METABOLISMO BACTERIANO Y OBSERVACIÓN Y

RECONOCIMIENTO DE HONGOS
Leysson forero vanegas (1115741553), karen zulay romero martinez (1116871780)
Microbiología básica, Grupo A, Departamento de Ciencias Básicas, Universidad de Pamplona

RESUMEN: Teniendo en cuenta que hicimos 2 practicas podemos concluir que la practica de metabolismo fue
usada para determinar PH, fermentación de azucares, movilidad, presencia de almidón, producción de DNAsa,
reducción de nitratos, presencia de enzimas, producción de gases y la práctica de Observación y reconocimiento de
hongos nos ayudo a encontrar e identificarlos mediante su morfología y diferenciarlos de una levadora.

Palabras Claves: levadura, hongos, PH, pruebas bioquímicas.

Catabólicas: Rompimiento de moléculas orgánicas

1. Introducción
Metabolismo bactriano:
La identificación bacteriana puede hacerse mediante la
observación de características de las colonias y
morfología con tinción de Gram, sin embargo, la
caracterización final de un aislamiento bacteriano
desconocido para identificarlo a nivel de género y
especie habitualmente se lleva a cabo estudiando
ciertos sistemas enzimáticos que son únicos para cada
especie y sirven como marcadores de identificación.
La actividad más importante del microbiólogo/
bacteriólogo clínico es el aislamiento e identificación
de agentes de interés infeccioso. Esta área principal de
la microbiología se denomina microbiología clínica o
diagnostica. Cada vez resulta más patente la
trascendencia que tiene la identificación exacta del
patógeno para tratar correctamente una infección, y
constantemente se están desarrollando nuevos
métodos más sofisticados. El metabolismo denota
todas las actividades químicas organizadas de una
célula, las cuales comprenden aspectos generales que
involucran procesos de degradación de moléculas
complejas para la producción de energía, así como de
precursores para todos sus procesos de síntesis de
enzimas, ácidos nucleicos, polisacáridos y otros
componentes celulares. Estas reacciones son de dos
tipos:
Anabólicas: Proceso de síntesis de los constituyentes
celulares a partir de moléculas simples y que
generalmente requieren energía.
1
para obtener energía. La mayor parte de las pruebas
usadas para evaluar la actividad bioquímica o
metabólica de las bacterias, por medio de la cual puede
hacerse una identificación presuntiva adecuada de una
especie, se lleva a cabo mediante el subcultivo o
siembra del aislamiento primario en una serie de
medios diferenciales, cuyos resultados pueden
interpretarse después de un periodo de incubación. Las
diferencias de la forma como procesan los nutrientes y
los desechos que producen y liberan los
microorganismos son el resultado de las enzimas que
poseen y pueden ser utilizadas para su clasificación.
Los hongos:
son organismos de organización Eucariota y de mayor
tamaño que las bacterias; estos se diferencian de otros
Eucariotas, por ser inmóviles (aunque algunas células
presentan mecanismos de locomoción), carecer de
pigmentos fotosintéticos y por las variaciones en la
composición de su estructura (como paredes
celulares). Los hongos presentan un tipo de nutrición
heterótrofa (quimiorganótrofos), dependiendo de
nutrientes orgánicos, solubilizados por los sistemas
enzimáticos de los hongos y absorbidos a través de la
pared y membrana celulares. Los hongos pueden ser
unicelulares (como las levaduras), o multicelulares
(hongos filamentosos); sin embargo, existen hongos
pleomórficos, que de acuerdo al medio en el cual se
encuentren, desarrollan un crecimiento filamentoso o
un crecimiento de tipo levadura. Estos últimos son
principalmente hongos patógenos. Las levaduras son
hongos unicelulares de forma esférica, alargada u oval
y con diferentes colores (blanco, rosado, beige o rojo).
Su tamaño oscila entre 2,5–10 x 4,5-21 μm. Son
 anaerobios facultativos, siendo las levaduras aeróbicas Metabolismo:
productoras de CO2, agua y biomasa relativamente
 Asa recta
alta y las levaduras anaerobias, fermentadoras de
 Asa redonda
azúcar en alcohol, CO2 y menos biomasa. La mayoría
 Tubos de ensayo medios líquidos:
son mesófilas, con una temperatura máxima de
 Fermentación de carbohidratos, Rojo de metilo,
crecimiento entre 24 y 48ºC, crecen en un rango
Voges-Proskauer, urea, nitratos, coagulasa.
amplio de pH entre 2,5 8. No presentan mecanismos
 Tubos de ensayo con agar recto para: motilidad e
de locomoción, por lo que únicamente pueden ser
indol.
transportadas a través de corrientes de aire, fluidos o
 Tubos de ensayo con agar inclinado para: TSI,
por insectos. 2 Las levaduras se reproducen por
citrato, descarboxilación de lisina (LIA).
gemación, generando en este proceso la célula madre,
 Cajas de Petri con agar para: almidón, caseína,
una o varias yemas que, crecen y se separan formando
DNAsa, agar nutritivo (antibiograma), agar
células independientes; otra forma de división de las
sangre.
levaduras es la división transversal o escisión. En
 Peróxido de hidrógeno al 3%.
medios de cultivo forman colonias opacas, cremosas o
 Rojo de metilo al 0.033% en etanol absoluto.
pastosas
 Reactivo de indol según Kovac’s
 Reactivos de Griess.
Reproducción de los hongos
 Solución de lugol.
Los hongos se pueden reproducir de forma sexual y
 Soluciones de antibióticos.
asexualmente. En algunas especies coexisten las dos
formas de reproducción, denominándose holomorfo.
Procedimiento para metabolismo:
El holomorfo, tiene a la vez una forma de
multiplicación asexuada, conocida como anamorfo (o
Se realiza la inoculación en cada una de los medios o
estado imperfecto), y una sexuada, conocida como pruebas con el microorganismo suministrado.
teleomorfo (o estado perfecto). La reproducción
asexuada, puede ocurrir por propagación vegetativa a Hongos:
partir de fragmentos de micelio, o por formación de
esporas de distinto tipo (conidios, esporangiosporas,  1 asa micológica.
etc.). La reproducción sexuada se caracteriza por la  2 cajas Petri estériles.
unión de dos núcleos que dan lugar a esporas sexuadas  1 bandeja para tinción.
(zigosporas, ascosporas, etc.). Adicionalmente, los  2 varillas de vidrio pitillos plásticos.
hongos pueden ser homotálicos, si poseen en el mismo  1 mechero Bunsen o de alcohol.
micelio núcleos complementarios que pueden  Azul de Lactofenol.
conjugarse; o heterotálicos, cuando requieren núcleos
 1 microscopio binocular compuesto.
provenientes de micelios diferentes. En general la
 Solución de Lugol.
reproducción asexuada es más importante para la
 3 portaobjetos estériles.
propagación de las especies, en muchos hongos la
 5mL de glicerina 10%.
reproducción sexual se da solo una vez al año o con
 3 cubreobjetos estériles.
poca frecuencia. En el tipo de reproducción asexual,
 1 set de papel para óptica.
existe un grupo de hongos a los que no se les conoce
 1 disco de papel filtro estéril (10 cm de diámetro).
reproducción sexual y por lo cual, son agrupados
 Cultivos fúngicos en agar PDA con 3
dentro de una Clase tentativa, la Clase Deuteromycetes
 5 días de incubación.
o clase de hongos imperfectos (Fungi Imperfecti); a los
 1 rollo de cinta adhesiva transparente.
integrantes de esta Clase, se los reclasifica dentro de
una Clase específica, cuando es hallado su estado  Toallas de papel desechable.
perfecto (teleomorfo o sexual); principalmente, los
estados sexuales de los Deuteromycetes, son hongos Procedimiento para Hongos:
de las Clases Ascomycetes y algunos Basidiomycetes
2. Materiales y Métodos 1. De cada uno de los hongos y levaduras suministrados
por el tutor, realice la caracterización macroscópica

2
basándose en el aspecto del micelio o del crecimiento en
las levaduras. Como marcadores de caracterización en las
levaduras, utilice los aplicados a caracterización
macroscópica de colonias bacterianas.
2. Para los hongos filamentosos: Micelio algodonoso,
pulverulento, aterciopelado.
3. Pigmentación del crecimiento (pigmentos confinados al
hongo o difundidos al medio de cultivo).
4. Consistencia: Dura, blanda, viscosa.
5. Realice el montaje en placas portaobjetos por las
metodologías de toma de muestra con asa micológica o
impronta, descritos en esta guía y utilizando como
colorante, azul de Lactofenol.
6. Para la observación de levaduras, realice el montaje con
solución de Lugol y lleve a objetivo de inmersión.
7. Del aislamiento asignado por su tutor, realice un micro
cultivo siguiendo las indicaciones dadas en esta guía.
Incube a 25-28°C/3-5 días. Concluido el tiempo de
incubación, realice el montaje y observación del hongo en
el micro cultivo, de la forma indicada en esta guía.
8. Realice la observación de los montajes indicados por el
tutor en los microscopios dispuestos para ello. Grafique
sus observaciones. Tenga en cuenta la bibliografía
relacionada en la guía, para la utilización de claves en la
identificación de los hongos observados.
3. Resultados y Análisis
Análisis para hongos:
En la tabla N° 2 se presentan los resultados de las
diferentes observaciones de los hongos filamentosos
trichoderma, fusarium, Penicilium, Aspergillus Níger,
Rhizopus y la levadura Sacharomices. Además, se
presentan la observación de los hongos encontrados en
la naranja y la papaya. Se puede observar la presencia
de hifas en los hongos filamentosos y las diferentes
estructuras que caracterizan a cada especie observada.
En la muestra de naranja se observó el hongo de genero
penicilium ya que por sus características puede crecer
a PH ácidos y en la muestra de papaya se observó la
genero colletotrichum spp ya que esta genero de hongo
afecta principalmente frutas y cereales.
Análisis para metabolismo:
Sacarosa: teniendo en cuenta los resultados llegamos
a la conclusión que ambos microorganismos son
positivos, tuvimos un error de siembra y por lo tanto
no pudimos observar la diferencia del uno al otro,
Proteus debía ser (+) y E. coli debía ser (-).
3
Glucosa: teniendo en cuanta los resultados podemos
observar que ambos microorganismos son negativos
para esta prueba, por lo que el medio cambia de un rojo
a un rosado y a un amarillo teniendo en cuenta la escala
de PH, Serratia debía ser (+) y S. aureus debía ser (-).
Lactosa: si observamos los resultados llegaos a la
conclusión que ambos microorganismos son negativos
por lo que no hubo un cambio a vino tinto o rojo
intenso, pero si hubo un cambio a amarillo y rozado
claro teniendo en cuenta que Salmonella debía ser (-)
y E. coli debía ser (+).
TSI: si observamos las muestras E. coli tiene un
resultado positivo para los 3 azucares con producción
de gas en el fondo (la glucosa), pero salmonella
presenta ácido sulfhídrico que cubre todo el medio y
no permite la identificación de las azucares, teniendo
en cuenta que produce gas igualmente.
Citrato: Teniendo en cuenta los resultados podemos
observar lo microrganismos que tienen la capacidad de
utilizar el citrato como fuente única de carbono. Para
un resultado (+) el medio cambia de color verde a color
azul, en este caso podemos concluir que salmonella es
positivo para citrato y proteus No lo es, pero si
fermenta las azucares acidificando la parte del fondo
(glucosa) la del medio (sacarosa) y alcalinizando la
parte superior (lactosa).
Lia: Si observamos los resultados podemos concluir
que salmonella es positiva para lia porque oscurece el
color purpura claro del medio, y proteus cambia a color
verde la parte inferior del medio concluyendo que el
medio se vuelve neutro y la parte superior continua del
mismo color inicial. Debemos tener en cuenta que esta
prueba es para determinar la acidificación y
alcalinización del medio.
Urea: con esta prueba podemos determinar la
capacidad de hidrolizar la urea, llegando a la
conclusión que ninguno de los dos microorganismos lo
hace siendo ambos negativos, pudiendo ser un error de
siembra, pero debemos tener en cuenta que E. coli
Produjo gas en la parte baja del medio.
Caldo nitrato: En esta prueba determinamos la
capacidad de reducir los nitratos a nitrilos. teniendo en
cuenta esta información podemos llegar a la
conclusión que ninguno de los dos microorganismos
es positivo para esta prueba, pudiendo ser un error de
siembra.
Rojo de metilo: Teniendo en cuenta los resultados
podemos hallar el microorganismo con la capacidad de
fermentar la glucosa con la producción de acido por la
vía acido mixta, con esta información podemos llegar
a la conclusión que los dos microorganismos son
negativos para esta prueba.
Voges proskauer: Esta prueba y la anterior son dos
pruebas en una, pudiendo así identificar Que los dos
microrganismos para juntas pruebas son negativos.
Motilidad: teniendo en cuenta esta prueba podemos
identificar el microorganismo que presenta organelos
especializadas para su locomoción como flagelos, por
lo tanto, legamos a la conclusión que E. coli es positivo
para motilidad porque se ve claramente el
desplazamiento en el medio, y enterococos no.
Gelatina: Se utiliza para determinar la capacidad de
un microorganismo que produce enzimas proteolíticas
que licuan la gelatina, en este caso el microrganismo
que lo hizo fue S. aureus y con E. coli el medio
mantuvo con su consistencia.
Almidón: Teniendo en cuenta la teoría, podemos
concluir después de agregarle Lugol a las cajas de Petri
previamente inoculadas e incubadas Que el
microorganismo Bacillus Metaboliza la amilasa y E.
coli no lo hace.
Desoxiliribonucleasa (DNAsa): En esta prueba
determinamos la capacidad de producir DNAsa que
hidroliza las moléculas de ADN, teniendo en cuenta lo
anterior podemos deducir que el microorganismo con
esta capacidad es S. aureus y Enterococos no o hace.

4. Conclusiones