Chương mười bốn 14

Sản xuất năng lượng

ở ti thể và lục lạp
Nhu cầu cơ bản để tạo ra năng lượng theo cách hiệu quả nhất Ty thể và sự photphoryl
đã có ảnh hưởng sâu sắc đến lịch sử sự sống trên Trái đất. Phần hóa oxy hóa
lớn cấu trúc, chức năng và sự tiến hóa của tế bào và sinh vật có
thể liên quan đến nhu cầu năng lượng của chúng. Thuở ban
đầu, khi không có oxy trong khí quyển, người ta cho rằng các Cơ chế phân tử của sự
tế bào sớm nhất có thể đã tạo ra ATP bằng cách phá vỡ các vận chuyển electron và
phân tử hữu cơ được tạo ra bởi các quá trình địa hóa. Các phản
hoạt động của bơm
ứng lên men như vậy - sẽ được thảo luận trong Chương 13 -
xảy ra trong bào tương của các tế bào ngày nay, nơi chúng sử proton
dụng năng lượng thu được từ quá trình oxy hóa một phần các
phân tử giàu năng lượng để tạo thành ATP. Lục lạp và sự quang hợp
Nhưng vào đầu lịch sử của sự sống, một cơ chế hiệu quả hơn
nhiều để tạo ra năng lượng và tổng hợp ATP đã xuất hiện dựa Sự tiến hóa của hệ thống
trên sự vận chuyển các electron dọc theo màng. Hàng tỷ năm tạo năng lượng
sau, cơ chế này trở nên rất quan trọng đối với sự sống còn của
toàn bộ sự sống trên Trái đất đến nỗi chúng ta dành toàn bộ
chương này cho nó. Như chúng ta sẽ thấy, các cơ chế vận
chuyển điện tử dựa trên màng được các tế bào sử dụng để trích
xuất năng lượng từ nhiều nguồn khác nhau. Các cơ chế này là
trung tâm của cả việc chuyển đổi năng lượng ánh sáng thành
năng lượng liên kết hóa học trong quang hợp và tạo ra một lượng lớn ATP từ các phân tử
nguyên liệu trong quá trình hô hấp tế bào. Mặc dù sự vận chuyển điện tử dựa trên màng
lần đầu tiên xuất hiện ở vi khuẩn hơn 3 tỷ năm trước, hậu duệ của những tế bào này hiện
đang có ở mọi ngóc ngách và kẽ hở của hành tinh, trên đất liền và cả đại dương của chúng
ta. Có lẽ thậm chí đáng chú ý hơn, hậu duệ của những vi khuẩn này tồn tại trong mỗi tế
bào nhân chuẩn sống dưới dạng lục lạp và ty thể.

Hình 14 Các cơ chế dựa trên màng tế bào sử

dụng năng lượng được cung cấp bởi thức ăn
hoặc ánh sáng mặt trời để tạo ATP. Trong
phosphoryl hóa oxy hóa,xảy ra trong ty thể,
chuỗi truyền điện tử đã sử dụng năng lượng tạo
ra từ oxy hóa chất dinh dưỡng để vận chuyển H+
qua màng. Trong quang hợp, xảy ra ở lục lạp,
thay vào đó sẽ sử dụng năng lượng ánh sáng mặt
trời. Trong cả hai trường hợp, sự chênh lệch
grandient H+ ở hai bên màng được dùng để tổng
hợp ATP

Trong chương này, chúng ta sẽ tìm hiểu các cơ chế phân tử của sự vận chuyển electron cho
phép các tế bào tạo ra năng lượng mà chúng cần để duy trì hoạt động sống của mình.
Chúng ta sẽ mô tả cách các hệ thống như vậy hoạt động trong cả ty thể và lục lạp, và các
nguyên tắc hóa học cho phép chuyển điện tử để giải phóng một lượng lớn năng lượng. Và
cuối cùng là con đường tiến hóa đã phát sinh các cơ chế này.
Nhưng trước tiên, chúng ta có một cái nhìn ngắn gọn về các nguyên tắc chung tập trung
vào việc tạo ra năng lượng trong tất cả các sinh vật sống: việc sử dụng màng để khai thác
năng lượng của sự chuyển động các electron.

Các tế bào thu được phần lớn năng lượng của chúng bằng các cơ chế dựa
trên màng.
Đồng tiền năng lượng chính trong các tế bào là ATP (xem Hình 3-32). Một lượng nhỏ ATP
được tạo ra trong quá trình đường phân ở tế bào chất của tất cả các tế bào (thảo luận trong
Chương 13). Nhưng đối với phần lớn các tế bào, hầu hết ATP của chúng được tạo ra bởi
quá trình phosphoryl hóa oxy hóa.Việc tạo ATP bằng quá trình phosphoryl hóa oxy hóa
khác với cách ATP được tạo ra trong quá trình đường phân, một trong số đó là quá trình
potphoryl hóa oxy hóa đòi hỏi phải có màng. Trong các tế bào nhân chuẩn, quá trình
phosphoryl oxy hóa diễn ra trong ty thể. Một quá trình dựa trên màng liên quan tạo ra ATP
khác, đó là quá trình quang hợp ở thực vật, tảo và vi khuẩn quang hợp (Hình 14.1).
 Quá trình tạo ATP dựa trên màng này bao gồm hai giai đoạn được liên kết với nhau: một
giai đoạn thiết lập một gradient proton điện hóa, giai đoạn khác sử dụng gradient đó để tạo
ATP. Cả hai giai đoạn được thực hiện bởi các phức hợp protein đặc biệt trong màng.
1. Trong Giai đoạn 1, các electron giàu năng lượng có nguồn gốc từ quá trình oxy
hóa các chất hữu cơ (đã thảo luận trong Chương 13), hay từ ánh sáng mặt trời, hoặc từ các
nguồn khác (sẽ thảo luận sau) được vận chuyển dọc theo một loạt các chất mang điện tử -
còn gọi là chuỗi vận chuyển điện tử - được gắn trong màng. Những electron này giải
phóng năng lượng và năng lượng này được sử dụng để bơm proton, có nguồn gốc từ nước
có mặt khắp nơi trong các tế bào, và cả trên màng, do đó tạo ra một gradient proton điện
hóa (Hình 14-2A). Gradient ion trên màng là một dạng năng lượng dự trữ có thể được khai
thác để thực hiện công việc hữu ích, khi mà các ion được phép chảy ngược qua màng thep
gradient điện hóa (thảo luận trong Chương 12).
2. Trong giai đoạn 2 của quá trình phosphoryl hóa oxy hóa, các proton đi ngược lại
theo gradien điện hóa của chúng thông qua một phức hợp protein gọi là ATP synthase, xúc
tác sự tổng hợp ATP từ ADP và photsphat vô cơ (Pi). Enzym phổ biến này có chức năng
như một tuabin, cho phép gradient proton điều khiển việc tổng hợp ATP (Hình 14-2B).

Hình 14-2 Hệ thống trên màng sử dụng năng

H+ H+ H+
H+
lượng thải ra do sự chênh lệch gradient điện hóa
H+ H+
H+ H+ H+ để tổng hợp ATP. Quá trình xảy ra trong hai
e- H +
giai đoạn (A) Trong giai đoạn đầu, bơm proton
electron
khai thác năng lượng từ sự vận chuyển điện tử
Electron có mức
năng lượng thấp
e- (không thể hiện ở đây), để bơm proton có nguồn
gốc từ nước, tạo ra một gradient proton trên
màng. Mũi tên màu xanh cho thấy hướng của
Bơm proton
H+ dòng điện tử. Những electron có mức năng lượng
H+ synthase cao có thể đến từ phân tử hữu cơ hay vô cơ hoặc
H+
có thể từ tác động của ánh sáng lên các phân tử
như diệp lục (B) Gradient proton được tạo ra
trong (A) được dùng như một kho năng lượng đa
GIAI ĐOẠN 1: Năng lượng do sự GIAI ĐOẠN 2: Năng lượng do sự năng. Nó có thể được sử dụng cho một loạt các
vận chuyển điện tử tạo thành được chênh lệch gradient H+ được phản ứng cần năng lượng trong ty thể, lục lạp và
sử dụng để bơm H+ qua màng khai thác để tổng hợp ATP tế bào nhân sơ, bao gồm cả sự tổng hợp ATP bởi
ATP synthase.
(A) (B)

Khi lần đầu tiên được đề xuất vào năm 1961, cơ chế tạo năng lượng này được gọi là thuyết
hóa thẩm Chemiosmotic hypothesis, bởi vì nó liên kết các phản ứng hình thành liên kết hóa
học tổng hợp ATP (“chemi”) với các quá trình vận chuyển qua màng thông qua bơm proton
(“Osmotic” từ Hy Lạp: osmos: bơm). Nhờ cơ chế hóa học này, giờ đây được gọi là liên kết
hóa thẩm Chemiosmotic coupling, tế bào có thể khai thác năng
lượng của sự vận chuyển điện tử theo cách tương tự như năng Câu hỏi 14-1
lượng được lưu trữ trong pin có thể được khai thác để thực hiện Dinitrophenol (DNP) là một phân tử
công việc hữu ích (Hình 14-3). nhỏ có khả năng tăng tính thấm
màng với proton.Trong những năm
Liên kết hóa thẩm là một quá trình cổ xưa. Được 1940, một lượng nhỏ chất độc hại đã
được kê cho bệnh nhân để giảm cân.
bảo tồn trong các tế bào ngày nay DNP có hiệu quả trong việc làm giảm
cân, đặc biệt là thúc đẩy mất dự trữ
Cơ chế hóa học dựa trên màng tế bào để tạo ATP phát sinh rất chất béo. Bạn có thể dự đoán giải
sớm trong quá trình hình thành sự sống.Rõ ràng, cơ chế này thích làm thế nào nó có thể gây ra
tác dụng như vậy? Tuy nhiên, có vài
thành công đến nỗi các tính năng thiết yếu của nó đã được giữ phản ứng phụ khó chịu, bệnh nhân
lại trong hành trình tiến hóa dài từ các tế bào nhân sơ đầu tiên có nhiệt độ tăng cao và đổ mồ hôi
đến các tế bào ngày nay. nhiều trong quá trình điều trị. Hãy
đưa ra một lời giải thích cho những
Sự giống nhau đáng chú ý này có thể được quy cho một phần triệu chứng này.
là do các bào quan sản xuất ATP trong các tế bào nhân chuẩn, .
các lục lạp và ty thể đều được tiến hóa từ vi khuẩn đã bị nhấn
chìm bởi các tế bào tổ tiên hơn một tỷ năm trước (xem Hình 1- Tất cả năng lượng
Dòng điện hóa học từ sự di
18 và 1-20). Bằng chứng là cả lục lạp và ty thể đều sinh sản tử trong chuyển điện tử
theo cách tương tự như của hầu hết các tế bào nhân sơ (Hình dây điện được chuyển đổi
thành nhiệt năng
14-4)

Hình 14-3 Pin có thể sử dụng năng lượng của sự chuyển

điện tử để thực hiện công. (A) Nếu các đầu cực của pin Năng lượng hóa
được kết nối trực tiếp với nhau, năng lượng được giải phóng học từ sự di chuyển
điện tử được
khi truyền electron sẽ chuyển thành nhiệt. (B) Nếu pin được chuyển đổi thành
năng lượng thế
kết nối với máy bơm, phần lớn năng lượng được giải phóng năng được lưu trữ
khi chuyển điện tử có thể được khai thác để thực hiện công trong mực nước
khác biệt; do đó ít
việc thay thế (trong trường hợp này là để bơm nước). Các năng lượng bị mất
tế bào có thể khai thác năng lượng chuyển điện tử tương tự như năng lượng
nhiệt
để thực hiện công việc – ví dụ như bơm H+ (Xem hình 14-2A)

Sự phân chia

Hình 14-4 Một ty thể có thể phân chia như một vi khuẩn. (A) Nó trải
qua một quá trình phân hạch tương tự như vi khuẩn. (B) Ảnh hiển vi
điện tử của một ty thể đang phân chia trong một tế bào gan. (B, được
sự cho phép của Daniel S. Friend.)
1 µm
Cả ty thể và lục lạp đều có bộ máy sinh tổng hợp giống như vi khuẩn để tạo ra RNA và
protein của mình, và chúng đều có hệ gen của riêng mình (Hình 14-5). Nhiều gen lục lạp
rất giống với gen của vi khuẩn lam – điều đó gợi ý rằng rất có thể lục lạp bắt nguồn từ vi
khuẩn lam.
Mặc dù ty thể và lục lạp vẫn chứa DNA, các vi khuẩn tổ tiên là nguồn gốc sinh ra các bào
quan này đã từ bỏ nhiều gen cần thiết cho sự sống độc lập khi chúng phát triển các mối
quan hệ cộng sinh, điều này đã dẫn đến sự tiến hóa tế bào động vật và thực vật nhân chuẩn.
Tuy nhiên, những gen bị loại bỏ này không bị mất; nhiều gen đã có sự di chuyển đến nhân
tế bào, nơi chúng tiếp tục đóng vai trò chỉ huy việc sản xuất protein quan trọng cần thiết
cho ty thể và lục lạp để thực hiện các chức năng chuyên biệt, bao gồm cả việc tạo ra ATP,
một quá trình mà chúng ta sẽ thảo luận chi tiết trong suốt phần còn lại của chương này.

Ty thể Lục lạp

Hình 14-5 Ty thể và lục lạp có nhiều đặc điểm ở vi khuẩn

Màng trong
tổ tiên của chúng. Cả hai bào quan đều chứa bộ gen DNA
Màng ngoài
của riêng và hệ thống dùng để sao chép DNA và tham gia
tạo RNA và protein. Các khoang bên trong của các bào
Chất nền Stroma quan này có chứa chất nền ở ty thể và stroma ở lục lạp,
DNA cả hai đều chứa DNA (màu đỏ) và một hệ ribosome đặc
biệt. Màng trong ở ty thể và màng thylakoid lục lạp có
Ribosome chứa các phức hợp protein liên quan đến sản xuất ATP
2 µm

Màng thylakoid

Ty thể và sự photphoryl hóa oxy hóa

Ty thể có mặt trong gần như tất cả các tế bào nhân chuẩn, nơi chúng hỗ trợ cho phần lớn
tế bào tạo ATP. Nếu không có ty thể, sinh vật nhân chuẩn sẽ phải dựa vào quá trình đường
phân tương đối kém hiệu quả cho tất cả quá trình sản xuất ATP của chúng. Khi glucose
được chuyển thành pyruvate bằng quá trình đường phân ở tế bào chất, kết quả cuối cùng là
chỉ có hai phân tử ATP được tạo ra trên mỗi phân tử glucose, ít hơn 10% tổng năng lượng
tự do có khả năng tạo ra được từ quá trình oxy hóa đường. Ngược lại, khoảng 30 phân tử
ATP được tạo ra khi ty thể được sử dụng để hoàn thành quá trình oxy hóa glucose. Dường
như các tế bào cổ đã thiết lập được mối quan hệ cộng sinh với vi khuẩn ban đầu để hình
thành nên ty thể ngày nay, qua quá trình tiến hóa phức tạp lâu dài.
Tầm quan trọng của ty thể được nhấn mạnh thêm bởi các rối loạn chức năng của ty thể. Ví
dụ, những bệnh nhân mắc chứng rối loạn di truyền được gọi Hội chứng động kinh giật cơ
với sợi cơ không đều (Myoclonic epilepsy with ragged-red fibres: MERRF), người mắc
phải hội chứng này bị thiếu nhiều protein cần thiết cho việc vận chuyển điện tử. Kết quả
 là, họ thường trải qua tình trạng yếu cơ, các vấn đề về tim, động kinh và thường bị mất trí
nhớ. Các tế bào cơ và thần kinh đặc biệt nhạy cảm với các khiếm khuyết của ty thể, bởi vì
chúng cần rất nhiều ATP để hoạt động bình thường.
Trong phần này, chúng ta sẽ xem xét cấu trúc và chức năng của ty thể. Chúng ta sẽ phác
thảo cách thức cơ quan này sử dụng chuỗi vận chuyển điện tử, được đính ở màng trong của
nó, để tạo ra gradient proton cần thiết thúc đẩy quá trình tổng hợp ATP.Và chúng ta sẽ xem
xét hiệu quả tổng thể mà hệ thống dựa trên màng này chuyển đổi năng lượng được lưu trữ
trong các phân tử cao năng lượng thành năng lượng có trong các liên kết phosphate của
ATP.

Ty thể có thể thay đổi hình dạng,vị trí, và số lượng để phù hợp với nhu
cầu của tế bào.
Ty thể khi được phân lập thường có kích thước và hình dạng tương tự như vi khuẩn tổ tiên
của chúng. Mặc dù chúng không còn có khả năng sống độc lập, nhưng ty thể có khả năng
thích nghi đáng kể và có thể điều chỉnh vị trí, hình dạng và số lượng của chúng để phù hợp
với nhu cầu của tế bào.Trong một số tế bào, ty thể vẫn cố định ở một vị trí, nơi chúng cung
cấp ATP trực tiếp đến một địa điểm tiêu thụ năng lượng cao bất thường. Ví dụ, trong một
tế bào cơ tim, ty thể được đặt gần bộ phận co bóp; trong khi đó trong một tinh trùng, chúng
được quấn chặt quanh phần đuôi (Hình 14-6)

Ty thể
of the motile flagellum that requires atp for its movement
Sợi cơ của bộ phận co bóp
Hình 14-6 Các ty thể được phân bố gần
các nơi sử dụng ATP cao. (A) Trong tế
bào cơ tim, ty thể được đặt gần với bộ
phận co bóp, trong đó sự thủy phân ATP
cung cấp năng lượng cho sự co cơ. (B)
Trong một tinh trùng, ty thể nằm ở
đuôi, quấn quanh một phần của đuôi
nơi đòi hỏi ATP cho sự di chuyển của nó.

Ty thể Dải ty thể liên tục

Nhân
Hình 14-7 Ty thể thường hợp nhất để tạo Ty thể
thành mạng lưới hình ống dài, có thể mở rộng
khắp tế bào chất. (A) Ti thể (màu đỏ) được
đánh dấu huỳnh quang trong nguyên bào sợi
chuột nuôi cấy này. (B) Trong một tế bào nấm
men, ty thể (màu đỏ) tạo thành một mạng lưới
liên tục, nằm gọn trong màng sinh chất. (A, sự
cho phép của Michael W.Davidson, Carl Zeiss
Microscopy online campus; B, sự cho phép của
J. Nunnari và cộng sự, Mol. Biol. Cell. 8:1233-
1242, 1997. Với sự cho phép của Hiệp hội Sinh
học Tế bào Hoa Kỳ.) (A) (B)
Trong các tế bào khác, ty thể hợp nhất với nhau để hình thành mạng lưới hình ống thon
dài, năng động, được phân bố khác nhau thông qua tế bào chất (Hình 14-7). Các mạng này
rất năng động, liên tục tách ra (xem Hình 14-4) và kết hợp lại.
Ty thể có mặt trong tế bào với số lượng lớn, ví dụ 1000 đến 2000 trong một tế bào gan.
Nhưng số lượng của chúng cũng sẽ khác nhau tùy thuộc vào loại tế bào và có thể thay đổi
theo nhu cầu năng lượng của tế bào. Ví dụ, trong các tế bào cơ xương, ty thể có thể phân
chia cho đến khi số lượng của chúng tăng gấp 5-10 lần nếu cơ bắp bị kích thích nhiều lần.
Tuy vậy dù bất kể hình dạng, vị trí và số lượng ty thể trong tế bào, tất cả các ty thể đều có
cấu trúc bên trong cơ bản giống nhau, hỗ trợ sản xuất ATP hiệu quả, như chúng ta sẽ thấy
tiếp theo.

Một ty thể chứa một màng ngoài, một màng trongvà hai khoang
Một ty thể được bao quanh bởi hai lớp màng, màng này xung quanh màng kia. Những
màng này, được gọi là màng ngoài và màng trong bao quanh không gian bên trong chất
nền ty thể và tạo ra một khoảng không gian liên màng hẹp hơn nhiều (Hình 14-8). Khi ty
thể tinh khiết được phân tách thành các thành phần riêng biệt và cấu trúc của chúng được
phân tích (xem Panel 4-3, trang 164-165), mỗi màng và không gian chúng bao quanh được
phát hiện rằng có chứa bộ protein độc đáo riêng biệt của mỗi phần.
Màng ngoài chứa nhiều phân tử của một loại protein vận chuyển gọi là porin, tạo thành các
kênh nước rộng xuyên qua lớp kép lipid (mô tả trong Chương 11). Kết quả là, màng ngoài
giống như một cái sàng có thể thấm qua tất cả các phân tử từ 5000 dalton trở xuống, bao
gồm cả các protein nhỏ. Điều này làm cho khoảng gian màng về mặt hóa học tương tự với
bào tương về mặt các phân tử nhỏ và các ion vô cơ mà cả hai đều chứa. Ngược lại, màng
trong, giống như các màng bào quan khác trong tế bào, không thấm với sự đi qua của các
ion và hầu hết các phân tử nhỏ, ngoại trừ những nơi có sự hiện diện của protein vận chuyển
màng. Do đó, chất nền ty thể chỉ chứa các phân tử được vận chuyển vào thông qua qua
màng trong và do đó, cấu trúc của nó cũng rất đặc biệt.
Màng trong ty thể là nơi diễn ra quá trình phosphor oxy hóa, và nó cũng chứa các protein
của chuỗi vận chuyển điện tử, bơm proton,và ATP synthase cần thiết cho việc tổng hợp
ATP. Nó cũng chứa nhiều loại protein vận chuyển cần cho sự di chuyển của các phân tử
nhỏ được chọn lọc như pyruvate và acid béo vào chất nền ty thể, nơi chúng sẽ được oxy
hóa.
Màng trong ty thể có cấu trúc rất phức tạp, tạo thành một chuỗi gấp nếp được gọi là các
mào, hướng vào trong chất nền ty thể (Hình 14-8). Những nếp gấp này làm tăng đáng kể
diện tích bề mặt của màng.Trong một tế bào gan, ví dụ,màng trong của tất cả các ty thể
chiếm khoảng một phần ba tổng số màng của tế bào.Và số lượng mào trong một ty thể của
cơ tim tế bào lớn gấp ba lần so với ty thể từ tế bào gan.
 Chất nền: chứa enzyme cần
thiết cho hô hấp tế bào
Màng trong: Gấp nếp tạo mào,
chứa protein thực hiện quá trình
phosphoryl oxy hóa: chuỗi vận
chuyển điện tử, ATP synthase.
Màng ngoài: Chứa protein
kênh ( gọi là porin ), có thể
thấm qua tất cả các phân tử từ
5000 dalton trở xuống
Khoảng gian màng. Chứa các
enzyme sử dụng ATP đi ra khỏi
chất nền để phosphoryl hóa các
nucleotide khác. Nó cũng chứa
protein được giải phóng ở
apoptosis (Chương 18)
Hình 14-8 Một ty thể được tổ chức
thành bốn vùng riêng biệt. (A) Một bản
vẽ sơ đồ chung và (B) ảnh hiển vi điện
Chu trình Acid Citric tạo ra các electron cao năng tử của ty thể. Mỗi phần ty thể chứa một
lượng cần thiết cho sự sản xuất ATP bộ protein duy nhất, cho phép nó thực
hiện các chức năng riêng biệt. Trong ty
Việc tạo ra ATP được cung cấp bởi dòng điện tử có nguồn gốc thể của gan, ước tính 67% tổng số
từ việc đốt cháy carbohydrate, chất béo,và các thực phẩm khác protein ty thể nằm trong chất nền, 21%
trong quá trình đường phân và chu trình acid citric (thảo luận ở màng trong, 6% ở màng ngoài,và 6%
trong Chương 13). Những electron cao năng lượng này được trong khoảng gian màng. (B: sự cho
cung cấp bởi các chất mang được tạo ra trong giai đoạn dị hóa. phép của Daniel S. Friend.)

Chu trình acid citric lấy nhiên liệu cần thiết để tạo ra các ra
Câu hỏi 14-1
chất mang hoạt hóa, từ các phân tử có nguồn gốc thức ăn, xâm
nhập vào ty thể từ tế bào chất. Cả pyruvate được sản xuất trong Ảnh hiển vi điện tử cho thấy ty thể
đường phân diễn ra trong tế bào chất,và các acid béo có nguồn trong cơ tim có mật độ mào cao hơn
gốc từ sự phân hủy chất béo (xem Hình 13-3) có thể đi vào nhiều so với ty thể trong các tế bào
khoảng gian màng của ty thể thông qua các porin trên màng da. Hãy đưa ra một lời giải thích cho
quan sát này
ngoài ty thể. Những phân tử này sau đó được vận chuyển qua
màng trong ty thể vào chất nền, nơi chúng được chuyển đổi
Hình 14-9 Ở tế bào
thành chất trung gian quan trọng: Acetyl CoA (Hình 14-9). nhân chuẩn, acetyl
CoA tạo ra trong ty
thể từ các phân tử có
nguồn gốc từ đường
và chất béo. Hầu hết
quá trình oxy hóa tế
Chất béo acid béo Acid béo Acid béo
bào, xảy ra trong
những bào quan tạo ra
phần lớn ATP
Các nhóm acetyl trong acetyl CoA sau đó được oxy hóa thành CO2 thông qua chu trình
acid citric (xem Hình 13-12). Một số năng lượng thu được từ quá trình oxy hóa này được
lưu lại dưới dạng các electron cao năng lượng, được giữ bởi các chất mang hoạt hóa là
NADH và FADH2. Những chất mang này sau đó có thể vận chuyển các electron cao năng
lượng của chúng cho chuỗi vận chuyển điện tử trong màng trong ty thể (Hình 14-10).
2 electron cao năng
lượng từ sự oxy
Hình 14-10 NADH cung cấp các hóa đường
electron cao năng lượng của nó cho
chuỗi vận chuyển điện tử. Trong bản
vẽ này, các electron vận chuyển được Cung cấp electron Khôi phục liên kết
biểu thị dưới dạng hai chấm đỏ trên
nguyên tử hydro màu đỏ. Một ion
hydride (một nguyên tử hydro có thêm
electron) được loại bỏ khỏi NADH và 2 electron đi qua chuỗi vận chuyển
được chuyển đổi thành proton và hai điện tử ở màng trong ty thể

electron.

Sự di chuyển của các điện tử được kết hợp với việc bơm các proton
Quá trình hóa thẩm diễn ra khi chất mang NADH và FADH2 vận chuyển electron đến
chuỗi truyền điện tử ở màng trong ty thể, sau đó chúng trở lại thành NAD+ và FAD+ (Hình
14-10). Các electron nhanh chóng được truyền dọc theo chuỗi đến oxy phân tử (O2) để tạo
thành nước (H2O). Chuyển động từng bước của các electron cao năng lượng này thông qua
các thành phần của chuỗi vận chuyển điện tử giải phóng năng lượng mà sau đó có thể được
sử dụng để bơm các proton qua màng trong (Hình 14-11). Lần lượt, gradient proton được
sử dụng để thúc đẩy quá trình tổng hợp ATP. Chuỗi phản ứng đầy đủ được thể hiện trong
Hình 14-12. Do đó, màng trong ty thể đóng vai trò là thiết bị chuyển đổi năng lượng chứa
trong các electron cao năng lượng của NADH (và FADH2) thành liên kết phosphate của
phân tử ATP (Hình 14-13). Cơ chế hóa học dùng để tổng hợp ATP như thế này được gọi
là phosphoryl hóa oxy hóa, bởi vì nó liên quan đến cả việc tiêu thụ O2 và bổ sung nhóm
phosphate vào ADP để tạo thành ATP.
Nguồn cung cấp các electron năng lượng cao năng lượng cho việc bơm proton khác nhau
giữa các sinh vật khác nhau và các quá trình khác nhau. Trong quá trình hô hấp tế bào, diễn
ra ở cả ty thể và vi khuẩn hiếu khí, các electron năng lượng cao đều có nguồn gốc từ đường
hoặc chất béo
H+ gradient

Hình 14-11 Khi các electron được chuyển từ

các chất mang sang oxy, các proton được
bơm qua màng trong ty thể. Đây là giai đoạn
2 e–
1 của hóa thẩm (xem Hình 14-2). Đường đi của
dòng điện tử được biểu thị bằng mũi tên màu
xanh acid 1/2O2

Sản phẩm
 Màng trong ty thể Màng ngoài ty thể

Hình 14-12 Các chất mang hoạt hóa được tạo

ra trong chu trình acid citric tạo ra ATP.
Pyruvate và acid béo xâm nhập vào chất nền ty
thể (phía dưới), nơi chúng được chuyển đổi
ATP ATP
thành acetyl CoA. Sau đó acetyl CoA được
chuyển hóa theo chu trình acid citric, tạo ra
ADP ADP
NADH (và FADH2, không được hiển thị). Trong
quá trình phosphoryl hóa oxy hóa, các electron
cao năng lượng do NADH (và FADH2) vận
chuyển sau đó được truyền dọc theo chuỗi vận
chuyển điện tử ở màng trong, tạo thành oxy
(O2); sự vận chuyển điện tử này tạo ra một
gradient proton trên màng trong, được sử
acid
dụng để sản xuất ATP bởi ATP synthase. Các tỷ
lệ chính xác của các chất phản ứng và các sản
phẩm không được trình bày trong sơ đồ này;
ví dụ:c húng ta sẽ thấy ngay rằng nó cần bốn
Acid béo electron từ bốn phân tử NADH để chuyển đổi
O2 thành hai phân tử H2O

Phân tử có nguồn gốc từ thức ăn đến từ tế bào chất

Trong quang hợp, các electron cao năng lượng đến từ chất diệp lục, thu năng lượng từ ánh
sáng mặt trời. Và nhiều sinh vật đơn bào (vi khuẩn cổ và vi khuẩn) sử dụng chất vô cơ như
hydro, sắt và lưu huỳnh là nguồn của các electron cao năng lượng mà chúng cần để tạo
ATP (xem, ví dụ, hình 1-12).
Bất kể nguồn điện tử nào, phần lớn các sinh vật sống sử dụng cơ chế hóa thẩm để tạo ATP.
Trong các phần sau, chúng tôi sẽ mô tả chi tiết quá trình này xảy ra như thế nào.
Năng lượng tích lũy
Các proton được bơm qua màng trong ty thể bởi trong electron cao
năng ở NADH

các protein trong chuỗi vận chuyển điện tử

Chuỗi vận chuyển điện tử, hay chuỗi hô hấp, thực hiện quá
trình phosphoryl hóa oxy hóa có nhiều bản sao trong màng
trong ty thể. Mỗi chuỗi chứa hơn 40 protein, được nhóm lại
thành ba phức hợp enzyme hô hấp lớn. Những phức hợp này, Năng lượng tích lũy
trong liên kết
mỗi cái lại chứa nhiều protein riêng lẻ, bao gồm cả protein phosphate cao năng
ở ATP
xuyên màng giữ chặt phức hợp trong màng trong ty thể.
Hình 14-13 Ty thể xúc tác cho sự chuyển
Ba phức hợp enzyme hô hấp, theo thứ tự là: (1) phức hợp hóa năng lượng. Trong quá trình oxy
NADH dehydrogenase, (2) phức hợp cytochrom c reductase,và hóa, năng lượng giải phóng qua sự oxy
(3) phức hợp cytochrom c oxyase (Hình 14-14). Mỗi phức hợp hóa NADH→ NAD+ thông qua các quá
chứa các ion kim loại và các nhóm hóa học khác hoạt động như trình chuyển đổi năng lượng trong màng
trong ty thể để tổng hợp ATP. Phương
trình: 2NADH + O2 + 2H+ → 2NAD+ + H2O
những bước đệm để tạo điều kiện cho các electron đi qua. Sự di chuyển của các điện tử
thông qua các phức hợp hô hấp này đi kèm với việc bơm các proton từ chất nền ty thể đến
khoảng gian màng. Do đó, mỗi phức hợp có thể được coi là một bơm proton

Hình 14-14 Các điện tử cao năng lượng

H+ H+ H+
được truyền qua ba phức hợp enzyme
hô hấp ở màng trong ty thể. Kích thước Cytochrome c
Khoảng gian màng
tương đối và hình dạng của mỗi phức C
được xác định, mặc dù rất nhiều thành Màng trong ty
Q
phần protein riêng lẻ tạo thành mỗi phức thể
riêng.Trong quá trình chuyển các Ubiquinone
Chất nền H+
electron cao năng lượng từ NADH sang
2 e-
H+ 2 H+ + 1/2 O2 H2O
oxy (đường màu xanh), các proton có H+
10 nm
nguồn gốc từ nước được bơm qua màng NADH
NAD+
từ chất nền vào khoảng gian màng bởi
Phức hợp NADH Phức hợp Phức hơp
mỗi phức hợp. Ubiquinone (Q) và dehydrogenase cytochrome c cytochrome
cytochrom c (c) đóng vai trò là các tàu reductase c oxidase

sân bay di động chuyên chở các electron

từ phức hợp này sang phức hợp tiếp
theo.

Phức hợp đầu tiên trong chuỗi hô hấp tế bào: NADH dehydrogenase sẽ nhận các electron
từ NADH. Những electron này được tách từ NADH dưới dạng ion hydride (H-), sau đó
được chuyển đổi thành proton và hai electron cao năng lượng. Phản ứng H- → H+ + 2e-
(hình 14-10) được được xúc tác bởi phức hợp NADH dehydrogenase. Các electron sau đó
lần lượt được truyền dọc theo chuỗi đến từng phức hợp enzyme khác bằng cách sử dụng
chất mang điện tử di động để vận chuyển điện tử giữa các phức hợp (Hình 14-14). Sự
chuyển điện tử này rất thuận lợi về mặt năng lượng: các electron được truyền từ các nơi
mang electron có ái lực electron yếu hơn đến những nơi có ái lực electron mạnh hơn, cho
đến khi chúng kết hợp với một phân tử O2 để tạo thành nước. Phản ứng cuối cùng này là
bước duy nhất cần oxy trong hô hấp tế bào và nó tiêu thụ gần như toàn bộ oxy mà chúng
ta thở.

Bơm proton tạo ra “dốc” proton điện hóa ổn định xuyên qua màng trong
ty thể
Nếu không có cơ chế khai thác năng lượng được giải phóng bởi sự vận chuyển điện tử từ
NADH sang O2, năng lượng này đơn giản sẽ được giải phóng dưới dạng nhiệt. Các tế bào
có thể phục hồi phần lớn năng lượng này vì ba phức hợp enzyme hô hấp trong chuỗi vận
chuyển điện tử sử dụng nó để bơm các proton qua màng trong ty thể, từ chất nền vào
khoảng gian màng (xem Hình 14-14). Sau này, chúng ta sẽ phác họa, tìm hiểu các cơ chế
 phân tử liên quan đến quá trình này. Bây giờ, chúng ta tập trung vào kết quả của quá trình.
Đầu tiên,việc bơm proton tạo ra gradient H+ - hay là gradient pH – thông qua màng trong.
Kết quả là, độ pH trong chất nền (khoảng 7,9) cao hơn khoảng 0,7 đơn vị so với trong
khoảng gian màng (là 7.2, cùng độ pH với bào tương). Thứ hai, bơm proton tạo ra gradient
điện thế - hoặc gọi là thế năng màng – vì có sự bơm H+ thông qua màng trong, phía chất
nền trở nên âm và ở mặt đối diện ở khoảng gian màng màng trở nên dương.
Như đã thảo luận trong Chương 12, lực điều khiển dòng di chuyển thụ động của ion qua
màng tỷ lệ thuận với gradient điện hóa của ion. Độ mạnh của gradient điện hóa đó phụ
thuộc cả vào hiệu điện thế (Volt) ở màng, được đo bằng điện thế màng, và trên gradient
nồng độ ion (xem Hình 12-5). Bởi vì các proton được tích điện dương, chúng sẽ dễ dàng
xuyên qua màng hơn nếu có quá nhiều điện tích âm ở phía bên kia. Trong trường hợp màng
trong ty thể, gradient pH và thế năng màng phối hợp với nhau tạo ra một gradient proton
điện hóa đầy năng lượng rất thuận lợi cho H+ để di chuyển trở lại vào chất nền ty thể. Thế
năng màng đóng góp đáng kể cho động lực proton này, giúp kéo H+ trở lại qua màng, thế
năng màng càng lớn, năng lượng được tích trữ trong gradient proton càng nhiều. (Hình 14-
15)
Động lực proton
Hình 14-15 Gradient điện hóa H+
do thế gradient đi qua màng trong ty thể bao gồm
pH lực lớn do thế năng màng (∆V) và
H+ H+
H+ lực nhỏ hơn do chênh lệch
H+ H+ gradient nồng độ H+ hay còn gọi
Động lực proton H+
Khoảng gian
do thế năng màng H+ H+ là gradient pH (∆pH). Cả hai lực
màng
pH 7.2
++++++++ ++++++++
kết hợp để tạo ra động lực
Màng trong Gradient điện
ty thể hóa H+
proton,cái nào kéo H+ vào lại chất
----------- -----------
pH 7.9
nền ty thể. Chính xác là mối quan
H+ H+ hệ toán học giữa các lực này được
Chất nền
Động lực biểu thị bằng phương trình Nernst
proton H+
(hình 12-23)
ΔV ΔV + ΔpH ΔpH
Câu hỏi 14-3
Khi thuốc Dinitrophenol (DNP) được
ATP Synthase sử dụng năng lượng dự trữ thêm vào ty thể,màng bên trong trở
trong Gradient điện hóa Proton để sản xuất nên thấm với proton (H+). Ngược lại,
khi thuốc Nigericin được thêm vào ty
ATP thể, màng bên trong trở nên thấm
Nếu các proton trong khoảng gian màng được phép chảy với K+. Ngược lại, khi thuốc nigericin
ngược vào chất nền ty thể, năng lượng được lưu trữ được thêm vào ty thể,màng bên
trong trở nên thấm. A) Gradient điện
trong gradient proton điện hóa sẽ bị mất dưới dạng
hóa proton thay đổi như thế nào khi
nhiệt. Một quy trình dường như lãng phí như vậy nhưng xử lí với DNP? (B) Gradient điện hóa
lại cho phép chú gấu ngủ đông giữ ấm, khi chúng ta thảo proton thay đổi như thế nào khi xử lí
với Nigericin?
luận thêm trong Làm thế nào chúng ta biết (trang 462-463). Tuy nhiên, trong hầu hết các
tế bào, gradient điện hóa proton trên màng trong ty thể được sử dụng để thúc đẩy quá trình
tổng hợp ATP từ ADP và Pi (xem Hình 2-25). “Thiết bị” đảm nhận chức năng này có thể
là ATP synthase, một loại protein gồm nhiều tiểu đơn vị, được gắn vào màng trong ty thể.
ATP synthase có nguồn gốc từ cổ xưa; tất cả dạng tế bào đều dùng cùng loại enzyme tạo
ra ATP như: trong ty thể của tế bào động vật, lục lạp của thực vật và tảo và màng sinh chất
của vi khuẩn. Phần protein xúc tác quá trình phosphoryl hóa ADP có hình dạng giống như
đầu kẹo mút xoay vào chất nền ty thể, được gắn với một cuống trung tâm với phần mang
H+ xuyên màng trong ty thể. (Hình 14-16). Sự di chuyển của các proton qua chất mang
khiến cho chất mang và cuống của nó quay nhanh, giống như một động cơ nhỏ. Khi cuống
quay, nó cọ xát với protein trong đầu tĩnh, làm thay đổi cấu trúc của chúng và khiến chúng
tạo ra ATP. Theo cách này, một sự biến dạng cơ học được chuyển đổi thành năng lượng
liên kết hóa học của ATP. Chuỗi tương tác này cho phép ATP synthase tạo ra hơn 100 phân
tử ATP mỗi giây ứng với mỗi 3 phân tử ATP mỗi vòng quay.
H+
(A) (B)

Phần
mang H+
Phần
F0 rotor mang H+
Cuống
trung tâm Chất nền
F0 F0 rotor
H+
Cuống
ATP
trung tâm

Mũ F1 ATPase

Hình 14-16 ATP synthase hoạt động như động cơ để chuyển
đổi năng lượng trong gradient điện hóa proton của chúng
thành năng lượng liên kết hóa học trong ATP. (A) Protein đa
đơn vị bao gồm đầu đứng yên, gọi là F1 ATPase, và phần quay
được gọi là F0. Cả F1 và F0 đều được hình thành từ nhiều tiểu đơn
vị. Được thúc đẩy bởi gradient điện hóa proton, phần F0 – bao
gồm phần mang H+ xuyên màng (màu xanh dương) cộng với một
thân trung tâm (màu tím) - nhanh chóng quay trong đầu đứng
yên của F1 ATPase (màu xanh lá cây), khiến nó tạo ra ATP từ ADP
và Pi. Đầu tĩnh được bảo vệ gắn vào màng bên trong bằng một
sợi protein kéo dài được gọi là cuống ngoại vi (màu cam). F1
ATPase được đặt tên như vậy bởi vì nó có thể thực hiện phản
ứng thủy phân ATP thành ADP và Pi.
Cuống
ngoại vi
Mũ F1
ATPase
(B) Cấu trúc ba chiều của ATP synthase,
được xác định bằng tinh thể học tia X. Thân
ngoại vi được cố định vào màng với sự trợ
giúp của tiểu đơn vị được biểu thị bằng hình
bầu dục màu hồng, đây là phần duy nhất của
phức hợp vẫn còn thiếu các chi tiết cấu trúc.
Ở đầu bên kia, thân này được gắn với đầu F1
ATP ase thông qua tiểu đơn vị nhỏ màu
đỏ.(sự cho phép của K. Davies.)
 ATP synthase cũng có thể hoạt động ngược lại bằng cách sử dụng năng lượng của quá trình
thủy phân ATP để bơm proton lên dốc, chống lại gradient điện hóa của chúng qua màng
(Hình 14-17).Trong chế độ này, ATP synthase có chức năng như một bơm H+ được mô tả
trong chương 12. Việc ATP synthase chủ yếu tạo ra ATP, hay tiêu thụ nó để bơm proton,
tùy thuộc vào độ lớn của gradient proton điện hóa trên màng có gắn với enzyme. Ở nhiều
vi khuẩn có thể phát triển cả hiếu khí hoặc yếm khí, con đường mà ATP synthase hoạt động
được đảo ngược thường xuyên khi vi khuẩn hết O2. Trong các điều kiện này, ATP synthase
sử dụng ATP được tạo ra bên trong tế bào bằng đường phân để bơm các proton ra khỏi tế
bào, tạo ra gradient proton mà tế bào vi khuẩn cần để nhập các chất dinh dưỡng thiết yếu
của nó bằng cách vận chuyển kết hợp. Một cơ chế tương tự được sử dụng để thúc đẩy sự
vận chuyển các phân tử nhỏ vào và ra khỏi chất nền ty thể, như chúng ta sẽ thảo luận tiếp
theo.
H+
Hình 14-16 ATP synthase là một thiết H+ H+
bị có thể đảo ngược. Nó có thể tổng H+ H+
hợp ATP bằng cách khai thác gradient H+ H+ H+
H+ H+
H+
điện hóa H+ (A) hoặc bơm proton chống
lại gradient này bằng cách thủy phân
ATP (B). Hướng hoạt động tùy thuộc
vào sự thay đổi năng lượng tự do (∆G, Chất nền
H+ H+ H+
thảo luận trong Chương 3) cho quá rotor
ATP ATP H+
trình kết hợp của vận chuyển H+ qua Pi + ADP H+
ATP H+
màng và tổng hợp ATP từ ADP và Pi. Ví H+
dụ, nếu gradient điện hóa proton giảm ATP Pi + ADP H+
H+
xuống dưới một mức nhất định, ∆G cho stator F1 ATPase
ận chuyển H+ vào chất nền sẽ không còn
đủ lớn để thúc đẩy sản xuất ATP; thay A. Tổng hợp ATP B. Thủy phân ATP
vào đó, ATP sẽ bị thủy phân bởi ATP
synthase để tạo lại proton gradient.

Vận chuyển kết hợp qua màng trong ty thể cũng được điều khiển bởi
Gradient điện hóa Proton.
Quá trình tổng hợp ATP không phải là quá trình duy nhất được điều khiển bởi gradient
điện hóa proton trong ty thể. Nhiều phân tử nhỏ, tích điện, như pyruvate, ADP và
phostphate vô cơ (Pi), được nhập vào chất nền ty thể từ bào tương, trong khi các loại khác,
như ATP, phải được vận chuyển theo hướng ngược lại. Các protein vận chuyển liên kết
các phân tử này có thể kết hợp sự vận chuyển của chúng với “dòng chảy” thuận lợi về mặt
năng lượng của H+ vào trong chất nền (xem Sự vận chuyển kết hợp ở hình 12 - 14).
Pyruvate và Pi, chẳng hạn, đồng vận chuyển vào bên trong cùng với các proton, khi các
proton di chuyển theo gradient điện hóa vào chất nền.
Các thể vận chuyển khác tận dụng thế năng màng được tạo ra bởi gradient điện hóa proton,
mà làm cho phía chất nền của phía màng trong ty thể tích điện âm hơn so với bên phải đối
diện với khoảng gian màng. Một protein mang đối chuyển khác khai thác gradient điện thế
này để xuất ATP từ chất nền ty thể và đưa ADP vào. Trao đổi này cho phép ATP được
tổng hợp trong ty thể được xuất khẩu nhanh chóng. (Hình 14-18)
Do đó, trong các tế bào nhân chuẩn gradient điện hóa
proton được sử dụng để điều khiển cả sự hình thành
ATP và vận chuyển các sản phẩm của sự chuyển hóa Câu hỏi 14-4
được chọn qua màng trong ty thể. Ở vi khuẩn, gradient
proton trên màng tế bào được sử dụng tương tự để thúc Các đặc tính đáng chú ý làm cho ATP
đẩy quá trình tổng hợp ATP và vận chuyển chất chuyển synthase hoạt động theo một trong
hóa. Nhưng nó cũng phục vụ như một nguồn năng lượng hai hướng cho phép sự xen kẽ năng
lượng được lưu trữ trong gradient
quan trọng có thể sử dụng trực tiếp: ví dụ, ở vi khuẩn có
H+ và năng lượng được lưu trữ trong
sự vận động, gradient proton vào trong tế bào thúc đẩy
ATP để tiến hành theo một trong hai
sự quay vòng nhanh chóng của lông vi khuẩn đẩy vi hướng. (A) Nếu ATP synthase có thể
khuẩn di chuyển theo. được ví như một tuabin chạy bằng
nước, khi nó hoạt động theo hướng
Sự chuyển đổi nhanh chóng của ADP thành ngược lại, điều gì sẽ là một sự tương
ATP trong ty thể giúp duy trì tỷ lệ ATP / ADP tự thích hợp? (B) Trong những điều
cao trong các tế bào. kiện nào người ta sẽ mong đợi ATP
synthase bị đình trệ, không đi theo
Kết quả của quá trình trao đổi nucleotide được thấy ở bất kì hướng nào? (C) Điều gì xác
Hình 14-18, ADP, được sản xuất bằng cách thủy phân định hướng trong hoạt động của ATP
ATP trong tế bào chất, nhanh chóng được đưa trở lại ty synthase?
thể để tái tạo lại ATP, trong khi phần lớn ATP sản xuất
Hình 14-16 Gradient điện hóa proton
trong ty thể được đưa vào tế bào chất, nơi cần thiết nhất. được dùng để điều khiển một số quá
trình vận chuyển. Điện tích trên mỗi
_ _ phân tử vận chuyển được biểu diễn để
3 ATP 4 Màng ngoài ty thể
ADP so sánh với điện thế màng tích điện âm
bên trong. Pyruvate và phostphate vô cơ
_ _ (Pi) được vận chuyển vào chất nền cùng
3
ADP ATP 4
Gradient điện thế ++++
với các proton, khi các proton di chuyển
++++
kéo theo trao đổi _ _ __ _ _ __ theo gradient điện hóa của chúng. Cả hai
ATP-ADP _
4 đều tích điện âm, do đó sự vận chuyển
ATP
_ bị cản trở bởi thế năng âm của màng; tuy
3
ADP
_
nhiên gradient nồng độ H+ - gradient pH
_
Pyruvate Pi - được khai thác để thúc đẩy sự vận
chuyển vào trong. ADP được đưa vào
chất nền và ATP được đưa ra bởi một
quá trình đối chuyển sử dụng gradient
Pyruvate
_ _ điện thế màng để điều khiển sự trao đổi
Pi
này. Màng ngoài ty thể có thể thấm với
tất cả các hợp chất này do sự hiện diện
_
Pyruvate
_ Pi của các porin trong màng. Sự vận
chuyển tích cực của các phân tử qua
màng bằng chất mang protein và việc
tạo ra một thế năng màng được thảo
luận trong Chương 12.
Một lượng nhỏ ATP được sử dụng trong ty thể để cung cấp năng lượng sao chép DNA,
tổng hợp protein và các phản ứng tiêu tốn năng lượng khác xảy ra ở đó. Vì thế, một phân
tử ATP điển hình trong tế bào người sẽ đưa ra khỏi ty thể và quay trở lại (dưới dạng ADP)
nhiều hơn một lần mỗi phút.
Như đã thảo luận trong Chương 3, hầu hết các enzyme sinh tổng hợp điều khiển các phản
ứng bất lợi về mặt năng lượng (phản ứng cần năng lượng, chứ không tạo ra năng lượng)
bằng cách ghép chúng với quá trình thủy phân ATP, thuận lợi về mặt năng lượng (xem
Hình 3 -33A). Do đó, nhóm ATP trong một tế bào được sử dụng để điều khiển một loạt
các quá trình tế bào giống như cách sử dụng pin để điều khiển động cơ điện. Để tiện lợi
cho hoạt động tế bào theo cách này, nồng độ ATP trong tế bào chất phải được giữ cao hơn
khoảng 10 lần so với ADP. Nếu hoạt động của ty thể bị dừng lại, mức ATP sẽ giảm đáng
kể và năng lượng cho tế bào sẽ cạn kiệt. Cuối cùng, các phản ứng bất lợi về mặt năng lượng
không thể diễn ra nữa và tế bào sẽ chết. Ví dụ điển hình là Cyanua, một chất độc, ngăn
chặn sự vận chuyển điện tử ở màng trong ty thể, gây chết tế bào theo cách này.

Hô hấp tế bào đem lại hiệu quả đáng kinh ngạc

Quá trình oxy hóa đường để sản xuất ATP có vẻ như không cần thiết. Chắc chắn quá trình
này có thể được thực hiện một cách trực tiếp hơn chẳng hạn như bằng cách loại bỏ chu
trình acid citric hoặc một số bước trong chuỗi hô hấp tế bào. Việc đơn giản hóa như vậy
chắc chắn sẽ giúp các bạn sinh viên học môn Hóa học dễ dàng hơn nhưng đó sẽ là tin xấu
cho hoạt động tế bào. Như đã thảo luận trong Chương 13, các con đường oxy hóa cho phép
các tế bào trích xuất năng lượng từ thức ăn một cách hiệu quả và ở dạng có thể sử dụng
liên quan đến nhiều chất trung gian được tạo ra, mỗi cái chỉ khác nhau một chút so với tiền
chất tạo ra nó. Theo cách này, một lượng năng lượng khổng lồ có trong các phân tử thức
ăn có thể được phân chia thành các phần nhỏ có thể thu được trong các chất mang hoạt
hóa,chẳng hạn như NADH và FADH2 (xem Hình 13-1).
Phần lớn năng lượng do NADH và FADH2 mang theo cuối cùng được chuyển đổi thành
năng lượng có trong liên kết của ATP. Số lượng ATP mà mỗi chất mang hoạt hóa có thể
tạo ra phụ thuộc vào một số yếu tố, bao gồm cả các electron của nó đi vào chuỗi hô hấp tế
bào. Các phân tử NADH được tạo ra trong chất nền ty thể trong chu trình acid citric, sẽ
chuyển các electron cao năng lượng của chúng đến phức hợp NADH dehydrogenase, phức
hợp đầu tiên trong chuỗi hô hấp tế bào. Khi các electron chuyển từ phức hợp enzyme này
sang phức hợp tiếp theo, chúng thúc đẩy quá trình bơm proton qua màng trong ty thể ở mỗi
bước trên đường đi. Theo cách này, mỗi phân tử NADH cung cấp đủ năng lượng để tạo ra
khoảng 2,5 phân tử ATP (xem Câu hỏi 14-5 và câu trả lời của nó).
Mặt khác, các phân tử FADH2 bỏ qua phức hợp NADH dehydrogenase và chuyển các
electron của chúng đến một chất mang di động khác được nhúng màng là ubiquinone (xem
Hình 14-14). Bởi vì các điện tử này xâm nhập sâu hơn vào chuỗi hô hấp so với các điện tử
được cung cấp bởi NADH, nên chúng thúc đẩy việc bơm ít proton hơn: mỗi phân tử FADH2
do đó chỉ tạo ra 1,5 phân tử ATP. Bảng 14-1 cung cấp thống kê đầy đủ về ATP được tạo
ra bởi quá trình oxy hóa hoàn toàn glucose.
Mặc dù quá trình oxy hóa sinh học của glucose thành CO2 và H2O bao gồm nhiều bước
phụ thuộc lẫn nhau, nhìn chung tổng thể quá trình có hiệu quả rõ rệt. Gần 50% tổng năng
lượng được giải phóng bằng cách đốt đường hoặc chất béo được thu giữ và lưu trữ trong
các liên kết phostphate của ATP trong quá trình hô hấp tế bào. Điều đó có vẻ không ấn
tượng, nhưng nó hiệu quả hơn so với hầu hết các thiết bị chuyển đổi năng lượng phi sinh
học. Động cơ điện và động cơ xăng hoạt động với hiệu suất khoảng 10-20%. Nếu các tế
bào hoạt động với hiệu quả này, một sinh vật sẽ phải ăn liên tục chỉ để duy trì hoạt động
sống chính nó. Hơn nữa, vì năng lượng lãng phí được giải phóng dưới dạng nhiệt,các sinh
vật lớn (bao gồm cả bản thân chúng ta) sẽ cần các cơ chế tốt hơn nhiều để làm mát cơ thể.
Thật khó tưởng tượng làm thế nào động vật có thể tiến hóa mà không có cơ chế hiệu quả,
phức tạp cho phép các tế bào lấy lượng năng lượng tối đa từ thức ăn

Bảng14–1 Sản lượng từ oxy hóa glucose

Lượng ATP
Quá trình Sản phẩm trực tiếp trên mỗi mol
glucose
Đường phân 2 NADH 3*
2 ATP 2
Pyruvate → Acetyl CoA 2 NADH
5
( 1 glucose → 2 Acetyl CoA) (chất nền ty thể)
Oxy hóa hoàn toàn Acetyl 6 NADH
15
CoA (chất nền ty thể)
2 FADH2 3
2 GTP 2
TỔNG 30
* NADH được tạo ra trong tế bào chất mang lại ít phân tử ATP hơn NADH được
tạo ra trong chất nền ty thể vì màng trong của ty thể không thấm với NADH.Do
vậy, để vận chuyển NADH từ tế bào chất vào chất nền ty thể, nơi nó gặp NADH
dehydrogenase, cần phải được cung cấp năng lượng.

Cơ chế phân tử của vận chuyển điện tử và bơm proton.

Trong nhiều năm, các nhà hóa sinh đã cố gắng để hiểu tại sao các chuỗi vận chuyển điện
tử phải được gắn trong màng để hoạt động trong sản xuất ATP. Câu đố về cơ bản đã được
giải quyết vào những năm 1960, khi người ta phát hiện ra rằng gradient proton xuyên màng
điều khiển quá trình. Tuy nhiên, khái niệm về hóa thẩm rất mới lạ, tuy nhiên, nó không
được chấp nhận rộng rãi cho đến nhiều năm sau đó, khi các thí nghiệm kết hợp với các hệ
thống tạo năng lượng nhân tạo đưa năng lượng của gradient proton vào thử nghiệm (xem
Làm thế nào chúng ta biết, trang 462-463)
Câu hỏi 14-5
Mặc dù các nhà nghiên cứu vẫn đang làm sáng tỏ một
số chi tiết của thuyết hóa thẩm ở cấp độ nguyên tử, Tính số lượng phân tử ATP có thể sử
nhưng các nguyên tắc cơ bản nhất hiện đã rõ ràng. dụng được tạo ra trên mỗi cặp
Trong phần này, chúng tôi sẽ kiểm tra các nguyên tắc electron được chuyển từ NADH đến
oxy, nếu (i) năm proton được bơm
cơ bản thúc đẩy sự chuyển động của các điện tử và sẽ
qua màng trong ti thể cho mỗi
giải thích chi tiết ở mức độ phân tử làm thế nào sự vận
electron truyền qua ba phức hợp
chuyển điện tử có thể tạo ra một gradient proton. Bởi enzyme hô hấp, (ii) ba proton phải đi
vì đây các cơ chế rất giống nhau, được sử dụng bởi ty qua ATP synthase thì mới cho được
thể, lục lạp và tế bào nhân sơ, những nguyên tắc này một phân tử ATP mà nó tạo ra từ
áp dụng cho gần như tất cả các sinh vật sống. ADP và phosphate vô cơ bên trong ty
thể, và (iii) một proton được sử dụng
Các proton được vận chuyển nhờ sự di để tạo ra gradient điện thế cần thiết
chuyển của điện tử. để vận chuyển từng phân tử ATP ra
khỏi ty thể đến với tế bào chất nơi
Mặc dù các proton giống với các ion dương khác như nó được sử dụng.
Na+, K+ trong cách chúng di chuyển qua màng. Tuy
nhiên trong một số khía cạnh, chúng lại khác biệt nhau. Các nguyên tử hydro cho đến nay
là nguyên tử phong phú nhất trong các sinh vật sống: chúng không chỉ trong tất cả các phân
tử sinh học có chứa carbon mà còn trong các phân tử nước. Các proton trong nước có tính
di động cao: bằng cách phân tách nhanh chóng từ một phân tử nước và liên kết với phân tử
khác, chúng có thể nhanh chóng di chuyển qua một mạng lưới liên kết hydro của các phân
tử nước khác (xem Hình 2-15B). Do đó, nước, ở khắp mọi nơi trong các tế bào, đóng vai
trò là một bể chứa sẵn sàng để nhận và cung cấp các proton.
Làm thế nào chúng ta biết
LÀM THẾ NÀO CƠ CHẾ HÓA THẨM LẠI GIÚP TỔNG HỢP
ĐƯỢC ATP
Năm 1861,Louis Pasteur đã phát hiện ra
rằng các tế bào nấm men phát triển và
phân chia mạnh mẽ hơn khi không khí,
đây là chứng minh đầu tiên rằng quá trình
trao đổi chất hiếu khí hiệu quả hơn nhiều
chuyển hóa kỵ khí. Những quan sát của
ông giúp chúng ta hiểu rằng phosphoryl
hóa oxy hóa là một cách thức tạo ATP
hiệu quả hơn nhiều so với đường phân, tạo
ra khoảng 30 phân tử ATP cho mỗi phân
tử glucose bị oxy hóa, so với 2 ATP được
tạo ra bởi đường phân đơn thuần. Nhưng
phải mất một trăm năm nữa, các nhà
nghiên cứu mới xác định rằng đó là quá
trình hóa thẩm bằng cách sử dụng bơm
proton để cung cấp năng lượng cho sự
tổng hợp ATP, cho phép các tế bào tạo
năng lượng tương ứng với hiệu quả như
vậy.
Sự tưởng tượng trung gian.
Vào những năm 1950, nhiều nhà nghiên
cứu tin rằng quá trình phosphoryl hóa oxy
hóa diễn ra trong ty thể, tạo ra ATP thông
qua một cơ chế tương tự như trong quá
trình đường phân. Trong quá trình đường
phân, ATP được tạo ra khi một phân tử
ADP nhận được một nhóm phosphate trực
tiếp từ một chất trung gian cao năng
lượng. Phosphoryl hóa mức cơ chất như
vậy xảy ra trong các bước 7 và 10 của
đường phân, trong đó các nhóm
phosphate cao năng lượng từ
1,3 – bisphosphoglycerate và
phosphoenolpyruvate, tương ứng, được
chuyển đến ADP để tạo thành ATP (xem
Bảng 13-1, trang 428-429). Người ta cho
rằng chuỗi vận chuyển điện tử trong ty thể
sẽ mô phỏng một cách trung thực một số
chất trung gian phosphoryl hóa mà sau đó
có thể cung cấp trực tiếp nhóm phosphate
của nó cho ADP. Mô hình này đã truyền
cảm hứng cho một cuộc nghiên cứu dài và
đầy khó khăn cho chất trung gian cao
năng lượng bí ẩn này. Các nhà nghiên cứu
đôi khi tuyên bố đã phát hiện ra chất trung
gian bị thiếu, nhưng các hợp chất được
tìm ra này hóa ra lại không liên quan đến
vận chuyển điện tử hoặc, như một nhà
nghiên cứu đã đưa nó vào sự xem xét về
lịch sử của năng lượng sinh học, “các sản
phẩm cao năng lượng của trí tưởng
tượng”.
Khai thác lực lượng
Cho đến năm 1961, Peter Mitchell đã đề
xuất rằng chất trung gian cao năng lượng,
mà các đồng nghiệp của ông đang tìm
kiếm trên thực tế là gradient điện hóa
proton được dựng lên bởi hệ thống vận
chuyển điện tử. Đề xuất của ông, được đặt
tên là thuyết hóa thẩm, tuyên bố rằng năng
lượng của một gradient điện hóa proton
được hình thành trong quá trình vận
chuyển electron qua chuỗi vận chuyển
điện tử có thể được khai thác để thúc đẩy
quá trình tổng hợp ATP.
Một số bằng chứng cung cấp hỗ trợ cho
giả thuyết của Mitchell. Đầu tiên, ty thể
tạo ra một gradient proton điện hóa trên
màng trong của chúng
 Nhưng cái gradient này còn được gọi là
động lực proton - thực sự dùng để làm gì?
Nếu gradient được yêu cầu để thúc đẩy
tổng hợp ATP, như thuyết hóa thẩm đặt
ra, nghĩa là hoặc phá vỡ màng bên trong
hoặc loại bỏ gradient proton trên nó sẽ ức
chế sản xuất ATP. Trên thực tế, các nhà
nghiên cứu nhận thấy cả hai dự đoán này
là đúng. Sự phá vỡ vật lý của màng trong
ty thể ngăn chặn quá trình tổng hợp ATP
trong cơ quan đó. Tương tự như vậy, sự
phân tán gradient proton bằng một tác
nhân hóa học không tách rời, chẳng hạn
như 2,4-dinitrophenol (DNP) cũng ức chế
sản xuất ATP của ty thể. Hóa chất phá hủy
gradient như vậy mang H+ qua màng
trong ty thể, hình thành một hệ thống thúc
đẩy cho sự di chuyển H+ bỏ qua ATP
synthase (Hình 14-19). Theo cách này,
các hợp chất như DNP tách rời mối liên
kết vận chuyển điện tử với quá trình tổng
hợp ATP. Kết quả của việc này, làm cho
lực động lực của proton bị tiêu tán hoàn
toàn, và ty thể không còn có thể tạo ra
ATP.
Sự tách rời như vậy xảy ra tự nhiên trong
một số tế bào mỡ chuyên biệt. Trong các
Màng trong ty thể Màng ngoài ty thể
H+
H+ H+ H+
ATP synthase
e-
Chuỗi truyền
điện tử Chất nền
Hình 14-19 Các tác nhân hủy gradient proton là các chất mang H+ có thể chèn vào màng trong ty thể.
Chúng làm cho màng thấm vào các proton,cho phép H+ thấm ngược lại vào chất nền ty thể mà không
đi qua ATP synthase. Sự tác động này ngăn cách hiệu quả sự vận chuyển điện tử với sự tổng hợp ATP.
tế bào này, được gọi là tế bào mỡ nâu,
phần lớn năng lượng từ quá trình oxy hóa
chất béo bị thoát ra dưới dạng nhiệt thay
vì chuyển thành ATP. Màng trong của ty
thể trong các tế bào này chứa protein
mang cho phép các proton di chuyển theo
gradient điện hóa của chúng mà không
cần đi qua ATP synthase. Kết quả là, các
tế bào oxy hóa chất béo dự trữ của chúng
với tốc độ nhanh và tạo ra nhiều nhiệt hơn
là ATP. Mô có chứa tế bào mỡ nâu nâu
hoạt động như một miếng đệm sinh học,
giúp hồi sinh động vật ngủ đông và bảo vệ
các khu vực nhạy cảm của trẻ sơ sinh
(chẳng hạn như lưng,cổ) khỏi cảm lạnh.
Tạo ATP nhân tạo
Nếu phá vỡ gradient điện hóa proton trên
màng trong của ty thể chấm dứt sự tổng
hợp ATP, thì ngược lại, tạo ra một
gradient proton nhân tạo sẽ kích thích
tổng hợp ATP. Một lần nữa, đây chính
xác là những gì xảy ra. Khi một gradient
proton được tạo ra một cách nhân tạo
bằng cách hạ thấp độ pH ở bên ngoài
màng trong của ty thể, sẽ tạo ra ATP.
Bổ sung chất H+ H+ H+
phá ghép
e-
 Làm thế nào gradient điện hóa proton lại
thúc đẩy việc tạo ATP? Đây là lúc mà
ATP synthase xuất hiện. Năm 1974,
Efraim Racker và Walther Stoeckenius
tuyên bố rằng họ có thể thiết kế một hệ
thống tạo ATP nhân tạo hoàn chỉnh bằng
cách kết hợp một ATP synthase được
phân lập từ ty thể của cơ tim bò với một
bơm proton được tinh chế từ “màng tím”
(purple membrane: là các protein như
bacteriorhodopsin, halorhodopsin,.. khi
được hoạt hóa bởi ánh sáng sẽ tạo gradient
proton bằng cách bơm H+ ra ngoài tế bào)
của prokaryote Halobacterium halobium.
Như đã thảo luận trong chương 11, màng
sinh chất của Archaean này có chứa
Bacteriorhodopsin, một loại protein bơm
H+ ra khỏi tế bào khi được kích hoạt bởi
ánh sáng mặt trời (xem Hình 11-27).
Khi bacteriorhodopsin được phân lập ở
trong các túi lipid nhân tạo (liposome),
Racker và Stoeckenius thấy rằng, với sự
hiện diện của ánh sáng, protein vi khuẩn
bơm H+ vào các túi, tạo ra một gradient
Ánh H+
bacteriorhodopsin Ánh
sáng sáng
liposome
H+
A. Không có ATP tạo ra B. Có sự tạo thành ATP
Ánh Ánh
sáng sáng
ATP synthase
C. Không có ATP tạo ra D. Không có ATP tạo ra
proton. (Sự định hướng của protein bị đảo
ngược quay vào bên trong, do đó các
proton được vận chuyển vào các túi; ở vi
khuẩn, các proton được bơm ra.) Khi ATP
synthase ở ty thể tim bò được kết hợp vào
các túi này, đã gây ngạc nhiên cho nhiều
nhà hóa sinh, hệ thống có thể xúc tác cho
quá trình tổng hợp ATP từ ADP và
phostphate vô cơ khi phản ứng với ánh
sáng. Sự tổng hợp ATP này cho thấy sự
phụ thuộc vào gradient proton, vậy nên
khi loại bỏ bacteriorhodopsin khỏi hệ
thống hoặc thêm các tác nhân phá ghép
như DNP đã ức chế sự tổng hợp ATP
(Hình 14-20).
Thí nghiệm này chứng minh rằng gradient
proton có thể kích thích ATP synthase tạo
ATP. Do đó, mặc dù các nhà hóa sinh đã
hy vọng khám phá ra chất trung gian cao
năng lượng có liên quan đến quá trình
phosphoryl oxy hóa, thực nghiệm đã
thuyết phục rằng việc tìm kiếm là vô ích
và thuyết hóa thẩm là chính xác. Mitchell
được trao giải Nobel năm 1978.
Hình 14-20 Các thí nghiệm trong đó
H+
bacteriorhodopsin và ATP synthase
của ty thể ở tim bò đã được đưa
H+ vào liposome, đã cung cấp bằng
chứng trực tiếp rằng gradient
proton có thể cung cấp năng lượng
H+
cho sự sản xuất ATP. (A) Khi thêm
ATP synthase bacteriorhodopsin vào các túi lipid
nhân tạo (liposome), protein tạo ra
một gradient proton khi cảm ứng với
ánh sáng. (B) Trong các túi nhân tạo
có chứa cả bacteriorhodopsin và
H+ Chất phá ghép
H+ ATP synthase, gradient proton được
tạo ra khi cảm ứng ánh sáng thúc
đẩy sự hình thành ATP từ ADP và Pi.
(C) Các túi nhân tạo chỉ chứa ATP
H+ synthase không tự sản xuất ATP khi
cảm ứng với ánh sáng. (D) Trong các
túi chứa cả bacteriorhodopsin và
ATP synthase, chất phá ghép đã loại
bỏ gradient proton nên không thể
tổng hợp được ATP
 Từ nước
Những proton này thường đi kèm với các electron được tạo
ra trong quá trình oxy hóa và khử. Khi một phân tử bị khử
Chất Chất
bằng cách thu được một electron (e,), electron mang theo
Chất
oxy
trung khử nó một điện tích âm; trong nhiều trường hợp, điện tích này
hóa
gian
được trung hòa ngay lập tức bằng cách thêm một proton từ
nước, do đó, hiệu ứng của việc khử là chuyển hóa toàn bộ
nguyên tử hydro, H+ + e- (Hình 14-21A). Tương tự, khi một
Chất Chất
Chất phân tử bị oxy hóa, nó thường mất một điện tử từ một trong
oxy
khử trung Đến
hóa các nguyên tử hydro của nó: trong hầu hết các trường hợp,
gian nước
electron được chuyển sang chất mang điện tử, và proton
Hình 14-20 Sự vận chuyển điện tử có
được truyền vào nước (Hình 14 - 21B). Do đó, ở trên màng
thể dẫn đến di chuyển động của
nguyên tử hydro, vì các proton dễ các electron được truyền dọc theo chuỗi vận chuyển điện
dàng được nhận hoặc mang đến cho tử, về nguyên tắc, nó là một vấn đề tương đối đơn giản để
nước. Trong ví dụ này, một phân tử bị di chuyển các proton từ một bên của màng sang bên kia.
oxy hóa – X, nhận một electron cộng Tất cả những gì được yêu cầu là chất mang điện tử được
với một proton khi nó bị khử (A) và một
phân tử khử - Y mất một electron cộng
định hướng trong màng phải theo cách sao cho nó nhận một
với một proton khi nó bị oxy hóa (B) electron cùng với một proton từ nước ở một bên của màng,
và sau đó giải phóng proton đó ở phía bên kia của màng khi
Electron cao năng
lượng Proton từ nước electron được chuyển sang phân tử mang điện tử tiếp theo
trong chuỗi (Hình 14-22).

A B C
màng
Thế năng oxy hóa khử là thước đo của ái lực điện
Protein mang electron
tử
–
Các protein của chuỗi hô hấp hướng dẫn các electron sao
A B e C
A
cho chúng di chuyển tuần tự từ phức hợp enzyme này sang
phức hợp khác mà không có bỏ qua một phức hợp nào. Mỗi
B Electron năng lượng
thấp
lần chuyển electron là một phản ứng oxy hóa khử xảy ra:
như được mô tả trong Chương 3, phân tử hoặc nguyên tử
cho electron sẽ bị oxy hóa, trong khi phân tử hoặc nguyên
A B C
tử nhận bị khử (xem trang 89-90). Các electron sẽ tự động
Proton đến nước chuyển từ các phân tử có ái lực tương đối thấp để đến với
Hình 14-20 Sự định hướng của chất các đến các phân tử có ái lực cao hơn với các điện tử. Ví
mang electron cho phép chuyển dụ, NADH có ái lực với điện tử thấp, do đó các electron của
electron để bơm proton. Khi một
nó dễ dàng được chuyển đến phức hợp NADH
electron đi dọc chuỗi vận chuyển điện
tử, nó có thể liên kết và giải phóng một dehydrogenase (xem Hình 14-14). Pin hiện nay mà chúng
proton ở mỗi bước. Trong sơ đồ, protein ta sử dụng để cung cấp năng lượng cho các thiết bị điện tử
B nhận proton từ một phía của màng khi của cũng dựa trên sự chuyển điện tử tương tự giữa các chất
nó nhận một electron (e-) từ protein A; hóa học với ái lực điện tử khác nhau.
protein B giải phóng proton sang phía
bên kia của màng khi nó chuyển
electron của cho protein C
Trong các phản ứng sinh hóa, bất kỳ electron nào bị loại bỏ khỏi một phân tử luôn được
truyền cho một phân tử khác, do đó, bất cứ khi nào một phân tử bị oxy hóa, một phân tử
khác sẽ bị khử. Giống như bất kỳ phản ứng hóa học nào khác, xu hướng của các phản ứng
oxy hóa khử có thể xảy ra một cách tự phát phụ thuộc vào sự thay đổi năng lượng tự do
(∆G) cho sự vận chuyển electron, do đó phụ thuộc vào ái lực tương đối của hai phân tử đối
với electron. (Vai trò của năng lượng tự do trong các phản ứng hóa học được thảo luận
trong Chương 3, trang 90-100.)
Bởi vì sự vận chuyển điện tử cung cấp hầu hết năng lượng trong các sinh vật sống, nên đây
là điều đáng để chúng ta dành thời gian để hiểu chúng. Các phân tử cho proton được gọi là
acid; những phân tử nhận các proton được gọi là các bazơ (xem Panel 2-2, trang 68-69).
Các phân tử này tồn tại trong các cặp bazơ acid liên hợp, trong đó acid dễ dàng chuyển
thành bazơ do mất một proton. Ví dụ, acid acetic (CH3COOH) được chuyển thành base
liên hợp của nó (CH3COO-) trong phản ứng
CH3COOH ↔ CH3COO- + H+
Theo cùng một cách, các cặp hợp chất như NADH và NAD+ được gọi là cặp oxy hóa khử,
bởi vì NADH được chuyển đổi thành NAD+ do mất electron trong phản ứng:
NADH ↔ NAD+ + H+ + 2e-
NADH là một nguồn cung cấp điện tử dồi dào. Các electron của nó được cho là được giữ
ở mức năng lượng cao vì ∆G cần để truyền chúng cho nhiều phân tử khác là thích hợp.
Ngược lại, rất khó để tạo ra các electron cao năng lượng trong NADH, vì vậy NAD+ dùng
để nhận điện tử yếu.
Xu hướng cho một cặp oxi hóa khử như NADH /NAD+ để cho hoặc nhận các điện tử có
thể được xác định bằng thực nghiệm bằng cách đo thế năng oxy hóa khử của nó (Panel 14-
1, trang 466). Các electron sẽ di chuyển tự phát từ một cặp oxi hóa khử có thế oxi hóa khử
thấp (hoặc ái lực thấp đối với các điện tử), chẳng hạn như NADH /NAD+ đến một cặp oxi
hóa khử có thế oxi hóa khử cao (hoặc ái lực cao đối với các điện tử), chẳng hạn như O2/
H2O. Do đó, NADH là một phân tử tuyệt vời để cung cấp các electron cho chuỗi hô hấp,
trong khi đó, O2 rất phù hợp để hoạt động như một chất nhận electron ở cuối con đường.
Như đã giải thích trong Bảng 14-1, sự khác biệt về thế năng oxy hóa khử, ∆E0ʹ, là thước
đo trực tiếp của sự thay đổi năng lượng tự do tiêu chuẩn (∆G °) để chuyển electron từ phân
tử này sang phân tử khác. Trong thực tế, ∆E0ʹ bằng ∆G° nhân với số âm là một hằng số.

Electron khi di chuyển tạo ra một lượng lớn năng lượng.

Lượng năng lượng có thể được giải phóng khi vận chuyển điện tử có thể được xác định
bằng cách so sánh thế năng oxy hóa khử của các phân tử liên quan. Một lần nữa, chúng ta
hãy nhìn vào việc chuyển các electron từ NADH đến O2 .Như được hiển thị trong Panel
14-1, hỗn hợp 1:1 NADH và NAD+ có thế năng oxy hóa khử là -320 mV, đã chỉ ra rằng
NADH có ái lực yếu đối với các điện tử và có xu hướng mạnh mẽ nhường điện tử; hỗn hợp
1: 1 ở H2O và ½ O2 có thế năng oxy hóa khử là +820 mV chỉ ra rằng O2 có ái lực mạnh với
các electron điện tử và có xu hướng nhận các điện tử. Sự khác biệt về thế năng oxy hóa
khử giữa hai cặp này là 1.14 volt (1140 mV),có nghĩa là việc chuyển từng electron từ
NADH đến O2 trong các điều kiện tiêu chuẩn này rất thuận lợi: ∆G° cho sự chuyển điện tử
đó là ở mức -26.2 kcal/mol mỗi electron hoặc -52.4 kcal/mol cho hai electron được chuyển
từ mỗi phân tử NADH (xem Panel 14-1). Nếu chúng ta so sánh sự thay đổi năng lượng tự
do này với sự thay đổi cần thiết cho sự hình thành các liên kết phosphoanhydride ở ATP
trong các tế bào (khoảng 13 kcal/mol), chúng ta thấy rằng có đủ năng lượng được giải
phóng bằng quá trình oxy hóa của một phân tử NADH để tổng hợp một vài phân tử ATP.
Các hệ thống sống có thể đã tiến hóa các enzyme cho phép NADH nhường các electron
trực tiếp cho O2 để tạo ra nước. Nhưng vì sự sụt giảm năng lượng tự do rất lớn, phản ứng
này sẽ tiến hành với gần như toàn bộ năng lượng sẽ được giải phóng dưới dạng nhiệt. Thay
vào đó, như chúng ta đã thấy, việc chuyển electron từ NADH sang O2 được thực hiện theo
nhiều bước nhỏ dọc theo chuỗi vận chuyển điện tử, cho phép gần một nửa năng lượng được
giải phóng được lưu trữ trong gradient proton ở màng trong thay vì bị thất thoát ra môi
trường dưới dạng nhiệt.

Kim loại liên kết chặt chẽ với protein hình thành các chất mang điện tử
đa năng.
Mỗi trong số ba phức hợp enzyme hô hấp bao gồm các nguyên tử kim loại liên kết chặt
chẽ với protein. Khi một electron đã được nhường cho một phức hợp hô hấp, nó sẽ di
chuyển trong phức hợp đó bằng cách chuyển từ ion kim loại này sang ion khác có ái lực
lớn hơn với các electron.
Khi truyền từ phức hợp hô hấp này sang phức hợp tiếp theo, hay ngược lại, các electron
được vận chuyển bởi các chất mang điện tử khuếch tán tự do trong lớp kép lipid. Những
phân tử di động này nhận các electron từ một phức hợp và đưa chúng đến phức hợp tiếp
theo. Trong chuỗi hô hấp của ty thể, ví dụ, một phân tử kỵ nước gọi là ubiquinone nhận
electron từ phức hợp NADH dehydrogenase và đưa chúng đến phức hợp cytochrom c
reductase (xem Hình 14-14). Mối liên quan hoạt động quinone tương tự như trong quá trình
vận chuyển điện tử ở quang hợp. Ubiquinone có thể nhận hoặc nhường một hoặc hai
electron, và nó nhận H+ từ nước với mỗi electron mà nó mang theo (Hình 14-23). Thế năng
oxy hóa khử của nó là +30 mV, đặt ubiquinone giữa phức hợp NADH dehydrogenase và
phức hợp cytochrom c reductase về xu hướng có hoặc mất electron của nó, điều này giải
thích tại sao ubiquinone lại nhận điện tử từ cái trước và đưa chúng cho cái sau (Hình 14-
24). Ubiquinone cũng đóng vai trò là điểm vào cho các electron được nhường bởi FADH2
tạo ra trong chu trình acid citric và từ quá trình oxy hóa acid béo (xem Hình 13-11 và 13-
12)
PANEL 14-1 Thế năng oxy hóa khử
LÀM THẾ NÀO ĐỂ ĐO ĐƯỢC THẾ NĂNG
Một cốc (trái) chứa chất A với hỗn hợp cân bằng giữa 2 dạng là
OXY HÓA KHỬ?
khử (Adạng khử) và oxy hóa (Adạng oxy hóa). Cốc còn lại chứa tiêu chuẩn
Volt kế tham chiếu hydro (2H+ + 2e- ↔ H2), có thế năng oxy hóa khử được
e–
gán tùy ý như là 0 theo quy ước quốc tế. (Một cầu muối được lắp
đặt từ dung dịch KCl đậm đặc cho phép K+ và Cl- di chuyển giữa các
Cầu muối cốc; để trung hòa các điện tích khi các electron chảy giữa các cốc).
Dây kim loại (màu xanh đậm) tạo đường dẫn, không có điện trở
cho các electron và có volt kế để đo điện thế oxy hóa khử của chất
A. Nếu các electron chảy từ Adạng khử đến H+ như đã chỉ ra, cặp oxi
hóa khử được hình thành bởi chất A được cho là có thế oxy hóa
Aoxi hóa và Akhử được bổ 1 M H+ và 1
atm khí H2
khử âm. Nếu thay vào đó chúng chảy từ H2 sang Adạng oxy hóa hóa,
sung với lượng như nhau
cặp oxi hóa khử được cho là có thế năng oxy hóa khử dương.

THẾ NĂNG OXY HÓA KHỬ TIÊU CHUẨN, E0’ Ví dụ về phản ứng oxy hóa khử
Thế năng oxy hóa
khử tiêu chuẩn E0’
Thế năng oxy hóa khử tiêu chuẩn cho một cặp oxy hóa khử, định
nghĩa như là E0, được đo ở trạng thái tiêu chuẩn trong đó tất cả các
chất phản ứng đều ở nồng độ 1 M, kể cả H+. Vì các phản ứng sinh
học xảy ra ở pH = 7, thay vào đó, các nhà sinh học sẽ định nghĩa
trạng thái tiêu chuẩn là Adạng khử = Adạng oxy hóa và H+ = 10-7 M. Thế năng
oxy hóa khử tiêu chuẩn này được ký hiệu E0'

TÍNH ∆G0 TỪ THẾ NĂNG OXY HÓA KHỬ. ẢNH HƯỞNG CỦA SỰ THAY ĐỔI NỒNG ĐỘ.
Để xác định sự thay đổi năng lượng cho sự chuyển điện Như đã giải thích trong Chương 3 (xem trang 94), sự thay
tử, ΔG0 của phản ứng (kcal/mol) được tính như sau: đổi năng lượng tự do thực tế cho một phản ứng, ΔG, phụ
thuộc vào nồng độ của các chất phản ứng và nói chung sẽ
ΔG0 = -n(0,023)ΔE0’ với n là số electron chuyển qua ứng
khác với thay đổi năng lượng tự do tiêu chuẩn, ΔG0. Thế
với sự thay đổi thế oxy hóa khử ΔE0 millivolts (mV), và
oxy hóa khử tiêu chuẩn áp dụng cho hỗn hợp 1: 1 của cặp
ΔE0’ = E0’ (Chất cho) – E0’ (Chất nhận) oxy hóa khử. Ví dụ, thế năng oxy hóa khử tiêu chuẩn là -
320 mV của hỗn hợp NADH và NAD+ với tỉ lệ 1: 1. Nhưng
Ví dụ khi có quá nhiều NADH, việc điện tử chuyển từ NADH sang
e–
chất nhận điện tử sẽ trở nên thuận lợi hơn. Điều này được
phản ánh bởi một thế oxy hóa khử âm hơn và ΔG âm hơn
NADH
Ubiquinone để chuyển electron.
oxy hóa
NAD+
Hỗn hợp tiêu
Ubiquinone khử Dư NADH chuẩn 1:1 Dư NAD+
Hỗn hợp Hỗn hợp dạng khử và oxy
NADH/NAD+ 1:1 hóa của ubiquinone 1:1

Đối với việc chuyển một electron từ NADH sang =

ubiquinone: ΔE0’ = +30 – (-320) = +350 mV

ΔG0 = -n(0,023)ΔE0’ = -1.(0,023).350 = -8 kcal/mol

Tương tự việc vận chuyển electron từ ubiquinone đến Nhường electron Thế năng oxy Nhường electron
oxy thậm chí còn thuận lợi hơn với ΔG0 = -18.2 mạnh hơn (E’ âm hóa khử tiêu yếu hơn (E’
hơn) chuẩn -320 mV dương hơn)
kcal/mol. Giá trị ΔG0 cho chuyển một electron từ NADH
đến oxy là tổng của hai giá trị này, -26.2 kcal/mol
 Hình 14-23 Quinones mang các
electron, nằm ở trong lớp kép lipid.
Quinone trong chuỗi vận chuyển điện
tử ty thể được gọi là ubiquinone. Nó
nhận H+ từ môi trường nước đi cùng
mọi điện tử mà nó nhận và có thể
mang hai electron cùng với các nguyên
tử hydro (màu đỏ). Khi ubiquinone
Đuôi hydrocacbon khử nhường các electron của nó cho
ưa nước chất mang tiếp theo trong chuỗi, các
proton được giải phóng. Đuôi
Ubiquinone dạng Ubiquinone dạng hydrocarbon dài, kỵ nước của giúp giữ
oxy hóa khử ubiquinone vào màng trong ty thể.

Câu hỏi 14-6

Các thế oxy hóa khử của các phức kim loại khác nhau
ảnh hưởng đến nơi chúng được sử dụng dọc theo chuỗi Tại nhiều bước trong chuỗi vận
vận chuyển điện tử. Các trung tâm sắt lưu huỳnh có ái chuyển điện tử, các ion Fe được sử
lực tương đối thấp đối với các điện tử và do đó nổi bật dụng như một phần của cụm heme
hoặc FeS để liên kết các electron
trong các chất mang electron hoạt động trong phần đầu
trong quá trình vận chuyển.Tại sao
của chuỗi. Ví dụ, một trung tâm lưu huỳnh sắt trong các nhóm chức này muốn thực hiện
phức hợp NADH dehydrogenase, chuyển các electron chuyển điện tử cần phải được liên
đến ubiquinone. Sau đó, các nguyên tử sắt trong các kết với protein? Hãy đưa ra một số
nhóm heme liên kết với protein cytochrom thường lý do khác nhau giải thích điều này là
được sử dụng làm chất mang điện tử (Hình 14-25). cần thiết.

NADH
Năng lượng tự do cho mỗi electron (kcal/mol)

NAD+
ubiquinone Hình 14-24 Thế năng oxy hóa khử tăng
dọc theo chuỗi vận chuyển điện tử ty
Phức hợp NADH thể. Sự gia tăng về thế năng oxy hóa
Thế năng oxy hóa khử

dehydrogenase khử xảy ra trên mỗi ba phức hợp

cytochrom c enzyme hô hấp, theo yêu cầu cho mỗi
Phức hợp trong số chúng để bơm proton. Để
cytochrom c chuyển đổi giá trị năng lượng tự do
reductase thành kJ/mol, hãy nhớ rằng 1 kilocalorie
tương đương với khoảng 4.2 kilojoules
Phức hợp
cytochrom c
oxidase

Hướng của dòng điện tử

Các nhóm heme có trong các cytochromes, như là phức hợp cytochrom c reductase và
cytochrom c oxydase, và chúng có màu (cytochrome xuất phát từ chroma trong tiếng Hy
Lạp nghĩa là màu sắc). Giống như các chất mang điện tử khác, protein cytochrom có sự gia
tăng thế năng oxy hóa khử khi càng đi xuống chuỗi vận chuyển điện tử ty thể. Ví dụ,
cytochrom c, một loại protein nhỏ nhận các electron từ phức hợp cytochrom c reductase và
chuyển chúng vào phức hợp cytochrom c oxydase, có thế năng oxy hóa khử là +230 mV-
moọt giá trị nằm khoảng giữa các cytochrom mà nó tương tác. (Hình 14-24)

Hình 14-25 Sắt trong nhóm heme có thể

hoạt động như một chất nhận điện tử.
(A) Cấu trúc dạng dải cho thấy vị trí của
nhóm heme (màu đỏ) được liên kết với
cytochrom c (màu xanh lá cây). (B) Vòng
porphyrin của nhóm heme (màu đỏ
nhạt) được gắn bằng liên kết cộng hóa
trị với chuỗi bên trong protein. Các
nhóm heme của các cytochrome khác
nhau có ái lực điện tử khác nhau bởi vì
chúng khác nhau một chút về cấu trúc
và được định vị trong các môi trường
khác nhau với mỗi protein khác nhau.

Cytochrom c oxidase xúc tác quá trình khử

Câu hỏi 14-7 oxy phân tử.
Hai chất mang electron khác nhau, Cytochrom c oxidase là chất mang điện tử cuối cùng
ubiquinone và cytochrom c, giúp cho trong chuỗi hô hấp, có thế năng oxy hóa khử cao nhất
việc vận chuyển electron giữa ba trong tất cả. Phức hợp protein này loại bỏ các electron
phức hợp protein của chuỗi vận khỏi cytochrom c, nên đây là quá trình oxy hóa vì vậy
chuyển điện tử. Về nguyên tắc, có
nó có tên là “cytochrom c oxidase”. Sau đó, các
thể sử dụng cùng một chất mang cho
cả hai bước không? Giải thích cho
electron này được đưa đến O2 để tạo ra H2O. Tổng
câu trả lời của bạn cộng, bốn electron được vận chuyển bởi cytochrom c
và bốn proton từ môi trường nước được thêm vào mỗi
phân tử O2 trong phản ứng: 4H+ + 4e- + O2 ↔ 2H2O
câu trả lời.
Ngoài các proton kết hợp với O2, bốn proton khác được bơm qua màng trong quá trình vận
chuyển bốn electron từ cytochrom c sang O2. Sự vận chuyển điện tử này thúc đẩy sự thay
đổi dị lập thể trong cấu trúc của protein vận chuyển các proton ra khỏi chất nền ty thể. Một
vị trí liên kết oxy đặc biệt trong tổ hợp protein này chứa cả nhóm heme cộng với một
nguyên tử đồng dùng làm kho lưu trữ cuối cùng cho tất cả các điện tử do NADH chuyển
tới khi bắt đầu chuỗi vận chuyển điện tử (Hình 14-26). Đây là quá trình gần như tất cả oxy
chúng ta thở được tiêu thụ.
Oxy rất hữu ích khi điện tử vẫn “chìm” trong màng vì có ái lực rất cao đối với các điện tử.
Tuy nhiên, một khi O2 nhận được một điện tử, nó sẽ tạo thành gốc superoxide (O2-); gốc
này có khả năng phản ứng nguy hiểm và chắc chắn sẽ chiếm lấy ba electron khác ở bất cứ
nơi nào nó có thể tìm thấy chúng, một xu hướng có thể gây ra thiệt hại nghiêm trọng cho
DNA, protein gần đó, và màng lipid. Vị trí hoạt động của cytochrom c oxidase sẽ giữ chặt
một phân tử oxy cho đến khi nhận được tất cả bốn electron cần thiết để chuyển đổi nó thành
hai phân tử H2O. Sự lưu giữ này giúp ngăn chặn các gốc superoxide tấn công các đại phân
tử gây tổn thương tế bào, một trong những nguyên nhân góp phần vào sự lão hóa của con
người.
Electron được
Tiểu đơn vị II
Khoảng gian cung cấp bởi
màng cytochrom c
e–

Chất nền

Vị trí
liên
kết O2
Hình 14-26 Cytochrom c oxidase là một bộ máy protein
tinh chỉnh. Protein là một dimer được hình thành từ Tiểu đơn vị I
monome với 13 tiểu đơn vị protein khác nhau. (A) Toàn bộ
protein được hiển thị định vị ở màng trong ty thể. Ba màu
thể hiện các tiểu đơn vị hình thành chức năng của phức
hợp được mã hóa bởi bộ gen của ty thể; các tiểu đơn vị
còn lại được mã hóa bởi gen của nhân. (B) Khi các electron
đi qua protein này trên đường đến phân tử O2, chúng (B)

khiến protein bơm các proton qua màng. Như hình, một
heme và nguyên tử đồng (Cu) tạo thành vị trí nơi phân tử
O2 liên kết chặt chẽ bị khử thành H2O

Sự phát triển của cytochrom c oxidase rất quan trọng đối với sự hình thành các tế bào có
thể sử dụng O2 làm chất nhận điện tử, và phức hợp protein này do đó rất cần thiết cho tất
cả các tế bào hiếu khí. Các chất độc như cyanua cực kỳ độc hại vì chúng liên kết chặt chẽ
với phức hợp cytochrom c oxidase, do đó làm dừng quá trình vận chuyển điện tử và sản
xuất ATP.
Lục lạp và quang hợp.
Hầu như tất cả các chất hữu cơ trong các tế bào ngày nay đều được tạo ra bởi quá trình
quang hợp, là một loạt các phản ứng điều khiển, sử dụng ánh sáng tạo ra các phân tử hữu
cơ từ carbon dioxide trong khí quyển (CO2). Thực vật, tảo và vi khuẩn quang hợp như vi
khuẩn lam sử dụng các điện tử từ nước và năng lượng của ánh sáng mặt trời để chuyển
CO2 trong khí quyển thành các hợp chất hữu cơ. Trong quá trình của các phản ứng này,
các phân tử nước bị tách ra, giải phóng một lượng lớn khí O2 vào khí quyển. Lần lượt oxy
này hỗ trợ quá trình phosphoryl hóa oxy hóa không chỉ ở động vật mà còn ở thực vật và vi
khuẩn hiếu khí. Do đó, hoạt động của vi khuẩn quang hợp ở thời kì đầu của sự phát triển
sự sống trên Trái Đất, giúp làm gia tăng hàm lượng O2 trong khí quyển, tạo điều kiện sự
phát triển của vô số dạng sống sử dụng hô hấp hiếu khí để tạo ATP. (Hình 14-27)
Ở thực vật, quá trình quang hợp được thực hiện trong một cơ quan nội bào chuyên biệt, đó
là lục lạp, có chứa các sắc tố thu nhận ánh sáng như chất diệp lục. Đối với hầu hết các loài
thực vật, lá là nơi chủ yếu diễn ra quang hợp. Quang hợp chỉ xảy ra vào ban ngày, tạo ra
ATP và NADPH. Những chất mang hoạt hóa này sau đó có thể được sử dụng, bất cứ lúc
nào trong ngày, để chuyển CO2 thành đường bên trong lục lạp, một quá trình gọi là cố định
carbon.
Với vai trò trung tâm của lục lạp lục trong quang hợp, chúng ta sẽ bắt đầu phần này bằng
cách mô tả cấu trúc của bào quan chuyên môn hóa mức độ cao này. Sau đó chúng tôi sẽ
cung cấp một cái nhìn tổng quan về quang hợp, tiếp theo là chi tiết về cơ chế mà lục lạp
thu nhận năng lượng từ ánh sáng mặt trời để tạo ra một lượng lớn ATP và NADPH. Tiếp
theo chúng tôi mô tả cách thức thực vật sử dụng hai chất mang hoạt hóa này để tổng hợp
đường và các phân tử thực phẩm khác giúp duy trì sự sống của chúng và nhiều sinh vật ăn
thực vật khác.

Hình 14-26 Các vi sinh vật thực hiện quá trình quang hợp tạo ra oxy đã thay đổi bầu khí quyển Trái đất.
(A) Đá stromatolites từ một đầm phá ở Tây Úc. Những cấu trúc này được hình thành trong môi trường
chuyên biệt bởi các khuẩn lạc lớn của vi khuẩn lam tạo ra oxy, tạo thành thảm bẫy cát hoặc khoáng chất
trong các lớp mỏng. (B) Mặt cắt ngang của một stromatolite, cho thấy sự phân tầng của nó. Một cấu trúc
tương tự được nhìn thấy trong stromatolites hóa thạch (không đưa ra). Những bồi đắp cổ xưa này có một
số hơn 3.5 tỷ năm tuổi, chứa dấu vết sót lại của vi khuẩn quang hợp có hoạt động giải phóng O2 đã biến
đổi bầu khí quyển Trái đất.(A: sự cho phép của Cambridge Carbonates Ltd.; B: sự cho phép của Roger
Perkins, Bảo tàng hóa thạch ảo “Virtual Fossil Museaum”)
Lục lạp giống như ty thể nhưng có thêm Thylakoid.
Lục lạp lớn hơn ty thể, nhưng cả hai đều được tổ chức theo các nguyên tắc có cấu trúc
tương tự nhau. Lục lạp có màng ngoài rất dễ thấm và màng trong ít thấm hơn nhiều, trong
đó các protein vận chuyển màng khác nhau được gắn vào. Cùng nhau, hai màng này và
khoảng gian màng hẹp, chúng hình thành lớp vỏ lục lạp. Màng bên trong bao quanh một
không gian rộng gọi là chất nền (stroma), tương tự như chất nền ở ty thể và chứa nhiều
enzyme chuyển hóa (xem Hình 14-5).
Tuy nhiên, có một sự khác biệt quan trọng giữa tổ chức của ty thể và của lục lạp. Màng
trong của lục lạp không chứa bộ máy quang hợp. Thay vào đó, các hệ thống thu nhận ánh
sáng, chuỗi vận chuyển điện tử và ATP synthase tạo ra ATP trong quá trình quang hợp đều
được chứa trong màng thylakoid. Màng thứ ba này được gấp lại để tạo thành một bộ túi
dẹt, được gọi là thylakoids, được sắp xếp chồng lên nhanh tạo thành các hạt grana (Hình
14-28). Không gian bên trong mỗi thylakoid được cho là được kết nối với các thylakoid
khác, tạo ra một phần thứ ba, không gian thylakoid, tách biệt với stroma.

Lục lạp Màng thylakoid

chứa diệp lục

Thylakoid
Grana

Chất nền

Không
bào

Thành tế
bào

Màng Màng 0,5 µm

(A) 10 µm (B) trong (C)
ngoài

Hình 14-26 Lục lạp, như ty thể, bao gồm một bộ các màng và khoang chuyên dụng. (A) Quan sát dưới
kính hiển vi quang học cho thấy lục lạp (màu xanh lá cây) trong tế bào của thực vật có hoa. (B) Hình vẽ
một lục lạp đơn cho thấy ba bộ màng tế bào, bao gồm màng thylakoid, chứa các hệ thống thu nhận ánh
sáng và hệ thống tạo ATP. (C) Hình ảnh với độ phóng đại cao dưới kính hiển vi điện tử cho thấy các
thylakoid được sắp xếp tạo thành các chồng gọi là grana; một chồng thylakoid duy nhất được gọi là
granum. (A: sự cho phép của Preeti Dahiya; C: sự cho phép của K. Plaskitt.)
Quang hợp tạo ra và sau đó tiêu thụ ATP và NADPH.
Về mặt hóa học, quang hợp có thể được tóm tắt trong một phương trình đơn giản như sau:
Năng lượng ánh sáng + CO2 +H2O → Đường + O2 + Nhiệt năng
Phương trình trêm thể hiện chính xác quá trình năng lượng ánh sáng thúc đẩy sự sản xuất
đường từ CO2. Nhưng cách nhìn nhận hời hợt này để lại hai trong số những thành phần
quan trọng nhất trong quang hợp: các chất mang hoạt hóa là ATP và NADPH. Trong giai
đoạn đầu tiên của quang hợp, năng lượng từ ánh sáng mặt trời được sử dụng để tạo ra ATP
và NADPH; trong giai đoạn thứ hai, các chất này được tiêu thụ để thúc đẩy quá trình tổng
hợp đường.
1. Giai đoạn 1 của quá trình quang hợp, phần lớn, Câu hỏi 14-7
tương đương với quá trình phosphoryl hóa oxy hóa Ở lục lạp có một khoang thứ ba, gọi
diễn ra trên màng trong của ty thể. Trong giai đoạn là khoang thylakoid, được, giới hạn
này, một chuỗi vận chuyển điện tử trong màng bởi màng thylakoid. Màng này chứa
thylakoid khai thác năng lượng của sự vận chuyển các hệ thống quang hóa, trung tâm
điện tử để bơm các proton vào không gian thylakoid. phản ứng, chuỗi vận chuyển điện tử
Kết quả là gradient proton sau đó thúc đẩy quá trình và ATP synthase. Ngược lại, ty thể sử
tổng hợp ATP bởi ATP synthase. Điều làm cho quang dụng màng trong của chúng cho vận
chuyển điện tử và tổng hợp ATP. Ở
hợp trở nên khác biệt là các electron cao năng lượng
cả hai bào quan các proton được
được cung cấp cho chuỗi vận chuyển electron quang
bơm ra khỏi khoang lớn nhất (chất
hợp đến từ diệp lục (Chlorophyll) đã hấp thụ năng nền). Khoang thylakoid được tách
lượng từ ánh sáng mặt trời. Do đó, các phản ứng tạo biệt hoàn toàn khỏi phần còn lại của
năng lượng của giai đoạn 1 đôi khi được gọi là các tế bào. Hãy giải thích tại sao sự sắp
phản ứng sáng (pha sáng) (Hình 14-29). Sự khác xếp này lại tạo gradient proton ở lục
biệt lớn giữa quang hợp và quá trình phosphoryl hóa lạp có thể đạt được lớn hơn so với ở
oxy hóa là chất nhận điện tử cuối cùng không phải là ty thể?
O2 mà là NADP+ để tạo ra NADPH.
2. Giai đoạn 2 của quang hợp, ATP và NADPH được tạo ra bởi các phản ứng vận chuyển
điện tử quang hợp của giai đoạn 1 được sử dụng để thúc đẩy quá trình sản xuất đường từ
CO2 (xem Hình 14-29). Những phản ứng cố định carbon này có thể xảy ra khi không có
ánh sáng mặt trời và do đó còn được gọi là phản ứng tối (pha tối). Chúng bắt đầu trong
chất nền lục lạp, nơi chúng tạo ra một loại đường ba carbon gọi là glyceraldehyde 3-
phosphate. Loại đường đơn giản này được đưa ra tế bào chất, nơi nó được sử dụng để sản
xuất sucrose và một số lượng lớn các phân tử hữu cơ khác trong lá của cây.
Mặc dù sự hình thành ATP và NADPH trong giai đoạn 1 và sự chuyển đổi CO2 thành
carbohydrate trong giai đoạn 2, được qua trung gian bởi chúng là hai bộ phản ứng riêng
biệt, nhưng chúng được liên kết bởi các cơ chế phản hồi phức tạp chỉ cho phép một nhà
máy sản xuất đường khi đủ điều kiện thích hợp. Một số enzyme cần thiết cho quá trình cố
 định carbon, ví dụ, bị bất hoạt trong bóng tối và được kích hoạt lại bởi ánh sáng kích thích
vận chuyển điện tử.
Hình 14-29 Cả hai bước
H2O CO2
quang hợp đều phụ thuộc
Tế bào chất
Ánh vào lục lạp. Bước 1, một loạt
sáng Thylakoid các phản ứng chuyển điện tử
Phản ứng chuyển Đường, tạo ra ATP và NADPH; ở quá
Đường,
điện tử quang Cố định amino acid
amino trình này, các electron được
acid và
hợp ở màng Carbon và acid béo
acid béo tách từ nước và oxy được giải
thylakoid khác phóng dưới dạng sản phẩm
phụ. Ở bước 2, CO2 được
Chất nền
đồng hóa (cố định) để tạo
O2 Lục lạp đường và các phân tử hữu cơ
khác. Bước 1 xảy ra ở màng
thylakoid, trong khi đó bước
Giai đoạn 1 Giai đoạn 2
(Phản ứng sáng) 2 bắt đầu ở chất nền lục lạp
(Phản ứng tối)
(như hình) và tiếp tục trong
QUANG HỢP tế bào chất.

Các phân tử chlorophyll hấp thụ năng lượng của ánh sáng mặt trời
Ánh sáng nhìn thấy được là một dạng bức xạ điện từ
bao gồm nhiều bước sóng, từ màu tím (bước sóng
400nm) đến màu đỏ đậm (700nm). Hầu hết
tương đối
absorbance

chlorophyll hấp thụ tốt nhất ánh sáng ở bước sóng

xanh và đỏ (Hình 14.30). Bởi vì các sắc tố này hấp
Độ hấp thụ

thụ ánh sáng xanh kém, thực vật màu xanh đối với
relative

chúng ta khi nhìn: điều đó nghĩa là ánh sáng xanh

400 450 500 550 600 650
w avelength (nm)
Bước sóng (nm)
Hình 14-30 Chlorophyll hấp thụ ánh
sáng của bước sóng xanh và đỏ. Như
thể hiện trong phổ hấp thụ này,
chlorophyll hấp thụ tốt nhất ở ánh sáng
xung quanh các bước sóng 430nm (màu
xanh) và 660nm (màu đỏ). Ánh sáng
xanh, ngược lại, được hấp thụ kém. Các
chất diệp lục khác có thể hấp thụ ánh
sáng có bước sóng hơi khác nhau.
700 được phản chiếu trở lại mắt chúng ta.
Khả năng chlorophyll khai thác năng lượng có từ
ánh sáng mặt trời bắt nguồn từ cấu trúc độc đáo của
nó. Các electron trong phân tử chlorophyll được
phân phối trong một đám mây phi tập trung (“không
định xứ”-thuật ngữ trong hóa học) xung quanh vòng
porphyrin hấp thụ phân tử ánh sáng (Hình 14 -31).
Khi ánh sáng có bước sóng thích hợp chiếu vào một
phân tử chlorophyll, nó sẽ kích thích các electron
trong mạng lưới khuếch tán này, gây nhiễu loạn cách
thức phân phối electron. Trạng thái cao năng lượng
bị nhiễu loạn này không ổn định, và một phân tử
chlorophyll bị kích thích sẽ tìm cách loại bỏ năng
lượng dư thừa này để nó có thể trở lại trạng thái ổn
định hơn, không bị kích thích.

Vùng đuôi
kị nước
Hình 14-31 Cấu trúc chlorophyll
cho phép nó hấp thụ năng
lượng từ ánh sáng. Mỗi phân tử
chlorophyll chứa một vòng
porphyrin với một nguyên tử
magiê (màu hồng) ở trung tâm
của nó. Vòng porphyrin này có
cấu trúc tương tự như vòng liên
kết sắt trong heme (xem Hình
14-25). Ánh sáng được hấp thụ
bởi các điện tử trong mạng liên
kết hiển thị màu xanh lam, trong
khi đuôi dài, kỵ nước (màu xám)
giúp giữ chlorophyll trong màng
thylakoid.
Một phân tử chlorophyll, tự nó trong dung dịch, chỉ đơn
giản là sẽ giải phóng năng lượng hấp thụ của nó dưới dạng
ánh sáng hoặc nhiệt nên hoàn toàn không có gì hữu ích. Tuy
nhiên, các phân tử chlorophyll trong lục lạp có thể chuyển
năng lượng ánh sáng thành một dạng năng lượng hữu ích
cho tế bào vì chúng được liên kết với một tập hợp protein
tham gia quang hợp đặc biệt ở trong màng thylakoid, như
chúng ta thấy ở phần tiếp theo.
Các phân tử chlorophyll kích thích năng lượng
vào một trung tâm phản ứng.
Trong màng thylakoid của thực vật và màng nguyên tương
của vi khuẩn quang hợp, các phân tử chlorophyll được giữ
trong các phức hợp đa protein lớn gọi là hệ thống quang
hóa. Mỗi hệ thống quang hóa bao gồm một tập hợp các
phức hợp ăng ten, thu năng lượng ánh sáng và một trung
tâm phản ứng, chuyển đổi năng lượng ánh sáng đó thành
năng lượng hóa học.
Trong mỗi tổ hợp ăng ten, hàng trăm phân tử chlorophyll
được sắp xếp sao cho năng lượng ánh sáng được bắt giữ bởi
một phân tử chlorophyll có thể được chuyển sang một phân
tử chất diệp lục lân cận trong mạng lưới. Theo cách này,
năng lượng nhảy ngẫu nhiên từ một phân tử chlorophyll
sang phân tử tiếp theo hoặc trong cùng một ăng ten hoặc
trong một ăng ten khác liền kề. Tại một số điểm, năng lượng
này sẽ gặp một dimer chlorophyll được gọi là cặp đặc biệt
(special pair), cặp này có các electron của nó ở mức năng
lượng thấp hơn các phân tử chlorophyll khác. Do đó, khi
năng lượng được nhận bởi cặp đặc biệt này, nó sẽ bị mắc
kẹt ở đó.
Cặp chlorophyll đặc biệt không nằm trong tổ hợp ăng ten.
Thay vào đó, nó là một phần của trung tâm phản ứng. Một
phức hợp protein và sắc tố xuyên màng được cho là đã phát
triển đầu tiên cách đây hơn 3 tỷ năm trong quá trình quang
hợp nguyên thủy vi khuẩn. Trong trung tâm phản ứng, cặp
đặc biệt được đặt trực tiếp bên cạnh một tập hợp các hạt
mang điện tử sẵn sàng nhận một electron cao năng lượng từ
cặp chlorophyll đặc biệt bị kích thích (Hình 14-32).
Sự vận chuyển điện tử này nằm ở trung tâm của quang hợp, bởi vì nó chuyển đổi năng
lượng ánh sáng đi vào cặp đặc biệt thành năng lượng hóa học dưới dạng một electron có
thể chuyển đổi. Ngay khi điện tử cao năng lượng được nhường đo, cặp chlorophyll đặc biệt
tích điện dương và chất nhận electron trở nên tích điện âm. Sự chuyển động nhanh chóng
của electron này dọc theo một tập hợp các hạt mang electron trong trung tâm phản ứng sau
đó tạo ra sự phân tách điện tích gây nên dòng chuyển động của các electron từ trung tâm
phản ứng sang chuỗi vận chuyển điện tử (Hình 14-33).
Hình 14-32 Một hệ thống quang hóa bao gồm
một trung tâm phản ứng bao quanh bởi các
Ánh Phức hợp ăng
Trung tâm
phức hợp ăng ten chứa chlorophyll. Khi năng
ten thu nhận Cặp lượng ánh sáng đã bị bắt bởi một phân tử
sáng phản ứng Màng
ánh sáng chlorophyll
đặc biệt thylakoid chlorophyll trong một phức hợp ăng ten, nó sẽ
truyền ngẫu nhiên từ phân tử chlorophyll này
sang phân tử khác (các vạch đỏ), cho đến khi bị
giữ lại bởi một dimer chlorophyll gọi là cặp đặc
biệt, nằm trong trung tâm phản ứng. Cặp
chlorophyll đặc biệt giữ các electron của nó ở
năng lượng được truyền
từ phân tử chlorophyll
năng lượng thấp hơn các chlorophyll ăng ten,
này sang phân tử khác do đó năng lượng được truyền từ ăng ten bị giữ
lại ở đó. Lưu ý rằng trong phức hợp anten chỉ có
Hệ thống quang hóa năng lượng di chuyển từ một phân tử diệp lục
này sang một phân tử khác, không phải là các
điện tử.

Một cặp hệ thống quang hóa hợp tác để tạo cả ATP và NADPH.
Quang hợp suy cho cùng là một quá trình sinh tổng hợp và xây dựng các phân tử hữu cơ
từ CO2, một tế bào thực vật đòi hỏi một nguồn năng lượng khổng lồ, dưới dạng ATP, và
một lượng lớn năng lượng dạng khử, dưới dạng chất mang hoạt hóa là NADPH (xem Hình
3-34). Để tạo cả ATP và NADPH, các tế bào thực vật và các sinh vật quang hợp sống tự
do như vi khuẩn lam sử dụng một cặp hệ thống quang hóa có cấu trúc tương tự nhau, nhưng
hoạt động lại khác nhau với các electron cao năng lượng, đó là do trung tâm phản ứng.
Khi hệ thống quang hóa đầu tiên (nhưng nghịch lý ở chỗ lại được gọi là hệ thống quang
hóa II, vì lý do lịch sử) hấp thụ năng lượng ánh sáng, trung tâm phản ứng của nó chuyển
các electron sang một chất mang điện tử di động gọi là plastoquinone, một phần của chuỗi
vận chuyển điện tử quang hợp. Chất mang này sẽ chuyển các electron cao năng lượng sang
bơm proton, giống như các bơm proton ở màng trong ty thể, sử dụng sự chuyển động của
các điện tử tạo ra một gradient proton điện hóa. Gradient proton điện hóa sau đó thúc đẩy
quá trình sản xuất ATP bởi một ATP synthase nằm trong màng thylakoid (Hình 14-34).
Đồng thời, một hệ thống quang hóa thứ hai gần đó được gọi là hệ thống quang hóa I đã thu
nhận năng lượng từ ánh sáng mặt trời. Trung tâm phản ứng của hệ thống quang hóa này
chuyển các electron cao năng lượng của nó sang một chất mang điện tử di động khác, đưa
 chúng đến một loại enzyme sử dụng Hình 14-33 Trong một trung tâm phản ứng, electron
chúng để khử NADP+ thành NADPH cao năng lượng được chuyển từ cặp đặc biệt sang
chất mang trở thành một phần của chuỗi vận chuyển
(Hình 14-35). Sự kết hợp hoạt động của
điện tử. Các chất mang trung gian được gắn trong
hai hệ thống quang hóa tạo ra cả ATP (hệ trung tâm phản ứng tạo đường dẫn từ cặp đặc biệt đến
thống quang hóa II) và NADPH (hệ thống chất mang (màu cam). Như hình, việc chuyển electron
quang hóa I) sẽ được sử dụng trong giai cao năng lượng từ cặp đặc biệt để lại một điện tích
đoạn 2 của quá trình quang hợp (xem dương tạo ra trạng thái phân tách điện tích, từ đó
chuyển đổi năng lượng ánh sáng thành năng lượng hóa
Hình 14-29).
học. Khi electron trong cặp đặc biệt đã được thay thế,
chất mang sẽ khuếch tán ra khỏi trung tâm phản ứng,
chuyển electron cao năng lượng vào chuỗi vận chuyển.
Sự vận chuyển Chất mang vận
Cặp đặc biệt điện tử cao chuyển
năng lượng tạo Cặp đặc biệt electron đến
nên sự phân thay thế chuỗi truyền
tách điện tích electron điện tử

Màng
thylakoid
Trung tâm Chất mang
phản ứng electron
Khoảng gian
màng thylakoid H+
Hình 14-34 Hệ quang hóa II cung cấp H+
H+ H+
điện tử cho bơm proton, dẫn đến tổng H+
Ánh H+ H+
hợp ATP bởi ATP synthase. Khi năng H+
sáng H+
H+
lượng ánh sáng được thu nhận bởi hệ e–
quang hóa II, electron cao năng lượng Màng
được chuyển đến chất mang điện tử di thylakoid e– Q
động gọi là plastoquinone (Q), gần
giống ubiquinone ở ty thể. Chất mang Phức hợp ăng ten plastoquinone
H+ H+
này chuyển các electron của nó sang Chất nền
một bơm proton được gọi là phức hợp
cytochrom b6-f, tương tự phức hợp Hệ quang hóa II Phức hợp
cytochrom c reductase của ty thể, là cytochrom b6-f

nơi duy nhất của bơm proton hoạt

động trong chuỗi truyền điện tử lục
lạp. Một ATP synthase được gắn trong
màng sử dụng năng lượng của gradient
điện hóa proton để tạo ra ATP.
Câu hỏi 14-9
Cả NADPH và NADH là các chất mang
điện tử mạnh. Tại sao các tế bào
thực vật có thể tiến hóa dựa vào
NADPH, chứ không phải NADH, để
cung cấp lực khử cho quang hợp?
Oxy được tạo ra bởi một phức hợp tách
nước liên kết với hệ thống quang hóa II
Sơ đồ mà cho đến nay chúng ta đã mô tả cho quang
hợp đã bỏ qua một câu hỏi hóc búa hóa học lớn. Khi
một chất mang điện tử di động loại bỏ một electron
khỏi trung tâm phản ứng (cho dù trong hệ thống quang
hóa I hay hệ thống quang hóa II), nó để lại chlorophyll
tích điện dương ở cặp đặc biệt (xem Hình 14-33). Để
thiết lập lại hệ thống và cho phép quang hợp tiến hành,
điện tử bị thiếu này phải được thay thế.
 Ánh
sáng Ferredoxin
Hình 14-35 Hệ thống quang hóa I chuyển các electron Khoảng
thylakoid
cao năng lượng sang enzyme tạo ra NADPH. Khi năng
lượng ánh sáng bị bắt bởi hệ thống quang hóa I, một Màng
electron cao năng lượng được truyền đến một chất thylakoid

mang điện tử di động gọi là ferredoxin (Fd), một protein

Chất nền
nhỏ có chứa một trung tâm lưu huỳnh sắt. Ferredoxin
Hệ quang hóa I
mang điện tử của nó đến ferredoxin-NADP reductase
(FNR), protein cuối cùng trong chuỗi vận chuyển điện tử H+ +
và tạo ra NADPH

Đối với hệ thống quang hóa II, electron bị thiếu được thay thế bằng phức hợp protein đặc
biệt giúp loại bỏ các electron khỏi nước. Enzyme tách nước này chứa một nhóm các nguyên
tử mangan (Mn) giữ hai phân tử nước từ đó các electron được tách ra cùng một lúc. Một
lần tách bốn electron đã bị loại bỏ khỏi hai phân tử nước và được sử dụng để thay thế các
electron bị mất bởi bốn cặp chlorophyll kích thích đặc biệt, và có sự giải phóng O2 (Hình
14-36).
Hoạt động này, đảm bảo rằng không có phân tử nước bị oxy hóa một phần nào được giải
phóng dưới dạng gốc dễ phản ứng nguy hiểm. Biện pháp tương tự được sử dụng bởi
cytochrom c oxidase để xúc tác phản ứng ngược lại việc chuyển electron sang O2 để tạo ra
nước trong quá trình phosphoryl hóa oxy hóa (xem 14-26)
Thật đáng kinh ngạc khi nhận ra rằng về cơ bản, tất cả oxy trong bầu khí quyển Trái Đất
đã được tạo ra bởi enzyme tách nước của hệ thống quang hóa II.
Hình 14-36 Trung tâm phản ứng
của hệ quang hóa II bao gồm một
enzyme xúc tác cho quá trình tách
Cụm Mn electron từ nước. (A) Sơ đồ cho
Ánh trong enzyme thấy dòng điện tử thông qua trung
H+
sáng tách nước
Khoảng tâm phản ứng của hệ thống quang
thylakoid Cặp đặc e– hóa II. Khi năng lượng ánh sáng kích
biệt
thích cặp đặc biệt, một electron
e– e–
được truyền tới chất mang điện tử
Q di động plastoquinone (Q). Một
electron sau đó được đưa trở lại
Chất nền
Hệ quang hóa II cặp đặc biệt bằng enzyme tách
e–
nước tách electron từ nước. Cụm
(A)
Mn (Mangan) tham gia vào quá
plastoquinone trình chiết electron được vẽ dưới
e–
dạng một đốm đỏ. Khi bốn điện tử
đã được rút từ hai phân tử nước,
(B)
O2 được giải phóng vào bầu khí
quyển. (B) Cấu trúc và vị trí của một
số chất mang điện tử liên quan
Cặp đặc biệt trong hệ thống quang hóa I nhận các điện tử của nó từ hệ
thống quang hóa II.
Chúng ta đã thấy rằng hệ quang hóa II nhận electron từ nước. Nhưng nơi nào mà hệ thống
quang hóa I nhận được các điện tử cần thiết để lập lại điện tích cặp đặc biệt của nó? Nó lấy
chúng từ hệ thống quang hóa II: cặp đặc biệt chlorophyll trong hệ thống quang hóa I đóng
vai trò là chất nhận điện tử cuối cùng cho chuỗi truyền điện tử mang electron từ hệ thống
quang hóa II. Dòng tổng thể của các electron được thể hiện trong Hình 14 -37. Các điện
tử được loại bỏ khỏi nước bởi hệ thống quang hóa II được, thông qua một bơm proton
(phức hợp cytochrom b6-f), với chất mang điện tử di động gọi là plastocyanin. Plastocyanin
sau đó mang các electron này đến hệ thống quang hóa I, để thay thế các electron bị mất bởi
chlorophyll kích thích của cặp đặc biệt. Khi ánh sáng được hấp thụ lại bởi hệ thống quang
hóa này, electron này sẽ được tăng lên mức năng lượng rất cao cần thiết để khử NADP+
thành NADPH. Hình 14-37 Sự chuyển động của điện tử dọc
theo chuỗi truyền điện tử quang hợp tạo
Có hai hệ thống quang hóa này hoạt động song
năng lượng cần cho việc sản xuất cả ATP và
song phối hợp với nhau. Sự tăng thêm năng NADPH. Điện tử được cung cấp cho hệ thống
lượng bởi ánh sáng được thu nhận bằng cả hai hệ quang hóa II bởi một phức hợp tách nước, tách
thống quang hóa cho phép electron được tách bốn electron từ hai phân tử nước, tạo O2 dưới
khỏi nước - thường giữ các electron của nó rất dạng sản phẩm phụ. Sau khi năng lượng của
chúng được tăng lên nhờ sự hấp thụ ánh sáng,
chặt (thế năng oxy hóa khử = + 820mV), tới
các electron này cung cấp năng lượng cho việc
NADPH - thường giữ các electron của nó lỏng bơm proton bằng phức hợp cytochrom b6-f.
lẻo (thế năng oxy hóa khử = -320mV). Thậm chí Các electron đi qua phức hợp này sau đó được
còn đủ năng lượng để cho phép chuỗi vận chuyển nhường cho một loại protein có chứa đồng,
điện tử liên kết hai hệ thống quang hóa với nhau chất mang điện tử di động plastocyanin (pC),
đưa chúng đến trung tâm phản ứng của hệ
bơm H+ qua màng thylakoid nên ATP synthase
thống quang hóa I. Sau khi tăng thêm năng
có thể khai thác năng lượng ánh sáng để tổng hợp lượng từ ánh sáng, các electron này được sử
ATP (Hình 14-38) dụng để tạo NADPH.

Khoảng
thylakoid
H+ H+
H+
H+ H +
Ánh H+
4H+ plastocyanin H+
Ánh H+ sáng
H+ H+
sáng H+
H+
pC
pC
Màng
thylakoid e– Q
Fd FNR
Phức hợp
Plastoquinone Ferredoxin
ăng ten
H+ H+
Chất nền
Hệ quang hóa II Phức hợp Hệ quang hóa I H+ +
cytochrome b6-f
Hình 14-38 Sự hoạt động kết
hợp của hệ thống quang hóa I
và II giúp tăng các electron lên
mức năng lượng cần thiết để
tạo ra cả ATP và NADPH. Thế
ferredoxin
năng oxy hóa khử cho mỗi phân Ánh sáng
Gradient proton gây phân
tử được biểu thị bằng vị trí của
được sử dụng tách điện

Thế năng oxy hóa khử (mV)

nó trên trục tung. Sự vận chuyển để tổng hợp ATP tích trung
điện tử được hiển thị với các mũi tâm phản
tên màu xanh không lượn sóng. Q ứng
Ánh sáng H+ + H+
Hệ thống quang hóa II chuyển gây phân Phức hợp e–
các electron từ cặp đặc biệt kích tách điện cytochrome b6-f
thích của nó sang chuỗi vận tích trung
tâm phản pC
chuyển điện tử trong màng ứng plastoquinone
thylakoid rồi đến hệ thống plastocyanin
quang hóa I (xem Hình 14-37). 4H+
Dòng electron ròng qua hai hệ
thống quang hóa được liên kết
nối tiếp từ nước đến NADP+ để
tạo NADPH. Enzyme phân ly nước

Hướng của dòng điện tử

Quá trình cố định carbon sử dụng ATP và NADPH để chuyển đổi CO2
thành đường.
Các phản ứng trong pha sáng của quang hợp tạo ra ATP và NADPH trong chất nền lục lạp,
như chúng ta vừa thấy. Nhưng màng trong của lục lạp không thấm được cả hai hợp chất
này, điều đó có nghĩa là chúng không thể được xuất trực tiếp vào tế bào chất. Để cung cấp
năng lượng và lực khử cho phần còn lại của tế bào, ATP và NADPH thay vào đó được sử
dụng trong chất nền lục lạp để sản xuất đường, có thể được vận chuyển ra tế bào chất bởi
các protein vận chuyển cụ thể trên màng trong lục lạp. Sự sản xuất đường từ CO2 và nước,
xảy ra trong các phản ứng ở pha tối (giai đoạn 2) của quá trình quang hợp, được gọi là cố
định carbon.
Phản ứng trung tâm của quá trình cố định carbon, CO2 từ khí quyển được gắn với một dẫn
xuất đường 5 carbon là ribulose 1,5-bisphosphate, để thu được hai phân tử của hợp chất 3-
carbon là 3-phosphoglycerate. Phản ứng cố định carbon này, được phát hiện vào năm 1948,
được xúc tác trong chất nền lục lạp bởi một enzyme lớn gọi là ribulose bisphosphate
carboxylase hoặc Rubisco (Hình 14-39). Rubisco hoạt động chậm hơn nhiều so với hầu
hết các enzyme khác: nó xử lý khoảng ba phân tử cơ chất mỗi giây so với 1000 phân tử
mỗi giây cho một enzyme thông thường. Để bù đắp cho hoạt động chậm chạp này, các nhà
máy duy trì lượng dư Rubisco để đảm bảo sản xuất đường hiệu quả. Enzyme thường chiếm
hơn 50% tổng số protein lục lạp và được xem như là protein phong phú nhất trên Trái Đất.
 Hình 14-39 Cố định carbon liên
quan sự hình thành liên kết
cộng hóa trị gắn carbon
dioxide vào ribulose 1,5
bisphosphate. Phản ứng được
xúc tác trong chất nền lục lạp
nhờ enzyme ribulose
bisphosphate carboxylase dồi
dào, hay Rubisco. Như được
Carbon dioxide Ribulose 1,5-bisphosphate Chất trung gian hiển thị, sản phẩm là hai phân
tử 3-phosphoglycerate.

Mặc dù việc sản xuất carbohydrate từ CO2 và H2O

không thuận lợi, nhưng sự cố định CO2 được xúc tác Câu hỏi 14-10
bởi Rubisco là một phản ứng thuận lợi về năng lượng.
A. Làm thế nào để các tế bào trong
Nó thuận lợi về mặt năng lượng vì có một nguồn cung rễ cây tồn tại, khi mà chúng không
cấp liên tục của ribulose 1,5-bisphosphate giàu năng chứa lục lạp và không tiếp xúc với
lượng được đưa vào quá trình. Vì hợp chất này được ánh sáng?
tiêu thụ, chuyển hóa bởi sự bổ sung CO2 (xem Hình
B. Không giống như ty thể, lục lạp
14-39). Năng lượng và lực khử cần thiết để tái tạo không có chất vận chuyển cho phép
ribulose 1,5-bisphosphate đến từ ATP và NADPH chúng xuất ATP sang tế bào chất.
được tạo ra bởi các phản ứng trong pha sáng quang Làm thế nào, các tế bào thực vật có
hợp. được ATP mà chúng cần để thực
hiện phản ứng đòi hỏi các năng
Một loạt các phản ứng phức tạp trong đó CO2 kết hợp lượng trong trao đổi chất ở tế bào
với ribulose 1,5 bisphosphate để tạo ra một loại đường chất?
đơn giản, một phần trong số đó được sử dụng để tái
tạo ribulose 1,5-bisphosphate, tạo thành một chu trình,
được gọi là chu trình cố định carbon hoặc chu trình
Calvin (Hình 14-40).
Cứ 3 phân tử CO2 đi vào chu trình, 1 phân tử glyceraldehyd 3-phosphate được tạo ra và 9
phân tử ATP và 6 phân tử NADPH được tiêu thụ. Glyceraldehyd 3-phosphate, đường ba
carbon là sản phẩm cuối cùng của chu trình, sau đó nó được cung cấp cho sự tổng hợp của
nhiều loại đường khác và các phân tử hữu cơ khác.
 Hình 14-40 Chu trình cố định
carbon tiêu thụ ATP và NADPH để
hình thành glyceraldehyd 3-
phosphate từ CO2 và H2O. Trong
ribulose 1,5- giai đoạn đầu tiên của chu trình,
bisphosphate CO2 kết hợp với ribulose 1,5-
bisphosphate (như trong Hình 14
.39). Trong giai đoạn thứ hai, ATP
và NADPH được tiêu thụ để sản
xuất glyceraldehyd 3-phosphate.
Trong giai đoạn cuối, một số
glyceraldehyd 3-phosphate được
sử dụng để tái tạo ribulose 1,5-
bisphosphate; phần còn lại được
vận chuyển ra khỏi chất nền lục lạp
vào tế bào chất. Số lượng nguyên
tử carbon trong mỗi loại phân tử
được biểu diễn bằng màu vàng. Có
nhiều chất trung gian giữa
glyceraldehyd 3-phosphate và
ribulose 5-phosphate, nhưng
chúng đã bị bỏ qua ở đây cho rõ
ràng. Sự xâm nhập của nước vào
chu kỳ cũng không được hiển thị.

Đường được tạo ra bởi quá trình cố định carbon có thể được lưu trữ dưới
dạng tinh bột hoặc được sử dụng để sản xuất ATP.
Các glyceraldehyd 3-phosphate được tạo ra bởi quá trình cố định carbon trong chất nền lục
lạp có thể được sử dụng theo một số cách, tùy thuộc vào nhu cầu của thực vật. Trong thời
gian hoạt động quang hợp tạo sản phẩm dư thừa, phần lớn được giữ lại trong lớp nền lục
lạp và chuyển thành tinh bột. Giống như glycogen trong tế bào động vật, tinh bột là một
polymer lớn của glucose đóng vai trò dự trữ carbohydrate, và nó được lưu trữ dưới dạng
các hạt lớn trong chất nền lục lạp. Tinh bột tạo thành một phần quan trọng trong chế độ ăn
của tất cả các động vật ăn thực vật. Các phân tử glyceraldehyd 3-phosphate khác được
chuyển thành chất béo trong chất nền. Nó tích tụ dưới dạng các giọt chất béo, và cũng như
tính bột, nó phục vụ như một chất dự trữ năng lượng (Hình 14-41).
Vào ban đêm, tinh bột và chất béo đượcdự trữ này có thể được phân hủy thành đường và
acid béo, được vận chuyển ra tế bào chất để giúp hỗ trợ nhu cầu trao đổi chất của cây. Một
số đường xuất khẩu đi vào con đường đường phân (xem Hình 13-5), nơi nó được chuyển
đổi thành pyruvate. Pyruvate đó, cùng với các acid béo, có thể xâm nhập vào ty thể của tế
bào thực vật và được đưa vào chu trình acid citric, cuối cùng dẫn đến việc sản xuất ATP
bằng quá trình phosphoryl oxy hóa (Hình 14-42). Thực vật sử dụng ATP này giống như
cách các tế bào động vật và các sinh vật không quang hợp khác thực hiện để tạo ra nhiều
phản ứng trao đổi chất.
Các glyceraldehyd 3-phosphate vận chuyển từ lục lạp vào tế bào chất cũng có thể được
chuyển đổi thành nhiều chất chuyển hóa khác, bao gồm cả disaccharide sucrose. Sucrose
là hình thức chính trong đó đường được vận chuyển giữa các tế bào của cây: giống như
glucose được vận chuyển trong máu của động vật, vì vậy sucrose được xuất khẩu từ lá
thông qua bó mạch để cung cấp carbohydrate cho phần còn lại của cây.

hạt tinh bột

Hình 14-41 Lục lạp thường màng lục lạp không bào
chứa một lượng lớn
carbohydrate và acid béo. thylakoid
Một phần mỏng của lục lạp giọt mỡ
cho thấy vỏ lục lạp, hạt tinh
bột, và các giọt chất béo
tích tụ trong chất nền là kết
quả của quá trình sinh tổng grana
hợp xảy ra ở đó. thành tế bào

Hình 14-42 Ở thực vật, lục lạp

1 µm
và ty thể hợp tác để cung cấp tế
bào các chất chuyển hóa và Ánh
ATP. Màng trong của lục lạp sáng
không thấm ATP và NADPH tạo
Tế bào chất
ra trong các pha sáng của quang
hợp. Nên, chúng được đưa vào
chu trình cố định carbon, để tạo Chu trình Chu trình
Phosphoryl
Đường Đường hóa oxy hóa
đường. Các loại đường và chất cố định acid citric
carbon
chuyển hóa lưu trữ dạng tinh
Tinh bột
bột, chất béo hoặc đưa ra phần
còn lại của tế bào thực vật. Ở đó, Lục lạp Ty thể

chúng đi vào con đường tạo

năng lượng qua quá trình tổng
hợp ATP trong ty thể. Màng ty
thể thấm được ATP. Lưu ý rằng Sự tiến hóa của hệ thống tạo năng lượng.
O2 được giải phóng vào khí
quyển bằng quá trình quang hợp Khả năng giải trình tự bộ gen của vi sinh vật rất khó, nếu
trong lục lạp được sử dụng để không nói là không thể, sự phát triển của vi sinh vật trong
phosphoryl hóa oxy hóa trong ty
thể, CO2 được giải phóng bởi
môi trường nuôi dưỡng đã giúp xác định được rất nhiều dạng
chu trình krebs trong ty thể sống bí ẩn trước đây. Một số trong số các sinh vật đơn bào
được sử dụng để cố định carbon này phát triển mạnh trong môi trường sống khắc nghiệt nhất
trong lục lạp. trên hành tinh,bao gồm các suối nước nóng lưu huỳnh và các
lỗ thông thủy nhiệt nằm sâu dưới đáy đại dương. Trong Vi khuẩn Bơm H+ sử
dụng ATP
những vi khuẩn đáng chú ý này, chúng tôi đang tìm ra manh nguyên thủy

mối cho lịch sử sự sống. Giống như dấu vân tay để lại tại hiện
trường vụ án, các protein và các phân tử nhỏ mà các sinh vật
này tạo ra cung cấp bằng chứng cho phép chúng ta theo dõi ATP
lịch sử của các sự kiện sinh học cổ đại, bao gồm cả những hệ
thống đã tạo ra các hệ thống tạo ATP có trong ty thể và lục GIAI ĐOẠN 1

lạp của các tế bào nhân chuẩn hiện đại. Do đó, chúng ta sẽ Protein vận chuyển
kết thúc chương này với một đánh giá ngắn gọn về những gì điện tử bơm H+

đã được học về nguồn gốc của các hệ thống thu nhận năng
lượng ngày nay, đã đóng một vai trò quan trọng như vậy trong
việc thúc đẩy sự tiến hóa của sự sống trên Trái Đất.

Các giai đoạn của sự tiến hóa phosphoryl hóa oxy. GIAI ĐOẠN 2
Bơm H+ sử
Như chúng tôi đã đề cập trước đó, các tế bào sống đầu tiên dụng ATP hoạt
trên Trái Đất, cả sinh vật nhân sơ và sinh vật nhân chuẩn động ngược lại
tạo ATP
nguyên thủy có thể đã tiêu thụ các phân tử hữu cơ được sản
xuất bởi quá trình địa hóa học và tạo ra ATP bằng cách lên H+

men. Bởi vì oxy chưa có trong khí quyển, các phản ứng lên
men yếm khí như vậy sẽ thải các acid hữu cơ như acid lactic
hoặc acid formic, vào môi trường (xem Hình 13-6A).
GIAI ĐOẠN 3
Có lẽ các acid như vậy làm giảm độ pH của môi trường, tạo
Hình 14-43 Phosphoryl hóa
điều kiện sự sống sót của các tế bào tiến hóa protein xuyên
oxy hóa có thể đã phát triển
màng có thể bơm H+ ra khỏi tế bào, do đó ngăn không cho tế qua các giai đoạn. Giai đoạn
bào trở nên quá acid (giai đoạn 1 trong hình 14-43). Một một có thể liên quan đến sự
trong những bơm này có thể đã sử dụng năng lượng có sẵn từ phát triển của ATPase bơm các
quá trình thủy phân ATP để đẩy ra H+ khỏi tế bào; một bơm proton ra khỏi tế bào bằng
năng lượng từ quá trình thủy
proton như vậy có thể là tổ tiên của các ATP synthase ngày
phân ATP. Giai đoạn 2 có thể có
nay. sự tham gia của quá trình tiến
hóa của một bơm proton khác,
Khi nguồn cung cấp của các chất dinh dưỡng được sản xuất
được điều khiển bởi một chuỗi
địa hóa bắt đầu giảm dần, sinh vật có thể tìm cách bơm H+ vận chuyển điện tử. Giai đoạn 3
mà không tiêu thụ ATP, đó sẽ là một lợi thế: có thể tiết kiệm sau đó đã liên kết hai hệ thống
một lượng nhỏ ATP mà có được từ quá trình lên men của này với nhau để tạo ra một ATP
thực phẩm ngày càng khan hiếm để làm nhiên cho hoạt động synthase sử dụng các proton
được bơm bởi chuỗi vận
quan trọng khác. Sự cần thiết của việc tiết kiệm năng lượng
chuyển điện tử để tổng hợp
có thể đã dẫn đến sự phát triển của các protein vận chuyển ATP. Một vi khuẩn có hệ thống
điện tử cho phép các tế bào sử dụng sự chuyển động của các cuối cùng này sẽ có ưu thế chọn
điện tử giữa các phân tử có thế năng oxy hóa khử khác nhau lọc so với vi khuẩn không có hệ
để bơm H+ qua màng (giai đoạn 2 trong hình 14-43). Một số thống nào hoặc chỉ có một.
trong những tế bào này có thể đã sử dụng các acid hữu cơ không thể phân hủy mà các tế
bào lân cận đã bài tiết dưới dạng chất thải để cung cấp các điện tử cần thiết cần cho sự vận
chuyển điện tử. Một số vi khuẩn ngày nay phát triển trên acid formic, ví dụ, sử dụng một
lượng nhỏ năng lượng oxi hóa khử thu được từ việc chuyển electron từ acid formic sang
fumarate để bơm H+.
Cuối cùng, một số vi khuẩn sẽ phát triển bơm điện tử - H+, hệ thống vận chuyển hiệu quả
đến mức chúng có thể thu được nhiều năng lượng oxy hóa khử hơn mức cần thiết để duy
trì độ pH bên trong. Những tế bào như vậy có thể đã tạo ra các gradient điện hóa proton
lớn mà sau đó có thể sử dụng để sản xuất ATP. Các proton có thể quay trở lại vào tế bào
thông qua bơm H+ tạo ATP, về cơ bản là sự di chuyển theo chiều ngược lại để tổng hợp
ATP (giai đoạn 3 trong Hình 14-43). Bởi vì những tế bào như vậy sẽ đòi hỏi ít hơn rất
nhiều nguồn cung cấp chất dinh dưỡng cho quá trình lên men đang giảm, chúng sẽ tăng
sinh mạnh hơn so với cá tế bào khác.

Vi khuẩn quang hợp thậm chí cần ít nhu cầu hơn về môi trường của
chúng.
Tuy nhiên, bước đột phá tiến hóa lớn trong chuyển hóa năng lượng gần như chắc chắn là
sự hình thành của các phản ứng quang hóa có thể sử dụng năng lượng của ánh sáng mặt
trời để tạo ra các phân tử như NADH. Người ta cho rằng sự phát triển này xảy ra sớm trong
quá trình tiến hóa của hơn 3 tỷ năm trước, trong tổ tiên của vi khuẩn lưu huỳnh màu xanh
lục. Vi khuẩn lưu huỳnh màu lục ngày nay sử dụng năng lượng ánh sáng để chuyển hóa
các nguyên tử hydro (như một electron cộng với một proton) từ H2S đến NADPH, từ đó
tạo ra lực khử cần thiết cho quá trình cố định carbon. (Hình 14-4)
Bước tiếp theo được cho là có liên quan đến sự tiến hóa của các sinh vật có khả năng sử
dụng nước thay vì H2S làm nguồn điện tử để quang hợp. Điều này đòi hỏi sự tiến hóa của
enzyme phân tách nước và bổ sung hệ thống quang hóa thứ hai, hoạt động cùng với hệ
thống quang hóa thứ nhất, để thu hẹp khoảng cách lớn về thế năng oxy hóa khử giữa H2O
và NADPH (xem Hình 14-38). Kết quả sinh học của bước tiến hóa này là sâu rộng. Lần
đầu tiên, có những sinh vật chỉ đáp ứng nhu cầu hóa học tối thiểu trên môi trường của
chúng. Những tế bào này bao gồm cả vi khuẩn lam đầu tiên (Cyanobacteria) (xem Hình
14-27) phát triển và tiến hóa theo cách khác hẳn đối với các vi khuẩn quang hợp
(Photosynthetic bacteria) xuất hiện trước đó, cần H2S, acid hữu cơ, hoặc các nguồn khác
như một nguồn điện tử. Do đó, một lượng lớn vật liệu hữu cơ có thể lên men, được sản
xuất bởi các tế bào vi khuẩn quang hợp này và tổ tiên của chúng, bắt đầu tích lũy. Hơn thế
nữa, chúng còn thải ra lượng lớn O2 vào khí quyển. (Hình 14-5)
Sự sẵn có của O2 đã tạo ra sự phát triển của vi khuẩn dựa vào chuyển hóa hiếu khí để tạo
ATP của chúng. Như đã giải thích trước đây,những sinh vật này có thể khai thác một lượng
 lớn năng lượng được giải phóng khi chúng phá vỡ carbohydrate và các phân tử hữu cơ khác
đến tận CO2 và H2O.
Hình 14-44 Quang hợp ở vi khuẩn lưu huỳnh
màu lục sử dụng H2S như là chất cho điện tử
chứ thay vì nước. Electron dễ dàng tách từ H2S
hơn từ H2O, vì H2S có thế năng oxy hóa khử cao NADP
reductase
hơn nhiều (so với hình 14-38). Nên chỉ cần một

Thế năng oxy hóa khử (mV)

Ánh sáng
hệ thống quang hóa để tạo NADPH và lưu huỳnh gây phân
nguyên tố được hình thành như sản phẩm phụ tách điện
tích trung
thay vì O2. Hệ thống quang hóa ở vi khuẩn lưu
tâm phản
huỳnh màu lục giống với hệ thống quang hóa I ở ứng
thực vật và vi khuẩn lam, trong đó tất cả đều sử
dụng một loạt các trung tâm lưu huỳnh sắt làm
chất mang điện tử cuối cùng nhường các
electron cao năng lượng cho ferredoxin (Fd).
Một loại vi khuẩn là Chlorobium tepidum, có thể
phát triển mạnh ở nhiệt độ cao và cường độ ánh
sáng thấp trong suối nước nóng. Hướng của dòng điện tử

Mức độ
oxy trong
khí quyển Bắt đầu tích
(%) lũy O2 nhanh
chóng

Thời gian
(hàng tỷ năm
trước đây)
Hình thành Ngày nay
đại dương và Tế bào sống Lần đầu quang hợp phân Động vật có
Nguồn gốc tế bào
lục địa xương sống
đầu tiên li nước giải phóng O2 quang hợp nhân thực
Trái Đất đầu tiên
hình thành Hô hấp hiếu khí
Tế bào quang Động vật và
trở nên phổ biến
hợp đầu tiên thực vật đa bào
đầu tiên
Hình 14-45 Oxy có ở bầu khí quyển Trái Đất hàng tỷ năm trước. Với sự phát triển của quá trình quang
hợp ở sinh vật nhân sơ hơn 3 tỷ năm trước, các sinh vật không còn phụ thuộc vào chất hữu cơ được tạo
hình sẵn. Chúng dần có thể tự tạo phân tử hữu cơ từ CO2. Sự chậm trễ hơn một tỷ năm giữa sự xuất hiện
của vi khuẩn phân ly nước và giải phóng O2 trong quá trình quang hợp và tích tụ nồng độ O2 cao trong bầu
khí quyển được cho là do phản ứng ban đầu của O2 với lượng sắt dồi dào hòa tan trong các đại dương. Chỉ
khi sắt sử dụng hết, một lượng lớn O2 mới bắt đầu tích lũy trong bầu không khí. Để đáp ứng với lượng O2
tăng lên trong khí quyển, các sinh vật hiếu khí, không quang hợp xuất hiện và nồng độ O2 trong khí quyển
cuối cùng đã chững lại.

Phương thức sống của Methanococcus cho thấy cơ chế hóa thẩm là một
quá trình cổ xưa
Các điều kiện ngày nay giống với những tế bào được cho là đã sống 3,5-3,8 tỷ năm trước
có thể là ở những nơi gần lỗ thông thủy nhiệt đại dương sâu. Những lỗ thông hơi này đại
diện cho những nơi có điều kiện khắc nghiệt như lúc lớp vỏ nóng chảy của Trái Đất đang
phá vỡ, để mở rộng chiều rộng của đáy đại dương. Thật vậy, các sinh vật hiện đại dường
như có liên quan chặt chẽ nhất với các tế bào giả định mà từ đó tất cả sự sống tiến hóa thích
nghi với điều kiện sống ở 75°C -95°C, nhiệt độ gần bằng nhiệt độ nước sôi. Khả năng này
phát triển mạnh ở nhiệt độ khắc nghiệt như vậy cho thấy rằng tổ tiên chung là tế bào đã
sinh ra vi khuẩn, vi khuẩn cổ và sinh vật nhân chuẩn, sống trong điều kiện yếm khí.
Một trong những vi khuẩn cổ sống trong môi trường ngày nay là Methanococcus
jannaschii. Ban đầu được phân lập từ một lỗ thông thủy nhiệt sâu hơn một dặm dưới bề
mặt đại dương, sinh vật phát triển trong điều kiện hoàn toàn không có ánh sáng và khí oxy,
sử dụng làm chất dinh dưỡng, các khí vô cơ - khí hydro (H2), CO2 và nitơ (N2) - từ bọt khí
bốc lên từ lỗ hơi (Hình 14-46). Phương thức tồn tại của nó gợi ý về việc các tế bào ban
đầu có thể đã sử dụng sự vận chuyển điện tử để lấy năng lượng và trích xuất các phân tử
carbon từ các vật liệu vô cơ tự do sẵn có trên Trái Đất thuở ban đầu.
Methanococcus dựa vào khí N2 là nguồn nitơ để tạo ra các phân tử hữu cơ như acid amin.
Các sinh vật khử N2 thành amoniac (NH3) bằng cách thêm hydro, một quá trình gọi là cố
định nitơ. Quá trình cố định đạm đòi hỏi một lượng năng lượng lớn, cũng như quá trình cố
định carbon chuyển đổi CO2 và H2O thành đường. Phần lớn năng lượng mà Methanococcus
cần cho cả hai quá trình có nguồn gốc từ việc chuyển electron từ H2 sang CO2,với việc giải
phóng một lượng lớn khí mêtan (CH4) dưới dạng chất thải (tạo ra khí đốt tự nhiên). Một
phần của sự chuyển điện tử này xảy ra trong màng tế bào và dẫn đến việc bơm proton (H+)
qua màng. Kết quả tạo gradient điện hoá proton thúc đẩy tổng hợp ATP qua ATP synthase.
Thực tế là cơ chế hóa thẩm như vậy tồn tại trong một sinh vật như Methanococcus cho thấy
rằng việc lưu trữ năng lượng trong một gradient proton có nguồn gốc từ sự vận chuyển
điện tử là một quá trình cổ xưa. Do đó, cơ chế hóa thẩm có thể thúc đẩy sự tiến hóa của
gần như tất cả các dạng sống trên Trái Đất.
Hình 14-45 Methanococcus đại diện
cho dạng sống tồn tại sớm trong lịch
sử Trái đất. (A) Vi khuẩn cổ này sống
trong các lỗ thủy nhiệt, nơi nhiệt độ
đạt gần nước sôi. (B) Ảnh hiển vi điện
tử quét cho thấy các tế bào đơn lẻ.
Những sinh vật này sử dụng khí H2 từ
các lỗ hơi dưới biển sâu làm nguồn
lực khử để tạo ra năng lượng thông
qua cơ chế hóa thẩm. (A, được sự
cho phép của Chương trình lỗ hơi
phòng thí nghiệm môi trường biển
(A) (B) 1 µm
quốc gia, Thái Bình Dương, B: được
sự cho phép của Chan B. Park.)
KHÁI NIỆM CẦN NẮM VỮNG.
• Ty thể, lục lạp và nhiều prokaryote tạo ra năng lượng bằng cơ chế dựa trên màng gọi là
cơ chế hóa thẩm, trong đó liên quan đến việc sử dụng gradient điện hóa proton để thúc
đẩy quá trình tổng hợp ATP.
• Ty thể sản xuất hầu hết ATP tế bào động vật, sử dụng năng lượng lấy từ quá trình oxy
hóa đường và axit béo.
• Ty thể có màng trong và màng ngoài. Màng bên trong bao quanh chất nền ty thể, trong
đó chu trình acid citric tạo ra một lượng lớn NADH và FADH từ quá trình oxy hóa
acetyl CoA.
• Ở màng trong ty thể, các electron cao năng lượng do NADH và FADH2 cung cấp được
truyền dọc theo chuỗi vận chuyển điện tử và cuối cùng kết hợp với oxy phân tử (O2) để
tạo thành nước.
• Phần lớn năng lượng được giải phóng khi chuyển electron dọc theo chuỗi vận chuyển
điện tử được khai thác để bơm proton ra khỏi chất nền tạo ra một gradient điện hóa
proton. Việc bơm proton được thực hiện bởi ba phức hợp enzyme hô hấp lớn được gắn
vào màng trong.
• Gradient điện hóa proton trên màng trong ty thể được khai thác để tạo ATP khi các
proton di chuyển trở lại vào chất nền thông qua ATP synthase nằm ở màng trong.
• Gradient điện hóa proton cũng thúc đẩy sự vận chuyển tích cực của các chất chuyển
hóa được chọn vào và ra khỏi chất nền ty thể.
• Trong quang hợp ở lục lạp và vi khuẩn quang hợp, năng lượng của ánh sáng mặt trời bị
bắt bởi các phân tử chlorophyll được gắn trong các phức hợp protein lớn được gọi là hệ
thống quang hóa; trong thực vật, các hệ thống quang hóa này nằm trong màng thylakoid
của lục lạp trong tế bào lá.
• Chuỗi vận chuyển điện tử liên kết với hệ thống hóa, vận chuyển các electron cao năng
lượng từ nước sang NADP+ tạo NADPH đồng thời cũng tạo ra O2.
• Các chuỗi vận chuyển điện tử quang hợp trong lục lạp cũng tạo ra một gradient proton
trên màng thylakoid, được sử dụng để tạo ra ATP bởi ATP synthase được gắn trong
màng.
• ATP và NADPH được tạo ra bởi quá trình quang hợp được sử dụng trong lục lạp để
tham gia chu trình cố định carbon, giúp tạo carbohydrate từ CO2 và nước.
• Carbonhydrate được xuất từ chất nền lục lạp đến tế bào chất, nơi nó cung cấp nguyên
liệu ban đầu để tổng hợp các phân tử hữu cơ khác.
• Cả ty thể và lục lạp được cho là đã tiến hóa từ vi khuẩn đã bị nội bào hóa bởi các tế bào
khác. Mỗi bên giữ lại bộ gen của riêng mình và phân chia theo các quá trình giống như
sự phân chia tế bào vi khuẩn.
• Cơ chế hóa thẩm có nguồn gốc cổ xưa. Các vi sinh vật hiện đại sống trong môi trường
tương tự như những sinh vật được cho là đã có mặt trên Trái Đất sơ khai cũng sử dụng
cơ chế hóa thẩm để tạo ra ATP.

Phức hợp ăng ten Ty thể

ATP synthase Cố định nito
Cố định carbon Phosphoryl hóa oxy hóa
Hô hấp tế bào
Cơ chế hóa thẩm
Chlorophyll Qinone
Lục lạp Trung tâm phản ứng
cytochrome Cặp oxy hóa khử
cytochrome c oxidase Thế năng oxy hóa khử
Pha tối Phản ứng oxy hóa khử
Chuỗi truyền điện tử Phức hợp enzyme hô hấp
Trung tâm sắt-lưu huỳnh Chất nền lục lạp
Pha sáng Thylakoids
Chất nền ty thể
CÂU HỎI.
Câu hỏi 14-11
Phát biểu nào sau đây là đúng? Giải thích
câu trả lời của bạn.
A. Sau khi một electron bị loại bỏ bởi ánh
sáng, ái lực với các electron của chlorophyll
tích điện dương trong trung tâm phản ứng
của hệ thống quang hóa thứ nhất (hệ thống
quang hóa II) thậm chí còn lớn hơn ái lực
điện tử của O2.
B. Quang hợp là sự ánh sáng kích thích vận
chuyển điện tử từ chlorophyll sang phân tử
thứ hai thường có ái lực thấp hơn nhiều đối
với các điện tử.
C. Bởi vì nó đòi hỏi phải loại bỏ bốn
electron để giải phóng một phân tử O2 khỏi
hai phân tử H2O, các enzyme tách nước
trong hệ thống quang hóa II phải giữ các
chất trung gian phản ứng mạnh liên kết chặt
chẽ để ngăn chặn một phần lực khử,các gốc
superoxide thoát ra.
Câu hỏi 14-12
Phát biểu nào sau đây là đúng? Giải thích
câu trả lời của bạn.
A. Nhiều, nhưng không phải tất cả, các
phản ứng chuyển electron liên quan đến các
ion kim loại.
B. Chuỗi vận chuyển điện tử tạo ra một điện
thế trên màng vì nó di chuyển các electron
từ khoảng gian màng vào chất nền.
C. Gradient điện hóa proton bao gồm hai
thành phần: chênh lệch pH và điện thế.
D. Ubiquinone và cytochrom c đều là các
chất mang điện tử khuếch tán.
E. Thực vật có lục lạp và do đó có thể sống
mà không cần ty thể.
F. Cả diệp lục và heme đều chứa một hệ
thống liên kết đôi rộng lớn cho phép chúng
hấp thụ ánh sáng khả kiến.
G. Vai trò của diệp lục trong quang hợp
tương đương với heme trong vận chuyển
điện tử ty thể.
H. Trọng lượng khô của cây đến từ các
khoáng chất được lấy từ rễ.
Câu hỏi 14-13
Một proton duy nhất di chuyển xuống
gradient điện hóa của nó vào chất nền ty thể
giải phóng 4,6 kcal/mol năng lượng tự do
(∆G). Có bao nhiêu proton phải chảy qua
màng trong ty thể để tổng hợp một phân tử
ATP nếu ∆G để tổng hợp ATP trong điều
kiện nội bào nằm trong khoảng 11-13
kcal/mol? (∆G được thảo luận trong
Chương 3, trang 90-100.) Tại sao chỉ có thể
ước lượng trong khoảng, và không phải là
một con số chính xác? Trong những điều
kiện nào giá trị thấp hơn sẽ áp dụng?
Câu hỏi 14-14
Chọn một trong những lựa chọn in nghiêng
và giải thích cho câu trả lời của bạn. “Nếu
không có O2, tất cả các thành phần của
chuỗi vận chuyển điện tử ty thể sẽ tích lũy
ở dạng khử / oxy hóa. Nếu O2 đột nhiên
được thêm lại, các chất mang điện tử trong
cytochrom c oxyase sẽ bị khử / oxy hóa
trước / sau những chất trong NADH
dehydrogenase.
Câu hỏi 14-15
Giả sử rằng sự chuyển đổi ubiquinone bị
oxy hóa thành ubiquinone dạng khử bởi
NADH dehydrogenase xảy ra ở phía chất
nền của màng trong ty thể và quá trình oxy
hóa của nó bằng cytochrom c reductase xảy
ra ở phía khoảng gian màng của màng (xem
Hình 14-14 và 14-23). Hậu quả của sự sắp
xếp này là gì đối với việc tạo ra gradient H+
qua màng?
Câu hỏi 14-16
Nếu một điện áp được đặt vào hai dây bạch
kim (điện cực) được ngâm trong nước, thì
các phân tử nước sẽ bị phân tách thành khí
H2 và O2. Ở điện cực âm, các electron được
nhường cho điện cực và khí H2 được giải
phóng; ở điện cực dương, các electron được
nhận từ điện cực và khí O2 được tạo ra. Khi
vi khuẩn quang hợp và tế bào thực vật phân
tách nước, chúng tạo ra O2, nhưng không có
H2. Tại sao?
Câu hỏi 14-17
Trong một thí nghiệm được thực hiện vào
những năm 1960, lục lạp đầu tiên được
ngâm trong dung dịch axit ở pH = 4, do đó,
chất nền và khoang thylakoid bị axit hóa
(Hình Q14-17). Sau đó lục lạp đã được
chuyển đến một dung dịch có pH =8. Điều
này nhanh chóng tăng độ pH của chất nền
lên 8, trong khi khoang thylakoid tạm thời
duy trì ở pH = 4. Một loạt sự tổng hợp ATP
đã được quan sát, và sự khác biệt pH giữa
thylakoid và stroma sau đó biến mất.
A. Giải thích tại sao những điều kiện thí
nghiệm này lại dẫn đến tổng hợp ATP.
B. Ánh sáng có cần thiết để thí nghiệm hoạt
động không?
C. Điều gì sẽ xảy ra nếu các thí nghiệm
được làm ngược lại, tức là để lục lạp đầu
tiên trong dung dịch pH = 8 sau đó chuyển
sang trong dung dịch pH = 4?
D. Thí nghiệm có hỗ trợ hoặc đặt ra câu hỏi
nào cho mô hình hóa thẩm không?
Giải thích câu trả lời của bạn.
Hình Q14-17
Ủ lục lạp Thay đổi pH môi
trong vài giờ trường và bổ sung
ADP + Pi
Câu hỏi 14-18
Là thí nghiệm đầu tiên của bạn trong phòng
thí nghiệm, cố vấn của bạn yêu cầu bạn
phục hồi lại bacteriorhodopsin được tinh
chế, một bơm H+ bị kích thích bới ánh sáng,
giúp bơm H+ từ màng tế bào của vi khuẩn
quang hợp và ATP synthase được tinh chế
từ ty thể ở tế bào tim bò, cùng với nhau,
được gắn vào cùng một túi màng tế bào như
trong hình Q14-18. Sau đó, bạn được yêu
cầu phải thêm ADP và Pi vào môi trường
bên ngoài và chiếu ánh sáng vào hệ thống
túi này.
A. Bạn trông đợi điều gì từ thí nghiệm này?
B. Bạn sẽ quan sát thấy gì nếu tất cả chất
tẩy rửa chưa được loại bỏ hoàn toàn và
màng túi do đó vẫn bị rò rỉ, thấm với các
ion? (Chất tẩy rửa giúp tinh chế được ATP
synthase và bacteriorhodopsin từ tế bào, do
đó sau tinh chế cần loại bỏ chất tẩy rửa
trước khi làm thí nghiệm)
C. Bạn nói với một người bạn qua bữa tối
về các thí nghiệm mới của bạn và anh ta đặt
câu hỏi về tính hợp lệ của một phương pháp
sử dụng các thành phần từ các sinh vật
không liên quan, rất khác nhau: “Tại sao
không phải ai cũng muốn trộn bánh vani với
dầu phanh”? Hãy thử bảo vệ cách tiếp cận
của bạn và phản hồi lại sự phê phán của anh
ấy
ATP synthase
tinh chế
Bacteriorhodopsin
tinh chế
Chất tẩy
Thêm phospholipid và
loại bỏ chất tẩy rửa
Ánh
sáng
Túi kín (Liposome)
Hình Q14-18
Câu hỏi 14-19
FADH2 được sản xuất trong chu trình acid
citric bởi một phức hợp enzyme gắn màng,
được gọi là succinate dehydrogenase, có
chứa FAD liên kết và thực hiện các phản
ứng:
Succinate + FAD → Fumarate + FADH2
Và
FADH2 → FAD + 2H+ + 2e-
Tuy nhiên, thế năng oxy hóa khử của
FADH2 chỉ là -220 mV. Đề cập đến Bảng
14-1 (trang 466) và Hình 14-pane24, đề
xuất một cơ chế hợp lý mà theo đó các
electron của nó có thể được đưa vào chuỗi
vận chuyển điện tử. Vẽ sơ đồ để minh họa
cơ chế đề xuất của bạn.
Câu hỏi 14-20
Một số vi khuẩn đã trở nên chuyên biệt để
sống trong môi trường có độ pH cao (pH ~
10). Bạn có cho rằng những vi khuẩn này
sử dụng gradient proton trên màng tế bào
của chúng để tạo ATP không? (Gợi ý: tất cả
các tế bào phải duy trì tế bào chất của chúng
ở độ pH gần với trung tính)
Câu hỏi 14-21
Hình Q14-21 tóm tắt các đường dẫn được
sử dụng bởi ty thể và lục lạp để xen kẽ các
dạng năng lượng khác nhau. Liệu có chính
xác để nói là
A. rằng các sản phẩm của lục lạp là cơ chất
cho ty thể?
B. rằng việc hoạt hóa electron bằng các hệ
thống quang hóa cho phép lục lạp điều
khiển sự chuyển điện tử từ H2O sang
carbohydrate, đó là hướng ngược lại của sự
chuyển điện tử trong ty thể?
C. rằng chu trình acid citric là đảo ngược
của chu trình cố định cacbon bình thường?
(A) Ty thể

Câu hỏi 14-23

Bạn trộn các thành phần sau trong một dung
dịch. Giả sử rằng các electron phải đi theo
đường dẫn được chỉ định trong Hình 14-14,
trong đó các thí nghiệm bạn sẽ mong đợi
Chu trình
acid citric một sự vận chuyển điện tử sang cytochrom
c? Thảo luận tại sao chuyển điện tử không
xảy ra trong các thí nghiệm sau:
(B) Lục lạp Sản phẩm
A. ubiquinone dạng khử và cytochrom c
dạng oxy hóa.
Ánh
Ánh sáng B. ubiquinone dạng oxy hóa và cytochrom
sáng c dạng oxy hóa.
C. ubiquinone dạng khử và cytochrom c
Hệ quang hóa I
Hệ quang hóa II dạng khử
Chu trình cố
định carbon
D. ubiquinone dạng oxi hóa và cytochrom c
dạng khử

Sản phẩm E. ubiquinone dạng khử, cytochrom c

dạngoxy hóa và phức hợp cytochrom c
reductase
Câu hỏi 14-22
F. ubiquinone dạng oxy hóa, cytochrom c
Một bản thảo đã được gửi để xuất bản cho dạng oxy hóa và phức hợp cytochrom c
một tạp chí khoa học có uy tín. Trong bài reductase
báo, các tác giả mô tả một thí nghiệm trong
G. ubiquinone dạng khử, cytochrom c dạng
đó họ đã thành công trong việc tách một
khử và phức hợp cytochrom c reductase
phân tử ATP synthase riêng lẻ và sau đó
quay đầu một cách cơ học bằng cách tác H. ubiquinone dạng oxy hóa, cytochrom c
dụng một lực lên nó. Các tác giả cho thấy dạng khử và phức hợp cytochrom c
rằng khi xoay đầu ATP synthase, ATP được reductase
tạo ra, trong trường hợp không có gradient
H+. Điều này có nghĩa gì về cơ chế tổng hợp
ATP? Bản thảo này có nên được xem xét để
xuất bản trong một trong những tạp chí tốt
nhất
Chương mười lăm 15
Khoang nội bào và
vận chuyển protein
Tại bất kỳ thời điểm nào, một tế bào nhân chuẩn điển hình thực Bào quan có màng bao
hiện hàng ngàn phản ứng hóa học khác nhau, nhiều trong số đó bọc
không tương thích lẫn nhau. Một loạt các phản ứng tạo ra
glucose, trong khi một phản ứng khác phá vỡ nó; một số
enzyme tổng hợp các liên kết peptide, trong khi các enzyme Phân loại Protein
khác thủy phân chúng, v.v.Thật vậy, nếu các tế bào của một cơ
quan như gan bị phá vỡ và môi trường của chúng trộn lẫn với
nhau trong ống nghiệm, kết quả là sự hỗn loạn hóa học, và các Vận chuyển bằng túi
tế bào, enzyme và các protein khác bị phân hủy nhanh chóng
bởi các enzyme phân giải protein của chính chúng. Để một tế
bào hoạt động hiệu quả, các quá trình nội bào khác nhau xảy ra Con đường xuất
đồng thời bằng cách nào đó phải được tách riêng.
Các tế bào đã phát triển một số chiến lược để cô lập, tổ chức
các phản ứng hóa học của chúng. Một chiến lược được sử dụng Sự nhập bào
bởi cả tế bào nhân sơ và tế bào nhân chuẩn là tổng hợp các
enzyme khác nhau cần thiết để xúc tác một chuỗi phản ứng cụ
thể, tạo phức hợp đa thành phần. Các phức hợp như vậy được
sử dụng, ví dụ, trong quá trình tổng hợp DNA, RNA và protein.
Chiến lược thứ hai, được phát triển cao nhất trong các tế bào
nhân chuẩn, là để giới hạn các quá trình trao đổi chất khác nhau
và các protein cần thiết để thực hiện chúng trong các phần khác nhau được bao bọc bởi
màng. Như đã thảo luận trong Chương 11 và 12, màng tế bào cung cấp các rào cản có tính
thấm có chọn lọc, thông qua đó việc vận chuyển hầu hết các phân tử có thể được kiểm soát.
Trong chương này, chúng ta sẽ xem xét chiến lược này.
Trong phần đầu tiên, chúng ta sẽ mô tả các phần màng chính bao quanh, hoặc các bào quan
có màng bao bọc, của các tế bào nhân chuẩn và xem xét ngắn gọn các chức năng chính của
chúng. Trong phần thứ hai,chúng ta sẽ thảo luận về cách thành phần protein của các ngăn
khác nhau được thiết lập duy trì. Mỗi ngăn chứa một bộ protein duy nhất phải được vận
chuyển chọn lọc từ tế bào chất, nơi chúng được tạo ra, đến ngăn chứa chúng được sử dụng.
Quá trình chuyển giao này, được gọi là phân loại protein, phụ thuộc vào các tín hiệu được
xây dựng trong chuỗi acid amin của protein. Trong phần thứ ba, chúng ta sẽ mô tả cách các
khoang nhất định được bao bọc trong một tế bào nhân chuẩn giao tiếp với nhau bằng cách
hình thành các túi nhỏ, có màng bao bọc. Những túi này nảy chồi ra từ một ngăn, di chuyển
qua tế bào chất và hợp nhất với một ngăn khác trong một quá trình gọi là vận chuyển bằng
túi. Trong hai phần cuối cùng, chúng ta thảo luận về cách sự vận chuyển bằng túi này cung
cấp các tuyến đường chính để giải phóng protein từ tế bào theo qua trình xuất bào và nhập
khẩu chúng bằng quá trình nhập bào.
Lysosome
Bào quan có màng bao bọc. Nhân

Trong khi một tế bào nhân

sơ thường bao gồm một
ngăn duy nhất được bao
bọc bởi màng sinh chất,
thì ở các tế bào nhân
chuẩn lại được phân chia
công phu bởi các màng
bên trong. Khi một mặt
cắt ngang qua thực vật
hoặc tế bào động vật được
kiểm tra dưới kính hiển vi
điện tử, rất nhiều túi nhỏ,
bao bọc màng, ống, hình
cầu, và các cấu trúc hình Peroxisome Ty thể
Mạng lưới
5 µm
dạng không đều có thể nội chất hạt
được nhìn thấy, thường Hình 15-1 Trong các tế bào nhân chuẩn, màng nội bào tạo ra các ngăn
kín ngăn cách các quá trình trao đổi chất khác nhau. Ví dụ về nhiều bào
được sắp xếp mà không
quan chính được bao bọc bởi màng có thể được xác định trong ảnh hiển
có thứ tự rõ ràng (Hình vi điện tử này của một phần của tế bào gan, được nhìn thấy trong mặt
15-1). Những cấu trúc này cắt ngang. Các hạt màu đen giữa các ngăn là tập hợp glycogen và các
là tất cả các bào quan enzyme kiểm soát sự tổng hợp và phân hủy của nó. (Sự cho phép của
riêng biệt, được bao bọc Daniel S. Friend.)
 bởi màng hoặc các bộ phận của các bào quan đó, mỗi trong số đó chứa một tập hợp duy
nhất các phân tử lớn và nhỏ và thực hiện một chức năng chuyên biệt. Trong phần này,
chúng ta sẽ xem xét các chức năng này và thảo luận về cách các bào quan có màng bao bọc
này đã phát triển.

Các tế bào nhân chuẩn chứa một bộ cơ bản của các bào quan được bao
bọc bởi màng.
Các bào quan có màng bao bọc chính của một tế bào động vật được minh họa trong Hình
15-2 và các chức năng của chúng được tóm tắt trong Bảng 15-1. Các bào quan này được
bao quanh bởi tế bào chất, được bao bọc bởi màng sinh chất của tế bào. Nhân nói chung là
cơ quan nổi bật nhất trong các tế bào nhân chuẩn. Nó được bao quanh bởi một màng kép,
được gọi là màng nhân, và trao đổi chất với tế bào chất thông qua lỗ nhân nằm trên màng.

Bóng nhập bào

(endosome) Hình 15-2 Một tế bào từ niêm mạc ruột chứa
Ty thể
các bào quan bao bọc màng được tìm thấy
Lysosome trong hầu hết các tế bào động vật. Nhân,
Bộ máy Golgi mạng lưới nội chất (ER), bộ máy Golgi,
lysosome, bóng nhập bào, ty thể và
Tế bào chất
peroxisome; là các khoang riêng biệt được
Peroxisome tách ra khỏi tế bào chất (màu xám) bởi ít nhất
Mạng lưới nội
chất có màng một màng thấm có tính chọn lọc. Ribosome
bao gắn các được hiển thị liên kết với ER, được gọi là ER
polyribosome hạt; ER thiếu ribosome được gọi là ER trơn.
Ribosome cũng được tìm thấy tự do trong tế
bào chất.
Ribosome tự do
Nhân

15 µm

Màng ngoài nhân liên tục với màng của mạng lưới nội chất (ER), một hệ thống các túi và
ống liên kết với nhau thường kéo dài khắp hầu hết các tế bào. ER vùng đảm nhiệm chức
năng chính của tổng hợp màng mới trong tế bào. Các khu vực rộng lớn của ER có ribosome
gắn trên bề mặt và được gọi là mạng lưới nội chất hạt (ER hạt). Các ribosome đang tích
cực tổng hợp các protein được đưa đến gắn vào màng ER hoặc vào bên trong ER, một
khoang gọi là lumen. Mạng lưới nội chất trơn (ER trơn) thiếu ribosome. Nó chiếm tỉ lệ ít
trong hầu hết các tế bào nhưng được phát triển cao để thực hiện các chức năng cụ thể trong
các tế bào khác: ví dụ: đó là nơi tổng hợp steroid hormone ở một số tế bào nội tiết của
tuyến thượng thận và là nơi có nhiều phân tử hữu cơ, bao gồm cả rượu, được giải độc trong
các tế bào gan. Trong nhiều tế bào nhân chuẩn, ER trơn đóng vai trò là nới dự trữ Ca2+. Sự
di chuyển của Ca2+ vào và ra ER trơn giúp tham gia vào phản ứng nhanh với nhiều tín hiệu
ngoại bào, như đã thảo luận trong chương 12 và 16.

Bảng 15-1 Chức năng chính các khoang có màng bao bọc ở tế bào nhân thực

Khoang Chức năng

Chứa nhiều con đường trao đổi chất (Chương

Tế bào chất 3 và 13); tổng hợp protein (Chương 7); khung
xương tế bào (Chương 17)

Chứa bộ gen chính (Chương 5); tổng hợp DNA

Nhân
và RNA (Chương 6 và 7)

Tổng hợp hầu hết các lipit (Chương 11); tổng

Mạng lưới nội chất hợp protein để phân phối cho nhiều bào quan
và màng tế bào (chương này)

Sửa đổi, sắp xếp,và đóng gói protein và lipid

Bộ máy Golgi để tiết hoặc giao đến một cơ quan khác
(chương này)

Lysosome Tiêu hóa nội bào (chương này)

Endosome Phân loại vật liệu nội bào (chương này)

Tổng hợp ATP bằng quá trình phosphoryl hóa

Ty thể
oxy hóa (Chương 14)

Tổng hợp ATP và cố định carbon bằng quang

Lục lạp (Ở tế bào thực vật)
hợp (Chương 14)

Peroxisome Oxy hóa các phân tử độc hại

Bộ máy Golgi, thường nằm gần nhân, nhận protein và lipit từ ER, sửa đổi chúng, và sau đó
phân phối chúng đến các đích đến khác nhau trong tế bào. Các túi nhỏ chứa các enzyme
tiêu hóa được gọi là lysosome giúp phân giải các bào quan bị già yếu, cũng như các đại
phân tử và các hạt được đưa vào tế bào bởi quá trình nhập bào. Trên đường đến lysosome,
các vật liệu nội bào trước tiên phải đi qua một loạt các ngăn gọi là endosome, trong đó phân
loại các phân tử đưa vào và tái chế một số trong số chúng trở lại màng sinh chất. Peroxisome
là các bào quan nhỏ chứa các enzyme được sử dụng trong nhiều phản ứng oxy hóa phá vỡ
lipid và phá hủy các phân tử độc hại. Ty thể và lục lạp (trong tế bào thực vật) được bao
quanh bởi một màng kép và là nơi chứa quá trình phosphoryl oxy hóa và quang hợp tương
ứng (thảo luận trong Chương 14); cả hai đều chứa các màng bên trong được chuyên môn
hóa đặc biệt để sản xuất ATP.
Nhiều bào quan được bao bọc bởi màng, bao gồm ER, bộ máy Golgi, ty thể và lục lạp,
được tổ chức tại các vị trí liên quan đến chức năng của chúng trong tế bào bằng cách gắn
vào khung xương tế bào, đặc biệt là các vi ống. Khung xương tế bào giúp di chuyển các
bào quan xung quanh và để điều khiển sự lưu thông của các túi giữa cơ quan này với cơ
quan khác. Những chuyển động này được điều khiển bởi các protein vận động sử dụng
năng lượng của quá trình thủy phân ATP để đẩy các bào quan và túi dọc theo các sợi, như
đã thảo luận trong Chương 1.
Trung bình, các bào quan bao bọc màng cùng nhau chiếm gần một nửa thể tích của một tế
bào nhân chuẩn (Bảng 15-2), và tổng số lượng màng kết hợp đến chúng là rất lớn. Trong
một tế bào động vật có vú điển hình, ví dụ, diện tích của màng lưới nội chất là gấp 20-30
lần so với màng sinh chất. Xét về diện tích và khối lượng của nó, màng sinh chất chỉ là một
màng nhỏ trong hầu hết các tế bào nhân chuẩn.
Nhiều điều có thể được học về thành phần và chức năng của một bào quan một khi nó đã
được phân lập từ các cấu trúc tế bào khác. Đối với hầu hết các phần, các bào quan quá nhỏ
để có thể được phân lập bằng tay, nhưng có thể tách một loại bào quan khỏi loại khác bằng
cách ly tâm vi sai (được mô tả trong Bảng 4-3, trang 164-165). Khi đã lấy được mẫu tinh
khiết của một loại bào quan, có thể xác định được protein của nó. Trong nhiều trường hợp,
bản thân bào quan có thể được ủ trong ống nghiệm trong điều kiện cho phép nghiên cứu
chức năng của nó. Ví dụ, ty thể bị cô lập, có thể tạo ra ATP từ quá trình oxy hóa pyruvate
thành CO2 và nước, miễn là chúng được cung cấp đầy đủ với ADP, phosphate vô cơ và O2.
 Bảng 15-2 Thể tích tương đối và số lượng của các bào quan chính được bao
bọc bởi màng trong tế bào gan (tế bào gan)

Tỉ lệ phần trăm tổng thể Số lượng gần đúng trên

Khoang nội bào
tích tế bào mỗi tế bào
Tế bào chất 54 1
Ty thể 22 1700
Mạng lưới nội chất 12 1
Nhân 6 1
Bộ máy Golgi 3 1
Lysosome 1 400
Peroxisome 1 300
Endosome 1 200

Các bào quan có màng bao bọc tiến hóa theo cách khác nhau.
Khi cố gắng hiểu mối quan hệ giữa các khoang khác
Câu hỏi 15-1
nhau của một tế bào nhân chuẩn hiện đại, sẽ rất hữu
ích khi xem xét cách chúng phát triển, tiến hóa. Các Như thể hiện trong Hình 15-3. Lớp
khoang có thể tiến hóa quá nhiều giai đoạn. Tiền thân kép lipid của nhân bên trong và bên
của các tế bào nhân chuẩn đầu tiên được cho là vi sinh ngoài màng hình thành một tấm liên
vật đơngiản, giống như vi khuẩn, có màng sinh chất tục, xung quanh các lỗ nhân. Vì màng
nhưng không có hệ thống nội màng. Màng sinh chấ là chất lỏng hai chiều, điều này sẽ
ngụ ý rằng protein màng có thể
trong các tế bào như vậy sẽ có tất cả các chức năng
khuếch tán tự do giữa hai màng
phụ thuộc màng, bao gồm tổng hợp ATP và tổng hợp nhân. Tuy nhiên, mỗi hai màng nhân
lipid, cũng như màng sinh chất trong hầu hết các vi này có một thành phần protein khác
khuẩn hiện nay. Vi khuẩn có thể có được bằng cách nhau, phản ánh các chức năng khác
sắp xếp này vì kích thước nhỏ của chúng, điều này nhau. Làm thế nào bạn có thể gải
mang lại cho chúng tỷ lệ diện tích bề mặt trên thể tích thích mâu thuẫn này?
cao: diện tích màng sinh chất của chúng đủ để duy trì
tất cả các chức năng quan trọng cần thiết. Ngược lại, các tế bào nhân chuẩn ngày nay có
khối lượng lớn hơn 1000 đến 10.000 lần so với các vi khuẩn điển hình như E. coli. Một tế
bào lớn như vậy có tỷ lệ bề mặt trên thể tích nhỏ và có lẽ không thể tồn tại với màng sinh
chất như là màng duy nhất của nó. Do đó, sự gia tăng kích thước điển hình của các tế bào
nhân chuẩn có lẽ không thể xảy ra nếu không có sự phát triển của hệ thống nội màng.
Các bào quan có màng bao bọc được cho là đã phát sinh trong quá trình tiến hóa theo ít
nhất hai cách. Các màng nhân và màng của bộ máy ER, Golgi, endosome và lysosome rất
có thể có nguồn gốc từ sự xâm lấn vào trong của màng sinh chất, như minh họa cho nhân
và màng ER trong Hình 15-3. ER , bộ máy Golgi, peroxisomes, endosome và lysosome
đều là một phần của cái gọi chung là hệ thống nội màng. Như chúng ta sẽ thảo luận sau,
phần bên trong của các bào quan này liên hệ với nhau và với mặt ngoài của tế bào bằng các
túi nhỏ mọc ra từ một trong các bào quan này và hòa nhập vào bào quan khác. Phù hợp với
nguồn gốc tiến hóa được đề xuất này, phần bên trong của các bào quan này được xử lý bởi
tế bào theo nhiều cách như ngoại bào, như chúng ta sẽ thấy. Sơ đồ giả thuyết trong Hình
15-3 cũng giải thích tại sao nhân được bao quanh bởi hai màng.
Hình 15-2 Màng nhân và ER có thể Màng nhân trong
đã tiến hóa thông qua sự xâm lấn Màng nhân ngoài
Lỗ nhân
của màng sinh chất. Ở vi khuẩn, Nhân
phân tử DNA thường được gắn vào DNA
màng sinh chất. Có thể là trong một ER
tế bào prokaryote rất cổ xưa, màng
sinh chất, với DNA đính trên nó, có
thể đã xâm lấn vào trong, trong các Màng tế
bào có gắn Tế bào
thế hệ tiếp theo, hình thành một
ribosome chất
lớp màng hai lớp bao quanh hoàn
toàn DNA. Màng này cuối cùng đã
tách hoàn toàn khỏi màng sinh
chất, tạo ra một khoang nhân
thông với ngoài bởi các kênh gọi là Ty thể và lục lạp được cho là có nguồn gốc theo cách
lỗ nhân, cho phép trao đổi với tế khác nhau. Chúng khác với tất cả các bào quan khác ở
bào chất. Các phần khác của màng
chỗ chúng sở hữu bộ gen nhỏ của riêng chúng và có thể
xâm lấn có thể đã hình thành ER.
Điều này sẽ giải thích tại sao không tạo ra một số protein của riêng chúng, như đã thảo luận
gian giữa màng ngoài và màng trong Chương 14. Sự giống nhau của bộ gen của chúng
trong nhân liên tục với ER với vi khuẩn và sự tương đồng gần gũi của một số
protein của chúng với protein của vi khuẩn cho thấy
mạnh mẽ rằng cả hai bào quan này đã tiến hóa từ vi khuẩn đã bị nhấn chìm bởi các tế bào
tiền nhân chuẩn nguyên thủy mà ban đầu chúng sống trong sự cộng sinh (Hình 15-4). Như
có thể mong đợi từ nguồn gốc của họ, ty thể và lục lạp gần như cô lập với hệ thống bóng
túi vận chuyển giúp kết nối môi trường của hầu hết bào quan có màng bao bọc với nhau và
với bên ngoài tế bào.
Hình 15-4 Ty thể được cho là có
Màng trong
nguồn gốc khi một prokaryote hiếu
Nhân
khí bị nhấn chìm bởi một tế bào
tiền nhân thực lớn hơn. Lục lạp
được cho là có nguồn gốc sau đó
theo cách tương tự, khi một tế bào
nhân chuẩn có ty thể nhấn chìm
một prokaryote quang hợp. Lý
thuyết này sẽ giải thích tại sao các
bào quan này có hai màng, sở hữu
bộ gen của riêng chúng,và không
Màng xung quanh Ty thể với
tham gia vào giao thông bóng túi Màng tế bào biến mất tạo tế bào màng kép
kết nối các khoang của hệ thống nội tền nhân thực
Tế bào vi khuẩn hiếu khí
màng.
Phân loại protein
Trước khi một tế bào nhân chuẩn phân chia, nó phải nhân đôi các bào quan được bao bọc
bởi màng. Khi các tế bào phát triển, các bào quan bao bọc màng mở rộng bằng cách kết
hợp các phân tử mới; các bào quan sau đó phân chia và trong quá trình phân chia tế bào,
các bào quan được phân phối giữa hai tế bào con. Sự phát triển của cơ quan đòi hỏi một
nguồn cung cấp lipid mới để tạo ra nhiều màng hơn và việc cung cấp các protein thích hợp
cả hai protein màng và protein hòa tan ở môi trường trong tế bào. Ngay cả trong các tế bào
không phân chia, protein vẫn được sản xuất liên tục. Những protein mới được tổng hợp
này phải được phân phối chính xác tới bào quan đích. Một số để tiết ra ngoài tế bào và một
số để thay thế các protein ở bào quan đã bị thoái hóa. Do đó, việc hướng các protein mới
được tạo ra vào bào quan chính xác của chúng là cần thiết cho bất kỳ tế bào nào phát triển
và phân chia, hoặc chỉ để hoạt động đúng.

Đối với một số bào quan, bao gồm ty thể, lục lạp, peroxisome và bên trong nhân, protein
được phân phối trực tiếp từ tế bào chất. Đối với những bào quan khác, bao gồm bộ máy
Golgi, lysosome, endosomes và màng nhân trong, protein và lipid được phân phối gián tiếp
thông qua ER, mà bản thân nó là một mạng lưới chính của tổng hợp lipid và protein. Protein
nhập vào ER trực tiếp từ tế bào chất: một số được giữ lại ở đó, nhưng hầu hết được vận
chuyển bằng túi đến bộ máy Golgi và sau đó chuyển sang màng sinh chất hoặc các bào
quan khác. Peroxisomes nhận được một số protein màng của chúng từ ER, nhưng phần lớn
các enzyme của chúng nhập trực tiếp từ tế bào chất.

Trong phần này, chúng ta sẽ thảo luận về các cơ chế mà protein trực tiếp xâm nhập vào các
bào quan được bao bọc màng từ tế bào chất. Các protein được tạo ra trong tế bào chất được
gửi đến các vị trí khác nhau trong tế bào theo “nhãn địa chỉ” cụ thể có trong chuỗi acid
amin của chúng. Khi đã đến đúng địa chỉ, protein sẽ xâm nhập vào màng hoặc màng trong
của cơ quan được chỉ định.

Protein được vận chuyển vào các bào quan bằng ba cơ chế.

Sự tổng hợp của hầu như tất cả các protein trong tế bào bắt đầu ở các ribosome trong tế
bào chất. Các trường hợp ngoại lệ là một số protein ty thể và lục lạp được tổng hợp ở các
ribosome bên trong các bào quan này; tuy nhiên, hầu hết các protein ty thể và lục lạp được
sản xuất trong tế bào chất và sau đó được đưa vào. Số phận của bất kỳ phân tử protein nào
được tổng hợp trong tế bào chất phụ thuộc vào trình tự acid amin của nó, tức là nó có thể
chứa một tín hiệu phân loại hướng protein đến cơ quan mà nó được yêu cầu. Các protein
thiếu các tín hiệu như vậy thường hoạt động trong tế bào chất; những chất có tín hiệu phân
loại giúp chuyển protein từ tế bào chất sang bào quan thích hợp. Các tín hiệu sắp xếp khác
nhau dẫn protein trực tiếp vào nhân, ty thể, lục lạp (trong thực vật), peroxisome và ER.
Khi một bào quan quan có màng bao bọc nhập loại protein hòa tan trong nước vào bên
trong của nó hoặc từ tế bào chất hoặc từ một bào quan quan khác, nó phải đối mặt với một
vấn đề: làm thế nào nó có thể vận chuyển protein trên màng của nó (hoặc màng), thường
không thấm vào các đại phân tử ưa nước? Nhiệm vụ này được thực hiện theo những cách
khác nhau bởi các cơ quan khác nhau

1. Protein di chuyển từ tế bào chất vào nhân được vận chuyển qua lỗ nhân, chúng xâm nhập
vào cả màng nhân bên trong và bên ngoài. Các lỗ nhân hoạt động như các cổng chọn lọc
vận chuyển tích cực các đại phân tử cụ thể nhưng cũng cho phép khuếch tán tự do các phân
tử nhỏ hơn (cơ chế 1 trong Hình 15-5).

2. Các protein di chuyển từ tế bào chất vào ER, ty thể hoặc lục lạp được vận chuyển qua
màng bào quan bởi quá trình vận chuyển bằng protein (protein translocator) nằm trên
màng. Không giống như vận chuyển qua các lỗ nhân, protein vận chuyển thường phải mở
ra để rắn xuyên qua màng thông qua chuyển vị (cơ chế 2 trong Hình 15-5) .Vi khuẩn có
các chất chuyển đổi protein tương tự trong màng sinh chất của chúng, chúng sử dụng để
xuất khẩu protein từ tế bào chất ra bên ngoài tế bào.

3. Các protein di chuyển từ ER và từ một ngăn của hệ thống nội màng sang nơi khác được
vận chuyển theo một cơ chế khác với hai cơ chế trên. Những protein này được chuyên chở
bởi các túi vận chuyển, mà nhú ra khỏi màng của một khoang và sau đó hợp nhất với màng
của một khoang thứ hai (cơ chế 3 trong hình 15 -5). Trong quá trình này, các túi vận chuyển
cung cấp protein hòa tan, cũng như các protein và lipid là một phần của màng túi.

Hình 15-5 Bào quan có màng bao bọc

nhập khẩu protein theo một trong ba cơ
chế. Tất cả những quá trình ở đây các quá
trình đòi hỏi năng lượng. Protein vẫn
được gấp lại trong quá trình vận chuyển
trong cơ chế 1 và 3 nhưng thường được
mở ra trong cơ chế 2.
Chuỗi tín hiệu hướng trực tiếp protein vào khoang chính xác
Tín hiệu sắp xếp điển hình trên protein là một chuỗi acid amin kéo dài liên tục, điển hình
là 15-60 acid amin. Chuỗi tín hiệu này thường (nhưng không phải luôn luôn) được loại bỏ
khỏi protein thành phẩm một khi nó đã được phân loại. Một số chuỗi tín hiệu được sử dụng
để xác định các số phận khác nhau của protein trong tế bào được hiển thị trong Bảng 15-
3.

Bảng 15-3 Một số chuỗi tín hiệu điển hình

Chức năng của tín hiệu Chuỗi tín hiệu ví dụ

+
H3N-Met-Met-Ser-Phe-Val-Ser-Leu-Leu-Leu-Val-Gly-Ile-
Nhập khẩu vào ER Leu-Phe-Trp-Ala-Thr-Glu-Ala-Glu-Gln-Leu-Thr-Lys-Cys-
Glu-Val-Phe-Gln-

Duy trì ở trong lumen ER Lys-Asp-Glu-Leu-COO-

+
H3N-Met-Leu-Ser-Leu-Arg-Gln-Ser-Ile-Arg-Phe-Phe-Lys-
Nhập khẩu vào ty thể
Pro-Ala-Thr-Arg-Thr-Leu-Cys-Ser-Ser-Arg-Tyr-Leu-Leu-

Nhập khẩu vào nhân -Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-

Xuất khẩu khỏi nhân -Met-Glu-Glu-Leu-Ser-Gln-Ala-Leu-Ala-Ser-Ser-Phe-

Nhập khẩu vào peroxisome -Ser-Lys-Leu-

Các acid amin tích điện dương được thể hiện bằng màu đỏ và acid amin tích điện âm màu xanh
lam. Các acid amin kỵ nước quan trọng được thể hiện bằng màu xanh lá cây. +H3N chỉ ra đầu
N của protein. COO- chỉ ra đầu C.

Trình tự tín hiệu là cần thiết và đủ để hướng protein đến một đích cụ thể. Điều này đã được
thể hiện bằng các thí nghiệm trong đó trình tự bị xóa hoặc chuyển từ protein này sang
protein khác bằng các kỹ thuật di truyền (được thảo luận trong Chương 10). Ví dụ, xóa một
chuỗi tín hiệu từ protein ở ER, chuyển đổi nó thành protein ở tế bào chất, trong khi đặt một
chuỗi tín hiệu ER ở đầu protein ở tế bào chất sẽ chuyển hướng protein đó thành protein ở
ER (Hình 15-6). Các chuỗi tín hiệu chỉ định cùng một đích có thể khác nhau rất nhiều mặc
dù chúng có cùng chức năng như: tính chất vật lý như tính kỵ nước hoặc vị trí của các axit
amin tích điện thường có vẻ quan trọng hơn đối với chức năng của các tín hiệu này so với
trình tự của chuỗi axit amin chính xác.
Protein tế bào chất Protein ER (Với chuỗi tín
Hình 15-6 Trình tự tín hiệu hướng
(Không có chuỗi tín hiệu) hiệu đã loại bỏ)
protein trực tiếp đến đích chính xác.
(A) Protein dành cho ER sở hữu một
Chuỗi tín hiệu ER
chuỗi tín hiệu đầu N hướng chúng loại bỏ khỏi
đến cơ quan đó, trong khi những protein ER và thêm
protein ở lại tế bào chất lại thiếu vào protein tế bào
chất
chuỗi tín hiệu như vậy. (B) Các kỹ
thuật DNA tái tổ hợp có thể được sử
dụng để thay đổi đích của hai Tế bào chất Tế bào chất
protein: nếu chuỗi tín hiệu được loại
bỏ khỏi protein ER và gắn vào protein
tế bào chất, protein sẽ được thay đổi
vị trí và ở những nơi không phù hợp Protein ER Chuỗi tín hiệu Protein tế bào chất gắn
thêm chuỗi tín hiệu

Màng nhân
Protein vào nhân thông qua lỗ nhân.
Màng ngoài
Màng nhân, bao bọc DNA nhân và xác định khoang
nhân, được hình thành từ hai màng đồng tâm. Màng Màng trong
nhân bên trong chứa một số protein đóng vai trò là vị Màng ER

trí liên kết của nhiễm sắc thể (được thảo luận trong Lumen
Chương 5) và các loại khác cung cấp chỗ neo cho các
tấm lamina, một tấm lưới được dệt tinh xảo của các
protein dạng sợi nằm dọc theo mặt trong của màng này
và cung cấp hỗ trợ cấu trúc cho lớp vỏ nhân (thảo luận
trong Chương 17). Thành phần của màng nhân bên
ngoài gần giống với màng của ER, mà nó liên tục Tấm lamina
(Hình 15-7). Khoang giữa 2 màng

Lớp màng nhân trong tất cả các tế bào nhân chuẩn được Lỗ nhân

đục lỗ bằng các lỗ nhân tạo thành các cổng, thông qua Hình 15-7 Màng nhân ngoài liên tục
với màng ER. Màng kép của lớp
đó các phân tử đi vào hoặc rời khỏi nhân. Lỗ nhân là
màng nhân có các lỗ nhân xuyên qua
một cấu trúc lớn, phức tạp bao gồm một phức hợp gồm màng. Các ribosome thường liên kết
khoảng 30 loại protein khác nhau (Hình 15-8). Nhiều với bề mặt tế bào của màng ER và
protein nằm trong lỗ nhân chứa các vùng rộng lớn, màng nhân ngoài không được vẽ ở
không có cấu trúc, trong đó các chuỗi polypeptide phần đây.
lớn bị rối loạn. Các phân đoạn bị xáo trộn này tạo thành
một tấm lưới mềm, rối, giống như một khu rừng tảo bẹ,
lấp đầy trung tâm của kênh, ngăn chặn sự đi qua của
 các phân tử lớn nhưng cho phép, các phân tử nhỏ, hòa tan trong nước vượt qua dễ dàng và
không chọn lọc giữa nhân và tế bào chất.
Các phân tử lớn hơn và các phức hợp phân tử cũng cần phải đi qua các lỗ hạt nhân. Các
phân tử RNA, được tổng hợp trong nhân và các tiểu đơn vị ribosome, được tập hợp ở đó,
phải được đưa sang tế bào chất (thảo luận trong Chương 7). Và các protein mới được tạo
ra dành cho nhân phải được nhập từ tế bào chất. Để đi qua được lỗ nhân, những phân tử
lớn và phức hợp phân tử phải biểu thị một chuỗi tín hiệu sắp xếp thích hợp. Chuỗi tín hiệu
hướng một protein từ tế bào chất vào nhân, được gọi là tín hiệu định vị nhân, thường bao
gồm một hoặc hai chuỗi ngắn chứa một số lysine hoặc arginines tích điện dương (xem
Bảng 15-3). Hình 15-8 Phức hợp lỗ nhân tạo thành
một cổng thông qua đó chọn đại phân
tử và phức hợp lớn vào hoặc ra khỏi
nhân. (A) Một vùng nhỏ của vỏ nhân
cho thấy hai lỗ nhân. Protein sợi nhô ra
Sợi tế bào chất
từ các cạnh của phức hợp lỗ nhân; về
lỗ nhân bên cạnh, chúng tụ lại tạo cấu
Màng ngoài
trúc như giỏ. Khoảng cách giữa các sợi
đủ rộng để các sợi không cản trở việc
tiếp cận lỗ nhân (B) Ảnh vi điện tử của
Tế bào chất một vùng bao bọc nhân cho thấy hình
Màng ảnh của hai lỗ nhân. (C) Ảnh hiển vi
nhân điện tử cho thấy cái nhìn trực diện về
phức hợp protein lỗ nhân; các màng
Nhân Lamina Màng trong đã được tách chiết bằng chất tẩy rửa.
Giỏ nhân Phức hợp
(B: sự cho phép của Werner W. Franke;
protein lỗ nhân 50nm C: sự cho phép của Ron Milligan.)
(A)

Tế bào chất

Nhân Phức hợp lỗ nhân

(B) (C)
0,1µm 0.1 µm

Tín hiệu định vị nhân trên các protein được định sẵn cho nhân được nhận ra bởi các protein
trong tế bào chất gọi là các thụ thể nhập khẩu nhân. Những thụ thể này giúp hướng protein
mới được tổng hợp vào lỗ nhân bằng cách tương tác với các sợi nhỏ giống như xúc tu kéo
dài từ vành lỗ chân lông vào tế bào chất (Hình15-9). Khi đó, thụ thể nhập khẩu nhân xâm
nhập vào lỗ nhân bằng cách “nắm lấy” các chuỗi acid amin ngắn, lặp đi lặp lại trong mớ
protein lỗ nhân lấp đầy trung tâm lỗ. Khi lỗ nhân rỗng, các chuỗi lặp lại này liên kết với
nhau, tạo thành một gel lỏng lẻo. Các thụ thể nhập khẩu hạt nhân làm gián đoạn các tương
 tác này, và chúng mở ra một lối đi thông qua lưới. Các thụ thể nhập khẩu chỉ đơn giản là
va chạm lại với một chuỗi lặp lại tiếp theo, cho đến khi chúng nhập vào nhân và đưa tới
các loại protein được vận chuyển. Các thụ thể trống sau đó quay trở lại tế bào chất thông
qua lỗ nhân để tái sử dụng (xem Hình 15-9).
Tín hiệu định
Hình 15-9 Protein nhân được nhập khẩu từ tế bào chất thông qua lỗ
Protein trong vị nhân chân nhân. Các protein chứa tín hiệu định vị nhân được nhận biết bởi
nhân Thụ thể các thụ thể nhập khẩu nhân, tương tác với các sợi kéo dài từ vành lỗ
nhập khẩu nhân. Như được chỉ ra bởi các mũi tên đen ngắn, sau khi bị bắt, các
nhân thụ thể di chuyển ngẫu nhiên với protein của chúng thông qua các
Sợi tế
bào chất
mắt lưới giống như gel của các sợi nhân, cho đến khi nhân kích hoạt
giải phóng protein. Sau khi vận chuyển, các thụ thể trở lại tế bào chất
thông qua lỗ nhân để tái sử dụng. Các loại thụ thể vận chuyển tương
tự, hoạt động theo hướng ngược lại, xuất mRNA từ nhân (xem Hình
Tế bào chất
7-23). Những bộ thụ thể xuất nhập khẩu này có cấu trúc cơ bản tương
tự nhau

Nhân
Mạng lưới Giống như bất kỳ quá trình nào tạo ra sự vận chuyển,
Giỏ
nhân protein sợi việc nhập khẩu protein nhân đòi hỏi năng lượng. Trong
nhân giống
như gel trường hợp này, năng lượng được cung cấp bởi quá
trình thủy phân GTP, qua trung gian bởi một GTPase
đơn phân có tên Ran. Quá trình thủy phân GTP này
Protein vận chuyển
vào nhân thúc đẩy sự vận chuyển hạt nhân theo hướng thích hợp,
như trong Hình 15-10. Protein lỗ nhân vận hành cổng
Hình 15-10 Năng lượng được cung cấp phân tử này với tốc độ đáng kinh ngạc, nhanh chóng
bởi quá trình thủy phân GTP thúc đẩy bơm các đại phân tử theo cả hai hướng thông qua cổng.
vận chuyển qua nhân. Một thụ thể
nhập khẩu nhân kết hợp một protein
nhân trong tế bào chất và xâm nhập
vào nhân. Ở đó nó gặp một GTPase đơn Thủy phân GTP,
Ran-GDP Protein liên kết
Ran-GDP tách ra
phân nhỏ gọi là Ran, có mang một phân khỏi receptor với receptor
tử GTP. Ran-GTP liên kết với thụ thể
nhập khẩu, khiến nó giải phóng protein
nhân. Sau khi vận chuyển, thụ thể vẫn Pi Lỗ nhân
mang Ran-GTP, được vận chuyển trở Tế bào chất
lại qua lỗ nhân đến tế bào chất. Ở đó,
một protein phụ (không hiển thị) kích
Nhân
hoạt Ran để thủy phân GTP. Ran-GDP
tách rời khỏi thụ thể nhập khẩu, sau đó
thụ thể được tự do liên kết một protein
được định sẵn cho nhân khác. Một chu
trình tương tự hoạt động để xuất các Protein được vận Ran-GTP liên
chuyển vào nhân kết với receptor
mRNA và tiểu đơn vị ribosome từ nhân Ran-GTP
vào tế bào chất, sử dụng các thụ thể
xuất khỏi nhân nhận ra tín hiệu xuất
khẩu (xem Bảng 15-3).
Lỗ nhân vận chuyển protein cấu trúc và các thành phần ribosome hoàn chỉnh của chúng
như các mảnh lắp ráp. Tính năng này giúp phân biệt cơ chế vận chuyển nhân với các cơ
chế vận chuyển protein vào hầu hết các bào quan khác. Protein phải mở ra để vượt qua
màng của ty thể và lục lạp, như chúng ta sẽ thảo luận tiếp theo.

Protein duỗi ra để nhập vào ty thể và lục lạp

Cả ty thể và lục lạp được bao quanh bởi màng trong và
ngoài, và cả hai là bào quan chuyên tổng hợp ATP. Câu hỏi 15-2
Lục lạp cũng chứa một hệ thống màng thứ ba, màng
Tại sao các tế bào nhân thực đòi hỏi
thylakoid (thảo luận trong Chương 14). Mặc dù cả hai
nhân như một khoang riêng biệt khi
bào quan đều chứa bộ gen của riêng chúng và tạo ra các tế bào nhân sơ có thể quản lý
một số protein của riêng, nhưng hầu hết các protein ty hoàn hảo mà không cần?
thể và lục lạp được mã hóa bởi các gen trong nhân và
được nhập từ tế bào chất. Những protein này thường có một chuỗi tín hiệu ở đầu N của
chúng cho phép chúng đi vào cơ quan cụ thể. Các protein được định sẵn cho một trong hai
cơ quan được di chuyển đồng thời trên cả màng bên trong và bên ngoài tại các vị trí chuyên
biệt nơi hai màng liên hệ với nhau. Mỗi protein được duỗi ra khi nó được vận chuyển và
chuỗi tín hiệu của nó bị loại bỏ sau khi hoàn thành quá trình dịch mã (Hình 15-11).
Protein chaperone (được thảo luận trong Chương 4) bên trong các bào quan giúp kéo
protein qua hai màng và gấp lại khi nó ở bên trong. Vận chuyển tiếp theo đến một vị trí cụ
thể trong cơ quan, chẳng hạn như màng trong hoặc ngoài hoặc màng thylakoid trong lục
lạp, thường yêu cầu các tín hiệu sắp xếp tiếp theo trong protein, thường chỉ được lộ ra sau
khi chuỗi tín hiệu đầu tiên bị loại bỏ. Ví dụ, việc chèn protein xuyên màng vào màng trong
được hướng dẫn bởi các chuỗi tín hiệu trong protein bắt đầu và dừng quá trình vận chuyển
qua màng, như chúng tôi mô tả sau để chèn protein xuyên màng vào màng ER
Sự tăng trưởng và duy trì hoạt động của ty thể và lục lạp không chỉ đòi hỏi nhập khẩu
protein mới mà còn sát nhập lipid mới vào màng tế bào. Hầu hết các phospholipid màng
của chúng được cho là được nhập khẩu từ ER, đây là nơi tổng hợp lipid chính trong tế bào.
Phospholipids được vận chuyển đến các bào quan này bởi các protein mang lipid chiết xuất
một phân tử phospholipid từ một màng và đưa nó vào một màng khác.Vận chuyển như vậy
có thể xảy ra tại các điểm giao nhau nơi màng ty thể và ER được tổ chức gần nhau. Nhờ
các protein mang lipid này, các màng tế bào khác nhau có thể duy trì các thành phần lipid
khác nhau.
 Màng ngoài
Protein tiền Màng trong
thân Tế bào chất
Chuỗi tín hiệu

Gắn với thụ thể nhập Vận chuyển vào Chất nền
khẩu Protein vận chuyển chất nền
Chất nền ở màng trong
Thụ thể nhập khẩu protein
Màng ngoài Khoang
gian màng Protein vận chuyển Protein ty thể
ở màng ngoài trưởng thành
Màng trong
Phân cắt
(A) (B) peptide tín hiệu

Hình 15-11 Protein tiền thân ty thể được duỗi ra trong quá trình nhập vào. (A) Một ty thể có màng ngoài
và màng trong, cả hai đều phải được bắt chéo với nhau để tiền thân protein ty thể xâm nhập vào. (B) Để
bắt đầu vận chuyển, chuỗi tín hiệu ty thể trên protein tiền thân được nhận biết bởi một thụ thể ở màng
ngoài ty thể. Thụ thể này được liên kết với một trình dịch protein. Phức hợp thụ thể, protein tiền chất tiếp
tục dịch mã khuếch tán sang bên trong màng ngoài cho đến khi nó gặp một chất chuyển vị thứ hai ở màng
trong. Sau đó, hai thể vận chuyển đưa protein qua cả màng ngoài và màng trong, duỗi protein ra trong
quá trình. Chuỗi tín hiệu cuối cùng bị cắt đứt bởi một peptidase tín hiệu trong chất nền ty thể. Protein
được nhập vào lục lạp theo cơ chế tương tự. Các protein chaperone giúp kéo protein qua màng và giúp
nó gấp lại không được hiển thị ở hình vẽ.

Protein tới Peroxisomes từ cả tế bào chất và mạng lưới nội chất.

Peroxisomes thường chứa một hoặc nhiều enzyme sản xuất hydro peroxide, do đó người
ta đặt tên của chúng theo phản ứng này. Các bào quan này có mặt trong tất cả các tế bào
nhân chuẩn, nơi chúng phá vỡ nhiều loại phân tử, bao gồm độc tố, rượu và acid béo. Chúng
cũng tổng hợp một số phospholipid nhất định, bao gồm cả những chất có nhiều trong vỏ
myelin cách ly sợi trục tế bào thần kinh.
Peroxisomes thu được phần lớn protein của chúng thông qua vận chuyển chọn lọc từ tế bào
chất. Một chuỗi ngắn chỉ có ba acid amin đóng vai trò là tín hiệu nhập khẩu cho nhiều
protein trong peroxisome. Trình tự này được nhận ra bởi các protein thụ thể trong tế bào
chất, ít nhất một trong số đó giúp đưa protein suốt đường vào peroxisome trước khi quay
trở lại tế bào chất. Giống như màng của ty thể và lục lạp, màng peroxisome chứa protein
mang hỗ trợ cho việc vận chuyển. Tuy nhiên, không giống như cơ chế hoạt động trong ty
thể và lục lạp các protein không cần phải duỗi ra để xâm nhập vào peroxisome và cơ chế
vận chuyển vẫn còn bí ẩn.
Mặc dù hầu hết các protein peroxisome, bao gồm cả các protein được gắn trong màng
peroxisome, đến từ tế bào chất, một số protein màng đến qua các túi nảy chồi từ màng ER.
Các túi vận chuyển nhập vào với peroxisome có từ trước hoặc nhập protein peroxisome từ
tế bào chất để phát triển thành peroxisome trưởng thành.
Bệnh liên quan đến peroxisome nghiêm trọng nhất, được gọi là hội chứng Zellweger, được
gây ra bởi các đột biến ngăn chặn nhập khẩu protein peroxisome. Những người mắc chứng
rối loạn này được sinh ra với những bất thường nghiêm trọng ở não, gan và thận. Hầu hết
không sống sót sau sáu tháng đầu đời. Đây như là một lời nhắc nhở nghiệt ngã về tầm quan
trọng quan trọng của các bào quan bị đánh giá thấp này đối với chức năng tế bào và cho
sức khỏe của các sinh vật.

Protein vào mạng lưới nội chất trong khi đang được tổng hợp.
Mạng lưới nội chất là hệ thống màng rộng nhất trong một tế bào nhân chuẩn (Hình 15
12A). Không giống như các bào quan được thảo luận cho đến nay, nó đóng vai trò là điểm
vào cho các protein dành cho các bào quan khác, cũng như cho chính ER. Các protein được
định sẵn cho bộ máy Golgi, endosome và lysosome, cũng như các protein được định sẵn
cho bề mặt tế bào, tất cả trước tiên phải đi vào ER từ tế bào chất. Khi đã ở trong khoang
lumen của ER hoặc được gắn vào màng ER, các protein riêng lẻ sẽ không trở lại tế bào
chất trong suốt hành trình tiếp theo của chúng. Thay vào đó, chúng sẽ được vận chuyển
bằng các túi vận chuyển từ bào quan này đến bào quan khác trong hệ thống nội màng hoặc
đến màng sinh chất.
Hai loại protein được chuyển từ tế bào chất sang ER: (1) protein hòa tan trong nước được
chuyển hoàn toàn qua màng ER và được giải phóng vào trong khoang lumen của ER; (2)
các protein xuyên màng chỉ được vận chuyển một phần qua màng ER và được gắn vào
trong đó. Các protein hòa tan trong nước được định sẵn cho xuất bào (bằng cách giải phóng
ở bề mặt tế bào) hoặc vào của một cơ quan của hệ thống nội màng. Các protein xuyên màng
được định sẵn cư trú trong màng của một trong những bào quan này hoặc trong màng sinh
chất. Tất cả các protein này ban đầu được hướng đến ER theo trình tự tín hiệu ER, một
phân đoạn gồm tám acid amin kỵ nước trở lên (xem Bảng 15-3), cũng tham gia vào quá
trình.
Không giống như các protein xâm nhập vào nhân, ty thể, lục lạp hoặc peroxisomes, hầu
hết các protein đi vào ER bắt đầu được luồn qua màng ER trước khi chuỗi polypeptide
được tổng hợp hoàn toàn. Điều này đòi hỏi các ribosome tổng hợp protein phải được gắn
vào màng ER. Các ribosome liên kết màng này bao phủ bề mặt của ER, tạo ra các vùng
được gọi là mạng lưới nội chất hạt vì hình dạng hạt đặc trưng của nó khi nhìn trong kính
hiển vi điện tử (Hình 15-12B).
Do đó, có hai quần thể ribosome riêng biệt trong tế bào chất. Các ribosome gắn màng được
gắn vào phía tế bào chất của màng ER (và màng nhân bên ngoài) và tạo ra các protein đang
được chuyển vào ER. Các ribosome tự do không được gắn vào bất kỳ màng nào và đang
tạo ra tất cả các protein khác được mã hóa bởi DNA nhân. Ribosome liên kết màng và
ribosome tự do giống hệt nhau về cấu trúc cũng như chức năng; chúng chỉ khác nhau về
protein mà chúng đang tạo ra tại bất kỳ thời điểm nào. Khi một ribosome tạo ra protein có
trình tự tín hiệu ER, trình tự tín hiệu sẽ hướng ribosome đến màng ER. Bởi vì các protein
có chuỗi tín hiệu ER được dịch mã khi chúng được tạo ra, không cần thêm năng lượng cho
việc vận chuyển chúng; độ giãn dài của mỗi polypeptide cung cấp lực đẩy cần thiết để đẩy
chuỗi phát triển qua màng ER. Hình 15-12 Lưới nội chất là
mạng lưới rộng nhất trong các
tế bào nhân chuẩn. (A) Ảnh
hiển vi huỳnh quang tế bào thực
vật sống cho thấy ER là một
mạng lưới phức tạp các ống. Tế
bào ở đây đã được biến đổi gen
để chứa protein huỳnh quang
trong lòng ER. Chỉ một phần của
mạng ER được hiển thị. (B) Ảnh
hiển vi điện tử cho thấy ER hạt
trong tế bào từ tuyến tụy chó,
nó tạo và tiết một lượng lớn
enzyme tiêu hóa. Tế bào chất
chứa đầy các túi ER được đóng
gói chặt chẽ, được gắn với các
(A) (B) ribosome. Một phần của nhân
10µm 200nm
và lớp vỏ nhân của nó có thể
Khi một phân tử mRNA được dịch mã, nhiều ribosome liên được nhìn thấy ở phía dưới bên
kết với nó, tạo thành một polyribosome (thảo luận trong trái; lưu ý rằng màng nhân ngoài
Chương 7). Trong trường hợp phân tử mRNA mã hóa protein liên tục với ER, gắn với ribosome
(A: sự cho phép của Petra
bằng chuỗi tín hiệu ER, polyribosome được gắn vào màng ER Boevink và Chris Hawes; B: sự
bởi các chuỗi polypeptide đang phát triển,đã được chèn vào cho phép của Lelio Orci.)
màng ER (Hình 15-13).

Protein hòa tan được tạo ra trên ER được đưa vào ER lumen
Hai thành phần protein giúp hướng dẫn các chuỗi tín hiệu ER đến màng ER: (1) một hạt
nhận dạng tín hiệu (SRP), có trong tế bào chất, liên kết đến cả chuỗi ribosome và chuỗi tín
hiệu ER khi nó xuất hiện (dịch mã) từ ribosome và (2) một thụ thể SRP, được gắn trong
màng ER, nhận ra SRP. Liên kết SRP với ribosome bộc lộ chuỗi tín hiệu ER làm chậm quá
trình tổng hợp protein bởi ribosome đó cho đến khi SRP gắn với thụ thể SRP trên ER. Khi
được gắn kết, SRP được giải phóng, thụ thể chuyển ribosome đến một bộ vận chuyển
protein trong màng ER và việc tổng hợp protein được tiếp tục. Chuỗi polypeptide sau đó
được luồn qua màng ER thông qua một kênh trong quá trình vận chuyển (Hình 15 sắt14).
Do đó, thụ thể SRP và SRP hoạt động như những “người mai mối” phân tử, hợp nhất các
ribosome đang tổng hợp protein với chuỗi tín hiệu ER và các kênh dịch mã có sẵn trong
màng ER.
Ngoài việc định hướng các protein tới ER, chuỗi tín hiệu mà đối với các protein hòa tan
hầu như luôn luôn ở đầu N, đầu tiên sẽ kết thúc tổng hợp để mở kênh trong trình vận chuyển
protein. Trình tự này vẫn bị ràng buộc với kênh, trong khi phần còn lại của chuỗi
polypeptide được luồn qua màng như một vòng lớn. Nó được loại bỏ bởi một peptidase tín
 hiệu xuyên màng, có một vị trí hoạt động đối diện với phía bên của màng ER. Chuỗi tín
hiệu bị cắt sau đó được giải phóng từ kênh chuyển vào lớp lipid kép và thoái biến nhanh
chóng.
mRNA mã hóa một protein
không có chuỗi tín hiệu ER vẫn
Hình 15-13 Một nhóm còn tự do trong tế bào chất
ribosome phổ biến được sử Polyribosome tự do trong tế bào chất

dụng để tổng hợp tất cả các

protein được mã hóa bởi bộ
gen hạt nhân. Ribosome đang
dịch mã protein không có chuỗi
tín hiệu ER vẫn tự do trong tế CHU KÌ RIBOSOME TỰ DO
bài chất. Các ribosome đang Kéo dài chuỗi polypeptide
dịch mã các protein có chứa trong tế bào chất

chuỗi tín hiệu ER (màu đỏ) trên

chuỗi polypeptide sẽ được Các tiểu đơn vị của ribosome
chuyển đến màng ER. Nhiều trong tế bào chất

ribosome liên kết với từng phân

tử mRNA, tạo thành một
polyribosome. Vào cuối mỗi
CHU KÌ RIBOSOME GẮN MÀNG
vòng tổng hợp protein, các tiểu
đơn vị ribosome được giải Tín hiệu ER Polyribosome gắn vào ER
phóng và nối lại nhóm chung
trong tế bào chất. Như chúng ta
thấy trong thời gian ngắn, chuỗi Tế bào chất
ribosome và tín hiệu liên kết với
kênh ER và kênh dịch chuyển mRNA mã hóa một protein Protein vận chuyển
phức tạp hơn minh họa ở đây. với chuỗi tín hiệu ER được
ER lumen
nhắm mục tiêu đến ER

Màng ER

Khi đầu C của protein hòa tan đã đi qua kênh vận chuyển, protein sẽ được giải phóng vào
trong lumen ER (Hình 15-15). Hình 15-14 Một chuỗi tín hiệu ER
và SRP hướng một ribosome đến
màng ER. SRP liên kết với cả chuỗi
tín hiệu ER và ribosome, do đó làm
mARN Ribosome
chậm quá trình tổng hợp protein
Tế bào chất
của ribosome. Sau đó, phức hợp
ribosome SRP gắn vào thụ thể SRP
Chuỗi SRP trên màng ER. SRP được giải
polypeptide phóng, chuyển ribosome từ thụ
được kéo dài thể SRP đến một bộ vận chuyển
Tín hiệu ER protein trong màng ER. Quá trình
Thụ thể SRP Protein vận
ER lumen tổng hợp protein được tiếp tục và
chuyển protein vận chuyển bắt đầu
chuyển polypeptide đang phát
triển qua lớp kép lipid.
 Chuỗi polypeptide
được kéo dài
Hình 15-15 Một protein hòa tan đi qua
Đoạn tín Kênh vận chuyển Phân cắt chuỗi màng ER và đi vào lumen. Protein vận
hiệu đóng tín hiệu chuyển liên kết chuỗi tín hiệu và luồn
phần còn lại của polypeptide qua lớp kép
Tế bào chất lipid như một vòng. Tại một số thời điểm
trong quá trình dịch mã, peptide tín hiệu
ER lumen được tách ra khỏi protein đang kéo dài
bởi một peptidase tín hiệu. Chuỗi tín hiệu
Protein vận Peptidase
bị cắt này được đẩy vào màng kép, nơi nó
chuyển
bị phân cắt. Khi quá trình tổng hợp
protein hoàn tất, polypeptide sẽ được
giải phóng dưới dạng protein hòa tan vào
lumen ER và kênh vận chuyển sẽ đóng lại.
Ribosome liên kết màng không được biểu
diễn ở đây

Tín hiệu bắt đầu và dừng xác định sự sắp xếp

Câu hỏi 15-3
của một loại protein xuyên màng trong
Giải thích làm thế nào một phân tử màng kép lipid.
mRNA có thể vẫn gắn liền với màng
Không phải tất cả các protein được tạo ra bởi các
ER trong khi ribosome tham gia dịch
ribosome gắn ER đều được giải phóng vào trong lumen
mã nó được giải phóng và quay lại tế
bào chất sau mỗi vòng dịch mã. ER. Một số vẫn được gắn trong màng ER dưới dạng
protein màng. Quá trình dịch mã cho các protein như
vậy phức tạp hơn so với các protein hòa tan, như một số phần của chuỗi polypeptide phải
được chuyển đến vị trí hoàn toàn xuyên lớp kép lipid, trong khi các phần khác vẫn cố định
trong màng.
Trong trường hợp đơn giản nhất, đó là protein xuyên màng với một phân đoạn kéo dài qua
màng duy nhất, chuỗi tín hiệu đầu N bắt đầu chuyển vị trí giống như protein hòa tan. Nhưng
việc vận chuyển bị dừng lại bởi một chuỗi acid amin kỵ nước bổ sung, trình tự dừng vận
chuyển, dọc theo chuỗi polypeptide. Tại thời điểm này, kênh vận chuyển giải phóng các
chuỗi polypeptide đang kéo dài vào trong lớp kép lipid. Chuỗi tín hiệu đầu N bị cắt, trong
khi đó chuỗi tín hiệu dừng vẫn ở trong lớp kép, trong đó nó tạo thành một đoạn kéo dài
hình xoắn ốc neo protein vào trong màng. Kết quả là protein kết thúc dưới dạng protein
xuyên màng đơn được đưa vào màng với sự định hướng xác định đối với đầu N ở phía bên
lumen của màng keép lipid và đầu C ở phía tế bào chất (Hình 15-16). Sau khi được đưa
vào màng, protein xuyên màng không thay đổi hướng của nó, được giữ lại trong suốt quá
trình tạo túi vận chuyển và dung hợp tiếp theo.
Trong một số protein xuyên màng, chuỗi tín hiệu sẽ bên trong, thay vì đầu N, chuỗi tín
hiệu được sử dụng để bắt đầu chuyển protein; trình tự tín hiệu nội bộ này, được gọi là trình
tự bắt đầu vận chuyển, không bao giờ bị xóa khỏi các polypeptide. Sự sắp xếp này xảy ra
trong một số protein xuyên màng trong đó chuỗi polypeptide xuyên qua lớp kép lipid nhiều
lần
Hình 15-16 Một protein
xuyên màng được giữ lại
trong lớp kép lipid. Chuỗi
tín hiệu ER đầu N (màu đỏ)
Tín hiệu dừng
bắt đầu vận chuyển như
trong Hình 15-15. Ngoài ra,
protein cũng chứa một
Tế bào chất
chuỗi kỵ nước thứ hai, hoạt
động như một chuỗi dừng
vận chuyển (màu cam). Khi ER lumen
chuỗi này đi vào kênh vận
chuyển, kênh đưa chuỗi
polypeptide đang kéo dài
sang một bên vào lớp kép
lipid. Chuỗi tín hiệu đầu N bị
cắt, để lại protein xuyên
màng được neo trong màng.
Protein tổng hợp tiếp về
phía tế bào chất sau đó tiếp
tục hoàn thành
Câu hỏi 15-4
A. Dự đoán định hướng trong màng
của một protein được tổng hợp với
chuỗi tín hiệu bên trong (được hiển
thị là chuỗi bắt đầu vận chuyển màu
đỏ trong Hình 15-17) nhưng không
chứa chuỗi dừng vận chuyển.
B. Tương tự, dự đoán định hướng
trên màng của một protein được
tổng hợp với chuỗi tín hiệu phân cắt
đầu N theo sau là chuỗi dừng vận
chuyển, sau đó là một chuỗi chuyển
bắt đầu vận chuyển.
C. Sự sắp xếp nào của các chuỗi tín
hiệu sẽ cho phép chèn một protein
đa bội với số lượng các đoạn xuyên
màng là số lẻ?
phân khúc?
Tín hiệu bắt
đầu kị nước COOH
kị nước
NH2 Tín hiệu dừng
đi vào kênh
NH2
Protein vận
Peptidase
chuyển
Protein xuyên màng
ER trưởng thành
Trong những trường hợp này, các chuỗi tín hiệu kỵ
nước được cho là hoạt động theo cặp: một chuỗi bắt
đầu vận chuyển bên trong phục vụ cho việc bắt đầu vận
chuyển, tiếp tục cho đến khi đến trình tự dừng vận
chuyển; hai chuỗi kỵ nước sau đó được giải phóng vào
màng đôi, trong đó chúng vẫn tồn tại dưới dạng các
vòng xoắn α kéo qua màng (Hình 15-17). Trong các
phức hợp protein xuyên màng nhiều lần, trong đó nhiều
xoắn ốc kỵ nước trải dài trên lớp kép, các cặp bổ sung
bắt đầu và dừng vận chuyển có trong một chuỗi tạo sự
vận chuyển chuỗi polypeptide và chuỗi khác dừng vận
chuyển gây ra sự giải phóng polypeptide, và cứ như
vậy cho các lần bắt đầu và dừng tiếp theo liên tục như
vậy. Do đó, các protein đó được khâu vào lớp kép lipid
khi chúng đang được tổng hợp, theo một cơ chế giống
như hoạt động của máy may.
Chúng ta đã xem xét làm thế nào các protein xâm nhập
vào lumen ER hoặc được gắn vào trong màng ER, bây
giờ chúng ta thảo luận về cách chúng được vận chuyển
bằng túi vận chuyển.
Hình 15-17 Một protein xuyên Tín hiệu dừng kị nước
NH2
màng kép có chuỗi tín hiệu ER
bên trong. Chuỗi bên trong này
(màu đỏ) không chỉ hoạt động NH2 COOH NH2
NH2
như một tín hiệu bắt đầu vận
chuyển, nó còn giúp neo Tín hiệu dừng
Tín hiệu bắt
đi vào kênh
protein trong màng. Giống như đầu kị nước
chuỗi tín hiệu ER đầu N, chuỗi Tế bào chất
tín hiệu bên trong được SRP
nhận ra, nó mang ribosome đến
màng ER (không hiển thị). Khi ER lumen
một chuỗi dừng chuyển (màu
Protein vận
cam) đi vào kênh vận chuyển,
chuyển
kênh đưa cả hai chuỗi vào lớp
lipid kép. Cả chuỗi bắt đầu vận
chuyển cũng như chuỗi dừng
chuyển đều bị cắt, và toàn bộ Protein xuyên màng
chuỗi polypeptide vẫn được ER trưởng thành
neo trong màng như potein
xuyên màng 2 lần. Các protein
xuyên màng nhiều lần hơn chứa
các cặp trình tự bắt đầu và dừng
chuyển tiếp, và quá trình tương
tự được lặp lại cho mỗi cặp.

Vận chuyển bằng túi

Việc xâm nhập vào lumen ER hoặc màng thường chỉ là bước đầu tiên trên con đường đến
đích khác. Điểm đến đó, ban đầu ít nhất, nói chung là bộ máy Golgi; ở đó, protein và lipid
được sửa đổi và sắp xếp để chuyển đến các nơi khác. Vận chuyển từ ER đến bộ máy Golgi,
và từ bộ máy Golgi đến các khoang khác của hệ thống nội màng, được thực hiện bởi sự
nảy chồi liên tục và hợp nhất của túi vận chuyển. Sự vận chuyển bằng túi này kéo dài ra
bên ngoài từ ER đến màng sinh chất và vào bên trong từ màng sinh chất đến lysosome, do
đó cung cấp các tuyến giao tiếp giữa bên trong tế bào và môi trường xung quanh. Khi
protein và lipid được vận chuyển ra ngoài dọc theo các con đường này, nhiều trong số
chúng trải qua các loại biến đổi hóa học khác nhau,chẳng hạn như việc bổ sung các chuỗi
bên carbohydrate.
Trong phần này, chúng ta sẽ thảo luận về cách các túi vận chuyển protein và màng giữa
các khoang nội bào, cho phép các tế bào ăn, uống và tiết ra. Chúng ta cũng xem xét làm
thế nào các túi vận chuyển này được hướng đến đích thích hợp của chúng, có thể là một cơ
quan của hệ thống nội màng hoặc màng sinh chất.

Vận chuyển bằng túi mang protein hòa tan và màng giữa các khoang.
 Vận chuyển bằng túi giữa các khoang được bao bọc bởi màng của hệ thống nội màng có tổ
chức cao. Một con đường bài tiết ra bên ngoài chính bắt đầu bằng việc tổng hợp protein
trên màng ER và sự xâm nhập của chúng vào ER và nó dẫn qua bộ máy Golgi đến bề mặt
tế bào; tại bộ máy Golgi, một đường khác dẫn qua các endosome đến lysosome. Một con
đường nhập bào vào bên trong, chịu trách nhiệm cho sự ăn vào và phân giải của các phân
tử ngoại bào, di chuyển các vật liệu từ màng sinh chất, thông qua endosome, đến lysosome
(Hình 15-18).
Để hoạt động tối ưu, mỗi túi vận chuyển nảy chồi ra từ một phần khoang phải mang theo
nó chỉ các protein phù hợp với đích đến và phải dung hợp chỉ với màng mục tiêu thích hợp.
Ví dụ, một túi vận chuyển hàng hóa từ bộ máy Golgi đến màng sinh chất, phải loại trừ các
protein tồn tại trong bộ máy Golgi và nó phải hợp nhất chỉ với màng sinh chất chứ không
phải với bất kỳ nơi nào khác. Trong khi tham gia vào dòng vận chuyển liên tục của các
khoang màng, mỗi bào quan phải duy trì bản sắc riêng biệt của nó, nghĩa là, thành phần
protein và lipid đặc biệt của nó. Tất cả các sự kiện nhận dạng này phụ thuộc vào các protein
được hiển thị trên bề mặt của túi vận chuyển. Như chúng ta sẽ thấy, các loại túi vận chuyển
khác nhau di chuyển giữa các bào quan khác nhau, mỗi loại mang một bộ phân tử riêng
biệt. Hình 15-18 Các túi vận chuyển
nảy chồi từ màng này và dung
Lysosome Màng sinh hợp với màng khác, mang thành
Màng nhân Endosome chất
Nhập bào phần màng và protein hòa tan
muộn
Mạng lưới
giữa các khoang của hệ thống nội
nội chất màng và màng sinh chất. Màng
của mỗi ngăn hoặc túi duy trì
hướng của nó, nên, phía tế bào
Endosome
sớm
chất luôn phải đối mặt với tế bào
chất và phía không tế bào chất
phải đối mặt với lòng của khoang
Túi vận hoặc bên ngoài của tế bào (xem
chuyển
Hình 11-18). Khoảng ngoại bào và
Xuất bào từng khoang được bao bọc bởi
màng (màu xám) liên hệ với nhau
bằng các túi vận chuyển. Trong
Bộ máy Golgi Tế bào chất
con đường xuất ra ngoài (mũi tên
đỏ), các phân tử protein được vận
Khoảng ngoại bào
chuyển từ ER, qua bộ máy Golgi,
đến màng sinh chất hoặc (qua
Túi vận chuyển nảy chồi được thúc đẩy bởi sự endosome sớm và muộn) đến
lắp ráp của một lớp vỏ protein. lysosome. Trong con đường nhập
bào (mũi tên xanh), các phân tử
Các túi vận chuyển nảy chồi từ màng thường có lớp vỏ ngoại bào được đưa vào (nội bào)
trong các túi có nguồn gốc từ
protein đặc biệt trên bề mặt tế bào học của chúng và do đó
màng sinh chất và được chuyển
được gọi là túi bọc. Sau khi nảy chồi từ cơ quan mẹ của nó, đến endosome sớm và, vào
túi sẽ phủ lớp lông của nó, cho phép màng của nó tương tác lysosome qua endosome muộn.
trực tiếp với màng mà nó sẽ hợp nhất. Các tế bào sản xuất
một số loại túi vận chuyển, mỗi loại có một đặc điểm vỏ protein. Vỏ phục vụ ít nhất hai
chức năng: nó giúp định hình màng vào một chồi và bắt các phân tử để vận chuyển trở đi.
Các túi vận chuyển được nghiên cứu tốt nhất là những cái có vỏ ngoài làm bằng protein
clathrin. Các túi được bọc clathrin này chồi từ cả bộ máy Golgi trên con đường xuất ra
bên ngoài và từ màng sinh chất trên con đường nhập bào vào bên trong. Ví dụ, tại màng
sinh chất, mỗi túi bắt đầu như một hố được phủ clathrin. Các phân tử clathrin lắp ráp thành
một mạng lưới giống như trên bề mặt tế bào của màng tế bào và chính quá trình lắp ráp
này bắt đầu định hình màng thành một túi (Hình 15-19).

Hình 15-19 Phân tử Clathrin tạo lồng giống như cái giỏ giúp tạo
hình màng thành túi. (A) Ảnh hiển vi điện tử cho thấy chuỗi các sự
kiện trong sự hình thành một túi được phủ clathrin từ một hố phủ
lớp clathrin. Các hố và túi bọc clathrin được hiển thị ở đây lớn bất
thường và đang được hình thành tại màng sinh chất của một tế bào
trứng gà. Chúng tham gia vào việc hấp thụ các hạt làm từ lipid và
protein vào tế bào trứng để hình thành lòng đỏ. (B) Ảnh hiển vi điện
tử cho thấy nhiều lỗ và lớp được phủ clathrin vừa chớm nảy chồi từ
bề mặt bên trong của màng sinh chất của các tế bào da nuôi cấy.
(A: sự cho phép của M.M.Perry và A.B. Gilbert, J. Cell Sci. 39:257-
272, 1979. Với sự cho phép của Công ty Biologists Ltd; B: từ J.
Heuser, J. Cell Biol. 84:560-583, 1980. Với sự cho phép của Nhà xuất
bản Đại học Rockefeller.)

Một protein liên kết GTP nhỏ gọi là dynamin lắp ráp như một vòng quanh cổ của mỗi hố
có vỏ bọc. Cùng với các protein khác được tuyển vào cổ của túi vận chuyển, dynamin làm
cho vòng bị co lại, do đó bó các túi khỏi màng mẹ của nó. Các loại túi vận chuyển khác,
với các protein vỏ khác nhau, cũng tham gia vào vận chuyển túi. Chúng hình thành theo
cách tương tự và mang các bộ phân tử đặc trưng của riêng mình giữa mạng lưới nội chất,
bộ máy Golgi và màng sinh chất. Nhưng làm thế nào để một túi vận chuyển chọn hàng hóa
cụ thể của nó? Cơ chế này được hiểu rõ nhất đối với các túi được phủ clathrin
 Túi vận chuyển
có vỏ
Vỏ clathrin

Cởi vỏ

Tạo túi vận

chuyển
adaptin
Thụ thể adaptin
Túi vận chuyển trần

dynamin
Tế bào chất

Khoang ngoại bào

Phân tử cần
vận chuyển

Clathrin tự nó không đóng vai trò trong việc lựa Hình 15-20 Túi bọc Clathrin vận chuyển các
chọn các phân tử cụ thể để vận chuyển. Đây là phân tử hàng hóa được lựa chọn. Ở đây, như
chức năng của lớp protein thứ hai được gọi là trong Hình 15, 19, các túi vận chuyển được hình
adaptin, giúp bảo đảm lớp phủ clathrin gắn vào thành từ màng sinh chất. Các thụ thể, với các
phân tử cần vận chuyển, được bắt giữ bởi các
màng túi và giúp chọn phân tử hàng hóa để vận adaptin, chúng cũng liên kết các phân tử clathrin
chuyển. Các phân tử cần vận chuyển mang tín với bề mặt tế bào chất của túi nảy chồi. Protein
hiệu vận chuyển cụ thể được nhận biết bởi các dynamin lắp ráp quanh cổ của các túi vừa nảy
thụ thể hàng hóa trong Golgi hoặc màng sinh chổi; sau khi được lắp ráp, các phân tử dynamin
chất. Adaptin giúp bắt các phân tử cụ thể bằng là các GTPase đơn phân (đã thảo luận trong
Chương 16) với sự giúp đỡ của các protein khác
cách bẫy các thụ thể hàng hóa liên kết chúng. được lựa chọn vào cổ (không được hiển thị), tách
Theo cách này, một tập hợp các phân tử được túi ra khỏi. Sau khi nảy chồi hoàn tất, các protein
lựa chọn, liên kết với các thụ thể cụ thể của của lớp vỏ được loại bỏ và túi có thể hợp nhất với
chúng, được tích hợp vào trong lòng của mỗi màng đích của nó. Protein vỏ chức năng tương
túi vận chuyển phủ clathrin mới hình thành tự được tìm thấy trong các loại túi vận chuyển
khác.
(Hình 15-20). Có nhiều loại khác nhau: các
adaptin liên kết các thụ thể hàng hóa trong màng sinh chất, ví dụ, không giống như những
thứ liên kết các thụ thể hàng hóa trong bộ máy Golgi, phản ánh sự khác biệt trong các phân
tử được vận chuyển từ mỗi nguồn này.
Một loại túi tráng khác, được gọi là túi bọc COP (COP là viết tắt của lớp vỏ protein “coat
protein”), có liên quan đến việc vận chuyển các phân tử giữa ER và bộ máy Golgi và từ
một bộ phận của bộ máy Golgi sang bộ phận khác (Bảng 15-4)
 Bảng 15-4 Một số túi vận chuyển có vỏ bọc

Các loại túi vận

Vỏ protein Bắt nguồn Nơi đến
chuyển vó vỏ bọc

Lysosome (thông qua

Vỏ clathrin Clathrin + adaptin 1 Bộ máy Golgi
endosome)

Vỏ clathrin Clathrin + adaptin 2 Màng sinh chất Endosome

ER Bộ máy Golgi
Mặt cis của bộ máy Mặt cis của bộ máy
Vỏ COP Protein COP
Golgi Golgi
Bộ máy Golgi ER

Vận chuyển kết nối phụ thuộc protein tether và SNAREs

Sau khi một túi vận chuyển nảy chồi từ một màng, nó
Câu hỏi 15-5 phải tìm đường đến đích chính xác để cung cấp các
Sự nảy chồi của các túi bọc clathrin chất được vận chuyển bên trong nó. Thông thường, túi
từ màng sinh chất tế bào nhân thực được vận chuyển tích cực bởi các protein vận động di
có thể được quan sát thấy khi chuyển dọc theo các sợi của khung xương tế bào, như
adaptin, clathrin và dynamin-GTP đã thảo luận trong Chương 17.
được thêm vào màng. Bạn sẽ quan
sát những gì nếu bạn bỏ qua (A) Khi một túi vận chuyển đã đến mục tiêu của nó, nó
Adaptin, (B) Clathrin, hay (C) phải nhận ra và cập bến với cơ quan cụ thể của nó. Chỉ
sau đó, màng túi mới có thể hợp nhất với màng đích.
Dynamin? (D) Bạn sẽ quan sát những
Tính đặc hiệu ấn tượng của vận chuyển bằng túi cho
gì nếu một đoạn màng sinh chất có
nguồn gốc từ một tế bào nhân sơ?thấy rằng mỗi loại túi vận chuyển trong tế bào bộc lộ
các dấu phân tử trên bề mặt của nó giúp xác định nguồn
gốc và chất cần được vận chuyển của túi. Các tín hiệu
này phải được nhận ra bằng các thụ thể bổ sung trên màng đích thích hợp, bao gồm cả
màng sinh chất.
Quá trình nhận ra phụ thuộc vào một họ GTPase đơn phân khác nhau được gọi là protein
Rab. Các protein Rab cụ thể trên bề mặt của từng loại túi được nhận biết bằng các protein
tethering tương ứng trên bề mặt của màng đích. Mỗi bào quan và mỗi loại túi vận chuyển
mang một sự kết hợp độc đáo của protein Rab, đóng vai trò là các dấu phân tử cho từng
loại màng. Hệ thống mã hóa của các protein Rab và tethering phù hợp giúp đảm bảo rằng
việc vận chuyển các túi chỉ hợp nhất với màng chính xác.
Thêm vào đó, sự nhận ra còn được hỗ trợ bởi một họ các protein xuyên màng được gọi là
SNAREs. Khi protein tethering đã liên kết được một túi bằng cách nắm giữ protein Rab
của nó, SNAREs trên túi (được gọi là v-SNARE) tương tác với SNAREs bổ sung trên
màng đích (được gọi là t-SNAREs), chắc chắn lắp ghép túi vào vị trí (Hình 15-21).
Các SNAREs tương tự liên quan đến việc lắp ghép cũng đóng vai trò trung tâm trong việc
xúc tác phản ứng tổng hợp màng cần thiết cho một túi vận chuyển để vận chuyển hàng hóa
của nó. Sự dung hợp không chỉ cung cấp các chất hòa tan của túi vào bên trong cơ quan
đích, nó cũng thêm màng túi vào màng của cơ quan (xem Hình 15-21).
Hình 15-21 Protein Rab,
Thụ thể
protein tethering và SNARE Protein cần
giúp vận chuyển trực tiếp các vận chuyển
túi đến màng đích của chúng.
v-SNARE
Một protein tethering sợi trên
màng liên kết với protein Rab Gắn kết
trên bề mặt túi. Sự tương tác
cho phép các túi gắn vào màng
đích. Một v-SNARE trên túi sau
đó liên kết với một t-SNARE bổ Kết nối
sung ở màng đích. Trong khi đó,
Protein tethering
protein Rab và tethering cung Dung hợp
cấp sự nhận biết giữa túi và
màng đích, các protein SNARE Tế bào chất
đảm bảo rằng các túi vận đến
đúng màng đích của chúng. Các Màng đích t-SNARE Giải phóng protein
protein SNARE này cũng xúc tác
cho phản ứng dung hợp hai
màng (Hình 15-22)

Sau khi được kết nối, sẽ có sự hợp nhất của một túi với màng đích của nó, đôi khi đòi hỏi
một tín hiệu kích thích đặc biệt. Trong khi đó, việc kết nối chỉ yêu cầu hai màng đến đủ
gần để các SNAREs nhô ra từ hai lớp màng lipid tương tác, phản ứng dung hợp đòi hỏi
một cách tiếp cận gần gũi hơn nhiều: hai lớp kép phải nằm trong phạm vi 1,5nm để lipid
của chúng có thể hòa lẫn nhau. Đối với sự đến gần gần này, nước phải được thay thế từ bề
mặt ưa nước của màng Một quá trình cực kỳ bất lợi về mặt năng lượng và do đó ngăn ngừa
màng không bị dung hợp ngẫu nhiên. Vậy nên, tất cả sự dung hợp màng trong các tế bào
phải được xúc tác bởi các protein đặc biệt tập hợp lại để tạo thành một phức hợp dung hợp,
cung cấp phương tiện để vượt qua hàng rào năng lượng này. Các protein SNARE tự xúc
tác cho quá trình dung hợp: một khi phản ứng dung hợp được kích hoạt, các v-SNARE và
t-SNARE quấn lấy nhau,do đó hoạt động giống như một chiếc tời kéo hai lớp lipid gần
nhau (Hình 15-22)
 KẾT NỐI DUNG HỢP MÀNG Hình 15-22 Sau khi kết nối,
Túi vận
chuyển protein SNARE có thể xúc tác
Kết nối túi Kết hợp Dung hợp
vận chuyển cho phản ứng dung hợp của túi
màng màng kép lipid
và màng đích. Sau khi được
kích hoạt, sự kết hợp chặt chẽ
giữa v-SNAREs và t-SNAREs đã
kéo hai lớp lipid kép vào vị trí
gần nhau. Lực của SNAREs cuộn
Màng đích lại với nhau ép chặt bất kỳ phân
tử nước nào bị giữ lại giữa hai
màng, cho phép lipid của chúng
Con đường xuất bào chảy với nhau để tạo thành một
lớp kép liên tục. Trong một tế
Vận chuyển bằng túi không bị hạn chế ở bên trong của tế bào. bào, các protein khác được
Nó kéo dài đến màng sinh chất. Các protein, lipid và chọn vào vị trí dung hợp giúp
carbohydrate mới được tạo ra được cung cấp từ ER, thông hoàn thành quá trình này. Sau
qua bộ máy Golgi, đến bề mặt tế bào bằng cách vận chuyển khi hợp nhất, các SNAREs được
tách ra để chúng có thể được
các túi kết hợp với màng sinh chất trong quá trình xuất bào sử dụng lại.
(xem Hình 15-18). Mỗi phân tử di chuyển dọc theo tuyến
đường này đi qua một chuỗi cố định của các khoang được bao bọc bởi màng và thường
được biến đổi hóa học trên đường đi.
Trong phần này, chúng ta sẽ đi theo con đường bên ngoài của protein khi chúng di chuyển
từ ER - nơi chúng được tạo ra và sửa đổi, thông qua bộ máy Golgi - nơi chúng được sửa
đổi và sắp xếp, đến màng sinh chất. Khi một protein chuyển từ khoang này sang khoang
khác, nó được theo dõi để kiểm tra xem nó đã được cuộn gấp đúng cách và được lắp ráp
đúng với các đích đến thích hợp chưa, do đó, chỉ các protein được xây dựng chính xác mới
được vận chuyển đến bề mặt tế bào. Với các protein không chính xác, thường chiếm đa số,
se bị phân cắt bên trong tế bào. Chất lượng, dường như, quan trọng hơn sự tiết kiệm khi
nói đến việc sản xuất và vận chuyển protein thông qua con đường này.

Hầu hết các protein được thay đổi hóa trị trong ER.
Hầu hết các protein đi vào ER được biến đổi hóa học ở đó. Liên kết disulfide được hình
thành do quá trình oxy hóa các cặp chuỗi bên cystein (xem Hình 4-30), một phản ứng được
xúc tác bởi một enzyme nằm trong lòng ống ER. Các liên kết disulfide giúp ổn định cấu
trúc của protein sẽ gặp phải các enzyme phân giải và thay đổi pH bên ngoài tế bào, sau khi
chúng được tiết ra hoặc sau đó chúng được kết hợp vào màng sinh chất. Liên kết disulfide
không hình thành trong tế bào chất vì môi trường ở đó là khử.
Nhiều protein xâm nhập vào màng ER hoặc màng ER được nối với glycoprotein trong ER
bằng cách liên kết hóa trị với chuỗi bên oligosacarit ngắn phân nhánh gồm nhiều loại
đường. Quá trình glycosyl hóa này được thực hiện bởi các enzyme glycosyl hóa có trong
ER nhưng không có trong tế bào chất. Rất ít protein trong tế bào chất được glycosyl hóa
và những protein chỉ có một đường duy nhất gắn vào chúng. Các oligosacarit trên protein
có thể phục vụ các chức năng khác nhau. Chúng có thể bảo vệ protein khỏi sự phân hủy,
giữ nó trong ER cho đến khi nó được cuộn gấp đúng cách, hoặc giúp hướng dẫn nó đến cơ
quan thích hợp bằng cách đóng vai trò là tín hiệu vận chuyển để đóng gói protein vào các
túi vận chuyển thích hợp. Khi bộc lộ trên bề mặt tế bào, oligosacarit tạo thành một phần
của lớp carbohydrate bên ngoài tế ngoài tế bào hoặc glycocalyx (xem Hình 11-33) và có
thể hoạt động trong việc nhận ra một tế bào khác.
Trong ER, các loại đường riêng lẻ không được thêm
từng loại một vào protein để tạo ra chuỗi bên Câu hỏi 15-6
oligosacarit. Thay vào đó, một oligosacarit phân
nhánh được tạo hình sẵn có chứa tổng cộng 14 loại Tại sao việc thêm một khối 14 phân
tử đường vào một protein trong ER
đường được gắn vào khối cho tất cả các protein mang
lại thuận lợi hơn thay vì xây dựng các
vị trí thích hợp cho quá trình glycosyl hóa. Các chuỗi đường từng bước trên bề mặt
oligosaccharide ban đầu được gắn vào một lipid protein bằng cách bổ sung tuần tự
chuyên dụng, được gọi là dolichol, trong màng ER; các loại đường ứng với từng loại
sau đó nó được chuyển đến nhóm amino (NH2) của enzyme khác nhau?
chuỗi bên asparagine trên protein, ngay lập tức sau khi
một mục tiêu asparagine xuất hiện trong ống thông ER trong quá trình dịch mã protein
(Hình 15-23). Việc bổ sung diễn ra trong một bước enzyme duy nhất được tách ra bởi
enzyme gắn màng (một oligosaccharyl transferase) có vị trí hoạt động của nó được phơi
bày về phía lumen của màng ER, điều này giúp giải thích tại sao protein tế bào chất không
bị glycosyl hóa theo cách này. Một chuỗi đơn giản gồm ba acid amin, trong đó có
asparagine, xác định asparagine nào trong protein nhận được oligosacarit. Các chuỗi bên
oligosacarit liên kết với nhóm NH2 asparagine trong protein được cho là liên kết N và cho
đến nay là loại liên kết phổ biến nhất được tìm thấy trên glycoprotein.
Việc bổ sung oligosacarit có 14 phân tử đường trong ER chỉ là bước đầu tiên trong một
loạt các sửa đổi tiếp theo trước khi glycoprotein trưởng thành đến bề mặt tế bào. Mặc dù
có sự tương đồng ban đầu, nhưng liên kết N oligosacarit trên glycoprotein trưởng thành rất
đa dạng. Tất cả là kết quả đa dạng từ sửa đổi rộng rãi cấu trúc tiền thân ban đầu được hiển
thị trong Hình 15-23. Quá trình xử lý oligosacarit này bắt đầu trong ER và tiếp tục trong
bộ máy Golgi.

Vận chuyển khỏi ER được kiểm soát để đảm bảo chất lượng protein.
Một số protein được tạo ra trong ER được định sẵn để hoạt động ở đó.cChúng được giữ lại
trong ER (và được đưa trở lại ER bất cứ khi nào chúng ra khỏi bộ máy Golgi) bằng chuỗi
C đầu tận gồm bốn acid amin gọi là tín hiệu duy trì ER (Bảng 15-3). Tín hiệu duy trì này
được nhận biết bởi một protein thụ thể gắn màng trong bộ máy ER và Golgi. Tuy nhiên,
hầu hết các protein đi vào ER đều được dành cho các vị trí khác; chúng được đóng gói vào
các túi vận chuyển nảy chồi từ ER và hợp nhất với bộ máy Golgi.
Hình 15-23 Nhiều protein được
glycosyl hóa ở asparagine trong ER.
Tế bào chất
Khi một asparagine thích hợp đi vào
trong lumen ER, nó bị glycosyl hóa
bằng cách thêm chuỗi bên oligosacarit
phân nhánh. Mỗi chuỗi oligosacarit
được chuyển dưới dạng một đơn vị
nguyên vẹn đến asparagine từ một
Chuỗi polypeptide
lipid được gọi là dolichol, được xúc tác đang kéo dài
bởi enzyme oligosaccharyl transferase.
Asparagine mà glycosyl hóa luôn luôn
có mặt trong trình tự tripeptide
asparagine-X-serine hoặc asparagine-
Oligosaccharide
X-threonine, nơi X có thể hầu như bất Oligosaccharide transferase
kỳ axit amin. liên kết lipid

Vận chuyển khỏi ER là rất chọn lọc. Các protein không cuộn gập đúng cách và các protein
dimeric (nhị trùng) hoặc multimeric (nhiều tiểu đơn vị) không lắp ráp đúng cách, được tích
cực giữ lại trong ER bằng cách liên kết với protein chaperone cư trú ở đó. Chaperone giữ
các protein này trong ER cho đến khi xảy ra sự gấp hoặc lắp ráp thích hợp. Chaperone ngăn
chặn các protein cuộn gấp sai lệch khỏi sự kết chùm lại với nhau, giúp điều khiển các
protein dọc theo con đường hướng tới sự gấp nếp thích hợp (Hình 15-24 và xem Hình 4-9
và 4-10); nếu việc gấp và lắp ráp đúng cách vẫn thất bại, các protein được xuất sang tế bào
chất, nơi chúng bị phân giải. Các phân tử kháng thể, ví dụ, bao gồm bốn chuỗi polypeptide
(xem Hình 4-33) tập hợp thành phân tử kháng thể hoàn chỉnh trong ER. Các kháng thể
được lắp ráp một phần, được giữ lại trong ER cho đến khi cả bốn chuỗi polypeptide được
lắp ráp; bất kỳ phân tử kháng thể nào không lắp ráp đúng cách đều bị phân giải. Theo cách
này, ER kiểm soát chất lượng protein mà nó đưa sang bộ máy Golgi.
Tuy nhiên, đôi khi, cơ chế kiểm soát chất lượng này có thể gây bất lợi cho sinh vật. Ví dụ,
đột biến chiếm ưu thế gây ra bệnh xơ nang bệnh di truyền phổ biến, dẫn đến tổn thương
phổi nghiêm trọng, tạo ra một protein vận chuyển ở màng sinh chất hơi bị sai lệch; mặc dù
protein đột biến có thể hoạt động bình thường như một kênh clorua nếu nó đến màng sinh
chất, nó vẫn được giữ lại trong ER, với những hậu quả nghiêm trọng. Do đó, căn bệnh này
xuất hiện không phải vì đột biến làm bất hoạt một protein quan trọng mà bởi vì protein
hoạt động bị các tế bào loại bỏ trước khi nó được có cơ hội để hoạt động.
 ER Hình 15-24 Chaperone ngăn chặn
các protein được cuộn gập sai
hoặc cuộn gập một phần khỏi ER.
Protein cuộn gập sai liên kết với
Protein cuộn Protein cuộn Protein protein chaperone trong lumen ER
gập sai gập đúng chaperone và được giữ lại ở đó, trong khi các
Tạo túi vận
protein gấp thông thường được
chuyển vận chuyển trong các túi vận
chuyển đến bộ máy Golgi. Nếu các
Kích thước của ER được kiểm soát bởi nhu protein bị sai lệch không thể gấp lại
cầu về protein. bình thường, chúng được vận
chuyển trở lại vào cytosol, nơi
Mặc dù chaperone giúp các protein trong ER gấp đúng chúng bị phân giải (không được
cách và giữ lại những protein sai, nhưng hệ thống kiểm hiển thị).
soát chất lượng này có thể trở nên quá tải. Khi điều đó xảy ra, các protein bị sai lệch sẽ tích
lũy trong ER. Nếu sự tích tụ đủ lớn, nó sẽ kích hoạt một chương trình phức tạp được gọi là
sự phản ứng với protein cuộn gập sai (UPR). Chương trình này nhắc tế bào sản xuất
nhiều hơn ER, bao gồm nhiều chaperone và các protein khác có liên quan với kiểm soát
chất lượng protein (Hình 15-25).
UPR cho phép một tế bào điều chỉnh kích thước ER của nó theo tải trọng của các protein
đi vào con đường bài tiết. Tuy nhiên, trong một số trường hợp, ngay cả ER mở rộng cũng
không thể đối phó và UPR hướng tế bào tự hủy bằng cách trải qua chết theo chương trình.
Một tình huống như vậy có thể xảy ra trong bệnh tiểu đường khởi phát ở người trưởng
thành, nơi các mô dần trở nên đề kháng với tác động của insulin. Để bù đắp cho sự đề
kháng này, các tế bào tiết insulin trong tuyến tụy sản xuất ngày càng nhiều insulin. Cuối
cùng, ER của chúng đạt đến công suất tối đa, tại thời điểm đó, UPR có thể kích hoạt sự
chết tế bào. Khi nhiều tế bào tiết insulin được loại bỏ, nhu cầu ở các tế bào còn sống tăng
lên, khiến cho nhiều khả năng chúng cũng sẽ chết, làm nặng thêm bệnh.