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ABSTRACT:
This laboratory was carried out with the purpose of recognizing in a practical way the theory
seen in class and deepening it. In laboratory practice number one, the importance of
microbiological sampling in food establishments (especially kitchens) was analyzed,
recognized and understood. In the second, the canning practice understood that there are foods
that are very safe for health, but if they are mishandled they can become very dangerous,
leading to death. The methodology used in the first laboratory was the collection of the sample
and later the sowing of the same in different methods (these determined by the norm), in the
second laboratory a canned product was chosen and for eight days three cans were incubated
at three temperatures, then the respective sowing was done, to finalize the reading of the same
ones, in this way, it was possible to conclude that having a safety in the establishments will be
directly reflected in the innocuousness of the foods produced by this way the health of the
commensal. This also allows us to identify the importance in the procedures of cleaning and
disinfection of the stalks and the importance of commercial sterility.
INTRODUCCIÓN:
MARCO TEÓRICO:
NORMATIVIDAD AGUA
La resolución 2674 del 2013 o el decreto 3075 de 1997 establece que la calidad de agua que se
debe utilizar en un establecimiento de alimentos debe ser de calidad potable y no solamente la
que se usa para la elaboración de alimentos, sino también para lo procesos de limpieza y
desinfección.
El decreto 1575 de 2007 del ministerio de salud y protección social, “ Sistema para la
protección y control de la calidad del Agua para consumo humano” y la resolución 2115 de
2007 señala las características, instrumento básico y la frecuencia del sistema de control y
vigilancia para la calidad del agua para el consumo humano: de igual forma, reglamentan y
determinan las condiciones óptimas para la calidad del agua potable. Esta legislación establece
que el método indicado para el análisis de agua es la filtración por membrana, pero también
expone los métodos de tubos múltiples de fermentación (NMP) y recuento en plata ( Siembra
en profundidad). Esta reglamentación obliga a que se realicen los siguientes análisis:
NORMATIVIDAD SUPERFICIES
La resolución 2674 del 2013 o el decreto 3075 de 1997 establece que la calidad de agua que se
debe utilizar en un establecimiento de alimentos debe ser de calidad potable y no solamente la
que se usa para la elaboración de alimentos, sino también para lo procesos de limpieza y
desinfección.
Según los resultados de los análisis microbiológicos realizados por los estudiantes de
Microbiología y Conservación de alimentos desde el año 2013 se han realizado una estadística
de las cuales se pueden definir unos parámetros internos para los indicadores de inocuidad en
Talleres de cocina de la Universidad de La Sabana. En el año 2015 se propusieron los
siguientes:
(Castillo, 2018)
NORMATIVIDAD DE MANIPULADORES
Según la resolución 2674 o decreto 3075, del ministerio de salud y protección social, un
manipulador es: “ toda persona que interviene directamente, en forma permanente u ocasional
en actividades de fabricación, procesamiento, preparación, envase, almacenamiento, transporte
y expendio de alimentos”. (Castillo, M; Ambrosio, A, 2015)
NORMATIVIDAD AMBIENTE
(Castillo, 2018)
NORMATIVIDAD DE ENLATADOS
Microbiología.
Método para evaluar la esterilidad comercial en los alimentos.
Olor Normal
Aspecto Característico
pH Característico
ANAEROBIOS
La bacterias anaerobias son aquellas que sólo pueden desarrollarse cuando no se cuenta con
presencia de Oxígeno y bajo condiciones de potenciales REDOX. El análisis de alimentos
envasados al vacío, se debe determinar preferentemente la fracción anaeróbica microflora.
(Adams,M, 1997, p 420-421)
TERMÓFILOS
Se considera un bacteria termófila aquellas bacterias que son capaces de creer en temperaturas
entre 40℃ - 65℃, entre ellos se encuentran algunos bacilos y clostridios
(B.stearothermophilus, B. coagulans, Cl. thermosaccharlyticum) y algunos acitinomicetos.
(Adams,M, 1997, p 101)
Clostridium spp
COLIFORMES
Las bacterias coliformes son bacterias en forma de bacilos, gram negativas que fueron
descubiertas a mediados del siglo XIX, estas eran bacterias que se encontraban en los
excrementos humanos de las personas enfermas de cólera, por lo que todas las bacterias que
aislaban eran clasificadas en esta categoría de Bacterium coli commune. Por su fácil aislamiento
y reconocimiento, se utiliza como un indicador de presencia de patógenos en el agua, por su
fácil aislamiento, reconocimiento y malas condiciones higiénico sanitarias. Estas bacterias son
patógenas (es decir que no producen endosporas) fermentadoras de lactosa (Jay, 2002).
Para ser más específicos, se tiene que hablar de E.coli si se habla de contaminación en
la comida, ya que este es un indicador de materias fecales que sobresale de las demás especies,
esto es lo que es un indicador en la industria de alimentos (Jay, 2002). Como muchas de las
bacterias Gram negativas, estas crecen en toda clase de medios y en muchos medios diferentes,
como por ejemplo, temperaturas desde -2 a 50ºC y en los alimentos se proliferan en
temperaturas desde los 3ºC, además crecen en un rango de pH grande que es de 4,4 a 9, es
necesario decir que a condiciones óptimas este tipo de microorganismos crecen en gran
cantidad y también lo hacen en medios poco probables, como lo son la sales biliares, que son
específicas para evitar el crecimiento de bacterias . (Jay, 2002)
HONGOS Y LEVADURAS
El segundo microorganismo son los hongos y en ellos las levaduras, todos pertenecientes al
reino Fungi, son tanto unicelulares, como los mohos, o como pluricelulares tipo setas, que son
más evolucionados, las levaduras son unicelulares y los dos son eucariotas (sin pared celular),
no tienen clorofila y son heterótrofos. En cuanto a la reproducción depende de la especie, esta
puede ser sexual o asexual. Los hongos son filamentosos en su mayoría, y por medio de hifas
crean micelios que pueden estar tabicados, separados o ninguna de las anteriores formando
conidias o por esporas. Dependiendo de la especie, cuando se producen esporas o ascosporas,
dependiendo de la especie, estas esporas pueden tener reproducción asexual, germinando las
esporas o por gemación, o sexual por medio de las esporas. (Mossel, D; Moreno, B; Struijk, C
,2003).
Salmonella spp
Salmonella spp es un bacilo pequeño Gram negativo que hace parte de la familia
Enterobacteriaceae, es uno de los microorganismos más importantes y representativos de los
que producen gastroenteritis alimentarias (Jay, 2002), además estas son móviles gracias a que
poseen flagelos perítricos (Brunia 2008). El crecimiento de esta bacteria se da entre 7 y 49˚C
y su crecimiento se ve reducido a temperaturas menores de 15˚C. (Lake et al 2002).
Adicionalmente al evaluar la bacteria a temperaturas extremas en las que crece, se encontró
que pueden crecer a 5,9ºC pero en medios y temperaturas específicas, por lo cual no es
concluyente, también se ha encontrado que en la carne de pollo conservadas en empaque al
vacío, esta puede sobrevivir a temperaturas de 3°C, pero sin metabolizar.
Shigella spp
La Shigella spp es una bacteria que pertenece a la familia Enterobacteriaceae, su forma es de
bacilo, es inmóvil y Gram negativa, es anaerobia facultativa, no tiene presencia de cápsula y
no es formador de esporas, esta bacteria cuenta con 4 serogrupos específicos que se han tratado
como especies las cuales son: Shigella boydii, Shigella dysenteriae , Shigella flexneri y Shigella
sonnei. Algunas de las especies de Shigella se consideran patógenas y causan gastroenteritis o
enfermedades agudas en el intestino delgado y grueso, con presencia de diarrea, fiebre, náusea,
y en algunas ocasiones toxemia, vómito y calambres. (Jay, 2002, p 494)
Staphylococcus aureus
OBJETIVOS:
Este laboratorio tenía como objetivo general el reconocer y comprender la importancia que
tiene el realizar muestreos microbiológicos en los establecimientos de comidas (especialmente
en las cocinas).
Como objetivos especif́ icos primero aprender a reconocer los planes de muestreo
microbiolgico, los cuales son pertinentes realizar en los establecimeintos que manejan
alimentos, segundo conocer el procedimiento para la evaluacion microbiológica ambiental y
del agua, reconociendo la flora microbiológica asociada, como tercer objetivo específico se
evaluará la eficacia de los procedimientos de limpieza y desinfección, partiendo de los análisis
de muestreo en las superficies. Finalmente, se buscó reconocer la microbiota presente y/o
existente en un manipulador de alimentos y sus incidencias en la inocuidad de los productos
alimenticios.
El objetivo general de este laboratorio es el de comprender que existen alimentos muy seguros
para la salud, pero si tienen una mala manipulación se pueden volver muy peligrosos,
llevándonos a la muerte. Como objetivos especif́ icos se busca verificar la eficacia del método
de esterilización comercial en la muestra escogia (salchichas), de igual manera se busca revisar
el número mínimo de mircoorganismos permitidos en los enlatados y finalmente, analizar si el
producto elegido cumplió con los controles de esterilidad comercial.
RESULTADOS LABORATORIO:
Talleres de la sabana
En la siguiente tabla se pueden apreciar los resultados de la tabla de cortar blanca, que pertenece
al restaurante escuela en la sección de terraza y que está fija al mesón, antes y después de usar
el desinfectante que se usa en el lugar:
(Tabla 2)
Superficie
AN PAPEL incontable -
En la siguiente tabla se ven expresados los datos encontrados en los medios de cultivo de
ambiente, estas tomas fueron hechas en el restaurante escuela en la sección de terraza dejando
abiertas las cajas en la parte superior de los mesones:
(Tabla 3)
Ambiental
AN 16x101 UFC/gr
En la siguiente tabla se puede ver los resultados de las toma de agua hechas en el restaurante
escuela, en la sección de terraza, en la bacha que se encuentra en la entrada del mismo espacio:
(Tabla 4)
Agua
AN Incontable
PDA 12x101 UFC/gr
Enlatados:
En las siguiente tablas se pueden ver los resultados de la incubación de tres latas de salchicha
del mismo lote a dos temperaturas diferentes, a 37º y a 55º para así hallar dos diferente clases
de microorganismos, mesófilos y termófilos. Por otro lado, se hizo la incubación en ambientes
aerobios y anaerobios, para así, encontrar alguna alteración y poder identificar el
microorganismo más fácilmente.
(Tabla 5)
Recuento 37º Ambiente Foto
En la siguiente tabla se evidencia los hallazgos de los cultivos hechos en medio líquido cerebro-
corazón, en las temperaturas de 37º, 55º y ambiente, tanto para microorganismos aerobios como
anaerobios, usando un tapón de vaselina para el últimos como se puede ver en la foto de la
tabla.
(Tabla 6)
Microorganismo 37º 55º Ambiente Foto
Aerobios Mesófilos - - -
Anaerobios Mesófilos - - -
Aerobios Termófilos - - -
Anaerobios - - -
Termófilos
DISCUSIÓN:
La discusión se llevará a cabo en tres partes, cada una para comparar los resultados de uno de
los cuatro diferentes lugares de donde se tomaron las muestras que se hicieron, como son: el
ambiente, el agua, las superficies y el manipulador, con sus respectivos indicadores, normas y
marcos de referencia. Todo esto teniendo en cuenta los microorganismos que se pueden obtener
en cada uno de los medios en los que se dio el recuento de colonias.
Primero, se discutirán los resultados de la tabla de las muestras tomadas del ambiente
en el restaurante escuela en la sección de terraza. Para esta toma se tuvieron en cuenta dos
medios de cultivo específicos, el AN para aerobios mesófilos y el PDA para mohos y levaduras,
en los cuales se encontraron para el medio PDA 9x101 UFC/gr, que comparado con las guías
de laboratorio de microbiología y conservación de los alimentos, nos da como
parámetro ≤ 50 ufc 65 cm 2/15m, por lo cual podemos evidenciar que la muestra
supera el parámetro por casi 40 UFC, lo cual nos indica una contaminación en el
ambiente por hongos y levaduras alta. Habiendo dicho esto, los resultados se pueden
explicar gracias a la cercanía y exposición de esta cocina al restaurante, y que gracias a
su diseño, presenta medios de ventilación y personas en constante tránsito, recibiendo
contaminación constante ambiental.
Segundo se hablará de las superficies, en este laboratorio se tomó como superficie una
tabla que se encuentra en el restaurante escuela, en la sección de terraza, fija al mesón. Esta es
de color blanco, presenta diferentes rasguños y hendiduras de colores oscuros como marrón.
En lo que se podía observar superficialmente en la primera toma, antes de la desinfección, era
que esta conservaba restos de comida de la preparación previa de las pizzas. En cuanto a los
medios en los cuales se hizo la incubación, se tomaron tres diferentes, el primero AN para
aerobios mesófilos, el segundo PDA para hongos y levaduras y por último VRBA para
coliformes totales o enterobacterias, tanto en cajas con medio, como en placas Petrifilm para
mayor precisión.
Por otro lado podemos evidenciar que el manipulador culple con solo uno los
requerimientos que nos dice la resolución 2674 o decreto 3075, del ministerio de salud y
protección social, un manipulador ya que solo cumple con el recuento de coliformes, pero no
de los demás. Por otro lado es importante mencionar que el manipulador que trabajamos no
estaba en las cocinas por lo cual la norma no es aplicable para estos parámetros.
CONCLUSIONES:
En la práctica de laboratorio se lograron obtener los objetivos del mismo. Primero teóricamente
se reconocio y se comprendio la importancia que tiene el realizar muestreos microbiológicos
en los establecimientos de comidas (especialmente en las cocinas). Segundo se reconocieron
los planes de muestreo microbiológico, los cuales son pertinentes realizar en los
establecimientos que manejan alimentos, Tercero, se conoció el procedimiento para la
evaluación microbiológica ambiental y del agua, reconociendo la flora microbiológica
asociada, posteriormente se evaluó la eficacia de los procedimientos de limpieza y
desinfección, partiendo de los análisis de muestreo en las superficies. Finalmente, se reconoció
la microbiota presente y/o existente en un manipulador de alimentos y sus incidencias en la
inocuidad de los productos alimenticios.
Para el segundo laboratorio se comprendió que existen alimentos muy seguros para la salud,
pero si tienen una mala manipulación se pueden volver muy peligrosos, llevándonos a la
muerte. Segundo, verificó la eficacia del método de esterilización comercial en la muestra
escogida (salchichas), Finalmente, se revisó teóricamente el número mínimo de
microorganismos permitidos en los enlatado y se analizó si el producto elegido cumplió con
los controles de esterilidad comercial.
Por último, concluimos que la utilidad de verificar estas prácticas y estos parámetros es lo que
nos permite verificar la calidad con la que cuentan los establecimientos, donde se producen los
alimentos. Además de que al tener una inocuidad en los establecimientos se verá directamente
reflejado en la inocuidad de los alimentos y por ende en la salud del comensal. Esto también
nos permite identificar la importancia en los procedimientos de limpieza y desinfección de los
establecimientos y la importancia de la esterilidad comercial.
BIBLIOGRAFÍA: