AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS

Leidy del Rosario Taimal (amleidy10@hotmail.com), Karen Lizeth Gómez Guaitarilla

(klgomez48@misena.edu.co), Hamilton Caicedo (hdcaicedo15@misena.edu.co), Luis
Fenando Alemeza (lfalemeza@misena.edu.co )
SENA- Centro ASTIN
Tecnología en Química Aplicada a la Industria
FICHA: 1619390

RESUMEN

La práctica experimental llevada a cabo, tuvo como principal objetivo reconocer los aspectos morfológicos del
crecimiento bacteriano (Acetobacter) y de hongos (Penicillium) en los medios de cultivo Agar Nutritivo y Agar
PDA respectivamente; así mismo, se emplearon técnicas de asilamiento microbiológico para obtener los
microorganismos de forma más pura. En ese sentido, para la siembra de la bacteria Acetobacter, se utilizó la
técnica de agotamiento en caja Petri, esterilizando constantemente el asa microbiológica después de cada
estría. Por otra parte, en el cultivo de agar PDA se sembró el hongo Penicillium por medio de la técnica de
punción, que como su nombre lo indica, se realiza un punto en el centro de la caja Petri depositando el micelio
seleccionado. Finalmente, ambas muestras se incubaron en posición invertida a una temperatura de 30°C para
permitir el crecimiento de los microorganismos y posteriormente observarlos.
Palabras Clave: Preparación de cultivos, esterilización, desinfección, Agar PDA, Agar Nutritivo.

1. INTRODUCCIÓN inmovilizada sobre una superficie de

un medio sólido, y separada en las
En la naturaleza habitan múltiples condiciones de crecimiento
microorganismos de diversos tipos y adecuadas dará a una consiguiente
actividades fisiológicas. Para llevar a descendencia que resultará
cabo un estudio de un determinado macroscópicamente visible y ello se le
microorganismo particular es denomina colonia. El objetivo de la
necesario separarlo de la población práctica está en reconocer las
mixta de la que se encuentra, para tal características morfológicas del
fin, se emplean técnicas de crecimiento bacteriano y de hongos en
aislamiento que conduzcan en la medios de cultivo mediante la
obtención de un cultivo de forma pura. observación macroscópica,
El proceso de aislamiento ayuda a la consiguiente ello también está de la
disposición de la descendencia mano, aprender sobre las técnicas de
aislamiento de microorganismos en
medios de cultivos sólidos en la
obtención de la manera más pura.
2. MATERIALES Y MÉTODOS
A. Morfología bacteriana:
Se realizó una descripción sobre las
colonias asignadas que fueron la
bacteria Acetobacter y el hongo
Penicillium acerca de su tipo de
crecimiento, forma, elevación, borde,
tamaño, superficie, aspecto, color y
consistencia.
respectivas estrías, cabe aclarar que
antes de realizar la técnica a emplear
se esterilizó el asa microbiológica con
la flama directa del mechero y se dejó
enfriar el asa antes de realizar las
estrías, cada vez que se hacía una
estría en la caja petri se esterilizaba el
asa microbiológica previamente y se
dejaba enfriar. Al finalizar con las
cuatro estrías se esterilizó el asa y se
tapó la caja petri con la muestra a
analizar y se dejó incubando a 30ºC en
una posición invertida por un tiempo
de 24 horas.

C. Siembra en caja petri por

B. Siembra en cajas Petri por
Técnica de Punción:
Técnica de Agotamiento:
Se seleccionó la colonia a tomar que
Se comenzó con la limpieza de la
fue el hongo Penicillium; se inició con
cabina de flujo laminar con alcohol al
la previa esterilización del asa
70%, luego, se encendió el mechero
microbiológica y se inoculó el
dentro de la cabina (en el centro) y
microorganismo con una ligera
junto a este se pusieron las cajas petri
punción en el centro de la caja petri a
con los microorganismos asignados:
utilizar (agar estéril PDA), y se dejó
la bacteria Acetobacter y la caja petri
incubando la muestra a 30ºC en una
con agar nutritivo estéril. Luego, se
posición invertida en el tiempo de 24
seleccionó la caja petri estéril y la otra
horas.
que contenía el microorganismo para
así cultivarla en la caja petri con agar
la cual se tomó una muestra con el asa
microbiológica y se continuó con la
técnica de agotamiento realizando sus
 otras características observadas en el
3. ANÁLISIS RE RESULTADOS cultivo se describen en la tabla Nº2.

Una vez preparado el medio de cultivo

se realizó la siembra de dos La caja Petri que contenía la población
microorganismos, el hongo de Penicillium se encontró
Penicillium, y la bacteria Acetobacter; contaminada con Aspergillus, por lo
el crecimiento de los microrganismos tanto la formación de la colonia así
y características de la morfología en como su morfología macroscópica no
colonia se describe en la tabla Nº 2. La se puede delimitar, sin embargo esta
morfología colonial, es una debe presentar forma filamentosa,
característica indispensable a tener en debe presentar elevación, con borde
cuenta en el aislamiento primario de irregular u ondulado, en cuanto al
una bacteria y, en la cual se debe color de esta colonia se puedo
considerar el borde y la elevación de observar un gris- verde, la apariencia
la misma, según lo establece Rojas es opaca y no permite ninguna
Triviño, (2011). trasmisión de luz, se observó la
apariencia de textura lisa tal como se
En el caso de la acetobacter
observa en la imagen de la tabla Nº1
presentan en su superficie celular
unas prolongaciones conocidas como
flagelos. Así mismo, estas bacterias
Cabe resaltar que se presentó
pueden encontrarse de manera
contaminación en los cultivos de
individual, formando parejas o en
estos microorganismos, esto como
cadenas. Presentan una pigmentación
consecuencia de condiciones no
pálida y de consistencia traslucida
óptimas de esterilidad al momento de
(permite el paso de la luz). Las
realizar la siembra, así como la mala
cadenas tienden a ser cortas. Estas y
disposición de las cajas Petri que
contenían dichos cultivos.
 Tabla N°2. Morfología de Penicilinium y Acetobacte

Penicilinium Acetobacter

Microorganismo

Característica

Forma Filamentosas Variable: Elípticas, bastones

agrupados, irregular

Elevación Elevada Plana o aplastada

Borde Irregular –Ondulado Lobulado

Abundancia de Moderada Moderada

crecimiento

Pigmentación Verde-gris Pálidas

Textura Algodonosa Lisa

Características ópticas Opaca (ninguna trasmisión de luz) Traslucida

Evidencia fílmica

 El objetivo de la práctica se
logró, ya que los integrantes del
4. CONCLUSIONES grupo aprendieron a preparar
medios de cultivo estériles de
manera correcta bajo
 condiciones específicas. Así 5. BIBLIOGRAFÍA
mismo, aplicaron las técnicas
de desinfección y esterilización Rojas, A. (2011). Universidad
requeridas. Nacional de Colombia. Conceptos y
 La práctica fue de suma práctica de microbiología general.
importancia, ya que se [PDF].
conocieron los cuidados que se
deben de tener en cuenta en la
preparación de medios de
cultivo, dado que de no seguir
las etapas de esterilización
puede influir en la composición
del medio y esté puede verse
afectado por otras variables.
Por ello, se recomienda
manipular muy pocas veces el
agar-agar tanto en el pesaje
como en la preparación de la
solución nutritiva del mismo.
 Se observó la morfología de la
bacteria Acetobacter y el hongo
Penicillium, describiendo la
forma, elevación, borde,
pigmentación, textura, entre
otros aspectos. Así mismo, se
aislaron los microorganismos
para obtenerlos de forma más
pura y poder estudiarlos de
manera eficaz.