PROTOCOLO DE ENSAYO

“Determinación de carbohidratos por HPLC”

I. Justificación o planteamiento de problema

xx
II. Objetivo
Determinar el % de glucosa, fructosa y sacarosa en matrices orgánicas complejas y
coloreadas.

III. Datos del ensayo.

 Tipo de ensayo
Investigación de proceso.
 Responsable
Quím. Silvia Coaquira
 Duración del ensayo
1 mes
 Fecha de inicio
07 de noviembre de 2017.

IV. Materiales y equipos

 Equipo HPLC con detector de índice de refracción.

 Columna amino fase reversa.
 Equipo de filtración al vacío.
 Filtro membrana de 0.45um.
 Filtro jeringa de 0.45um
 Viales con tapa de 2mL.
 Balanza analítica autocalibrada. ADAM.
 Fiola de 10, 25 y 50mL con tapa de vidrio calibrado.
 Pipeta graduada de 1 y 2mL calibrado.
 Micropipeta de grado variable 100-1000uL.
 Beaker de 50, 100 y 250 mL.

V. Reactivos

 Agua grado HPLC.

 Agua tipo II.
 Acetonitrilo grado HPLC
 Metanol grado HPLC
 Dioxano grado HPLC.
  Etanol ACS
 Rotenona para análisis.

VI. Metodología
Muestras:
A. Insumo: Barbasco
B. Intermedio: barbasco macerado
i. RD4004 Proceso
ii. RD4004: Reproceso
C. Terminado: RD-5095.
Cada muestra; será realizado por triplicado para el posterior análisis estadístico.
Procedimiento para determinación de rotenona por espectrofotometría UV. Se seguirá el
procedimiento descrito en ME-LB0011.00
Procedimiento para determinación de rotenona por HPLC. Se seguirá el procedimiento
descrito en la AOAC 983.06.
Se determinará el contenido total de rotenoides presente en cada muestra, el cual se
comparará con los resultados de rotenona por HPLC, los resultados serán registrados en
un formato para ir generando data y posteriormente determinar especificaciones, así como
su respectivo factor de corrección por ambas metodologías.

VII. Cronograma de actividades

Semanas
Actividades 20 21 22 23 24 25 26 32 33 34 35
Determinación de rotenona en barbasco por UV
Determinación de rotenona en barbasco por HPLC
Determinación de rotenona en barbasco macerado por UV
Determinación de rotenona en barbasco macerado por HPLC
Determinación de rotenona en RD4004 por UV
Determinación de rotenona en RD4004 por HPLC
Determinación de rotenona en RD5095 por UV
Determinación de rotenona en RD5095 por HPLC
Análisis de resultados

VIII. Referencias bibliográficas

 Official method AOAC 983.06.