UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSÉ DE CALDAS

FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL

DIFERENCIACIÓN CELULAR (PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS)

La teoría celular es uno de los fundamentos de la biología moderna. Esta teoría afirma: 1)
Todos los organismos vivos estas compuestos por una o más células, 2) las reacciones
químicas de un organismo vivo, incluidos sus procesos liberadores de energía y sus
reacciones biosintéticas, tienen lugar dentro de las células, 3) las células se originan de
otras células y 4) las células contienen la información hereditaria de los organismos de
los cuales son parte y esta información pasa de una célula progenitora a una célula hija.
Toda la evidencia disponible indica que hay una continuidad ininterrupida de las células
modernas y los organismos que ellas componen con las primeras células primitivas que
aparecieron sobre la tierra.

Todas las células comparten dos características esenciales. La primera es una membrana
externa, la membrana celular también conocida como membrana plasmática que separa
el citoplasma de la célula de su ambiente externo. La otra es el material genético, la
información hereditaria que dirige las actividades de la célula y le permite reproducirse y
transmitir sus características a la progenie.

Existen dos tipos fundamentales distintos de células, las procariotas y las eucariotas. En
las células procariotas, el material genético se encuentra en forma de una molécula
grande o circular de ADN a la que está débilmente asociadas diversas proteínas. En las
células eucariotas, el ADN es lineal y esta fuertemente unido a las proteínas especiales.
Dentro de la célula eucariota el material genético esta rodeado por una doble membrana,
la envoltura nuclear, que los separa de los otros contenidos celulares en un núcleo bien
definido (eu significa verdadero y karyon, significa núcleo o centro) en las células
procariotas (antes de un núcleo) el material genético no esta contenido dentro de un
núcleo rodeado por una membrana, aunque esta ubicado en una región definida llamada
nucleoide. En el citoplasma se encuentra una gran variedad de moléculas y complejos
moleculares. Tanto los procariotas como los eucariotas contienen complejos proteicos y
de ARN llamados ribosomas que desempeñan una función clave en la unión de los
aminoácidos individuales durante la síntesis proteica. Las moléculas y los complejos
moleculares están especializados en determinadas funciones celulares.

PROCARIOTAS

Las procariotas a las cuales pertenecen las bacterias no presentan membrana nuclear por
lo tanto se considera que carecen de núcleo y la membrana celular de los procariotas está
rodeada por una pared celular externa que es elaborada por las propias células.

Las células procariotas son muy pequeñas tiene un tamaño de 0.25 x 1.2 µm a 1.5 x4 µm.
Las procariotas son de dos clases archaeobacterias y eubacterias. Las archaebacterias
difieren de las eubacterias porque carecen de pared de peptidoglucano y resisten
ambientes extremos de pH, salinidad y temperatura carentes de oxígeno.

Las eubacterias presentan una pared celular semirrígida que rodea a la membrana
plasmática de peptidoglucano (bacterias Gram positivas) y otras (Gram negativas),
presentan además de la pared de peptidoglicano una capa de lipopolisacáridos, que
previene su destrucción por los glóbulos blancos. Además de su pared presentan una
membrana plasmática importante para el movimiento de materiales hacia dentro y fuera
de las células. El DNA circular o cromosoma bacteriano, se encuentra unido a la
membrana plasmática y se concentra en una región denominada nucleoide; algunas
bacterias poseen plásmidos constituídos por ADN con genes de resistencia a antibióticos.

Las procariotas no presentan citoesqueleto, pero presentan proteínas que le dan forma a
la célula, contienen ribosomas en los que se realiza la síntesis de proteínas. Algunas
bacterias presentan uno o más flagelos móviles que le sirven para desplazarse con
rapidez en el medio líquido, otras presentan pillus (vellosidades) para adherirse a
diversas superficies. Los flagelos están constituídos por la proteína flagelina lo que los
hace diferentes a los de las células eucariotas que éstan constituídos por la proteína
tubulina constituyente de los microtúbulos. Las bacterias se reproducen por fisión binaria
cada 20 minutos, no presentan mitocondrias para la producción de energía, a cambio de
éstas presentan mesosomas constituídos por membranas que cumplen esta función.
Ejemplos de bacterias son la Escherichia coli que se encuentra normalmente en el
intestino humano y de otros mamíferos, haciendo parte de la flora bacteriana normal, pero
cuando se bajan las defensas se reproducen con mayor rapidez haciéndose patógenas.
En la boca encontramos bacterias Gram Positivas como Streptococcus viridans y
Streptococcus pyogenes , Cocos gram negativos del género Neisseria aerobios ó
anaerobios.

EUCARIOTAS

Los eucariotas comprenden los protistos, hongos, plantas y animales. Poseen además de
organelos constituidos por membrana, una membrana que separa el material genético del
citoplasma y por consiguiente se considera que tienen un núcleo verdadero.

Ciertas células eucariotas, incluidas las de las plantas u hongos, tienen paredes celulares
aunque su estructura es diferente de la de las paredes celulares procariotas. Otras
células eucariotas entre ellas la de nuestro propios cuerpos y la de otros animales no
tienen paredes celulares, otro rasgo que distingue a los eucariotas de las procariotas es el
tamaño: las células eucariotas habitualmente son de mayor tamaño que las procariotas.

En las células eucariotas estas funciones se llevan a cabo en una gran variedad de
estructuras rodeadas por membranas llamadas organelas que constituyen distintos
compartimientos dentro del citoplasma. Entre las organelas se destacan los peroxisomas,
que realizan diversas funciones metabólicas; las mitocondrias, centrales energéticas de
las células y en las algas y célula vegetales los plástidos como los cloroplastos donde
acontece la fotosíntesis.

En las células eucariotas ciertas proteínas se organizan formando intrincadas estructuras

que da lugar a una especie de esqueleto interno: el citoesqueleto, que aporta sostén
estructural y posibilita el movimiento celular.

Los organelos de las células eucariotas se pueden agrupar en núcleo, pared y membrana
celular y citoplasma. Se pueden encontrar una membrana (M) alrededor del núcleo y de
otros organelos contenidos en el citoplasma (C) algunos organelos son los cloroplastos
que están presentes en organismos fotosintetizadores. Las mitocondrias se encargan de
liberar energía de las moléculas orgánicas y están presentes en células que realizan
respiración aerobia. Todo el material u los organelos contenidos por la membrana
plasmática son llamados colectivamente protoplasma. Las células eucariotas pueden
tener o no pared celular.

Otros organelos celulares son núcleo con su membrana nuclear, aparato de Golgi, retículo
endoplasmático liso y rugoso, ribosomas, citoesqueleto centriolos, plasmodesmos,
peroxisomas, microtúbulos, vacuola, lisosoma.

FIGURA 1. Células Procariotas y Eucariotas tomado de:

http://www.netxplica.com/Verifica/figuras/celulas.eucariotica.procariotica.2.png.

Las células entonces, son sistemas biológicos que aparecieron en la tierra como producto
de la evolución, pueden producir descendencia y evolucionar. El estudio de la estructura y
el funcionamiento celular se denomina: citología. Las herramientas más útiles para esta
ciencia son el microscopio óptico, el microscopio de barrido de electrones y la bioquímica
celular. Entre las características que diferencian entre las células esta el tamaño, la forma
celular, el número de núcleos los organelos que contienen. En la tabla 1 se describe la
presencia (+) o ausencia (-) de organelos en algunos tipos diferentes de células:
Tabla 1. Algunas características y diferencias entre células procariotas y eucariotas y
entre células animales y vegetales.

Procariota Eucariota
Estructuras externas Animal Vegetal
Pared celular + - +
Membrana celular + + +
Flagelos +/- -/+ -/+
Estructuras internas
Retículo endoplasmático - +/- +/-
Microtúbulos - + +
Ribosomas + + +
Centriolos - + -
Aparato de Golgi - + +
Otros organelos
Núcleo verdadero - + +
Mitocondria - + +
Cloroplastos -/+ - +
Cromosomas + +
Vacuolas - -/+ +

Materiales que llevan estudiantes

• Cebolla
• Elodea
• Papa
• Levadura en polvo
• Células epiteliales de la mejilla (se toma la muestra el día de las práctica)
• Agua estancada ó de florero (qué lleve varias semanas expuesta a las flores) ó agua de
almacenamiento de cilantro
• Bisturí
• 3 palillos
• Portaobjetos y cubreobjeto
• Un par de Guantes de látex

Materiales presentes en laboratorio

• Vaso precipitado
• Pipeta pasteur
• Azul de Lactofenol
• Violeta de Genciana o Cristal violeta
• Lugol de Gram - Reactivo de Lugol
• Alcohol acetona
• Fuscina de Gram
• Aceite de inmersión
• Microscópio
• Medio de cultivo bacteriano

PROCEDIMIENTOS Y RESULTADOS

Células epidérmicas de cebollas

Con unas pinzas desprenda la epidermis interna de un trozo de cebolla. Una vez lo haya
obtenido, coloque un trozo de epidermis sobre un portaobjetos. La epidermis es una capa
delgada de células. Trate de impedir que se doble al ponerla sobre el portaobjetos.
Añada una o dos gotas de agua y coloque el cubre objeto.

Examine la placa al microscopio con el menor aumento y busque los límites de las
células. Identifique lo observado.

Agregue una gota de reactivo de Lugol a la preparación y describa lo ocurrido. Observe

con mayor aumento una sola célula, dibuje los detalles que pueda ver e identifique los
organelos señalando los nombres.

Células de elodea

Retire una hoja tierna de la planta, colóquela en el portaobjetos. Adicione una gota de
agua y cúbrala con el cubreobjetos. Observe la preparación con el menor aumento.
Escoja una porción de la hoja en que las células se vean claramente y enfoque con mayor
aumento. Mencione los organelos que reconoce.

Dibuje las células e incluya el mayor número de detalles. Escriba los nombres de las
partes que pueda identificar.

Células de papa

Corte con un bisturí o cuchilla un trozo de papa y prepare una muestra muy delgada.
Colóquela sobre la lámina, adicione una gota de lugol y después de 3 minutos observe al
microscopio en menor aumento. Observe con mayor detalle en un aumento mayor. Dibuje
lo observado.

Células de levadura

Disuelva en 5ml de agua un poco de levadura seca. Coloque una gota de levadura
disuelta sobre una lámina y adicione una gota de azul de lactofenol; cúbrala con una
laminilla. Observe primero la preparación con un objetivo de menor aumento y luego con
el de mayor aumento. Dibuje sus observaciones a mayor aumento. Descríbalas.

Células bacterianas

A partir de la colonia de un medio de cultivo realice un raspado suave y haga un extendido

sobre el portaobjetos limpio. Deje secar al ambiente y fije al calor con un mechero de
alcohol.
Agregue unas gotas de Cristal violeta observando que quede cubierto todo el extendido y
déjela actuar por un minuto. Lave la lámina o portaobjetos con agua corriente con el
chorro muy suave, colocando el portaobjetos en posición vertical con respecto al chorro.
Agregue lugol por un minuto. Lave con agua corriente como en el paso anterior.
Decolorar con alcohol acetona (se cuenta hasta 10 segundos) Lavar con agua corriente.
Colorear con safranina o fuscina por 30 segundos. Deje secar al ambiente y observe en
100x con aceite de inmersión.

Células epiteliales

Con un palillo, con cuidado, recupere una capa de epidermis de la parte interior de la
mejilla. La muestra recolectada debe colocarse en un portaobjetos, cubrirla con una gota
(lo menos posible) de azul de metileno y cúbrala con un cubreobjetos. Observe en
objetivos 5x, 10x y 40x.

Preguntas útiles para el análisis de resultados

• De las células observadas, ¿cuáles tienen cloroplastos?

• Mencione las diferencias que observó entre células microbianas, vegetales y
animales.
• ¿Qué características tienen las células de papa? ¿Qué organelos característicos
puedes observar?
• ¿Para qué se utiliza el Cristal violeta en la tinción de Gram?

• ¿Qué diferencias existen entre bacterias Gram+ y bacterias Gram-?

• Según la forma observada y la coloración de las bacterias observadas ¿cómo las

clasifica?
¿Qué diferencias observa entre las células epiteliales de la mucosa oral y las bacterias
presentes?
Complete el siguiente cuadro a partir de las observaciones realizadas en la práctica.

TIPO DE
CARACTERÍSTICAS FORMA IMPORTANCIA
CÉLULA
ORGANELOS
OBSERVADOS
AGUA
ESTANCADA
BACTERIA
LEVADURA
EPITELIO DE
CEBOLLA
HOJAS DE
ELODEA
CÉLULAS DE
PAPA
CÉLULAS
EPITELIALES
DE LA
MEJILLA

BIBLIOGRAFIA
BAKER J., ALLEN G., Biología e investigación Científica. Fondo Educativo
Interamericano. Estados Unidos. p. 134-141. 1970
CURTIS H., BARNES., N. Biología. Editorial Médica Panamericana S.A. Sexta Edición.
Buenos Aires-Argentina. p. 63-98. 2000.
KAPLAN L.A., PESCE A. Clinical chemistry theory, analysis and correlation. The C.V.
Mosby Co. St. Louis, p. 924-926.1984
MURRAY R., MAVES P., GRANNER D., RODWELL V. Bioquímica de Harper, Editorial el
Manual Moderno. p. 175-185. 2001.
YEPES A., Biología general Manual para prácticas de laboratorio. Universidad Distrital
Francisco José de Caldas. Ed. Fondo de publicaciones. Pereira-Colombia. p.77-88. 2006