Lampiran 1

Pembuatan Suspensi Fungi *

1. Pembuatan Suspensi Aspergillus niger

1 ose

kultur murni 5 ml SDA miring, (+) 5 ml SDB suspensi

Aspergillus niger inkubasi suhu kamar steril Aspergillus niger
pada cawan petri selama 4 hari

2. Pembuatan Suspensi Candida albicans

1 ose 1 ml

kultur murni 1 ose 5 ml SDB

Candida albicans 48 jam dalam 5 ml SDB 48 jam ≈ ½ Mc Farland I
pada SDA miring (peremajaan khamir) (± 1,7 x 106 mo/ml)

129
 Lampiran 2

Penentuan Pengaruh Dimetilsulfoksida dengan Metode Dilusi Padat

1, ml 0,7 ml 0,5 ml 0,3ml 0,1 ml

DMSO 100 %

@ (+)10 ml SDA 50 °C

9,09 % 6,54 % 4,76 % 2,91% 0,99 %

dihomogenkan, dituang dalam cawan petri

dihomogenkan, dibiarkan memadat

inokulasi fungi *

inkubasi

amati ada/tidak ada KHM

Keterangan lampiran:
* fungi: Aspergillus niger, inkubasi suhu kamar selama 4 hari.
* fungi: Candida albicans, inkubasi suhu kamar selama 2 hari.

130
 Lampiran 3

Penentuan Daya Antifungi N-benzoil-N’-feniltiourea, N-(4-metilbenzoil)-N’-

feniltiourea, N-(4-klorobenzoil)-N’-feniltiourea, N-benzoil-N’-(4-metilfenil)tiourea,
dan N-(4-klorobenzoil)-N’-(4-metilfenil)tiourea dengan Metode Difusi Cakram
terhadap Aspergillus niger

1,75 ml 1,50 ml 1,25 ml 1,0 ml 0,75ml 0,50ml 0,25ml 0,05ml

40000 35000 30000 25000 20000 15000 10000 5000 1000

ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

@ (+) DMSO ad 2 ml

@ pipet 20 µl/cakram

Letakkan cakram dalam cawan petri yang berisi SDA 30 ml yang telah diinokulasi
Aspergillus niger

Inkubasi suhu kamar selama 4 hari, kemudiian diamati ada/tidak ada DHP
disekitar cakram

131
 Lampiran 4

Penentuan Daya Antifungi N-benzoil-N’-feniltiourea, N-(4-metilbenzoil)-N’-

feniltiourea, N-(4-klorobenzoil)-N’-feniltiourea, N-benzoil-N’-(4-metilfenil)tiourea,
dan N-(4-klorobenzoil)-N’-(4-metilfenil)-tiourea dengan Metode Difusi Cakram
terhadap Candida albicans

Base layer Seed layar

SDA 30 ml 50ºC 10 menit Suspensi fungi yang ≈

½ Mc. Farland I
Cawan Petri diameter 15 cm

pipet 0,1 ml

Biarkan padat 10 ml SDA 50°C, 10 menit

Tuang Seed layer diatas base layer (rotasi sampai homogen)

Ratakan dan lakukan pra pengeraman sekitar 1,5 - 2 jam

Difusi Cakram

132
 1,75 ml 1,50ml 1,25ml 1,0ml 0,75ml 0,50ml 0,25ml 0,05ml

40000 35000 30000 25000 20000 15000 10000 5000 1000

ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

@ (+) DMSO ad 2 ml

@ pipet 20 µl/cakram

Letakkan cakram dipermukaan media yang berisi base layer dan seed layer yang
telah diberi suspensi Candida albicans

Inkubasi suhu kamar selama 2 hari

Amati ada/tidak ada DHP disekitar cakram

133
 Lampiran 5
Penentuan Daya Antifungi N-benzoil-N’-feniltiourea, N-(4-metilbenzoil)-N’-
feniltiourea, N-(4-klorobenzoil)-N’-feniltiourea, N-benzoil-N’-(4-metilfenil)tiourea,
dan N-(4-klorobenzoil)-N’-(4-metilfenil)-tiourea dengan Metode Dilusi Padat

1,75 ml 1,50ml 1,25ml 1,0ml 0,75ml 0,50ml 0,25ml 0,05ml

40000 35000 30000 25000 20000 15000 10000 5000 1000

ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

@ (+) DMSO ad 2 ml

@ dipipet 0,3 ml

@ (+)10 ml SDA 50 °C

1200 1050 900 750 600 450 300 150 30

ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

dituang dalam cawan petri, dihomogenkan dan dibiarkan memadat

inokulasi fungi *

inkubasi

Amati ada/tidak ada KHM

Keterangan lampiran
*Fungi Aspergillus niger: inkubasi suhu kamar selama 4 hari
*Fungi Candida albicans: inkubasi suhu kamar selama 2 hari

134
 Lampiran 6

Penentuan Daya Antifungi Ketokonazol dengan Metode Dilusi Padat

Terhadap Aspergillus niger

1,75 ml 1,50ml 1,25ml 1,0ml 0,75ml 0,50ml 0,25ml 0,05ml

4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 100

ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

@ (+) DMSO ad 2 ml

@ dipipet 0,3 ml

@ (+)10 ml SDA 50 °C

120 105 90 75 60 45 30 15 3
ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

dihomogenkan, dituang dalam cawan petri

dihomogenkan, dibiarkan memadat

inokulasi Aspergillus niger

inkubasi suhu kamar selama 4 hari

amati ada/tidak ada KHM

135
 Lampiran 7

Penentuan Daya Antifungi Ketokonazol dengan Metode Dilusi Padat Terhadap

Candida albicans

1,75 ml 1,50ml 1,25ml 1,0ml 0,75ml 0,50ml 0,25ml 0,05ml

2000 1750 1500 1250 1000 750 500 250 50

ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

@ (+) DMSO ad 2 ml

@ dipipet 0,3 ml

@ (+)10 ml SDA 50 °C

60,0 52,5 45,0 37,5 30,0 22,5 15,0 7,5 1,5

ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

dihomogenkan, dituang dalam cawan petri

dihomogenkan, dibiarkan memadat

inokulasi Candida albicans ≈ ½ Mc Farland I

inkubasi suhu kamar selama 2 hari

amati ada/tidak ada KHM

136
 Lampiran 8

137
138
 Mikroskopis 1: hifa vegetatif bersekat
2: sel kaki 2: sel kaki
3: konidiofor 3: konidiofor
4: vesikel 4: vesikel
5: sterigma 5: sterigma
6. konidiospora 6. konidiospora
Gambar
(Pada pembesaran
15x40)

6
5

4
1 2

3
(sel kaki tidak teramati pada
Gambar )

(sel vegetatif bersekat tidak

teramati)

139