ADN polimerasa 1

ADN polimerasa
Las ADN polimerasas intervienen en la replicación del ADN para dar a cada célula hija una copia del ADN original
en el proceso de la mitosis. Llevan a cabo la síntesis de la nueva cadena de ADN emparejando los
desoxirribonucleótidos trifosfato (dNTP) con los desoxirribonucleótidos complementarios correspondientes del ADN
molde. Los dNTP que se usan en la replicación del ADN contienen tres fosfatos unidos al grupo hidroxilo 5' de la
desoxirribosa y dependiendo de la base nitrogenada serán dATP, dTTP, dCTP o dGTP. La reacción fundamental es
una transferencia de un grupo fosfato en la que el grupo 3'-OH actúa como nucleófilo en el extremo 3' de la cadena
que está en crecimiento. El ataque nucleofílico se produce sobre el fosfato α (el más próximo a la desoxirribosa) del
desoxirribonucleósido 5' trifosfato que entra, liberándose pirofosfato inorgánico y alargándose el ADN (al formarse
un nuevo enlace fosfodiéster). A diferencia de la mayoría de procesos biológicos que ocurren en la célula en los que
sólo se separa un grupo fosfato (Pi), durante la replicación se separan los dos últimos grupos fosfato, en forma de
grupo pirofosfato (PPi)...
Este proceso se puede resumir en una ecuación química:
(DNA)n + dNTP ↔ (DNA)n+1 + PPi
A pesar de que la ADN polimerasa sólo tiene un sitio activo para emparejar los cuatro dNTPs diferentes, la unión
correcta de los pares de bases A:T, C:G es posible basándose en la geometría de éstos: si la unión es incorrecta se
produce un desplazamiento del fosfato α haciendo más difícil su unión al extremo 3'-OH y ralentizando así el ritmo
de catálisis, lo que da lugar a que la ADN polimerasa añada preferentemente las bases correctas.
Las ADN polimerasas pueden añadir hasta 1000 nucleótidos por segundo. Esto es debido a su naturaleza procesiva,
es decir, el número de nucleótidos que son capaces de añadir cada vez que se asocian al molde de ADN que van a
copiar. Dado que la adición de los nucleótidos es un proceso que dura unos milisegundos, la velocidad de catálisis va
a depender del tiempo que la ADN polimerasa permanece unida al ADN, esto es, de su procesividad.
El crecimiento de la cadena se produce en
dirección 5' → 3', ya que se requiere de un
grupo 3'-OH libre para el inicio de la
síntesis puesto que éste es el que realiza el
ataque nucleofílico sobre el fosfato α del
dNTP, de forma que las ADN polimerasas
requieren de un iniciador 3'-OH (que puede
ser de ADN o ARN) llamado cebador que es
sintetizado por la ARN primasa. El extremo
3' del cebador se denomina extremo
cebador.

Las ADN polimerasas también realizan

otras funciones durante el proceso de
replicación. Además de participar en la Función correctora exonucleasa 3' → 5' de las ADN polimerasas.

elongación, desempeñan una función

correctora y reparadora gracias a su actividad exonucleasa 3', que les confiere la capacidad de degradar el ADN
partiendo de un extremo de éste. Es importante que existan estos mecanismos de corrección ya que de lo contrario
los errores producidos durante la copia del ADN darían lugar a mutaciones.
ADN polimerasa 2

ADN polimerasas de E. coli

Las principales ADN polimerasas en E. coli son las ADN Pol I, ADN Pol II, ADN Pol III, y cada una de ellas está
especializada en una o más de estas funciones según cuál sea su papel en la replicación. La procesividad se relaciona
con cuánto tiempo permanece unida la ADNpol al ADN cuando está agregando nucleótidos. Así, la ADN Pol I que
es poco procesiva (añade entre 20 y 100 nucleótidos por acontecimiento de unión), es la encargada de la eliminación
de los cebadores y el "relleno" del espacio que dejan con ADN (actividad exonucleasa 5' → 3' y actividad polimerasa
5' → 3'). La ADN Pol II está encargada de la reparación de los quiebres producidos en el ADN (actividades
polimerasa 5' → 3' y exonucleasa 3' → 5'), la ADN Pol III que es muy procesiva es la principal encargada de la
elongación del ADN (actividad polimerasa 5' → 3') durante la cual también realiza tareas de corrección (actividad
exonucleasa 3' → 5'). Notar que actividad correctora y de reparación no son lo mismo. Sólo la ADN pol I y beta
tienen actividad de reparación, en cambio todas las polimerasas tienen actividad correctora (poseen 2 sitios activos:
un sitio de polimerización y otro de corrección). ¿Por qué ocurre? ¿Cómo se da cuenta la DNApol de que hubo un
error en la replicación del ADN? Ocurre por el fenómeno de tautomerización. Los nucleótidos cambian a su forma
química alternativa, la DNApol las confunde con otro nucleótido y lo elonga. Cuando este vuelve a su conformación
más estable provoca un cambio en el ancho de la hebra (20A) y termina abriéndose. Esto es detectado por la
polimerasa, quien cambia conformacionalmente y deja la hebra posicionada en el sitio de corrección. Las ADN Pol
IV y V, identificadas en 1999, están involucradas en una forma poco común de reparación del ADN.

Características principales de las ADN polimerasas de E. coli

ADN Pol I ADN Pol II ADN Pol III

Estructura Masa molecular (dalton) 109.000 90.000 900.000

Constitución Monómero Monómero Dímero asimétrico

Número de polimerasas / célula 400 Desconocido 10 - 20

Actividad / Función Polimerasa 5' → 3' / Elongación SI SI SI

Exonucleasa 3' → 5' / Corrección SI SI SI

Exonucleasa 5' → 3' / Reparación SI NO NO

ADN polimerasa 3

A diferencia de lo que ocurre con la ADN Pol I, que sólo

debe añadir unos 5-10 nucleótidos una vez eliminado el
cebador, es importante que la ADN Pol III sí sea muy
procesiva, y por esa razón suele formar parte de un
complejo denominado holoenzima ADN Pol III que le da
una mayor procesividad. Este complejo consta de diversas
subunidades polipeptídicas encargadas cada una de una
función, y que constituyen en su conjunto un dímero
asimétrico: una mitad se encarga de la síntesis de la hebra
adelantada y la otra mitad de la hebra rezagada. El
corazón catalítico lo componen las subunidades α que
corresponden a dos copias de la ADN Pol III, la
subunidad ε con actividad correctora exonucleasa 3' → 5'
y la subunidad θ cuya función podría ser la de ensamblar
las otras dos; las subunidades τ mantienen la estructura
dimérica; el complejo γ lo conforman las subunidades γ y
δ cuya su función es la de aumentar la procesividad de la
ADN Pol III; la subunidad β sujeta la ADN Pol III al
ADN.

Holoenzima ADN Pol III de E. coli.

ADN polimerasas
eucarióticas
Hay 13 tipos aunque las más
importantes son dos:
• ADN polimerasa α (alfa): Se
Actividad correctora exonucleasa 3' → 5' de la subunidad ε de la holoenzima ADN Pol encuentra en el núcleo celular, se
III. inhibe por alidilcolina y en
humanos presenta 4 subunidades,
aunque las más importantes son dos:
• Subunidad mayor (130 kDa): tiene actividad polimerasa
• Subunidad menor (48 kDa): tiene un centro activo de primasa para sintetizar el cebador necesario para la
replicación pero carece de actividad exo 3'→5' por lo que no corrige errores.
• ADN polimerasa σ (sigma): Se localiza en el núcleo celular y se inhibe mediante alidilcolina. Tiene una o dos
subunidades dependiendo el organismo. Tiene una alta capacidad de polimerización y actividad correctora de
errores (exo 3'→5'). Carece de actividad primasa.
La primasa (que es parte de la molécula de ADN polimerasa α) sintetiza ARN cebadores y además comienza la
elongación con DNA de las dos cadenas. Después se produce un cambio de polimerasa y entra la ADN polimerasa σ,
que continúa la síntesis.
ADN polimerasa 4

Reacción en cadena de la polimerasa

La propiedad de las ADN polimerasas para replicar hebras de ADN se utiliza para la reacción en cadena de la
polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en inglés, para obtener un gran número de copias de un fragmento de
ADN particular, amplificándolo para propósitos de investigación. En los procesos de PCR se requiere la utilización
de polimerasas termoestables, como la Taq DNA polimerasa, debido a que es necesario aplicar altas temperaturas
para desnaturalizar la molécula de ADN.

Bibliografía
• Watson, J. D. et al. 2006. Biología Molecular del Gen (5ª Ed.). Madrid: Médica Panamericana. 84-7903-505-6.
• César Benito Jiménez, Profesor Titular de Genética, Departamento de Genética, U.C.M.. «La Replicación [1]».

Referencias
[1] http:/ / www. ucm. es/ info/ genetica/ grupod/ Replicacion/ Replicacion. htm#Inicio
Fuentes y contribuyentes del artículo 5

Fuentes y contribuyentes del artículo

ADN polimerasa  Fuente: http://es.wikipedia.org/w/index.php?oldid=41212493  Contribuyentes: AngelHerraez, Aracne, Cookie, Deneapol, Diegusjaimes, F.A.A, Flakinho, GermanX,
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Vichovalenzuela, Xuankar, Xvazquez, Youssefsan, 42 ediciones anónimas

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