BÀI 6: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VSV HIẾU KHÍ TRONG KHÔNG KHÍ

1. Nguyên tắc
-Truyền thống: đĩa petri có chứa môi trường nuôi cấy được đưa đến nơi cần lấy mẫu, sau đó mở
nắp đĩa trong khoảng 15 phút rồi đậy nắp đĩa petri lại đem đi ủ ở 37oC trong 24h và quan sát.
-Máy: Ở phương pháp này, đĩa petri có chứa môi trường nuôi cấy được đặt ở trong máy
Briomérieux Samplr’air Lite trong một thời gian tùy theo dung tích được cài đặt. Các vi sinh vật
được mang vào môi trường nuôi cấy nhờ dòng không khí cần lấy đi thẳng vào môi trường đĩa
thạch (mở đĩa ra xong đóng nắp lại liền). Sau khi ủ ở 37oC thì quan sát.
2. Dụng cụ và hóa chất
- 2 đĩa petri đã tuyệt trùng.
- Môi trường PCA
- Máy Briomérieux Samplr’air Lite.
- Tủ ủ
3. Chuẩn bị môi trường nuôi cấy
a. Môi trường Plate Count Agar (PCA).
Bước 1: Cân 0,705g môi trường và pha loãng với 30ml nước cất rồi đem đi nấu.
Bước 2: Môi trường sau khi nấu thì để nguội khoảng 50oC – 55oC rồi đổ vào đĩa petri (thao tác
lấy đĩa và đổ phải thực hiện ở trong tủ cấy vô trùng hoặc trong phạm vi 20cm so với đèn cồn).
Bước 3: Chờ môi trường đông lại thành thạch rồi sử dụng.
b.Cách tiến hành
-Máy :
 Vệ sinh máy trước khi sử dụng máy để định lượng vi vật vật hiếu khsi trong không khí
(gần nhà vệ sinh).
 Đến nơi cần kiểm tra không khí, mở nắp đĩa petri ra. Sau đó gắn đĩa petri vào máy tại vị
trí cố định, tiếp theo đậy lại bằng Stainless steel gird (lưới thép không gỉ). Khởi động
máy sau đó cài đặt thông số dung tích (nhóm chọn dung tích 400ml). Sau đó bấm “Yes”
để máy hoạt động.
 Sau khi máy đã làm việc xong, ta lấy đĩa petri ra đậy nắp lại.
 Ủ ở 37oC trong 24h, lấy ra đếm tổng số khuẩn lạc có trên đĩa.
 Tính toán kết quả dựa vào công thức sau:
𝑵
X=
𝑽
Trong đó: X: Tổng số vi sinh vật cfu/m3
N: Tra bảng n-N dựa vào n (là số khuẩn lạc trên đĩa)
V: Thể tích lấy mẫu (m3)
-Truyền thống: Đến nơi cần kiểm tra không khí, mở nắp đĩa petri ra, để khoảng 15 phút sau đó
đóng nắp lại rồi ủ ở 37oC trong 24h, lấy ra đếm tổng số khuẩn lạc trên đĩa.
c. Kết quả định lượng tổng số vi sinh vật hiếu khí ở không khí gần nhà vệ sinh (cách nhà
vệ sinh 5m).
 Khuẩn lạc trên môi trường PCA

Đĩa petri môi trường PCA Truyền thống Máy

Số khuẩn lạc (n) 78 Không xác định

-Vì kết quả mẫu máy bị nhiễm và mẫu truyền thống chỉ có 1 đĩa nên không thể tính tổng số vi
sinh vật.