- 7 5 SNI 01-2896-1998 Standar Nasional Indonesia ICS 67.040_ Cara uji cemaran logam dalam makanan Badan Standardisasi NasionalPendahulu:n si car Nasional Indonesia (SNI) cis uji © sy logguny untuk smakasan akan revisi dari SNI 19-2896-1992, vang disusun dengan maksud untuk memperbaiki dan melengkapi cara uji yang sudah da sebingga semnua produk makanan dan minenan dapat di uji dengan cara yang sama cian dapat dipertunggung jawabkan dari aspek keseliatan dan keselamatan konsumen. Stand ini disusun oleh Balai Besar Industri Hasil Pertanian Bogor berdasarkan hasil pembahasan melalui rapa-rapat teknis, pra konnsensus dan terakhir dirumuskan m elaini Rapat Konsensus Nasional pada tanggal 24 Pebruari 1998 di Jakarta, yang dihadiri oleh wakil-wakil dari produsen, konsuinen, lembaga pengyjian serta instansi pemerintah yang terksDatlar i halaman jalan i Dattarisi. : ii 1 Ruang lingkup 1 2 Acuan 1 3 Penyiapan contoh 1 4 Cemaran logan; tembaga, seng, timah dan ber dalam makanan (cara hidrolisis) - 1 s imbal, tembaga, seng, tinal, dun besi daliwn kakaran pengubuan kering) ...... 3 6 — Cemaran logam; raksa (Hg) dalam makanan . Peer ae 5 7 Comaran logam; tembaga (Cu), besi (Fe), nikel (Ni), dan. timbal (Pb) dalam miinyak dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom dengan graphite fisnace 8 8 Cemaran logam; tembaga (Cu), besi (Fe), nikel (Ni), dan (Zn) dalam avinyak ee 3 “4 9 ts oidO Cera uji ceneran logan dalam makenan 1. Ruang lingkaip ee grote ae = ‘Stade i lip Newt, pengispan contoh, cara uji-cemaran logam alam. makenan, cara uji cemaran logamn untuk minyak, dan pembuatan larutan standar Contoh P butir4 pan contoh makanan sesuai SNE @1-2891-92, Cara uji makanan can mina sai SNLOL-355$-1994, Cara uji minyak dar — Penyiapan contoh minyak dan lemak femak, butir 2 1 Cexmaran logary, embaca, sa, tial: dan besi dalam makanan (Cara hide cemaran logam, tembags, song. tials dan besi slalant mak jn, dan makanan dalam k: fics untuk contol buah-buahan, sayuran, 1 dari 1641 Prinsip Contch dihidrolisis do : dan ngmbebaskan Jogun-logam yang terkanduag d.dalunay asam untuk men 2. Relay... i f : Bi. a) Spektrofotometer serapan atom dengan segula kelengkaparnya >) rucaamalitik de:ogan ketelitian 0,001 mg, terkalibrasi ¢) Ei lenmeyer 250 m! d) Penangas listrik e) Lebu ukur $0 ml, terkalibrasi Pereaksi 4310 Airsuling 4320 Lanvin scm kloridat Tambiihkan $00 ml HCI pa 37%, bj. 1.19 ke dalam 220 ml air suling 43.3 Lanutan deret standar besi (Fe) Stapkon tuwtur stimdur besi (Fe) yang menganding 0-20 ug Vert adung 50% lanutan HCI diatas (butir 4.3.2) 5 & 43.4 Larutan deret standar tembaga (Cu) wpkan lanutan standar tembaga (Cu) yang mencandung 0-15 ug Curt Larutan akhir mengandung Su% larutan HCI diatas (butir 4.3.2) 43S Lanutan deret standar timah (Sn) Srapkan hunwtan standir tinal (Sa) yang mengandung 0-300 ug Swed, Larutan akbur barus mengandune $O% fanitan HCI diatas (butir 4.3.2) 4.3.6 Lanitan deret standar Seng (Zn) i Siapknn larutan stindur seng (Zn) yang menganding 0-2 ug Za/ml, Larutan akhir harus monigaihang 56% Harutian HCP disitas (butir'4. 3:2) Caatatg ahs ae Eee ae 2 dari 1644° Cara Kerja 3): Timbaig., tarutan HCE (butir 4.3.23, kemidiaa pasa ‘sampai_mendi keadaan tersebil ») Dinginkan larutan dan kemudian pindahkan ke dalam labu ulcer 50 mal secara kuanttatif, fit dan biarkan dalam elama'S ménit. : oi ig encerkan smpai tanda garis dengan air suling, Kocok dan saring melalui kertas saring Whatnan No.1. ¢) Bust larutan blanko dengan cara penambahan pereaksi yang sama seperti contoh, 4) Bacalah absobansi larutan deret standar, blanko dan contoh 2) Buat kurva kalibrasi dengan sumbu Y sebagai absorbansi dan sumbu X sebasai konsentrasi (ppm) 2) Hirung kanduncan logam dalam contoh. 4.5 Perhitungan Kandungan logam dalam contoh dihitung dengan menggunakan ramus seb Eandungan logam (ues) = (ug logam/m! dari kurva kalibrasi) x V an Jah volume pelarutan, dalam ml lah bobot contoh, dalam gram. sin logan; timbal, tembaga, seng, timah,dan besi dalain makenan (cara pens kering) ‘alam makanan (cara Cara uji cemarcn logam, timbal, tembaga, seng, timah dan best wsabuan kering) berlaic tittuk contoh suse bubuk, kakao bubuk, ikan, tepung ‘erigu,.saes tomat, dan bahay, dusar paka. temak..- 3 dari 16 5:3 contoh dan.masukkan ke dalim erlenmeyer 250-ml, tambahkan:23.mbContehdicampur dengan larutan magnesivm nitrat -dalamretanol, kemudian. dikeringkan dan 5.1 Prinsip diabukan. Ditenjotam paenkaraa sbeorbanst ‘dengan mengsunakan peered serapan °.! a) Cawan porselen dengan kapasitas $0 atau 100 ml b) Pipet isil0 ml, terkalibrasi ©) Penangas air 4) Tanur,terkalibrasi 2) Spektrofotometer serapan atom beserta kelengkepannya, terkalibrasi 4) Labu ukur 100 mi, terkalibrasi $3.1 Lamutan magnesium nitrat 10% dalam etanol Larutan 10 ¢ Mg (NO;):. 6 H:0 dalam 100 ml etanol 95%, $3.2 Larutan campuran HCI dan HNO: an 100 ml HCI p.2 sampai 250 ml denean air suling, kenmdian tambahken ‘+ p.adan encerkan kembali sampai $00 ml denzan air sulins, n piost 10,0 mi Taran magnesium witcor dalam n batang penzaduk Axzk.t botang pengoduk dan bslasi dengan etarot Uspkan etanol diatas penangas air sambil diaduk sekali-sekali, kemudion panaskan strik (tutuplah jiala gelas dengan kaca arloji). Pindahican oe ke dalam tanur dengen suhu 200 °C dan secara bertahap naikkan sulin Sanipai S00 °C Selama 2 jam dan abukan sepanjang malarh pada subu'd$0-500°C >. 4 dar 16{) 4) Augkat piala gelas dari tanur dan biarkan dingin diatas asbes. Apabila masih terdapa’ siva karbon, setelah dingin tambahkan 1 ml air dan 2 inl HINO: p.a, kemudi keringkari diatas.penangas ait..Panaskan kembali pada sul $00" selma 1 jum, Utungi,perlakuan: ini sampar dipierol -hrabu yang berwarni putih, - é 6) Teanbalins Som{ laritan campuran HCl. dan HNO: k> daliin abu melalui dinding pial stan pau 1s penrangas air swsnpai bu Fart rT 1) Pindahkan larniu secara kuantitafil ke dalun tabu uur 100 rl ke dengan air culing Saring dengan kertas sorieg, whabunn 51+ 9) Keryakan blanko dengan mengcumian peeks yang ceria, ke) Bocalok absorbanst Ianitan standar, blanko dan contoh dengan tnengmunakar 2 inmpitkan Lobes spektrotin me serapan atom pada panjang gelombang 219, nin untuk seng, 235.4 nn 283.3 mm untuk uu i mbaga, 248,3 nun intuk besi,dan 324.7 nm untuk tembaga, 1) Beat kuva kahbrasi dengue sumbu Y seb: cai absorbansi dan sumbu X sebaga: Konsenmasi (dalam ppm) sung kandungan Iygam dalam contoh, Jogun dalam contoh dihiting dengan m:egunakan nimins sbb ug foganvml dari kurva “atibrast x v Kandarian Logan (ug/g) = - Keeterangan vantalct volume pet:wutan, dalam ul ni axdals' bobot contol, slalun gran, 6 Cewaran log:un, raksa (He) dalam makesan 6.1 Prinsip Mereaksikan senyawa raksa dengan NaBH atau SuCly dalam keadaan asam guna membentuk pas alomik Hg dun diikuti dengan pembacaan absorbans menggunakun spektrofotometer serqpan atom tanpa nyala dengan panjang gelombang 253,7 run ug 5 dari 166.2 Pereaksi 6.2.1 Larutan pereduksi a). Larutan Sa Che 220 ad : * ‘Campurkan 50 ml-H:SOwdengan-300-ml air suling. -Dinginkan bi 1S grim fiidFofcitaininsulfit, dain 25° gow SiC a juga digunukan N:trium borohidrida (NaBH) b) Lanitan NaBH, Lanutkan 3 gram serbuk NaBHL dan 3 gram NaOH dilam air sities gga. suin rvang.tambah 15. * gran Nat impitian hirigga S00 ml, atau jam abu ukcur $06 ml, 6.2.2 Lanutan peng-ncer Ke dalam labu ukur I liter yang mengandung 300-50 + ml air, tambahkan $8 ml HNO; dan 67 ml Hz SOs, impitkan dan kocok. 623 Lanutan baku vaksa 6.2.3.1 Larutan baku 1000 mg/l Larutkau 0.1354 gram HaClz dalam 100,0 ml air sulisg. 2 Lantan kerja Jing fg ken Eom anwtan sduk (6.2.3.1) dalam 1 1 HgSO. No Lanutws kerja int hari dibuat ebelum digun kan 6.3 Peralatan a) Spektrofote: serapan atom yang dilengkapi lengan lanpu katoda Hy das generalor ap hidrida CHVG") bd) Labu dekstruksi 280 ml berdasar bul. 2) 4P: Jiingin terbuat dari borosilikat, diameter 12-18 mm, tinggi 400 mm. diisi dengan cincin “Raschig” setinggi 100 mm, kemudiau dilapisi dengan batu didih berdiameter 4 mm di atas cincin setinggi 20 min. 4) Labuukur 100 m}, terkalibrasi 6 dari 16"N 64 Cara kerja 1... Pengubuan basal - coi Sg eee ‘Tunbang 5 gram coritoh ké dalam labu dokstruksi, tanibah 25.ml-HySOq LN, 20> mi HNO; 78/1 nil Tahitan natiiunt molibdat 296; dan'S-6 babe Baa didi” b) Hubungkan labu dekstruksi dengan pendingin dan panasken selama 1jam. Hentikas pemanasan dan biarkan selama 1S menit. ¢) Tambah 20 ml HNO;-HCIO, (1:1) melalui pendingia. 4) putih. Lanjutkan pemanasan selama 10 menit, kemudian dinginkan. ©) Dengan hati-hati tambahkan 10 ml air melalui pendingin sambil labu digoyang: soyangkan. ) Didihkan lagi selina 10 menit 5) Maikan pemanas dan cuci pendingin deugan 3 kali 15 ml air suling, dinginks subu kaunar h) Sevara kuuntitatif, pindahkan larutan dekstruksi contoh dalam Tabu ukur 100 ml, encerkan dengan air suling sampai tanda garis. i) Ke 3) Siapkan deret standar, akan blanko dengan pemakaian pereaksi seperti yang digunakan. Pada contol. k) Tambahkan 20 ml larutan pereduksi ke dalam laruan deret standar, larutan dekstruksi, dan Larutan blanko 1) Baca absorbansi Inrutan deret standar, laruta dekstriksi, dan tartan blanko dengan menggunakan spektrofotometer serapan alom tanpa nyala pada panjang gelombang 253,7am, m) Buat kurva kalibrasi dengan sumbu Y sebussi absorbansi dan suwnbu X konsentrasi (dalam ppm) 1) Hitung kandungan Hg dalam contoh. ‘Sebagai alternatif, peuyiapan contok dapat dilakukan dengan pengabuan kering meaggunakan digester microwave 7 dari 166.4.2 Dekstruksi menggunakan digester microw: ve dengan sistem tertutup i 2 ml HNOs dan 1 ml HG ‘+ hutup Fapal: dan m:sukkan ke dalain oven mic: owave. Kerjakan.sesuai-denzan petuniv: pemakaian alat 2 Fiakin’ Blanka congan peniakaian pereakéi seperti yan: dagu: c) Seapkan deret stan lar A Fowsbabiom 20 mit laruthars petedukss ) - a) Sesuai dengan butir.7.4--adan bo. H 8) Timbang 5,00 g-contoh ‘dalam botol . polictilen (Polipropiten) 20 mi, kefiidian tambahian 5,00 g modifier matriks dan kocok, ¢)_ Ulang perlakuan tahap 7.4.1,¢ terhadap deret standar blanko 1.4.3. Peayiapan peralatan unk penetepan tembaga, besi dan nikel 4) Yyalakan spektrofotometer serapan atom dan Korektor latar balakans deurium (D2) ‘arurlch arus lampu, lebar celah, panjang gelombang dan aplikasi. Panjang gelombang wang dibumabkan adalah 324,7 nm untuk tembaga (Cu), 303,1 am untuk besi (Fe), dan cphite furnace atomizer dalam spekirofotomeler serapan atom cce seperti pada tabel 1 don arurlah program yang diburuhkaa untuk fi Tabel 1 Program graphite furnace atomizer untuk Cu, Fe, Ni Tanap | Suh, Pap ume, | Holdtime, i _ dak | ET) 2700 1200 Apabila tidak mu us di diatas, an program vans $2 1 Gunakan tabunz grafit normal +44 Penyiapan peralatan untuk penetapan timbal (Pb) 3 a dan b, Panjang gelombang yang dibuuhkan adalah 263.3 nin, dan 2} Sesuai butir 2 dan tabel 3. sen graphite furnace atomizer sepert tertera pasa tl 411 dari 16: Tabei 2 Program sraphite furnas izer untuk Pb untuk tabung yang tidak dil 2 Tabap Sub. "C Hoidtime detik Aliran yas. i a mi menit 2 7 i 300 3 i ° i 2 o i 2 as Tabel 3 Program graphite furnace atomizer untuk Pb ‘untuk tabung yang dilapisi pirolitik Tabap ‘Subu. °C Ramp time, | Hold time, detik + Aliran gas, i l i detik | m'menit_: i 10 i a] Togog ot t i 0 i 20 300 t t $s a i i = i t 3 some! bb) Sebelum metalaikan injeksi,bilasi pipet tip dengan cara memipet 20 ul siklo-heksana dan kemudian membuansnya, 7.48 Penetapan absorbansi optimum T4S1 — Blanko tabung grafit -Amanilah absorpsi dari tabu 745.2 Blanko larson mii Di akan pipet miizo atau automatic sempter, mpeksthaan > 3 an mengst dafam eraphite firmacs dan e3! 2" 1.83. Standardisasi peralaran ketiga larutan deret standar ke dalam graphite Dengan menggunakan pipet_mikro. injeks nace, dan catatiah absorbansinya, 12 dari 1674.S4 Analysis contoh f-menggunaksur-pipet-mikro, injeksikan 2.) ul contoh minyak, ke- dalam graphite. fuimace dan catatlah absorbansinya. b) Lemak (yang mempunyai titik leleh diatas 40°C Siaykan program tanibahan dengan tahap-tahar seperti berikut Holi time 20 detik, shu 60°C, aliran gas interal 0 ml/menit. Mulailah dengan progarn sulu:, Pada tahap awal, dengan menggunakan pivet mikro, masukkin 20 ul lemak yang telalr dilelshkan ke salam graphite furnace, biarsan tip berada pada pembukaan_injeksi mtu mencairkan lernak, kemwdian injeksikan. C:tatlah absorbansinya. ¢) Labukan penetapan duplo 4) Buat kurva kalibrasi Bus! kurva kalibrasi dengan cara memplot al~orbans dari deret standar yang telah dikoreksi terhadap blanko, terhadap kandungan !ogam. ¢) Hiting kandungan logam dalam contoh TASS Perhitungan Kandungn logam dalam contoh adalah nilai yne langsung diperoleh dari pembacaan konsentrisi pada kurva kalibrasi Calatan 1 Botol plietilena utau poliproilena bebas logaun disiapkan sebagai berikut Ber-shkan botol-botol tersebut dengan asam nitr:t hangat (7.3,¢), bilasi dengan zar suling ata kerinekau dalam oven pada suhu 80 °C 2. Minyak dengan kandungan logam rendah Aititkan alumunium oksida (7 3.4) dengan cara memanaskaesna dalam oven pada suhu 16070 seta 14 yun. Siapkan kolom kromatogat dengan menggunak.ss ahsicoan ckside yang telah diaktitkan dengan sebanyak 2 x massa minyak yang akan dimurnikan Larutkan 1 bagian (massa) minyak dalam 3 bagizn (volume) light petroleum. Masukkan anitan minyak ke dalam kolom dan elusikan dengan $ bagian (volume) light petroleum. kan light petroleum dengan menggunkan aliran nitrogen, diatas penangas air yang +, dipanaskan. Hitangkan sisa-sisa-light petroleum dalam minyak yang telah, dimumikan dengan menggunkan vakum, 13 dari 163. Untuk setiap penetapan logam, sunakan tabung grafit yang terpisah Tabung grafit untuk penetapan besi harus dilapisi dengan niobim untuk meyakinkan pahwa'Semuia ‘bési’ telah ditetapkan: ‘Bila’ diguhiakan’ tabung erafit yang tidal “dilopisi, maka hasilnya akan bervariasi terganning dari jenis senyawa besi yaug terdapat dalam contoh. Cara melapisi tabung grafit adalah sebagai berikut : Dengan menggunakan pipet milo, injrksikan 100 ul forutan niobium nitrat ke dalam furnace. Mulailah dengan program suhu untuk pengeringan pada 100 °C selama 60 detik, dan kemudian atomisasi pada 2700 °C selama $ detik. Ulangi prosedur ini sampai 300 ul Iarutan niobium nitrat diinjeksikan. Atomisasixan pada suhu 270°C: sampai diperolsh absorbansi yang tetap {untuk menghilangkan kontaminasi besi) 8 _ Cemaran logamn; tembaga (Cu), besi (Fe), Nikel (Ni ) dalam minyak $8.1 Prinsip Pengabuian join Lerikast graphite tumice: a) Spehteiuiometer serapat bb) Cawon kuarsa, kapasitas 100 ml an ps d) Labu uber lyn asi Aseemnitiot HIND s2M 84 Carakerja a) Timbang 30 gram minyak kedalam cawan ku berkapasicas 190 ml b) Tunplah cawan tersebut dengan tutup kaca pyre dan cea dengan pe -kemuidian arangkan selama kira-kira 24,jam : ates pencn listrik pada suhu 300 14 dari 16| ¢)Apabila contoh sudah tidak berasap lagi, lanjuhn pengabuan di dan tanur pada suhe “400 °C selama 2 jam dan sempurnakan pengabuan tersebut praca suhu $00 jam 4) Angkat cawan berisi abu dari datam tanur dan linginkan, ©) Levutkaa abu dengan $ ml asa nitrat 2 M, dan brngatkan di ates penangas aur selana 30 miei 1) Pindakkan tartan ke dalam Tabu ukur 10 mi, Bilusi cawan dan impitkan tabu vba dessgan TINO; 2 M. @) Kerjakan blanko dengan menggunakan pereaks: yang sama seperti pala contoh, h) Bacalah absorbansi larutan blanko, standar dan contoh dengan mengrunakan Spektrofotometer. Serapan Atom dengan atomizer batang karbon dengan kondisi pengoperasian alovizer dan parameter instrumen seperti tertera dalam but 7.4.3 j) Bust karva kalibrasi, Dengan sumbu y sebagsi absorbansi dan sumbu X sebagal konsentrast j) Hitung kandungan cemaran logam dalam contoh. 3.8 Pechitinga Eand-ean ogam dala conto. dibitung dengan menggunakan runus sebaysi berikut (ug to win!) dat kurv Kabsbras: xv Kantian Lowann (ue!) Ee yadda volume pel wea mi adalah bobot contele «alam gram. 9 Pembuatan larutan standar 9.1 Varutan standar 1090 mg PbA Lanutkan 1,000 gram Pb dalam 30 ml HCI 1: 1. Dinginkan dan masukkan ke dalam labu kur 1000 ml, encerkan dengan air suling sampai tanda garis. 15 dari 169.2 Larutan standa r 1000 mg Cw Larutkan 1,000 gram Cu dalam 30 ml HNO; 1: 1 panas. Setelah dingin, tambabkan 50 ml HCL 1: 1, kemudian masuikan ke dalam labu ukur 100 mi, encerkan dengan air suling sampai tands garis. 93 Larntan standar 1000 mg Zn Lenutkan 1,000 gram logam seng dalam 30 mi HCl i : 1 panas, Setelah cingin masukkan ke dalam labu uur 1000 mi dan encerkan sampai tanca garis. 94 Lanitkan standar 1000 mg Sn Larutkan 1,000 gram timah dalam 100 ml HCI dengan pemanasan pada suhu 5 -80 Setelsh larut dinginkan dan tambalikan lagi 200 ml HC1, kemudian masukkan ke dalam labu kur 1900 ml, encerkan dengan air = sampai tanda garis, 9.5 Laratan standar 1000 Fel Laruckan 1,000 gram besi dalam 1 ml asam klorida 6 N, kemudian masukkan ke dalam labu elur 1000 ml, dan encerken dengan a sampai tonda garis. Caratan wsitar dapat juga disiapkan dar ai al wif pembustan Larut 16 dari 16