Scribd Logo
Upload

Welcome to Scribd!

  • LIBRO DE Valida - Met - Anal - AEFI PDF

    Uploaded by

    Vidal Flores Copa
    5 views315 pages

    Original Title

    LIBRO DE valida_met_anal_AEFI.pdf

    Copyright

    © © All Rights Reserved

    Available Formats

    PDF or read online from Scribd

    Did you find this document useful?

    Is this content inappropriate?

    Report this Document

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Download as PDF or read online from Scribd
    Flag for inappropriate content
    5 views315 pages

    LIBRO DE Valida - Met - Anal - AEFI PDF

    Uploaded by

    Vidal Flores Copa

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Download as PDF or read online from Scribd
    Flag for inappropriate content
    of 315
    A.E.F.I. ASOCIACION ESPANOLA DE FARMACEUTICOS DE LA INDUSTRIA. VALIDACION DE METODOS ANALITICOS AUTORES Generalidades, materias primas y especialidades farmacéuticas Leticia Aguirre Ortega Maribel Martin Pomar F. Javier Garcia Garcia Begofa Mateos Pérez Tetesa Garcia Junca Cristina Ochoa de Echaguen Aguilar Mique! tilera Fontanet Miguel Angel Ortega Sanchez Marta Juncadella Roca Marti Pujol Forn Monica Lizondo Carbo Marisa Reig Serrat ‘Anna Maria Liuch Sanfeliu Marta Torres Gontaus Métodos en Microbiologia ‘Susana Antinez Moreno Cesca Niubé Prats ‘Ana Maria Carro Vinaras Maria Pilar Oliver Aguera Antonia Garcia Avila Métodos en Bioandlisis Me Cruz Caturla Perales Carlos Nieto Abad Carles Cetma Lezeano José Antonio Pérez Cuadrado Gregorio Encima Garcia Maria Rovira Guerin Josep M. Jansat Rufach Digna Tost Robusté Estadistica aplicada y tablas estadisticas Rogelio Cortés Loras COORDINADORES José Antonio Pérez Cuadrado, voca' ae 160 ae ls Seccin Caaiana de AEFI Marti Pujol For, vocal de Conte Caidad dels Secciin Coat de AEFI La Asociacion Espajiola de Farmacéuticos de la Industria-AEFI, agradece la inestimable colaboracién de las siguientes empre- sas que han facilitado la edicion de esta monografi Agilent Technologies Innovating the HP Way analitica MERCK AGILENT TECHNOLOGIES Carretera Nacional VI - Km 18,200 28230 Las Rozas (Madrid) Tel.: 91 631 30 42 MCC ANALITICA, S.A. C/. Ganduxer 129 08022 Barcelona Tel.: 93 212 00 33 MERCK EUROLAB Distribucion material para laboratorio Pol. Merck 08100 Mollet del Vallés (Barcelona) Tel.: 93 565 55 00 PERKIN ELMER, S.L. Av. Universitat Autonoma 3A 08290 Cerdanyola del Vallés (Barcelona) Tel.; 93 582 45 22 PH-C Laboratorio de analisis C/. Esmeragda 19-21 08950 Esplugues de Llobregat (Barcelona) Tel.: 93 473 96 62 SOCIEDAD DE VALIDACION DE SISTEMAS, S.L. C/. Fedanci 8-10 — Baixador de Sant Joan 08190 Sant Cugat del Vallés (Barcelona) Tel.: 93 675 25 24 INTRODUCCION: OBJETO, AMBITO DE APLICACION Y CONTENIDO DE LA MONOGRAFIA En el afio 1989 un grupo de profesionales integrantes de la Seccion Catalana de AEFI (Asociacion Espanola de Farmacéuticos de Industria) preparé una. monografia sobre “Validacion de métodos analiticos”. Por aquel entonces era un tema de gran actualidad pero estaba lejos de su regulacion y habia muchas opiniones divergentes de su necesidad 0 de como llevarla a cabo. Estaba muy extendida la idea de que la validacién analitica era un {ramite burocratico, con poca 0 ninguna implicacién por parte del laboratorio y que bastaba incluiria en los dosiers de Registro Los objetivos primordiales de aquella publicacién fueron + Aportar una vision global y sistematizada de la validacion analitica. ‘ * Orientar a los técnicos de los laboratorios de control e 1D que se enfrentaban, en su trabajo diario, a la problematica de la validacién. EI ambito de aplicacién de a monografia’ se dirigié principalmente hacia los métodos analiticos de tipo quimico e instrumental de uso mas comun: control de materias primas. producto terminado y estudios de estabilidad y de desarrollo galénico, : Los métodos analiticos de tipo microbiolégico y los destinados a estudios de metabolismo. farmacocinética y bioequivalencia podian presentar particularidades que no se contemplaban en aquel trabajo. Desde entonces y hasta la actualidad la situacién ha cambiado radicalmente, de tal forma Que hoy en dia no se concibe la idea que un laboratorio pueda utilizar un método analitico que no haya sido objeto: previamente de algun tipo de validacion, transferencia o, simplemente, comprobacién. La bibliografia cientifica en este campo es tan abundante que se hace dificil seleccionar los trabajos mas interesantes. Actualmente el tema esta bien regulado, con monografias de caracter obligatorio como las publicadas en las Farmacopeas Europea y Americana o bien con textos de cumplimiento recomendable como son las Normas ICH (Intemational Conference Harmonisation) o las guias editadas por las agencias. teguladoras. A pesar de todo ello, de forma periédica_y desde diferentes sectores, se han venido fecibiendo peticiones de actualizacién de la Monografia AEFI. Las Vocalias de Control de Calidad e 1+D de AEFI Catalana decidieron finaimente acometer de forma conjunta ta confeccién de una nueva Monografia y crearon una comisién de trabajo con este fin A grandes rasgos el planteamiento de la Comisién se basé en que la Monografia debia ‘cumplimentar los puntos siguientes: 1) Ambito de aplicaci6n amplio, con inclusion de todos los campos analiticos de las areas quimica, galénica. microbiolégica y farmacolégica. 2) Explicacién y desarrollo de los principales conceptos tedricos. 3) Inclusion de ejemplos, 4) Explicacién de los éonceptos estadisticos necesarios para una buena comprensién de la parte teorica y de los ejemplos ’ For motivos practicos, la Comision se dividié en cuatro Subcomisiones (Especialidades y La segunda parte trata de la Validacién de métodos analiticos de tipo quimico e instrumental para especialidades y materias primas. So desarrollan los parametros fundamentales de la validacion (selectividad, linealidad Precision, exactitud y limites de Geteccion y cuantificacion) y una serie de temas relacionados. idenenica de los sistemas, La cuarta parte trata de la Validacién de métodos analiticos para los estudios de Farmacologia, Farmacocinética y Bioequivalencia y se basa en of eetecio y comentario Critico del borrador de la FDA (Food and Drug Administration) sobre “ ioanalytical Methods Validation for Human Studies": Validacion durante la tase previa a un estan (selectividad, curva de calibracion, precision, exactitud, recuperacidn, estabilidad de las muestras), validacion durante la fase de realizacion del estudio y documentacion Finalmente la quinta parte sobre Estadistica aplicada incluye una exposicion de los desenige- stadisticos fundamentales (poblacion y muestra, indices estadisticcs fegresion y disefios factoriales, Finaliza con una resefia de k estadisticos disponibles en el mercado. La Comision agradece especialmente ta colaboracién de las empresas que han Maansorzado el proyecto, gracias a la cual se favorecera la difusién y distnibucion de 14 Monografia INDICE GENERAL ABREVIATURAS_.......-. . i: GLOSARIO ... oe eed PARTE| — GENERALIDADES PARTE II: VALIDACION DE METODOS DE ANALISIS EN MATERIAS PRIMAS Y ESPECIALIDADES FARMACEUTICAS PARTE Ill: VALIDACION DE METODOS DE ANALISIS EN MICROBIOLOGIA PARTE IV: VALIDACION DE METODOS EN BIOANALISIS PARTE V: — ESTADISTICA APLICADA. APENDICE " 19 39 136. 209 249 315 a (=a) b (=B) e e% gl (=v, DF) kK miz eS oe x N Abreviaturas y simbolos. 7 ABREVIATURAS Y SIMBOLOS Termino independiente en una recta de regresién o curva de calibracion Pendiente en una recta de regresién o curva de calibracion. Diferencia significativa en una prueba estadistica v)) Residual en la recta de regresion Error en porcentaje. { Factor de respuesta | \ Grados de libertad. Factor de‘tapacidad.” Relacién masa/carga en espectrometria de masas. Generalmente coincide con la masa de un ién (si la carga es la unidad), Tamaho de la muestra; numero de valores ‘de una serie; numero de réplicas de un tratamiento. Nanogramo, Nanémetro, Probabilidad de que un estadistico determinado sea mayor que el valor observado. Partes por millon (equivalente a pg/mL 0 g/g). Partes por billon anglosajén (1x10) (equivalente a ng/mL. 0 ng/g). Coeficiente de correlacién. Coeficiente de determinacion. Desviacion estandar de una muestra Variancia de una muestra, Desviacién estandar de la media Estadistico de Student. Tiempo de retencién de un analito. Tiempo muerto (tiempo en el que un compuesto no retenido pasa por el interior del sistema). Variable independiente (valor nominal), Media de una muestra. Valor estimado 0 calculado de la variable independiente. Variable dependiente (valor experimental). Valor estimado 0 calculado de la variable dependiente. Variable tipificada de la curva de Gauss 0 normal. 8 Abreviaturas y simbolos ‘AAPS American Association of Pharmaceutical Scientists. AOAC Association of Official Analytical Chemists. ‘ANOVA Analisis de la variancia. BPL (=GLP) Buenas practicas de laboratorio. CCF (=TLC) Cromatografia en capa fina. cr lonizacién quimica (método de ionizacion en Espectrometria de Masas) CLE Concentracién limite de endotoxinas (método LAL), CSE Endotoxina estandar de control (método LAL). CV (=CV%) Coeficiente de variacién D Estadistica de la prueba de normalidad de Kolmogorov. DAD Detector de diodos. DF Grados de libertad DLs Dosis letal 50. eC Electroforesis capilar : EMEA Agencia Europea de Medicamento. EPA Environmental Protection Agency, eu Unidades de endotoxina (método LAL). EP(=Eur. Pharm.) Farmacopea Europea. ER% Error relativo porcentual. Se utiliza especialmente en Bioandlisis, F Valor de la distribucién de Snedecor-Fisher. FDA Food and Drug Administration. FTIR Espectrometria IR con transformada de Fourier. 6 Estadistico de la prueba de homogeneidad de variancias de Cochran GC(=CG) —_Cromatografia de gases. ‘ Gc-Ms Acoplamiento de cromatografia de gases con espectrometria de masas. om Media geométrica (método LAL) HPLC Cromatografia liquida de alta resolucién, He Hipotesis nula. Hy Hipotesis alternativa. IC(=LC) —_Intervaio de confianza. ICH International Conference of Harmonisation. tupac International Union of Pure and Applied Chemistry, kK Numero de grupos. LAL Lisado de amebocitos de Limulus. LC (-LOQ) Limite de cuantificacion. LD(=LOD) Limite de deteccién Lims Laboratory Information Management Systems, Mc (=Ms) MDv Ms Ms-MS N NIST NMP RSE SC (=Ss) SIM T TSA TSB UFC usp uv a B v (=gl 6 DF) Zann m M ug (=meg) ¥ Abreviaturas y simbolos 9 Media cuadratica (en ANOVA). Maxima dilucion valida (método LAL). Espectrometria de masas. . Espectrometria de masas en tandem Numero de platos tebricos National Institute of Standards and Technology. Numero mas probable de microorganismos. Patron de referencia de! método endotoxina (LAL). Pass/Fail Cutoff (método LAL). Estadistico del test de recorrido de Dixon, Porcentaje de recuperacién Resolucién (cromatogfafia). Endotoxina estandar de referencia (método LAL). ‘Suma de cuadrados en ANOVA. Monitorizacion selectiva de iones (método de adquisicién de elevada sensibilidad en espectrometria de masas). Factor de asimetria Agar triptona soja. Caldo triptona soja. Unidades formadoras de colonias. Farmacopea de los Estados Unidos Ultravioleta. ‘Anchura de pico cromatografico. Error de tipo | (falso positivo), Error de tipo II (falso negativo). Grados de libertad, Longitud de onda. Sensibilidad del lisado (LAL). Estadistico de la distribucion de Poisson. Desviacion estandar de la poblacién. Variancia de la poblacion. ‘ Media de la poblacion. Microgramo. Estadistico de Chi cuadrado. Glosario 11 GLOSARIO El presente glosario se limita a los términos estadisticos y propios de, ja validacién analitica En los casos procedentes se indica entre paréntesis la expresién equivalente en lengua inglesa. Analito (Analyte) sustancia contenida en la muestra sometida a andlisis. Blanco de matriz biolégica (Blank matrix). Matriz biolégica (normalmente sangre, plasma, suero u orina) libre de los analitos a cuantificar. Blanco, placebo o matriz de la muestra (Blank, placebo, sample matrix). Muestra Preparada para la lectura final pero que no contiene analitos. Puede ser un blanco de los Feactivos 0 bien un blanco de la muestra problema que contenga todos los ingredientes de la muestra problema excepto los analitos. En este’ ultimo cago se denomina placebo o matriz de la muestra, - Este concepto de _matriz no puede aplicarse a las plantas medicinales, ya que no es posible Separar los analitos del resto de componentes. ‘En el ambito de plantas el término matriz se utiliza como sinénimo de muestra representativa, Cantidad declarada o nominal (Labeled amount). Es la cantidad 0 concentracién tedrica de un analito. Cuando se trabaja con concentraciones relativas se le da valor 100. Cantidad estimada 0 calculada. Contenido, riqueza, potencia. Es la cantidad o concentracién de analita hallada tras la ejecucion del método analitico, ya sea por un método directo 0 por comparacién con un estandar o varios estandares (interpolacion en una curva de calibracién), Coeficiente de variacion o desviacion estandar relativa (Coefficient of variation or relative standard deviation). Es la desviacién estandar expresada como funcion de la media. Normaimente se exptesa en porcentaje. cr ea= **100 Desviacién estandar (Standard deviation). Estadistico basico indicativo de la dispersién variabilidad de los resultados. ' - EOP, [ne Gy? TT ae Desviacién esténdar de la media o error estandar (Standard error of the mean). La desviacién estandar de una media de n resultados se obtiene a partir de la siguiente expresion: In Disefio factorial (Factorial design). Plan de experimentacién cuya caracteristica mas destacable es que los valores de todos los factores se van moviendo simulténeamente. En la experimentacion los disefios mas utiizados son los de dos niveles, de forma que un diseno factorial completo de K factores con dos niveles por factor, conduce a un numero de experimentos igual a 2" 12 Glosinn. Disefio factorial fraccionac.» (Fractional factorial design). Los disefos tactoriales fraccionados permiten estudiar un numero elevado de factores con un numero de experimentos mucho menor de lo que requeriria un factorial completo. Si el numero de niveles es 2, el nlimero de factores a estudiar es K y el grado de fraccionamiento es P. el numero de experimentos a realizar es 2**. Al reducir el numero de experimentos se Presentan una serie de confusiones, que pueden afectar a la puesta en evidencia de las interacciones entre los efectos principales. Distribucion de probabilidad . Modelo matematico que relaciona los valores de una variable con su probabilidad de ocurrencia en la poblacién. Las distribuciones mas frecuentes son la normal, la { de Student, la F de Snedecor y la chi-cuacrado entre otras. Efecto de la dilucién (Dilution effect). El rango de una recta 0 curva de calibracion debe abarcar el rango de las concentraciones esperadas de analito en las muestras problema, No es recomendable extrapolar resultados por debajo ni por encima del rango estudiado en la linealidad. Cuando ta concentracion de la muestra problema es superior al limite superior de! rango de linealidad se puede diluir 1a muestra convenientemente (con agua o con blanco, seguin los casos) y reanalizarla. Conviene demostrar que el efecto de la dilucién no afecta la exactitud y precision de! método mediante el analisis de muestras con patrones o placebos cargados con analito sometidas al proceso de dilucion. Error relativo porcentual (Relative error in percentage), Desviacion en porcentaje de los valores experimentales frente a los valores tedricos. e%=ER' [(Valor experimental- valor teérico)/valor tedrico}*100 En el caso de una curva de calibracién el error relativo porcentual de cada uno de los Patrones se halla mediante la expresi6n: ER% = [s cu), 100 x siendo x, los valores tedricos y i; los valores experimentales estimados Por aplicacién de la ecuacién que define la curva de calibracion. (Si es una recta: x; = (y;-a)/b ). Error, Error sistematico, Error aleatorio (Systematic error, Random error). Los errores analiticos, que se cometen al efectuar los analisis, pueden ser determinados o indeterminados. Los errores determinados 0 sistematicos van en una sola direccién y se deben a fallos de instrumentos, personas 0 métodos. Deben eliminarse (0 corregirse sus efectos) puesto que afectarian la exactitud del método. Los errores indeterminados 0 aleatorios son de origen desconocido, actuan en ambas direcciones y determinan la variabilidad de los resultados 0 precisién del método. Los errores indeterminados son objeto de los tratamientos estadisticos (no confundir los errores analiticos con los errores «ty fb 0 riesgos de los tests estadisticos). Estabilidad de la muestra (Sample stability). Es un requerimiento basico la demostracién de la estabilidad de la muestra y de los patrones durante el tiempo comprendido entre su Preparacién y la finalizacion del analisis, especialmente cuando se utilizan equipos automaticos en donde las muestras pueden permanecer horas antes de ser analizadas. En el Ambito bioanalitico ta estabilidad es un parametro fundamental. Estandar de referencia. Estandar de trabajo (Primary reference standard. Working standard). Un estandar de referencia 0 patron primario es un producto homogéneo con Propiedades especificas (identidad, pureza y riqueza) que ha sido analizado y certificado por un organismo cualificado y homologado (reconocido oficialmente), Glosario 13 Un esténdar de trabajo o patron secundario es un estandar cuya riqueza (u otras caracteristicas), ha sido comprobada y calibrada mediante un metodo validado frente a un patron de referencia Exactitud (Accuracy). Expresa la proximidad entre el valor que es aceptado Convencionalmente como’ valor verdadero, valor nominal, teérico un valor de referencia y el valor encontrado experimentalmente. Capacidad de! método analitico para proporcionar resultados lo mas cercanos posibles al valor tedrico 0 nominal. Matematicamente se expresa como el valor numérico del error sistematico (diferencia entre el valor medio hallado y el verdadero) o bien como error relativo porcentual, En Microbiologia. cuando se trata de efectuar contajes microbianos, Ja exactitud se define como el porcentaje de recuperacién frente al valor del inoculo. En Materias primas y Especialidades se utiliza también el porcentaje de recuperacion como expresion equivalente a la exactitud si bien el concepto de recuperacion puede ser diferente a la exactitud en otros ambitos de trabajo (Bioandlisis, Plantas medicinales, etc). Véase el término de “recuperacién’ de este glosario, Factor de capacidad (Capacity factor). En un método cromatografico es el numero de vollmenes de fase mévil necesarios para eluir un compuesto después del volumen inicial contenido en la columna. Factor de simetria, factor de asimetria o factor de cola. (Tailing factor). Medida de la asimetria de la sefial generada por el pico cromatografico. Fiabilidad (Reliability). Capacidad de un método analitico para mantener durante periodos Ge tiempo apropiados los cntenos tundamentales de validacion. La fiabilidad indica les Prestaciones del método para uso rutinario. . Grados de libertad (Degrees of freedom). Numero de categorias independientes que definen una muestra o una poblacién. En el cdlculo de la desviacion estandar significa el numero de desviaciones independientes con respecto a la media y vale n-1. En el caleuls de {a recta de regresién, el numero de grados de libertad es n-2 Homogeneldad de variancias (Variance homogeneity). En muchos tests estadisticos es mer esario comprobar previamente la homoscedasticidad (nomogeneidad de variancias) de las muestras mediante tests especificos (F de Snedecor, Cochran, Barielt. Levene. etc). La Condicion de variancias diferentes recibe el nombre de heteroscedasticidad Idoneidad det sistema (System suitability test). Conjunto de ensayos que permiten comprobar en el momento de utiizacién del, método que el Incertidumbre de una medida (Uncertainty). Estimacién del intervalo dentro del cual se encuentra el valor verdadero de la cantidad medida una vez efectuadas las correcciones debidas a errores sistematicos. en magnitud entre la mayor y isfactoriamente con adecuada Si bien la denominacién rango es muy comin, deberian utiizarse los términos intervalo, amplitud 0 recorrido como mas apropiados para esta definicion (Rango es el equivalente inglés del término “Rank” que significa niimero de orden dentro de una serie). Intervalo de confianza o limites de confianza (Confidence interval o confidence limits) Intervalo en torno al valor estimado que contiene el valor real con una probabilidad determinada. Se aplica en diversas situaciones: limites de confianza de ure determinacion individual, de una media de resultados, de una variancia, de una recta de tegresion, etc, V4 neain: Limite de cuantificacién (Limit of quantification), Minima cantidad de analito que puede determinarse cuantitativamente con una adecuada exactitud y precision Limite de deteccién (Limit of detection). Minima cantidad de analito que puede ser Getectado aunque no necesariamente cuantificado con precisién y exactiud tinealidad (Linearity). Capacidad del método para proporcionar resultados que son Girectamente (o por medio de transformaciones ‘matematicas) Proporcionales a la Concentracion del analito en la muestra dentro de un rango establecido Marcador de calidad, En el andlisis de ciertas plantas medicinales y con el objeto de definir de cae ticaciones de calidad se determinan analitos presentes en la planta (marcadores de calidad) que no son los causantes de la actividad terapeutica, Media aritmética (Mean, average). Valor de centralizacién de una muestra 0 poblacién. Equivale a la suma de todas las observaciones dividida por el numero de las mismae Método analitico © ensayo (Analitycal procedure, analitycal method, test Procedure). Procedimiento que explica delalladamente todas las operaciones necssariae para efectuar un analisis concreto. Método bioanalitico (Bioanalityeal method). Método destinado a la determinacién de analitos presentes en matrices bioldgicas, normalmente sangre, plasma, suero u orn Método de referencia (Referece method). Método validado del que se sabe que resulta adecuado para efectuar un cierto tipo de analisis. Método indicativo de estabilidad (Stability indicating method). Método altamente Selective en el que la presencia de impurezas y productos de degradacion influye on los resultados obtenidos. Muestra (Sample). Producto resultante de una operacién de muestreo. El muestreo debe seaigeresentativo y con un determinado caracter aleatorio si bien, en algunos tipos de analisisy en aplicacién de la flosofia del peor caso, se propician muestreos sesgados Muestra de contro! de calidad (en bioandlisis), (Quality contro! sample). Muestra de raz Blologica con una concentracién conocida de uno o varios analtos que se utiliza para comprobar la precisién y exactitud del método asi como la estabilidad de los analitos, No se utiliza para la determinacién de la curva de calibrado, Muestra de patrén de calibrado, (en bioanélisis), (Calibration standard sample); Muesta de matriz biolégica con una concentracion conocida de uno 0 varios analitos. Se utllina exclusivamente para la determinacién de la curva de calibrado. Muestra real, analitica 0 problema (en bioanilisis),"{Analityeai sample, real sample). Muestra biolégica susceptible de ser analizada. No se refiere a muestras de patron de alibrado 0 a muestras de control de calidad preparadas con blancos de una matris biolégica, Ponderacién, modelos de regresién ponderada (Weighting method). Se aplica para forreait la heteroscedasticidad 0 falta de homogeneidad de variancias en las respuestas de igs distintos niveles de una curva de calibracign. Se emplea en Bioandlisis al ser muy amplio el rango de concentraciones. Dado que en la regresion por minimos cuadrados las diferencias entre los valores experimentales y los valores calculados suelen ser mucho Trayores en los valores altos de concentracién, la ponderacién equilibra el peso de las distintas concentraciones de la curva de calibrado. Los factores de ponderacion mas utiizados son 1/Concentracion y 1/Concentracion al cuadrado. Glosario 15 Precision (Precision). Capacidad de un método para proporcionar resultados proximos entre si. Grado de, dispersién de los resultadas analiticos respecto.a su valor medio. Se puede estudiar a tres niveles: Repetibilidad. Evalua la precision de! método efectuando una serie de analisis sobre la misma muestra en las mismas condiciones operativas (aparatos, reactivos, analista) en un mismo laboratorio y en un periodo de tiempo corto. Precision intermedia: Evalua la precision del método frente a variaciones internas del laboratorio (analista, dia, instrumento, etc.). Es la precision intralaboratorio. Reproducibilidad: Evalda la precision entre laboratorios diferentes. Recta de regresién (Recta de calibracidn, Curva de calibracién). (Regresién line, Calibration line, Calibration curve). Relacién entre las respuestas instrumentales que Produce un analito y las concentraciones del mismo. Siempre que sea posible se buscaré una respuesta de tipo lineal. Cuando no lo sea se podran efectuar transformaciones matematicas para “rectificar” la curva de calibracion o bien se ajustara a funciones mas complejas. Cuando el rango de trabajo sea muy amplio se pueden utilizar factores de ponderacion. Recuperacién (Recovery). Se define como eficacia en el rescate del analito de la matriz de ‘a muestra. Es un parametro que se debe estudiar durante el desarrollo de! método analitico La recuperacion ideal es de! 100%. Recuperaciones mayores indican interferencias debidas a la matriz o errores determinados que deben eliminarse; recuperaciones menores indican pérdidas de analito durante las fases de preparacion de la muestra Cuando la recuperacién no es satisfactoria pero es reproducible cabe la posibilidad de utilizar ef método analitico empleando un factor de correccién que compense las pérdidas de analito. De esta forma no se ve afectada la exactitud. Es el caso por ejemplo de métodos analiticos para validar la limpieza de equipos. Lo mas habitual, sin embargo, es que el Propio método analitico incorpore mecanismos que eliminen el error de recuperacién, por ejemplo rectas de calibracién realizadas con la matriz, métodos de adicion de esténdar 0 métodos con estandar interné. Relacién sefal-ruido. Ruido de fondo (Signal to noise ratio, background noise). En temas instrumentales es la sefial residual o linea de base registrada con concentracin cero de analito. Es decir, es la sefial ruido que proporciona un blanco o placebo. Matematicamente suele expresarse como la desviacion estandar de la respuesta de un cierto numero de blancos. Réplicas y repeticiones. En la presente monografia se entiende como “réplicas” o replicados a los analisis sucesivos de una muestra en las mismas condiciones utilizando el metodo analitico completo, desde la preparacién de la muestra hasta la medicion final de analito. Las inyecciones repetidas de la muestra final (duplicado, triplicado) que se realizan para mejorar la precision instrumental no son réplicas, sino repeticiones que dependeran de la Precision del sistema instrumental empleado, Residual (Residual). Es la diferencia entre el valor observado experimentalmente y el valor estimado en una recta de regresién o curva de calibracion Resolucién (Resolution). Medida de la separacién entre dos picos cromatograticos. El valor de resolucién ideal es aquel que permite la resolucién hasta la linea de base entre los picos de interés, Revalidacion (Revalidation). Repeticion total o parcial de la validacion de un método analitico debido a modificaciones en el propio método, equipos, muestras a analizar. etc. al objeto de garantizar que los resultados contintian siendo fiables, 16 Glosario Robustez (Robustness). Medida de la capacidad de un método analitico para permanecer inalterado ante pequefias pero deliberadas variaciones en cierlos parametros Proporcionando idea de su fiabilidad o estabilidad durante su empleo en rutina, No debe confundirse con el término Ruggedness, citado.en la Farmacopea USP que seria asimilable al término reproducibilidad. Selectividad (Selectivity). Capacidad de un método analitico para medir ylo identificar Simultanea 0 separadamente los analitos de interés de forma inequivoca sin interferenciae ge impurezas , productos de degradacién. compuestos relacionados, excipientes u olrce sustancias presentes en la matriz de la muestra. Capacidad del método para producir una respuesta para el analito de interés distinguible de {odas las otras respuestas de los demas componentes de una mezcla potencialmente compleja, La especificidad se utiliza como sindnimo de la selectividad aunque deberia reservarse para aquellas situaciones donde la respuesta obtenida sélo se puede producir con una trica entidad quimica Sensibilidad (Sensitivity). Capacidad de un método analitico para detectar pequeas concentraciones de analito, Serie analitica 0 ensayo de lote de muestras en bioandlisis (Analitycal run, analytical batch): conjunto de muestras formado por al menos una curva de calibracion identica a ta ulizada en la validacién, muestras de control de calidad y muestras problema, procesadas conjuntamente. ‘Sesgo (Bias). Error sistematico o deterr inado. (Véase “error’ en este glosario). Suma de cuadrados (Mean square). En Estadistica y especialmente en ANOVA, una suma Ge cuadrados es la suma de los cuadrados de las diferencias entre los componentes de una serie y su media aritmética, La suma de cuadrados dividida por los correspondientes grados de libertad da el valor de la ‘media cuadratica o variancia. . Test o Prueba de Hipétesis (Hypothesis testing), Prueba que permite decidir con un Gierto riesgo de error cual dé las hipétesis (nula o alternativa) es la verdadera La hipétesis nula se designa por H, y es la que se debe probar o contrastar. La hipétesis alternativa es la complementaria y se designa por Hy. Esta hipotesis no se somete directamente a prueba pero es la mas verosimil cuando la prueba estadistica nos conduce a rechazar la hipotesis nula. ee . Tests unilaterales y bilaterales (one sided, two sided tests). En los tests bilaterales las diferencias de las muestras a comparar son en ambos sentidos; en los unilaterales en un solo sentido. Asi en una prueba teral para comparar dos desviaciones estandar (2 colas) Hipétesis nula Ho: 0; = 62 Hipotesis alternativa Hy: 6; + 02 En una prueba unilateral (1 cola a la derecha o la izquierda): Hipotesis nula Ho: 6; < 62 Hipétesis alternativa 0; > a Transferencia de un método analitico. Proceso de demostracién y verificacion dentro de un laboratorio que un método previamente validado en otro ambito conduce a resultados fiables Glosario 17 Validacién (Validation). Establecimento de la evidencia documental que un procedimiento analitico conducira con un alto grado de seguridad a la obtencion de resultados precisos y exactos dentro de las especificaciones y atributos de calidad previamente establecidos Obtencién de pruebas documentadas de que un método analitico es lo suficientemente fiable como para producir el resultado previsto dentro de los intervalos definidos. Valor estimado en una recta de regresion (Expected value). En una recta de regresion de ecuacién y= bx + a, son los valores estimados de la variable dependiente ( ) obtenidos al aplicar dicha ecuacién sobre los valores tedricos x, Valor recalculado en una curva de calibracién (Back calculated values). En una recta de regresién de ecuacién y= bx + a, son los valores estimados de la variable independiente (*) obtenidos al aplicar dicha ecuacion sobre los puntos experimentales y,. Es decir, son los resultados de las concentraciones de los patrones recalculados utilizando la propia ecuacion de la curva de calibracién: Valor verdadero asignado (Assigned Value). En la determinacién de la exactitud es el valor que se asigna ala muestfa de concentracion conocida, es decir, el valor de concentracién que se acepta como verdadero en dicha muestra Variancia (Variance). Cuadrado de la desviacién estandar. LX n-1 n(n=1) GENERALIDADES INDICE: PARTE I Generalidades 1. GENERALIDADES.. 1.1. Validacién de métodos analiticos 1 Definicion 4.1.1. Definicion general 1.4.2. Definicion analitica ei 4.1.3 Otros terminos relacionados con la validacion 2 Razones que justifican la validacion de métodos analiticos 1 3 1 1 2.1 Métodos susceptibles de ser validados. Entorno legal — 3.1. Requerimientos para el registro . . 3.2 Normas de Correcta Fabricacion de Medicamentos 1.3.3. Farmacopeas. —s 1.2 Organizacion: buenas practicas de laboratorio. 1.2.4. Organizacién y personal 1.2.2 Instalaciones rece - 1.2.3 Cuidado, alojamiento y confinamiento de los elementos utilizados en los sistemas experimentales biologicos es 1.2.4 Aparatos, reactivos, material y especimenes. 1.2.4.1 Aparatos - a 1.2.4.2 Reactivos... 1.2.4.3 Material y especimenes... 1.2.5 Sistemas experimentales cece 1.2.6 Productos de referencia y muestras de ensayo 1.2.7 Documentacién. Procedimientos escritos 1.2.8 Archivo de documentos 1.2.9 Verificacion de los resultados. 1.2.10 Autoinspeccion . 13 Fases en el desarrollo de un método analitico y criterios de validacion 1.3.1. Definicién de las caracteristicas de practicabilidad ... 1.32 Estudios de estabilidad de la muestra preparada para analisis .. 1.3.3 Puesta a punto. Caracteristicas de idoneidad 1.3.4 Caracteristicas de fiabilidad . 1.4 Documentacién de la validacion 1.4.1. Protocolo de validacion . Soe 1.4.2 Realizacién de la validacién y evaluacion de los resultados 1.4.3 Informe de validacion....... 1.4.4 Certificado de validacién 1.4.5 Archivo 1.5 Revalidacion ... Generalidades 23 1. GENERALIDADES Este capitulo de introduccion general ha sido redactado basicamente desde el Punto de vista Gel andlisis de materias primas y de especialidades farmacéuticas. Por este motivo, muchos. Ge los procedimientos descritos no son aplicables en el eniomo de la validacon oc metodos poanalltcos © microbiolégicos. Los conceptos, procedimientos y parliculeriaades ae este ‘po de validaciones se comentaran de forma exhaustiva en los capitulos correspondientes. 1.1 Validacién de métodos analiticos 144° Definicion El Kérmino validacién ha sido definido en la literatura, de diversas maneras y Por numerosos autores. Aunque los términos dadés son diferentes el significado de las misnos cx siempre el mismo: a) especificar e implementar, b) aprobar y c) documentar. ‘Veamos dos de las posibles definiciones de validacién 14.4.1 Definicién general Segiin las Normas de Correcta Fabricacién (edicién 99): Validacién: Obtenci6n de pruebas con arreglo a las Normas de Correcta Fabricacion, de arian Guiet procedimicnto, proceso, equipo, material, actividad o sistema Produce en realidad el resultado previsto. 1.4.1.2 Definicién analitica ' Es el establecimiento de la evidencia documental de que un procedimiento lucira, con un alto grado de seguridad, a la obtencién de resultanoc Precisos y Sxactos, dentro de las especiticaciones y los attibutos de calidad previamronte establecidos. 14.4.3 Otros términos relacionados con la validacién Gallbracién: Conjunto de operaciones que determinan, bajo condiciones previamente definidas. la relacién entre los valores indicados por el vistors de medicién y los valores Conocides correspondientes a un patron de referencia (NCF. ed 99). En resumen, los términos “validacién, cualificacion y calibracién’, son conceptos que suelen emplearse de forma indistinta, sin embargo conceptuaimento son jiferentes, Validar es verificar documentaimente que un método 0 proceso hace lo que tiene que hacer.

    You might also like