UNIVERSIDAD SANTIAGO DE CALI Practica No. 9 = de Laboratorio de Analisis Instrumental ‘ofesor: Jorge Enrique Castillo Ayala_M. Se. CUANTIFICACION DE CALCIO PRESENTE EN LECHE, POR ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION ATOMICA OBJETIVOS 1. Cuantifiear el calcio presente en leche pasteurizada utiizando la técniea de espectroscopia de absorcién atémica. 2. Preparar una curva de calibracién para la cuantificaci6n de calcio. 3. Realizar el tratamiento de la muestra para cuantificar el calcio presente en la leche. MATERIALES Y REACTIVOS Reactivos ‘Oxido de Lantano_( loruro de Potasio (KCI) ‘Acido Clorhidrico concentrado (HCI) Carbonato de Calcio _(CaCOs) Materiales | Matraces aforados de 100 mL. Matraces aforados de 50 mL | Agitador de vidrio | Buretas de 10 ml._(2) | Pinzas para bureta_(2) Probeta de 10 mL (1) [ Waso de precipitados de 25 mL_(1) Frasco lavador (1) Microespatula_(1) Pipetas aforadas de 10 mL_(3) Propipeta_(1) PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL I: Preparacién de solucién de La al I %. (00 ml de solucién al 1% en La; se pesa 1,1727 g de LaxOs y se eva a un L, adicionar 5,0 mL de HCI concentrado hasta disolucién total, ‘on agua destilada, Rotular. Preparar I baldn aforado de 100 m se completa a volumen ¢ Nota: en caso de no tener LazOs, Se liza una solucién de KCI al 1% en K, hacer el cdileulo.Preparacién de la solucidn estindar de calcio: Nota: Para la preparacién de la solucién estdndar de calcio se utiliza CaCOs secado a 110°C durante una hora. 1. Solucién patron de Calcio: Pesar 0.2500 g de CaCOs seco y Hlevarlo a un baton aforado de 100 mL; adicionar HCI concentrado hasta disolver completamente el Carbonato de Calcio, completar a yolumen con agua destilada; solucién de 1000 ppm. Rotular, 2. Solucién de Caleio de 100 ppm: De la solucién patrén de calcio mida 10 mL y paselos a un balén aforado de 100 mL, complete a volumen con solucién de HCI 0,01 M. Rotular. Preparacion de la curya de calibracién de calcio: 1. Partiendo de la solucién de 100 ppm realice el procedimiento segin el siguiente cuadro, utilice balones de 30 mL y complete hasta el aforo con agua; mida los volimenes de solucién de carbonato de calcio y de éxido de lantano con bureta de 10 mL. Esténdar Volumen (mL) | Volumen (mL) de | Concentracion de solucién de | solucién de La al | (ppm) de Caen la 100 ppm 1% solueién Blanco 00 50 0.00 1 05: 5.0 1.00 2 10 ans 2.00 3 2.0 5.0) 4.00 4 3.0) 5.0 6.00 3 4.0 5.0 —_ 8.00 Preparacion de la muestra: 1. Medir con pipeta aforada, 10 ml de leche pasteurizada y adicionar 1 ml de HCI concentrado; dejar en reposo 10 min. 2. De la solucién sobrenadante obtenida en el paso anterior, medir 2 mL y Hlevarlos a tun balén aforado de 100 mL, adicionar 10 mL. de solucién de lantano y completar con agua destilada. Cuantificacién del Ca presente en Ia muestra: Nota: Con los resultados experineentales obtenidos, Hlene ta tabla adjunta y entréguela al profesor al final de la préctica 1. Encienda el espectrofotémetro 15 minutos antes de empezara a trabajar, 2. Realice el procedimiento de calibracién recomendado segin el equipo.3. Lea la solucis a ee la solcign blanco por triplicado, (Introduzea el tubo de teflén en ef balén que see lea el valor maximo de absorbancia, escriba este resultado, retire el }6n del balén e introdiizcalo en un recipiente con agua destilada hasta que la lectura sea de cero; repit i [ectuta sea de cero; repita este procedimiento dos veees ms y promedie el valor de la Jectura del blanco). 4. Partiendo desde el blanco realice lecturas por triplicado para cada uno de los =. ae sténdares (segtin el procedimiento descrito anteriormente para la lectura del blanco), promedie sus resultados y realice la linea de calibracién 5. Realice la lectura de sus muestras por triplicado (segin el procedimiento descrito anteriormente para la lectura del blanco), promedie los resultados y calcule la concentracién del Ca en la muestra problema; “si la muestra es muy concentrada, realice las diluciones necesarias” 6. Una vez realizadas todas las lecturas de estindares y muestras, pase abundante agua para lavado del equipo. PREGUNTAS: 1. Cual es la longitud de onda de resonancia del calcio 2. Calcule la absortividad del calcio utilizando Ia linea de calibracién, (se utiliza un quemador de 10 cm) 3. De acuerdo con sus resultados cual es el porcentaje de Ca en la leche analizada? 4. Por qué es necesario adicionar solucién de Oxido de Lantano a las muestras? 5. El Cloruro de Potasio tiene el mismo efecto que el lantano? Explique. 6. Segdn sus resultados experimentales y comparando con el contenido de calcio eportado en la literatura para leche de vaca, la muestra analizada cumple con la especificacién? BIBLIOGRAFIA: 1. Mauri, A, Llobat. M, Herdez, R. Laboratorio de Anilisis Instrumental, Editorial Reverté. Espafia. 2011. 2. Ayres, Gilbert, “Andlisis Quimico Cumitativo”. Segunda edicién. Editorial Harta México. 1971. 3. Skoog, Douglas. y col. “Fundamentos de Quimica Analitica”, Octava e Editorial Thomson. México. 2005. 4. Miguel Peris Tortajada. Problemas y Cuestiones de Analisis de Alimentos. Universidad Politécnica de Valencia. Departamento de Quimiea. Valencia. 1999 5. Ramis, G. Garcia, M. Quimiometria. Editorial Sintesis. Madrid. 2010 6 Cookbook. De espectroscopia de absoreién atémica. n,