ZX TECAM [ RELATORIO DE ENSAIO N°. ‘Solicitante: SUPERDONT IND E COM. LTDA. EPP Endereco: R VINTE QUATRO DE MAIO, 325 ~ CEP: 20950-090 - RIO DE JANEIRO - RJ <<1715506>><> Identificacéo da Amostra Boletin Defitve Descri¢ao da Amvostra: Superpost + pos de fibva de vidro Modelos Data de Recapgao: \soviEstriadov:Utrafine+ nanofine+ ightcaretightbal aio7/2017 Responsével pela Coleta: Nao se aplica Data de Inicio do Ensaio: 081082017, Data Fim do Ensaio: osi08/2017 Data de Emissao: 08/2017, Dados da Amostra Data de Fabricagso: 07776 Data de Validade: 07/21 Lote: 2581 Registro: 80102850023 Informacao Adicional: Composicio Declarade: fibra de vido @ esina epox Ensaio de Avaliagao do Potencial de Citotoxicidade - in vitro 4. OBJETIVO ‘Avaliar © potencial citot6xico da amostra, Superpost + pinos de fibra de vidro Modelos: liso + Estriado + Ultrafine + rnanofine + lightcore + lightball sobre células de linhagem V-79. 2, CONDIGOES DE ENSAIO Espécie utlizada: Linhagem celular V-79. Controle negativo: Meio de cultura DMEM + 10% Soro Fetal bovino e 1% PeniciinalEstreptomicina Controle exiracao: Meio de cultura DMEM .+ 10% Soro Fetal bovino © 1% Penicilina/Estreptomicina mantido em frasco tipo Schott a 37°C por 24 horas, Controle positivo: Extragdo realizada em meio de cultura DMEM .+ 10% Soro Fetal bovino € 1% Peniclina/Estreptomicina dos produtos ZDBC ou ZDEC (extracdo realizada por 24 horas a 37°C). 3. PROCEDIMENTO. Fibroblastos, da linhagem celular V-79, foram cultivados em placas de cultura celular de 96 pogos e incubadas por um periodo de 24 horas para formagao da monocamada celular. Apés este periodo o meio de cultura foi substituido por um novo meio contendo 098 tratamentos (n=6) e 08 controles positivo (n=6), negativo (n=12) e de extrago (n=12), As concentragdes da amostra utlizadas para o tratamento foram 100%, 50%, 25% e 12,6% onde as mesmas foram incubadas por 24 horas. Ao término do periodo de exposigao, © meio de cultura com os tratamentos foi descartado e foi adicionado a cada poco 50 pil da solugdo de MTT (1 mgimL), as células foram incubadas por 2 horas, em seguida a solugao de MTT foi descartada e foi adicionado 100 uL de |sopropanol em cada poco e a placa foi mantida sob agitagao por 5 minutos, Foi realizada a leture da absorbancia das amostras, no comprimento de onda de 570 nm (comprimento de onda de referénicia 650 nm), ‘Amostras que apresentam redugao da viablidade celular maior do que 30% em relacao ao controle negativo so consideradas citotoxicas. 4, RESULTADOS 0 resultado do ensaio esta resumido na Tabela 1 e Figura 1, Foi observada redugao da viabilidade celular inferior a 30% erm Felagao ao controle negativo em todas as concentracdes da amostra Superpost + pinos de fibra de vidro Modelos: liso + Estriado + Ultrafine + nanofine + lightcore + lightball (12,5%, 25%, 50% e 100%) ‘us Fob, 50 9=uca $570 ver 1 | (08051-020 - 640 Paulo -SP Tol (11) 3677-2553 - ws aca com be Pagina tee |ZX TECAM RELATORIO DE ENSAIO N®.: <<1715506>><> Tabela 4: Viabilidade celular (%) da média das porcentagens das réplicas dos controles negativo e positive e concentiagées da amostra Superpost + pinos de fibra de vidro Modelos: liso + Estriado + Ultrafine + nanofine + lightcore + lightball. Substancia Viabilidade celular (%) Redugao da viebilidade (%) Controle Negativo - C- 100 Controle extragao ~ CE 7 “ Amostra ~ 12.5% 89 " Amostra ~ 25% 96 4 Amostra ~ 50% 8 15 ‘Amostra ~ 100% 7 2 Controle positive ~ 208¢ ou ZDEC ° 100 cE 25% zi 125% 50% é 100% Zw = :« | a 5 zoscz0ee\, Figura 1: Redugdo da viablidade celular da amostra Superpost + pinos de fibra de vidro Modelos: liso + Estriado + Ultrafine + nanofine + lightcore + lightball nas concentragies de 100%, 50%, 25% e 12,5% apos exposieo de 24 horas, 8. CONCLUSAO A amostra Superpost + pinos de fibra de vidro Modelos: liso + Estriado + Ultrafine + nanofine + lightcore + lightball nao ~apresentou efeito téxico para a linhagem celular V-79, portanto nao fol considerada ctotoxica, Notas: Ensaios realizados de acordo com a ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005. AA reprodugdo parcial deste relatdrio de ensaio requer autorizagao formal por parte do TECAM Laboratérios. ‘Amostragem sob responsabilidade do solicitante. Referéncia principal: POP N°LC 003, Referéncias adicionais: !SO 109935: 2009 (Annex C ~ MTT cytotoxicity test 26051-090 - Ste Paulo - SP Tel (19) 3877-2559 - wu aca com be Pagina 2 de 8ZX ECM RELATORIO DE ENSAIO N°.: :<1715506>><> Revisores Mariana Aguilera Alencar da Siva MSc. Mariana Aguilera A. da Siva Biologa - CRBIo 109492/01-D s resultados apresentacios referem-se exclusivamente & amostra snalisada un Fie, 59 a-usa 56771 ver + 5051-090 - S40 Paulo - SP Tel. (1) 3677-2555 - www team com oe Péoina sce 3