新冠第七版诊疗方案解读及核酸和抗体检测关注点

Penjelasan Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 7)

dan Critical Poin dalam Tes Asam Nukleat dan Antibodi

中山大学附属第一医院医学检验科 刘 敏
Liu Min, Dept. Laboratorium Medis RS Pertama Afiliasi Universitas Sun Yat-sen

1
内容目录 Daftar Isi

1 一 新冠第七版诊疗方案解读
1. Penjelasan Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 7)

2 二 检验样本的采集与保存
2. Pengambilan dan Penyimpanan Sampel

3 三 COVID-19病毒核酸检测关注问题
3. Hal-hal yang Perlu Diperhatikan dalam Tes Asam Nukleat COVID-19

4 四 COVID-19血清学检测关注问题

4. Hal-hal yang Perlu Diperhatikan dalam Tes Serologi COVID-19

• 通过采取一系列预防控制和医疗救治措施，我国境内疫情上升的
势头得到一定程度的遏制，大多数省份疫情缓解，但境外的发病
人数则呈上升态势。

• 为进一步加强对该病的早诊早治，提高治愈率，降低病亡率，最
大可能避免医院感染，同时也要注意境外输入性病例导致的传播
和扩散。
• Melalui pelaksanaan serangkaian kebijakan kontrol preventif dan pertolongan medis, momentum penyebaran wabah di Tiongkok telah dibatasi
hingga taraf tertentu, kondisi wabah di mayoritas provinsi membaik, tetapi jumlah orang yang terpapar di luar Tiongkok terus bertambah.

• Untuk memperkuat diagnosis dan pengobatan dini COVID-19, meningkatkan tingkat penyembuhan, menurunkan angka kematian, infeksi di RS
sebisa mungkin dihindari, juga harus memperhatikan penyebaran yang disebabkan oleh kasus penyakit yang masuk dari luar negeri (kasus
impor). 3
新型冠状病毒肺炎诊疗方案发展史

• 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第一版） （20200121）
• 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第二版） （20200122）
• 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第三版） （20200123）
• 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第四版） （20200127）
• 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第五版） （20200205）
• 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第五版修正版） （20200210）
• 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第六版） （20200218）
• 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版） （20200303）

4
Sejarah Pengembangan Protokol
Diagnosis dan Perawatan Pneumonia
COVID-19
• Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 1) (21 Jan 2020)
• Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 2) (22 Jan 2020)
• Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 3) (23 Jan 2020)
• Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 4) (27 Jan 2020)
• Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 5) (05 Feb 2020)
• Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 5 Revisi) (10 Feb
2020)
• Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 6) (18 Feb 2020)
• Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 7) (03 Mar 2020)

5
一、病原学特点 1. Etiologi
• 经过病毒序列比对分析，推测新型冠状病毒病的自然宿主可能是蝙蝠。在从
Melalui analisis perbandingan sekuensing virus, diduga inang alami virus COVID-19
蝙蝠到人的传染过程中很可能存在未知的中间宿主媒介。
mungkin kelelawar. Dalam proses penularan dari kelelawar ke manusia
kemungkinan besar terdapat medium perantara yang belum diketahui.
根据对 SARS-CoV 和 MERS-CoV 的研究：
Berdasarkan penelitian terhadap SARS-CoV dan MERS-CoV:
• 冠状病毒对热敏感，56℃ 保持 30 分钟，
Virus korona sensitif terhadap panas, 56℃ selama 30 menit terus-menerus,
• 乙醚、75% 乙醇、含氯消毒剂、过氧乙酸
Ether, etanol 75%, disinfektan yang mengandung klorin, asam perasetat,
• 和氯仿等脂溶剂均可有效灭活病毒。
dan kloroform, serta pelarut lemak lainnya dapat secara efektif
meng-inaktivasi virus.
• 生物安全防护和实验操作的重要依据。
Dasar penting untuk perlindungan keamanan biologis dan eksperimen.
二、流行病学特点 2. Epidemiologi

（一）传染源 (1)Sumber penularan

目前所见传染源主要是新型冠状病毒感染的肺炎患者。
Sejauh ini sumber penularan yang umumnya ditemukan adalah pasien pneumonia yang terinfeksi COVID-19
无症状感染者也可能成为传染源。
Orang yang terinfeksi tanpa gejala (asimptomatik) pun bisa menjadi sumber penularan.
（二）传播途径 (2) Rute penyebaran
经呼吸道飞沫和密切接触传播是主要的传播途径。在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓
Rute penyebaran pada umumnya lewat tetesan (droplets) saluran pernapasan dan kontak dekat. Jika kontak dengan aerosol
度气溶胶情况下存在经气溶胶传播的可能（第五版无）。由于在粪便及尿中可分离到新型
konsentrasi tinggi dalam waktu panjang di lingkungan yang relatif tertutup, ada kemungkinan tertular lewat aerosol (tidak ada pada

冠状病毒，应注意粪便及尿对环境污染造成气溶胶或接触传播（第六版无） 。
versi 5). Karena ada virus COVID-19 yang dipisahkan dari feses dan urin, maka sebaiknya perhatikan penyebaran lewat aerosol atau
kontak yang disebabkan oleh kontaminasi lingkungan dari feses dan urin. (tidak ada pada versi 6).
（三）易感人群 (3) Orang yang Mudah Tertular
人群普遍易感。
Semua orang pada umumnya mudah tertular.
三、病理 （新增）
（一）肺脏：实变、渗出、单核和淋巴细胞浸润及血管内透明血栓形成。渗出物机化和肺间质
纤维化。支气管黏膜上皮和II型肺泡上皮细胞胞质内可见病毒颗粒。
（二）脾脏、肺门淋巴结和骨髓：脾脏明显缩小。淋巴细胞数量明显减少，灶性出血和坏
死，脾脏内巨噬细胞增生并可见吞噬现象；淋巴结淋巴细胞数量较少，可见坏死。
免疫组化染色显示脾脏和淋巴结内CD4+T和CD8+T细胞均减少。骨髓三系细胞数
量减少。
（三）心脏和血管：心肌细胞变性、坏死、炎症、血栓改变。
（四）肝脏和胆囊：体积增大，炎症改变，肝窦充血、胆囊高度充盈。
（五）肾脏：肾小球球囊腔内见蛋白性渗出物，肾小管上皮变性、脱落，间质充血，可见微血
栓和灶性纤维化。
（六）其他器官：脑组织充血、水肿、食管、胃和肠管黏膜上皮不同程度变性、脱落、坏死。
3. Patologi (Tambahan baru)
(1)Paru-paru: Konsolidasi, eksudasi, infiltrasi sel mononuklear dan limfosit serta trombosis hialin
intravascular. Mekanisasi eksudat dan fibrosis interstitial paru. Dapat ditemukan partikel virus COVID-
19 pada epitel mukosa bronkial dan cytoplasma sel epitel alveolus tipe II.
(2)Limpa, kelenjar getah bening hilus, dan sumsum tulang: Limpa terlihat mengecil. Jumlah limfosit
berkurang secara nyata, juga tampak perdarahan fokal dan nekrosis. Hiperplasia makrofag dalam limpa
dan tampak fagositosis; Limfosit kelenjar getah bening jumlahnya sedikit dan tampak nekrosis.
Pewarnaan imunohistokimia menunjukkan bahwa sel CD4+T dan CD8+T di dalam limpa dan kelenjar
getah bening berkurang. Jumlah semua keturunan sel hematopoietik (hematopoietic cell lineages)
berkurang.
(3)Jantung dan pembuluh darah: Kardiomiosit degenerasi, necrosis, inflamasi, dan trombosis.
(4)Hati (liver) dan kantung empedu: volume membesar, perubahan dalam inflamasi, hiperemia sinusoid
hati (hepatic sinusoid hyperemia), isi kantung empedu sangat penuh.
(5)Ginjal: Ditemukan eksudat protein di dalam kapsul Bowman, epitel tubulus ginjal (renal tubular
epithelium) denaturasi dan terkelupas, hiperemia interstitial, tampak trombus mikro dan fibrosis fokal.
(6)Organ lainnya: Hiperemia jaringan otak, edema, epitel mukosa esofagus, lambung, dan usus terdapat
degenerasi, pelepasan, dan nekrosis dengan tingkat berbeda.
四、临床表现
（一）临床表现
基于目前的流行病学调查，潜伏期1-14天，多为3-7天 。
以发热、干咳、乏力为主要表现。少数患者伴有鼻塞、流涕、咽痛、肌痛和腹泻等症状。 重
症患者多在发病一周后出现，呼吸困难和/或低氧血症,严重者可快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓
毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍及多器官功能衰竭等。值得注意的是重型、危
重型患者病程中可为中低热，甚至无明显发热。
部分儿童及新生儿症状可不典型表现为呕吐、腹泻等消化道症状或仅表现为精神弱或呼吸急促
（新增）。
轻型患者仅表现为低热、轻微乏力等,无肺炎表现。
从目前收治的病例情况看，多数患者预后良好，少数患者病情危重。老年人和有慢性基础疾病
者预后较差。患有新型冠状病毒肺炎的孕产妇临床过程与同龄患者相近（新增）, 儿童病例症状相对
较轻。
4. Manifestasi klinis
(I) Manifestasi klinis
Berdasarkan investigasi epidemiologi sejauh ini, masa inkubasi 1-14 hari, mayoritas 3-7 hari.
Gejala utama adalah demam, batuk kering, dan kelelahan. Ada sedikit pasien yang juga menderita gejala
seperti hidung tersumbat, ingusan, sakit tenggorokan, nyeri otot, dan diare. Pasien tingkat parah mayoritas
muncul satu minggu setelah jatuh sakit, kesulitan bernapas dan/atau hipoksemia, dalam waktu singkat, yang
parah bisa berkembang menjadi Sindrom Gangguan Pernapasan Akut (Acute Respiratory Distress Syndrome),
syok septik, asidosis metabolik dan disfungsi koagulasi yang sulit diperbaiki, serta kegagalan multi organ, dll.
Yang perlu diperhatikan adalah, dalam perjalanan penyakit pasien tingkat parah dan kritis, mereka bisa
mengalami demam ringan hingga moderat, bahkan ada yang tidak demam.
Sebagian gejala anak-anak serta bayi baru lahir bisa jadi tidak tipikal, seperti muntah-muntah, diare, dan
gejala saluran pencernaan atau hanya tampak seperti tidak berenergi atau napas pendek (baru).
Pasien tingkat ringan hanya mengalami demam ringan, kurang energi ringan, dll, tanpa menunjukkan gejala
pneumonia.
Dari kondisi kasus-kasus yang diterima dan diobati selama ini, kebanyakan pasien berprognosis baik, sedikit
yang kondisinya kritis. Prognosis manula dan orang yang beriwayat penyakit kronis lebih buruk. Proses klinis
wanita hamil yang terjangkit COVID-19 mirip dengan pasien yang seumuran (baru), gejala penyakit pada
anak-anak relatif lebih ringan.
（二）实验室检查（第七版细分为一般检查和病原学及血清学检查）

1.一般检查：发病早期外周血白细胞总数正常或减少, 可见淋巴细胞计数减少, 部分患者可出现肝酶、乳酸脱氢

酶(LDH)、肌酶和肌红蛋白增高;部分危重者可见肌钙蛋白增高。多数患者C反应蛋白(CRP)和血沉升高,降钙素原
正常。严重者D-二聚体升高、外周血淋巴细胞进行性减少。重型、危重型患者常有炎症因子升高。

2.病原学及血清学检查:

（1）病原学：在鼻咽拭子、痰和其他下呼吸道分泌物、血液、粪便等标本中可检测出新型冠状病毒核酸，检测
下呼吸道标本（痰或气道抽取物）更加准确（第六版为：为提高核酸检测阳性率，建议尽可能留取痰液，实施气
管插管患者采集下呼吸道分泌物），标本采集后尽快送检。

（2）血清学检查：新型冠状病毒特异性IgM抗体多在发病3-5天后开始出现阳性，IgG抗体滴度恢复期较急性期
有4倍及以上增高（血清学检查第六版无）。
血清学检查与核酸检测可起到互补作用。
（三）胸部影像学：双肺多发磨玻璃影、浸润影
(II) Pemeriksaan Laboratorium (Versi 7 membagi lebih lanjut menjadi pemeriksaan umum, etiologi, dan serologi)
1. Pemeriksaan umum: Pada masa dini terjangkit penyakit, jumlah leukosit pada darah perifer (peripheral blood
leukocyte) normal atau berkurang, tampak bahwa jumlah limfosit berkurang, sebagian pasien juga ada peningkatan
enzim hati, laktat dehidrogenase (LDH), enzim otot, dan mioglobin; sebagian pasien kritis tampak ada peningkatan troponin.
Kebanyakan pasien ada peningkatan protein C-Reaktif (CRP) dan laju endap darah (ESR), prokalsitonin normal. Pasien
parah mengalami peningkatan D-Dimer dan pengurangan limfosit pada darah perifer (peripheral blood lymphosyte) secara
progresif. Banyak pasien tingkat parah dan kritis mengalami peningkatan faktor inflamasi
2. Pemeriksaan etiologi dan serologi:
(1)Etiologi: Pada spesimen seperti swab nasofaring, sputum, dan sekresi saluran pernapasan bawah lainnya, darah,
feses, dll terdeteksi asam nukleat COVID-19, lebih akurat lagi bila menguji spesimen saluran pernapasan bawah
(sputum atau aspirat saluran pernapasan) (pada versi 6: Guna meningkatkan angka positif (positive rate) tes asam nukleat,
disarankan agar mengambil dan menyimpan sputum sebisa mungkin; bagi pasien dengan intubasi trakea, ambil sekresi
saluran pernapasan bawah), setelah spesimen diambil, secepatnya dikirim untuk diuji.
(2)Pemeriksaan serologi: Antibodi IgM yang merupakan antigen spesifik COVID-19 kebanyakan menunjukkan hasil
positif 3-5 hari setelah terjangkit penyakit. Pada fase pemulihan, titer antibodi IgG meningkat empat kali lipat ke atas
dibanding pada fase akut. (Tidak ada bagian pemeriksaan serologi pada versi 6)
(III) Rontgen Thorax: Tampak multipel ground-glass opacity (GGO) dan infiltration shadow pada kedua paru.
Tes serologi dan asam nukleat bisa saling
melengkapi.
五、诊断标准
（一）疑似病例
结合下述流行病学史和临床表现综合分析:
1. 流行病学史
（1）发病前14天内有武汉市及周边地区,或其他有病例报告社区的旅行史或居住史；
（2）发病前14天内与新型冠状病毒感染者(核酸检测阳性者)有接触史；
（3）发病前14天内与曾接触过来自武汉市及周边地区来自有病例报告社区的发热或有呼吸道症状的患者；
（4）聚集性发病：2周内在小范围如家庭、办公室、学校班级等场所，出现2例及发热和/或呼吸道症状
病例 （第六版对聚集性发病无详细解释）。
2.临床表现
（1）发热和/或呼吸道症状；
（2）具有上述新型冠状病毒肺炎影像学特征；
（3）发病早期白细胞总数正常或降低,淋巴细胞计数减少。
有流行病学史中的任何一条，且符合临床表现中任意2条。无明确流行病学史的，符合临床表现中的3条。
 5. Kriteria Diagnosis
(1)Kasus terduga/suspect/PDP
Analisis komprehensif dengan menggabungkan riwayat epidemiologi dan manifestasi klinis di bawah ini:
1. Riwayat Epidemiologi
(1) Memiliki riwayat perjalanan atau riwayat tinggal di Kota Wuhan dan daerah sekitarnya, atau komunitas lain yang
ada laporan kasus penyakit dalam kurun waktu 14 hari sebelum terjangkit penyakit;
(2) Memiliki riwayat kontak dengan orang yang terinfeksi COVID-19 (positif tes asam nukleat) dalam kurun waktu 14 hari
sebelum terjangkit penyakit;
(3) Pernah kontak dengan pasien dengan gejala demam atau saluran pernapasan yang berasal dari kota Wuhan dan
daerah sekitarnya, serta dari komunitas yang ada laporan kasus penyakit dalam kurun waktu 14 hari sebelum terjangkit
penyakit;
(4) Cluster penyakit: dalam 2 minggu muncul 2 kasus dengan gejala demam dan/atau gejala saluran pernapasan di
lingkungan kecil seperti keluarga, kantor, kelas sekolah, dll. (Tidak ada penjelasan rinci tentang cluster penyakit pada
versi 6)

2. Manifestasi klinis
(1)Demam dan/atau gejala saluran pernapasan;
(2)Ada ciri-ciri hasil foto thorax (imaging characteristics) COVID-19 seperti yang disebut di atas;
(3)Jumlah leukosit normal atau berkurang pada masa dini terjangkit penyakit, jumlah limfosit berkurang.

Seseorang dianggap PDP jika memenuhi salah satu syarat riwayat epidemiologi, dan juga memenuhi dua syarat manifestasi
klinis. Bagi yang tidak ada riwayat epidemiologi yang jelas, memenuhi ketiga syarat manifestasi klinis.
 （二）确诊病例 (2) Kasus positif

疑似病例，具备以下病原学证据之一者：
Seseorang dianggap positif jika merupakan PDP dengan salah satu bukti etiologi/serologi berikut:
1、实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性；
1. Deteksi RT-PCR Fluorescent Real Time menunjukan positif pada tes asam nukleat COVID-19;
2、病毒基因测序，与已知的新型冠状病毒高度同源；
2. Viral gene sequencing, homologi sangat mirip dengan virus COVID-19 yang sudah diketahui;
3、血清新型冠状病毒特异性IgM抗体和IgG抗体阳性；血清新型冠状病毒特异性IgG抗体由
3. Antibodi IgM dan antibodi IgG spesifik COVID-19 positif, atau perubahan dari negatif menjadi
阴性转为阳性或恢复期较急性期4倍及以上升高（新增）。
positif pada antibodi IgG spesifik COVID-19, atau peningkatan 4 kali lipat ke atas pada fase
pemulihan dibanding fase akut (baru).
 六、临床分型 6. Klasifikasi Klinis

（一）轻型： 临床症状轻微，影像学未见肺炎表现。
（二）普通型： 具有发热、呼吸道等症状，影像学可见肺炎表现。
（三）重型（符合之一）： RR≥30次/分、指氧饱和度≤93%、动脉血氧分压 (PaO2) / 吸氧浓
度(FiO2) ≤ 300mmHg (1mmHg=0.133kPa)、肺部影像学显示24-48小时内病
灶明显进展＞50%。儿童重型（新增）。
（四）危重型（符合之一）： 出现呼吸衰竭，且需要机械通气； 出现休克； 合并其他器官功
能衰竭需ICU监护治疗。
(1)Ringan: Gejala klinis ringan, belum tampak pneumonia pada hasil rontgen.
(2)Moderat: Ada gejala seperti demam dan gejala saluran pernapasan, tampak pneumonia pada hasil rontgen.
(3)Parah (memenuhi salah satu syarat): RR≥30kali/menit, saturasi oksigen jari ≤93%, Tekanan Parsial Oksigen pada Arteri (PaO2) /
Fraksi oksigen yang dihirup (FiO2) ≤ 300mmHg (1mmHg=0.133kPa), pada rontgen paru dalam 24-48 jam tampak progresi lesi
(lesion progression) jelas ＞50%. Tingkat parah anak-anak (baru).
(4) Kritis (memenuhi salah satu syarat): muncul gagal pernapasan, dan perlu bantuan ventilator; muncul syok (shock); kombinasi gagal
organ tubuh lainnya dan perlu pengobatan dan pengawasan ICU.
七、重型、危重型临床预警指标（新增）
（一）成人
1. 外周血淋巴细胞进行性下降；
2. 外周血炎症因子如IL-6、C反应蛋白进行性上升；
3. 乳酸进行性升高；
4. 肺内病变在短期内迅速进展。
（二）儿童
1. 呼吸频率增快；
2. 精神反应差、嗜睡；
3. 乳酸进行性升高；
4. 影像学显示双侧或多肺叶浸润、胸腔积液或短期内病变快速进展；
5. 3月龄以下的婴儿或有基础疾病（先天性心脏病、支气管肺发育不良、呼吸道
畸形、异常血红蛋白、重度营养不良等），有免疫缺陷或低下（长期使用免疫
抑制剂）。

18
7. Indikator Peringatan Dini Klinis
untuk Tingkat Parah dan Kritis (baru)
(1)Orang dewasa
1. Penurunan progresif limfosit darah perifer;
2. Faktor peradangan darah perifer seperti IL-6 dan CRP meningkat secara progresif;
3. Asam laktat meningkat secara progresif;
4. Lesi intrapulmoner meningkat cepat dalam jangka waktu pendek
(2) Anak-anak
1. Tingkat pernapasan bertambah cepat;
2. Respons mental buruk, mengantuk;
3. Asam laktat meningkat secara progresif;
4. Hasil rontgen menunjukkan infiltrasi bilateral atau multilobe, efusi pleura, atau lesi intrapulmoner
meningkat cepat dalam jangka waktu pendek;
5. Bayi berusia di bawah 3 bulan, atau anak-anak yang memiliki riwayat penyakit (seperti penyakit
jantung bawaan, dysplasia bronkopulmoner, malformasi saluran pernapasan, hemoglobin abnormal,
malnutrisi parah, dll), atau anak yang punya kondisi imunodefisiensi atau imunosupresi
(menggunakan immunosuppressive agent jangka panjang).
19
 八、鉴别诊断 8. Diagnosis banding

• 新型冠状病毒感染轻型表现需与其他病毒引起的上呼吸道感染相鉴别。

• 主要与流感病毒、副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒等其他已知病
毒性肺炎及肺炎支原体肺炎感染鉴别。尤其对疑似病例要尽可能采取包
括快速抗原检测和多重PCR核酸检测方法，对常见呼吸道病原体进行检测。

• 此外，还要与非感染性疾病，如血管炎、皮肌炎和机化性肺炎等鉴别。
• Gejala infeksi COVID-19 ringan perlu dibedakan dengan infeksi saluran pernapasan atas yang disebabkan oleh virus lain.
• Terutama melakukan pembedaan antara infeksi COVID-19 dengan virus influenza, virus parainfluenza, adenovirus,
Respiratory Syncytial Virus (RSV), atau pneumonia yang disebabkan oleh virus yang sudah diketahui, serta infeksi pneumonia
mycoplasma pneumoniae lainnya. Terutama terhadap kasus PDP, sebisa mungkin laksanakan pengecekan seperti
deteksi antigen cepat (rapid antigen detection) dan tes asam nukleat Multiplex PCR untuk memeriksa
patogen pernapasan yang sering ditemui.
• Selain itu, juga perlu dibedakan dengan penyakit yang tidak menular seperti vasculitis, dermatomiositis, dan
organizing pneumonia (OP).
九、病例的发现与报告
9. Identifikasi dan Pelaporan Kasus

各级各类医，机构的医务人员发现符合病例定义的疑似病例后，应当立即进行单人间隔离
Ketika menemukan kasus PDP COVID-19, staf medis di semua tingkatan dan jenis Fasilitas Kesehatan harus segera mengisolasi pasien di ruang isolasi

治疗，院内专家会诊或主诊医师会诊，仍考虑疑似病例，在2小时内进行网络直报，并采集标本
Apabila kasus masih dianggap sebagai PDP COVID-19 setelah konsultasi dengan ahli atau dokter, maka kasus harus langsung dilaporkan secara online dalam waktu 2 jam,
进行新型冠状病毒核酸检测，同时在确保转运安全前提下立即将疑似病例转运至定点医院。与新
dan mengambil spesimen untuk tes asam nukleat COVID-19. Segera pindahkan PDP dengan transportasi yang aman ke rumah sakit rujukan. Bagi pasien yang diduga

型冠状病毒感染者有密切接触的患者,即便常见呼吸道病原检测阳性,也建议及时进行新型冠状病
memiliki kontak dekat dengan pasien positif COVID-19, bahkan jika hasil tes patogen pernapasan umum positif, tetap disarankan untuk melakukan

毒病原学检测。
tes deteksi COVID-19.

疑似病例连续两次新型冠状病毒核酸检测阴性（采样时间至少间隔24小时）且发病7天后
Jika tes asam nukleat COVID-19 negatif selama dua kali berturut-turut (dengan setidaknya 24 jam interval antara setiap pengambilan spesimen), dan jika setelah 7 hari

新型冠状病毒特异性抗体IgM和IgG仍为阴性可排除疑似病例诊断（第六版无）。
sejak onset,

antibodi IgM dan IgG spesifik COVID-19 tetap memberi hasil negatif, diagnosis sebagai PDP bisa dikesampingkan. (tidak ada dalam edisi ke-6)

“Undang-undang Republik Rakyat Tiongkok untuk Pencegahan dan Tindakan

terhadap Penyakit Menular” menyatakan COVID-19 dikategorikan sebagai Penyakit 《中华人民共和国传染病防治法》规定新型冠状病毒为乙
Menular Kelas B, dan mengadopsi tindakan pencegahan dan pengendalian untuk
laporan kasus Penyakit Menular Kelas A.
类传染病，并采取甲类传染病的病例报告的预防控制措施
十、治疗
10. Perawatan
（一） 根据病情确定治疗场所
(1) Menentukan Lokasi Perawatan sesuai Tingkat Keparahan Penyakit

1. 疑似及确诊病例应在具备有效隔离条件和防护条件的定点医院隔离治疗，疑似病例应单人单
Kasus PDP dan positif harus diisolasi dan ditangani di rumah sakit rujukan dengan fasilitas isolasi dan protektif yang efektif. Kasus PDP
间隔离治疗，确诊病例可多人收治在同一病室。
harus diisolasi dan dirawat di ruangan terpisah, sedangkan kasus positif dapat dirawat bersama dalam satu ruangan yang sama.

2. 危重型病例应尽早收入ICU 治疗。
Kasus kritis harus dirawat di ICU sesegera mungkin.

（二） 一般治疗 对症治疗

(2) Perawatan Umum perawatan simptomatik

（三）重型、危重型病例的治疗 在对症治疗的基础上，积极防治并发症，治疗基础疾病，预
(3). Perawatan Kasus Parah dan Kritis Dilakukan terapi simptomatik, sambil aktif mencegah komplikasi, mengobati penyakit yang menyertai,

防继发感染，及时进行器官功能支持。
mencegah infeksi sekunder, dan segera memberi dukungan (support) fungsi organ.

（四）中医治疗 根据病情、当地气候特点以及不同体质等情况，参照方案进行辨证论治。
(4) Pengobatan Terapi yang berbeda dapat diberikan sesuai protokol dengan mempertimbangkan kondisi penyakit, karakteristik iklim lokal, dan
Tradisional Tiongkok kondisi fisik yang berbeda.
 十一、出院标准和出院后注意事项
11. Standar pemulangan dari rumah sakit dan hal-hal yang perlu diperhatikan setelah pemulangan

（一）出院标准：1、体温恢复正常3天以上。2、呼吸道症状明显好转；3、肺部影像学显示急
(1) Standar Pemulangan : 1. suhu tubuh normal selama lebih dari 3 hari, 2. Perbaikan gejala gangguan pernapasan yang signifikan; 3. Rontgen paru menunjukkan perbaikan signifikan

性渗出性病变明显改善；4、连续两次呼吸道标本核酸检测阴性(釆样时间至少间隔24h)（第六
pada lesi eksudatif akut, 4. Hasil negatif dari tes asam nukleat patogen saluran pernafasan selama dua kali berturut-turut (interval pengambilan sampel minimal 24 jam)
版是1天）； 满足以上条件者可出院。
(interval miminum adalah 1 hari menurut edisi ke-6.) ; Apabila memenuhi standar di atas, maka dapat dipulangkan dari RS.

（二）出院后注意事项：
(2) Yang perlu diperhatikan setelah pemulangan:

1）定点医院做好与患者居住地基层医疗机构间的联系，共享病历资料，及时将出院患者信
Rumah sakit rujukan harus meningkatkan komunikasi dengan fasilitas layanan kesehatan primer di tempat tinggal pasien, berbagi rekam medis, dan segera

息推送至患者辖区或居住地居委会和基层医疗卫生机构；
meneruskan informasi kasus pasien yang dipulangkan kepada pengurus RT/RW dan fasilitas layanan kesehatan primer.

2）患者出院后，建议应继续进行14天自我健康状况监测，佩戴口罩，有条件的居住在通
Pasien yang sudah boleh pulang dianjurkan untuk memonitor kesehatannya selama 14 hari, memakai masker, tinggal di kamar terpisah berventilasi baik,

风良好的单人房间，减少与家人的近距离密切接触，分餐饮食，做好手卫生，避免外出活动；
mengurangi kontak dengan anggota keluarga, makan/minum terpisah, menjaga kebersihan tangan dan menghindari kegiatan di luar rumah.

3）建议在出院后第2周、第四周到医院随访、复诊。
Setelah dipulangkan, dianjurkan untuk kontrol ke RS pada minggu kedua dan keempat.
十二、转运原则
12. Prinsip transfer

运送患者应使用专用车辆，并做好运送人员的个人防护和车辆消毒，见《新型冠状病毒感染的肺炎病
Penggunaan mobil khusus untuk transfer pasien, dan memastikan proteksi terhadap petugas transfer serta disinfeksi mobil, sesuai dengan
例转运工作方案》（试行）。
Protokol Transfer Pasien Pneumonia COVID-19 (Edisi Percobaan)

十三、医疗机构内感染预防与控制
13. Pencegahan dan pengendalian infeksi dalam fasilitas kesehatan

严格遵照我委《医疗机构内新型冠状病毒感染预防与控制技术指南（第一版）》、《新型冠状病毒
Pencegahan dan pengendalian infeksi harus secara ketat mematuhi ketentuan “Panduan Teknis untuk Pencegahan dan Pengendalian Infeksi COVID-19 di Fasilitas Kesehatan (Edisi Pertama)”
感染的肺炎防护中常见医用防护使用范围指引（试行）》的要求执行。
dan “Pedoman Penggunaan Peralatan Pelindung Medis Umum untuk Perlindungan terhadap Pneumonia COVID-19 (Edisi Percobaan)”.

总体原则：新冠患者样本检测二级实验室三级防护。
Prinsip Umum: laboratorium level 2 dan proteksi level 3 untuk uji spesimen COVID-19
内容目录
Daftar Isi

1 一 新冠第七版诊疗方案解读
1. Penjelasan Protokol Diagnosis dan Perawatan
Pneumonia COVID-19 (Edisi 7)

2 二 病原学及血清学检测样本的采集
2. Pengambilan dan Penyimpanan Sampel

3 三 COVID-19病毒核酸检测关注问题
3. Hal-hal yang Perlu Diperhatikan dalam Tes Asam
Nukleat COVID-19

4 四 COVID-19血清学检测关注问题
4. Hal-hal yang Perlu Diperhatikan dalam Tes Serologi
COVID-19
 新型冠状病毒病原学和血清学检测的主要方法

检测方法学 检测平台 方法特点

聚合酶链式反应（PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，被广泛应用于临床检验。其
RT-PCR
特异性强、灵敏度高、操作简便快速、对样本的纯度要求低等特点。

测序技术可直接解读出核酸碱基的排列顺序, 对于一个完全未知的新病毒来说，测序技术是必须
核酸测序
的。但需要相对昂贵的仪器、较长的时间，且需要专业生物信息学人对其解读。

等温技术灵敏度和反应时间上与PCR相当。但等温扩增对引物的设计要求比较高；较低温下的扩
核酸检测 等温扩增
增反应，引物的非特异性结合的可能性会增加。
数字PCR技术，它将一小管（50微升左右）分割成了近10万个液滴，单一液滴为独立的反应单元，
数字PCR 反应完成后读取每一单元的扩增情况（荧光），从而最终可实现模板DNA的绝对定量。但此技术
的试剂和机器昂贵。
此方法原理是Cas13蛋白在人工设计的gRNA引导下，结合特异性RNA序列后，产生反式切割
CRISPR RNA探针的活性。但单独使用该技术通常达不到临床检验的灵敏度，因此需要结合扩增技术来提
高灵敏度。目前由公司和团队在进行方法学的进一步优化，同时也需要大量的临床样本试验验证。

抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。血清学检测TAT时间短，操作
方便，特异性强，但存在“窗口期”，容易受到血液标本中的一些干扰物质（如类风湿因子、非
血清学检测 抗原/抗体
特异IgM、溶血所致的高浓度血红蛋白等）的存在而出现“假阳性”结果，所以建议抗体检测采
用IgM和IgG同时检测,并多次动态检测来确认。

26
 Metode Utama Tes Etiologi dan Serologi COVID-19

Metode
Pengujian
Platform Pengujian Karakteristik

Polymerase chain reaction (PCR) adalah metode untuk sintesis enzimatik dari fragmen DNA spesifik in vitro. Metode ini
RT-PCR banyak digunakan dalam uji klinis, terutama karena spesifisitas dan sensitivitasnya yang tinggi, pengoperasian yang
mudah dan cepat, dan persyaratan rendah untuk kemurnian sampel.

Teknologi sekuensing dapat secara langsung menafsirkan urutan basa asam nukleat. Untuk virus baru yang sama sekali
Sekuensing asam
tidak diketahui, teknologi sekuensing diperlukan. Namun, itu membutuhkan peralatan yang relatif mahal, waktu yang lama,
nukleat dan membutuhkan ahli bioinformatika profesional untuk menafsirkannya.

Sensitivitas dan waktu reaksi dari teknik isotermal sebanding dengan PCR. Namun, amplifikasi isotermal membutuhkan
Amplifikasi
Tes asam persyaratan desain primer yang relatif tinggi, reaksi amplifikasi pada suhu yang lebih rendah akan meningkatkan
Isotermal kemungkinan pengikatan primer yang tidak spesifik.
nukleat
Teknologi PCR digital, yang membagi tabung kecil (sekitar 50 mikroliter) menjadi hampir 100.000 tetesan, dan tetesan
tunggal adalah unit reaksi independen. Setelah reaksi selesai, status amplifikasi (fluoresensi) dari masing-masing unit
Digital PCR
dibaca. Pada akhirnya, kuantifikasi absolut DNA template dapat dicapai. Tetapi reagen dan mesin teknologi ini cukup
mahal.
Prinsip metode CRISPR adalah protein Cas13, dipandu oleh gRNA yang dirancang secara artifisial, dan dikombinasikan
dengan sekuens RNA spesifik, menghasilkan aktivitas probe RNA trans-cleaving. Namun, sensitivitas uji klinis biasanya
CRISPR tidak dicapai dengan menggunakan teknologi deteksi CRISPR saja, sehingga perlu dikombinasikan dengan teknologi
amplifikasi untuk meningkatkan sensitivitas. Saat ini, metodologi sedang dioptimalkan lebih lanjut oleh perusahaan dan
tim, dan sejumlah besar uji sampel klinis juga diperlukan untuk verifikasi.

Reaksi antigen-antibodi mengacu pada reaksi pengikatan spesifik yang terjadi antara antigen dan antibodi yang sesuai.
Tes serologi memiliki TAT pendek, operasi mudah, dan spesifisitas yang kuat, tetapi “periode jendela” dari tes ini rentan
Tes
Antigen/Antibodi terhadap beberapa zat yang mengganggu dalam sampel darah (seperti faktor rheumatoid, IgM non-spesifik, hemoglobin
Serologi konsentrasi tinggi yang disebabkan oleh hemolisis, dll), yang mengarah ke hasil "false positive". Oleh karena itu
direkomendasikan bahwa deteksi antibodi IgM dan IgG, dan beberapa uji dinamis harus dilakukan untuk konfirmasi.

27
1. 采集样本的种类
Jenis sampel yang dikumpulkan

COVID-19

样本种类
Jenis sampel

核酸检测 抗体检测
样本 sampel uji asam nukleat 样本 sampel uji antibodi

肺泡/支气 血液、尿液 全血
鼻/咽拭子 气道分泌物 痰液 粪便
管灌洗液 等 静脉血
Cairan lavage/ Swab hidung / Sekresi Sputum Feses Darah, urin, dll Seluruh darah
bilas alveolar / faring saluran Darah vena
bronkial napas

28
2. 核酸样本采集----轻症患者样本采集
2. Pengambilan sampel asam nukleat Pengambilan Sampel dari Pasien Ringan

Swab orofaring: Gunakan 2 swab

dacron atau flocked swab untuk
mengambil spesimen dari kedua
sisi tonsil dan dinding faring
posterior. Kedua swab direndam di
tabung media 3mL yang sama,
tangkai plastik swab dekat tutup
dibuang, dan tutup tabung
dikencangkan

 鼻咽拭子：先后用2根植绒
为提高检出阳性率，  口咽拭子：用2根植绒拭
拭子采集两侧鼻孔。两根拭
可同时采用鼻咽拭deteksi positif, swab 子同时擦拭双侧咽扁桃体
Demi meningkatkan

子浸入同一含3mL采样液的 nasofaring dan swab

子和口咽拭子采样， orofaring dapat dilakukan
secara bersamaan, dan
及咽后壁，将拭子头漫入
管中，尾部弃去，旋紧管盖。 ditempatkan dalam
采样后放入同一管 tabung media yang sama 含3mL采样液的管中，弃
Swab nasofaring: Gunakan 2 swab dacron setelah pengambilan

细胞保存液或病毒 尾部，旋紧管盖。
atau flocked swab untuk mengambil sampel
spesimen dari kedua sisi lubang hidung.
Kedua Swab direndam di tabung media 3mL
yang sama, tangkai plastik swab dekat tutup
dibuang, dan tutup tabung dikencangkan
保存液中；
29
 采样常见问题：
FAQ Pengambilan Sampel

1. 利用棉签拭子采样：会影响上皮细胞的洗脱和核酸的提取；
Pengambilan sampel dengan swab kapas: akan mempengaruhi elusi sel epitel dan ekstraksi asam nukleat

2. 采样后，植绒拭子未置于细胞保存液/生理盐水中保存送检：
Setelah pengambilan spesimen, jika swab dacron (flocking swab) tidak disimpan dalam larutan media sel / larutan saline untuk diperiksa:

拭子干燥后会影响核酸的提取；
Setelah swab kering akan mempengaruhi ekstraksi asam nukleat

3. 咽拭子未在正确部位采集：错误的上颚部、口腔中采集，这样
Swab faring tidak diusap di lokasi yang benar: langit-langit mulut yang salah, rongga mulut, sehingga

不能获取合格的上皮细胞；
tidak dapat memperoleh sel epitel yang berkualitas

4. 未获取深部咳痰，送检唾液痰等。
Tidak mendapat sputum dalam, yang diperiksa adalah air liur, dll.

30
2. 核酸样本采集方法----重症患者样本采集
Metode pengambilan sampel asam nukleat --------- Pengambilan sampel dari pasien parah

 鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气
Aspirat nasofaring atau aspirat saluran pernapasan: Gunakan pengumpul (collector) yang terhubung ke pompa bertekanan negatif untuk mengisap lendir dari nasofaring atau

管抽取呼吸道分泌物，用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小 儿导
mengisap sekresi jalan nafas (airway) dari trakea, dan bilas pengumpul sekali dengan 3ml cairan sampel (Juga dapat menggunakan kateter pediatrik yang terhubung dengan

尿管接在 50mL 注射器上替代收集器）。

jarum suntik 50 mL untuk menggantikan alat pengumpul)

 下呼吸道抽吸液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约30cm深处），
注入 5mL 生理盐水，接通负压，后续操作同鼻咽抽取物。
Aspirat saluran pernapasan bagian bawah: Masukkan ujung kepala kolektor ke trakea (sekitar 30 cm) dari lubang hidung atau trakea,

suntikan 5 mL saline, nyalakan tekanan negatif, dan selanjutnya sama dengan prosedur pengambilan aspirat nasofaring.

 深咳痰液：清水（勿用含消毒剂的漱口液）漱口2-3次，将患者深咳出的痰液收集
Dahak (sputum) dalam: kumur dengan air bersih 2-3 kali (jangan kumur dengan disinfektan), dan ambil sputum dalam dari batuk pasien,

于含3ml采样液（细胞保存液）的 50mL 螺口痰杯中。

tampung di kontainer sputum (dengan tutup putar) 50 mL yang berisi 3 ml larutan spesimen (larutan pengawet sel).

 支气管肺泡灌洗液：纤支镜通过口或鼻插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其
Cairan lavage bronchoalveolar: Bronkoskop dimasukkan ke dalam bronkus lobus tengah paru-paru kanan atau segmen lingular paru-paru kiri melalui mulut atau hidung,

顶端契入支气管分支开口，缓慢注入灭菌生理盐水，每次20-60mL，
masukkan ujung atas bronkoskop ke dalam bukaan cabang bronkial, perlahan-lahan suntikan saline steril, 20-60 mL setiap kali, tarik kembali tabung cabang untuk menyimpan cairan lavage untuk

分次回抽分管留存灌洗液送检。
diperiksa.

肺泡灌洗液
Cairan lavage alveolar

对于呼吸道标本建议尽可能留取深部痰液，对气管插管病人应采集下呼吸道分泌物送核酸检测。
Untuk spesimen saluran pernapasan, dianjurkan untuk meyimpan sputum dalam sebanyak mungkin. Untuk pasien dengan intubasi trakea, harus mengumpulkan sekresi saluran pernapasan bawah untuk tes asam
nukleat.
31
2. 核酸样本采集----其他
Pengambilan sampel asam nukleat ---- Lainnya

 血液标本：尽量釆集发病后7天内的急性期抗凝血。采集量5mL,以空腹血为佳，建议使用
Spesimen darah: Sebisanya kumpulkan darah antikoagulan dalam fase akut 7 hari setelah onset. Volume koleksi sebanyak 5 mL, sebaiknya darah setelah puasa.

含有EDTA抗凝剂的真空釆血管采集血液。
Direkomendasikan menggunakan tabung vakum yang mengandung antikoagulan EDTA untuk mengambil/menyimpan darah.

 粪便标本：尽量选取脓血或黏液的粪便 1-2g，置于密闭无菌容器中1小时内送检。
Spesimen feses: Sebisanya pilih 1-2g feses dengan nanah darah atau lendir dan letakkan di wadah steril tertutup untuk diperiksa dalam waktu 1 jam.
 尿液标本：清晨清洁中段尿至少5mL置于无菌尿杯。
Spesimen urin: Kumpulkan setidaknya 5mL urin di tengah-tengah aliran, di pagi hari, dan letakan dalam wadah urin steril.
 眼结膜标本：出现眼部感染症状的病例需采集眼结膜拭子标本。
Spesimen konjungtiva: Diperlukan spesimen swab konjungtiva mata untuk kasus infeksi mata.

3. 抗体样本采集----血清学样本： Pengambilan sampel antibodi ---- Sampel serologi

静脉采血，推荐无抗凝剂的采血管，避免溶血或红细胞标本，避免细菌污染和纤维蛋白的影响
尽量釆集急性期、恢复期双份血清。
第一份血清应尽早（最好在发病后7天内）釆集， 第二份血清应在发病后第3～4周釆集。采集量5mL。
Pengambilan darah vena, direkomendasikan untuk menggunakan tabung koleksi darah tanpa antikoagulan. Hindari spesimen hemolisis atau
sel darah merah, kontaminasi bakteri dan fibrin. Kumpulkan serum 2 kali saat fase akut dan fase pemulihan.

Serum pertama harus dikumpulkan sedini mungkin (lebih baik dalam 7 hari setelah onset), dan serum kedua harus dikumpulkan 3 sampai 4 minggu
setelah onset. Volume koleksi 5 mL. 32
要点
标本的选择 . 优选下呼吸道标本，如肺泡灌洗液，否则优先采集深咳痰、鼻拭子、咽
拭子、粪便标本等。
. 不同样本的阳性检出率不尽相同，下呼吸道样本阳性检出率高于上呼吸
道样本。

不同病程 . 感染早期：上呼吸道样本病毒载量高
. 普通肺炎或轻症病例：病毒载量随着病程延长，病毒载量降低。
. 危重患者会在后期出现病毒载量反弹现象。

. 恰当采集部位，采集到含有病毒的细胞，优选鼻咽拭；
采样过程 . 加强标本采集人员的培训，确保采集到合格的可供检测用的样本；
. 选择适用病毒检测的采样管；
. 标本采集后尽快运输到实验室进行检测，运输的时候需采取低温运输；
如无法立即开展检测，标本需至于-70 度以下超低温保存。

33
Key Points

Pemilihan . Lebih diutamakan spesimen saluran pernapasan bawah, seperti cairan lavage alveolar.
spesimen
Jika tidak, utamakan mengambil sputum dalam. swab hidung, swab faring, spesimen
feses, dll
. Sampel yang berbeda memiliki tingkat deteksi positif yang berbeda. Tingkat deteksi
positif sampel saluran pernapasan bawah lebih tinggi daripada sampel saluran pernapasan
atas.
Perbedaan
perjalanan penyakit . Infeksi awal: spesimen saluran pernapasan bagian atas memiliki viral load yang tinggi
. Pneumonia umum atau kasus ringan: viral load menurun seiring perjalanan penyakit.
. Viral load pasien kritis meningkat pada fase akhir

. Lokasi pengambilan (bagian tubuh) yang tepat, dapat mengambil sel-sel yang
Proses pengambilan mengandung virus, utamakan swab nasofaring
sampel
. Perkuat pelatihan personel dalam pengambilan sampel untuk memastikan sampel
memenuhi syarat untuk tes
. Pilih tabung pengambilan sampel khusus untuk deteksi virus
. Spesimen harus segera dibawa ke laboratorium setelah pengambilan, saat proses
pengangkutan harus menggunakan suhu rendah
. Jika tes tidak dapat segera dilakukan, spesimen harus disimpan pada suhu rendah di
bawah -70 derajat 34
内容目录
Daftar Isi

1 一 新冠第七版诊疗方案解读
1. Penjelasan Protokol Diagnosis dan Perawatan
Pneumonia COVID-19 (Edisi 7)

2 二 病原学及血清学检测样本的采集
2. Pengambilan dan Penyimpanan Sampel

3 三 COVID-19病毒核酸检测关注问题
3. Hal-hal yang Perlu Diperhatikan dalam Tes Asam
Nukleat COVID-19

4 四 COVID-19血清学检测关注问题
4. Hal-hal yang Perlu Diperhatikan dalam Tes Serologi
COVID-19
COVID-19核酸检测

根据现行法规、指南、规范，开展新冠病毒检测应同时满足以下条件：
开展新冠病 1. 取得医疗机构执业许可证，通过各省临检中心技术验收的临床基因扩增实验室。
毒检测的实 2. 实验室至少达到生物安全二级，独立分区的 PCR 实验室。
验室要求 3. 从事新型冠状病毒检测的技术人员应经过生物安全培训（培训合格）和具备相应的实验技能。
（包括第三 4. 检测人员必须做到同一样本至少两人进行试验，务必做到三级防护。
方检测实验
室） 除以上条件要求外，有的地区还依照《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫办医政
发〔2010〕194 号），要求医疗机构需要取得临床基因扩增检验实验室设置备案。
实验室许可 目前有关部门没有准入许可的要求，符合实验室所列条件，即可开展新新型冠状病毒临床检测
样本制备区 样本制备区应为负压或加强型 P2 实验室，标本操作应在生物安全柜内进行。
样本的物流需有单独的物流通道和相对独立的收样空间。收样室需要通风或有排送风系统，需设
样本运转 有生物安全柜。
新冠病毒是高致病型病原微生物，普通的实验室不具备长期保存新冠标本的资质，只能临时保存，
样本保存 实验后的标本要进行销毁或移交有资质的机构。

36
 Tes Asam Nukleat COVID-19

Sesuai dengan peraturan yang ada, pedoman dan standar, persyaratan berikut harus dipenuhi oleh laboratorium untuk melakukan
Persyaratan tes COVID-19 :
untuk 1. Laboratorium amplifikasi genetik klinis yang memegang izin praktik institusi medis, dan lulus ujian teknis pusat pemeriksaan klinis
Laboratorium masing-masing provinsi.
(termasuk 2. Mencapai setidaknya Biosafety Level 2 dan memiliki laboratorium PCR yang terpisah dan independen.
Laboratorium 3. Teknisi yang terlibat dalam tes COVID-19 telah menerima pelatihan biosafety, lulus ujian akhir, dan menguasai keterampilan yang
pihak ketiga) relevan untuk tes.
untuk Melakukan 4. Tes untuk satu sampel harus dilakukan oleh setidaknya dua personel dengan perlindungan Level 3.
Tes Asam
Nukleat COVID- Selain persyaratan di atas, beberapa daerah juga memerlukan registrasi dan kualifikasi dalam tes amplifikasi genetik klinis sesuai
19 dengan Tindakan Administratif untuk Laboratorium Amplifikasi Genetik Klinis dari Institusi Medis (Peraturan Departemen Kesehatan
tentang Administrasi Medis [2010] No. 194)
Saat ini, pihak yang bersangkutan belum menetapkan persyaratan perizinan untuk melakukan pemeriksaan klinis COVID-19, dan
Izin Laboratorium
bagi yang memenuhi persyaratan untuk laboratorium dapat melakukan pemeriksaan klinis COVID-19.
Area Persiapan Persiapan sampel harus dilakukan dalam lingkungan bertekanan negatif atau laboratorium P2+, dan penanganan spesimen harus
Sampel dilakukan di kabinet biosafety.
Saluran transportasi eksklusif dan area pengumpulan yang relatif independent/terpisah diperlukan untuk transportasi spesimen.
Transportasi
Ventilasi atau sistem pasokan/pembuangan udara, dan kabinet biosafety juga diperlukan di ruang pengumpulan spesimen.
Sampel

Coronavirus adalah mikroorganisme patogen yang sangat patogenik (highly pathogenic). Laboratorium biasa tidak memenuhi syarat
Penyimpanan
untuk penyimpanan spesimen virus corona dalam jangka panjang, dan hanya dapat melakukan penyimpanan sementara. Setelah
Sampel
tes selesai, spesimen harus dihancurkan atau diserahkan ke lembaga yang memenuhi syarat.
37
COVID-19核酸检测流程 Proses Nucleic Acid Test COVID-19

核酸检测流程
Proses deteksi asam nukleat

疑似患者 样本采集 样本保存

PDP Pengambilan Sampel Penyimpanan Sampel
l

样本前处理
试剂准备 样本运输
Persiapan reagen 及灭活 Pengiriman Sampel
Penanganan dan penonaktifan sampel

核酸提取 PCR扩增 结果分析

Ekstraksi asam nukleat Amplifikasi PCR Analisis hasil
关注实验过程中的影响因素（华西医院研究）

ORF1ab基因 N基因

以上样本均采集于同一病人同一病程 不同灭活条件下的扩增曲线

滤柱法 煮沸裂解法
不同提取试剂对于
不同稀释浓度的样
本的影响：A 和B
的提取效果明显优
于C ，尤其是对于
同一样本采用不同方法提取核酸后RT-PCR结果比较

低浓度标本，提取
效果更佳明显。 39
 Faktor-faktor yang mempengaruhi proses percobaan
(Penelitian RS HUAXI)

ORF1ab基因 N基因
Gen ORF1ab Gen N

Sampel diatas diambil dari satu orang pasien yang sama dan
perkembangan penyakit yang sama Kurva amplifikasi dalam kondisi inaktivasi yang berbeda

Efek reagen ekstraksi yang

berbeda pada sampel dgn
滤柱法 煮沸裂解法
konsentrasi pengenceran Metode kolom filter Boiling sterilization
berbeda: efek ekstraksi A
dan B secara signifikan lebih
baik daripada C, terutama
untuk sampel konsentrasi
Perbandingan hasil RT-PCR setelah ekstraksi asam
rendah, efek ekstraksi lebih nukleat dengan metode yang berbeda dalam sampel
baik dan nyata . yang sama
40
新型冠状病毒核酸检测靶点及结果解读

二个基因片段结果报告判读与解释
核酸靶点： ORF1ab基因、N基因（中国）
 ORF1ab、N 经设计验证可作为特异性靶标检测、 E基因，RdRp基因，N基因（WHO）
N1基因，N2基因，N3基因，RP基因(US CDC)
E 与SARS等存在交叉性，不能单独作为确诊检测靶标；
ORF1ab和N基因二个同时阳性时，判定为阳性。
 单基因双试剂检测阳性时，判定为阳性。
 若仅单试剂ORF1ab或N基因其中之一检测结果阳性时，建议重新采样复查，
复查后ORF1ab或N基因仍为阳性时，判定为阳性；双试剂时，可报阳性。
 若ORF1ab或N基因检测结果处于灰区时，需重新采样复查，
若结果仍为灰区时，扩增曲线有明显起峰，该样本判断为阳性，否则为阴性。

41
 Target dan interpretasi hasil deteksi asam nukleat COVID-19

Interpretasi dan penjelasan dari dua laporan hasil fragmen gen

 Hasil uji ORF1ab, N sebagai target spesifik , E dan SARS bersilang, dan
tidak dapat digunakan sebagai target tunggal . Ketika dua gen ORF1ab Target asam nukleat: gen ORF1ab, gen N (Cina)
dan N positif pada saat yang bersamaan , maka dinilai sebagai positif. Gen E, gen RdRp, N gen (WHO)
Gen N1, gen N2, gen N3, gen RP (US CDC)
 Tes reagen ganda gen tunggal, dinilai sebagai positif.
 Jika hanya satu dari hasil tes gen ORF1ab atau N yang positif, disarankan
untuk mengambil sampel ulang dan memeriksa kembali, setelah
pemeriksaan ulang, jika gen ORF1ab atau N masih positif, itu dinilai
sebagai positif, ketika tes reagen ganda, dapat dilaporkan sebagai positif.
 Jika hasil tes gen ORF1ab atau N berada di area abu-abu, Anda perlu
sampel ulang dan periksa kembali, jika hasilnya masih di daerah abu-abu,
kurva amplifikasi meningkat signifikan, sampel dinilai positif, jika sebaliknya
maka negative.

42

RT-PCR结果的判读
阳性
Positif
阳性扩增结果：IC（内标）：S型
扩增
ORF1ab且N基因/E基因 扩增阳性
(Ct值＜35 各厂家不同)
Hasil amplifikasi positif: IC
(standar internal): amplifikasi
tipe-S
ORF1ab dan amplifikasi
positif dari gen N / gen E
(Nilai Ct <35 bervariasi
berdasarkan produsen)
Interpretasi hasil RT-PCR
阴性
Negatif
阴性扩增结果：IC（内标）：S型扩
增ORF1ab基因，N基因/E基因扩增
阴性
（Ct值>35各厂家不同）
Hasil amplifikasi negatif: IC
(standar internal): gen ORF1ab
yang diperkuat tipe S, gen N / E
yang diperkuat negatif
(Nilai Ct> 35 bervariasi
berdasarkan produsen)
高度可疑
Sangat mencurigakan
高度可疑结果：IC（内标）：S型扩增
ORF1ab 扩增阳性 （Ct值＜35各厂家不 ORF1ab 扩增阴性，
同）N基因/E基因 扩增阴性
用另一种试剂盒复测；
或用另一种检测方法复测；或测序
Hasil yang sangat mencurigakan: IC
(standar internal): amplifikasi tipe-S
Amplifikasi positif ORF1ab (nilai Ct
<35 bervariasi berdasarkan
produsen) Gen N / E amplifikasi gen
negatif
Retest dengan kit lain;
Atau tes ulang dengan metode
deteksi lain, atau sequencing
不确定
Tidak yakin
不确定结果：IC（内标）：S型扩增
N基因/E基因 扩增阳性 （Ct值＜35各
厂家不同）
用另一种试剂盒复测；或重新采样复测
Hasil tidak pasti: IC (standar
internal): amplifikasi tipe-S
Amplifikasi ORF1ab negatif,
Gen N / E amplifikasi gen
positif (nilai Ct <35 bervariasi
43
berdasarkan produsen)
Retest dengan kit lain, atau
resample untuk tes ulang
核酸检测“假阴性”与“假阳性”
Tes asam nukleat ”false negative" dan ”false positive"

“假阴性”： ”false negative”:

临床 “假阴性”指的是临床症状及影像学高度疑似病毒性肺炎，但新型冠状病毒核酸检测多次或始
”False negative" klinis mengacu pada gejala klinis dan pencitraan yang sangat diduga virus penumonia, tetapi asam nukleat COVID-19 telah diuji berulang kali dan selalu "negatif."
终为“阴性”。导致检测假阴性的原因涉及样本制备、核酸提取和检测等过程：
Yang mengakibatkan hasil tes adalah negatif palsu melibatkan proses persiapan sampel, ekstraksi asam nukleat, dan proses lainnya seperti:
1、不同病程期未取到合适的样本；
1. Sampel yang sesuai belum diperoleh dalam periode
2、未取到足量的病毒； yang berbeda;
2. Tidak mendapatkan virus dalam jumlah yang cukup;
3、检测试剂灵敏度不足；
3. Sensitivitas reagen yang tidak memadai saat tes;
4、核酸提取效率不高。 4. Ekstraksi asam nukleat yang tidak efisien.

“假阳性” ”false positive”

实验室污染（扩增产物遗留污染和标本间交叉污染）、部分试剂存在和其它冠状病毒的交叉反应；
Kontaminasi laboratorium (kontaminasi sisa produk amplifikasi dan kontaminasi silang antara
spesimen), adanya beberapa reagen dan reaksi silang dengan virus corona lainnya;

1. 制定质量管理制度、规范检验操作、完善质量控制措施；1. Merumuskan sistem manajemen kualitas , membakukan

langkah pengetesan, dan meningkatkan pengendalian
2. 根据患者情况，选择合适样本进行采集； kualitas;
2. Pilih sampel yang cocok menurut kondisi pasien
3. 开展室内质控和室间质控。
3. Melakukan kontrol kualitas dalam ruangan dan kontrol kualitas antar kamar
44
中国新型冠状病毒核酸检测室间质评
2020年3月16日~24 日，中国卫健委临检中心开展了2019⁃nCoV 核酸检测室间质量评价，
涵盖1296家实验室，共收到844家实验室的有效结果，合格实验室701家（83.1%），不合
格实验室143家（16.9%）。

45
 Evaluasi EQA (External Quality Assesment)
Deteksi Asam Nukleat COVID-19 di Cina
Dari 16 hingga 24 Maret 2020, Pusat Inspeksi Klinis Komisi Kesehatan dan Medis Nasional
China melakukan evaluasi External Quality Assesment deteksi asam nukleat 2019⁃nCoV,
yang meliputi 1296 laboratorium. menerima hasil yang efektif dari 844 laboratorium,
laboratorium yg memenuhi syarat sebanyak 701(83,1%) dan 143 laboratorium tidak berkualitas
(16,9%). Frekuensi
cek ulang Frekuensi Frekuensi
cek ulang cek ulang
Frekuensi Frekuensi Frekuensi Frekuensi Frekuensi Frekuensi
kesesuaian Frekuensi
Nama metode cek ulang kesesuaian cek ulang kesesuaian kesesuaian kesesuaian
Hasil laporan

Real time
RT-PCR

transcription mediated
amplification TmA

high-throughput sequencing

time of flight mass

spectrometer

Chip gen PCR

46
Catatan: Positif palsu dalam uji asam nukleat biasanya karena kontaminasi silang antara spesimen dan kontaminasi produk amplifikasi, tetapi
juga dapat disebabkan oleh jarum primer Specific reagent .
RT-PCR技术检测病毒核酸影响因素小结
疾病本身特点 咽拭子采样的局限性
Karakteristik penyakit Keterbatasan pengambilan sampel throat/ nasoharing
swab
1、操作操作：采集位置、采集量影响
1、感染阶段不同，病毒载量分布不同；
1. Tahap penularan berbeda , kadar muatan viruspada berbeda di tahap infeksi yg 1. Pelaksanaan pengambilan sampel, lokasi ,volume
tidak sama pengambilan
2、需用适合病毒检测及PCR操作的涤纶或人造棉
2、 病毒对不同器官侵害存在特异性差异 头塑料柄咽拭子；
2. Ada perbedaan spesifik terhadap organ tubuh yg
diserang Virus
假阴性 2. Perlu menggunakan polyester atau kepala kapas
sintetis yang cocok untuk deteksi virus dan PCR

运输、保存等问题 原因 3、采集人员操作不规范Tenaga medis pengambilan yang

Transportasi, penyimpanan, dan masalah lainnya Penyebab false negative tidak berstandar.

1、采集器中应放置病毒保存液； T PCR试剂盒的缺陷
1. memilih wadah penyimpanan cairan virus kekurangan PCR Reagen box
1、研发周期短，产品稳定性差；
2、储存/运输温度、时间等外在因素； 1. Siklus R&D yang singkat dan stabilitas produk yang
2. Faktor eksternal seperti suhu / waktu penyimpanan / transportasi; buruk;

2、未经过反复认证与临床验证；
3、RNA病毒易降解 2. Belum melalui verifikasi berulang kali dan verifikasi klinis;
3. Virus RNA mudah terdegradasi
3、设计上存在特异性基因位点不足的缺陷；
解决方案：
3. Kekurangan situs gen spesifik yang tidak mencukupi saat merancang
 采集不同部位样本：鼻咽拭子、深部痰、肺泡灌洗液……
 建立新型冠状病毒统一采样、检测标准及室间质评 4、不同厂家qPCR质量良莠不齐
 建立新的、更有效的新型冠状病毒检测方法 4. Kualitas qPCR bervariasi dari produsen yang berbeda
解决方案：Solusi:

 采集不同部位样本：鼻咽拭子、深部痰、肺泡灌洗液……

 Mengumpulkan sampel dari berbagai bagian: nose nasofaring, dahak

dalam, bronchoalveolar lavage fluid.

 建立新型冠状病毒统一采样、检测标准及室间质评
 Menetapkan standar pengambilan sampel dan deteksi terpadu untuk
COVID-19 dan EQA ( External Quality Assessment)

 建立新的、更有效的新型冠状病毒检测方法
 Membangun metode deteksi baru yang lebih efektif untuk COVID-19

48
内容目录 Daftar Isi

1 一 新冠第七版诊疗方案解读

1. Penjelasan Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 7)

2 二 病原学及血清学检测样本的采集

2. Pengambilan dan Penyimpanan Sampel

3 三 COVID-19病毒核酸检测关注问题
3. Hal-hal yang Perlu Diperhatikan dalam Tes Asam Nukleat COVID-19

4 四 COVID-19血清学检测关注问题
4. Hal-hal yang Perlu Diperhatikan dalam Tes Serologi COVID-19
COVID-19的血清学检测 Tes serologis COVID-19

新冠病毒和抗体
COVID-19 dan antibodi
特异性高 混合多肽
Peptida campuran dengan spesifisitas tinggi
抗体检测
Deteksi antibodi

Light chain

Heavy chain
核心蛋白 丰富而保守
Protein inti kaya dan konservatif
早期出现 Wilayah variable (Fab)
Penampilan awal
Wilayah konstan (Fc)

抗体结构示意图
Diagram skematik struktur antibodi

冠状病毒结构示意图
Diagram skematik COVID-19
Karena diproduksi oleh
. IgM作为人体中最早出现的抗体，是人体抗感染免疫的“先头部队”。 stimulasi antigen, maka
secara khusus dapat
Sebagai antibodi paling awal dalam tubuh manusia, IgM adalah "kekuatan pertama" yang
mengikat antigen yang
bertindak sebagai kekebalan anti-infeksi tubuh manusia.
sesuai, dan memiliki
. IgG是血清和组织液中含量最高的抗体，约占血清Ig总量的75%。亲和力高、 glikoprotein sebagai
体内分布广泛、具有免疫效应的抗感染“主力军”。 imunitas/kekebalan
tubuh.
IgG adalah antibodi dengan kandungan tertinggi dalam serum dan cairan jaringan, terhitung sekitar 75%
dari total serum Ig. Afinitas tinggi,
tersebar luas di seluruh bagian tubuh dan merupakan Tentara Utama digaris depan imun tubuh.
由抗原刺激产生，
能与对应抗原特异结合的、具有免疫功能的糖蛋白。
血清学检测 Pengujian serologis

血清学检测方法: 化学发光法（CLIA）、 ELISA、胶体金技术等。

Metode deteksi serologis: chemiluminescence (CLIA), ELISA, Colloidal gold technology,
dll.
以CLIA为例：CLIA sebagai contoh:

样本准备 样本测试过程
Persiapan sampel Proses pengujian sampel

51
 胶体金名

原理
反应板上的抗原可与待测样本中抗体结合，再与胶体金标记的抗人抗体
结合并显色，形成肉眼可见的红色斑点或条带，从而判断阳性或阴性。

特点
该技术对实验室设备和人员要求较低，适合基层开展规模检测，可以进行
辅助诊断。

局限性
 由于窗口期（IgM，参考SARS约10天）的存在，该技术难以在感染初期检出阳性结果。
 体内干扰因素（异嗜性抗体、类风湿因子等）存在、患者免疫力低下、HOOK效应等也
会导致假阴性结果出现。
 免疫诊断技术敏感性较好但特异性相对较差，检测中可能会现假阳性结果。
 胶体金
Colloidal gold

Prinsip
Antigen pada pelat reaksi dapat dikombinasikan dengan antibodi dalam sampel yang
akan diuji, dan kemudian dikombinasikan dengan Colloidal gold dan dikembangkan
untuk membentuk bintik merah atau pita yang terlihat oleh mata telanjang, sehingga
dapat dinilai positif atau negatif.

Fitur
Teknologi ini memiliki persyaratan rendah untuk sarana dan personel
laboratorium, cocok untuk pengujian skala dasar, dan dapat digunakan untuk
diagnosis tambahan.

Keterbatasan
• Karena adanya jeda waktu (IgM, sekitar 10 hari dengan mengacu pada SARS),
teknik ini sulit untuk mendeteksi hasil positif pada tahap awal infeksi.
• Adanya faktor interferensi in vivo (antibodi heterofil, faktor reumatoid, dll.), Imunitas
pasien yang rendah, dan efek HOOK juga dapat menyebabkan hasil negatif palsu
• Teknik imunodiagnostik memiliki sensitivitas yang baik tetapi spesifisitas yang relatif
buruk, dan hasil false positive dapat muncul dalam tes.
化学发光Chemiluminescence
原理
用被标记的抗体（抗原），与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成抗原）
-待测抗原（抗体）-标记抗体（抗原）复合物，通过固相包被抗体（磁分离技术将游离
抗原抗体洗净，再加入发光底物 即可实现发光。

特点
具有灵敏度高、特异性强、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单自
动化程度高等优点。
目前已有几家代表性发光试剂厂家宣布研发出9款相关产品。

局限性
但往往需要品牌限定的化学发光仪，试剂成本相对较高且无法开
放通用，众多小型实验室难以承受其成本压力。
化学发光 Kemiluminesensi

Prinsip
Antibodi berlabel (antigen) bereaksi dengan antigen yang sesuai (antibodi) dalam
spesimen untuk membentuk antibodi pelapis fase padat (antigen) -antigen yang
akan diuji (antibodi) berlabel kompleks antibodi (antigen), Antigen dan antibodi
bebas dicuci dengan teknologi pemisahan magnetik, dan kemudian substrat
luminescent ditambahkan untuk mencapai luminescence.

Fitur
Ini memiliki kelebihan :sensitivitas tinggi, spesifisitas kuat, metode stabil dan
cepat, jangkauan deteksi luas, operasi sederhana dan otomatisasi tingkat
tinggi.
Saat ini, beberapa produsen reagen luminescence telah mengumumkan
pengembangan 9 produk terkait.

Keterbatasan
Namun, sering membutuhkan instrumen chemiluminescence yang
ditentukan merek. Biaya reagen relatif tinggi dan tidak dapat dibuka untuk
penggunaan umum. Banyak laboratorium kecil tidak mampu membayar
biaya tersebut
新冠病毒抗体 Antibodi COVID-19

b：1例新冠肺炎患者在发病后7、8、9和18天的体内病毒IgM、IgG抗体水平。
b: Tingkat antibodi IgM dan IgG pada satu pasien COVID-19 pada 7, 8, 9 dan
18 hari setelah onset Berdasarkan survei epidemiologi saat ini, masa
inkubasi adalah 1-14 hari, sebagian besar 3-7 hari
c：5例新冠肺炎患者发病后20天体内IgG抗体阳性。 新型冠状病毒诊疗方案（试行第七版）临床表现
c: Antibodi IgG positif dalam 5 kasus pasien COVID-19 setelah 20 hari Manifestasi klinis dari diagnosis COVID-19 dan rencana
terserang penyakit. perawatan (untuk implementasi uji coba edisi ketujuh)
Zhou P, Yang Xl, Wang XG at al. NATURE, 2020. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2012-7
 以N蛋白作为抗原检测IgM、IgA和IgG抗体
Deteksi antibodi IgM, IgA dan IgG menggunakan protein N sebagai antigen

IgM、IgA平均在发病后5天（3-6天）检出，
检出率分别85.4%、92.7%

IgG抗体平均在14天（10-18天）检出，
检出率77.8%。

IgM, IgA terdeteksi rata-rata 5

hari (3-6 hari) setelah terserang
penyakit, Tingkat deteksi
masing-masing adalah 85,4%
dan 92,7%

Antibodi IgG terdeteksi rata-

rata dalam 14 hari (10-18 hari),
Tingkat deteksi adalah 77,8%.
Guo L, et al. Clin Infect Dis. 2020 Mar 21.

57
Tabel 1. Perbandingan Hasil Tes Antibodi 2019-nCoV dan Tes Asam Nukleat 2019-nCoV (Kasus)

Hasil Tes Asam Nukleat 2019-nCoV

positif negatif total

positif

negatif
Hasil Tes
Antibodi 2019-nCoV total

在 19例核酸检测阴性但基于临床症状确诊的 COVID-19 患者中：

16 例患者 2019-nCoV IgM阳性，其阳性率达到 84.21%；

18 例患者 2019-nCoV IgG阳性， 其阳性率达到 94.74%。

说明：
抗体的检测可以非常有效地弥补核酸检测漏检的风险；
在COVID-19 的及时诊治及防控中发挥实验室诊断价值。
Dari 19 kasus pasien dengan hasil tes asam nukleat negatif tapi positif COVID-19 secara klinis:
16 pasien 2019-nCoV IgM positif, 84.21% positif
18 pasien 2019-nCoV IgG positif, 94.74% positif

Catatan:
Tes antibodi sangat efektif mengurangi resiko hasil tes asam nukleat yang terlewat;
Tepat waktu diagnosis dan perawatan serta memberikan hasil diagnosis laboratorium pada
masa kontrol dan pencegahan COVID-19.
 Tabel 1. Indeks Evaluasi Antigen 2019-nCoV dalam grup pasien NCP dan Non-NCP
Pasien NCP Pasien Non-NCP (Pembanding)

Rasio kemungkinan
negatif
Tipe test Nilai prediktif Nilai prediktif Rasio kemungkinan
Angka positif Angka negatif Total Sensitivitas Angka positif Angka negatif Total Spesifisitas positif negatif positif

IgM dan IgG

Konsentrasi IgM 2019-nCoV

Konsentrasi IgM 2019-nCoV

Sebelum asam nukleat Setelah asam nukleat Pertama kali Kedua kali Ketiga kali
berubah negatif berubah negatif

Konsentrasi IgM 2019-nCoV

Konsentrasi IgM 2019-nCoV
Pertama kali Kedua kali Ketiga kali
Sebelum asam nukleat berubah negatif Setelah asam nukleat berubah negatif

Catatan: 2019-nCoV: COVID-19 2019; NCP: COVID-19 Pneumonia; Catatan: 2019-nCoV: COVID-19 2019; NCP: COVID-19 Pneumonia;
IgM: Imunoglobulin M; IgG: Imunoglobulin G IgM: Imunoglobulin M; IgG: Imunoglobulin G
Gambar 1: Kondisi perubahan konsentrasi antigen 2019-nCoV sebelum dan setelah Gambar 2: Kondisi perubahan konsentrasi antigen 2019-nCoV pada 3 kali berturut
asam nukleat 2019-nCoV berubah negative pada 17 pasien NCP. tes darah setelah 19 pasien NCP dirawat di rumah sakit.
 新型冠状病毒感染抗原、抗体水平模式图
Diagram pola level antigen dan antibodi infeksi COVID-19

antigen 抗原
Level antigen, antibodi

IgM
抗原、抗体水平

IgG

0 7 14 21 28 3 0 7 14 21 28 3
5
初次感染
5
再感染 感染时间（天）
Awal terinfeksi Terinfeksi kembali Durasi infeksi (hari)
 血清学检测方法的特点：
Fitur Metode Tes Serologis:
抗原抗体反应，具有合理的灵敏度和特异性
Reaksi antigen-antibodi dengan sensitivitas dan spesifisitas yang wajar
血清学方法样本易于收集（主要为血清样本）
Sampel metode serologis mudah dikumpulkan (terutama sampel serum darah)
对样本采集者和检测环节的生物安全防护较低（相较于核酸检测方法），不需要PCR设备
Tingkat perlindungan keamanan biologis lebih rendah (dibanding metode tes asam nukleat) untuk pengumpul sampel dan penguji sampel, tidak memerlukan perlengkapan PCR.

– --易于广泛应用，尤其是适用于一些偏远地区。
Gampang digunakan secara luas, terutama cocok untuk daerah – daerah terpencil.
TAT时间短（几分钟--1小时），操作简单容易，适合大规模检测。
Waktu TAT pendek (beberapa menit – 1 jam), penanganan lebih mudah, cocok untuk tes skala besar.
价格合理 Harga terjangkau
经过验证有效的血清学方法可以用作流行病学回顾分析、
尤其是对有确切流行病学史但核酸检测阴性的可疑患者，
进行急性期和恢复期血清学筛查，可以有效地起到辅助诊
断的作用。
Metode serologi terbukti efektif dapat digunakan untuk analisa retrospektif epidemiologis,
terutama untuk pasien suspect dengan riwayat epidemiologis pasti tetapi tes asam nukleat negatif.
Saringan serologi pada fase akut dan fase pemulihan dapat secara efektif membantu peran diagnosa. WHO interim guidance (2 March 2020).
导致抗体检测假阳性可能的干扰因素
内源性干扰物：
.类风湿因子RF: 与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的标记的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。
.嗜异性抗体HA：可通过交联固相和标记的单抗或多抗而出现假阳性反应。
.补体：免疫反应中交联抗体，而出现假阳性结果。
.抗鼠Ig 抗体：使用鼠源性单克隆抗体靶向治疗时，对使用鼠源性单克隆抗体的免疫测定，可产生假阳性结果。
.溶菌酶：可与固相化的IgG和标记的IgG间形成桥接，从而导致假阳性。

外源性干扰物：
.标本溶血：高血红蛋白在温育过程中会吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应，导致假阳性。
.标本贮存时间过长：保存时间过长，IgG可聚合成多聚体，在间接法免疫测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性。
.标本凝固不全：在ELISA测定过程中仍可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果。
.阳性判断值（cut-off ）设定：灰区

62
Faktor Penyebab Hasil “False Positive” pada Tes Antibodi

Faktor Gangguan Internal:

• Rheumatoid Factor RF: dan antibodi spesifik IgG yang berlapis di fase padat terikat dengan marker yang kemudian ditambahkan,
menyebabkan hasil “false positive”.
• Heterophilic Antibody HA： Reaksi “False positive” dapat terjadi karena cross-linking antara fase padat dan antibodi monoklonal atau
poliklonal marker.
• Sistem Komplemen：Reaksi imunitas cross-linking dengan antibody, menyebabkan hasil “false positive”
• Anti-tikus Antibodi Ig: saat terapi menggunakan antibodi monoklonal dari tikus, hasil dari imunoasai yang menggunakan antibodi
monoklonal dari tikus dapat memberi hasil “false positive”
• Lisozim: dapat membentuk jembatan antara IgG fase padat dan IgG marker, dan hasil tes “false positive”.

Faktor Gangguan Eksternal:

• Hemolisis spesimen: selama inkubasi, kadar hemoglobin yang meningkat teradsorpsi pada fase padat, lalu
bereaksi dengan substrat HRP yang kemudian ditambahkan, menyebabkan hasil test “false positive”.
• Waktu penyimpanan spesimen terlalu lama: waktu penyimpanan terlalu lama, IgG dapat berpolimerisasi, di
imunoasai tidak langsung akan menyebabkan reaksi background yang dalam, sehingga hasil “false positive”
• Spesimen tidak membeku dengan sempurna: pada proses tes ELISA masih terbentuk blok fibrin, gampang
menyebabkan hasil “false positive”.
• Setting cut-off hasil positif: area abu-abu
63
 抗体检测“假阴性”
Tes Antibodi “False Negative” dan “False Positive"
临床的“假阴性”：
感染早期，抗体尚未出现，或不能检出
患者免疫功能因治疗或疾病发展受损，未能产生足够检出的抗体

“False negative" secara klinis:

 Masa awal infeksi, antibodi belum terbentuk atau tidak terdeteksi
 Fungsi kekebalan tubuh pasien terganggu karena pengobatan atau perkembangan penyakit,
gagal menghasilkan antibodi yang cukup untuk terdeteksi

实验室检测的“假阴性”：
试剂所选择的抗原及质量
实验室环境条件：温度、湿度
检测操作
“False negative” pada tes laboratorium:
 Reagen yang dipilih, antigen dan kualitasnya.
 Kondisi laboratorium: temperatur dan kelembaban
64
 Cara pengerjaan tes
新型冠状病毒特异IgM/IgG检测策略

 COVID-19特异IgM/IgG抗体完全可以作为COVID-19在病毒核酸检测阴性情况下的确诊标准，
其前提是需要2次以上的动态检测。
病毒核酸检测阴性，
但患者疑似，同时
 正因为有这种假阳性的存在，特异 检测特异IgM/IgG

IgM/IgG抗体检测不适用复工等一般 IgM(+)/IgG(-) IgM(-)/IgG(+)

IgM(+)/IgG(+) IgM(-)/IgG(-)
疑为急性感染，但
人群的筛查，这是必须要强调的。
IgG假阳性或为既往感染，
需间隔一周左右再 疑为急性感染，间隔 报告阴性，间隔一周左右
可继续观察IgG滴度，如出
次检测 一周左右再次检测 继续检测，如出现前述三
现增加且达4倍以上，则为
种模式，则按相应模式流
 动态观察以区分特异IgM/IgG检测的
急性或近期感染
程进行检测及判断

IgM(+)/IgG(-)，
结果“真与假”。 IgM(+)可能为假阳性，
后续可继续检测观察，
IgM(-)/IgG(+) 或 IgM(+)
/IgG(+) ，但IgG滴度持续
如患者直至康复，结 增高，达4倍以上，则可判
束不变，则IgM可确 断为急性或近期感染
认为假阳性

IgM(+)/IgG(+) 或
IgM(-) /IgG(+) ，
可判断为急性感
染 参考文献：《中国新型冠状病毒肺炎诊疗方案》（试行第七版）
Strategi deteksi IgM / IgG spesifik COVID-19

 Antibodi IgM/IgG spesifik COVID-19 dapat digunakan sebagai kriteria diagnosis untuk COVID-
19 pada saat tes asam nukleat virus yang negatif. Prasyaratnya adalah diperlukan lebih dari 2
kali tes dinamis. Tes asam nukleat virus

 Karena adanya “false positive” negatif, tetapi pasien

dicurigai, dilakukan tes
IgM / IgG spesifik
seperti itu, tes antibodi IgM / IgG spesifik bersamaan.

tidak cocok untuk skrining populasi

IgM(-)/IgG(+)
umum pada saat selesai karantina. IgM(+)/IgG(-)
Diduga sebagai infeksi
IgM(+)/IgG(+)
Diduga sebagai infeksi IgG “false positive” atau infeksi
IgM(-)/IgG(-)
Hasil tes negatif, lanjutkan tes
Ini harus ditekankan. akut, tetapi perlu diuji
lagi sekitar satu minggu
akut, tetapi perlu diuji
lagi sekitar satu
sebelumnya, dapat terus
mengamati titer IgG, jika ada
sekitar satu minggu kemudian,
Jika muncul salah satu dari tiga
 Pengamatan dinamis untuk kemudian peningkatan dan lebih dari 4 kali,
minggu kemudian contoh tersebut di atas, maka
artinya infeksi akut atau baru
ikut prosedur contoh dan
terinfeksi.
membedakan hasil tes IgM / IgG IgM(+)/IgG(-)，
lakukan tes yang sesuai.

IgM(-)/IgG(+) atau IgM(+)

spesifik "benar dan salah". IgM(+)
Mungkin
/IgG(+) ，
“false positive”,
selanjutnya dapat dilakukan Tapi titer IgG terus meningkat,
tes observasi, jika pasien lebih dari 4 kali, dapat dinilai
tidak ada perubahan sampai
akhir pemulihan, IgM dapat sebagai infeksi akut atau
dikonfirmasi sebagai “false infeksi baru.
positive”.

IgM(+)/IgG(+) atau
IgM(-) /IgG(+) ，
dapat dikonfirmasi
sebagai infeksi akut

Referensi: Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 7)

常见病原感染及特异抗体确认 Infeksi Patogenik Umum dan Konfirmasi Antibodi Spesifik

急性感染： Infeksi akut:

呼吸道病毒（流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒、冠状病毒等） Virus pernapasan (influenza, orthopneumovirus ,
adenovirus, rhinovirus, coronavirus, dll.)
消化道感染病毒感染（HAV、HEV等）Infeksi virus saluran pencernaan (HAV, HEV, dll.)
其他：如埃博拉病毒、西尼罗河病毒、登革病毒、EB病毒等
Lainnya: seperti virus Ebola, virus West Nile, virus dengue, virus EB, dll.

慢性感染：（确认实验）Infeksi kronis: (konfirmasi percobaan )

HCV Ag

抗-HCV：HCV RNA和重组免疫印迹（RIBA） HCV Ag

抗-HIV：HIV RNA和免疫印迹（WB）
抗-HBc：HBV DNA
梅毒抗体：免疫印迹（WB）
 Anti-HCV: RNA HCV dan Uji immunoblot rekombinan (RIBA)
 Anti-HIV: RNA HIV dan immunoblotting (WB)
 Anti-HBc：HBV DNA
 Antibodi Sifilis: Western Blot (WB)
检测新冠病毒抗体的临床意义 Arti Klinis Mendeteksi Antibodi COVID-19
排除假阳性
通常认为：
目前
 血清IgM的检出，提示发生新近感 IgM/IgG阳性表明机体有“感染”
新冠数据还很缺乏
染，可用于感染的早期诊断。
 IgG抗体可作为回顾性诊断和流行 抗体阳性

病学调查的检测指标。
还可能是接触 也可能是曾经感染过， 可能是正在
了抗原物质 体内产生了抗体，感 受感染
染产生了痕迹
需要大量循证医学证据
接种疫苗
隐 既 现
密切接触者 性 ？感染症状？ 往 症

抗体检测仅用作对新冠病毒核酸检测阴性疑似病
例的补充检测，或在疑似病例诊断中与核酸协同
使用，不作为新冠病毒感染者确诊和排除的依据，
也不适用于一般人群的筛查，试剂仅限医疗机构
使用。 新型冠状病毒诊疗方案（试行第六版） 流行病学特点

机体被感染后产生抗体，机体检测到抗体，说明有抗原刺激（包括有现症或既往感染或抗原接触），但不一定是感染病。

68
Arti Klinis Mendeteksi Antibodi COVID-19
Menghilangkan
“false positve”
Secara umum:
• Jika serum darah IgM terdeteksi, Masih banyak
kekurangan data IgM / IgG positif menunjukkan bahwa
menunjukkan bahwa infeksi baru
telah terjadi dan dapat digunakan Covid-19 tubuh memiliki "infeksi"
untuk diagnosis dini infeksi. Antibodi
• Antibodi IgG dapat digunakan sebagai positif
indikator deteksi untuk diagnosis
retrospektif dan penyelidikan Mungkin juga telah Mungkin sedang
Mungkin juga
epidemiologis. terinfeksi sebelumnya, terinfeksi
terpapar antigen
tubuh telah menghasilkan
antibodi, dan infeksi telah
menghasilkan jejak
Vaksinasi
Diperlukan banyak bukti medis Gejala saat ini
? Gejala
Kontak dekat Resesif Dulu
infeksi?
Pengujian antibodi hanya digunakan sebagai
tes pelengkap untuk kasus-kasus yang dicurigai
di mana tes asam nukleat dari COVID-19
adalah negatif, atau digunakan bersama
(1) Sumber infeksi.
dengan asam nukleat dalam diagnosis kasus- Sumber infeksi yang diketahui sejauh ini kebanyakan adalah
kasus yang dicurigai.Ini tidak digunakan pasien yang terinfeksi COVID-19. Orang dengan infeksi tanpa
sebagai dasar untuk diagnosis pasien COVID-
19, juga tidak cocok untuk skrining masyarakat
gejala juga dapat menjadi sumber infeksi.
umum, reagen hanya digunakan untuk institusi Protokol Diagnosis dan Perawatan Pneumonia COVID-19 (Edisi 6) Fitur Epidemiologis
medis.
Tubuh memproduksi antibodi setelah terinfeksi. Tubuh mendeteksi antibodi, menunjukkan bahwa ada stimulasi antigen
(termasuk gejala saat ini atau infeksi sebelumnya atau paparan antigen), tetapi tidak selalu merupakan penyakit menular.
69
 抗体检测小结 Ringkasan Tes antibodi
 抗体检测是一种快速、简便的检测方式；
 抗体检测作为核酸检测的有效补充；
 抗体检测结果具有流行病学意义。
• Tes antibodi adalah metode tes yang
cepat dan sederhana;
• Tes antibodi sebagai komplemen untuk tes
asam nukleat yang efektif;
• Hasil tes antibodi memiliki arti epidemiologis.

• Apakah cocok untuk skrining,

masih perlu mengetahui target  是否能用于筛查，还需辨别筛查目的；
skrining;
• Bukan bukti diagnosis infeksi
COVID-19;
 不是新冠感染确诊的证据；
• data klinis untuk mengetahui
kejadian, perkembangan, dan  认识新冠感染发生、发展、预后、转归的临床数据。
prognosis infeksi COVID-19.

新冠病毒特异IgM/IgG检测：
Tes IgM / IgG spesifik COVID-19:
. 可用于复工、海关入关等人员的筛查吗?
• Apakah cocok untuk skrining pemulihan kembali, imigrasi?
. 可用于一线医务人员可能的感染筛查吗? • Apakah cocok untuk skrining infeksi staf medis garda depan?
•
. 可用于普通人群的居家检测吗? Apakah cocok untuk tes di rumah bagi masyarakat umum?
• Apakah cocok untuk skrining semua pasien di rumah sakit?
. 可用于医院内所有住院患者的筛查吗?
方法学比较
方法学比较
技术名称 样本类型 共同特点 优点 缺点 检测目的 适应实验室

1、裣测时间长；
1、检测靶标基于人体
酶免疫技术 1、特异性较强 2、单次检测通量有限； 具有相应技术能力
抗体的反应，包括IgM
2、设备要求低； 3、操作环境开放.易污染; 的各种规模实验室
和IgG；
4、通常只能定性或半定量检测
2、敏感性较好；
通常为血清样本 3、操怍简单;
4、实验室及设备人员
免 的要求低于PCR技术；
疫 5、影响因素较多，易 1、特异性强； 初筛 具有一定规模，拥
分 化学发光技术 产生假阴性结果；且 2、方法稳定快速；
1、需要特殊设备；
有相应化学发光仪
析 2、检测成本较高；
器设备的实验室
难在感染早期检测出 3、能够定量检测；
阳性结果;
6、特异性相对较差，
可能出现假阳性结果；
通常为血清样本， 7、检测灵敏度、特异 各种规模的实验室，
1、方法稳定快速： 1、灵敏度较差；
免疫胶体金标记技术 也可以是尿液、粪 性低于PCR技术; 尤其适合缺乏硬件
2、实验室和人员要求低 2、无法定量检测
便等 条件的小实验室

1、自动化程度高；
1、检测成本较高； 拥有荧光定量PCR
荧光定量PCR 2、敏感性较好；
2、只能相对定量； 设备的实验室
3、特异性强
1、靶标直接检测病毒
1、自动化程度高；
本身；
2、能够实现绝对定量； 1、检测通量极低； 拥有数字PCR设备
2、灵敏度高； 确诊
3、灵敏度、敏感度、特异性 2、检测成本高； 的实验室
3、特异性强；
等均优于qPCR
核 4、重复性好；
酸 含有检测目标核酸 5、需要通过PCR实验 1、检测费用高；
裣 高通量测序 物质的样本 室验收; 1、准确；
2、结果分析难度大，对人员专业 多用于科研领域
测 6、扩增前操作繁琐, 2、全面；
要求高
对人员技术要求较高，
需要取得上岗证；
1、恒温； 1、引物设计要求较高；
7、容易被污染,产生
2、高效； 2、检测成本高；
假阳性结果 尚未广泛应用于临
恒温扩增技术 3、实验室要求低，许多产品 3、非特异扩增(假阳性)难消除； 初筛
床检测
甚至不要求在PCR实验室中 4、比传统PCR更易产生气溶胶污
操作 染；
Perbandingan Metodologis
Nama Teknis
Immunoassay enzim
Immunoassay
Chemiluminescence
Teknik marker colloidal gold
pada imunitas
PCR Kuantitatif
核 5. Harus lulus syarat lab
酸 target tes zat asam
裣 High Throughput
测 Sequencing (HTS)
Isothermal amplification
Perbandingan Metodologis
Jenis sampel Karakteristik umum Kelebihan Kekurangan Tujuan Tes Lab yang cocok
1. Target deteksi 1. Durasi tes yang panajang,
didasarkan pada reaksi 2. Hasil tes satuan terbatas,
Semua lab dengan
antibodi manusia, 1. Bersifat sangat khusus 3. Lingkungan tes terbuka, gampang
kemampuan teknis
termasuk IgM dan IgG; 2. Perlengkapan sederhana terkontaminasi,
yang sesuai
2. Sensitivitas yang baik; 4. Biasanya hanya kualitatif atau
3. Operasi sederhana; semi-kuantitatif.
Biasanya sampel 4. Syarat staf dan
serum darah
perlengkpan lab lebih
rendah dari PCR;
Lab dengan skala
5. Mudah terpengaruh Skrining
1. Bersifat sangat khusus tertentu dan
dan mudah hasil false 1. Diperlukan perlengkapan khusus, awal
2. Metode stabil dan cepat perlengkapan
negative, dan sulit untuk 2. Harga tes mahal.
3. Bersifat kuantitatif chemiluminescence
mendeteksi hasil positif
yang sesuai
pada tahap awal infeksi;
6. Spesifisitasnya relatif
buruk, dan hasil false
Biasanya sampel positive dapat terjadi;
Semua lab, terutama
serum darah, tetapi 7. Sensitivitas dan 1. Metode stabil dan cepat 1. Kurang sensitif.
cocok untuk lab kecil
urine, tinja, dll juga spesifisitas deteksi lebih 2. Syarat lab dan staf rendah 2. Tidak bersifat kuantitatif
yang tidak lengkap
boleh. rendah dari PCR;
1. Otomatisasi tinggi; Laboratorium dengan
1. Harga tes mahal.
2. Sensitivitas yang baik; perlengkapan PCR
2. Hanya relatif kuantitatif
3. Bersifat sangat khusus kuantitatif
1. Target langsung 1. Otomatisasi tinggi;
mendeteksi virus; 2. Bersifaat kuantitatif Laboratorium dengan
2. Sensitivitas tinggi; 1. Jumlah hasil deteksi rendah
3. Respon,Sensitivitas dan Konfirmasi perlengkapan PCR
3. Bersifat sangat khusus 2. Harga tes mahal.
spesifisitas lebih baik daripada digital
4. Hasil ulang baik; qPCR
Sampel mengandung
PCR; 1. Harga tes mahal.
6. Sebelum perluasan, 1. Akurat; Sering digunakan
nukleat 2. Analisis hasil sulit dan
penanganan rumit, dan 2. Komprehensif;
membutuhkan staf professional
dalam penelitian ilmiah
dibutuhkan staf
professional (bersertifikat);
7. Mudah terkontaminasi 1. Persyaratan desain primer tinggi;
1. Suhu konstan;
dan menghasilkan hasil 2. Harga tes mahal.
2. Efisien;
“false positive” 3. Amplifikasi non-spesifik (false Skrining Jarang digunakan
3. Syarat lab rendah, banyak
positive) sulit dihilangkan; awal dalam pengujian klinis
produk bahkan tidak memerlukan
4. Lebih rentan terhadap polusi
penanganan di lab PCR
aerosol daripada PCR tradisional;
结果解读
PC
No. R IgM IgG 解读
1 + - - 患者可能处于COVID-19感染“窗口期”,“窗口期” 一般为２周
2 + + - 患者可能处于COVID-19感染早期
3 + - + 患者可能处于COVID-19感染中晚期或复发感染
4 + + + 患者可能处于COVID-19感染中晚期或复发感染
5 - + - IgM阳性提示极大可能处于COVID-19感染急性期，需考虑核酸检测结果存疑
患者近期曾感染COVID-19并处于恢复期，体内病毒被清除，IgM尚未减低至检测下
6 - + +
限；或核酸检测结果假阴性，患者处于感染活跃期。
提示患者可能既往感染COVID-19，但已恢复或体内病毒被清除，免疫应答产生的
7 - - +
IgG维持时间长，仍存在于血液中被检测到。
提示患者初次感染载量极低的COVID-19并处于早期，病毒载量低于核酸检测下限，
8 - 弱+ + 机体产生少量IgM抗体，而尚未产生IgG；或者由于患者自身类风湿因子阳性等引起
的IgM假阳性。

注：北京协和医院检验科《新型冠状病毒血清特异性抗体检测技术应用
探讨》
 Hasil Analisis
No. PCR IgM IgG Analisis
1 + - - Pasien mungkin dalam “masa jendela" infeksi COVID-19, “masa jendela" umumnya 2 minggu

2 + + - Pasien mungkin berada pada tahap awal infeksi COVID-19

3 + - + Pasien mungkin dalam tahap pertengahan atau akhir infeksi COVID-19 atau terinfeksi lagi

4 + + + Pasien mungkin dalam tahap pertengahan atau akhir infeksi COVID-19 atau terinfeksi lagi

IgM positif menunjukkan bahwa sangat mungkin di tahap akut infeksi COVID-19, dan hasil tes asam
5 - + -
nukleat perlu dipertimbangkan
Pasien baru terinfeksi COVID-19 dan sedang dalam fase pemulihan.Virus dalam tubuh telah
6 - + + dibersihkan dan IgM belum dikurangi hingga batas deteksi yang lebih rendah, atau hasil tes asam
nukleat false negative dan pasien dalam fase infeksi aktif.
Pasien mungkin pernah terinfeksi COVID-19, tetapi telah pulih atau virus telah dibersihkan dari
7 - - + tubuh, dan IgG yang dihasilkan oleh respon imun dipertahankan untuk waktu yang lama dan masih
terdeteksi dalam darah.
Pasien baru terinfeksi dan beban infeksi sangat rendah, viral load di bawah batas yang lebih rendah
8 - 弱+ + dari deteksi asam nukleat, tubuh produksi sedikit antibodi IgM, tetapi belum menghasilkan IgG, atau
false positive karena faktor rheumatoid pasien itu sendiri positif atau faktor lainnya.
Catatan: Laboratorium Rumah Sakit Peking Union Medical College "Diskusi Penerapan Teknologi Deteksi Serum Antibodi Spesifik COVID-19"
 -

Tes Asam Nukleat

核酸检测 N
- Langsung mendeteksi virus
病毒存在的直接证据 - Skema test sekarang
目前的检测方案
-

抗体检测 B A
抗原检测
间接证据 病毒存在的直接证据
提示作用 目前不成熟
Test Antibodi 需直接证据进行确诊
Test Antigen
- Tidak langsung mendeteksi
- Langsung mendeteksi virus
- Sebagai fungsi indikasi
- Sekarang masih belum sempurna
- Diperlukan bukti langsung
untuk memastikan
早检测、早诊断、早报告、早隔离、早治疗
CEPAT DETEKSI, CEPAT DIAGNOSIS, CEPAT MELAPOR, CEPAT KARANTINA, CEPAT SEMBUH

75
76