Professional Documents
Culture Documents
Pekarski Kvasac
Pekarski Kvasac
Kvasac je jednoćelijski mikroorganizam i njegova ćelija se sastoji od vode, proteina, šećera, masti,
minerala i vitamina.
Poznato je-oko 600 različitih vrsta kvasca koji su raspoređeni u prirodi. Neke vrste su visoko
specijalizirane i mogu'se naći samo u određenim' staništima u određeno doba godine, dok su druge široko
rasprostranjene i mogu se izolovati iz više izvora. ~
Razlika između jednoćelijskih i višećelijskih mikroorganizama je ta da jednoćelijski imaju znatno veću
sposobnost dijeljenja, tako se i ćelija kvasca može reprodukovati vrlo brzo.
Reprodukcija se odvija pupanjem i formiranjem novih ćelija kvasca.
Pod povoljnim uslovima razmnožavanje
Proizvodni a pekarskog kvasca može biti tako da od početnih 10 mg može
4 77 nastati 150 tona u
toku sedmice.
Razmnožavanje se kontroliše pomoću 3 faktora:hrana,kiseonik i
temperatura. —
Ćelija kvasca je po veličini približno jednaka ćeliji ljudskih crvenih krvnih zrnaca i sfernog do
elipsoidnog oblika je. Zbog ovako male veličine potrebno je oko 7 milijardi ćelija da bi se dobio 1 gram
prodajnog kvasca.
Međutim dodavanje zraka u fermentacionom procesu nije jednostavno.
Proizvodnja pekarskog kvasca____
Ako je koncentracija šećera tokom fermentacije velika kvasac će proizvodi alkohol čak i kada, je kiseonik
prisutan u .dovoljnim količinama ili — suvišku. • •"
Ovaj problem se riješava postepenim dodavanjem šećera u tok fermentacije. ,
Brzina dodavanja šećera mora biti takva da kvasac potroši šećer dovoljr: brzo,tako daje koncentracija
šećera praktično uvijek nula.
Već hiljadama godina kvasac je poznat čovjeku.. Egipćani su prije 50C godine koristili kvasac i procese
fermentacije kod pravljenja hljeba, i r znajući šta uzrokuje fermentaciju, na nju su gledali kao na misteroz;
fenomen. Mali komad tijesta čuvan je nakon svakog pravljenja i koristio : naredni dan za fermentaciju
tijesta. Vremenom su 4naučnici
70
otkrili da kvasac mikroorganizam što je i dovelo
Proizvodnja do razumijevanja njegove
pekarskog kvasca
Prije 1800-tih kvasac iz prizvodnje piva se koristio, nakon separacije, i pekarski kvasac, osim ovoga
korištile su se i mljevene žitarice kao sirov ali je prinos kvasca bio mali a etanola veliki. Napredak u
proizvoc pekarskog kvasca napravljen je u Austriji, Njemačkoj i Holandiji a bic podstaknut upotrebom
kvasca donjeg vrenja umjesto kvasca gornjeg vrenja kod dobijanja piva koji nije bio pogodan za
pravljenje hljeba što je dovelo do novih načina proizvodnje pekarskog kvasca.
Oko 1780. godine u Holandiji je razvijen industrijski način proizvodnje kvasca iz raži kao sirovine. Od 1880.
do lS^O.1 godine holandski postupak se primjenjivao u svim zemljama Evrope.
Ipak prvi značajniji korak u razvoju tehnologije 'proizvodnje pekarskog kvasca je razvoj "Bečkog'procesa"
(Mautnerov postupak) od 1840. do 1850. godine. Ovaj proces zasnivao se ne samo na raži, nego je koristio
kukuruz, ječam i krompir kao sirovinu. Glavni proizvod u ovom procesu bio je alkohol, dok je kvasac bio
1
sporedni proizvod, i dobijalo se oko 12 % kvasca od 100 kg sirovine. ,
U periodu od 1880. do 1895. otkriven je takozvani zračni postupak, sa vrenjem u aerobnom uvjetima, pri
čemu se kroz kominu lagano upuhivao zrak, što je povećalo količinu kvaščevih stanica, a istovremeno
smanjilo količinu alkohola. Pronalazač je Danac EUSEBIUS BRUUN, koji je prvi osnovao fabriku
zasnovanu na ovom procesu 1881. godine. Zbog nedostatka žitarica kasnije je uveden postupak sa melasom
kao ekonomski povoljnijom sirovinom. Za razliku od melase kao sirovine, žitarice su sadržavale određenu
količinu mineralnih komponenti potrebnih za rast kvasca, tako da je prelazak na melasu kao sirovinu
donekle usložnjavao proces proizvodnje kvasca. —
Korištenjem melase kao sirovine javio se problem što se dobijala crna boja kvasca i što melasa nije imala
dovoljno promotora rasta. Novim otkrićima došlo se do zaključaka da se nedostatak nitrogena u melasi
može nadoknaditi dodavanjem amonijevih soli.
Između 191-5. - 1920. godine otkriven je istovremeno u-Danskoj (SOREN- SAKO) i u Njemačkoj (F.F.
HEYDUCKO) tzv. doljevni postupak, po kome se nije, kao ranije, u fermentor dolijevala kompletna
količina melase (uključujući i hranljive komponente) zajedno sa matičnim kvascem na početku procesa,
čime započinje značajniji napredak u proizvodnji kvasca. Na ovaj način došlo je do povećanja stepena
iskorištenja, produktivnosti, poboljšanja aktivnosti, stabilnosti i održivosti kvaščeve biomase. Postupak je
patentiran od strane DANSK GAERINGS INDUSTRI (D.G.l.) i Udruženja proizvođača špiritusa. Ovaj
proces prihvaćen je u čitavom svijetu pod nazivom “DANSKI POSTUPAK" ili “Z-POSTUPAK". Slovo-Z
simbolizira nulu, tj. koncentacija alkohola u fermentorima tokom čitavog procesa jednaka je nuli.
Posljednjih godina postupak se naziva “FED BATCH PROCESS".
Od 1930-1945 razvijeni su sistemi za aeraciju i počelo se sa korištenjem prvih vakuin filtera kao i mašina za
oblikovanje, rezanje i pakovanje. Pekarski kvasac se proizvodi odivrste Saccharomyces cerevisiae.
Naučno ime Saccharomyces odnosi se na saccharo što znači šećer i myces - gljivica, dok cerevisiae potiče
4 70 Proizvodnja pekarskog kvasca
od imena Ceres-rimske boginje poljoprivrede.
Radovi na poboljšanju stabilnosti biomase rezultirali su proizvodnjom suhog aktivnog kvasca (SAK). Prvi
pokušaji dobijanja suhog kvasca vezani su za prvu polovinu 19. vijeka kada je kvasac sušen pomoću
apsorpcionog papira ali se na razvoj komercijalnog procesa moralo čekati još Izvjesnog vrijeme. Prva
proizvodnja suhog aktivnog kvasca započela je 1918. godine u Njemačkoj, ali je usavršena u Australiji
1940, a u toku drugog svjetskog rata razvijena je u SAD. Dadas suhi aktivni kvasac dominira tržištem a
naročito gdje transport svježeg kvasca predstavlja problem.
Razvoj tehnologije, posebno tehnologije mikroprocesaora uslovljava i razvoj tehnologije kvasba kao i ostalih
industrijskih grana. —
Naučna istraživanja u biohemiji, biologiji i -genetici (metabolizam stanica kvasca, potrebe za vitaminima,
nove sorte kvasca), te opći razvoj tehnologija (npr. upotreba aparata od nehrđajućeg čelika, separatori.
kontrola i postupci reguliranja, automatizacija), doprinjeli su daljem razvoju kako SAK-a, tako i svježeg
kvasca.
13.1.
Ako se pođe od činjenice da je za razmnožavanje kvasca neophodno obezbijediti u podlozi slijedeće sastojke
(u asimilirajućem obliku):vodu, izvore ugljika i energije, spojeve nitrogena, fosfate, soli magnezija, kalija,
spojeve sumpora, mikroelemente i faktore rasta, onda se može reći da se Svaka od navedenih sirovina ima
određenu ulogu u procesu proizvodnje i mora da ispunjava odgovarajuće zahtjeve kvaliteta.
13.1.1. Melasa
melanoidina, karamelnih tvari i produkata razgradnje šećera. Za proizvodnju kvasca melasa treba biti bez
sadržaja tvari koje sprečavaju vrenje, kao što su isparljive organske kiseline, sulfitna kiselina, nitrit i tome
slično.
. Istraživanjima 1970. je utvrđeno da količina asimilirajućeg nitrogena varira između 0,15-0,35 %, računato
na masu melase, što predstavlja 15-25 % ukupnog nitrogena melase. Pri upoređivanju podataka sadržaja
ukupnog nitrogena i asimilirajućeg nitrogena, zapažena je izvjesna zakonitost (sa porastom ukupnog
nitrogena u melasi raste i procenat asimilirajućeg nitrogena u melasi):
Postoji veoma veliki broj spojeva sa ugljikom koje kvasac može asimilirati u aerobnim uvjetima. .
Na osnovu sastava melase može Se zaključiti da ona sadrži određeni dio tvar koje su neophodne za rast i
razmnožavanje kvasca (faktore rasta, mineralh« tvari i elemente u tragovima).
Poželjno je da melasa kao sirovina za proizvodnju kvasca ima standardn sastav, odnosno da ne sadrži
sastojke koji bi štetno utjecali na brzinu rast: kvasca i njegova tehnološka svojstva. Sadržaj sumpor (IV)
oksida preko 0,025 % usporava rast kvasca, a kolićin, od 0,02 % negativno utječe na kvalitet kvasca. Ova
količina sumpor (IV oksida uslovljava da kvasac ima tamnu boju, manju trajnost i slabiji fermentativnu
moć.
Slobodne isparljive kiseline u melasi se po pravilu nalaze u neznatnir količinama, tako da ne smetaju pri
proizvodnji kvasca.
Zakiseljavanjem melase u toku pripreme djelimično se hidroliziraju so isparljivih organskih kiselina, pa se u
melasi može utvrditi prisustv
4 70
mravlje, sirćetne i buteme kiseline. - Veće količine isparljivih organski
Proizvodnja pekarskog kvasca
kiselina negativno utječu na rast kvasca.
U tehnologiji kvasca smatra se da je koncentracija buterne kiseline hraftljivoj podlozi od 0,15 % kritična,
stoje adekvatno sadržaju od 0.6 1 buterne kiseline u melasi. Zapaženo je i da se različite vrste kvasca različit
ponašaju prema negativnom utjecaju buteme kiseline
Općenito, ako je sadržaj isparljivih kiselina manji od 15-20 % u ukupni
kiselosti melase, i u toku procesa dobijanja kvasca neće se smanjiti aktivno:
kvasca.
Nitriti pri koncentraciji od 0,004 °/o u hranljivoj podlozi su također veon štetni za ćelije kvasca, j^r
usporavaju rast ćelija i pupanje. Pri veći koncentracijama nitrita, ćelije kvasca izumiru, s tim da prvo izumii
pupoljci.
Mikroorganizmi koji se nalaze u melasi potiču iz repe (nisu uništeni u tol prerade šećerne repe) ili su
dospjeli u melasu u toku skladištenja. C mikroorganizmi su uglavnom posebno rezistentne sporogene
bakterije Melasa koja sadrži minimalno 76 % suhe tvari i pokazuje alkalnu neutralnu reakćiju (pH ne manji
od 6,8) može se čuvati duže vremena bez gubitaka saharoze. Pri jednomjesečnom čuvanju (skladištenju)
melase gubici saharoze iznose 0.04-0.22 % od njene mase.
Na temperaturama manjim od 10° C viskozitet može biti toliki da je nemoguć transport pumpama bez
prethodnog zagrijavanja.
13.1.2. Kvasac
Kvasac namijenjen za proizvodnju -pripada klasi funga (plijesni), rodu Sacharomyces, sa mnogo različitih
sojeva i vrsta. Ma kako se kvasci razlikovali, oni su svi jednostanična ži,va bića sa stanicama opkoljenim
opnom. Danas se Ćelije su ovalnog oblika, okružene staničnim zidom izgrađenim od glukana,
manoproteina i hitina. Citoplazmena membrana sastoji se od fosfolipiđa i proteina tipičnih za eukariotske
organizme. Unutrašnjost kvašćevih stanica ispunjena je citoplazmom sastavljenom pretežno od
bjelančevinastih tvari. Jedan dio cifoplazme su enzimi koji kataliziraju biohemijske reakcije stanične
funkcije, među kojima su i enzimi vrenja. U centru stanice nalaze se vakuole Ispunjene ćelijskim sokom, a
ostale organele smještene su više periferno. Svaka ćelija ima nukleus, gdje je smješten genetski materijal u
vidu DNK-a. ćelija kvasca ima 6000 različitih gena i 16 različitih hromozoma.
Često se u zidovima stanica kvasca nalaze male kapljice-masti (granule koje jako prelamaju svjetlost), kao. i
polisaharid glikogen (slika 3).
pređu u spore. U poređenju sa drugim organizmima kvasac ima. znatno bolje šanse za preživljavanjem u
teškim uslovima jer ne zavisi od klime ili uslova u zemljištu i može preživjeti kao spora stotinu godina.
Spore nastaju tako da se stanični sadržaj podijeli na više dijelova i svaki dio zaokruži opnom, a -stanica se
potom rasprsne i spore oslobode-Kada se spore ponovo nađu u povoljnoj sredini, one izrastu u normalne
stanice koje se dalje razmnožavaju pupanjem.
U toku djeljenja ćelije nukleus „majke“ ćelije migrira do zida ćelije kvasca, zid puca i formira se „kćerka"
ćelija koja raste i vezana je za matičnu ćeliju, a kasnije se odvaja od nje. Nakon odvajanja stanice-kćeri od
stanice-majke, na mjestu odvajanja ostaje ožiljak i na bazi broja ožiljaka može se odrediti starost stanice.
Ožiljci ometaju razmjenu tvari ćelije sa vanjskom sredinom. Sa svakim novim ožiljkom površina koja je
pokrivena njima se povećava u odnosu na površinu ćelije koja nije, metambolizam se usporava sve više i
više i dolazi do starenja. Svaki ožiljak zauzima oko 2 % površine ćelije.
Poslije određenog broja dijeljenja stanica odumire bez obzira na povoljne uvjete hranljive podloge i uzgoja.
Ćelija posjeduje i vanćelijsku vodu koja je kao omot oko ćelije vezana elektrostatskim silama i određuje
4 70 Proizvodnja pekarskog kvasca
plastičnost kvasca. Kod uklanjanja vode omot postaje tanji i tanji i na kraju puca. Ovo dovodi do loma
površinske napetosti 1 do mrvljenja ćelije. Površinska napetost se može održavati na visokom nivou čak i
kad je sloj vode veoma tanak a to se postiže dodatkom emulgatora u toku procesa filtriranja.
Na slici 4. dat je sastav komada kvasca u odnosu na sadržaj vode i suhe tvari.
Kvasac brže troši nitrogen iz amonijevth soli nego iz pojedinih aminokiselina ili iz jednostavne smješe
aminokiselina. Dobro izbalansirane količine nitrogena omogućavaju reguliranje pH u hranljivoj podlozi.
Inače amonij snifat predstavlja bijelu kristalnu so, lako topivu u vodi i sa sadržajem nitrogena oko 21 %
Kao izvor nitrogena koristi se f amonij hidrogenfosfat (NH.ihHPOi, koji je ujedno J izvor fosfata, o
čemu se mora voditi računa ‘prilikom primjene. Amonij hidrogensulfat je so koja sadrži 20-21 %
nitrogena i oko 50 % P2O5.
Asimilacija uree može se povećati dodatkom biotina. Kod njenog doziranja treba biti oprezan, jer pri
većim koncentracija oštećuje kvasac.
i
Potrebna količina nitrogena ,za proizvodnju izračunava se iz količine i hemijskog sastava kvaščevih
stanica i količine nitrogena koji kvasci mogu asimilirati iz melase. Količina nitrogena u kvaščevim
stanicama kreće se od 5-10 % na suhu tvar i ima značajnu ulogu u fermentativnoj aktivnosti i stabilnosti
kvaščevih stanica. Tako se općenito uzima da kvasci sa više nitrogena, imaju veću fermentativnu
aktivnost, ali su nestabilni, dok kvasci sa nižim sadržajem nitrogena imaju veću rezervnu količihu
ugljikohidrata i stabilniji su
Nitrogen iz ovih soli se l^.ko asimilira, ali se mora znati da amonijum sulfat ima kiseji uticaj zbog toga što
asimilacija (NPbb iona ostavlja (HSOd' anion u rastvoru. Nitrogen i mineralne soli se dodaju postepeno i
brzina njihovog dodavanja nije kritična kao kod ugljikohidrata.
Sav nitrogen se može dodati nekoliko sati prije kraja fermentacije. lAmino kiseline prisutne u melasi
kvasac asimilira, ali dodavanje amino kiselina nije ekonomično.
Ukoliko se neorganski izvor nitrogena zamjeni sa amino kiselinom, zbog njenog sadržaja C, ona se
smatra još jednim izvorom ugljika, što uitće na 1 prinos.
Amino kiseline imaju regulatorni efekat na metabolizam kvasca jer one ubrzavaju ili usporavaju proces u
zavisnosti od vrste dodane kiseline. Pozitivan efekat amino kiselina na razmnožavanje je značajan samo
za vrijeme relativno kratkog exponencijalnog perioda dodavanja hrane i razmnožavanja kvasca.
Asimilacijotn amino kiselina može se promjeniti i sastav amino kiselina u kvascu.
Kada se uzme u obzir cijena aminokiselina kao sirovina, onda i upotreba dodatnih izvora nitrogena i nije
praktična prednost.
Vcća koncentracija sirovih proteina znaći da će kvasac imati veću sposobnost klijanja ali i relativno nižu
stabilnost u toku skladištenja i transporta, tj. sadržaj proteina od 50% i veći.
Veoma mala koncentracija sirovih proteina znači malu sposobnost klijanja ali odličnu stabilnost, za udio
proteina od 43 % i manje.
Koncentracija proteina u svježem prodajnom kvascu zavisi od uslova tržišta, učestalosti dostave i klime.
Prodajni kvasac koji se proizvodi u Evropi danas, ima koncentraciju sirovih proteina od 45 - 48 % tj. neku
osrednju vrijednost kao i umjerenu sposobnost klijanja i stabilnost,
Tek kada je kvasac sposoban za razmnožavanje na visokom stupnju moguće je postići visoku koncentraciju
proteina u kvascu sa odgovarajućim dodatkom nitrogena.
Ako zbog, kotištenog metoda, kvasac ima nizak stepen razmnožavanja u toku poslijednjeg generacijskog
vremena, npr. u toku dodavanja melase sa dužom linernom fazom, kvasac neće apsorbovati nitrogen čak i
kad je stepen doziraja nitrogena visok. Stoga se koncentracija proteina kvasca smanjuje uslijed spore brzine
razmnožavanja.
Uticaj koji imaju doziranje nitrogena i koncentracija proteina na kvalitet prodajnog kvasca može se opisati
kao:
Via oka doza nitrogena dovodi do visoke koncentracije proteina; a pošto su proteini uglavnom enžimsict
tako se povećava i ukupna koncentracija enzima kvasca a samim time i intenzitet metabolizma.
Male doze nitrogena dovode do niske koncentracije proteina u kvascu a samim time i do povećanja rezervnih
ugljikohidrata. Enzimska aktivnost kvasca je niža ali je trajnost veća.
Fosfor je neophodan za biosintezu glavnih sastavnih dijelova jirotoplazme i koenzima. Ulazi u sastav
nukleinskih kiselina, nekih enzima i vitamina. Melasa ne sadrži dovoljne količine fosfornih spojeva, te je za
normalan život kvasca neophodno dodavanje fosfornih spojeva u vidu soli ili kiseline, zavisno
od sadržaja fosfora u polaznoj melasi i količine dobijeneg- kvasca. Fosfor se u podlogu dodaje u obliku
topivih fosfata, koje kvascl vrlo brzo asimiliraju. Najčešće se kao izvor fosfora koristi amonij
hidrogenfosfat (NH4)2HPC>4 ili ortofosforna kiselina H3PO4, kada je podloga melasa. Osim ovttT
pomenutih sirovina može se koristiti i kalcij dihidrogenfosfat (superfosfat) Ca(H2POđ2 + CaSCU.
Superfosfat je smjesa soli koja se dobija' iz rude fosforita. Kod nabavke superfosfata potrebno je obratiti
pažnju na sadržaj P2O5 u njemu i na metodu kojom je određen1 taj sadržaj.- Sadržaj se kreće oko 16-20 %
P2O5.
(NH4)2HP04 sadrži oko 50-% P2O5 i više od 22 % NH3. U svom sastavu ne smije da ima arsen i fluor.
4 70 Proizvodnja pekarskog kvasca
Fosfor, izražen kao P2O5, u kvascu iznosi 1,4-5,0 %, a najčešće od 1,8-3,0 % računato na suhu tvar kvasca
ili 1/3 sadržaja nitrogena. Zbog svega navedenog značajno je pravilno doziranje fosfornih spojeva. Ako je
sadržaj P2O5 u suhoj tvari kvasca ispod 2 %, smanjuje se brzina razmnožavanja kvasca, niži ne stepen
iskorištenja, manja je trajnost kvasca.
Isto važi kada postoji nedostatak nitrogena. sav dostupan fosfor se neće asimilirati čak i kad je u višku.
Elementi koji su1 bitni za proces ishrane kvasca zastupljeni su u manjim količinama, a to su kalij, sumpor i
magnezij, ali ne i kalcij.
Kalija ima dovoljno u samoj melasi, magnezija u vodi iz vodovodne mreže, a sumpor se unosi dodatkom
sulfata i sa sulfatnom kiselinom. Nedostatak magnezija nadoknađuje se dodatkom magnezij sulfata MgSCb
Magnezij sulfat (gorka so) - MgSC>4. * 7 H2O predstavlja kristalni prah lako topiv u vodi. sa najmanje 99
% MgSCU. * 7 H2O i maksimalno 0.002 % arsena. Zbirni prikaz potrebnih mineralnih soli dat je u tabeli 6.
Kada se rastvor amonijaka i amonij sulfat koriste naizmjenično postižu se dva cilja istovremeno, korekcija
pH vrijednosti u fermentoru i obezbjeđuje se potreban nitrogen.
Rastvor amonijaka privremeno povećava pH vrijednost, dok kvasac ne asimilira NH3. a amonij sulfat je
smanjuje, nakon što se NH44 ioni asimiliraju.
fabrikama, ali je neke vrste kvasca teško asimiliraju •••koristi se umjesto magnezij sulfata ako Je potrebmo
održavati nisku koncentraciju sulfata u otpadnoj vodi
Druga kombinacija je:
Vrsta Saccharomyces cerevisiae nema sposobnost da sintetizira meso-inozitol, pantotensku kiselinu i biotin.
U melasi često nema ovih faktora rasta u dovoljnim količinama pa ih je po pravilu potrebno dodavati.
Supstance poznate kao tvari rasta kvasca su vitamini B-grupe, biotin, pantoteinska kiselina i inozitol. Neki
autori u ovu skupinu uključuju i tiarnin i nikotinsku kiselinu, mada njih mogu sintetizirati mnogi sojevi
kvasca Saccharomycea cerevisiae, te nisu esencijalni.
Po pravilu je potrebno dodavati biotin, a za tu namjenu dodaju se sintetski biotin ili destiobiotin koji imaju
identičnu biološku aktivnost. Na 1 kg suhe tvari kvasca smatra se da je potrebno 0,60 mg biotina. Manjak
biotina u melasi može se nadoknaditi i dodatkom 20-25 % tršćane melase repnoj melasi. Neke
aminokiseline ili njihove smjese mogu u izvjesnom stupnju zamijeniti biotin i intenzivirati rast kvasca.
Biotin (vitamin-H), osim toga što je osnovni faktor rasta kvasca, učestvuje i u obrazovanju nukleinskih
kiselina, sintezi arninokiselina i proteina, deaminaciji aminokiselina.
Biotin je optički aktivan (D-biotin. L-biotin, DL-biotin) aliise u prirodi nalazi samo D-oblik.
L-biotin je neaktivan dok DL-biotin pokazuje oko 50 % aktivnosti.
Kao promotor rasta D-biotin se djelimično može zamjeniti sa visokom dozom aspartne kiseline, kada je oko
50 % potreba za N pokriveno ovom.amino kiselinom, u formi glicerida.
Smjesa aspartne kiseline i glicerolmonooleata može upot.punosti zamjeniti biotin.
Ova zamjena se objašnjava ulogom biotina u metabolizmu kvasca. Izgleda da, kao koenzim, biotin
učestvuje u svim karboksilatnim reakcijama.
Pantotenska kiselina je strukturalna komponenta koenziina A koji"igra važnu ulogu u cijelom
intermedijemom metabolizmu ćelije, p-alanin se 'može koristiti kao zamjena za pantotensku kiselinu u
većini kultura kvasca.
Pantotenska kiselina je optički aktivna (D.L.DL forme). D-pantotenska kiselina je jedina koja se može
pronaći u prirodi i koja ima karakteristike promotora -ras ta.
Sintetička DL-pantotenska kiselina pokazue samo 50 % aktivnosti. Nedostatak pantotenske kiseline dovodi
do nedostatka koenzima A što dovodi do smanjenja respiratorne aktivnosti u kvascu, ali to puno ne utiče na
fermentaciju.
m-inozitol izgleda da nema funkciju koenzima kao promotori rasta, on je direktna komponenta fosfolipida
koji su uključeni u stavaranje membrane ćelija. Zbog toga je potrebna veća količina m-inozitola nego drugih
promotora rasta. On je optički neaktivan, a postoji i njegov stereo-izomemi oblik poput cis-inozitola, koji je
takođe optički neaktivan, kao i D-inozitol i L-inozLtol, oba optički aktivni. Ovi izomeri ne mogu zamjeniti
m-inozitol kao promotor rasta kod kvasca. Ukoliko je količina m-inozitola premala.onda membrane plazme
i mltohondrija postaju previše propusne i zidovi ćelije sadrže povećane količine glukana i heksosamina ali
smanjene količine proteina
4 70
i fosfata. Proizvodnja pekarskog kvasca
Melasa od šećerne trske sadrži oko 6000 ppm inozitola a melasa od šećerne repe nešto više dok su potrebe
kvasca oko 2000-5000 ppm.
Kvasac se može adaptirati u slučaju nedostatka pantotenata i inozitola a djelimično adaptirati na nedostatak
tiamina. Tiamin se često dodaje u toku fermentacije da bi nadomjestio njegov nedostatak u melasi a ima
ulogu stimulansa za fermentaciju tijesta zbog čega se i dodaje.
Sadržaj tiamina u pekarskom kvascu je oko 50-150 pg/g čvrste mase.
Drugi vitamini nisu potrebni ili su već u određenim količinama sadržani u melasi.
Ukoliko se ćelija kvasca uzgaja u anaerobnim uslovima u toku nekoliko generacija, onda one razvijaju
potrebu za određenim supstancama pored ovih već pomenutih promotora rasta a to su ergosterol i oleinska
kiselina. Ergosterol i oleinska kiselina su supstance koje su sadržane u strukturama raznih intracelularnih
veznih membrana
13.2.1. Uticaj pH
Koncentracija vodikovih iona značajno utječe na razvoj kvasaca. Većina proizvodnih sojeva pekarskog
kvasca razvija se u pH području 2,5-6,5. Kod proizvodnje na podlozi od melase, optimalan pH je 4.5-5,8 i
pri ovim Vrijednostima ćelije dobro rastu i razmnožavaju se. Sem toga pri izmjeni pH sredine mijenja se i
karakter samoga vrenja, te dolazi do nastajanja nekih sporednih produkata.
Za sprečavanje bakterijske kontaminacije koristi se nešto niže pH područje od 4,0-4,5, ali tada dolazi do
jače adsorpcije obojenih tvari iz melase na površini kvasčevih stanica.
U proizvodnji pekarskog kvasca regulacija pH vrši se prema potrebi, odnosno prema generaciji uzgoja
kvaščeve biomase.
Ipak može se reći da u industrijskoj praksi proizvodnje pekarskog kvasca smatraju se optimalnim slijedeće
vrijednosti:
Diskontmuirhni-šaržni postupak
Prvi stupanj , čiste kulture počinje inokulacijom laboratorijski uzgojene kulture kvasck volumena 5 do 30
litara, i to u fermentoru volumena 100 do 500 litara.
Nakon razmnožavanja ova količina se koristi za inokulaciju u slijedećem fermentoru.
U ovom industrijskom uzgoju kvasac prolazi kroz nekoliko faza u toku propagacije:
• I faza Indukcija, metabolizam ćelija koje su na početku inokulirane u svježem supstratu je oštećen.
Broj ćelija ostaje konstantan ili se privremeno smanjuje,dok broj živih ćelija uvijek opada u ovoj fazi.
• II faza Tranzicija, također se naziva i faza ubrzanja u kojoj se ćelijski metabolizam prilagodio
uslovima ishrane i diže. se ka optimalnoj vrijednosti, broj ćelija' se postepeno povećava. Faze 1 i II
često se nazivaju odgođenim fazama.
• III faza Eksponencijalna, naziva se i logaritamska, u njoj se broj ćelija umnožava eksponencijalno a
metabolizam je optimalan.
• IV faza Linearna, dešava se samo ako se u toku eksponencijalnog razmnožavanja ćelija jedan od
nutrijenata npr. O2 bude limitirajući tj. počinje da određuje brzinu i nije dostupan u dovoljnim
količinama nego u konstantnim, linearnim količinama. Tada razmnožavanje ćelija postaje također
linerano, a ako se ne javi limitirajući nutrijent 111 faza prelazi direktno u slijedeću fazu.
• V faza Redukcija, naziva se i fazom negativnog ubrzanja u kojoj se brzina razmnožavanja, ali ne i
broj ćelija, smanjuje (reducira) zbog potrošnje jednog ili više nutrijenata ili zbog akumulacije
produkata metabolizma koji imaju toksičan uticaj.
• VI faza Stacionarna, u njoj su istovremeno razmnožavanje ćelija i autoliza u ravnoteži tj. brzine su
im približno iste. Autoliza ćelija je rezultat nedostatka nutrijenata ili intoksikacije produktima
metabolizma. Ova stacionarna faza je veoma kratka. Proizvodnja pekarskog Icuasca
• VII faza Autoliza, uslijed povećane dekompozicije ćelija broj ćelija opada.
Faze VI i VII i nisu faze razmnožavanja u pravom smislu te riječi i one su nepoželjne u tehnologiji kvasca.
Dolivni postupak
Dolivni postupak je najzastupljeniji postupak koji se koristi kod proizvodnje pekarakog kvasca u
poslijednjih 80-tak godina. Treba napomenuti da postoji više varijacija procesa proizvodnje, ali svi oni
imaju nekoliko zajedničkih faza (slika 6 i 7):
-da u čvrstom stanju dovoljno dugo zadržava dobar izgled i -da što je moguće duže zadržava dobra
fermentativna svojstva.
Sem toga, kod dobrog soja kvasca potrebno je da se sva gore navedena svojstva održavaju preko čitavog
niza generacija.
U toku čuvanja kulture kvasca često dolazi do degeneracije (starenja ćelije), koja se kasnije odražava u
proizvodnji i kvalitetu kvasca. Iz ovih razloga potrebna je stalna kontrola proizvodnih sojeva kvasca, a
Proizuadnia pekarskog kvasca ; l
4S
13.1.8 Voda
Voda koja se koristi -za- proces je kvaliteta - vode za piće. Razlikuje se procesna , industrijska i napojna
voda.
Procesna i ¡oda je sva ona koja dolazi u kontakt sa kvascem kao i voda za razrjeđenje melase i ispiranje
kvasca. Ona treba da je bakteriološki ispravna i da sadrži manje od 0.3 mg/l Fe iona. manje od 50 mg/l
nitrata, bez nltrita, manje 0.5 mg/l amonijum iona, manje 100 bakterija/l i bez E-coli bakteiiija u 100 ml. pH
vrijednosti 6.5 do 8.5
Industrijska voda se koristi ža hlađenje. Napojna voda se koristi ~u bojlerima za proizvodnju pare.
Obično da bi se obezbijedila voda potrebnog kvaliteta, voda se predhodno steriliše upotrebom hipoklorita,
klora ili ozona.
13.1.9. Zrak
Zrak korišten za proces aeracije mora, biti oslobođen svih mikroorganizama i primjesa koje mogu
nepovoljno djelovati na razvoj kvasca. Zato je neophodno provesti čišćenje zraka, kako za uklanjanje
mikroorganizama, tako i za uklanjanje svih drugih primjesa bilo čvrstih čestica ili drugih.
Korištenjem velikih količina zraka u toku fermentacije nastaće i pjena koja se mora kontrolisati hemijski ili
mehanički, a češća je hemijska kontrola. Sredstva za sprečavanje pjenjenja u procesu proizvodnje dodaju se
u cilju sniženja sadržaja pjene. Za te svrhu koriste se spojevi tipa površinsko aktivnih supstanci, kao što su
nezasićene masne kiseline. Sami agensi protiv pjenjenja nesmiju proizvoditi svoju stabilnu pjenu.
U praksi se najčešće koriste kao sredstva za suzbijanje pjenjenja: biljne i životinjske mineralne masti i
ulja, nezasićene masne kiseline (ulje suncokreta, repice, kukuruznih klica, palme, kokosa, soje i dr.).
Među navedenim sredstvima najviše se koristi oleinska kiselina (95 %, jodni broj 80-90, kiselinski broj 185-
200).
CH3-(CH2)7 -CH=CH-(CH2)7-COOH oleinska kiselina
Osim toga koriste se i različita sintetska sredstva, poput oktadekanola i polipropilen glikola.
Emulgatori
Koriste se u proizvodnji suhog aktivnog (instant) kvasca, a predstavljaju hemijske spojeve čije je osnovno
svojstvo površinska aktivnost. To svojstvo proizilazi iz intermolekularne polamosti koja je uvjetovana
prisustvom hidrofilnih i hidrofobnih skupina.
Proizuadnia pekarskog kvasca ; 4S
l
U proizvodnji kvasca koriste se najčešće: sorbitol esteri masnih kiselina (sorbitol monostearat), glicerol
esteri masnih kiselina (smjesa mono i diacilglicerola vinske i octene kiseline, kao i estera limunske
kiseline), te
drugi spojevi slične namjene.
Zato da bi zadržali svojstva i omogućili dobijanje najboljeg kvaliteta produkta neophodno je obezbijediti
optimalne uvjete kultiviranja. Te uvjete u prvom redu čine temperatura, pritisak, pH i sastav hranljive
podloge.
Pošto melasa sadrži u sebi određene koloidne nestabilne tvari koje se lako talože, kao i pjenu i
mikroorganizme koji mogu prouzrokovati anomalije u procesu, to je neophodno provesti dezinfekciju
melase. Za proizvodnju kvasca, otopina melase treba da bude bistra 1 sterilna.
Mikroflora melase je vrlo raznovrsna i čine je tri grupe mikroorganizama: bakterije, kvasci i plijesni.
Na slijedećoj slici data je shema pripreme melase po metodu ALVOTERM, prema prijedlogu firme ALFA-
LAVAL, Švajcarska.
13.3.1.1. Termička obrada melase
Jedan od najpovoljnijih načina za uklanjanje infekcija melase je termička obrada. Ona se zasniva na
zagrijavanju melase Ili otopine melase do temperature sterilizacije, održanja temperature i zatim hlađenja
Za ostvarenje ovih zahtjeva primjenjuju se različiti postupci, koji se međusobno razlikuju po parametrima
termoobrade, temperaturi i dužini sterilizacije.
U većini slučajeva melasa se predhodno razrljeđi toplom vodom na gustoću od oko 40-45°Bg (što
odgovara omjeru melasa : voda 1,5:1 do 2,5:1), čime se postiže sniženje viskoziteta melase i povećava
mogućnost taloženja — koloidnih nestabilnih tvari, ali i značajno poboljšanje efekata termičke obrade. Što
je veće razblaženje to je i: niža tei mostabilnost mikroorganizama.
Proizuadnia pekarskog kvasca ; 4S
l
Efekat sterilizacije povećava se s temperaturom. Pri temperaturi sterilizacije 70-100°C, u trajanju od 1
sata, dezinfekcija melase koja sadrži 40-50 % suhe tvari ne1 ostvaruje se u potpunosti, u njoj ostaje veća
količina mikroorganizama, među kojima je značajna količina mliječno kiselih bakterija.
Kod viših temperatura (110°C u trajanju 30 min. ili 120°C u trajanju 15 min.) količina bakterija ne
umanjuje se mnogo. Pri temperaturama sterilizacije melase 120°C i više, u životnoj sposobnosti ostaje
samo neznatna količina sporo obrazujućlh bakterija.
Potpuna sterilizacija melase postiže se pri temperaturi 130°C u trajanju 10 minuta, i na 140°C u trajanju 5
sekundi.
Ako se u toku pripreme snižava pH, efekat bistrenja se još povećava. Kod | razrjeđenja melase na gustoću
40-45°Bg, melasa se zakiseljava sulfatnom kiselinom na pH=5-5.3, a ukoliko je gustoća niža tad Je pH=3.8-
4 2. Reguliranjem kiselosti melase poboljšani su efekti bistrenja 1 sterilizacije
Proizvodni a pekarskog kvasca 4 77