13 Regulacion de la transmision sindptica: segundos mensajeros Las vias de segundo mensajero activadas por receptores metabotropicos comparten una logica molecular comin La via del AMP cielco implica a un mensajero citoplasmico polar y difusible ELIP, el diactglicerol el ge dcido araquidénico es metabolizado para producir otros segundos mensajeros ido araquidénico se a traves de la hidrdlisis de los fostolipidos La via de la tirosina cinasa utiliza receptores y cinasas: citoplasmicas Los segundos mensajeros gaseosos, el 6xida nitric el monéxido de carbono estimuilan la sintesis de GMPe Las acciones fisiologicas de los receptores ionotr6picos ¥ metabotrdpicos presentan diferencias: los segundos imensajeros pueden cerrar y abrir los canales ibnicos La proteina cinasa dependiente del AMP ciclico puede ce- rar los canales del potasio ‘Los metabolitos del dcido araquidsnico abren los mismos canales cerrados por el AMPe Las proteinas G pueden regular directamente los canales ionicos Las vias de segundos mensajeros interaccionan entre si Las fosfatasas fosfoproteinas regulan los niveles de fostorilacion Los segundos mensajeros pueden generar una transmisin si- naptica con consecuencias duraderas Resumen 05 RECEPIORES SINAPTICOS TIENEN. dos funciones Principales: el reconocimiento de transmisores es- pecificos y la activacin de efectores. El receptor Feconoce en primer lugar a un transmisor que permanece en el medio externo a la célula, y se une a él; despucs, a cconsecuencia de esta unin, el receptor movditica el po: tencial de membrana de la céluta y st estado bioguimico. Los receptores sinépticos identiticados hasta el mo: mento se pueden clasificar en dos tipos principales, segtin la manera de acoplamiento de las funciones del receptor ¥ del efector. Uno de los tipos, el niceptor iootrdpico abbre lox canales idnicos de manera directa: las tunciones recepte ray efectora de la apertura son desempenadas por rex nes diferentes de una tinica macromolécula (Fig. 13-1), Los mecanismos moleculares que subyacen ala accign, de los receptores ionotrépicos se expusieron en los Capi tulos 11 y 12, El otro tipo principal de receptor, el rcuptor metal pico, abre los canales iénicos de manera indirecta: las fur Ciones receptora y efectora de la apertura son desempe- fadas por moléculas distintas. Este tipo de receptor esti constituido por dos familias: los receptores acoplados a la proteina G y los receptores de cinasas de tirosina, Los receptores acoplades «la proteina G estan unidos a un com: ponente efector por una proteina fijadora de nuclestide guanina, o proteina G (Fig. 13-1B). Esta tamilia cont los receptores 1 y fadrenérgicos, los receptores muscari- Aicos acetilcolina (ACh), los receptores GABA, ciertos receptores glutamato y serotonina, los receptores para neuropéptids, asi como los receptores odloriteros y' la rodopsina (la proteina que reacciona frente a la luz e i ia las senales visuales). Laactivacién del componente efector de los receptores acoplacos ala proteina G requiere la participacién de va ras proteinas diferentes. Generalmente, el etector es una enzima que produce un segundo mensajero ditusible Estos segundos mensajeros, a su vez, inician una cascada bioquimica al activar la cinasa de proteinas especiticas que fostorilizan diversas proteinas celulares (en residuos de serina o treonina) 0 al movilizar tones de Ca” desde230 Pate IIL / Interace [A Apenura directa tecoptor ionotrapica! cant Lo F saci ‘Apenura Tao ‘plasms B Apenura ndvecta Recor acogado a Jansson | Cascada de segundo mensye"o 2 Receotr de la Yosina onass anaes wh Cascada de segundo ensayo Figura 13-1. Todos los receptores conocidos de neurotrans: ‘misores se pueden clasificar en dos grupos segun la manera con que se acoplan las funciones receptora y efectora. ‘A. Los receptores ionotrépicos abren directamente fos canaies 'énicos como parte de una macromolécula Unica que también forma el canal 6nico. El receptor localizado en el lado extracel: Jar y el canal nico, inckado en la membrana celular, se forman dentro de la misma proteina B. Los veceptores que abren indirecta mente los canales ionicos '50n de dos familas. 1. Receptores metabotrOpicos acoplados a proteinas que activan los canales iOnicos y otros sustratos de manera indiecta al activar una proteina unida a GTP que con fre- Ccuencia inicia una cascada de segundo mensajero. 2. Recepto- res de titosina cinasa que regulan la actividad de los canales n cos inditectamente mediante una cascada de reaccones de fostoriiacion de proteinas que se inicia con la autofostoniacion de la propia cinasa en residuos de trosina, las reservas elulares ¢ iniciar de esta manera las reaccio- res que modifican el estado bioquimico de la célula. Sin embargo, en algunos casos la propia proteina G 0 el se- gundo mensajero pueden actuar directamente sobre un canal iénico, ox clomentales entre neuronas: transmisidn sinsptica La segunda familia de receptores que abren los canales iénicos de manera indirecta corresponde a los receptores de cinass de tirosina, La regidn citoplismica de un recep tor de cinasa de tirosina es una enzima que se fosforiliza a si misma y a otras proteinas en residuos de tirosina, La fosforilacién de la regidn citoplasmica det receptor per mite que éste se una a otras proteinas provocando su ac: tivacidn; las proteinas a las que se une pueden ser otras cinasas que son capaces de actiiar sobre canales iinicos. Los receptores de cinasa de tirosina normalmente son ac tivados por hormonas, factores de crecimiento y neuro péptidos! Las vias de segundo mensajero activadas por receptores metabotrépicos comparten una logica molecular comin ~ Elniimero de sustancias conocidas que acttian como gundos mensajeros en la transmisién sindptica es mucho ‘menor que el ntimero de transmisores. Aproximadamen- te 100 sustancias actian como transmisores y cada una de ellas activa varios receptores diferentes en la superfi- cie celular. Los pocos segundos mensajeros que han sido bien caracterizados son de dos categorias, no yaseosos y gaseosos El segundo mensajero no gaseoso mejor conocido es el monofosfato de adenosina ciclico (AMPc). El trabajo de investigacién realizado sobre el AMPc ha influido gran medida en nuestra concepeién de los mecani generadores de los segundos mensajeros. Otra clase de Segundo mensajero no gaseoso se produce por la hidrali sis de los fosfolipidos en la membrana plasmatica cel lar: los inositol polifosfates y el diacilglicerol son libera- dos por la accién de la fosfolipasa C, mientras que el Scido araquidénico lo es por la de ta fosfolipasa A, EL calcio intracelular también puede actuar como segundo mensajero. Estas son las vias de segundo mensajero >, gaseoso que estudiaremos en este capitulo ‘Los segundos mensajeros gaseosos son intensamente difusibles. Los dos mejor estucliados son el Gxido nitrico (NO) y el monéxido de carbono (CO). La enzima sinteta- ss del dxido nitrico genera NO, mientras que la enzimna hhemo-oxigenasa genera CO. Estos mensajeros también se estudiacdn en este capitulo. A pesar de sus diferencias, las vias de los segundos mensajeros comparten muchas caracteristicas basicas "La mayor parte de Ins cinasas de tirsina son prteinas citplsmnica® que no tienen funcién rceptora y que ne presentan una 200 de recone tmiente de igando, apart que tampoce paseen in componente transmem ‘bana. Por tanto, estas cinasas son clastiadas como teosinas cna" rectors, A menudo se asocian a receptores acoplads ala proteina G04 eceptorestrosna cinasay, por tanto, responsen (aunque de manera tela) los neurotransmisoees y las hormonas, Aguas tirosina cinasas 0 revepioras también desempefan una funcién en los fenximenos de tans: ‘duction de sefal que se producen durante el crecimiento y el desarrolleCapitulo 13 / Regulacion de ta transmision sinapt Sistema del cAMP 231 segundos mensajeros Sistema delfosfoinosito! Sistema del acido araquidonico - as! f Histamina [eee 4 ee Fecepor ACh Facet dea rstamina |__ wee] fe Ke 4 = PSH. | ym ‘itoplasrwco al ae mas aces sara ae attain | | ee] ne | | sez | se [ck Figura 13-2, Los sistemas sinapticos de segundo mensajero identificados hasta el momento tienen un funcionamiento comin. Las vias de transcuccién de sefallustradas en este es- ‘quema siguen una secvencia de etapas comun (izquierda). Los tansmisores quimicos que acanzaf las moléculas receptoras: ten la membrana plasmatica activan una familia muy relacionadas de proteinas transductoras que, a su vez, activan enzimas efec- toras primarias. Estas enzimas producen un segundo mensajero {Que activa un efector secundanio o que acta directamente sobre Luna proteina diana fo reguladora) istema del AMP ciclico. Esta via puede ser activada por un feceptor fradrenérgico. | segundo mensajera AMPc esta pro: {ducido por Ia adenil cciasa que es activada por una proteina G ‘cuya denominacién se debe a que requiere trfosfato de quanosi ‘na (GTP) para actuar. La proteina G en el esquema se denomina (Fig. 13-2). Todos los receptores acoplacos a la proteina G estan formados por una tinica subunidad con 7 regiones caracteristicas de membrana (Fig. 13-3). La union del transmisor a estos receptores activa una proteina G ti- mérica de transduccidn. (Las proteinas G se exponen con, detalle mas adelante.) Después, la proteina G activada se lune a una enzima efectora: la adenilil ciclasa en la via del AMPe, la fosforilasa C en la via del diacilglicerol-inositol Polifosfato, y la fosforilasa A, en la via del écido araqui- donico. Cada una de estas vias de sefal inicia una serie de modificaciones en proteinas especificas del interior de la célula, mediante la generacién de segundos mensajeros que se unen a la proteina diana (0 reguladora) directa- mente o bien mediante la activacidn de una proteina cina- Sa que da origen a la fosforilacidn de la proteina diana. En. algunas vias, las proteinas G se acoplan directamente a los canales idnicos para regular su apertura. Ga fosforilacién mediada por proteina cinasas es esen- ‘ial para comprender la accidn de las vias de los segun- G, debido a que estimua a Bclasa.Algunios recoptores aciwan Ua proteina G que inhibe la ciciasa. Sistema del fosfoinositol. Esta via, actwada po" un vecepto: ‘uscarinco de aceticoline (ACh). utiza otro too 4e proveina G (G, para activar el receptor primano, fa enzima fosiowwasa (PLC). Esta enzima induce fs aparcion de un oarsja de se9un dos mensajeros, el diacigicerol (DAGI y el nosioi 14 51° sos fato Py) A su ver, el IP, moviiza Ca” Be las reservas iniemas E1DAG activa la proteina cinasa C (PKC) Sistema del dcido araquidonieo. Esta vi ‘receptor dela histamina, Una proteina G na wont el acido araquidonico, Posteriormente, el Acido ataqudone: metabolizedo en una cascada que implica a varias enzvna la Sy 12sipoxigenasa y la cicloxigenasa dos mensajeros. El AMP, el Ca** y el diacilglicerol ejer cen una gran parte de su efecto sobre las células median: te la accién de las proteina cinasas. Debio a que una Unica proteina cinasa puede causar la fosforilacién de mailtiples proteinas diana diferentes, alterando de esta ‘manera su actividad de forma llamativa, las proteina rnasas suelen provocar la amplificacién y distribuciin de las seftales La via del AMP ciclico implica a un mensajero citoplismico polar y difusible La via del AMPc es el prototipo de via intracelular de seal que utiliza un segundo mensajero hidrosoluble que inde en el citoplasma. Esta via refleja las etapas tipi cas en una via neuronal de segundo mensajero. La unién de los transmisores a los receptores interrela- cionados con la cascada del AMPc induce la activacion de una proteina G estimuladora denominada G,, que fue232 Parte Ill / interacciones elementales entre neuronas; transmisién sindptica Figura 13-3. Un receptor acoplado a la proteina G contiene siete regiones que se extienden sobre la membrana. El re- ceptor fiyadrenéraico que aparece en el esquema es estructuralmente similar a OWf0s receptores metaborrépicos acopla: dos a la proteina G, como los receptores B-adrenérgicos, ACh muscarinicos ¥ la 10 dopsina. Una caracteristica funcional im: portante es que el punto de union para ol eurotransmisor se sita en une hendidura del receptor que estd incluida en la bicape lipidica accesible desde el lado extracelular de la superficie celular. El residuo aminos: cdo acido aspartico-113 (Asp113, en azul oscuro} participa en la union. La parte del receptor que aparece en marron es la zona 2 la que se.asocia la proteina G. Los dos ‘esiduos de serina (en amarillo) son pun: tos de fosfoniacion y estan implicados en la inactivacién del receptor. (Adaptado de Frielle y cols., 1989.) identificada inicialmente por Martin Rodbell y por Al Gilman y sus colaboradores. En su estado inactivo de re- 1poso, la proteina G, esta unida normalmente a una molé- cula de GDP. Tras su activacién, la proteina G, se une a una molécula de GTP en intercambio por GDP, provo- cando la activacién de la proteina G. Mas tarde, la provo- cando G activada estimula la adenililciclasa. Esta enzi- ma, una proteina integral de membrana que se extiende 12 veces sobre la membrana plasmitica, cataliza a su vez la conversion de ATP en AMPe. En conjunto, el complejo GTP-proteina G y la subunidad catalitica de la cinasa constituyen la forma activa de la enzima ‘Cuando se asocia a la subunidad catalitica de la cicla- sa, la proteina G, también actia como una GTPasa hidro- lizando su GTP a GDP. El resultado es que la proteina G disocia de la ciclasa, inactivando la ciclasa para inte- Figura 13-4. El ciclo det AMPe. La unidn de un transmisor al receptor permite que la proteina G estimuladora (G,) portadora dde GOP se unaa una regién intracelular del receptor. Esta asocw ion determina que el GTP se intercambie con GOP, lo que pro- voca que la subunidad 2, de la G,, que ahora es portadora de GTP, se disocie de las subunidades fi. Después, la subunidad », ‘se asocia con una regién intracelular de adenvliciclasa, activando de esta manera la enzima para producir muchas moléculas de AMPe a partir de ATP. La subunidad 2,. cuando se une a le cicls sa, es una GTPasa, La hidrOlisis del GTP a GDP ya fostato inorgé: nico (P) induce la disociacion de la subunidad 2, de la ciclasa y su nueva asociacién con las subunidades ft. Entonces, la cciasa interrumpe la produceién del segundo mensajero. En algun mo- mento durante este ciclo, e! transmisor se disocia del receptor El'sistema vuelve a un estado de inactividad cuando el punto de tunién al transmisor en el receptor queda vacio, cuando las tes subunidades de la proteina G se han vuelto a asociar y cuando e! punto de unién del nucledtido guanina en ia subunidad 2 es cu pado por GDP. (Adaptado de Alberts y cols., 1994.)Capitulo 13 / Regulacidn de la t 9 Unén paa la ote G Laluson ena beaoa proves io ascocon det omblo tansmesreceptr con a sotene Gy activa de sia manera paras nercambo GTP-GDP Edespiscasent del GDP por GTP supone ave la subunded $2 ds000 del comoieo G, excorsende un unto de ung ara Ia aderslocass on i sucuncedie a sound se une octane va activa pa proce ‘muchas molecuiss de ANIBe a Pras de GTP nora subnidad provoca que sia Suburi recoore u contormactn oral Ge manta (82 $e dsc deo ocisa (que quod nati y se waoWe a ‘8008 cont complee [gaeimacin de cciasa so rete hasta que a iocicion Seitansmsor provoca que el ecaptor eco sy conlmacén orgrat @& wom) 8010 Protea G, ansmision sindptica: segundos mensajeros 233 een Membrana plastica | oP234 Parte Ill / Interacciones elementales entre neuronas: transmisién sinaptica [ seed ae Nerina p35 Dubus reglodoras 1 1 Puntos de unin dt AMP depenaene et ane ae Protana Proteina P__- Respuesta (race) otal colar Foslatasas ee potena Figura 13-5. La via de! AMPc es tipica en las vias neuronales de segundo mensajero. La adenillciclasa converte el ATP en AMPc. Cuatro moléculas de AMPc se unen a jas dos subunida des reguladoras de la proteina cinasa dependiente del AMPe, I ‘berando las dos subunidades cataliticas, que postenormente son ores para realzar la fosfonlacion de proteinas sustrato espectt ‘cas que regulan una respuesta celular. Dos tipos de enzma regu: lan esta via. Las fostodiesterasas convierten ei AMPc en AMP (que es inactivo), las fostatasas de proteina eliminan los grupos fostato de las proteinas reguladoras (sustrato, iberando fosfato ‘norganico, P rrumpir la sintesis de AMPe (Fig, 13-4). Por tanto, el re- ceptor y la ciclasa no interaccioian de manera directa sino que son acoplados por la proteina transductora, la proteina G.. La duracién de la sintesis de AMPc esta re- gulada por la actividad de GTPasa de la proteina G,. En presencia continuada de transmisor, y después de que la GTP ha sido hidrolizada, la proteina G, puede unirse a ‘un nuevo complejo transmisor-receptor en la superficie celular, activando de esta manera nuevamente la ciclasa Las proteinas G no son componentes integrates de la membrana, aunque estan asociadas con la hoja interna de la membrana plasmatica. Gilman y sus colaboradores observaron que las proteinas G estan formadas por tres subunidades:; 2, 8 y ;. La subunidad 2 esta asociada a la membrana de manera laxa, y habitualmente es el agente de acoplamiento entre los receptores y las enzimas efec- toras primarias. Por el contrario, el complejo fi esta uni- doa la membrana de manera mucho mas fuerte que la subunidad 2. Como veremos més adelante en este capi tulo, las subunidades (de las proteinas G también pue- den actuar de forma directa sobre los canales iGnicos ha identificado mas de una docena de tipos de subunida- des x. Las proteinas G con subunidades z diferentes ejer- cen acciones distintas y, por tanto, tienen denominaciones tambien distintas. Por ejemplo, el receptor adrenérgico activa la adenililciclasa al actuar sobre la proteina G, una proteina G que contiene una subunidad 2, mientras que otros receptores inhiben la ciclasa al actuar sobre las pr teinas G, que contienen una subunidad x, inhibidora Ademds, otras proteinas G activan las fosforilasa Ay y C (Fig. 13-2) y probablemente también otros muchos mec: nismos de transcripcién de seftal que todavia no han sido identificados. En comparacién con otros érganos del cuerpo, el cerebro contiene una proporcién excepcional- mente elevada de estas otras proteinas G. Las moléculas de proteina G superan en niimero a las, moléculas receptoras a las cuales se acoplan en la célula Debiclo a que un tinico receptor ligador puede activar muchas proteinas G, estas proteinas sirven para ampli car una sefal sindptica pequena (representada por una cantidad relativamente reducida de transmisor quimico y de moléculas receptoras) en el gran niimero de comple: jos ciclasa activados necesarios para catalizar la sintesis de una concentracién efectiva de AMPc en el interior de la célula. La amplificacién se intensifica todavia mas con la reaccién de la proteina cinasa, que representa el pase siguiente en la cascada del AMP ~ El principal objetivo de la accién del AMPc en la mays parte de las células es la proteina cinasa dependiente del AMPe, o PKA. Esta proteina cinasa, identificada y carac- terizada por Edward Krebs y colaboradores, es tina enzi- ma multisubunidad formada por dos subunidades regu- ladoras y dos subunidades cataliticas, En ausencia de AMP, las subunidades reguladoras se unen a las subu- nidades cataliticas y las inhiben. En presencia de AMPc, cada subunidad reguladora se une a dos moléculas de AMPs, provocando una modificacién de configuracién que causa la disociacién de las subunidades reguladoras y cataliticas (Fig. 13-5). Entonces, se liberan las subunida des cataliticas activas que transfieren el grupo ;-fostoril del ATP a los grupos hidroxilo de residuos especificos de serina y treonina en las proteinas sustrato. Las otras pro teina cinasas de serina y treonina que consideraremos en ‘este capitulo, las proteina cinasas dependientes de GMPe y dependientes de Ca /calmodulina, asi como la protei-Capi Figura 13-6. Todas las proteina cinasas estén relacionadas y reguladas de manera similar. En ausencia de un activador, lox ‘snasas son enzmaticamente mactivadas debido a que sus re giones cataliticas estén inhibidas. En lo que se refiere a las pro- teina cinasas de serina y treonina (A-D), las regiones cataliticas estan realmente cubiertas por regiones reguladoras que presen tan secuencias de aminoacidos similares a las que estan fostor ‘ades en las proteinas sustrato, Sin embargo, a diferencia de las Proteinas sustrato, no existe el residuo de Serina o de treonina al ual se deberia transferir un grupo fostotilo. Estas regiones inf bidoras. denominadas pseudosustratos. se unen por tanto a la ‘eqién cataitica, pero no se pueden tostoniar ‘A. En la proteina cinasa dependiente de! AMPc, dos subunida. des reguladoras identicas se asocian entre sien el punto A y con tas subumdades cataliticas en el punto R, Cada subunidad regula {dora también contiene dos puntos de union para el AMPc. Cuan 0 el AMPe queda fado por las regiones reguladaras de las sub uunidades cambia su configuracion y se disocia de las dos Subunidades cataliticas. Las subunidades cataliticas disociades pueden entonces fosforlar las proteinas sustrato BD En las otras proteina cinasas principales. las regiones regu ‘adoras (A) y fas regiones cataliticas (C) forman parte de la misma cadena polipeptidica. La proteina cinasa dependiente del GMiPe 5 similar a la proteina cinasa dependiente del AMPc en su se cuencia de aminoacidos y. todavia en mayor grado, en su region cataiitica. La proteina cinasa dependiente de Ca’-/calmodulina (D). a diferencia de otras cinasas, esta presente en la célula como un complejo de varias moléculas cuyas propiedades bio uimuicas son similares. En todas estas enzimas, ia union al se. ‘gundo mensajero parece desplazar {a molacula exponiendo de esta manera la regidn catalitica y activandola, E. La activacion del receptor de tirosina cinasa es diferente Las ‘egiones reguladoras son extracelulares nuentras que las rego ‘pes cataliticas son intracelulares. La fiyacion de un transmisor luna hormona 0 un factor de crecimiento en la tegién reguladora etermina que se asocien dos receptores monomsricos. Esto Induce 1a autofostoniacion del receptor en su region citoplasm:- £a Entonces. e! receptor autofosforilado provoca la fostonacion ¥ la activacion de otras moléculas, na cinasa C, presentan regiones reguladoras y cataliticas dentro del mismo polipéptido (Fig. 13-6). Ademids de inhit ir la actividad enzimatica, las subuni dades reguladoras de la PKA también pueden servir Para localizar y dirigir a las subunidlades cataliticas hacia distintos lugares en el interior de las células. Una clase de Proteinas denominada proteinas fijadoras a la cinasa A {AKAP) se une de manera especifica a wr tipo de isofor- ima de subunidad reguladora (Rj). Se considera que al- Buna AKAP localiza la PKA en las proximidades de los Canales iénicos. La localizacién de una cinasa concreta Cerca de un sustrato determinado puede incrementar la especificidad, la velocidad y la eficiencia de la seital me- diada por un segundo mensajero. La especificidad de las proteina cinasas también de- Pende de manera esencial del hecho de que las cinasag 0137 Regulacion de ta ransmisitn siniptica: segundos mensajers 236 ‘A Proteina cinasa dependiente del AMP B Proteina cass dependiente del GMP Ga A oe " © Proteina cnasa depenchente de Ca'-fealmodulins Se, tien € Prowina einasa C E Trosina casa solo pueden fosforilar proteinas en los res dluos de serina o treonina que estan contenidos en el con- texto de una secuencia de fosforilacién especitica de Roiicidos alrededor del residuo que va a ser fosforilado Por ejemplo, la fosforilacién de la PKA habitualmente re quiere una secuencia de fosforilacion de dos aminoaci dos basicos contiguos (lisina o arginina), seguida de cualquier aminodcido y de un residuo de serina o treoni- a (por ejemplo, Arg-Arg-Fen-Tre). Otros residuos pré- ximos a esta Secuencia también contribuyen a la afinidad del sustrato proteina por la cinasa En las neuronas se han identificado varios sustratos importantes para la PKA. Entre ellos se incluyen los ca- nales iGnicos abiertos mediante voltaje y mediante ligan- do, proteinas de vesiculas sindpticas, enzimas implica- das en la sintesis de transmisor y proteinas que regulan236 Parte Ill / Interacciones: Ja transcripcidn yénica, Como consecuencia de ello, la via del AMP¢ (asi como otras vias de segundo mensajero) puede producir efectos importantes sobre las propieda des electrofisiolgicas y bioquimicas de las neuronas, Consideraremos algunas de estas acciones mas adelante cen este capitulo, ELIP, el diacilglicerol y el écido araquidénico se generan a través de la hidrolisis de los fosfolipidos. Ademis de la via del AMPe, muchos segundos mensaje- ros importantes se generan a través de la hidrlisis de los fostolipidos en la hoja interna de la membrana plasmati- ca (Fig. 13-7). Esta hidrdlisis esta catalizada por dos enz mas especificas, la fosfolipasa C y la tosfolipasa A;, cada tuna de las cuales es activada por proteinas G diferentes que se acoplan en receptores distintos. Estas dos fosfoli- pasas derivan su denominacién de los enlaces éter que hidrolizan en el fosfolipido. Aunque ambas enzimas pueden actuar sobre muiltiples fosfolipidos, el fostolipi- do hidrolizado con mayor frecuencia es el fosfatidilinosi- tol 4,5-bifostato (PIP,). Generalmente, el PIP, contiene el estearato acido graso especificado hacia el esqueleto det glicerol en la primera posicidn, y el araquidonato dcido graso no saturado en la segunda posicisn: PIP, nd -o-t- OM OM La fosfolipasa C hidroliza el enlace fosfodiéster que tune el esqueleto de gliceral al grupo polar de la cabeza, dando lugar a la formacién de diacilglicerol (DAG) y de inositol 1,4,5-trisfosfato (IP). Tanto el DAG como el IP ‘son segundos mensajeros. El diacilglicerol, que es hid fobo, permanece en la membrana donde activa la protei- na cinasa C (Fig. 13-7B y Recuadro 13-1), En su forma inactiva, esta cinasa se localiza en el citoplasma. Cuando se genera el DAG, la enzima se desplaza hasta la mem- brana para formar el complejo actiyo que puede fosfori- lar muchos sustratos proteicos en la célula, tanto de membrana como citoplasmicos, La activacién de la pro- teina cinasa C requiere los fosfolipidos de membrana y a menudo también necesita niveles elevados de Ca” cito: plasmico ademas de DAG (Recuadro 13-1), ELIP,, que representa la segunda rama de la via de la fosfolipasa C, proveca la liberacion de Ca** desde su almacenamiento en la membrana interna y hacia el cito- ntales entre neuronas: transmisisn sinsptica plasma (Fig, 13-7). Este almacenamiento de membrana contiene una gran concentracién de Ca" en sui wz v po- see un tipo de canal para el Ca” en su membrana. Este canal del Ca** es una proteina de gran tamaio 4 tiene un receptor para el IP, en su superficie citoplismi- ca. La union del IP, a su receptor induce la apertura del canal de Ca™ con liberacién de Ca’ hacia el citoplasma. A su vez, el incremento en el nivel de Ca intracelular puede desencadenar muchas reacciones bioguimicas, asi como la apertura de canales idnicos activados por el cal cio en la membrana plasmatica Un aspecto importante de la biturcacién de la via del segundo mensajero que se produce por la tostolipasa C es el hecho de que los dos productos de la hidrélisis (IP, y DAG) pueden actuar de manera independiente ¥ tam bien en conjunto. Algunos receptores de transmisores in- ducen tinicamente 1a produccién de IP,, sin activar la proteina cinasa C. El calcio suele tener actividad cuando forma un com plejo con la pequefa proteina clenominada calmodulina Un ejemplo importante es la activacidn de la proteina ci nasa dependiente de Ca” /calmodulina (Fig. 13-7C). Esta enzima esta constituida por un complejo que posee mu cchas subunidades similares, de manera quie cada subuni- dad contiene regiones reguladoras ¥ cataliticas dentro de la misma cadena polipeptidica. Cada subunidad se pue de autofosforilar mediante una reaccidn intramolecular es muchos puntos de la molécula enzimitica, C hay Ca** ni calmodulina, la regisin regutactora C termi ‘se une a a porcidn catalitica de esta cinasa y la inactiva. La tunidn del complejo Ca°-calmodulina produce modifica ciones de configuracién de la molécula de cinasa que libe ran la region catalitica para que tiene su actividad. La autofosforilacién de esta enzima tiene un importante efecto funcional: convierte la enzima en una forma inde- pendiente del Ca™ que tiene actividad persistente inelu- soen ausencia de Ca”. La PKA y la PKC tambien se acti van en ausencia de un segundo mensajero, debido a lo accidn de las proteasas que degradan las regiones regula doras de estas enzimas. Las cinasas con actividad consti tutiva parecen ser importantes para iniciar las modifica ciones a largo plazo en la plasticidad sinaptica que se asocian a ciertas formas de aprendizaje y memoria. con- El Acido araquidénico es metabolizado para producit otros segundos mensajeros Los receptores que activan la fosfolipasa A, inducen la liberaci6n de Acido araquidénico a partir de la membra- ra celular (Fig. 13-8), de manera que el dcido araquidéni- co se convierte rapidamente en alguno de una familia de metabolitos activos denominados eicosmroises debido a que presentan 20 (del griego, cicosa) atomos de carbono. E1 dcido araquidénico es metabolizado por tres tipos de enzimas: 1) ciclooxigenasas, que producen prostaglandi nas y tromboxanos; 2) varias lipooxigenasas, que produ=Capitulo 13 / Regulaciin de la teansesion sinaptica: segundos mensajewss 23 A Tolostato de diacigicerotinosito! Figura 13-7. La hidrdlisis de los fosfo lipids en la membrana celular activa tres cascadas importantes de segun dos mensajeros. A. Enlavia de! nositoltipido la union de! transmisor 2 un receptor activa una pro teina G que, a su vez, activa a fosfolpasa C (PLC) Esta tosfolipasa fragmenta el fosfatidiimositol 1.4,5-bifosfato (PIP,) en dos segundos mensajeros, el inositol 1,4,5:tnsfosfato IP,) y el diaciglicerol (DAG). EI inositol 4,5-tasfostato es hidra- soluble y puede difundirse en el citoplas. ma. Aqui, se une a un receptor en el ret culo endoplasmico para liberar Ca? oe las reservas interas, B. El diaciighcerol, que es el otro sequn: do mensajero producido por la fragmen- tacion del PIP,, permanece en la mem bbrana donde activa la proteina cinasa C (PKC). Los fostolipidos de la membrana tambien son necesarios para esta activa cién. Por tanto, fa PKC sélo estd activa ° cuando sufre translocacion desde el cito: eo °° slasma a la membrana. Algunas isofor ‘mas de la PKC también requieren Ca? para su activacion C. El calcio unido a la calmodulina activa 3 proteina cinasa dependiente del cal cio/caimodulina 8 Proteina cinasa C Proteina cinasa cen diversos metabolites que se mencionaran mas ade- lante y 3) el complejo P450 que contiene hemo, que oxida el acido araquidénico asi como los metabolitos de la ci- clooxigenasa y la lipooxigenasa. Las vias de la ciclooxigenasa y la lipooigenasa, se han estudiado intensamente en el tejido nervioso. Los meta- bolitos del acido araquidénico se caracterizaron inicial- mente en otros tejidos debido a sus potentes acciones en 'a inflamacién, la lesién y el control del tono muscular liso en los vasos sanguineos y el pulmon. En el cerebro, la sintesis de prostaglandinas y tromboxanos aumenta de manera llamativa mediante estimulos inespecificos como ‘endeplaseo : | el choque electroconvulsivo, el traumatismo 0 la isque- mia cerebral aguda (pérdida localizada de sangre). Mu: cchas de las acciones de las prostaglandinas estan media: das por una familia de receptores prostaglandinicos relacionados con la proteina G que estan presentes en la membrana plasmatica. Estos receptores, que contienen 7 segmentos transmembranosos, pueden activar o inhibir la adenililsintetasa, o bien activar la fostolipasa C Las lipooxigenasas introduicen una molécula de orig no en la molécula de dcido araquidénico, dando como resultado acido hidroperoxieicosatetraenoico (HPETE). La despolarizacion de cortes cerebrales con concentra:238, entales & Parte IL / Interacciones ¢ Recuadro 13-1, Isoformas de la proteina cinasa C Existen al menes nieve isoformas de la protwina cinasa C (PKC) ¥ todas ellas se han encontrado en el teido nervioso, Mas que poscer diferentes protvinas como elementos eguladores yc fiticos, cada encima contiene regiones reguladoras y cataliticas ‘ica cadena polipeptidica continua (wéase la Fig. 1360), ito se han encontrado das interesantes dife Hasta el mom renicias funcionales ente estas isoformas. Las denominadas for- mas mayores (2 fy Br ¥ 2) pees “aleo yon activadas por los iones CaP” junto con el iacilice- fal. Las formas menores (p. «3, 2) earecen de In eegion de fjacibn de cali y, por tanto, su actividad es independiente del {ia segunda diferencia interesante es que, de las formas rmayores solo la PRC es ativada por coneentraciones bajas de sieido araquidnico, un cide graso de membrana, mientras que tosas las isoformias responden al diacigliceroly alos ésteres de dle fjacion de forbol (Hoxinas © les que fijan la PR y tacifitan et erect 19 de tumores) Adeniis, todas las isoformas de la PKC conta sensible a la protedlisis y que se sitia entre las re dora y-cataitica de la enzima, La elevacion de fos niveles cio: pplismicas de Ca’ asociada a la activacion profongada de fa PKC puede provocar la activacidn de peoteasas que fragmentan la cinasa en este punto. Esta libero una forma de PKC denomi fnada PKM que es constitutivamente activa dlebido a gue carece ela regidn reguladora. Una PKC ¢ quecarece de region regula dora se puede sintetizar durante la induc ele la postenciacidn 4 largo plazo en las neuronas del hipoca nes regula ipo, Se considera qu Aeceptor . Bioms0 se ¢bromotenacio —7 edo ods noaincog sreticn = Sa aiwooegnain “=< (Clonegensss f =~ ye A prsneawriiee, Figura 13-8. El acido araquidonico se libera cuando es acti vada una fosfolipasa por un receptor de histamina. Las sub: nidades fy de la proteina G actwvan la fosfolipasa A, (PLA,) que hideolza el fosfatdiinositol PD en la membrana plasmatica. Esto ‘enaima puede set inhibida mediante algilacién con bromuro de ‘-bromofenacilo. Una ver liberado, el dcido araquidonico es me: tabolizado a través de vanas vas. ties de las cuales aparecen en. el esquema Las vias de la 12. y de la Scipooxigenasa producen ‘anos metabolites activos. Las lipooxigenasas son inhibidas por € 4cido nordihndroguaiarético (NDGA), La via de la ciclooxgena $a produce prostaglandinas y tromboxanos. Esta enzima es inh bida por la indometacina, el Acido acettsaliciica y otros antuntla ‘matorios no esteroideos las PRM persistentes profongan las modlficaciones en la ddad sinaprica que pueden contribuir a ce dlizaye y memoria ciones elevadas de iones K” extracelulares, glutamato 0 Nemetil-p-aspartato (NMDA) incrementa ef grain mecli- da la actividad de la 12-lipooxigenasa, Se ha demostrado que el 12-HPETE y algunos de sus metabolitos regulan los canales idnices en sinapsis especificas. El écido araquidénico y sus metabolitos son muy lipo- solubles y se difunden fécilmente a través de las mem- branas. Pueden estar activos en el interior de la etula en la que son producidas y también en las células adyacen- tes, como [a neurona presinaptica. Por tanto, estas sus- tancias pueden actuar como met celulares (Fig, 13-9). Wsajeros sinpticos trans La via de ta y cinasas citoplasmicas El receptor de las tirosina cinasa tes pep- tidos como el factor de crecimiento epidérmico (EGP), el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), et factom de crecimiento nervioso (NGF), el factor de crecimiens derivado del cerebro (BDGF) y la insulins, res difieren de los receptores acoplados a la prote en dos aspects. En primer lugar, se extienden sobre la ‘membrana una sola vez. En segunclo lugar, su regién ci- toplismica contiene una actividad de proteina cinasa que fosforila las proteinas en residuos de tirosina (véase la Fig, 13-1B). De la misma manera que las proteina ci- nasas serina-treonina descritas previamente en este cap tulo, las tirosina cinasas también regulan la funcién de las proteinas neuronales que fostorilan. Los sustratos de Ia tirosina cinasa a menudo pertenecen a una clase espe- cial de proteinas que parecen estar dedicadas a la pro- duccién de modificaciones a largo plazo en la funcion neuronal ‘Ademas de la regién que se extiende sobre la membra~ tna y de la regién de cinasa citoplismica, los receptores de la tirosina cinasa presentan una regién de unidn exCapitulo 13 / Regulacién de ta transmisién sinsptia segundos men ‘A iberacion del ransmisor quimico © qo veosoen ® ®@ 8 Reaccion enamatica © Senaizacen tanscelular a 7 Receptor Engrs efector eerara 7 |= Paso on mensae retogiodo Espn Espa Reghio con permeated ostenaca aovacente domembrare Figura 13-9. Hay indicios de sefales transcelulares desde la neurona postsindptica a la neurona presinaptica (transmi- sion retrogradal y entre las células postsinapticas. Hasta hace poco, Se consideraba que la transmisin sindptica se produ- Cia solo en una dieccién, desde la neurona presinaptica hasta la Célula postsinaptica. Una terminal presinapiica libera un neuro- {ransmisor on la sinapsis y el transmisor reacciona con un recep- tor acoplado a la proteina G y localizado en una espina dendritica ostsinaotica (A). El receptor activa una enzima que produce un tracelular para un péptido ligando. Al unirse a tn ligan- do, una proteina receptora de tirosina cinasa monoméri- a se asocia a otra para formar un dimero. La dimeriza- cin induce la activacion de la cinasa intracelular. Cada mondmero fosforila su contrapartida en un residuo de tirosina. Mas tarde, esta fosforilacién activa todavia mas la cinasa, de manera que adquiere capacidad para fosfo- rilar otras proteinas del citoplasma. Laaccién mejor caracterizada del receptor de la tirosi- ‘na cinasa es la iniciacién de una cascada de reacciones que implica a varias proteinas adaptadoras y proteina ci- asa, ¥ que en tiltima instancia produce cambios en la transcripcién genética, Las proteinas adaptadoras sirven ara elaborar un complejo de sefalizacion multiprotei- nna, Poseen una region (SH2) que se une a regiones de receptores activados de tirosina cinasa que contienen los residuos fosfotirosina, y una segunda regién (SH3) que se une a regiones ricas en prolina de la proteina efectora, acoplando de esta manera el receptor a la funcién efecto. ra. Se considera que estas acciones relativamente lentas facilitan ta supervivencia neuronal y regulan la diferen- iacion y el desarrollo de las neuronas. Sin embargo, re- _Disminucin LentaGegundos AMP cco (1 Regulaion al cierre de los canales corriente del ‘0 minutos) ‘otros segundos mensajeros) Potencial postsindptico excitador EL.GMPe actia directamente sobre canales iénicos es: pecificos en el segmento externo de los bastones de la ‘etina, una importante funcion reguladora que se descr be en detalle en el Capitulo 26. La proteina cinasa depen- diente del GMP¢ difiere de la proteina cinasa dependien- te del AMPc en que es un polipéptido tinico que contiene regiones reguladoras (de unién a GMPc) y cataliticas. Como ya hemos visto, estas regiones son similares a las, de otras proteina cinasas con funcién parecida, especial- mente las responsables de la catalisis. Debido a las simili- tudes entre las proteina cinasas dependientes del AMPc, del GMPc y de Ca™ /calmodulina, todos estos segundos ‘mensajeros enzimaticos parecen estar relacionados con una enzima ancestral, Las maximas cantidades de fosforilacién de proteinas dependiente del GMPe se producen en las células de Purkinje del cerebelo, que son neuronas grandes con abundantes dendritas ramificadas, En estas neuronas, la cascada del GMPe contribuye a una depresion a largo plazo de la transmision sinaptica (LTD), una forma de plasticidad sindptica que puede estar en la base de cier- tas formas de aprendizaje motor, Las acciones fisiologicas de los receptores ionotrdpicos y metabotrépicos presentan diferencias: los segundos mensajeros pueden cerrar y abrir los canales iGnicos Las diferencias estructurales entre los receptores meta- botropicos e ionotropicos se reflejan,en sus funciones fi- siologicas (Cuadro 13-1). Por ejemplo, los neurobidlogos suelen clasificar las acciones de los transmisores sobre los receptores como rapidas o lentas, una distincién que se refiere tanto a la velocidad de inicio como a la dura: cion del efecto postsinaptico. La apertura directa de los canales iGnicos a través de los receptores ionotrpicos suele ser rapida, del orden de milisegundos, debido a que implica la modificacién de fa configuracién de una sola macromolécula. Por el contrario, la apertura indirec> ta de los canales iénicas a través de los receptores meta: botrépicos tiene un inicio mas lento (decenas de milise gundos a segundos) y una duracién mayor (segundos a minutos) debido a que implica una cascada de r nes, cada una de las cuales lleva su tiempo, Una segunda diferencia funcional impoctante se retiere a las acciones fisiolégicas de las das clases de receptores, Los canales abiertos mediante ligando acttian como con- mutadores simples de encendido-apagado. Su tarea principal es excitar una neurona para iniciar un potencial de accién o bien inhibir la neurona para que no se pueda excitar ni generar un potencial de acciény. Como estos ca: nales sélo se abren cuando se unen a un transmiisor dis- ponible en la hendidura sinaptica, normalmente se loca lizan en la membrana postsindptica. Los canales que se abren mediante ligando no participan en el establec miento del potencial de reposo de una célula ni en la ge neracién y conduccién de un potencial de accién Por el contrario, los receptores metabotrdpicos, en vir~ tud de su capacidad para reclutar segundos mensajeros intracelulares de difusion libre, pueden actuar sobre ca~ nales que se localizan por todo el soma celular, en las dendritas, en los axones, e incluso en las terminales pre- indpticas y en los conos de crecimiento. Como conse- cuencia de ello, diversos tipos de canales estan influidos por estos receptores de accién indirecta, como los canales ‘en reposo, canales abiertos mediante voltaje que generan el potencial de accién y proporcionan la entrada de Ca” para la liberacién de neurotransmisores, v-canales abier~ tos mediante ligando. Una tercera diferencia importante es que las acciones sinapticas metabotrépicas no solo pueden incrementar la apertura de canales sino que tam- bien pueden disminuir la apertura de los mismos En si mismas, las acciones sindpticas lentas de los re- ceptores metabotropicos normalmente sen insuficientes para que la célula se excite y genere un potencial de ac- ion. En consecuencia, normaimente no median en las conductas rapidas, tal y como hacen los canales abiertosCapitulo 13./ Regulacion de Ia transmisién sinsptica: segundos mensajerss 24) A Regulacin presinapica a000, Potancal possraotco Conta Te Figura 13-10. Las acciones sinapticas reguladoras que im: plican a segundos mensajeros se ejercen en tres puntos. A. La accion sinapuica em las terminales presindpticas puede ac- tivar segundos mensajeros que regulan los canales presinapt- cos k’ y Ca’, reguiando de esta manera la liberacion de trans S0¥ y ei tamaro del potencial pastsinaptico B. La.accién sindptica en la membrana postsinaptica puede acti var segundos mensajeros que alteran el tamario de los potencia- mediante ligando. Sin embargo, pueden influir de ma- era importante en las propiedades electrofisiolégicas de una célula, como las modificaciones en el potencial de reposo, la resistencia de entrada, las constantes de longitud y tiempo, el potencial liminar, la duracién del Potencial de accién y las caracteristicas de excitacién re- Petitiva, Por ello, las acciones de los receptores metabo- trépicos se suelen denominar acciones sindpticus regulado- ras. Podemos distinguir tres grandes clases de acciones népticas reguladoras seguin el punto de accién en una neurona y segtin la funcién normal del canal que es regu- lado (Fig, 13-10): 1. Regulacién de la liberacién del transmisor median: te acciones sabre los canales en las terminales presi- napticas; 2 Regulaci6n de los potenciales sinapticos répidos ‘merced a 1a regulacion de canales abiertos median- te transmisor; 8 Regulacion postsinaptica Potoncial postsnapico ieee atm Ses Regulacion en ef cuerpo (somal celular Potancat do acs. AA les postsinapticos rapidos mediante la regulacion de receotores, ‘onotrépicos C. Los segundos mensajeros pueden alterar la funcion de los canales de reposo y de apertura mediante voltaje en 8! cuerpo Celular, modificando de esta manera diversas provadades elec: tnicas como el umbral, las constantes de espacio y tiempo. y 1a uracion del potencial de accian. 3. Regulacién de ta excitabilictad elgctrica y de las pro- piedades de excitacién neuronal merced a la regula cidn de canales en reposo y de canales abiertos m diante voltaje en el cuerpo celular La distincién entre las acciones directas e indirectas de los transmisores queda ilustrada elegantemente por la transmisin sindptica colinérgica en las neuronas de los ganglios auténomos. La estimulacidn del nervio pre: ‘ndptico libera ACh, que produce un potencial postsinip- tico excitador rapido (PPSE) en la neurona postsinaptica al unirse a receptores ACh nicatinicos ionotrapicos ¥ a tivarlos. Este PPSE rapido se contintia con un PPSE lento que requiere 100 ms para desarrollarse pero que después. dura varios segundos (Fig. 13-11). ELPPSE lento se debe a la estimulacién por la ACh de los receptores ACH mus: carinicos metabotrpicos El receptor ACh muscarinico es uno de los dos tipos basicas de receptor para la ACh, siendo el otro el recep- tor ACh nicotinico, Los receptores ACh nicotinicos de las242 Parte Ill / Interacciones elementales entre neuronas [A Transmision sinaptica rapids y lenta prewnioca = Penoentcs Potencal de PPSE tapdo Prt mo eee al eee Aas metabo opice ae: sa B Efecto dela muscarina sobre la comente M Mascara na i aa a ¥ © El efecto ant-acomadacion de ia inhibicion de la covente M Actes Durant et PPSE eo som PSE edo PPSEento Figura 13/11. La transmisién sinéptica répida y lente se pro- duce en las mismas neuronas ganglionares aut6nomas. ‘A. La liberacion de ACh hace una neurona postsinaptica produ: coun PPSE rapido debido a la activacion de receptores ACh iono- {wopicos {nicotinicos!, y un PPSE lento debido a la activacion de receptores ACh acopladas a la proteina G (muscarinicos). Ei se- ‘gundo mensajero implicado en esta Uitima accion no ha sido denuficado todavia B. Los reqistros de voltaje mediante pinza indican que la ACh disminuye la magnitud de una corriente de K* de activaci6n lenta ¥ con apertura mediante vottaje, transportada a través det canal de tipo M. Los registros muestran corriente de membrana ()) ‘en respuesta alos pulsos de voltae de despolarizacién. La mem- brana se sometio a un incremiento progresivo desde el potencial de base (V) hasta el potencial de prueba (V) durante 1 segundo neuronas son muy similares a los del miisculo, que se estudiaron en el Capitulo 11; abren el canal iénico de ma- nera directa. Los receptores ACh muscarinicos son miembros de la familia de receptores acoplados a la pro- teina G. David Brown y Paul Adams observaron que esta accidn de la ACh en los ganglios auténomos se debia a tuna disminucién de la corriente de K* que contribuye al establecimiento del potencial de-reposo. Esta corriente es transportada por un canal de K* de activacién lenta y sensible al voltaje denominado canal K* de tipo M (por- ‘que es sensible a la muscarina) (Fig, 13-11B). También se diferencia de otros canales del K* con rectificaci6n retar- dada en su menor tiempo de activacién; los canales del K* de tipo M requieren tras la despolarizacién varios cientos de milisegundos para su apertura Las corrientés se registraron en condiciones de control {izquier dal y 18 la aplicacion de muscarina (derecha). La muscanna pro duce una disminucidn en la corriente de salida del K* para el po- tencial de base al certar los canales K" de tipo M que estan abiertos en reposo (se puede observar el desplazamiento en la cortiente basal). Ademas, el cierre de los canales K" de tipo M ‘disminuye la magnitud de la corriente de salida de activacién len: ta en respuesta a la despolarizacién progreswve C. La activacion lenta dependiente del voltaje de los canales de tipo M faciita normalmente el que la membrana permanezca ‘cerca-de su potencial de repos durante los estimulos prolongs dos de despolanizacion. Cuando el canal de tipo M se cierra du rante el PPSE lento, la membrane inicia una serie de potenciales de accién en respuesta a un pulso de corriente prolongado. ¥ va no presenta acomodacion. co Asi como el PPSE rapido es generado por la apertura de los canales que conducen el Na” y el K*, el PPSE lento se genera por el cierre de los canales de K* de tipo M Cuando se cierran los canates de tipo M disminuye la cantidad de K* que sale de la célula. En consecuencia, la pequefia entrada continua de Na’ a través de los canales ‘en reposo origina una corriente neta de entrada que des polariza la membrana hasta un nuevo potencial. (Hasta qué punto se despolariza la membrana? La despolariza~ cién de la membrana hasta acercarse al potencial de re- poso tiene dos efectos principales: disminuye la fuerza conductora de entrada sobre el Na’ e incrementa la fuer za conductora de salida sobre el K*. Por tanto, la mem- brana se despolariza hasta que la disminucién en la con~ ductancia del K*, que se debe al cierre de los canales deCapitulo 13./ Regulacion de la transmisién siniptica: segundos mensajeros 243, tipo M, es equilibrada por ef aumento en la fuerza con ductora de salida sobre el K* y por la disminuci6n en la fuerza conductora de entrada sobre el Na’. Para el nuevo, potencial de reposo, la corriente de salida del K* y la co: triente de entrada del Na’ quedan de nuevo equilibra das. Esta accidn sinéptica reguladora que implica un cierre de canales contrasta con las acciones de los receptores ionotrdpicos.en las que el transmisor siempre incrementa laapertura de canales. {Cudles son las propiedades espe- ciales de los PSE lentos con disminucidn de la conduc tancia? Una caracteristica importante es que la disminu- cidin de la conductancia en reposo debida al cierre de los canales de tipo M no séto incrementa la excitabilidad ce. lular al causar una despolarizacién sino que también dis. minuye la corriente necesaria para despolarizar una cé- lula en cierto grado. Teniendo en cuenta la ley de Ohm (AV = Al/g,), siempre que la conductancia en reposo (¢,) disminuye, es necesaria una corriente excitadora menor para despolarizar una célula hasta su umbral. La dist nucién de la corriente de salida en ciertos casos puede tener otras consecuencias importantes, como facilitar la prolongacién del potencial de accién (véase més adelan- te) Ladlisminucidn de la corriente de salida del K* a través de los canales de tipo M también tiene efectos importan- tes sobre la acomodaciGn de las neuronas a los estimulos prolongades de despolarizacién (Fig. 13-110). En res- puesta a un estimulo excitador prolongado que se site inmediatamente por encima del umbral, una neurona sanglionar inicia rpidamente uno o dos potenciales de accion y despues se acomoda 0 adapta al estimulo incre- mentado y deja de excitarse. Sin embargo, cuando la mis- ma célula recibe un estimulo prolongado durante el PPSE lento mediado por los canales de K” de tipo M, el cierre de los canales de K’ de tipo M permite a la célula iniciar una serie continua de impulsos (en lo que se de- ‘omina anti-acomodacién). Como ilustra esta regulacién por la ACh, los canales del K" de tipo M hacen algo mas que facilitar el estableci- ‘miento del potencial de reposo; ademas, controlan la ex- citabilidad, En ausencia de ACh, la apertura de tos canales de tipo M aumenta en respuesta a pequefias despolariza- = y 6- del re- ceptor ACh nicotinico. La PKC causa la fosforilacion de las subunidades % y 0-, y la tirosina cinasa fosforila las subunidades yy 6-. En conjunto, tres ¢inasas diferen- tes fosforilan el receptor ACh en siete puntos distintos, todos los cuales se localizan en el asa citoplismica princi- pal de cada subunidad. No todas estas fosforilaciones tienen consecuencias funcionales conocidas, pero la fos- forilacién dependiente del AMPe de las subunidades ; 6, asi como la fosforjlacién inducida por la tirosina, in- crementan la velocidad con la que se desensibiliza el re- ceptor en respuesta a la ACh. Otros tipos de interferencia estan relacionados con ac- ciones reguladoras antagonistas en las que una via se ‘opone 0 anutla a otra via diferente. El ejemplo clisico de regulacién antagonista es la accién de los transmisores que activan la proteina G, y que, por tanto, inhiben la produccién de AMPc en respuesta a los transmisores que acttian a través de G,, Nuestro geupo de investigacién ya ha encontrado un segundo tipo de regulacién antagon ten el cual la apertura del canal K* de tipo S esta facili- tada por la FMRFamida (actuando a través de la via de la 12-lipooxigenasa) y dificultada por la serotonina (ac tuando a través del AMPc). A continuacién, veremos un tercer tipo de interferencia antagonista que implica la re- gulacién de la desfosforilacién proteica por el segundo ‘mensajero Ca" Las fosfatasas fosfoproteicas regulan los niveles de fosforilacion Las acciones sindpticas mediadas por la fosforilacién son finalizadas por enzimas denominadas fostatasas fosto- Proteicas, que eliminan et grupo fosfato y generan de ‘sta manera fosfato inorginico (Fig, 13-17). Una clase de fosfatasas, las fosfatasas serina-treonina desfosforilan Proteinas en residuos de serina 0 treonina y, por tanto, Puecen corregir las acciones de la PKA, la PKC y la Ca**/calmodulina cinasa. Una segunda clase dle tostata- Won ale Ia transmision sindptica, segundos menswier’s 249) Fostogataa Totnes Figura 13-17. Las fostatasas fosfoproteicas interrumpen las acciones de las proteina cinasas. Las diveccione's divacta ein versa de la fostonlacin estan controladas por protelna cinasos y or fostatasas fosfoprotercas, respectvamente La intensidad y la duracion de la tosforlacion se pueden controlar mediante la snhibicion de la actividad de la fostatasa a traves de una protena ‘denominada inhibidor 1. La fosfoniacion del inhibdo: | or ia pro. tzina cinasa dependiente del AMPc (PKA) reduce la actwvidad de la fostatasa 1 fosfoproteica, La imtensidad de is fostoniacion de! ‘nhibidor-1 esté controlada por la calcineurina, una tostat vada por Ca" que desfosforia et ihibdor 1 en pres: y.de calmodulina. Ei calcio puede entrar en ia céluis m activacion del receptor glutamato de iso NMDA. (Mod ficaso de Halpain y cols. 1990) 525, las fosfatasas proteicas fosfotirosina, destosforilian proteinas en residuos de tirosina, Las acciones de los neurotransmisores se consideraron inicialmente centradas en la activacidn de las proteina cinasas, mientras que las fosfoproteinas fostatasas se consideraban enzimas domésticas que no estaban some- tidas a regulacién. Sin embargo, ahora sabemos que va- ras fosfatasas estén muy reguladas. Una de las principa- les fosfatasas serina-treonina celulares, la. tostatasa-1, esta bajo el control de una proteina reguladora denomi- nada inhibidor | (Fig, 13-17). BI inhibidor 1 se une a la fostatasa 1 e inhibe su actividad. Sin embargo, esta ac- iGn se produce solamente después de que el inhibidor L ha sido fosforilado por la PKA. Por tanto, un incremento en el AMPe aumenta la tasa directa de fostorilacién debi- do.a Ia activacion de la PKA y disminuve la tasa inversa de desfosforilacion a causa de la inhibicicin de la activi- dad de la fosfatasa 1 (que se debe a la fosforilacién de! inhibidor 1). Este constituye un mecanismo de retroali- mentacidn positiva para el control de los niveles de fos- forilacién en las e¢lulas. Otro paso regulador lo proporciona la calcineurin ‘otra fosfatasa serina-treonina. Cuando es activada por el250 Receptor Tansmisor Parte Ill / Interacciones elementales entre neuronas: transmisién s Figura 13-18, Un tnico transmisor qui mico puede ejercer efectos acorto olar- — — {go plazo sobre un canal iénico. En este ‘ejemplo, una nica exposicion al trans Sor activa el sistema de segundo mensaje fo AMPc que, a Su vez, activa fa proteina ‘cinasa dependiente del AMPc (PKA), La ci ‘nasa fosforia un canal K* para producrr un potencial sinaptico que modifica la excitab fidad neuronal durante minutos, Al repetir la activacién, el vansmisor —actuando 2 través de la PKA— induce la fosforilacion de una 0 mas proteinas reguladoras trans- ctipcionales que activan la expresi6n gén cca. La activacién génica origina una prote ‘na que produce un cierre mas preciso del ‘canal, asi como modificaciones en la exc- tabiidad neuronal que duran dias 0 sema- nas. complejo Ca?*/calmodulina, la calcineurina desfosforila el inhibidor 1 (haciendo que permanezca inactivo). Este complejo sistema permite que se establezcan potentes in- teracciones entre la entrada de Ca’ y la fosforilacién pro- teica. En las neuronas dopaminérgicas de los ganglios basales, la dopamina (que actia a través de receptores metabotrépicos D1) activa la PKA que, a su vez, fosforila el inhibidor 1 (que en estas células se denomina DARPP- 32). La inhibicidn resultante de la fosfatasa 1 induce una potenciacidn global de la fosforilacién en la neurona. En estas células, el inhibidor 1 puede quedar desfosforilado ‘cuando la calcineurina es activada por la entrada de Ca a través de receptores glutamato de tipo NMDA, estimu- lando la actividad de la fosfatasa. Como veremos mas adelante (Capitulo 63), se conside- ra que existe una cascada similar subyacente a la depre- sin mantenida de la transmisién sindptica en el hipo- ge e./ ATP Ttansenpoon ‘campo. En este caso, la entrada de Ca” a través de los receptores NMDA activa la calcineurina; esto induce la desfosforilacién del inhibidor 1 incrementando la activi- dad de la fosfatasa 1 y disminuyendo la fosforilacién en las neuronas del hipocampo. Los segundos mensajeros pueden generar una transmisién sindptica con consecuencias duraderas Hasta el momento, hemos considerado dos tipos de ac- ciones sinapticas mediadas por procesos quimicos. En uno de ellos, los transmisores actuan directamente sobre los canales del receptor postsinaptico y, de esta manera, ¢jercen acciones sindpticas directas y rapidas que duranCapitaio 13./ Rey milisegundos. En el otro, los transmisores actian a tra- vis de segundos mensajeros para modificar canales iéni- 0s y otras proteinas sustrato ejerciendo acciones sinapti cas directas que duran segundos o minutos. En un tercer tipo de accisn sinaptica, los transmisores actian a través de segundos mensajeros para prodiucit la fosforilacién de proteinas transcripcionales y, por tanto, alteran la expresion génica de la eélula (Fig. 13-18). De ¢sta manera, las proteina cinasas activadas por segundos mensajeros no solo pueden modificar las proteinas pree- xistentes sino que también pueden inducir la sintesis de nuevas proteinas al alterar la expresién génica. Este ter- cer tipo de accién sindptica puede causar otras modifica ciones que duran dias 0 incluso mas tiempo. Estas modi- ficaciones de larga duracién son probablemente importantes para el desarrollo neuronal y para la memo= ria a largo plazo. Finalmente, los transmisores pueden actuar a través de segundos mensajeros para estimular la sintesis local dle proteinas en las espinas dendriticas de neuronas post- Apticas. Este parece ser un mecanismo que contribuye alas modificaciones sinspticas especificas a largo plazo. Resumen? Las sefales entre las neuronas se producen a través de las interacciones de los neurotransmisores con tres clases distintas de receptores. A su vez, estos receptores tienen ‘efectos en la célula postsinaptica que muestran grandes diferencias en su mecanismo bioquimico, en la duracion, dle su accidn y en su funcidn fisiol6gica. La activacion de los receptores ionotrépicos abre directamente un canal énico que forma parte de la macromolécula del receptor. Estos canales abiertos mediante el transmisor producen el tipo mas rapido y mas breve de accion sinaptica, con tuna duracién de sélo unos pocos milisegundos en pro- ‘medio. Esta répida transmisiGn sindptica gobierna la ma- yor parte de las acciones motoras y del procesamiento Perceptivo en el sistema nervioso, Los efectos duraderos de los transmisores estan me- diados por la activacién de los receptores acoplados a la proteina G y de los receptores de tirosina cinasa, Los re- ceptores acoplados a la proteina G son proteinas con sie= te segmentos transmembranosos que pertenecen a una Bran superfamilia genética. Estos receptores actuian a tra~ V5 de la unidn a proteinas fijadoras del nuclestido gua- hina (proteinas G), que activan cascadas de segundos mensajeros o alteran directamente la actividad del canal 'Gnico. Los segundos mensajeros mas importantes son el AMP ciclico y los productos de la hidrdlisis de los fosfoli- Pidos: IP,, diacilglicerol y acido araquidénico. Muchas acciones de los segundos mensajeros depen- den de la activacién de proteina cinasas, que inducen 'a fosforilacion de diversas proteinas celulares como ca- ales iénicos, modificando su estado funcional. Estas ac- acion de la ysmision sindiptica: segundos mensajeros 25) clones de los segundos mensajeros suelen durac entre se gundos y minutos. Por tanto, no yobieman conductas 13 idas sino que sirven para regular la potencia y eficacia dela transmision sinaptica répida al regular la liberacion de transmisores, la sensibilidad de los receptotes iano tr6picos o la excitabilidad eléctrica de la célula postsi naptica Estas acciones estin implicadas en los estados emo: cionales, en el estado de animo, en el despertar. y en Giertas formas sencillas de aprendizaje y memoria. Las acciones de los segundos mensajeros no slo abren los canales iSnicos, de la misma manera que los receptores abiertos mediante transmisor, sino que también pueden cerrar canales que normalmente estan abiertos en ausen: de transmisor, disminuyendo la conductancia de membrana, La forma duradera de la transmisién sinaptica implica modificaciones en la transcripcién génica; estas moditi caciones pueden persistir durante emanas. Estas acciones de cardcter mas permanente parecen implicar a muchos de los mismos tipos de receptores y de vias de segundo mensajero que participan en las acciones te: guladoras a corto plazo de los transmisores. Sin embar- 0, pueden requerir la estimulacion repetida y una ac- cin mas profongada de los segundos mensajeros. Como veremos en el Capitulo 63, la activacion sinipticamente inducida de la expresiGn génica es esencial para e! alma- cenamiento de la memoria a largo plazo. Steven A. Siegelbaum James H. Schwartz Eric R. Kandel Lecturas seleccionadas Cooper JR, Bloom FE, Roth RH. 1996. The Biochemical Basis of Neuropharmacology. 7th ed. New York: Oxtord Univ: Pros Gilman AG. 1995. Nobel lecture. G proteins and regulation of adenylyl cyclase. Biosci Rep 15(2):65.97. Hille B. 1994. Modulation of ion-channel function by G. protein-coupled receptors, Trends Neurosci 17:531 5%, Huganir RL, Greengard P. 1990. 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