EL AGUA 2.1 Interacciones débiles en los sistemas acuosos 47 2.2 lonizacién del agua, Scidos débiles ybases débiles 60 2.3 Tamponamiento contra cambies de pH 1en los sistemas bioldgions 65 24° Elagua como reactivo 69 2.5 La adecuacién del ambiente acuoso a los organismos vives 70 Greo que con la progresiva aplicacian de los métodos. 4e la quimica estructural a os problemas fislol6gicos, observaremos que la importancia del entace de hidrégeno en fisilogga os mayor que la de cualquier otra caracteristica estructural Linus Pauling, he Nature ofthe Chemical Band, 1939 2Qué es io que Bloom, amante del agua, extractor «de agua y de agua acameador admiré en el agua al voher? ‘Su universalidad, su wirtud demoerdtica. ares Joyce, ises, 1922 Ee ‘uistanicia més sbundante en los sistemas vivas, tizuyendo e! 70% o:mas del peso de la mavoria de or- -fanismos. Las primeros organismos vivos apareciorgn ent wn ‘entorno acuoso y el curse de Ia evolueién hi sido mokleade por las propiedades de! meso acuoso en que se inicio a vida. Este capitulo se inicia con la descripcion de las propieda- ides fisieas y quimicas del agua, alas que se adaptan todas lat ‘caracteristicas de la estructura y fuei6n eetulares. Las Riera de straccién entre las moléculas ce agua y la débil tendencia ‘del agua a jonizarse tienen una importancia crucial para la €- ‘ructura y funcion de las biomoléculas. rataremos el tema de Iv ionizacion en términas de constantes de equilib, pH y ‘eurvas de titulackon y consideraremos la forma en. la que las soluciones acuosas de icidos 0 bases débiles y de sus sales ae- ‘wan com tampones contr los cambios de pH en los sistemas, Diokigicos. La molécula de agua y sus productoe de joniaseién, 1H” y OH, influyen de manera profunda sobre la estructura, autoformacidin y propiedades ce los camponentes celilares lias interacclones no covalentes responsables de Ia fuerzay de la especifcitiad de “reconocimiento” entre las biornoléculas, cestin infuidas de manera doeisiva por las propiedades dlsol- vontes del agua, entre las que se incluye su eapacidad para formar enlaces de hidrégeno consigo misma y con ls solutos. 2.1 Interacciones débiles en los sistemas acuosos Las puentes de hidrdgena entre moléealas de sgua proporeio- ‘ran las uerzas de cohesion que hacen que ef agua sa liguida temperatura ambiente y favorecen elextremo orcienamiento, de las moléculas,tipico del agua crstalina Cielo), Las bioro- Jéculas polares 3e disuelven Piilmente en el agua porque pu den reemplxzar lus interacciones agua agtaa por interacclones ‘agua-soluto energéticamente rads favorables, Por el conttario, Jas biomoléculas apolaresinterferen en lasinteracciones agua ‘agua pero na son capaces de formar inberaociones agua-soluto en eonseevencia, las moléenlas apolares sen misy poco soht- bles en agus-. En soluciones acuosas, las moléculas apolares tienden a agruparse entre si Las puentes de hidrgeno y os enlaces datos, las interac Clones hidrofobicas (del griego, “temor al agua”) y de van dor ‘Waals gon individusimente débiles, pero colectivarsente tienen luna inflicncia muy significativa sobre la estructura tridimen- sional de las prateinas,dcids nacleicos, polisacarides lipids de membrana, Los puentes de hidrégeno confieren al agua ‘Sus propiedades extraordinarias Bl agua tiene un punto de fusiin, un punto de eballicton y un calor de vaporizacion més elevados que la mayaria de cso ventes communes (Tabla 2-1). Estas propiedades del agua se a“tame cca mcrae pm cet 10g nie icy, ape ese oe DB verges £2 4n2 Mas da ds sono ode reign ar nos Se rattan ede ena i deben a la atraccidn entre moléeulas de agua adyacentes, lo que confiere al agua iquida una gran cohen interna. Un vis- {azo a la estructura electrdnica de ls molécula ce HO permite educir la causa de estas tuerzis de atraceifn intermelecular. Cada éiomo de hidrégeno de una moléeula de agua eom- atte un par electrénice con el Stomo de oxfgeno sentra. La ‘drometria de Is mokécula de agua sigue las formas de los orbi- tales electrnicos extemos del étoma ce oxigen, que som stni= lares alos orbitals de enlave del carbon sp (noe Fig. 1-1), Estos ortitalas deseriton un tetraedeo, con un Sitomo de hid Beno en dos vértices y electronessin compartir entJes otros os (Fig. 2-1n), El dngulo del enlace H—0—H es de 104.5", menor ‘que los 109.5" de un tetraedro perfecto por la compresién por los orbitaes no enlzantos del stomo de oxigen, El nile del oxigeno atrae electrones mais fuertemente ‘quo el cleo del hidrégeno (un protdn) es deci el oxégen es ‘ds electronegative. Por tanta el Hy el O camparten la eee- ‘tones de forma desigual; los electrones se sitdan con mayer recuencia cerea dot étomo del oxigen que del ele hideegen. El resultado de esto &s la formacién de das dipalos eléctricos ‘on in molécula de agua, alo largo de cada uno de los enlaces 1-0; cada tirogeno-es porsatior de una carga peestiva parcial (@*) y e1tomo de oxisno es portador de uns eurga negative parcial igual a fa suma de las dos cargas positivas parciales (25) (Fig. 2-10). Como resultado de ella, existe un atrae- cidn clecirostatica entre el atom de oxigeno de una malécuka de agua y el ildrdgeno de otra (Fig. 2-16), que se denomina Puente de hidrdgeno. & lo Largo le este Libro, presentare- ros log puentes de Nidrégeno mediante tres lineas paralelas de color azul, como en a Figura 2-Le, [Los puentes de idréeno son relativamente dies, Las ppuentes de hidrgeno en el agua liquida tienen una energia ‘de disociacidn de enlace (la enengia requerida pura romper tun enlace) de aproximadamente 23 1./'mel, en comparacisn ‘con Jos 470 mol del enlace cavalente O—H an al agua oe los 348 ka/mol dat enlace covalente C—C. El enlace de hid oe a * * ™ ™ oss can | Puente debidsigee = Ott am lee covalent ‘00068 nm ) FGURA 2-1 Estructura de la moécul de agua. (2 natureza po. tarde fa mould #0 se mesa en model de a) oa Mos yess. a5 ines 20% of eesti lo bites 0 conlazanies. Existe un ordenamient cl tlkdrico de lox pares de clectwones La capa exer atededor del stoma de onigena os dk Soon do drgeno leven carga parcial pestves aalzades (8°) yet tomo de oxigene tene una carga parcial negatva 2”) {Dos moldclas de 1.0 unids por un puede drogen n= brolizada aqu ya la arg de este Hiro miedante tes ines zl) en lomo de genase a males super yun amo de i drégena de nino: Las puentes de hudrgeno son large ni ties que ls enlaces O— Healey,eno tiene un 108 de cardcter covalente, debido al solapa santo da lo echttalon de anlace, 7 ts O00 cle enebaber ele trostética. A temperatura amblente, la energla térmica de na ‘solucion acuosa (la energia cinética del movimiento de los ato- ‘mos y molécalas individuales) es del mismo orden de magn ‘td que la necesaria para romper los enlaces de hidrégeno. ‘Cusrid se caliente el agua, el increment de termperatura 3 un refejo del movimiento més répido de las moléeals indivi- stuales del agua, Aunque en cualquier momento dado la mayo ia de moléculas en el agua Ifquida estén unidas por puentes de hidrogeno, el tiempo de vida de cada une de ellos es tan ‘séllo de entre 1 y 20 picosegundos (1 ps = 10-™ 5); al rom- perse un puerue de hidrégeno se forma otro, con la misma 0 ‘eon otra moléeula, en el lapso de 0,1 ps, Se ha aplicade el tér- mino de “agrupamientos fluctuantes" (flickering clusters) a las agrupaciones de corta duraciin de moléculas de agua uni- as por puentes de hdrégeno en fae liquid, La suma de to- ‘dos los puentes de hidrégeno entre moléculas de HyO confiere gran cohesidn inter al agua liquida. Las extensas tedes de rmoléculas de agua unidas por enlaces ce hideogeno forman también puentes de coneson entre slitos (protetnasy Seid nudeieos, por ejemplo) que permiten que las moléculas més vandes interaccionen entre ells 2 través de dstancis de va- ios nanGmetros sin necesidad de entrar en contact ico El ordenanero cas tetraécrice de los orbitals alrededor ‘del tomo de oxigeno (Fig. 2-La) permite que eacia molécula de ‘agua forme enlaces de hidrégeno can hasta cuatro moléculas ‘de agua vecinas, Sin embargo, en el agua liquida a tempera- tra ambiente y presi atmsférea, as mal6eulas de agua es- ‘én desorganizadas 3 en movimiento continuo, de forma que -eada moléeula forma puentes de hidr6geno con un promedio ste otras 34 molécuias solamente, Por el contrario,en-l hielo, cada moécla est fis ene espacio y forma puentes de hideé- geno con otras 4 moléculas de agua (Fig. 2-2). La rotura de un §nimere de puestes de hidrigeno suficiente para desestabil- zara reticulacrstalina cel hielo requiere mucha energlatér= nea, fo que explica el punto de fusion relativamente elevado del agua (Tabla 2-1). Cuando se funde el hielo 0 se evapora el gu, se absorbe calor por parte del sistema: H,O(solido) > H,O(iquide) ait ‘H,OMiquido) —+ HO(gas) +6,9 ki/mol AIP = $44.0 kelimol Durante Ia fusidn o la evaparacién aumenta la entropia del sistema acuoso a medida que conjuntos altamente ordenadas de motéculas de agua se relajan para dar paso alos conjuntos de puentes de hidrégeno menos ordenados del agua liquida © ‘alas moléenlas totalmente dasardenadas de agua en el estado gaseoto, A temperatura ambiente, tanto la fusién del hielo eo- mmo la evaporacién del agua se dan esponténeamente; la ten- dencia de las moléculas de agua a asociarse mediante puentes de hidrégeno queda contrarrestada por el empuje energético hacia el clesorden, Recuérdese que la variacion de energia bre (AG) ha de ser negativa para que un proceso se procuzca de forma esponténea: AG = AH — TAS, en donde AG repre senta la fuerza matriz, Aff la variacién de entalpia relacionada 2.1 Interacciones débiles en los sistemas acuoses 49 FIGURA 2-2. Fuentes de hidrogeno en el hielo. Cada molécuia de agua forma un méximo de cuato puentes de hideégeno, cxeando una red cristalina regular. Por el contaria ene agua liquida a tepera- tura ambiente y presién atmosériea cada molécula de agua forma [pucntes de hidrogeno con ouas 3,4 moléeuas de agua en promedio, ated erstalina del hielo es menos densa que el agua liquida y por ‘0 flta en el agua liquid. con Ia rotura y formacion de enlaces y AS la variacién en el rato de desorden. Dado que AW es positiva para a fusién-y para la evaporacion, es el aumento de entropia (AS) el que have que AG sea negativa e impulse estas transformaciones. El agua forma puentes de hidrégono con los solutos polares Los puentes de hidrégeno no son exclusives del agua. Se for- man fécilmente entre un tomo electronegative (el aceptar de hidrégeno, normalmente oxigeno o mitrégeno eon un par de electrones no enlazantes) y un dtomo de hidrégeno unido ovalentemente a otro dtomo electronegativo (el dador de hi- ddrdgeno) en la misma 0 en otra malécula (Fig. 2-3). Los ato: mos de hidregeno unidos eovalentemente a étornos de carbone ium YT j aces 8 WN Yo” 8G WO mee GP eee ime PY 14s FIGURA2-2 Tipos comunes de puentes de hidrégeno en los iste mas biolgicos. El aceptor de hictSgena es habitualmente el oxigen ‘0 ntrogeno; el dadores otro dtorn electronegativo.Caplio? Bl agua 1 participa en la formacion de puentes de hidrgend, puesto que el carbono es tan slo ligeramente més electronegative ‘que el hicirgeno y, por tanto, el enlace CH es solo ray de bilmente polar. Esta diferencia explien por qué el butanot (CHg(CH,),CH,OH) tiene un punto de ebuilicén relaiva- mente alto de 117°C, mientras que el butaria (CH (CH) :CHs) tiene un punto de ebuilicién de solamente ~0,5 °C. 1 buts nol ene un grupo hidroxilo polar, por lo que puede formar puentes de hidrégens intermoleculares, Las biomoléculas no cangadas pero polares tales corno los azticares se disuelven f- climente en el agua debido al efecto estabiizador de ls poen- tes cle hidrégeno que se forman entre las grupos hidroxilo oe xigeno earborilica del anicary as moléculas polares de agus Ls alcohols, aldehides,cetonasylos compuestes que conti nen enlaces NH forman puentes de hidrégeno con las moké- cults de agua (Fig. 2) y tienden a ser solubles en aut. Los puentes de hierégeno aleancan una fuerza maxima sand ls moléculasunidas estén oriertadas de forma que la interaccién electrostética sea ln mayor posbie, Io que tiene lugar cuando el dtomo de hidrégeno y los dos tomos aue Joeomparten se encuentran en tines reeta -esto es, euando €ltomo scepter est alineao con el enlace covalente entre Bitte! ied acpi Eat arene perce Becca Seen || nels Sine yolnaua oe Li \ v Ae u 8 i 5 9 Ww t 4H Bey ALN. a ABA i t Adanina FIGURA 2-4 Algunos puentes de hidhdgene que tienen inporiancia Diolégica, \ 7 FIGURA2-5 Direcchonalidid del pune delhidedgend, La ara ‘tre las cangselftricasparcaes (vase Fig. 2-1) es nsviva anda los tes dtomos implicados fen este caso ©, Hy OF se allan en lines recta. Cuando los grupos unidn por puente de hictgeno sulen re trcciones exrvetuales (Como por ejemplo. cuando forman parte de luna tnkca molécula de protenal esta geometria ideal puede no ser posible ye puente de hidrgeno resultante ex mis dbl el tomo dador y el H (Fig. 2-5}-, Los muentes de hidrégeno Ulenen pues un caricter altamente direcclonal y son capaces de mantener dat maléculat © grupos unidos por puente de i ddnégeno con un ardenamiento gearétrico eapecifico. Verernos mds adelante que esta propiedad de los puentes de hidrageno) cconfiere estructuras tridimensionales muy: precisas a molécu- Js de proteins y deidos rucleiocs en las que existen muchos, ppuentes de hidréigeno intramoleculares, El agua interacciona electrostéticamente con los solutes cargados Bl agua es un disoivente polar: Disueve ficiimente la mayoria Ge biomoléeulas, que generalmente son compuestos cargades ‘opolares CTubla 2-2); los compuestos que se disuelven ficil- mente eh el agua son Midrofilieom (cel greg, “amantes del 4912"). Por el contrario, los deolventes apolares tales como el loroforma y el benceno son males disolventes de as bom ol ‘suas polares, pero disuelven filmente las que son hdroté- bbieas -miéculas apoares tales como os lpi y as eras, EL agua disnelve sales tales como et NaCi mediante la hi- Aratacion y estabifizacion de los iones Na* y CI”, debilitando las ineraeciones eleetrosttieas entre ellos y contrarrestando ‘asfou tendencla a asociarse en una red cristalina (Fig. 2-6).Lo rmisiao ocurre con las blomoléculas cargadas, compuestos con _grupns funcional tales como Ios écidas carborilicos ioniza~ dos (—COO™>, ins aminas protonadas {—NHS) y os éteres 0 anhidrios fosféricos. El agua disuelve fclmente este tipo de ‘campuestos reemplazardio puentes de hidnigeno soluto-solito por puentes de hidrégeno soluto-agua, apantalfando asi las interacciones electrostiticas entre molécuias del soluto, Blagua es especialmente efectiva en apantalla las interac. clones electrustticas cnire lones disuelios a causa de su ele vata constante dietéctrica, na propiedad fisies que refieja el mimero de dipolos en un disolvente. La intensidad, 0 fuer (F), dels interaceiones inicas en una disalucion depende de 4a magnitud de ls cargas (@), la distancia entre los grupos ‘cargados (> la. comstante dielécirica (6) del disotvente en el ‘que tienen lugar las interaceiones: Wes Po ae2.4 Interacciones débiles en os sisternas acuosos on Hoon Antptieas Fenicianina Gila °NH—-CH.—CO0 Quant —c00- Aspartate ~00e—cHt, br C00- Fostoecaina ecto y--000- ceuenmuc 1 oes on CCH t—¢ 0 ° NICH cial & bio os HOCH,—CH-CHLOR, (7) supee sotaes. [77] Grapes apotares Pra el agua s 25°C, « (que es adimensional) tiene un La entropla aumenta cuando se disuelve valor de 78,5 mientras que para el benceno, que es un disol vente muy apolar, « vale 4,6, Asi, Ins interacciones idnicas ‘son mucho ms fuertes en los ambientes menos polares. La ‘dependencia respecto a 7 hace que las tracciones 0 rept: siones iénicas operen s6lo a distancias uy eortas, del orden de 10.4 40 nm (dependiendo de la concentracién de electro- lito) euands el disoivente ex 1 agua. FIGURA 2-6 El.agua.como dicolvente gus disielve much sale retains Nidatando las lonas qu las compari. La re clink del NaCl se destuye a redid que moléculaa de agua se gman al tuna sustancia eristalina ‘Armia que se disuelve une st tal como el NaCl os tones Na” y CI” que abonlonar la red erstalina adquleren més t- testa de movimiento (Fig. 2-6). Bl incremento de entropia (Gesorten) que se produce en el sistema es el principal res- onsale dela facili con la que se disuelven en agua sales ‘on Nat Ceteveetn srentcin oop figeeecr ered ? ton cr Dicratade & tededoe de los iones CI y Na*. Las eargas iGnicas son al parcial ‘mente newtralizadas y se debilitan las atraccioneselecrostitcas ne ‘csarias para la Formac do lave.52 Canto? El agua ‘tales como‘el NaCl. En Lérmings termedinémicas, ls disclicién, tione lugar con wna variaeién favorable en la energia libre AG = AW ~ 7/6, on donde AH tiene un valor postive pequetio TAS un valor positivo alto, de forma que Ad? es negative, Los gases apolares se disuelven mal en el agua {Los gases biologicamente importantes tales eomo el COs, Oa ¥ No, son apolares, En el Og y No ambos stomas Comparten los electennes de igual manera. En el COs, cata enlace C=€) es po- lay, pera los dos cipolos estan dirigidas de manera opuesta, con lo que se ana entre si (Tabla 23). El ryovimienta de es- tax moléculas dosce Ia fase gaseosn desordehada a la fase acuosa restringe su movimiento y el movindente de las molé ceulat de agua y representa, por tanto, un descenso de entro. pla. La naturaleza apolar de estos gases ya disminucicn de fentropia. cuando se introducen en la disolucién hrcen que ‘an muy poco solubles en agua (Tabla 2-8). Algunos onganis- ‘mos contienen proteinas transpartadoras hikrosolubles Chamo- {lobina y miogiobina, por ejemplo) que faclitan el transporte del O;. El didxido de earbono forma éeide earbérieo (1,003) fen disolueidn acuosa y 0s transpottado en forma de ion bicar- ‘wanato (HO05), ya sea en forma libre -e bicarbonata es muy soluble en agua (~100g/L.a 25 °C} o-unido a hemoglobin Otros dos gases, ef NEa y el HAS, tambien tienen pupeles bielo- ficos en algunos organisms; éstos son gases polares que se dlisuelven ficiimerte en el agua, Los compuestos apolares.fuerzan cambios desfavorables energéticamente en la estructura del agua ‘Cuando ae mezela el agua con bencerioo hexano, se forman dos fases; ninguno de los dos iquidos-es soluble en el ote. Los compuestos apolares tales como ef Bencens y el haxano son hidrofbicos -son incapaces de experimentar interacciones eneraéticamente favorables con las moléculas de agua y, ce hecto,interferen en a formacién de enlaces de hire en tre las moléculas de agua, Todas las moléeulaso ines en a solucin acuoca interfieren en los puentes de hidrégen ee algunas moléeulas de agus en su proximidad inmestits, pero Jos soluts cargos o poares (lates como el NaC) compen san sta prin de puentes de hidedgeno entre muoéculas cle ‘agua mediante la formacion de nuevas interacciones entre el slutoy e agua. La voriacia neta de entalpia (A) ena diso- Iucin de estas sustancias es, generaimente, nequetia, Los 80 Iutos hitrofdbicos no efecen esta compensein, por lo que $3 adicign al agua puede resultar, por tanto, en una pequeta ‘nancin le entalpia; In rotura de puentes de hidnigeno re- aulere i adn de energa al sstern. Adem, la dsalucin ‘le compiiestos hidrofbbico en el agua da lugar aun descenso significative de entropla. Las moléculas de agua en la vecindad inmediata del soluto apolar estén restringidas en sus orienta ‘ciones posibles ya que forman wna capa en forma de jaula de roléculas de agua muy ondenada alrededor de ada moléetla de soluto. Rstas moléeuins de agua no estén tan altartente orientaias como las de os elatratos, compuestos ristalinos de un gouta apolar y agua, pero el efecto es el mismo en am bos casos: él orden en las moléculas de agua reduce la entro- pla. El nikmero de moléculas de agua ordenadas, ¥ por tanto la ragnitud del descenso de entropia, e& proporcional al area superficial de] solato hrofebio includ en a jaa de mol clas de agua. La variaccn de energta libre que eonieva la disolucion de un soluto apolar en agua ef, or tno, cstavo rable: AG = Alf ~ TAS, en donde AM ene un vale positive, AS un valor negativay AG es posit ‘Los compuestos anfipéticos contienen regiones que son poles (0 cargadas) y regiones que son apoares (Taba 22). TABLA 2-3. Solubilidad de algunos gases en agua Solubiicad Gas Estructura” Polaridad fen aga (a) Ne es en aps Nitrogen N=N polar 0,018 (40°) Ocigene 90 polar 0,035 (60°C) Digiido de carbono polar 0.97 (456) ‘maniac Polar 900 (10°C) Sulfur de hidedigeno. HOH) Poiar 1860 (40 °C) “Ach meremtn ae tr as cae (5) ua a eh ya pa ec (eases ten al ‘ens inl arn cn mre nO Bap eS AMS rotamer comin(flickering elusters) de imaeale dey en ‘tsenodll aside pyotécutan de agua muy orcenadae rman jalas” alrededor de Ins ‘eaddenad alqutieashideotiba “ FIGURA 2-7 Compucstos anfipiticas on solucién acuosa. (a) los cid pasos de cadena large tener danas aguiicas ay hid bicas, cada una de las eunles est rodeadls par una capa de moc las de agua altamente ordenadas, (k) Agrupsndose en micelas, las rmoléculas de Acide gato exponen al agua la minima supesice bi- rofbica posible y se necestan manos molGoulas de agua en Ia capa do gua ordenada. La micela se etabilza gracias a la energla ganacla nla liberaciin de moicula de agus inmovilizacias. Cuma se mezela un compuesto aii com aa, a rein polar hidrofiliea interacciona favorabletente con el disolvente ytiende a disolverse, pero la regiin apolar hidrofobica tiende a evar elcontacto oon el aga (ig, 2-Fa. Las reiones apolares de ls molgeulas ge agrupan para presentar a menor Are drofébica posible al disolvente mientras que las regiones pala- res se disponen de forma que se maximice su interaccion con 6! lsotente acuoso (Fig, 2:7). sas estructurasestables de comapuestas anfistion en a, denominads micetas, poe den contener cientos o miles de moléculas. Las ficreas que mantienen juntas Jas regiones apokares de las mokéculas se cle- rominan interaceiones hidrofobicas. La fuer de estas limeracciones no se debe a ninguna atraecion inrinseca entre Jas partes apolares, Proviene mds bien de la obtenctin de la ‘Tadsimi estabihidad termodinamica el sisterna al rinirnizar ef rnimera de molecule de agua orderadasnecearia para t0- ar poreiones hidrofbieas de las mein de solo. Muchas biomoléculas son anfipaticas as proteins, pl mento, cierta stamina los extersles yfosfalipkis de las ‘membranas tienen regiones con superficie polares ¥apoln- res. Lam estrueturas formas por estas maéculas se estabi- Lizan mediante interacciones hidrofébicas entre las regiones apolares. Las interacclones hidrofébicas entre lipldos y entre 2.1 Interacelones débiles en ius sistemas scuoses 53. é ae neg oe A SES bot. pigeminde Bes ee ccna & -ASsy OK Mees ‘deundantes » odo, Stemvertine 4 st qh Sinaia BERLE pie See aoe ke Aes Te ¢ ar a Sy a Aargoenieion te. Tunis aRB RE Beti et, eee AR oP A os 4 > eS lipdos y proteinas aon los determinantes ms importantes de lvestructura de las membranas biologias. Las interacciones hicrofdbicas entre aminoscidos apolaes estabiaan también Jas estructuras tridimensionales de las protetnas, La formacidn de puentes de idrdigeno entre el agua y los solutos polares también proshice un clerto ordenamntento de las moléculas de agua, pero el efecto es menos significative {que con los solutes spolares, Parte de a Merz impure de Ja unidn de un sustrato polar (reactivo} ala superficie polar complementaria cle un erzima es el aumento de entropia que54 Capitulo? 8 agua FIGURA 2-8. La iberaciém de agua orderida favorece fa formacién de un complejo enzima-sustato, Cuando eatin separals, tant el Enzima como el sustato fuerzan a las moéculas de agua coneanas a formas una capa ordenada. La unig del susrato al ena Hera pre del agua ordenada y ol aumonts de entopia resulta riper. ‘ona un “empujsin” termodindenica para la formacisa del complejo eins escrito, tiene lugar al desplazar el encima molécuias de agua ordeni- das del sustrato (Fig. 28). Las interacciones de van der Waals son atracciones interatémicas débiles Cunndo dos stamas no cargados se encuentzan muy cerca, las rues eleetrénicas que los rodean se influyen mutuamente Vasiaeiones al azar en las posiciones ce Ins electrons alrede- ddor del micleo pueden crear un dipolo eléctrica transitoni que induce un cipal eléctrico opuesto también transitori 1 atomo cercano. Los dos dipolog se atraen débilmente entee sicon lo que los ntieleos se acerean més. Estas stracciones ‘chiles se denominan interacciones de van der Waals. A ‘medida que los cos nicleos se acercan entre sisus rubes elee- ‘ronicas empiezan a repelerse, En el punto determinado en (que la atraceiGn de van der Waals equilbra exactamence esta fuerza repulsiva, se dice que los nGcleas se eicuentran en con: tacto de van der Waals. Cada dtomo posee un radio de van der Waals caracteristico, que consittuye uns medida de to {que este tomo permitié acercarse a otto (Tabla 2-4). Ex lng modelos maleculares espaciales que se muestram a lo largo de fe libri fos dtomos se representan con tamatias propareiona- ‘es asus radios cle van der Waals, Las interacciones débiles son cruciales para la estructura y funclén de las macromoléculas ‘Las interacciones no covalentes que: hernns descrita (puentes de hidrdgeno e interacciones ionicas, hidrofobicas y de van ‘der Waals) (Tabla 2:5} son mucho mas débiles que lng enlaces ‘eovalentes. Se requiere un aporte de enorgia de 350 KI para romper un mol (6 X 10) de enlaces C—C simples y de unos 410 ki para romper un mal de enlaces C—H, pero se requie- en Solainente enize 4 y 8 kd para destruir un mol de interac- slones de van der Waals tipicas. Las interaccsones hicrofobicas son también mucho mas détiles que los enlaces covulentes, ‘aungue son sustancialmente reforzsdas por in disolvente de Polaridad elevada (uma disolucién salina concensrada, por ‘elemplo) Las inveracciones finicas ¥ Jas puentes de hidrégeno ‘son dle fuerza variable, que depend de a polaridiad del iso vente y del grado de alineamiento de los étamoa unids par ‘enlace tle hidrdgeno, pero son slempresignificativamente mds Face: at au Wi Co i (182) Epa ow cr "ns Js Ger 86, 319817 ik ene: Png. 19 ‘te Cemeal ue 3 Cee Une Fe, a a enor eters ers pace eo a. ‘home errs rane enema ie Se so moms Ge ase dr OG ern ems edo dma sans hice ena de rs nt "aa aacasomea gs elon er de adr ade os ‘a or a egecarem De ss, Wri ete Vor enns eabes Be soins QUPY an © BAT mn = 64am.TABLA 2-5 Cuatro tipos de interacciones no covalentes (“débiles") entre biomoléculas ‘en disolucién acuosa Enlaces de hidrigeno Ente gupos nevros So=0 Ho Ente enlaces peptidicos é Seon, Ineeracciones iénicas ‘iraccin Repulsién Imeracciones hidrof6bicas Interacciones de van der Waals Dos éiomos cualesquiera ‘muy proximos: debiles que los enlaces covalentes. Ex un digolvente aewoso- 25°C, la energia térmica disponible puede ser del mismo of: den de magnitud que la fuerza de estas interaceiones débiles y la interaccidn entre las moléculas de soluto y de disolvente (agua) es casi tan favorable como las interacciones soluto-so- Tato. En consecueneta, los puentes de hidndgeno y las interac= clones idnicas, hidrofobiess y de van der Waals se forman y rompen eontinuament. ‘Aunque cada uno de estos cuatro tipos de interacciones es débil en comparacién con un enlace eovalente, el efecto acumulativo de-mnuchas interacciones de este tipo puede ser muy signifcativo, Por ejemplo, la union no covalente de un en- ima a su sustrato puede implicar varios puentes de hierogena ‘yuna a mas interseciones iénicas ast como interaccianes hi \drofébicas y de van det Waals. La formacin de cada uno-de estos enlaces débiles contribuye a un descenso neto ce la energia Ubre del sistema. Podemas calcular la estabiidad de tuna interacei6n no covalente, tal como la sle ura moléeula pe- ‘quefta unida por puentes de Iidrogen a su pareja macrerncle- cular, & partir de la encrgia de unién. La estabilidad, medida parla constante de equilibrio (véase mis adelante) de la eac- cidn de nisin, varia de forma ezponenciad con la energia.de unién. La disociacion de dos biomoléculas (tales como un-en- ‘ma y su sustrato unida) asociadas de forma no covalente me- diance multiples interaovinnws débiles requiere que todas estas 2.4 Interaeeiones débiles en los sistemas acuosos 55, Interacciones se destruyan al mismo tiermpo. Dado que ls in teracciones ftuetian al azar, tal destruceidn simmulténes es muy oCo probable. La estabilidad molecular conferida por dos, cinco 0-20 interacciones déblles es, por tanto, mucho mayor de lo.que podria esperarse de una simple adiciéin de las peque- ‘as enengias de union. ‘Las macromoléculas tales como las proteinas, el DNA y et RNA contienen tantos sitios potenciaies para ls formacién de puentes de hidedgeno o interacciones idnicas, de van der Waals ohidrofébicas que el efecto acumulativo del gran mire rode pequefias fverzas de uniin es enorme, La estructura mas stable (nativa) de la mayoria de macramoléculas es aiquella, en la que se maxinizan las posibilidades de unions dies. EL plegamiento de una cadena polipeptidica o polinucleotidica en. su forma tridimensional viene determninade por este principio, La nid de un antigene a un anticuerzo especifice depend de los efectos acumulativas de muchas interacciones détiles. Co- mo se ha resaltaiio anteriormente, la energia liberada cuando ‘un enzima se une de manera no covalente a su sustyato es la fuente prineipal de! poder eatalitics del enzima, La unién de ‘una hoftnona o un newrotzanamisor a su receptor celular pro- telco es ol resultado de anterseciones débiles. Una consecten: a del gran tamato de los eneimnas y de los receptores es que sus grandes superficies proporcsonan muchas oportunidades para ol establecinionto de interaeciones débiles, A nivel me ccalar, la compiomentariedatl entre biotnaléeulae que interacci- nan entre af refle la Complementariedad y las interacciones ebiles entre grapos polares, cargados e hidrofibicas en la su- perficie de las motéeulas. Al determinar la estructura de una protesna tal como Ia hemoglobina (Pig. 2-9) par eristalografia de rays X (wéase Re cundro 4-4, p. 136), es frecuente encontrar maléeilas de agua. ‘unidas tan fuertemente que forraan part de la estructura crs ) oo) FIGURA 2-9 Unidm del agua ala hemoglobina, La esiuctura cxsta lina de la heroglobina se muesra en (a) con sus moléculas de agua lunidas fesferas rojas yen (b) sin las moléculas de agua. Estas mole ‘ulas de agua se hallan tan fomernente unis 2 fa protein que alo: tam al patién de diracesén de rayos X como st foraran parte del tsa. Las dos subunidacls a de la hemoglobisn se muestran en co lor gris y ls dos subunidacles 8 en azul. Cada subumidad ene unico tn grupo hemo festructura de varias oj), que slo es visible en las subunidades Bn esta figura Laestrctura y funcién de a hernoglo- bina se tratan en detalle en el Capa 536 Capitulo? El agua talina; Jo mismo ocurre en eristales de RNA © DIVA, Estas mo. léculas de agua, detectabiles también en disotuciGn mediante ‘esonancia magnética nuclear, poseen propiedades que las ds. ‘inguen del resto de agua del disolvente, Son, par ejemplo, es- méticamente inactivas (véase mas adelante), El agua ‘uertements unida es esencial para la funcién de muchas pro teins. Por ejemplo, en una de ins resveianes clave del procesc {des fotostntesis, ln erergia de la lz se usa para bomlieat pro- tones a travis de una membrana bioligica al tiempo que se produce un flujo de eleetrones a través de-una serie de protet nas transportadoras (véasa Fig. 19-54), Una de estas protet- nas, el citocromo Lene unida una cadena de cinco moléculas de agua (Fig. 2-10) que puesle proporcionar una via para el ‘movimiento de los protanes através cle la merabrana segsin un proceso canocido como salto de protones” (que se deseribe ‘nis adelante). Casi con toda seguridad, otra bomb de proto nes que utiliza la energin de a luz, la baeterlorrodopsina, usa luna eadena de moléculas de agua unidas y orientadas de una forma precisa para el movimiento transmembrana de las peo- tones (véase Pig, 19-89), alte po Cn |FIGURA 2-10 Cadena de agua en el eitocromo f, Hay agua unida en ‘canal de protones de fa proteina de membrana eitacromo f, que orm pane de la maquinarsrecolectora de enerpia dela fotosntss 7 clocoplasts tnéase Fig. 19-57). Cinco moléculas de agua estsn ‘umidas mediante enlaces de hickcgeno entre ellasy com grupos fan onal dela profoina: los demos de la cadens principal de residues ‘se vali, proina arpninay lanin y las cadena teal dete re ‘vos de asparagina yds resus de glutamina La prtena tiene un {pup emo unio (ase Fig 5-1} que, mediante su stomo-de hier, facia el luo de elocrones durante Is fotointsis. El Mlajo elects ico esta acoplada al movimiento de pratones a travels de La mer bran, lo que probablemente produce un ‘salto de protones” (vase Fig, 2-14) alo larg do eta cadona de moléculas de agua ida. Los solutos afectan a las propiedades coligativas de las disoluciones acuosas ‘Los solutes de cualquier tipo alteran certs propiesades sicas lel agua disolvente: su presion dle vapor, punto de ebullicién, punto de fusion (punto de congelicién) y presién osmética. Bs lus se denomainan propiedades eoligativas (ligada”) puesto ‘que el efecto de los solutes sobre las cuatro tiene la misma ‘base: la concentracion de agua es menor en las disoluciones ‘que en el agua pura. Bl efecto de laconcentracién de salto 90 bre las propiediades colgativas del agua ee indepertinte de las Propiedades quimicas cel soluto; depencle tnicamente del i- ‘mero de particulas de soluto (moléculas, janes) en una deter- nada eantiad de- ava, Un, compuesto tal como el NaCl, ie se disocia en disolucion, tiene un efeetn sas veces mayor $o- ‘bre la presicn asmtica, por elernplo, que un ndmero klético dle moles de un soluto que no se disocie como por ejemplo la duces, Los solutos.alteran las propieeledes coligatvas de ls diso- Juciones acuosas al disminuir Ia concentracién efectiva de ‘agua. Per elemple, cuando una fracein significative de las ro: Iéculas de la superficie de una disolucién acuosa no son de ‘agua sino de soluto, la tendencia de las moléculas de agua a ‘escapar a la fase vapor ~es decir, a presion de vapor~ dist rue (Fig. 2-11). De modo similar, la tenvdencia de las molé- clas de agi a trasladarse desde afase acwosa a la superficie de un cristal de hielo en formacton se reduee cuando algunas de las mokéculas que ekioan con el cristal son de soluta, na de ‘agua. Br este caso la disohucion se congelaré més lertamente ‘que el agua para, y a una temperatura inferior, Para una diso- Iucién acuosa 1,00 molal (1,00 mol de solute por 1000 g de agua) de un soluto ideal, no volstl y ne diseeiable, & 101 KPa atm) de presion, el punto de eongelacisn es 1,86°C menar ¥ el punto de ebullicion es 0,648 °C mayor que el del agua ‘pura, Para disoluciones 0,100 molal del mismo soluto, los cam bios som deta déclina parte Las moléeulas de agua tienden a trasladarse de una re- fi6n de elovada concenteaclén de agua a una de concentra Cidn inferior. Cuando dos discluciones acuosae diferentes estén separadas por una membrana semipermeable (que deja pasar molgeulas de agua pero no del soluto), las rnoiécnlas de ‘agua que diftuden de la region de alta concentracin de agua hacia I de coneentraciGn de gua rienor producen presiin os- motica (Fg. 2-12), El valor aproximado de esta presién, 1, ‘medida como fa fuerza necesaria para oponerse al movimiento. del agua (Pig. 2-12c), viene dado por la ccuacisn de van Holl N=seRr fen In que Fes Ia comstante cle Ios gases y Tes la temperatura absoluta. I término ie es la oxsmolaridad de la disolucién, el producto de la concentracién molar de solute. y el factor van’ Hoff i, que es una medida del grado de diseciacn del soluto en dos © ms especies iénicns. En dischiciones dias de NaCl, el solute se disocia complotamente en tones Na* y CL doblandla ef numero cle particulas de solute, ¥ en este ‘caso i = 2. Para solutos no jonizables, ies slempre 1, Para di-Enel agua puracada nesta salucidin, molecula dol supecficie a concanteacin eeetiva 8 HO y todas de Hy0 se encuentra devapor Cada moldcula cara d moleculas de agua ‘nal reno del guide ce en la euperficie yon claeno ypiuede conteibuin dal Ligue tom de #0. ala tirmaciéa decrisiales La presin de vapar del delete. ‘agua.y la tendenein del agua Liguidn incorporaree en lun cristal estén propercio- ‘almante reduces FIQURA 2-11 Los solutos alteran las propiedad colgatvas de las isolactones acuosas. (a) una presim de 101 KF (1 am) el agua pura hieeve a 100°C y ve congela 3.0. 6 La presencia ce moe. clas de soluto reduce la probabilidad de que ls mokeculs de agua abunconen la dsolucin y entren en fa fas gas, reducieno de esta orm la presin de vapar de fa dislueidn # nerementande el punto de ebulicién, De mode similar Ia probabilided de que una malé- ‘ula de agua chaque con un cristal de hela en formacin y se una at mismo es meno cuando algunas de Iss maléculst que ehocan co al eristal son de soluta an vez de agi, El elects ls damincidn de pant de congas, saluctones de varios (7) solutes, Hes la suma de Ls contribu clones de cada especie: T= RTE, + fey bo # hats) Lagsmosis,elmoviniento de agin. través de una merbeana semipermeable impulsado pur diferencias en a presion osm6- tic, es un factor importante en la visa de la mayoria dle as cé- Tula. Las membranas plasmeticas son mds permeables al agua aque ale mayor parte del resta de meiéculas pequefas, ones y racromoléeulas. Esta permeabiidad es dehida en parte ala ‘Smpledifusin ele agua através dela ieapa lpica yen parte eames protcieos (acuxporinas; ase Fig. 11-46) en la mem bana que permiter el paso seletivo de agua, Las disoluciones do iu asrolaridad se denominan fsotGmleas. Una eh ro sieada por una dsoluckin iota no gar nl perl agua (Fis 2-13), Bn una disotucion Miperténiea, aquela com ua em Jaridad mayor que el eitnso, la cétua se encoge al salir agua 2.1 Intoraceiones débiles an les sistemas aeuosos 87 ‘hacia fuera. Bn una disolucion hipoténtea (le osmolaridad ‘menar), las eétulas hinchan al penetrar el agua en ellas. Em ‘st, medio habitual, as e6lulzs contienen generalmente concen ‘rnclones mis elevadas de iomoléculas y de ines que sus al- rededores, de forma que la preside asmética tiende a impullsar agua hacia el interior de las clas, Sino se equilbrara de al- ‘guna forma, este movimiento de agua hacia dentra distendera Ja membrana plasmtica y egaria a causar la explosion de la ‘ula (isis asmdtica). ‘Alo largo de la evolucion han surgido varios mecanisimos para evitar esta catistrofe, En las bacterias vos vegetales, 1a membrana plasmatiea ostd rodeada de-una pared celular no lexpandible de rigidez y fuerza suficientes para resistr la pre sidn osmética y evilar la lisis osmética. Algunos protozoos de ‘agua dulce, que viven en un anedio altamente hipoténico, po seen un orginulo (vacuola contract) que bornbea agua al ex terior de la célula, En animales rvulticelutares, el plasma ‘sanguineo y el uido intersticial (el Quido extravelutar de los (sidos) se mantionen a una osrolarda! cereans a la del eto. sol, La elevada concentracidn de albeimina y otras proteinas en l plasma sanguinea contribuye a su osmolaridad. Las ofhulas también bormbean activamente fones tales coma el Na" hela cl fuido intersticial para permanecer en equilibrio nsmético can su entorno. Puesto que el efecto de los solutos en la asmotaridad de- pende del nimero de particulas disueltas, no de sn mas, las ‘Aqua ——_-Soluto no ‘Mombrana ssemipermenble FIGURA 2-12 Gsmoss y media de fa presi onmética (a) Estado inicial, EX tubo contiene una solucién acvosa, ef vasa contiene agus pray la membrana semipermeable permite «paso de agua pero no ‘de soluto, El agua faye desde el vaso hacia el tabo para igualar su ‘cancentaciéaa un lado ya otro de fa membrana, () Estado final. Se hha movida agua hacia la solucién del compuesto no pesmeante, die Iuyendola y clevando la columea de agua destro del tubo, Enel fequiibrio, la fuerza de grave que acta sobwe a solucion que hay fe! tubo equlliira exactament la teadencia det agua a moverse: hhaca el interior det tubo, donde su concentacin es meno. (€) La resin astica (se mide comm I fuerza que es neces aplear para devolve la slucidn del tubo al rive de adel vaso. sta fuerza ‘6 proporcional ala tur, fi, de fa column er (b,FIGURA 2-13 Efecto de Ia osmaaridad extracellar en el movi ‘mento del agua a través de una membrana plasmitiea, Cuando una ‘élulaen equilbrie osmskico can el entorna que a rude fest €5, en un medio istinico) (a) se transfiere a una solucinhipetnies 0) 8 una soluctinhipotinica (eel agua Faye através de la membrana plasmatica en la dneccién que tienda iguala a oxmolaridad dentro fuera de a cul. ‘macromoléculas (proteinas, écidos nacleicos, poliseéridas) ‘ener un efecto mucho menor en a osmolaridad de una iso clon que la que tenudria una misma masa de sus componentos ‘monoméricos, Por ejemplo, un gra ce un pol'sacdrdo com> puesto por 1000 unaces de glucosa tiene el mismo efectaen |n osmolaridad que un mitigramo de gluoosa Un efecto det al- ‘macenariento de combustible en forma de polisacdridos (al- ridin o sucégeno) en vez de come glicosa u otros anicares simples es el de ovitar un aumento enorme de la presién os- motica en la eélula de depésito ‘Las plantas uilzan Ia prestn osmtien pars conse ig dea mecdnica. La concentractin muy elovada dé olito én as ‘acuolasimpulsa agua hacia el interior dela cdl (Fig, 2-13), La presion osmdtica resultante contra la pared celular (pre sion de turgencla) proporeora rigidea al célla, al tej y al ‘organismo vegetal Cuarido Ia leeuuga de su ensalada ge mar- chita es debioa que la péctida de agua ha reducido ba presin de turgencia.Akeracianes repentinas en la presién de tirgencin roducen el moviiento ce paces dela planta que se observa en plantas sensibles al tacto como la Venus atrapzmoseas y ln mi ora (Recuado 21), [La demosis también tiene conseciencias en los protocolos de Laboratorio, Las mitoconcrias, cloroplastosy lsatortas, por tjemplo, estan rodeados de membrana semipermeables. Para isla estos organulos a partir de células rotas, los bioguimicos «leben llevar a cabo los fraccionarnientos en dsoluciones isot- nicas (héase Fig. 1-8). Loss tampones wliizados en os fraccio- ‘arientos celulares contienen normalmente concentraciones suficientes (alrededor de 0,2 m) de sacarosa 0 algtin otro s0- Jtoinerte para proteger los angina de ia isis osmética. RESUMEN 2.1 Interacciones débiles en los sistemas acuosos ‘= Las muy diferentes electronegatividades del H y del @ hacen delagua una molécula muy polar, capaz de formar enlaces de hidrégeno consigo misma y con sus solutes. Las enlaces de hidrégeno son de vida ceflmera, prineipalmente electrostations y ms dbiles ‘que los enlaces covalentes, Bl agua es un buen isolvente de sohutos palares (hidrofiiens), cor. tos que forma enlaces de hidrigeno, y de ealtas ccargados, con los que interaeriona, electrastatieamente, © Los compuestos no polares (hidrafBbicos) no se disuclven bien en el agua; no pueden formar enlaces de hidrégeno can el disolvente y su presencia induce lun ardenamiento energéticamente desfavorable de ‘moléculas de agua alrededor de sus superfcies hhidrofobicas. Para minimizar la superficie expuesta al ‘gua, ls compuesios no polares come por ejemplo los Hipidos forman agregadlos (miselas) en Kea que sus ‘partes hidrofbbicas se hallan seeuestracas en} interior, asoeidndose a través de interacciones, hicrofobieas, y solv las partes mas polares interaccionan con el agus ‘= Numerosas interacciones débiles no covalentes, influyen decisivamente sobre el plegamienta de macromoléculas tales como las proteinas ons dcklos nueleicos. Lis conformaciones maeromeleculares mas estables son aquellas en las que se maximiza el niimero de enlaces.de hidrégeno en el interior de la ‘moléculay entre la moléeulay el digelvente, y en las ‘que las zonas hidrofobicas se agrupan en el interior de Ja molécula,lefos del disolvent acuoso. ‘= La concentrackin de los solutos tiene tna gran Jnflvencia sobre las propiedadtes fsicas de Las disoluciones acuosas. Cuando se separan dos ‘comnpartindentos acunsos mediante una. mermbrana semipermeable (tal corno la membrana plastica ‘que separa la Célula de su entorno}, el agua faye a ‘través de esta membrana hasta iqualar la osmalaridad de Tos dos compartimientos, Esta terdencia del agua a uly través-de la membrana semipermeable recibe el ‘nombre de presién osnsétiea2 Interasciones débiles en los sistemas acuosos 5B CSIs No) pee Ma Tee De aE UL Ter) Respuesta téctil en plantas: un fenémeno osmético [Las hnjasaltamente especializacs de Ia Venus atrapamoseas ‘{Pionaca muscipulit) se ‘unt ligero togue de un insecto de insecto para su posterior digestion, Ateaide par el mde ae ta superficie de las hajas ramet wrovenido, atraparndo a 3 inseeto toca tres pelas mecink ensibles, des lenando el cierre en forma de tvathpa de la hoja (Fig, 1}. Este movimiento de la hoja es producido por ripidas variaciones (en. (5.5) en lapresidin de tuugencia de las células mesoflas las celulasinteriores de ka Hoja), probablemente producidas por la Uberacién de ianes K* de las células yel consiguiente Mnjo resultante de agua hacia tuera por dsinosis. Glindulae digestivas en la suport cia de Ia hoja eran erwin que extruen sitrieites del in La planta sensible (Mimasa pudica) también experi ‘menta un eambio destacable en la forma de las hojas ceser- ‘carlemaclo por un toque mecanico (Fig. 2). Un ligeto toaue 0 vibracién preduce un repentino decaimiente de las hejas, te sullado de una subita reduecion de ta presicn, en las cétulas de enla turgencia tnase de cada faliolo y hoja, Al igual que ¢ alrapamoseas, la caida de presiéin de turgencia fs el resultado de la uberacién de jones K* seguica del hyo hac fuera ee gus, FIGURA1 Respuesta tit en la Venus atraparnoncas, Una mosca quese acerea una hojaabierta (a) es arapeds pra su digest por ls plana FQURA2 Las hojas en forma ce puma dea planta sensible (a ‘iertan ycacn () para prateger ala planta de daios estucales i) po el vont,