Anti-HCV
Sau khi ủ, liên hợp kháng thể đơn dòng kháng IgG
Kháng thể kháng vi rút viêm gan C (CLIA)
Thông tin đặt hàng
Danh mục số Kích cỡ đóng gói
Anti-HCV111 2×50 tests
Anti-HCV112 2×100 tests
Mục đích sử dụng
Xét nghiệm Anti-HCV sê-ri CL là xét nghiệm miễn dịch
hóa phát quang (CLIA) để xác định định tính kháng thể
kháng virus viêm gan C (Anti-HCV) trong huyết thanh
hoặc huyết tương người.
Tóm tắt
Virus viêm gan C (HCV) là một loại virus RNA sợi đơn
dương có vỏ bọc, đã được phân loại là một chi riêng
trong họ Flaviviridae. Đây là nguyên nhân phổ biến nhất
gây ra bệnh virus truyền qua đường máu 1-3 cũng như
viêm gan không phải loại A, B mắc phải từ cộng đồng
trên toàn thế giới4. Bộ gen HCV bao gồm ~ 9,5 kb mã
hóa cho một polypeptide 3000 axit amin của các miền
cấu trúc và phi cấu trúc5. Giống như các virus RNA khác
cùng với sự biểu hiện không đồng nhất đáng kể do hậu
quả của các đột biến xảy ra trong quá trình sao chép
của virus. Sự hiện diện của kháng thể kháng HCV chỉ ra
rằng một cá nhân có thể đã bị nhiễm HCV, có thể chứa
HCV truyền nhiễm và / hoặc có thể có khả năng truyền
nhiễm virus HCV6. Các xét nghiệm kháng thể kháng
HCV được sử dụng một mình hoặc kết hợp với các xét
nghiệm khác (ví dụ: HCV-RNA) để phát hiện nhiễm
trùng với virus viêm gan C và để kiểm tra máu và các
sản phẩm từ máu của những người bị nhiễm HCV.
Nguyên lý đo
Xét nghiệm Ant-HCV sê-ri CL là xét nghiệm sandwich
hai điểm để xác định mức độ kháng thể kháng vi-rút
viêm gan C.Trong bước đầu tiên, mẫu, dung dịch xử lý
mẫu, các vi hạt thuận từ được phủ kháng nguyên HCV
tái tổ hợp được thêm vào một cuvette phản ứng. Sau
khi ủ, kháng thể kháng HCV có trong mẫu liên kết với
kháng nguyên HCV được phủ trên các vi hạt. Sau đó,
các vi hạt được thu từ tính trong khi các chất không
liên kết khác được loại bỏ bằng cách rửa.Trong bước
thứ hai, dung dịch pha loãng và liên hợp kháng thể đơn
dòng kháng IgG gắn alkaline phosphatase được thêm
vào cuvet phản ứng.
2016-03 V1.0 Anti-HCV Page 1 of 4
người liên kết với kháng thể kháng HCV thu được trên
các vi hạt. Các hạt vi mô được thu từ tính trong khi các
chất không liên kết khác được loại bỏ bằng cách
rửa.Trong bước thứ ba, dung dịch cơ chất được thêm
vào cuvet phản ứng. Nó được xúc tác bởi alkaline
phosphatase trong phức hợp miễn dịch thu được trên
các vi hạt. Phản ứng hóa phát quang thu được được đo
bằng đơn vị ánh sáng tương đối (RLU) bởi một bộ nhân
quang được chế tạo bên trong hệ thống. Một mối quan
hệ trực tiếp tồn tại giữa lượng kháng thể kháng HCV
trong mẫu và RLU được tạo ra trong phản ứng.Sự hiện
diện hay vắng mặt của kháng thể kháng HCV trong
mẫu được xác định bằng cách so sánh tín hiệu phát
quang của phản ứng với tín hiệu cắt được xác định từ
hiệu chuẩn hệ thống. Chỉ số cắt (COI) được tính bằng
RLU mẫu / RLU cắt.
Thành phần thuốc thử
Bộ thuốc thử bao gồm bốn thành phần: Ra, Rb, Rc và
Rd. Thành phần không thể bị hoán đổi và thông tin chi
tiết của từng thành phần được liệt kê dưới đây：
Các vi hạt thuận từ được phủ bằng kháng
Ra nguyên HCV tái tổ hợp trong dung dịch đệm
MES có chất bảo quản.
Kháng thể đơn dòng kháng IgG người gắn
Rb Alkaline phosphatase trong đệm MES với chất bảo
quản.
Mẫu pha loãng trong dung dịch đệm HEPES với chất
Rc
bảo quản.
MES đệm với chất bảo quản.
Rd
Vị trí của từng thành phần thuốc thử được hiển thị trong hình
bên dưới (Mặt trước ở bên trái và mặt trên ở bên phải):
Lưu trữ và ổn định
Thuốc thử Anti-HCV (CLIA) chưa mở vẫn ổn định đến một
năm khi được bảo quản ở 2-8 0C, ngày hết hạn thực tế
được ghi trên nhãn.
Thuốc thử Anti-HCV (CLIA) có thể được lưu trữ trên tàu ở
2-8 0C và được sử dụng trong tối đa 28 ngày sau khi mở.
P/N: 046-006260-00 (1.0)
Chuẩn bị thuốc thử
Ra: Sẵn sàng sử dụng
Rb: Sẵn sàng sử dụng
Rc: Sẵn sàng sử dụng
Rd: Sẵn sàng sử dụng
Vật liệu yêu cầu nhưng không được cung
cấp
Máy phân tích xét nghiệm miễn dịch hóa phát quang
Mindray seri CL.
Cat. No. Anti-HCV211: Anti-HCV Calibrators, 1×2.0mL
cho mỗi mức hiệu chuẩn C0 và C1.
Cat. No. Anti-HCVN311: Kiểm chứng âm Anti-HCV
3×2.0mL.
Cat. No. Anti-HCVN312: Kiểm chứng âm Anti-HCV,
6×2.0mL.
Cat. No. Anti-HCVP311: Kiểm chứng dương Anti-HCV,
3×2.0mL.
Cat. No. Anti-HCVP312: Kiểm chứng dương Anti-HCV,
6×2.0mL.
Cat. No. CS511: Dung dịch cơ chất, 4×115mL.
Cat. No. WB411: Dung dịch đệm rửa.
Ống phản ứng.
Hệ thống thiết bị
Máy phân tích xét nghiệm miễn dịch hóa phát quang
Mindray seri CL.
Thu và chuẩn bị mẫu
Huyết thanh người và huyết tương thu thập trong ống
chứa natri heparin và lithium heparin được khuyến cáo
cho xét nghiệm này. Thu thập tất cả các mẫu máu
theo các biện pháp phòng ngừa thông thường cho lấy
máu tĩnh mạch. Thực hiện theo khuyến nghị của nhà
sản xuất ống thu thập máu cho ly tâm. Ly tâm các
mẫu sau khi kết thúc quá trình đông máu. Một số mẫu,
đặc biệt là những bệnh nhân được điều trị bằng thuốc
chống đông máu có thể biểu hiện thời gian đông máu
tăng lên. Vui lòng đảm bảo rằng fibrin còn lại và các
vật liệu tế bào đã được loại bỏ trước khi phân tích.Để
có kết quả tối ưu, kiểm tra bọt khí trong tất cả các
mẫu . Loại bỏ bọt khí bằng đầu côn trước khi phân
tích. Mẫu phải được trộn kỹ sau khi rã đông. Các mẫu
đã rã đông nên được ly tâm trước khi sử dụng. Nếu
mẫu được phủ lớp lipid sau khi ly tâm, mẫu phải được
chuyển sang ống sạch trước khi xét nghiệm. Không
chuyển lớp lipid.
2016-03 V1.0 Anti-HCV Page 2 of 4
Xử lý cẩn thận để ngăn ngừa nhiễm chéo. Không sử
dụng mẫu bị ly tâm quá mức. Không sử dụng mẫu bị
bất hoạt nhiệt.Mẫu phải được kiểm tra càng sớm càng
tốt sau khi lấy. Nếu xét nghiệm không được hoàn
thành trong vòng 8 giờ, mẫu phải được bảo quản ở 2-8
° C hoặc lạnh hơn. Mẫu vật sẽ ổn định trong 7 ngày ở
2-8 ° C, 3 tháng ở -20 ° C. Tránh nhiều hơn năm chu
kỳ làm đông.
Quy trình xét nghiệm
Để thực hiện tối ưu xét nghiệm này, người thao tác nên
đọc kỹ hướng dẫn vận hành hệ thống liên quan, để có
đủ thông tin như hướng dẫn vận hành, quản lý, bảo
quản mẫu, phòng ngừa an toàn và bảo trì. Chuẩn bị tất
cả các vật liệu cần thiết cho xét nghiệm.
Trước khi nạp bộ thuốc thử anti-HCV (CLIA) vào máy
lần đầu tiên, chai thuốc thử chưa mở phải được đảo
ngược nhẹ nhàng ít nhất 30 lần để đảo đều các vi hạt
đã lắng trong quá trình vận chuyển hoặc bảo quản.
Kiểm tra bằng mắt để đảm bảo các vi hạt đã được
đồng nhất hóa. Nếu các vi hạt vẫn dính chặt vào chai,
tiếp tục đảo ngược cho đến khi các vi hạt đã về dạng
huyền phù. Nếu các vi hạt không thể đồng nhất hóa,
không nên sử dụng chai thuốc thử này. Liên hệ với bộ
phận Dịch vụ khách hàng của Mindray để được giúp
đỡ. Không đảo ngược chai thuốc thử đã mở.
Xét nghiệm này cần 20 μL mẫu cho một lần xét
nghiệm. Thể tích này không bao gồm thể tích chết của
ống chứa mẫu. Thể tích thêm vào là cần thiết khi thực
hiện các thêm các xét nghiệm khác từ cùng một mẫu.
Người vận hành nên tham khảo hướng dẫn vận hành
hệ thống và yêu cầu cụ thể của xét nghiệm để xác
định thể tích mẫu tối thiểu.
Bộ hiệu chuẩn
Thông tin hiệu chuẩn được lưu trữ trong mã vạch được
đính kèm trong gói thuốc thử và mẫu hiệu chuẩn. Khi
thực hiện hiệu chuẩn, quét thông tin từ mã vạch vào
hệ thống trước, sau đó kiểm tra bộ hiệu chuẩn ở hai
mức. Cần hiệu chuẩn trước khi có bất kỳ xét nghiệm
Anti-HCV nào. Việc hiệu chuẩn lại được khuyến nghị cứ
sau 4 tuần hoặc khi sử dụng lô thuốc thử mới hoặc các
giá trị kiểm chứng nằm ngoài phạm vi chỉ định. Để
được hướng dẫn chi tiết về hiệu chuẩn, hãy tham khảo
hướng dẫn vận hành hệ thống.
P/N: 046-006260-00 (1.0)
Bộ kiểm chứng (QC)
Để xác minh độ tin cậy của hệ thống xét nghiệm, Kiểm
chứng nên được chạy ít nhất một lần trong 24 giờ, sau
khi gói thuốc thử mới được nạp hoặc sau mỗi lần hiệu
chuẩn. Kiểm chứng được đề xuất cho xét nghiệm này là
kiểm chứng dương và âm HCV Mindray.
Kết quả QC phải nằm trong phạm vi chấp nhận được.
Nếu một mức QC nằm ngoài phạm vi chỉ định của nó,
kết quả của các kiểm tra liên quan là không hợp lệ và
các mẫu phải được kiểm tra lại. Hiệu chuẩn có thể
được yêu cầu. Kiểm tra hệ thống xét nghiệm, tham
khảo hướng dẫn vận hành hệ thống. Nếu kết quả QC
vẫn nằm ngoài phạm vi được chỉ định, vui lòng liên hệ
với Dịch vụ khách hàng của Mindray để được trợ giúp.
Tính toán
Máy phân tích sê-ri CL tự động tính toán RLU cắt
(Cutoff RLU) bằng RLU trung bình từ ba lần lặp của
mức hiệu chuẩn C0 và hai lần lặp lại của mức hiệu
chuẩn C0 và lưu kết quả. Sau đó, máy phân tích tính
toán kết quả Anti-HCV dựa trên RLU cắt bằng cách
tính toán sau.Cutoff RLU = [(RLU trung bình của C1 -
RLU trung bình của C0) x Hệ số hiệu chuẩn] + RLU
trung bình của C0. Hệ số Hiệu chuẩn cụ thể cho từng
tổ hợp lô thuốc thử và lô hiệu chuẩn. COI = RLU mẫu /
RLU cắt.
Giải thích kết quả
Các mẫu có COI <1,00 là không phản ứng trong xét
nghiệm Mindray Anti-HCV. Những mẫu này không cần
xét nghiệm thêm.Các mẫu có COI≥1.00 có phản ứng
ban đầu trong xét nghiệm Mindray Anti-HCV. Tất cả
các mẫu Phản ứng ban đầu nên được chuyển vào ống
ly tâm và ly tâm ở mức ≥10,000 RCF (Lực ly tâm
tương đối) trong 10 phút và kiểm tra lại 2 lần. Nếu COI
<1,00 trong cả hai lần xét nghiệm lại, mẫu được coi là
Không phản ứng với Anti-HCV. Nếu COI> 1,00 trong
một trong hai lần xét nghiệm lại, mẫu là phản ứng lặp
lại với Anti-HCV. Các mẫu phản ứng lặp lại nên được
điều tra thêm bằng các xét nghiệm bổ sung như xét
nghiệm miễn dịch đặc hiệu HCV khác và xét nghiệm
immunoblot hoặc kết hợp các xét nghiệm NAT.
Hạn chế của xét nghiệm
Kết quả Anti-HCV của một mẫu nhất định có thể khác
nhau, trong các xét nghiệm từ các nhà sản xuất khác
nhau, do sự khác biệt trong phương pháp xét nghiệm,
2016-01 V3.0 Anti-HCV Page 3 of 4
hiệu chuẩn và độ đặc hiệu của thuốc thử. Các kết quả
xét nghiệm nên được sử dụng cùng với các dữ liệu
khác, chẳng hạn như các triệu chứng, kết quả của các
xét nghiệm khác và lịch sử lâm sàng, vv để đưa ra
quyết định lâm sàng.
Đặc tính hiệu suất
Độ nhạy
400 mẫu đã được khẳng định là dương tính với Anti-
HCV bằng phương pháp tham chiếu. Xét nghiệm
Mindray Anti-HCV trên hệ thống CL-2000i đã phát hiện
399 mẫu dương tính và 1 mẫu âm tính. Tỷ lệ trùng hợp
dương là 99,75%.
Độ chụm
Xét nghiệm Anti-HCV sê-ri CL được thiết kế để có độ
chụm ≤10% (CV cùng thiết bị). Độ chính xác được xác
định bằng cách tuân theo quy trình tiêu chuẩn phòng
xét nghiệm lâm sàng (NCCLS) của Ủy ban quốc gia
(NCCLS) EP5-A2(7). Hai mức QC đã được kiểm tra
đồng thời trong hai lần chạy mỗi ngày, trong tổng cộng
20 ngày, sử dụng một lô thuốc thử và một đường cong
hiệu chuẩn duy nhất. Các dữ liệu chính xác được tóm
tắt trong bảng dưới đây.
Anti-HCV trung CV trong CV giữa CV trong
Mẫu cùng lần các lần cùng
bình (COI) chạy thiết bị
chạy
Kiểm chứng âm 0.21 2.09% 5.34% 8.09%
Kiểm chứng dương 3.93 2.48% 1.69% 3.34%
Độ đặc hiệu
Huyết sắc tố lên tới 500 mg / dL, bilirubin lên đến 20
mg / dL, triglyceride lên tới 3000 mg / dL và protein tổng
lên tới 10 g / dL sẽ không gây nhiễu xét nghiệm Anti-TP
của CL-series. Với các chất này ở nồng độ được chỉ định,
sự khác biệt là <0,1 COI trên mẫu âm tính và ＜ 10%
COI trên mẫu dương tính. Không có sự gây nhiễu rõ ràng
đã được quan sát từ yếu tố thấp khớp (lên đến 1000 IU /
mL) hoặc kháng thể kháng nhân. Xét nghiệm Mindray
Anti-HCV được đánh giá cho các chất phản ứng chéo tiềm
năng từ các cá nhân có điều kiện y tế không liên quan
đến nhiễm HCV. Ít nhất 5 mẫu chứa mỗi mầm bệnh có
khả năng gây nhiễu của các loại sau (HAV, HEV, HBV,
CMV, HSV, HIV-1/2, Toxo, RV, TP, EBV, E.coli) được xét
nghiệm bằng Mindray Anti-HCV và một bộ thuốc thử
tham chiếu. Tất cả các kết quả đều phù hợp giữa xét
nghiệm Mindray và xét nghiệm tham chiếu.
623 mẫu đã được khẳng định là âm tính với Anti-HCV
bằng phương pháp tham chiếu. Xét nghiệm Mindray Anti-
HCV trên hệ thống CL-2000i đã phát hiện 621 mẫu âm
P/N: 046-003269-00 (3.0)
tính và 2 mẫu là dương tính. Tỷ lệ trùng hợp âm là
99,68%.
Cảnh báo và đề phòng
1. Chỉ dùng trong chẩn đoán in vitro.
2. Thực hiện theo tất cả các quy tắc trong việc xử
lý thuốc thử trong phòng xét nghiệm và thực
hiện các biện pháp phòng ngừa an toàn cần
thiết.
3. Do sự khác biệt về phương pháp và độ đặc hiệu
của kháng thể, kết quả xét nghiệm của cùng một
mẫu có thể khác nhau khi sử dụng bộ thuốc thử
từ các nhà sản xuất khác nhau trên hệ thống
Mindray hoặc sử dụng bộ thuốc thử Mindray trên
các hệ thống khác.
4. Không sử dụng bộ dụng cụ thuốc thử quá hạn sử
dụng.
5. Không sử dụng thuốc thử trộn từ các lô thuốc
thử khác nhau.
6. Luôn giữ gói thuốc thử ở vị trí thẳng đứng để đảm
bảo không có vi hạt nào bị mất trước khi sử dụng.
7. Gói thuốc thử mở hơn 28 ngày không được
khuyến cáo sử dụng.
8. Độ tin cậy của kết quả xét nghiệm không thể
được đảm bảo nếu các hướng dẫn kèm theo
không được tuân theo.
9. Tất cả các mẫu chất thải và chất thải phản ứng
nên được coi là có khả năng nguy cơ sinh học.
Việc xử lý mẫu vật và chất thải phản ứng phải
tuân theo các quy định và hướng dẫn của địa
phương.
10. Bảng dữ liệu an toàn vật liệu (MSDS) có sẵn
theo yêu cầu.
3. Aach RD, et al. Hepatitis C Virus Infectionin
Post-Transfusion Hepatitis: An Analysis with First-
and Second-Generation Assays. N Engl J Med
1991;325:1325-9.
4. Alter MJ, et al. Risk Factors for Acute Non-A, Non-B
Hepatitis in the United States and Association with
Hepatitis C Virus Infection. JAMA 1990;264:2231-5.
5. Major ME, Feinstone SM. The Molecular Virology of
Hepatitis C. Hepatology 1997;25(6):1528-1538.
6. Choo QL, et al. Hepatitis C Virus: The Major
Causative Agent of Viral Non-A, Non-B Hepatitis. Br
Med J 1990;46:423-41.
7. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
Precision Performance of Quantitative Measurement
Method; Approved Guideline –Second Edition.
© 2016 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co.,
Ltd.
Đã đăng ký bản quyền
Nhà sản xuất: Shenzhen Mindray Bio-Medical
Electronics Co., Ltd.
Địa chỉ: Mindray building, Keji 12th Road South, Hi-
tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen, 518057
P.R.China
E-mail: service@mindray.com.cn
Tel: +86-755-26582888
Fax: +86-755-26582680

Đại diện EC: Shanghai International Holding Corp.

Biểu tượng đồ họa GmbH (Europe)
Địa chỉ: Eiffestraβe 80, Hamburg 20537, Germany
Tel: 0049-40-2513175
Fax: 0049-40-255726

Thư mục
1. Alter HJ, et al. Detection of Antibody to Hepatitis C
Virus in Prospectively Followed Transfusion
Recipients with Acute and Chronic Non-A, Non-B
Hepatitis. N Engl J Med 1989;321:1494-500.
2. Esteban JI, et al. Hepatitis C Virus Antibodies Among
Risk Groups in Spain. Lancet 1989;ii:294-7.

2016-03 V1.0 Anti-HCV Page 4 of 4 P/N: 046-006260-00 (1.0)