Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados BOQUE IIT. FISIOLOGIA VEGETAL TEMAS’, FOTOSENTESIS. “TENDS A/10/11 = 7.1, Lntroduccién. 7.2. El aparato fotosintético vegetal: Estructura, elementos y organizacién 7.3 Fotosintesis: Absorcién y conversién de la energfa luminosa 7.3.1, Reacciones que capturan energia, 7.3.2, Reacciones de reduccién y asimilacién del diéxido de carbono: Ciclo de Calvin 7.3.3. Factores que regulan la actividad del CFRC 7.4, Fotorrespiracién 7.5. Otros mecanismos de asimilacién fotosintética del COZ. 7.6. Asimilacién fotosintética de otros bioelementos primordiales. 7.7, Resumen. 7.8. Bibliografia utilizada Las plantas son capaces de absorber y convertir la energia pero no de crearla, La naturaleza se ha impuesto a si misma la tarea de cémo cazar al vuelo la luz que fluye hacia la tierra y de almacenar a mds elusiva de las energias de forma estable. Para conseguir este propésito ha cubierto la corteza de la tierra de organismos que en sus procesos vitales absorben la luz del sol y utilizan su energia para prodacir continvamente una acumulacién de diferencia quimica. Estas arganismos son las plantas: ef reino vegetal constituye la despensa en que los fugaces rayos solares son fijados y almacenados para su uso posterior: una medida econémica providencial a fa que va inexorablemente unida la propia existencia Fisica de la raza humana, (Mayer, 1845), 7.1 Introduccién Los organismos autotréficos , entre los que se incluyen la inmensa mayoria de los vegetales, constituyen la puerta por la que la energia y la materia se incorporan ala biosfera, mediante el proceso de fotosintesis, Por una parte , estos organismos son capaces de transformar la energia luminica procedente del sol en energia quimica utilizable en las reacciones metabdlicas, Por otra parte, el diéxido de carbono asimilado en los érganos fotosintéticos constituye, junto con el hidrégeno procedente del agua y los elementos minerales absorbidos por las rafces, la base estructural del crecimiento de los vegetales y en consecuencia de la produccién primaria de los ecosistemas y la biosfera. poves: der Tema oy pee ot has edoplGn ers \sGraiy air. Sentvae UL sHID DRMetabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados Por todo ello la fotosintesis es un proceso fundamental para la vida en la tierra’, 7.2. El aparato fotosintético vegetal: Estructura, elementos y organizacién La fotosintesis en plantas superiores tiene lugar en tejidos fotosintéticos que se agrupan en su mayorfa en érganos especializados. Estos érganos son las hojas. La luz solar es una radiacién que se dispersa en toda la atmésfera terrestre, para cprovecharla al méximo es necesario exponer la mayor cantidad de tejido a los fotones incidentes, de ahi la gran superficie foliar que suelen tener los vegetales. Las hojas son también por esta razén, generalmente planas, como pequefios paneles solares que se pueden orientar a los rayos solares para tratar de absorber de modo dptimo toda la luz que necesitan, ‘Ademés las plantas tienen habitualmente muchas hojas pequefies para lograr otras ventajas funcionales: * Distintas hojas pueden tomar distintas orientaciones, adapténdose a la incidencia luminosa que cambia a lo largo del dia con el movimiento del sol. *« La disipacién térmica en un elemento sometido a radiacién solar es mucho mds eficaz si es pequefio y tiene proporcionalmente una gran superficie en contacto con el aire. En la fig. se muestra una hoja con los compuestos que intervienen en la reaccién global fotosintética. Dos son gases -CO; y H20) intercambiados con la altmdsfera, el producto final es un sdlido hidrosoluble, azucar (CH20), y el sustrato primero agua (HO) es un liquide tomado por las raices, que se puede transformer en gas (vapor de agua) por evapotranspiracién segiin las necesidades hidricas y metabélicas de la planta El oxigeno, el diéxido de carbono y otros gases entran en la hoja principalmente a través de aberturas especiales, los estomas. Los gases y el vapor de agua llenan los espacios existentes entre las células de la capa esponjosa, entrando y saliendo de las células por difusidn. El agua, absorbida por las raices, entra en la hoja por medio de los vasos del xilema del haz conductor, en tanto que los aziicares, producto de la fotosintesis, dejan la hoja a través de un tejido conductor conocido como floema, viajando a otras partes de la planta, entre ellas, los érganos no fotosintetizantes, La seccidn de la hoja se relaciona con el gradiente de penetracién de la luz, siendo éste dependiente de la estructura tisular de la seccién de la hoja. Los tejidos internos de la hoja estén completamente encerrados por células epidérmicas tronsparentes, cubiertas con una capa cerosa, la cuticula, La mayor parte de la fotosintesis se realiza en las células del mesofilo en empalizada, células alargades, compactadas y con una gran densidad de cloroplastos que se * Entre las miltiples aplicaciones derivadas del conocimiento o la manipulacién de la fotosintesis se. incluyen: la mejora de la produccién de los cultives, la comprensién de les diferencias de productividad entre diferentes ecosistemas o la prediccién de los efectos cambiantes ambientales sobre la composicién y productividad de las comunidades vegetales.Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados encuentran directamente por debajo de la epidermis superior -haz-. Luego estén las células de! meséfilo lagunar, cercanas al envés, son irregulares y dejan muchos huecos 0 espacios llamados cdmaras subestomdticas, esenciales para el intercambio gaseosos regulado por los estomas, A este segundo tipo tisular le llega menos luz y por ello tiene menor densidad de orgénulos fotosintéticos, Como vemos, las hojas estén constituidas esencialmente por tejidos fotosintéticos, es decir, por células que tienen en su interior la maquinaria necesaria para la fotosintesis, A nivel celular, esta maquinaria se localiza especifica y exclusivamente en unos orgdnules subcelulares llamados cloroplastos. Estos orgdnulos son el elemento comtin presente en todas las célulos fotosintéticas eucariotas, desde las plantas superiores hasta las algas unicelulares y pluricelulares. Los cloroplastos son orgénulos separados del citosol celular por una doble membrana denominada envuelta o envoltura cloropléstica; la membrana externa es bastante permeable -debido a la presencia de la proteina porina- y rodea a la membrana interna la cual tiene permeabilidad més selectiva, Esta Ultima a su vez, parece estar en conexién con un complejo sistema membranoso que constituye parte esencial del interior cloropldstico, Las membranos del interior del cloroplasto constituyen los tilacoides, y forman un sistema intrincado de membranas tilacoidales que se pliegan dando dobles membranas, a modo de léminas paralelas més o menos separadas o apiladas. La fig. muestra las distintas estructuras vegetales que contienen el aparato fotosintético, desde lo macroscépico a lo microscépico, es decir, desde las hojas hasta los tilacoides, pasando por el tejido foliar y los cloroplastos. Los tilacoides estén constituidos por biomembranas®, es decir bicapas lipidicas. La composicién lipidica -lfpidos polares muy especificos como galactolipidos, sulfolipidos y fosfolipidos’- es determinante de la fluidez de la membrana y de la movilidad de las protefnas insertadas en ella. Gran parte de la funcién fotosintética realizada en los tilacoides es solamente posible por el hecho de estar basados en membranas. Los complejos fotosintéticos que realizan la primera fase de la fotosintesis se insertan transversalmente en las membranas tilacoidales. Con esta insercién los complejos quedan insertados en dos espacios acuosos diferentes, Ademés las membranas son un fluido bidimensional donde los complejos fotosintéticos pueden moverse, Este movimiento lateral dentro de la matriz bidimensional, de la ‘membrana tilacoidal, permite cambiar y regular la funcién de las proteinas fotosintéticas en respuesta a disitntas situaciones metabélicas ya que con el * Las membranas biolégicas estén constituidas por una doble capa de lipides anfipéticos, es decir, lfpidos que tienen ura cabeza polar en contacto con el medio acuoso y una cola hidréfoba que se sita hacia el interior de la membrana en contacto con la cola de la capa opuesta. Por estas caracteristicas quimicas las membronas son barreras semipermeables entre espacios acuosos que compartimentan el medio interno celular 0 lo separen del exterior. 9 Junto a estos lipidos que construyen la bicapo, existen en los tilacoides otros Iipidos con Funciones distintes, como son la poreja plostoquinona/plastoquinol que son transportadores redox, o el tocoferol, que es una molécula tipo prenilquinono que tiene funciérantioxidante. También son Iipidos los pigmentos fotosintéticos clorofilas y carotencides.Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados movimiento, se pueden producir variaciones en las conexiones entre los distintos elementos. Los tilacoides plegados formando esas ldminas paralelas de dobles tmembranas se llaman lamelas. Existen dos tipos de lamelas: las lamelas grana que constituyen apilamientos de numerosas ldminas a modo de discos y las lamelas estomdticas que son Idminas simples mds extensas que interconectan zonas de lamelas apiladas. Las lamelas grana y estromdticas, al estar hechas por dobles membranas tilacoidales plegadas, dejan un espacio acuoso en su interior denominado lumen, que queda separado del espacio acuoso interno general del cloroplasto llamado estroma. El estroma es la matriz acuosa principal de! cloroplasto, ocupa el mayor volumen y puede ser considerado andlogo al citosol de una célula. En el estroma se localiza en disolucién el aparato biomolecular que realiza la segunda fase de la fotosintesis, incluida la via principal de fijacién del diéxido de carbono por el ciclo de Calvin. El lumen es un espacio separado diferente, donde la reaccién mds significativa es la fotolisis del agua que produce oxigeno. Los tilacoides son por tanto biomembranas que separan dos espacios con claras diferencias en composicién y funcién, Por otro lado los tilacaides no son iguales en todo el cloroplasto sino que son asimétricos presentando internamente una polaridad transversal y una distribucién zonal lateral a primera fase de la fotosintesis es una fase de conversién de energia que incluye la formacién de una cadena redox de transferencia de electrones y la consecuente generacién de un gradiente de concentracién de protones, Los tilacoides contienen los cuatro complejos proteinicos* que llevan a cabo ese manejo de electrones y protones imprescindible para la conversién energética, Los tres primeros estén implicados en la transferencia electrénica a lo largo de la membrana y en la transferencia proténica a través de la membrana -del estroma al lumen-; realizan estas transferencias porque son complejos protefnicos transmembrana que contienen engarzada en su esqueleto una serie de moléculas con capacidad redox reversible. Dos de estos complejos son fotosistemas: el fotosistema I y el IZ, es decir sistemas capaces de absorber y transformar la energia foténica en energia electroquimica redox. El tercer complejo, es un sistema conector entre ambos fotosistemas llamado complejo citocromo bef, este complejo no es exclusivamente fotosintético y su principal funcién es concetar los dos fotosistemas, oxidando el plastoquinol producido en el fotosistema IT y reduciendo la plastocianina que se oxidard en et fotosistema I; el cuarto complejo, la ATP sintetasa, es distinto, pues no interviene en las transferencias citadas, sino que utiliza el gradiente de protones que los otros complejos han originado a través del tilacoide para sintetizar ATP en el lado estromdtico a partir de ADP y Pi.> * Los mumeresos polipéptidos que integran estos cuatro complejos proteinicos fotosintéticos estén codificados por dos geromas, el DNA que existe dentro del cloroplasto y el DNA nuclear de coda lula vegetal. ® Los protones, al fluir de vuelta del lumen al estroma a favor de gradiente, proporcionan una energia fuerza proténnotriz- que el cuarto complejo utiliza para sintetizar ATP, a partir de ADP y Fi. Este, Fo(4Fe ~ AS)---Fd" El elemento central P700 es un dimero de clorofilas a, acopladas exciténicamente. Estas clorofilas absorben la energia, Estas clorofilas absorben la energia exciténica y se comportan como un elemento unitario capaz de coltar un ALMetabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados electrén y dar lugar a un radical catiénico oxidante 700’. El electrén soltado pasa @ Ay que es también una clorofila a, Ao cede el electrén a una fitoquinona la vit Kt nombrada Al, A continuacién intervienen en la transferencia tres grupos sulfoférricos constituides por cuatro dtomos de hierro y 4 dtomos de azufre (4Fe -AS), denominados F, , Fs y Fs . Tras la reduccidn de Fx, los siguientes cofactores FA y FB no reciben los electrones consecutivamente sino alternativamente, es decir el flujo electrénico paso por uno u otro de modo alternado en equilibrio. Un punto especialmente importante y significativo de la cadena redox fotosintética es la primera reaccién en la cual se produce la oxidacidn del agua - fotolisis del_aqua-. En esta reaccién los vegetales originan como subproducto oxigeno molecular, gas que difunde fuera del cloroplasto y de la célula y es soltado ala atmosfera aa través de los estomas’”. La oxidacién del agua, se hace quimicamente en una séla etapa, libera O2 a la atmosfera y protones y electrones que son los que van a reducir el CO2 en la etapa asimiladora de la fotosintesis 02 +4Ht+ 4e- La produccién de una molécula de oxigeno requiere dos moléculas de agua y la pérdida de 4 electrones . El proceso requiere la participacién de iones Cl-, Ca2+ y Mn2+ y tiene lugar en la cara interna de los tilacoides (pag. 219 Barcelé, fig.12.4). En ella, una protefna con Manganeso puede aceptar hasta 4e- sucesivamente de dos moléculas de agua. Probablemente a través de otros transportadores los e- pasan sucesivamente al P680+ (oxidado) y al resto de la cadena fotosintética transportadora de electrones. El flujo principal es lineal desde el agua al NADP; pero en ciertas circunstancias, el flujo electrénico puede seguir las llamadas vias cfclicas’®. En estas vias ciclicas los electrones no llegan hasta el NADP+, sino que fluyen de un modo ciclico en torno a un fotosistema mediante una reconexién hacia atrés, desde elementos redox de potencial negativo que han recibido los electrones de P*(excitado) hacia los elementos redox de potencial més positivo que son donadores de Pr, Es decir, los electrones son devueltos desde la ferredoxina, hacia los elementos anteriores de la cadena fotosintética, en un ciclo mediado por el pool de plastoquinonas y por su complejo de oxide reduccién intermediario -el complejo citocromo béf-. Este flujo ciclico no produce NADPH, sino que utiliza parte de la energia redox acumulada después del fotosistema I en bombear protones a través de la membrana fotosintética y a la vez disipa el resto de la energia en forma de calor - por el aumento de entropia en el proceso ciclico-. Este movimiento de protones "” Todos los organismos heterstrofos somos dependientes de ese oxigeno para nuestros procesos vitales, ya que nuestra bioenergética celular se besa en la respiracién que necesita oxigeno como sustrato esencial, '8 Los flujos ciclicos son un proceso de interrupcién del transporte electrénico lineal entre los fotosistemas T y IT. Los flujos cfclicos provocan que en un cierto paso redox, el electrdn vuelva @ ser ‘tomado por un elemento de la cadena por el cual ya habfa pasado. 12Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados aumenta el gradiente de pH utilizado luego por la ATP sintetasa para obtenerATP, lo que da lugar a la llamada fotofosforitacién ciclica, que energéticamente es menos eficiente que la lineal, ya que una parte importante de la energia es disipada en forma de calor”, Como hemos visto, los cloroplastos sintetizan ATP a partir de ADP y Pi por quimiosmosis, proceso que esta estrechamente acoplada al flujo fotosintético de electrones. Esta fosforilacién al estar promovida por la luz se denomina fotofosforilacién © fosforilzacién fotosintética. Es catalizeda por el Ultipo macrocomplejo enzimético anclado en la membrana tilacoide que es la ATP sintetasa, que no interviene en el flujo electrénico sino que utiliza la energia acumulada por la cadena redox fotosintética en forma de fuerza o energia protén motriz para sintetizar ATP. El proceso es el siguiente, la energia liberada del flujo de electrones se usa para bombear protones desde el estroma hacia el espacio tilacoidal, a través de la membrana, acumuldndose éstos en los tilacoides. Los protones son en realidad hidrogeniones, de modo que su acumulacién disminuye el pH del interior de los tilacoides. La difusién hacia el exterior de los hidrogeniones en alta concentracién en los tilacoides sélo es posible en determinados puntos, presentes en la membrana tilacoidal en los que esté presente una ATP sintetasa -llamada complejo CFo-CF1. Al cruzar los protones el complejo CFo-CF1, se libera energia y la ATP sintetasa cataliza la produccién de ATP. El mecanismo intimo de la fotofosforilacién ha podido ser comprendido gracias a la teoria quimiosmética formulada en el afio 1961 por el bioquimico inglés Mitchell (premio Nobel de quimica, 1978) que dice que /a energia de oxido reduccién que se libera cuando los electrones caen desde desde un nivel de potencial a otro inferior no se utiliza directamente en la sintesis de ATP, sino que ‘se almacena como estadio intermedio en forma de energia dcido-base gracias a la generacién de un gradiente electroguimico de protones a través de la membrana tilacoidal, De acuerdo con la hipétesis de Mitchell, el gradiente electroquimico de protones que se genera a uno y otro lado de la membrana tilacoidal -que es sélo ligeramente permeable a las especies iénicas, particularmente a los protones- durante el transporte de electrones actua como forma intermediaria de energia entre la energia redox y la energia de enlace fosfato del ATP. Segtin Mitchell, el transporte vectorial de protones, acoplado al transporte de electrones desde el estroma hasta el lumen tilacoidal es consecuencia de la disposicién asimétrica, a uno y a otro lado de la membrana, de transportadores de electrones que alternativamente unen o no protones®, Ademds de los sitios de ” En este flujo ciclico, junto al fotosistema T interviene el complejo citocromo b6f y a través de él, se da una translocacién de protones del estroma al lumen cuya acumulacién es la fuerza que va a permitir la sintesis de ATP acoplada a la cadena fotosintética » ‘lo largo de la cadena de transporte electrénice fotosintética existen determinados puntos -los lcmados sitios de acoplamiento- en los que el flujo de electrones se acopla con el movimiento de protones a través de la membrana tilacoidal. 13‘Metabolismo vegetal: Fotosintesis respiracién y procesos relacionados cacoplamiento la propia fotooxidacién de! agua en el lumen tilacoidal y la propia reduccién de los piridin nucledtidos (NADP+) en el estroma cloroplético son reacciones que conllevan liberacién y captacién de protones como producto y sustrato respectivamente. Estas reacciones contribuyen por lo tanto a la creaccién del potencial electroquimico de protones a través de la membrana del tilacoide - gradiente transmembranal de protones-. Generalmente se acepta que la energla redox que se libera durante el transporte de electrones se conserva parcialmente como energia electroquimica de protones y que la sintesis de ATP a partir de ADP y Pi tiene lugar posteriormente cuando los protones acumulados en el interior de los tilacoides (H') son transportados de vuelta a la fase estromética externa (He) por un complejo multiproteico que atraviesa la membrana de uno a otro lado. Dicho complejo se denomina ATP-sintetasa y cataliza la reaccién: ADP +Pi+n Hy —» ATP + H20 + nH," Donde n es el niimero de protones implicados en la sintesis de una molécula de ATP. La sintesis de ATP es un proceso endergdnico y el cémbio de energia libre que requiere la reaccién en condiciones esténdar depende de la concentracién de Mg2s, fuerza iénica, temperatura, etc. En condiciones normales esta energia es de 33 kT mol-1, (més informacién en pég.203 y ss del libro fotobioqufmica) 7.3.2. Reduccién y asimilacién de! diéxido de carbono: Ciclo de Calvin La fotosintesis es un proceso complejo, en el que intervienen miltiples reacciones bioguimicas. Como hemos visto en esta primera fase, la clorofila absorbe energia luminosa que se convierte de inmediato en energia eléctrica, conforme los electrones fluyen desde la molécula de clorofila. Una parte de esta energia se usa en la sintesis de ATP por quimiosmosis, proceso por el cual la energia eléctrica se convierte en quimica. Otra parte de la energia luminosa captada por la clorofila se usa en la disociacién del agua, proceso denominado fotolisis, Se libera oxigeno del agua y el hidrégeno de ésta se combina con el aceptor de hidrdgeno NADP+ con la formacién de NADPH. De nuevo la energia eléctrica se convierte en energia quimica”. Las reacciones de esta primera fase de la fotosintesis, llamadas también reacciones fotodependientes ocurren sélo en presencia de luz. Al conjunto de reacciones que contintan se les denomina reacciones fotoindependientes ya que no dependen directamente de la luz solar, pero dependen de los productos de las reacciones fotodependientes. Aunque en esta segunda fase se puede hablar de aquellas reacciones enziméticas que aunque no promovidas directamente por la luz , se sirven del poder "1 Yemnos pues como la energia de la luz que absorben los pigmentos fotosintéticos se utiliza Finalmente para la sintesis de poder reductor (Ferredoxina reducida y NADPH) y energia quimica de enlace fosfato (ATP), productos que Amnon ha denominado poder esimilatorio (og, 219 De la Rosa) 14Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados asimilatorio generado en la fase lumninosa de la fotosintesis para la conversién de los sustratos inorgdnicos de los que se alimentan las plantas (didxido de carbono, nitratos o dinitrégeno, sulfatos o fosfatos) en los complejos productos bioquimicos caracteristicos de la materia viva (carbohidratos, lipides, proteinas y écidos nucleicos)**, nosotros vamos a tratar exclusivamente de la reduccidn asimilatoria del carbono. La resultante del conjunto de reacciones de la fotosintesis puede sintetizarse mediante la siguiente ecuacién: 6CO2 + 12 HeO + Hv --~- CeHy2Og + 6 HzO + 602 En general en las plantas terrestres, el CO2 se incorpora desde la atmosfera, a través de los estomas. En las algas y plantas acudticas procede del CO2 disuelto en el agua circundante, hy representa la energia luminosa transformada en ATP y NADPH y CoHiz0g es la férmula general para designar a los carbohidratos de seis unidades de carbono sintetizados en este proceso”. La fijacién fotosintética del carbono constituye uno de los procesos mds importantes que tiene lugar en la superficie de nuestro planeta, Dejando aparte el carbono orgdnico presente en la biosfera y en las reservas de combustibles fésiles, este elemento se reparte entre la atmésfera, en la que se encuentra como anhidrido carbénico CO2 y de la que constituye el 0.03% en volumen (300 ppm) o sea 3 ml por cada 10 |,; las aguas continentales o marinas en as que se encuentra disuelto en equilibrio con su forma hidratada (H2CO3) y sus dos formas aniénicas, bicarbonato y carbonato y las rocas calizas, constituidas fundamentalmente por carbonates de calcio y magnesio, también en equilibrio por erosién, disolucién y formacién de depésitos con las aguas continentales, Los organismos fotosintéticos utilizan el CO2 para la sintesis de los carbohidratos y demés compuestos carbonados precursores en definitive de las sustancias orgdnicas de todos los seres vivos, De hecho las plantas son los organismos que mayoritariamente reciclan el CO2 atmosférico producido por la respiracién y la combustidn, La mayoria de los organismos fotosintéticos asimila el CO2 mediante la ruta metabélica conocida como ciclo fotosintético de reduccién del carbono (CFRC) o ciclo de Calvin. Calvin y cols, as{ como otros grupos de investigacién en los affos cincuenta y gracias al uso de “C, consiguieron dilucidar la ruta completa de asimilacién del diéxido de carbono, con todos sus intermediarios, asi como las enzimas que catalizan las distintas reacciones, Esta ruta demostraba tratarse de un ciclo bioquimico, Este ciclo se conocié con el nombre de sus descubridores Calvin- Benson-Bassham, aunque modernomente se tiende a simplificar como ciclo % Es importante recordar, que mientras la reduccién asimilatoria de los compuestos oxidados de ritrégeno necesita tnicamente poder reductor, la reduccién asimilatoria del carbono ~asi como la del azufre 0 el dinitrégeno- requiere tanto de poder reductor NADPH como de energia écido-base. en forma de ATP. %3 Seqin esta ecuacién, la produccién de un mol de carbohidrates (hexosa) requiere el consumo de seis moles de diéxido de carbone y seis de aguo. El proceso lleva asociado la liberacién de seis moles de oxigeno al ambiente. 15Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados fotosintético de reduccién del carbono (CFRC), ciclo reductivo de las pentosas- fosfato 0 ciclo de Calvin. (Fig. 11.4 del Azeén péig.176). Con los datos obtenidos, Calvin y col., postularon un ciclo en cuyo funcionamiento repetido, se utilizan moléculas de CO2 y se producen hexosas™. El ciclo de Calvin tiene lugar en el estroma o matriz soluble de los cloroplastos de los eucariotas fotosintéticos -algas y plantas- y en el citoplasma de los procariotas -bacterias fotosintéticas y cianoficeas-, En su conjunto esté integrado por trece reacciones secuenciales catalizadas por once enzimas ditintos de los que sélo cuatro (ribulosa- 1,5-bifosfato carboxilase, NADP-gliceraldehido-3- fosfato deshidrogenasa _fosforilante, _ sedoheptulosa-1,7-bifosfatasa fosdforribuloquinesa) son exclusives de esta ruta metabdlica. Bésicamente, se diferencian tres fases: a) Fase carboxilativa que implica la fijacién inicial del CO2 -es decir su inclusién en un compuesto orgénico- que tiene lugar por carboxilacién de la RuBP (Ribulosa 1 5-bifosfato). b) Fase reductiva, en ella se produce ILa reduccién del carbono fijado a hidratos de carbono -reduccién de intermediarios metabdlicos- que requiere el aporte de energia y poder reductor generados mediante la cadena de transporte electrénico. c) Fase regenerativa, que conlleva la regeneracién de la RuBP -reordenacién de productos- y que requiere también aporte energético. Cada etapa puede incluir subetapas de activacién o empuje exergénico con ATP aunque sélo la fase reductiva y la regenerativa consumen energia de enlace fosfato en forma de ATP. En general, excepto probablemente en algunas bacterias las etapas 2% y 3% son idénticas en todos los organismos fotosintéticos. En cambio existen diversos mecanismos para la etapa 1°, es decir, otras vias de fijacién y asimilacién del CO2 que estudiaremos al final del capitulo. a) La fase de carboxilacién consta de una séla reaccidn en la que una molécula de CO2 se fija a una molécula de RuBP, formando un compuesto intermediario inestable de seis carbonos que esponténeamente se hidroliza en dos moléculas de PG (fosfoglicerato). La reaceién global es muy exergénica y esté catalizada por la ribulosa -1,5- bifosfato carboxilasa/oxigenasa (RuBisCo)*° considerada la proteina més abundante de la biosfera, La reaccién de carboxilacién se desarrolla en cinco pasos todos los cuales estan catalizados por la RuBisCo. Como se refleja en la fig.11.4 (pag, 176 Azcén. Ciclo de Calvin) estequiomé- tricamente es necesaria la fijacién de tres moléculas de CO2 para que el carbono pueda avanzar hacia la sintesis de hidratos de carbono con la consiguiente * Seis moléculas de RuBP con seis de CO2, se transforman en 12 de 3-PGA; estas doce moléculas sufren una serie de transformaciones como resultado de las cuales se produce una molécula de hexosa y con los treinta dtomos de carbono restantes, se generan otras seis moléculas de RuBP. Por cade molécula de CO2 esimilado se consumen tres de ATP y dos de NADPH. °5E| nombre de carboxilasa/oxigenosa se debe a que Ia Rubisco también cataliza la oxigenacién de la RuBP, La rubisco es una enzima de clto peso molecular (560 kDa) compuesto por dieciséis subunidades. La actividad de la rubisco esté regulada por varios efectores (pH, Mg2s, CO2) en respuesta ala iluminacién, siendo activo el enzima en la luz e inactivo en ka oscurided). 16Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados regeneracin completa de RuBP, ya que el primer intermediario de la sintesis, es un compuesto fosfatado de tres dtomos de carbono. Se describiré globalmente el CFRC en términos de fijacién de tres moléculas de CO2. Por lo tanto en esta primera fase tras la incorporacién de tres moléculas de CO2, a tres moléculas de RuBP, se obtienen seis moléculas de PG, b) Fase de reduccién, En esta segunda fase el PG se reduce a 3-PGA por el ién hidruro del NADPH, requiriendo la reaccién energia de enlace fosfato”’. El proceso conjunto transcurre en dos reacciones secuenciales, la primera consiste en la fosforilacién del PG, cada una de las 6 moléculas de PG es fosforilada con consumo de una molécula de ATP, en una reaccién catalizada por la PG quinasa (que opera también en la glucdlisis y la gluconeogénesis). Dando lugar a la formacién de 6 moléculas de 1,3-bifosfoglicerato (BPG). La segunda secuencia consiste en la reduccidn del 1,3-bifosfoglicera a 3-GAP (gliceraldehido 3-fosfato) por la giceraldehido 3-fosfato deshidrogenasa (en clgunos libros viene como NADP-GP deshidrogenasa fosofrilante), que consume poder reductor en forma de NADPH. El resultado neto de esta fase son 6 moléculas de 3-PGA. c) La fase de regeneracién consta de diez reacciones de interconversiones entre moléculas de ozucares fosfato que tienen de tres a siete dtomos de carbono”, siendo el resultado neto de la misma la transformacién de cinco moléculas de 3-GAP (5 x 3C) en tres moléculas de ribulosa 5-fosfato (3 x 5C) - proceso en el que se genera fosforo inorgdnico- que son finalmente fosforiladas por la fosforribuloquinasa con gasto de ATP, para regenerar las tres moléculas de RuBP, que cierran el ciclo y que pueden de este modo volver al comienzo de un nuevo ciclo, siendo la molécula de 3-GAP que falta, derivada a la sintesis neta de carbohidratos -triosas fosfato-, mientras como hemos visto las otras cinco participan en la regeneracién de la RuBP**, A partir de los ciclos descritos, a ecuacién que resume el ciclo de Calvin puede sintetizarse en la siguiente expresién: 6CO, + 12 NADPH +18 ATP + ® CcHi0,+ 12 NADP+ +18 ADP + 18 Pi + 6 HO Como hemos visto, en cada “vuelta” completa del ciclo, ingresa en él una molécula de didxido de carbono, Aqui se resumen seis ciclos, el nimero requerido para elaborar dos moléculas de gliceraldehido-fosfato, que equivalen a un aziicar de seis carbonos”*, % En efecto la reduccién del PG a 3-PGA con NADPH como donador de electrones es termoding= micamente desfavorable y requiere ATP para salvar la barrera nergética ® Para que pueda darse la regeneracién es necesaria la interconversién de GAP en dihidroxiacetona- fosfato (DHAP), compuesto similar al GAP salvo por que posee el grupo carbonilo en el interior de la ‘molécula (acetona) en lugar de en un extreme (aldehfdo). (los siguientes pasos en pég, 177 de Azcén) emt, 7 Las neacciones implicadas en la regeneracién de la RuBP son similares a las de la via de las pentosa- fosfato, presente tanto en plantas como en animales. Sélo la ditima enzima implicada, la foforribule- quinasa, se encuentra exclusivamente en los cloroplastos. #9 Hay que sefialar que la asimilacidn del CO2 a carbohidrato conlleva la reduccin parcial del carbono del estado oxidado +4 al del 0, lo cuel constrasta con los procesos de asimilacidn del nitrato y sulfato ue implican reduccién total de los correspondientes bioelementos. 7‘Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados La molécula "extra" de gliceraldehido fosfato representan la ganancia neta del ciclo de Calvin, Estas moléculas son el punto de partida de numerosas reacciones que pueden implicar, nuevas rutas de biosintesis de distintos compuestos. ‘Aunque las triosas fosfato (GAP 0 DHAP) son los productos resultantes de la fijacién del CO2 por el ciclo de Calvin , estos compuestos carbonados no se acumulan en el cloroplasto sino que se exportan al citoplasma celular, donde se utilizan en principio para la sintesis de dcidos orgénicos, atninodcidos y aziicares de reserva como sacarosa y altmidén Por lo tanto, ademds de los carbohidratos, algunos aminodcidos -algunos de los esenciales como feucina, valina, isoleucina y lisina-, todos los écidos grasos que se encuentran en los vegetales -que también son sintetizados por otros plastos- isoprenoides -este grupo incluye sustancias de interés esencial para la fotosintesis como carotenos y xantofilas; otros isoprenoides cumplen funciones hormonales importantes como el dcido abscfsico, las giberelinas y los esteroides- se sintetizan en el cloroplasto a partir del carbono fijado en la fotosintesis. La sintesis de sacarosa y de otros productos que son transportados por el floema tiene lugar en el citosol”, La sacarosa es un disacdrido no reductor que resulta de la unién fructosa-glucosa por sus carbonos 2 y 1 respectivamente. Es el compuesto que las plantas usan de forma mds generalizada para transporter reservas de carbono asimilado de unas estructuras a otras. El exceso de triosa fosfato que no se utiliza en la sintesis de sacarosa se convierte en almidén, que actua de sustancia de reserva de carbono en la mayorfa de las plantas de manera similar a la funcién del glucégeno en células de animales y hongos. En los cloroplastos se encuentra como pequefios grdnulos, mientras que en los amiloplestos de estructuras no fotosintéticas, se encuentran como grande grénulos, La sintesis del almidén es similar a la de la sacarosa y sélo difiere en los dos ltimos pasos. (pég.178 de Azcén y 248 ss de Borcelé). El ditimo paso en la sintesis de almidén consiste en la unién de moléculas de glucosa para formar un polimero con dos tipos de cadena: la atnilosa -cadenas lineales de glucosa- y la amilopeptina que forma cadenas de ramificacién lateral La sintesis y el almacenamiento del almidén tiene lugar en el propio cloroplasto, para ser movilizado y exportado durante la noche. De esta manera los cloroplastes pueden proporcionar carbono reducido al resto de fa planta tanto de dia como de noche, El almacenamiento de carbono en forma de almidén permite mantener velocidades altas de fotosintesis, alin cuando la sintesis de sacarosa sea més lenta®, % El proceso de exportacién a través de la membrana del cloroplasto esté cotalizedo por una pretetna inteinseca de la membrana interna de este orgénulo que promueve la entrada de una molécula de PG 0 de ortofosfate por cada molécula de triosafosfato que sale. 3 Ello tiene lugar mediante un mecanismo de intercambio de triosas- fosfato con Pi procedente del citosos, a través de un transportador de la membrana interna del cloroplasto -una permecsa- Explicaci6n tb en pég. 247 de Barcel. La acumulacién de la fructosa ~2,6-bifosfato inhibe la sintesis de sacarosa con el consiguiente aumento de triosas fosfato en el citosos. Este incremento produce a su vez la inhibicién del 18Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados Por lo tanto, la mayor parte de! carbono fijado por la planta se distribuye finalmente en cuanto a carbohidratos de reserva se refiere en los dos mds abundantes en los tejidos fotosintéticos, el almidén en los cloroplastos y la sacarosa en el citoplasma y en fa vacuola. Sin embargo, gran parte del carbono fijado se utiliza para la sintesis de otros carbohidratos de gran importancia para el mantenimiento de la estructura de la célula vegetal eucariética: celulosa, hemicelulosa y peptinas (pig. 229 del de la Rosa), “Resumen de la fotosint Serie de reacciones Resumen del proceso Materiales necesorios | Productos terminales a. Reacciones fotodependientes | Lc energia de |a luz solar se usa que ocurren en las membranas | para disociar el agua, producin de los tilacoides ATP y reducir el NADP 1. Reacciones fotoquimicas ‘Se energiza la clorofila que enel|Energia luminosa y Electrones centro de reaccién cede sujpigmentos (clorofila) electrén energizado a una molécula aceptora de electrones 2. Transporte de electrones | Se transportan los electrones|Electrones, NADP:,| NADPH y Oz fen una cadena de aceptores de|H2O y aceptores de electrones de las memebranas jelectrones tilacoidales; los electrones rreducen el NADPF: la disociacién del agua permite tener una parte de los protones (H+) que se acumulan en el espacio tilacoidal 3. Quimiosmosis Los protones (H+) cruzan la|Gradiente de proto- ATP membrana tilacoidal conforme a| nes, ADP + Pi un gradiente de protones, por conductos especiales se libera energia que sirve pora producir ATP. B, Reacciones fotoindependien- | Fijacién del carbono: se usa CO2 | Bifosfato de ribulosa, | Carbohidratos, ADP + tes que ocurrenenel estroma | para producin azucar cO2, ATP, NADPH y| Pi NADP+ enzimas 7.3.3.Factores que regulan la actividad del CFRC En la prdctica el ciclo de Calvin sélo funciona en condiciones de iluminacién que proporcionan ATP y NADPH producidos por las reacciones de captura de energia en la primera etapa de la fotosintesis; de hecho existen mecanismos reguladores espectficos -que actian sobre las etapas irreversibles del ciclo- que impiden que el ciclo de Calvin pueda funcionar en la oscuridad. En general los factores que regulan la actividad del CFRC son: los meconismos reguladores de la rubisco, la disponibilidad de sustratos (COZ y RuBP) para su transporte de las triosa fosfato del estroma al citesol, Como resultado global el exceso de carbono ‘asimilado se desvia hacia la sintesis de olmidén en el cloroplasto (pig. 227 s5 del de la Rosa) 19Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados actividad carboxilasa, y la regulacién de otras enzimas del CFRC. (Mayor explicacin de esto es la pig. 245 y ss de Barcelé y 181 ss de Azcén), Fotorrespiracién En presencia de oxigeno, los organismos fotosintéticos degradan oxidativamente parte de los carbohidratos que ellos mismos fotosintetizan, el proceso se llama fotorrespiracién-, ya que depende de la luz y del oxigeno. La fotorrespiracién es consecuencia del hecho de que, la RuBisCo es la enzima de que depende la fijacién del CO2 en el ciclo de Calvin -actividad carboxilasa-, sin embargo, en ciertas condiciones e incluso en condiciones de atmésfera normal (21% de 02 y 0,036% de CO2) la rubisco ** puede catalizar la reaccién de la RuBP con una molécula de 02 en lugar de con un CO2 -es decir acta como oxigenasa entre un 25 y un 30% de las veces-, Esta actividad oxigenasa de la rubisco es el comienzo de un proceso llamado fotorrespiracién, denominado asi porque: ocurre durante la luz diurna, requiere O2 como la respiracién aerobia y produce CO2 y H2O como la respiracién aerobia, sin ‘embargo se diferencia de esta en que no almacena energia en forma de ATP. Los sucesivas fases de la fotorrespiracién tienen lugar en una serie de reacciones llamadas ciclo C2 0 ciclo fotorrespiratorio. Esta ruta C2 supone utilizar oxigeno -en el primer paso a cargo de la rubisco y después en el peroxisoma- y liberar COZ -en la formacién de serina- por lo que reune caracteristicas de proceso respiratorio, ademés es dependiente de la luz -al contrario que la respiracién mitocondrial; ademds este proceso es estimulado por concentraciones crecientes de O2 mientras que la respiracién mitocondrial no-, por lo que recibe el nombre de fotorrespiracidn , estd presente en todos los vegetales y aunque reduce el rendimiento energético del CO2, y por lo tanto reduce la eficacia fotosintética, puede ser importante para disipar excesos de poder reductor**, Ademds la fotorrespiracidn se favorece con la temperatura ya que ésta favorece la actividad oxigenasa y disminuye la solubilidad del CO2 disuelto en agua. El proceso fotorrespiratorio implica la formacién de glicolato , bien como producto final, bien como intermediario y conlleva una pérdida de la productividad potencial del organismo que lo realiza®®. Veamos como ocurre: La primera reaccién y probablemente la més importante de la ruta C2 es la oxigenacidn de la RuBP catalalizada por la rubisco que conduce a la excisién de la pentulosa en dos fragmentos de tres (3-PGA) y dos carbonos (dcido * Conviene recordar que a la ribulosa bifosfato carboxilasa se la conoce también como ribulosa bifesfato carboxilasa/oxidasa (RuBisCo) pues, aunque Fosee mayor afinidad por el CO2, si fa presién parcial de 02 en el estroma es suficientemente alta funciona como oxidasa, * Como vemos, A diferencia de la respiracién mitocondrial la fotorrespiracién requiere la presencia de luz para regeneral la RuBP y la energia desprendida en la oxidacién de la ribulosa no est acoplada ola sintesis de ATP. 5 Muchas plantas C3 inclufdas elgunas de importancia agricola como la soja, el trigo o la patata, no generan tanto carbohidrato en la fotostntesis como cabrfa esperar, fundamentalmente en los dias Cdlides del verano. 20Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados foosfoglicélico). Se inicia con ello la ruta del glicdlico en la que se consume ATP y poder reductor y se desprende parte del CO2 anteriormente fijado, El fosfoglicolato formado en el cloroplasto por oxigenacién de la RuBP es répidamente hidrolizado a glicolato por una fosfatasa especifica. Mediante un transportador espectfico el glicolato sale del cloroplasto y difunde hacia el peroxisoma. En este el glicolato es oxidado a glioxilato generdndose agua”. El glioxilato sufre posteriormente una transaminacién produciéndose glicina. La glicina deja el peroxisoma y entra en la mitocondria donde el complejo glicina descarboxilasa descompone una molécula de glicina liberando amoniaco”” y CO2 y dejando libre el otro carbono de la glicina que se une a un transportador de carbono que lo dona a otra glicina para formar serina. Tanto Ia glicina como la serina pueden utilizarse para formar proteinas pero en su mayor parte serén metabolizadas para formar 3-PGA en el cloroplasto. El 3.PGA se reintegra al ciclo de Calvin, La fotorrepiracién es una ruta sin aparentes beneficios y que reduce fuertemente la eficiencia de la fotosintesis, sin embargo es inevitable, Ain asi, lo que si puede conseguirse es minimizarla aumentando la concentracién de COZ 0 reduciendo la presencia de 2 en la rubisco. En condiciones naturales la fotorrespiracién es particularmente significativa en plantas C3, que pueden perder por esta via hasta el 50% del carbono asimilado fotosintéticamente, mientras que su incidencia es poco importante en plantas C4, CAM y microalgas. En efecto, diversos tipos de plantas de evolucidn reciente y frecuentemente de zonas cdlidas y dridas han desarrollado mecanismos -C4 CAM y otros- de concentracién de CO2 en el entorno de la RuBisCo™ y reducir la incidencia de la fotorrespiracién a minimos, 7.5. Otros mecanismos de asimilacién fotosintética del CO2. La asimilacién del CO2 en la fotosintesis se realiza bésicamente conforme a las rutas bioquimicos explicadas; junto a estas rutas, sin embargo se han descubierto posteriormente procesos bioquimicos y modificaciones morfolégicas que cambian sustancialmente el CFRC. La importancia de estos proceso en diferentes tipos de plantas es desigual y depende en buena parte de las condiciones de crecimiento Como sabemos, el CO2 entra en la hoja por diminutos poros llamados estomas que se abren y se cierran en respuesta a factores como el contenido de agua y la intensidad de la luz -por ejemplo, en dias secos y calientes las plantas cierran los estomas para conservar el agua-. Cuando estén cerrados los estomas, en las plantas % En el peroxisome hay grandes contidades de catalase, por lo tanto al generarse glioxilato y peréxido de hidrégeno, este ditime mediante la catalasa pasa a.aguo. 7 La pérdida de nitrégeno orgénico como amonio se reasimila via glutamina sintetasa con gasto adicioral de ATP, * En condiciones de elevada iluminacién y bajas concentraciones de CO2 en el meséfilo -por ejmplo en un cierre estomatico como respuesta a la sequia o a la salinidad- la fotorrespiracién puede ser una via para disipar el exceso de ATP y NADPH generado en los tilacoides,previniéndose los daiios que indirectamente pudieran causar al oparato fotosintético.. 21Metabolismo vegetal fotosintesis respiracién y procesos relacionados €3 disminuye mucho el aporte de CO2 y se desacelera de manera considerable la fotosintesis®, Algunas plantas que ocupan principalmente zonas cdlidas y en algunos casos Gridas 0 semidridas han desarrollado un sistema que les permite mejorar la fijacién del CO2 fijéndolo en forma de dcido mélico 0 aspértico para liberarlo después en el entorno de la rubisco. Puesto que los primeros productos de la fijacién del CO2 tienen 4 dtomos de carbono a estas plantas se las conoce como plantas C4 -maiz, cafia de azucar y bastantes malas hierbas que crecen en verano-. Las plantas C4 ademds de este mecanismo han desarrollado una anatomia particular del meséfilo ~anatomia Kranz- que refuerza la separacién espacial de las dos carboxilaciones y Ia eficacia del mismo. En estas plantas las células del meséfilo en vez de formar el parénquima lagunar y en empalizada, se asocian alrededor de los haces conductores formando una vaina espesa de células clorofilicas grandes con los cloroplastos agrupados en la periferia y con paredes celulares més gruesas profundamente atravesadas por los plasmodesmos que comunican las células de la vaina y las de! meséfilo, Rodeando los haces vasculares se encuentran células clorofilicas més pequeds, las células de la vaina con cloroplastos més grandes que los del meséfilo, con poca grana y con almidén. Comparada con la anatomia C3 esta disposicién genera una mayor proporcién de espacio aéreo, dentro de la hoja alrededor de las células del meséfilo, asf como un contacto directo de las células de la vaina con el floema. En conjunto esta disposicién del meséfilo facilita la difusién del CO2 y en cierta forma canaliza més estrechamente el flujo del carbono en el espacio y a nivel bioquimico. El ciclo C4 comprende bésicamente cuatro etapas: 1. Asimilacién del diéxido de carbono al fosofoenolpiruvato -PEP- que es un compuesto de 3C, que implica la carboxilacién del fosfoenol piruvato (PEP) en las células del meséfilo para formar dcidos C4. En el caso de que fuera oxalacetato (4C) *° este se convierte en Malato. 2. Transporte de dcidos de cuatro carbonos a las células de la vaina, 3. Descarboxilacién de estos dcidos en las células de la vaina -para generar piruvato (3C) si es malato el 4C- y C02, Malato + NADP Piruvato + CO2 + NADPH El CO2 liberado de las células de la vaina es fijado por la Rubisco y reducido a carbohidratos por via del CFRC. 4, Regreso a las células del meséfilo del dcido C3 -piruvato o alanina- formado por descarboxilacién de los écidos C4 y regeneracién del aceptor del CO2 -fosofeenolpiruvato- mediante su reaccién con ATP. » La concentracién efectiva del CO2 en el meséfilo es baja, puesto que en la atmosfera lo es y existen diversas barreras, sobre todo la apertura estomética, que limitan el flujo del CO2 a la rubiseo. Ademés mantener abiertos los estomas tiene un coste elevado en pérdidas de agua por trenspiracién seaccidn catalizada por la carboxilasa de fosfoenol-piruvato enzima que posee alta afinidad por el 602 y lo Fija con eficacia incluso en concentraciones bajas 22Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados Podemos distinguir tres tipos de plantas C4 de acuerdo con la enzima que descarboxila en la vaina los écidos C4, Nombre del[ Ac. C4 principal en| Enzima de descar-|Ac. C3 devuelto al ejemplos ‘subtipo las células de la| boxilacién Jas células del ving - meséfile : NADP-ME | Mdlico Enzima imélica | Piruvato Maiz, cafia de dependiente del ‘azucar, sorgo NADP (cloroplesto) NAD-ME- Aspértico Enzima. mélica | Alanina Panicum dependiente de! milliaceum NAD (mitocondria) PEP-CK ‘Alanina/pirwvato | Fosfoerolpiruvato | Alanina/piruvato | Panicum méxirnun carboxiquinasa (citoplasma) Subtipos del ciclo fotosintético C4 La funcién del mecanismo C4 es aumentar la concentracién de CO2 en las células de la vaina -hasta 10 a 60 veces respecto a las C3- para que ocurra el ciclo C3 en ésta La combinacién de los mecanismos C3 y C4 requiere el gasto de 30 moléculas de ATP por cada una de hexosa, en vez de 18 de ATP usadas en ausencia del mecanismo C4, este sobregasto permite que la concentracién de CO2 sea mds alta en las células de la vaina. Como vemos, cuando la luz es abundante, el indice de fotosintesis estd limitado por la concentracién de CO2, de modo que estén en posicién ventajosa las plantas C4 con valores més altos de Co2 en las células de la vaina fascicular. Las plantas C3 tienen la ventaja con intensidad de luz y temperaturas mds bajas.’* Algunas plantas, en general que viven en condiciones xéricas 0 de extrema sequedad, fijan el CO2 de manera similar pero por la noche -de dia los estomas estén cerrados- y lo transforman en CO2 durante el dia y consiguen asi una seporacién temporal de la carboxilacién inicial y la definitiva -en el ciclo de la rubisco- que le permite aumentar la eficiencia en el uso del agua. En este tipo de plantas, se dé un metabolisino fotosintético especial llamado metabolismo dcido de las crasuldceas CAM™ que ha sido capaz de solucionar el problema del ahorro de agua y la eficiencia fotosintética, Las plantas CAM fijan el COZ por la noche, cuando se abren sus estomas convirtiéndolo en malato, que se almacena en vacuolas. Durante el dia los estomas estén cerrados y es imposible el intercémbio gaseosos entre la planta y la atmésfera el malato se descarboxila ‘para tener de nuevo CO2. En este punto el C02 esté disponible en los tejidos de las hojas para su fijacién en azticares por el * Por ejemplo el centeno invernal, que es una planta C3, crece en abundancia en clima Frio ya que su metobolismo requiere menos energfa que el de una planta CA para fijar el CO2, Este nombre hace referencia a la acumulacién de écidos orgénicos durante la noche por Jas plantas ‘que poseen este mecanisme de fijacién. En cualquier caso la fotesintesis CAM va asocioda normalmente normalmente con hojas suculentos con grandes vacuolas Nenas de agua 23Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados mecanismo C3, que es el comtin en la fotosintesis, En la via CAM la separacién de las dos carboxilaciones no es espacial, como ocurria en las plantas C4, sino ‘temporal, Analizando con algo més de detalle el ciclo CAM tendremos que: (pig. 196 de Azcbn fig 12.7 y 12.9): En las plantas CAM la carboxilacién C4, mediada por la PEP carboxilasa tiene lugar durante la noche en las células del meséfilo. El oxalacetato formado es transformado en malato, forma en la que se acumula el carbono por la noche en estas plantas. Esta transformacién conlleva un gasto de poder reductor y es mediada por la enzima malato deshidrogenasa dependiente de NAD+. El malato acumulado se almacena en las vacuolas de gran tamafio -la concentracién de malato al final de la noche suele ser alta lo que le confiere a estas hojas un cierto sabor dcido al amanecer. Durante el dfa, en presencia de elevada iluminacién -la resistencia estomética aumenta hasta el cierre completo- el malato se libera de la vacuola y se produce la descarboxilacién de! malato acumulado durante la noche a piruvato mediante una de las tres enzimas que cumplen idéntica funcién en las plantas C4, y la utilizacién del C02 liberado por la Rubisco. De este modo al igual que ocurria en las plantas C4, las plantas CAM incrementan la concentracién de CO2 en el lugar activo de la rubisco. El piruvato resultante se transforma en almidén. Durante la noche siguiente el almidén origina por glucélisis moléculas de fosfoenolpiruvato que constituyen el sustrato de la carboxilacién por PEP carboxilasa, cerrdndose as{ el ciclo La separacién temporal de los procesos fotosintéticos en las plantas CAM hace que la asimilacién del carbono tenga lugar durante la noche, cuando la demanda atmostérica de agua es muy baja, de este modo pueden mantener los estomas abiertos sin apenas pérdida de agua y cerrar los estomas durante el dia cuando la demanda atmosférica es mayor. Por tal motivo la fotosintesis CAM se asocia con una elevada eficiencia en el uso del agua. La separacién entre plantas C3 y CAM no es neta, asi existen plantas con metabolismo C3 estricto, metabolismo intermedio C3-CAM, metabolismo CAM estricto, CAM facultative -ejemplo Briophylum que habitualmente es C3 pero en dias cortos y noches frlas es CAM: 0 en la llamada planta del polo ‘Mesembryanthemun crystalinum, en condiciones de stres hidrico induce un ‘ cambio de metabolismo C3 a C4- y otras con metabolismo conocido como CAM\ “iniitil" -es este caso los estomas se mantiene cerrados de dia y de noche de manera que el C02 respirado durante la noche se fija intermitentemente en forma de malato y se reasimila durante el dia, las plantas no pueden crecer ya que no hay ganancia de carbono, pero la pérdida de carbono y agua es extraordinariamente baja de manera que pueden vivir durante mucho tiempo incluso sin sistema radicular (plantas ornamentales que pueden vivir colgadas de una pared. En el ambiente acudtico, una asimilacién del CO2 por difusién como la que se da en plantas terrestres C3 es muy poco efectiva -sélo se da en algunos vegetales acuéticos-. Por todo ello, los vegetales acudticos ~algas unicelulares, pluricelulares, plantas macréfitas acudticas y fanerégamas marinas- han desarrollado diversos mecanismos para concentrar el COZ en el entorno de la rubisco gracias a una 24Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados diversidad de mecanismos de bombeo de carbono inorgdnico, La caracteristica comtin a todos estos mecanismos es que logran una concentracién estable de COZ en el entorno de la rubisco y que esta situacidn excede lo que es habitual en situacién de equilibrio con la atmésfera. (pag. 197 Azcén de mecanismo de. asimilacién det carbono inorgénico por los vegetales acuéticos-). Finalmente, aunque en las condiciones actuales, el factor més limitante para la fotosintesis es la concentracién de CO2, existen numerosos microhdbitat generados por el medio o por las propias plantas, en los que la concentracién de CO2 es localmente alta, asi por ejemplo plantas que viven en el sotobosque cerca del suelo, plantas de zonas urbanas, el componente alga del liquen, etc. 7.6. Asimilacién fotosintética de otros bioelementos primordiales. Este tema se va «a tratar en otro apartade pero conviene tomar aqui unas notas para poder relacionarlo en el tema corvespondiente (pag233 y ss del de la Rosa), Hablaremos de aquellos procesos que aunque no promovidas directamente por la luz, se sirven del poder asimilatorio generado en la fase lumninosa de la fotosintesis para la conversién de los sustratos inorgénicos de los que se alimentan las plantas (diéxido de carbono, nitratos o dinitrégeno, sulfatos o fosfatos) en los complejos productos bioquimicos caracteristicos de la materia viva (carbohidratos, lipides, proteinas y dcidos nucleicos)*?, nosotros vamos a tratar exclusivamente de la reduccién asimilatoria del carbono. Las plantas tienen la capacidad de reducir el nitrato y el sulfato a amonio y a sulfuro o tilo (-SH) respectivamente, e incorporar dichas formas reducidas a moléculas orgdnicas. Este proceso se denomina asimilacién del sulfato y asimilacién del nitrato. Con el fésforo no sucede lo mismo. La asimilacién del nitrégeno por las plantas, esto es la conversién del nitrégeno inorgénico -nitrato o amonio- en nitrdégeno orgdnico -glutamato, glutamina o asparragina) es un proceso que requiere poder reductor, ATP y esqueletos carbonados. El poder reductor y el ATP pueden ser suministrados por las reacciones luminicas de la fotosintesis o por la glucdlisis y respiracién . Ast mismo los esqueletos carbonados son proporcionados por la oxidacién de carbohidratos que en Ultimo término, son formades por reduccién fotosintética del carbono. La asimilacién del azufre constituye una importante via metabélica a partir de la cual las plantas sintetizan una amplia variedad de compuestos orgdnicos azufrades -cisteina, metionina, glutatién-. Tanto la reduccién del sulfato a sulfuro como la incorporacién de este a ‘esqueletos carbonados para dar cisteina ocurren a expensas del poder asi generado con Ia luz. #4 Es importante recordar, que mientras la reduccién asimilatoria de los compuestos oxidados de ritrégero necesita (nicamente poder reductor, la reduccién asimilatoria del carbono -ast como la del azufre 0 el dinitrégeno- requlere tanto de poder reductor NADPH coino de energia écido-base en forma de ATP. 25Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados En contrate con los otros bioelementos primordiales, el fésforo, no cambia su estado de oxido-reduccién (+5) al incorporarse a la materia viva’, sino que sufre un proceso dcido base de energetizacién por el que el anidn ortofosfato libre (HePO,) pasa a metafosfato rico en energia(+PO,*) que se fija al ADP para formar ATP. El fosfato energizado no es sélo fuente de energia para el mantenimiento de las funciones vitales y para la reduccién y asimilacién de los demds elementos biogenésicos, sino que el mismo es constituyente esencial de los componentes moleculares bésicos de los seres vivos especialmente de los fosfolipidos y dcidos nucleicos. El fésforo constituye el bioelemento clave de todo el metabolismo energético celular y el ATP la autentica moneda energética de todos los organismos vivos. Por consiguiente al considerar la fotofosforilacién cabe hablar de energetizacin fotosintética del fésforo. 7.7, Resumen La fotosintesis en plantas superiores tiene lugar en tejidos fotosintéticos que se agrupan en su mayoria en érganos especializados. La fotosintesis en los eucariotas ocurre dentro de organelas llamadas cloroplastos, que estén rodeados por dos membranas. Dentro de los membranas del cloroplasto est contenida una solucién de compuestos orgdnicos ¢ iones, conocida como estroma, y un sistema complejo de membranas internas fusionadas que forman sacos llamados tilacoides, Los tilacoides se apilan formando los grana, Los pigmentos y otras moléculas responsables de la captura de la juz estén situados en las membranas tilacoidales: una serie de membranas internas que se encuentran en los cloroplastos, En los procariotas fotosintéticos, que no contienen organelas internas, los tilacoides pueden formar parte de la membrana celular, pueden aparecer aislados en el citoplasma 0 constituir, como en el caso de las cianobacterias, una compleja estructura de la membrana interna, Para que la fotosintesis funcione es esencial que una parte del aparato biomelecular fotosintético sea sensible a la luz. Esta fotosensibilidad viene dada por la existencia de sistemas moleculares -fotosistemas- que son capaces de absorber la luz, transmitir la energfa absorbida y convertirla en una energia no radiante, estable y acumulada, como es la energfa quitnica. La fotosintesis se inicia con la absorcién de la luz por ciertos pigmento- proteina denominados antena y la posterior canalizcién de la energia de los fotones hacia los centros de reaccién de los fotosistemas, donde la energia se transforma en una corriente de electrones entre moléculas oxido-reductoras. Las reacciones de oxido-reduccién producen en tiltimo término, dos biomoléculas estables (NADPH y ATP) que se van acumulando, Estas biomoléculas son dtiles como fuente de energia asimiladora ya que proporcionan poder de reduccién -el NADPH- y poder de enlace -el ATP- para la siguiente fase. “* Précticamente todo el fésforo presente en los sistemas geolégicos y biolégicos se encuentra en su forma totalmente oxidada (+5): en la corteza terrestre principalmente como sales de calcio altamente insolubles y en los seres vivos como anién ortofosfate libre (pi) o como fosfato orgénico principalmente como esteres de fésfore (pég. 241 de de la Rosa) 26Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados En la segunda fase de la fotosintesis se sucede toda una serie de reacciones de asimilacién de elementos necesarios para la construccién biomolecular. Los elementos constitutivos son tomados de fuentes minerales inorgdnicas como agua, didéxido de carbono, nitratos, sulfatos, etc.- e incorporados en moléculas orgdnicas metabolizables. El elemento esencial y mayoritario en la materia orgdnica es el carbono; el carbono en la fotosintesis es tomado del diéxido de carbono del aire. Estas reacciones, que ocurren en el estroma, forman parte de un proceso denominado Ciclo de Calvin. Ambas fases estén perfectamente coordinadas e interrelacionadas El gliceraldehido fosfato, el azticar de tres carbonos producido por el ciclo de Calvin, puede parecer acaso una recompensa insignificante frente a toda la actividad enzimética de la célula y por nuestro propio esfuerzo intelectual por entenderlo. Sin embargo, esta molécula y las que derivan de ella suministran la fuente energética para virtualmente todos los sistemas vivos y el esqueleto de carbono bésico a partir del cual puede sintetizarse la gran diversidad de moléculas orgdnicas. El carbono se ha fijado, 0 sea, fue transferido del mundo inorgdnico al orgénico. En presencia de oxigeno, los organismos fotosintéticos degradan oxidativamente parte de los carbohidratos que ellos mismos fotosintetizan, el proceso se llama fotorrespiracién-, ya que depende de la luz y del oxigeno, Estd presente en todos los vegetales y aunque reduce el rendimiento energético del 02, y por lo tanto reduce la eficacia fotosintética, puede ser importante para disipar excesos de poder reductor. Tgualmente, la asimilacién del CO2 en la fotosintesis se realiza bdsicamente conforme a las rutas bioquimicas explicadas; junto a estas rutas, sin embargo se han descubierto posteriormente procesos bioquimicos y modificaciones morfolégicas que cambian sustancialmente el CFRC, estos constituyen otras vies de asimilacién fotosintética del CO2. Finalmente decir que existe una estrecha interconexién entre los procesos de fotosintesis y respiracién. En tanto que la fotosintesis constituye el punto de captura de energia de las plantas y -por extensidn- de la casi totalidad de los seres vivos, la respiracién constituye un sistema mediante el cual todos los seres vivos consumen la energia almacenada en los enlaces quimicos. En las plantas, ambos procesos ocurren en forma simulténea. Luego, para que las plantas puedan crecer, la velocidad a la que se realiza la fotosintesis debe exceder la velocidad de la respiracién 7.8.Bibliografia Azcén-Bieto, J.; Talén, M. (2001).- Fundamentos de Fisiologia Vegetal. Ed. McGraw-Hill Interamericana.y Universidad de Barcelona, 155-202, Barcelé, J.; Nicolas, G.; Sabater, B.; Sanchez-Tamés, R. (1992).- Fisiologia Vegetal. Ed. Pirdmide S.A. Madrid. Pég, 211-275, De Ia Rosa, Miguel A.; Hervds, M.; Serrano, A.; Losada, M, (1990).- Fotobioquimica, Coleccién Ciencias de la Vida, Ed. Sintesis. Madrid. 27Metabolismo vegetal: fotosintesis respiracién y procesos relacionados Raven, P.; Evert, R.; Eichhorn, S. (1992). Biologia de las plantas. Ed. Reverté, S.A. Barcelona. Pag. 95-113 Solomén, E; Berg, L.: Martin, D.; Villee, C. (1996).- Biologia de Villee. Interamericana McGraw-Hill. Pég. 173-191 28DIBUJOS TEMAS BLOQUE II: FOTOSINTESIS sss FOSFORILACION CICLICA Y NO CICLICACOMPLEJOS PROTEICOS FOTOSINTETICOS Sess) LUZ (Dia) DescarboxitactinHaz EPIDERMIS: PARENQUINNA ENEMPALIZADA © LEAMA . Spidermis adaxial vascular clorénquima estomaPSII reaction conter Stroma ‘Thylakold. ‘membrane ‘Speciel-pair A photon chlorophylls, Thylakoid oa" O,-evolving complex 2H,O 4H*+O, REPARACION DEL POLIPEPTIDO D1 FOTORRESPIRACION