Professional Documents
Culture Documents
ووﺣﯾدة اﻟﻧﺳﯾﻠﺔ
أ .إﺧﺗﯾﺎر ﺣﯾوان اﻟﺗﺟرﺑﺔ :ﯾﺗم اﺧﺗﯾﺎر اﻟﺣﯾوان ﻋﻠﻰ ﺣﺳب اﻟﻛﻣﯾﺔ
اﻟﺗﻲ ﻧرﯾد ﺗﺣﺿﯾرھﺎ:
•ﻛﻣﯾﺎت ﻛﺑﯾرة :اﻟﺣﯾواﻧﺎت اﻟﻣﺳﺗﻌﻣﻠﺔ ﻛﺑﯾرة اﻟﺣﺟم ﻣﺛل اﻟﺣﺻﺎن ،اﻟﻣﺎﻋز.
•اﻟﻛﻣﯾﺔ )ﻋﻧد اﻟﺣﯾوان( ﻏﯾر ﻣﮭﻣﺔ :اﻷﺟﺳﺎم اﻟﻣﺿﺎدة وﺣﯾدة اﻟﻧﺳﯾﻠﺔ :اﻟﻔﺄر
.Balb/C
ب .اﺧﺗﯾﺎر اﻟﻣﺳﺗﺿد
ﻓﻲ اﻟﻐﺎﻟب ﻻ ﯾﺗم اﺧﺗﯾﺎر اﻟﻣﺳﺗﺿد ﺑل ھو اﻟذي ﯾﻔرض ﻧﻔﺳﮫ ﻣﺛﻼ ﻓﯾروس ﻣﺳﺑب ﻟﻣرض ﻣﺎ
)ﻓﯾروس ﻛوروﻧﺎ ،ﻓﯾروس اﻟﺷﻠل (...أو ﻣؤﺷر ﻋﻠﻰ وﺟود ﻣرض ﻣﺎ )ﻣﺳﺗﺿد ﺳرطﺎﻧﻲ(...
ﺟـ .اﺳﺗﻌﻣﺎل اﻟﺣﺎﻣل
= Haptensﻣﺳﺗﺿدات ﻧﺎﻗﺻﺔ ﻻ ﺗﺳﺗطﯾﻊ ﺗﺣﻔﯾز اﺳﺗﺟﺎﺑﺔ ﻣﻧﺎﻋﯾﺔ إذا ﻛﺎﻧت ﻧﻘﯾﺔ.
د .ﺧطوات اﻟﺗﻣﻧﯾﻊ
ﯾﺗم اﻟﺗﻣﻧﯾﻊ ﺗﺣت اﻟﺑﺷرة أو ﺗﺣت اﻟﺟﻠد أو ﻓﻲ اﻟﻌﺿل أو ﻓﻲ اﻟورﯾد ﺣﺳب
اﻟﻣﺧطط اﻟﻌﻣﻠﻲ اﻟﻣﺗﺑﻊ واﻟﻣرﺗﺑط ﺑطﺑﯾﻌﺔ اﻟﻣﺳﺗﺿد أو اﻟﺧطوة اﻟﻌﻣﻠﯾﺔ
ﻣﺛﻼ
)(J 1 اﻟﯾوم 1 اﻟﺗﻣﻧﯾﻊ اﻷول
ﯾﻣﻛن اﺳﺗﺧﻼص اﻟدم ﺑﻌد أﺳﺑوع إذا ﻛﺎن اﻟﻣﻘﺻود دراﺳﺔ اﻹﺳﺗﺟﺎﺑﺔ
اﻷوﻟﯾﺔ ) (IgMﻟﻛن ﻟﺗﺣﺿﯾر ﻛﻣﯾﺔ ﻛﺑﯾرة ﺗﺗﺟﺎوز ھذه اﻟﺧطوة
)(J 15 اﻟﯾوم 15 اﻟﺗذﻛﯾر اﻷول
)(J 21 اﺳﺗﺧﻼص اﻟدم اﻟﯾوم 21
)(J 28 اﻟﯾوم 28 اﻟﺗذﻛﯾر اﻟﺛﺎﻧﻲ
)...(J 35 اﺳﺗﺧﻼص اﻟدم اﻟﯾوم 35
-ﯾﺗم اﻟﺣﺻول ﻋﻠﻰ اﻟدم ﻣن اﻟﺣﯾوان ﺑﻌدة طرق :ﺑﺎﻟذﺑﺢ ،ﺑﺛﻘب ﻓﻲ
اﻟﻘﻠب أو ﺑﺎﻷﺧذ ﻣن اﻷوردة اﻟﻣﺧﺗﻠﻔﺔ
ﺑﻌد ھذا ﯾﺗم ﺗرك اﻟدم ﯾﺗﺧﺛر ﻟﻠﺣﺻول ﻋﻠﻰ اﻟﻣﺻل أو إﺟراء طرد ﻣرﻛزي
ﻟﻠﺣﺻول ﻋﻠﻰ اﻟﺑﻼزﻣﺎ
اﻟﻣﺷﻛل اﻟﺛﺎﻧﻲ ﻛﯾف ﻧﻧﻣﻲ ھذه اﻟﺧﻠﯾﺔ ﻓﻲ وﺳط زراﻋﻲ ﻣﻊ اﻟﻌﻠم أن
اﻟﻠﻣﻔﺎوﯾﺎت ﻻ ﺗﻌﯾش طوﯾﻼ ﻓﻲ اﻷوﺳﺎط اﻟزراﻋﯾﺔ
Kohler and ﺑﻘﻲ اﻟﻣﺷﻛل ﻣطروﺣﺎ ﺣﺗﻰ ﺳﻧﺔ 1975ﺣﯾث اﺳﺗطﺎع ﻛل ﻣن
Milsteinﻣن اﻗﺗراح طرﯾﻘﺔ ﻹﻧﺗﺎج اﻷﺟﺳﺎم اﻟﻣﺿﺎد وﺣﯾدة اﻟﻧﺳﯾﻠﺔ ﺑواﺳطﺔ
اﻟﮭﺟﺎﺋن
G. KÖHLER & C. MILSTEIN (1975) Continuous cultures of fused cells
secreting antibody of predefined specificity. Nature volume 256, 495–497
ﺗطورت اﻟﻔﻛرة وﺗطورت اﻟطرق ﻹﻧﺗﺎج اﻷﺟﺳﺎم
اﻟﻣﺿﺎدة وﺣﯾدة اﻟﻧﺳﯾﻠﺔ.
ﻣن ﺳﻠﺑﯾﺎﺗﮭﺎ
اﻷﺟﺳﺎم اﻟﻣﺿﺎدة اﻟﺧﯾﺎﻟﯾﺔ أﻛﺛر ﺗﻘﺑﻼ ﻋﻧد اﻹﻧﺳﺎن ﻣن اﻟﻔﺄرﯾﺔ ﻟﻛون أﻏﻠب اﻟﺟﺳم اﻟﻣﺿﺎد ﻣن اﻹﻧﺳﺎن
اﻷﺟﺳﺎم اﻟﻣﺿﺎدة ﺷﺑﮫ اﻟﺑﺷرﯾﺔ
Humanized McAb
اﻷﺟﺳﺎم اﻟﻣﺿﺎدة ﺷﺑﮫ اﻟﺑﺷرﯾﺔ أﻛﺛر ﺗﻘﺑﻼ ﻋﻧد اﻹﻧﺳﺎن ﻣن اﻟﻔﺄرﯾﺔ وﻣن
اﻟﺧﯾﺎﻟﯾﺔ ﻟﻛون أﻏﻠب اﻟﺟﺳم اﻟﻣﺿﺎد ﻣن اﻹﻧﺳﺎن
ﻓﻘط اﻷﺟزاء ﻛﺛﯾرة اﻟﺗﻐﯾر وﻟﯾس ﻛل اﻟﻣﻧطﻘﺔ اﻟﻣﺗﻐﯾرة ﻣن اﻟﻔﺄر
scFv
Nanobodies
Nanobodies