‘P| PROCEDIMIENTO PREPARACION DE FORMALINA, 0 ago NEUTRAAL 10% N® Resolucion: 1827 21 de Septiembre de 2012 PROCEDIMIENTOS PARA PREPARACION DE FORMALINA NEUTRA AL 10% Este documento esta dirigido a personal de Anatomia Patolégica y tiene como objetivo asegurar Ia estandarizacion de la fijaci6n de tejidos. ELABORADO POR DRA. FANCY GAETE TMJANNETTE AMARO DRA. FANCY GAETE TM ANGIE CALFUMAN THANGE GALPUMAN | OR JULIOMONTT VAL TV FAULIARA | TMPAULINA TORO REVISABO POR ‘APROBADO POR JEFE DE LAUNIOAD JEFE LABORATORIO. JEFE DE LAUNIDAD TECNOLOGO MEDICO ‘CARGO. eee eee JEFE LABORATORIO DIRECTOR TECNOLOGO MEDICO FECHA “| ‘SEPTIEMBRE 2012 SEPTIEMBRE 2012, Pan | Qtatpmax (; HOSPITAL SANTIAGO ORIENTE DR. LUIS TISNE BROUSSE ‘Avda. Las Torres N® 5180 ~ Comuna Pariloln ~ Fono 4725200 ~ www hsorante ct 9‘MP _ PROCEDIMIENTO PREPARACION DE FORMALINA ee N® Resolucién: 1627 co eden cd 21 de Septiembre de 2012 Control de Cambios Version Deseipcén Fecha ] i Treaaien AGOSTO 2004 ] TMJANNETTE AMARO | TM MAURICIO CASTRO. 2 Revisée ‘AGOSTO 2008 | 3 Revisée OCTUBRE 2010 | 4 Revisér ‘AGOSTO 2011 | 5 Revisi6n sepriewaRe 2012 | = HOSPITAL SANTIAGO ORIENTE DR. LUIS TISNE BROUSSE ‘Auda, Las Toros N° 5180 ~ Comuna Pefialeén ~Fono 4728200 -wwuhsorentec! 98‘PM _| PROCEDIMIENTO PREPARACION DE FORMALINA| va aco TER N° Resolucién: 1627 _——— Ll | 21 de Septiembre de 2012 FIJADOR DE TEJIDOS. El Unico fijador de tejidos recomendado para microscopia de luz y estudio inmunohistoquimico es la formalina. Para lograr una buena fijacién de los tejidos y disminuir las alteraciones histologicas y antigénicas producidas por la acidez, debe usarse formalina neutra y diluida al 10% Es de responsabilidad de las UAP proveer a los Servicios 0 Unidades de toma de muestras (biopsias) de formalina adecuadamente diluida y neutralizada. La solucién comercial de formaldehido es al 37-40% y ésta se denomina formalina pura (considerada 100%); al diluir esta solucién 10 veces se alcanza la dilucién de formaldehido al 4% o formalina al 10%. Formalina neutra al 10% 1) Se puede comprar directamente al proveedor: Formalina Buffer diluida al 10% 2) Se puede preparar a partir de formalina pura de dos formas: a. Tamponada con buffer fosfato b. Neutralizada con carbonato de calcio a. Preparacién de formalina al 10% tamponada con buffer fosfato (pH=6,8) Reactivos para 10 Litros Formalina pura (formaldehido 37-40%)... Agua Mestdade ce drt, 5 cote ~ Titros Fosfato de sodio monobasico (NaH2PO,,H20). Fosfato de sodio dibasico (NazHPO.)........ oo fitro vv vv 1. Preparar el buffer disolviendo ambas sales en los 9 litros de agua destilada’. HOSPITAL SANTIAGO ORIENTE DR. LUIS TISNE BROUSSE ‘Avda, Las Tores N® 5180 ~ Comuna Pefialeén —Fono 4725200 www hsorentec! 99SP _| PRocEDIMIENTO PREPARACION DE FORMALINA vo, uannco NEUTRA AL 10% N° Resolucién: 1627 21 de Septiembre de 2012 2. Dejar reposar 24 horas. 3. Medir pH y anotar fecha de preparacién en el envase. b. Preparaci6n de formalina al 10% neutralizada con carbonato de calcio (pH=6). Es la utilizada de rutina en nuestra Unidad Reactivos para 10 litros > Formalina pura (formaldehido 37-40%) coveeecensseeeee Vito > Agua destilada® ........ coos ttineeeoneene 9 litros > Carbonato de calcio (a saturacién).......... =109 1. Mezclar 9 litros de agua destilada* con = 10 g de carbonato de calcio y dejar reposar por 24 horas. 2. Agregar 1 It de formalina pura y mezclar bien 3. Medir pH y anotar fecha de preparacion al envase. * Para técnicas histologicas comunes practicamente no hay problema en usar agua corriente, sin embargo se recomienda el uso de agua destilada, con la cual se controla mejor la osmolaridad de la solucién obteniendo mejores resultados ante el requerimiento de técnicas moleculares (PCR, FISH) Referencias: Carson, R, Histotechnology: A Self-Instructional Text, 1st Ed, 1992, pp12-13. Culling, C.F.A., Handbook of Histopathological and Histochemical Techniques, Ed. 3,Butterworths, London,UK. Bancroft, J.D. and Stevens, A.,Theory and Practice of Histological Techniques, Ed. 2,Churchill Livingstone, Edinburgh,UK. Jocelyn H Bruce-Gregorios, Bonnie Cohen,M.D., Histopathologic techniques,2nd Ed, 2008, pp.28 ‘Sheehan,D,Hrapchak,B: Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp.46,Battelle Press, Ohio, HOSPITAL SANTIAGO ORIENTE DR. LUIS TISNE BROUSSE Avda, Las Torres N° 5150 ~Comuna Pefalolén ~Fono 4725200 —wwhsorentel 100