Apoptosis (Muerte celular)

Academia de Profesores de Biología Celular

Universidad Autónoma Metropolitana-
Iztapalapa (UAM-I), México

Apoptosis - UAM-I
A. Rocío Ortiz Muñiz
Fuente imagen apoptosis:
http://www.virtuallaboratory.net/Biofundamentals/lectureNotes/AllGraphics/apoptosisCartoon.gif

Objetivo - Diaporama

El objetivo del presente diaporama es

mostrar las características principales
y los mecanismos de la muerte celular,
celular,
con énfasis en la muerte celular
programada o Apoptosis
Apoptosis.. Ilustrar su
importancia y presentar las diferencias
entre los dos tipos principales de
muerte celular (apoptosis y necrosis)

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Temario
Parte del temario del Curso de Biología
Celular que cubre el presente diaporama:

Tema IX.-
IX.- Envejecimiento y Muerte Celular 2 Hrs

1.
1.-- Apoptosis. Definición, causas y mecanismos
Relación con ciclo celular y cáncer.
2.
2.-- Necrosis. Definición, causas y mecanismos
3.
3.-- Diferencias entre apoptosis y necrosis

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 Resumen - Diaporama
Tipos principales de muerte celular:
celular:
Características y diferencias Apoptosis – Necrosis
Definición Apoptosis
Apoptosis:: Causas de apoptosis,
enfermedad y apoptosis
Apoptosis:
Apoptosis: Inducción Señales (internas y
externas)
Vías de apoptosis (Extrínseca o de los receptores
de muerte e Intrínseca o mitocondrial)
Elementos participantes:
participantes: Caspasas, Proteínas
Inhibidoras de Apoptosis (IAPs)
Fases y Eventos en Apoptosis

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Proliferación y muerte celular

Para mantener el
número apropiado
de células en los
tejidos, se requiere:
requiere:
Balance entre:
Proliferación celular
Muerte celular

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Tipos principales de muerte celular

Necrosis

Apoptosis
Condensación Fragmentación

Cambios Organelos Cuerpos

Morfología Intactos Apoptóticos
celular
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 Esquema Apoptosis - Necrosis
Se mantiene integridad- Cuerpos apoptóticos
membrana envueltos por membrana
Deshidratación celular

Condensación de la
Fragmentación nuclear
cromatina

Expansión-célula y organelos Se libera el contenido de la célula

Se rompe la membrana plasmática Desintegración

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Diferencias Apoptosis - Necrosis

Apoptosis Necrosis
• Muerte de células • Muerte de grupos
individuales celulares
• Por estímulos fisiológicos • Por daño celular
• Sin liberación de enzimas • Liberación de enzimas
lisosomales lisosomales
• Sin ruptura membrana • Ruptura membrana
• Sin respuesta inflamatoria • Respuesta inflamatoria
• Requiere energía • No requiere energía

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Término - Apoptosis

Fue propuesto por

Kerr, Willie y Currie
en 1972
1972..
Recuerda a las hojas
que caen en otoño
desde los árboles
árboles..

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Fuente de la imagen: Presentación Elena Toledo y col.

3
 Apoptosis
Tipo especial de muerte
celular:
celular: ordenada y
silenciosa
Parte del desarrollo
normal
Responde a estímulos
fisiológicos y patológicos
Genéticamente
codificada

“Muerte celular Fuente imagen: farm1.static.flickr.com/167/400106830_ae8eee5...

programada” Apoptosis - Biología Celular, UAM-

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Causas de apoptosis

Se han propuesto dos razones principales por

las que las células se comprometen al
suicidio::
suicidio

•Desarrollo y renovación celular normal

• Eliminación celular selectiva

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Apoptosis
Desarrollo y Morfogénesis
Ejemplos representativos relacionados con el
desarrollo apropiado:
apropiado:

Reabsorción de la
cola del renacuajo

Formación de los
órganos reproductivos

Fuente Imagen:
http://www.celldeath.de/encyclo/aporev/revfi
gs/revfig_1.htm Apoptosis - Biología Celular, UAM-
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4
 Apoptosis
Desarrollo y Morfogénesis
Ejemplos representativos relacionados con el
desarrollo apropiado:
apropiado:

Remoción del
tejido interdigital,
en la formación
de los dedos.
dedos.

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Apoptosis -Metamorfosis

Está relacionada con la

asombrosa transformación
de una oruga en una
mariposa

Fuente: The Natural History Museum London

www.sciencemuseum.org.uk/on-line/lifecycle/im
www.sciencemuseum.org.uk/on- Apoptosis - Biología Celular, UAM-
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Apoptosis
Homeostasis
Ejemplos representativos relacionados con
el equilibrio celular del organismo:
organismo:

Es esencial para múltiples procesos

fisiológicos, por ejemplo
ejemplo:: mecanismos de
maduración del sistema inmune
•La eliminación de linfocitos auto-
auto-
reactivos durante el desarrollo
•La remoción del exceso celular después
de completarse una respuesta inmune.
inmune.

Vínculo Imagen: http://www.cober.com.ar/links/otros/galeria/galeria.html

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5
 Apoptosis
Homeostasis
En el cuerpo humano
alrededor de 100,
100,000
células se producen cada
segundo por mitosis y un
número similar muere por
apoptosis..
apoptosis
Durante nuestra vida el
99.
99.9% de nuestras células
mueren por muerte celular
programada..
programada

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Enfermedad y muerte celular programada

Homoeostasis

Proliferación Muerte celular

Reducción en la Incremento en la
muerte celular muerte celular

Supervivencia de células Las células se pierden por

normalmente destinadas a muerte celular excesiva.
excesiva.
morir..
morir Enfermedades
Padecimientos auto-
auto-inmunes neurodegenerativas
•Cáncer •SIDA
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Eliminación selectiva
Apoptosis - Eliminació
Ejemplos representativos para eliminar
amenazas a la integridad del organismo
organismo::

•Células con daño al ADN que no

puede ser reparado
•Linfocitos T citotóxicos activados
•Células auto – reactivas del
sistema inmune
•Células infectadas

Fuente Imagen: Jese M. Cuezva. Proliferación Apoptosis

Célula tumoral. http://apored.bq.uam.es/investigacion/galeria.html
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 Proceso Conservado
La muerte celular fisiológica se observa en todos los
organismos multicelulares
multicelulares..

•Los componentes fundamentales están conservados

• Se observa incremento en la complejidad
complejidad..

Modelos de estudio:
estudio:

C. elegans

D. melanogaster

y mamíferos

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Fuente: Pascal Meier y col, 2000

Características -Apoptosis
Leucocito Normal Leucocito en Apoptosis

Proceso activo (con alta organización)

Origina cambios estructurales característicos
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Fuente imagen: fig.cox.miami.edu/.../255/255hist/255history.htm

Señales - Apoptosis

•Señales positivas (Inhiben apoptosis)

•Señales negativas (Promueven apoptosis)

Se inicia apoptosis por:

•Eliminación de señales positivas (necesarias
para la supervivencia continua)
• La implementación de señales negativas

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 INDUCTORES APOPTÓTICOS
Señales Externas

Agentes físicos (Radiaciones)

Agentes químicos (fármacos)

Virus, bacterias

Deficiencia de factores tróficos

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INDUCTORES APOPTÓTICOS
Señales Internas

Incremento de agentes oxidativos

en el interior celular

Daño al ADN por diversos agentes

Genera
eneración
ción de moléculas que
promueven la apoptosis

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Inducción - Apoptosis
A
A) Agentes usados en
Quimioterapia
• Las células en apoptosis se
observan amarillas

B
B) Radicales de oxígeno

A) Vínculo Imagen:
http://www.bioon.com/experiment/UploadFiles/200410
/20041019025559633.gif
B) Vínculo Imagen: Isabel Fabregat
http://apored.bq.uam.es/investigacion/galeria.html Apoptosis - Biología Celular, UAM-
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 Vías de inducción de apoptosis

Dos vías de inducción de apoptosis:

•Vía extrínseca o vía de los receptores de muerte

•Vía intrínseca o vía de la mitocondria

AMBAS VÍAS TIENEN CONEXIÓN posterior en

la etapa de activación de caspasas

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Vía Extrínseca
Extrínseca o de los receptores de muerte:
Recibe señales pro-apoptóticas desde el exterior y de
las células vecinas
•Participan dos familias de receptores: la proteína Fas
(CD95
(CD 95)) y el factor de necrosis tumoral (TNF
TNF))
•Se unen con su ligando: Fas L o TNF R1

•Se une un complejo de señalización inductor de

muerte (DISC).
•Se activa la caspasa 8 (iniciadora) Activa
caspasas efectoras

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Ligando de muerte Vía Extrínseca

(FasL, TRAIL o TNF)

Receptor de
muerte

Fas + FADD +
pro caspasa 8
FADD
DISC FLIP
(complejo de Pro caspasa 8 Apoptosis
señalización
inductor de
muerte) Caspasa 8 Activa Caspasas
Efectoras
FADD = Dominio de muerte asociado a FAS
FLIP = Proteína inhibidora, puede desactivar el proceso
Caspasas = cisteín
cisteín--proteasas , mediadoras esenciales de apoptosis
Caspasa 8 = iniciadora de Vía Extrínseca Apoptosis - Biología Celular, UAM-
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 Vía Intrínseca
•Intrínseca o mitocondrial:
mitocondrial:

Se ejecuta principalmente en respuesta a daño en
el DNA y estrés celular

Dentro de la mitocondria se encuentran proteínas
pro--apoptóticas
pro

Es muy relevante la ubicación del citocromo c

Las proteínas de la familia de Bcl
Bcl--2 son esenciales
en la regulación de ésta vía (actúan sobre la
mitocondria)..
mitocondria)

Se forma el Apoptosoma (Citocromo c + Apaf
Apaf--1 +
caspasa 9)

Bcl--2 = gen linfoma células B

Bcl
Apaf-1 = activador - proteasa apoptótica
Apaf-
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Vía Intrínseca
Señales apoptóticas intracelulares (Daño al ADN)
Mitocondria
Citocromo c (en citoplasma)
Salida
Citocromo c:
Pro caspasa 9 Bax y Bak
Apaf--1
Apaf
Promueven
Bcl--2 y Bcl-
Bcl Bcl-X L
inhiben
XIAP

Caspasa 9 Caspasas Apoptosis

Activa Efectoras

APAF-1= Factor de activación-1 de proteasa apoptótica

XIAP = proteína inhibidora de apoptosis - inhibe caspasas (Pro- 9, 3 y 7)
Bax y Bak = de familia Bcl-2 (pro-apoptóticas). Bcl-2 y Bcl-X L = anti-apo
Caspasa 9 = cisteín-proteasa iniciadora de Vía Intrínseca
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Miembros de la familia Bcl-2

El nombre de la familia se Familia Bcl-2
debe al gen aislado
implicado en el linfoma de
Anti-apoptóticos
células B (bcl
bcl:: B-cell
lymphoma))
lymphoma
Incluye genes pro-
apoptóticos y anti-
Pro-apoptóticos
apoptóticos
Regulan la liberación de
factores pro
pro--apoptóticos
apoptóticos, en
particular el citocromo c,
desde la mitocondria al
citoplasma.

Fuente: Serotec,www.ab-direct.com Apoptosis - Biología Celular, UAM-I

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 Citocromo c (Re - localización)

Señales apoptóticas

Miembros Bcl-
Bcl-2 con
sólo el dominio BH3
BH3
blanco
(Bid, Bad, Bim
Bim,, Bik)
blanco
Integrantes Bcl-2 con Componentes Bcl-2
varios dominios: con varios dominios:
Bcl-2 y Bcl-XL Salida (Bax y Bak)
inactivan a Bax y Bak Citocromo c promueven salida Cit.

Bax y Bak
Promueven
blanco

blanco
blanc
o Bcl-2 y Bcl-
Bcl- Bcl-X
blanco L Inhiben

Fuente Parte imagen: Bianchi ME, 2004 Apoptosis - Biología Celular, UAM-
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Convergen las dos vías de Apoptosis

Vía Intrínseca - mitocondrial Vía Extrínseca - receptores

Apoptosoma DISC

Pro caspasa 9 Caspasa 9 Caspasa 8 Pro caspasa 8

Iniciación
Ejecución Pro caspasa 3
XIAP Pro caspasa 7 FLIP

Caspasa 3
Caspasa 7
Apoptosis

Unión a sustratos

Fuente Base Imagen: Riedl SJ, Salvesen GS,

GS, 2007 Apoptosis - Biología Celular, UAM-
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Elementos participantes
Caspasas

Caspasa Activa
Conformada por 2
dímeros

Fuente: Serotec,www.ab-
Serotec,www.ab-direct.com Apoptosis - Biología Celular, UAM-
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 Caspasas (c
(ciste
isteíína-asp
aspaart
rtato
ato
proteasas
prote asas))

Mediadores esenciales de apoptosis

cisteín--proteasas,
cisteín caracterizadas por
presentar un residuo de cisteína en su
sitio activo.
activo.
Cortan al nivel de un residuo de
aspartato

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Grupos de caspasas

De acuerdo a su actividad se han

clasificado en dos grupos
grupos::

Caspasas iniciadoras (activadoras de

apoptosis): 2, 8, 9 y 10.

Caspasas efectoras (operadoras de la

apoptosis): 3, 6, 7.

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Caspasas
Tipos de Caspasas
Esquema Diferentes Caspasas

Caspasas Ejecutoras Caspasas Iniciadoras Caspasas Inflamatorias

Las relacionadas con apoptosis se clasifican en: iniciadoras y efectoras
Las iniciadoras procesan las formas inactivas de las efectoras, activándolas.
Las efectoras una vez activadas procesan otros sustratos proteicos

Adaptadores Caspasas Caspasas Ejecutoras

Iniciadoras

transactivación Caspasas Activas

Fuente: Serotec,www.ab-direct.com Apoptosis - Biología Celular, UAM-I

12
 Proteínas Inhibidoras de Apoptosis
(IAPs
IAPs))

IAP son anti-

apoptóticas ya
que
Caspasas
Inhiben la
Iniciadoras
actividad de
las caspasas.
Hay al menos 5
en mamíferos
•XIAP
Caspasas
•c-IAP1
Efectoras
•c-IAP2
•IAP neuronal

•Survivina s
Inhibidor de
Apoptosis las IAPs

Inhiben tanto a las caspasas iniciadoras como a las efectoras, bloqueando

diversos puntos del proceso
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Fuente: Holcik
Holcik,, 2002

Fases de la Apoptosis
El proceso se ha subdividido en 3 fases
diferentes:
diferentes:
•Fase de Inducción
•Fase Efectora
•Fase de degradación
Los cambios característicos de la
apoptosis, aparecen en secuencia en las
diferentes fases

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Cambios en la membrana Plasmática

Célula normal Célula apoptótica

INTERIOR Fosfatidilserina INTERIOR

EXTERIOR EXTERIOR

Movimiento transmembranal de la fosfatidilserina:

Se encuentra en la cara interior de la membrana, al iniciar
el proceso de apoptosis se localiza en ambas caras
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 Fragmentación del ADN

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Citoesqueleto
Célula Viva Célula en Apoptosis

Desorganización de los componentes del

citoesqueleto

Fuente: Apo_iifaemt.jpg Apoptosis - Biología Celular, UAM-

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Eventos – Apoptosis - Resumen

Estímulos Estímulos
Cambios en
externos Internos
la membrana
plasmática Apoptosis
Receptores Activación
Mitocondria
Membrana caspasas

Cambios
Mitocondria

Expresió Degradación
n genes ADN

Receptores y ligandos,
Caspasas -14, Reguladores de Caspasas
Bcl2 – 12
Adaptadores
Proteínas: Inhibidoras, reguladoras (cinasas)

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