Professional Documents
Culture Documents
Adoc - Pub Solanacearum Pada Tanaman Kentang
Adoc - Pub Solanacearum Pada Tanaman Kentang
3
Balai Penelitian Tanaman sayuran
Jalan Tangkuban Parahu 517 Lembang, Bandung 40391
Korespondensi: hersanti09@gmail.com
ABSTRACT
ABSTRAK
Penyakit layu bakteri yang disebabkan oleh R. solanacearum merupakan salah satu
penyakit penting yang menyerang tanaman kentang. Salah satu alternatif
pengendalian yang ramah lingkungan adalah menggunakan mikroba antagonis
seperti Pseudomonas fluorescens, Bacillus subtilis, dan Trichoderma harzianum.
Tujuan penelitian adalah untuk mendapatkan isolat mikroba antagonis terbaik yang
paling menekan penyakit layu bakteri pada tanaman kentang. Dua percobaan pada
penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap. Percobaan in vitro menguji
daya hambat tiga isolat P. Fluorescens, dua isolat B. subtilis, satu isolat B. cereus dan
3 isolat T. harzianum terhadap perkembangan koloni R. solanacearum pada media
King’s B. Percobaan in vivo menguji kemampuan seluruh isolat terhadap penekanan
serangan penyakit layu pada tanaman kentang. Hasil percobaan menunjukkan bahwa
isolat T. harzianum 1, T. harzianum 2 dan T. harzianum 3 mampu menekan penyakit
layu bakteri pada tanaman kentang dengan persentase penghambatan berturut-turut
77,21 %, 77,21 %, dan 63,57 %.
Kata kunci: Mikroba antagonis, Penyakit layu bakteri, Kentang, Ralstonia
solanacearum
198
Jurnal Agrikultura 2009, 20(3): 198-203 Penapisan beberapa isolat Pseudomonas fluorescens, Bacillus subtilis , Hersanti
PENDAHULUAN
PENDAHULUAN Cibadak, beberapa strain P. fluorescens di antaranya
berasal dari daun Anthurium serta rizosfer cabai,
Kentang merupakan salah satu produk tanaman yang krisan, anyelir dan tomat, Strain Trichoderma
berpotensi untuk diversifikasi pangan. Tanaman harzianum yang juga dikoleksi ITB, UGM dan
kentang juga menjadi salah satu komoditas pangan di Segunung. Pada penelitian ini seluruh isolat tersebut
Indonesia yang sudah diekspor. Produksi kentang akan diuji kemampuannya dalam menekan penyakit
Indonesia mengalami pertumbuhan rata-rata 5 % per layu bakteri yang disebabkan Ralstonia solanacear-
tahun dan mencapai lebih dari 1 juta ton pada tahun um pada tanaman kentang.
2006 dengan luas areal tanam 60.000 ha tetapi
hanya dapat memenuhi 10 % konsumsi nasional, METODE PENELITIAN
yaitu 8,9 juta ton per tahun. Di samping produksi
yang belum cukup, volume dan nilai ekspor kentang Percobaan in vitro dilaksanakan di laboratorium
sejak 1998 (31.204 ton atau senilai US$ 5,88 juta) Bakteriologi dan Mikologi, Balai Penelitian Tanaman
terus mengalami penurunan (Bisnis Indonesia Hias Segunung, Cianjur sedangkan percobaan in vivo
Online, 2008). dilaksanakan di rumah kaca Penyakit Balai
Kendala dalam peningkatan produksi Penelitian Tanaman Sayuran, Lembang. Seluruh
kentang di Indonesia adalah antara lain serangan percobaan dilaksanakan pada bulan Maret 2009
hama dan penyakit tanaman. Salah satu patogen sampai dengan Juli 2009.
penyebab penyakit yang cukup merugikan dalam Mikroba
pertanaman kentang adalah bakteri Ralstonia Tiga isolat Pseudomonas yaitu P. fluorescens 2, P.
solanacearum yang menimbulkan gejala layu pada fluorescens 4 dan P. fluorescens 9 disediakan oleh
tanaman dan gejala lanjut berupa umbi menjadi Balithi yang masing-masing diisolasi dari rizosfer
busuk. Pada jenis-jenis kentang yang rentan, krisan, anyelir dan cabe yang tumbuh di Segunung.
penyakit layu dapat menyebabkan kerugian sampai Isolat B. subtilis 14 diperoleh dari Balithi yang
40 % (Semangun, 2002). diisolasi dari rizosfer Amarilis yang tumbuh di
Salah satu pengendalian penyakit layu Cibadak, Sukabumi. Bacillus Subtilis 12 dan B.
bakteri yang aman bagi lingkungan adalah cereus diperoleh dari Institut Pertanian Bogor. Tiga
penggunaan mikroba antagonis. Beberapa mikroba isolat Trichoderma yaitu T. harzianum 1 diperoleh
antagonis yang telah banyak diteliti adalah Bacillus dari Universitas Gajah Mada, T. harzianum 2
subtilis, Pseudomans fluorescens, dan Trichoderma diperoleh dari Balithi dan T. harzianum 3 diperoleh
harzianum. Ketiga isolat mikroba tersebut telah dari ITB.
diuji sebelumnya untuk mengendalikan penyakit
R. solanacearum dan penyakit lain pada tanaman Percobaan in vitro
Percobaan
tomat, tembakau, kacang, nilam, jahe, dan krisan. Metode penelitian adalah metode eksperimen yang
Basillus subtilis, P. fluorescens dan T. harzianum dirancang dalam Rancangan Acak Lengkap dengan
mampu menurunkan intensitas penyakit yang tiga ulangan. Percobaan rumah kaca ini menguji
disebabkan R. solanacearum pada jahe sebesar 4 % daya antagonis sembilan isolat mikroba dengan
(Bustamam, 2006). T. harzianum juga mampu kontrol negatif berupa tanpa pemberian mikroba
memberikan hasil terbaik dalam mengendalikan maupun bakterisida.
Sclerotium rolfsii pada tanaman kacang dengan Media uji yang digunakan adalah 10 mL
kapasitas penekanan sebesar 12,07 % (Kuswinanti, agar King’s B yang ditempatkan pada cawan Petri
2006). P. fluorescens dan T. harzianum sangat berdiameter 9 cm. Pada bagian tengah dan sisi
potensial untuk dikembangkan sebagai agen media agar ditempatkan cakram kertas saring steril
pengendali patogen tanaman hias, khususnya layu berdiameter 0,5 cm yang telah dicelupkan ke dalam
fusarium pada krisan (Wuryaningsih, 2009). P. masing-masing suspensi bakteri antagonis. Untuk
fluorescens secara nyata dan konsisten juga menekan menumbunkan jamur T. harzianum, Susupensi spora
serangan Fusarium oxysporum f.sp tracheiphilum T. harzianum diambil dengan loop dan digoreskan
pada krisan sebanyak 72,51 % (Hanudin et al., 2004). di atas permukaan media agar sepanjang 3 cm.
Balai Penelitian Tanaman Hias (Balithi) Kultur tersebut kemudian disimpan di dalam
mengkoleksi beberapa strain mikroba antagonis inkubator selama 24 jam pada suhu 27 OC.
yaitu B. subtilis yang berasal di antaranya dari Kerapatan sel suspensi P. Fluorescens, B. Subtilis
rizosfer anyelir, krisan di Segunung dan amarilis di dan B. cereus adalah 107 cfu mL-1 sedangkan
199
Jurnal Agrikultura 2009, 20(3): 198-203 Penapisan beberapa isolat Pseudomonas fluorescens, Bacillus subtilis , Hersanti
kepadatan spora suspensi T. harzianum adalah 106 tanaman terserang bakteri R. solanacearum. Waktu
spora mL-1. inkubasi diamati setiap hari sampai 60 hari setelah
Pengujian antagonisme antara mikroba tanam (HST). Persentase tanaman terserang yang
antagonis dan R. solanacearum dilakukan dengan diukur pada hari ke 36, 42 dan 46 dihitung dengan
cara menyemprotkan suspensi R. solanacearum rumus:
kerapatan 109 cfu mL-1 dengan menggunakan sprayer % tanaman terinfeksi =
ke atas permukaan petridish yang berisi biakan Jumlah tanaman yang terinfeksi
mikroba antagonis. Setelah 24 jam inkubasi pada × 100 %
Jumlah tanaman sampel
suhu 27 0C, diamati lebar zona hambatan di
sekeliling mikroba antagonis. Areal hambatan Analisis Statistik
terpanjang dari masing-masing isolat merupakan Data dianalisis dengan analisis ragam menggunakan
variabel penentu isolat terbaik untuk menseleksi Uji F pada taraf 5 % dan jika terdapat perbedaan
efektivitas antagonis terhadap R. solanacearum. yang nyata pengujian dilanjutkan dengan Uji Jarak
Seluruh isolat tersebut kemudian diuji lebih lanjut Berganda Duncan pada taraf 5 %.
secara in vivo di rumah kaca.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Percobaan in vivo
Percobaan
Percobaan ini dirancang dalam Rancangan Acak Pada pengujian secara in vitro didapatkan hasil
Kelompok dengan tiga ulangan. Perlakuan yang diuji bahwa isolat-isolat bakteri P. fluorescens, B. subtilis,
adalah sembilan isolat mikroba dengan kontrol jamur T. harzianum mampu menekan perkembang-
positif berupa bakterisida dengan bahan aktif an R. solanacearum pada media King’s B. Panjang
streptomisin sulfat 15 % dan oksitetrasiklin 5 %. areal hambatan masing-masing mikroba antagonis
Kontrol negatif tanpa perlakuan mikroba maupun dapat dilihat pada Tabel 1.
bakterisida.
Pada percobaan in vivo, bibit kentang Tabel 1. Panjang areal hambatan mikroba antagonis
varietas Granola ditanam dalam polibeg diameter 40 Ralstonia solanacearum pada media King’s B
cm yang berisi 5 kg campuran tanah dan pupuk
kandang (1:1; v:v) yang telah dipasteurisasi dan telah Panjang Areal
Mikroba antagonis
diinokulasi R. solanacearum dengan mengadopsi Hambatan (cm)
metode Hanudin (1995). Bakteri R. solanacearum P. fluorescens 2 (Pf2) 4,17 d
yang ditumbuhkan pada media Tetrazolium Cloride P. fluorescens 4 (Pf4) 3,00 c
(TZC) dipanen dengan menambahkan 10 mL P. fluorescens 9 (Pf9) 3,87 d
aquades steril, dan dikeruk dengan menggunakan B. subtilis 14 (Ba14) 2,13 b
tabung kaca L. Suspensi bakteri diperbanyak pada
B. subtilis 12 (Bs12) 3,83 d
media Nutrient Broth sebanyak 500 mL yang
ditempatkan di atas pengocok selama 24 Jam. Setiap
B. cereus 13 (Bc13) 2,20 b
polibeg diinokulasi dengan suspensi R. solanacearum T. harzianum UGM (Th1) 3,33 c
sebanyak 25 mL dengan penambahan 100 ml T. harzianum Segunung (Th2) 3,27 c
aquades. T. harzianum ITB (Th3) 2,40 b
Aplikasi P. fluorescens, B. subtilis, B. cereus Kontrol (K) 0,00 a
dan T. harzianum dilakukan dengan merendam
bibit kentang selama 10 menit kemudian diikuti Keterangan : Nilai rata-rata yang diikuti huruf yang sama
pada kolom yang sama menunjukkan tidak
dengan menyiramkan suspensi mikroba sebanyak 75
berbeda menurut Uji Jarak Berganda Duncan
mL. Aplikasi kedua dilakukan 14 hari setelah tanam
pada taraf 5 %.
dengan cara menyiramkan 75 mL suspensi mikroba.
Konsentrasi suspensi P. Fluorescens, B. Subtilis dan Isolat Pf 2 (asal rizosfer krisan), Pf 9 (asal
B. cereus yang digunakan adalah 109 cfu mL-1 dan rizosfer cabai) dan Bs 12 (isolat dari IPB)
T. harzianum adalah 107 spora mL-1. Populasi memperlihatkan areal hambatan tertinggi di antara
tanaman pada percobaan ini adalah 10 tanaman per isolat yang diuji. Kemampuan isolat mikroba dalam
perlakuan sehingga seluruhnya terdapat 330 menekan R. solanacearum disebabkan oleh
tanaman. kompetisi ruang seperti yang diperlihatkan pada
Respons yang diamati pada percobaan in mikroba T. harzianum dan antibiosis pada
vivo meliputi waktu inkubasi dan persentase P. fluorescens dan B. subtilis.
200
Jurnal Agrikultura 2009, 20(3): 198-203 Penapisan beberapa isolat Pseudomonas fluorescens, Bacillus subtilis , Hersanti
Tabel 2. Masa inkubasi dan persentase tanaman kentang yang layu akibat serangan bakteri Ralstonia
solanacearum
Masa inkubasi Tanaman Layu (%) Hambatan
Mikroba antagonis
(HST) 36 HST 42 HST 49 HST (%)
P. fluorescens 2 (Pf2) 38 0a 3,3 a 40 abc 45,42
P. fluorescens 4 (Pf4) 38 0a 10 a 50 abc 31,78
P. fluorescens 9 (Pf9) 41 0a 10 a 33,3 abc 54,57
B. subtilis 4 (Ba14) 41 0a 3,3 a 30 abc 59,07
B. subtiilis 12 (Bs12) 38 0a 3,3 a 73,3 c 0,00
B. cereus 13 (Bc13) 38 0a 3,3 a 30 abc 59,07
T. harzianum UGM (Th1) 38 0a 3,3 a 16,7 ab 77,21
T. harzianum Segunung (Th2) 38 0a 3,3 a 16,7 ab 77,21
T. harzianum ITB (Th3) 36 3,3 a 6,7 a 26,7 ab 63,57
Kontrol 38 0a 6,7 a 73,3 c 0,00
Bakterisida 49 0a 0,0 a 3,3 a 95,49
Keterangan: Nilai rata-rata yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak berbeda menurut Uji
Jarak Berganda Duncan pada taraf 5 %
Kemampuan P. fluorescens dalam meng- aplikasi bakterisida yaitu 49 HST sedangkan masa
hambat R. solanacearum didukung oleh hasil inkubasi terlama pada tanaman kentang yang diberi
penelitian Chet (1987) bahwa P. fluorescens mikroba antagonis terdapat pada perlakuan Pf9 dan
menghasilkan antibiotik pyuloteorin, oomycin, Ba14 yaitu 41 HST. Masa inkubasi penyakit pada
phenazine-1-carbo-xylic acid atau 2,4- perlakuan Pf2, Pf4, Bs12, Bc13, Th1 dan Th2 adalah
diphloroglucinol yang efektif menghambat 38 hari.
perkembangan bakteri ataupun jamur patogen. Berdasarkan data Tabel 2, diketahui bahwa
Berdasarkan data pada Tabel 1, diduga T. gejala serangan R. solanacearum muncul antara
harzianum hanya mampu menghasilkan antibiotik 36−49 HST. Menurut Nur Aeny (2001), masa
yang sedikit lebih rendah dibandingkan dengan inkubasi bakteri patogen ini tergantung dari daya
bakteri P. fluorescens dan B. subtilis untuk virulensinya terhadap masing-masing tanaman inang
mengendalikan patogen bakteri R. Solanacearum. dengan kisaran masa inkubasi antara 14-39 hari.
Hal ini diduga karena daya hambat T. harzianum Masa inkubasi ini dipengaruhi oleh beberapa faktor
lebih efektif untuk patogen dari golongan jamur. diantaranya tanaman inang, lingkungan, dan
Kemampuan sifat antibiosis jamur lebih rendah patogen. Konsentrasi dan virulensi bakteri patogen,
dibandingkan dengan bakteri. Namun penelitian lain serta ketahanan dari tanaman berperan dalam
menyebutkan bahwa bakteri T. harzianum dapat menentukan berapa lama waktu yang dibutuhkan
menginduksi sifat resisten tanaman kapas terhadap bakteri untuk menimbulkan gejala awal (Samanhudi,
serangan bakteri (Howell, et al. 2000 dikutip 2001).
Bustaman, 2006). Dengan demikian T. harzianum Pada umur tanaman kentang umur 36 HST
dapat digunakan untuk menambah keefektifan P. dan 42 HST persentase tanaman layu pada semua
fluorescens dan B. subtilis dalam menekan penyakit perlakuan tidak berbeda nyata (Tabel 2). Persentase
layu bakteri. tanaman layu bakteri pada kedua pengamatan ini
Periode inkubasi merupakan periode waktu berkisar antara 0 % samapai 10 %. Peningkatan
yang dibutuhkan oleh patogen sejak penetrasi hingga persentase pentakit layu bakteri yang sangat tinggi
timbul infeksi yang diekspresikan melalui gejala terjadi pada pengamatan 49 HST. Persentase
yang dapat dilihat pada tanaman atau bagian tanaman layu tertinggi terjadi pada perlakuan Bs12
tanaman. Data pada Tabel 2 menunjukkan bahwa yaitu 73,3 % yang tidak berbeda nyata dengan
gejala layu tanaman kentang yang paling cepat kontrol negatif. Persentase tanaman layu yang
terjadi pada perlakuan Th3 yaitu 36 hari setelah terendah terdapat pada tanaman yang diberi
tanam (HST). Masa inkubasi terlama terdapat pada bakterisida. Di antara tanaman yang diberi mikroba
201
Jurnal Agrikultura 2009, 20(3): 198-203 Penapisan beberapa isolat Pseudomonas fluorescens, Bacillus subtilis , Hersanti
antagonis, persentase tanaman layu terendah diper- Chet, I. 1987. Innovative Approaches to Plant
lihatkan oleh perlakuan Th1, Th2 dan Th3 meskipun Disease Control. Edisi II. The Hebrew
jika mengabaikan statistik maka persentase tanaman University of Jerusalem, Rehovot.
layu pada perlakuan Th3 lebih besar daripada Th1 Bustaman. 2006. Seleksi mikroba rhizosfer antagonis
dan Th2. terhadap bakteri pada tanaman jahe di lahan
Persentase hambatan terhadap penyakit tertindas. Jurnal Ilmu-ilmu Pertanian
layu bakteri di atas 50 % terdapat pada tanaman Indonesia 8: 12–18.
kenting yang diberi perlakuan Pf 9, Bs. 4, Bs12, Choi GJ, JC Kim, EJPark, YH Choi, KS Jang, HK Lim,
Bc.13, Th1, Th. 2 dan Th. 3 dan bakterisida. Persen- KY Cho and SW Lee. 2006. Biological
tase penghambatan layu bakteri tertinggi terdapat Control activity of two isolates Pseudo-
pada perlakuan T. harzianum. Kemampuan T. monas fluorescens against rice sheath blight.
harzianum dalam menekan penyakit layu bakteri Plant Pathol. J. 22: 289–294.
didukung penelitian Maketon (2008) yang Djatmiko, HA, T Arwiyanto, T Hadisutrisno dan BH
membuktikan bahwa aplikasi T. harzianum dapat Sunarminto. 2007. Potensi tiga genus bak-
menekan serangan R. Solanacearum penyebab teri dari tiga rizosfer tanaman sebagai
penyakit layu bakteri pada tanaman tembakau agensia pengendali hayati penyakit lincat.
sebesar 80 %. Di akhir percobaan, persentase peng- Jurnal Ilmu–Ilmu Pertanian Indonesia. 9:
hambatan total ketiga isolat T. harzianum adalah 40–47.
77,21, 77,21 dan 63,57 masing-masing untuk isolat Gunawan. OS. 1987. Taksiran kehilangan hasil
Th1, Th2 dan Th3. Persentase penghambatan produksi kentang yang disebabkan oleh
penyakit layu bakteri pada tanaman kentang oleh T. Pseudomonas solanacearum Smith. Bull.
harzianum lebih tinggi daripada oleh mikroba Penel. Hort. 25: 100–103.
lainnya meskipun pada pengujian in vivo zona Hanudin, B Marwoto, A Saepuloh, Mulya dan M
hambatan Th1 dan Th2 lebih kecil daripada ketiga Machmud. 2004. Formula cair Pseudomo-
isolat P. Fluorescens dan B. subtilis 12. nas fluorescens untuk pengendalian
penyakit layu fusarium pada Anyelir
SIMPULAN (Abstrak). Jurnal Penelitian Tanaman Hias.
http://balithi.litbang.deptan.go.id. (Diakses
Hasil penapisan beberapa isolat Pseudomonas 4 Mei 2009).
fluorescens, Bacillus subtilis, Bacillus cereus dan Hanudin, 2009. Mikroba antagonis sebagai agen
Trichoderma harzianum yang bersifat antagonistik hayati pengendali penyakit tanaman. Jurnal
terhadap Ralstonia solanacearum pada tanaman Penelitian Tanaman Hias.
kentang memberikan simpulan bahwa: http://balithi.litbang.deptan. Go.id. (Diakses
1. Secara in vitro isolat P. fluorescens 2, B. subtilis 5 April 2009).
12, dan T. harzianum 1 merupakan isolat yang Kuswinanti, T. 2006. Efetivitas Trichoderma
terbaik dalam menekan R. solanacearum. harzianum dan Gliocladium virens dalam
2. Isolat T. harzianum 1, T. harzianum 2, dan menekan pertumbuhan Sclerotium rolfsii
T. harzianum 3 mampu menekan penyakit layu penyebab penyakit busuk pangkal batang
bakteri pada tanaman kentang dengan persen- pada tanaman kacang tanah (Abstrak).
tase penghambatan berturut-turut 77,21 %, Buletin Penelitian vol 9 no.1.
77,21 % dan 63,57 %. http://ijonline.net/index.php/BullPen/article
/view/247 (Diakses 5 April 2009).
DAFTAR PUSTAKA Maketon, M, A Jirasak and S Chatchai. 2008. Green
house evaluation of Bacillus subtilis Ap-01
Bisnis Indonesia Online. 2008. Harga Benih Kentang and Trichoderma harzianum AP-001 in
Semakin Mahal. controlling tobacco diseases. Brazilian J.
http://www.w3.org/TR/html (Diakses 23 Microbiol. 39:296–300.
April 2009) Nur Aeny, T. 2001. Patogenesitas bakteri layu pisang
Baker, KF and RJ Cook. 1983. The Nature and (Ralstonia sp.) pada beberapa tanaman.
Practise of Biological Control of Plant Jurnal Hama dan Penyakit Tumbuhan
pathogens. American phytopathology soci- Tropika 1: 60–62.
ety. St. Paul. Minnessota. 538 pp.
202
Jurnal Agrikultura 2009, 20(3): 198-203 Penapisan beberapa isolat Pseudomonas fluorescens, Bacillus subtilis , Hersanti
203