Contenido La Célula Seceién I. Introduccién L._Visin global de la célula ¢ investigacién celular 3 ‘© ORIGEN Y EVOLUCION DE LAS CELULAS) 4 Tar primer esl 7 Evolucién del metabolismo Procariotas actuales 5 Células eucariotas 9 Desarrollo de organismos multicelulares iH © CELULAS COMO MODELOS EXPERIMENTALES, 15 E, colr Levaduras, Dictyostelium discoideum Drosophila melanogaster 8 Arabidopsis thaliana Is rebraslos Is # INSTRUMENTOS DE LA BIOLOGIA CELULAR 20 Microscopia optica Microscopia eleetsénica acin subeclalar 10 de las edlulas animales en eultivo Cultivo de eélulas vegetales Virus EXPERIMENTO CLAVE: Cultivo celular animal MeDicins MOLECULAR: Virus y eiincer 2. Quimica celular aT + COMPOSICION MOLECULAR DE_LAS CELULAS, au TabaRTTTOR ss Lipids ha Acids nucleons ‘8 Proteinase 50 = PAPEL CENTRAL DE LAS ENZIMAS COMO CATALIZADORES BIOLOGICOS. 56 Actividad eaalzara Te Tk THT ¢ Mecansmos de cailissencimstic 8 Coensimas ai Requlacin de la sotivida envimitiea 41 * ENERGIA METABOLICA, 63 Tera bre y ATT Ts Gencracd de ATP a p. 6 Prodcidn de enersia parr de oras molgeulas orginicas n Fotosinesis e = BIOSINTESIS DE LOS COMPONENTES CELULARES 7 DOTS Lipids 75 Protsinas 76 Actos nucleicos 7» = MEMBRANAS CELULARES iw Tipo de mena Proteins de membrana acontenido Transporte a través de membranas celulares ExpERIMENTO CLAVE: Plegamiento de las cadenas polipeptidicas MEDICINA MOLECULAR: Fenileelonucia 3. Fundamentos de biologia molecular Bo + HERENCIA, GENES V ADN %9 ‘Genes y cromosomas m0 Genes enzims “1 Identiicaciin del ADN como el material genético 93 Estructura del ADN 98 Replicaciin del ADN 95 '* EXPRESION DE LA INFORMACION GENETICA, 96 Colinealidad de genes y proteinas 77 Papel del ARN mensajro 9% Cdigo genético %9 Virus ARN y transcripsin invee 100 [+ ADN RECOMBINANTE 103] Endonucleasas de restriccian TOs Generaciin de molgeulas de ADN recombinante \07 Vectoces para el ADN recombinante 108 Seeuenciacién de ADN ut Expresion de genes clonados Te Amplificacion de ADN com la reac en cadena dela polimerasa us = DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS Y PROTEINAS, 7 TTradacrin de acidor micsicos 7 Deteccion de pequetias camtidades de ADN 0 ARN por PCR 19 Sons de aiouerpos para proteinas 19 Sond de busqueda en biblioteca de ADN recombinante 21 > EUNCION DE LOS GENES EN EUCARIOTAS Anilisis genético en levaduras Transferencia de genes en plantas y animales Mutagénesis de ADN clonados Introduccién de mutaciones en genes celulares 128, Exreeimento cLave: Hipdtesis de provirus de ADN 102 Mepieina mocecutar: VIH y sida 105 Seccion II. Flujo de la informacién genética +. Organizacion y secuenciacton de Tox genomas celulares + COMPLEJIDAD DE LOS GENOMAS DE EUCARIOTAS Trivanes y exones Secuencias de ADN repettivas éniea y pseudogenes Duplicacion Composicién del genoma en los eucariotas superiores = CROMOSOMASY CROMATING Toman Centrémeros Telémeros CUENCIAS DE LOS GENOMAS COMPL TENOHTAS FOCATIOTAS T El genoma de levaduras. locontenido Los zenomas de Caenorhabditis elegans y Drosophila melanogaster ‘Genomas de plantas. Genoma humane SNPERIMENTO CLAV Descubrimiento de los intrones, non 5. Replicacién, mantenimiento y reorganizacién del ADN gendmico 163 165 Is7 2 170 ‘* REPLICACION DEL ADN 19 ADN povimerasas 180 Horquila de replieacién 182 Fidelidad de replicacin 188 COrigenes ¢inicacin dela replicaciin 19 elomeros y telomeras: replicacion de los extremos de los cromosomus 191 ~ REPARACION DELADN TE Tnversion directa del ADN datado Tar Reparacidn por escsion 196 Reparaciin propensa al error 201 Reparacidn recombinatoria 202 [ RECOMBINACION ENTRE SECUENCIAS HOMOLOGAS DE ADN 208 Laas moléculas de ADN se recombinan mediante roturas y uniones 30 Modelos de recombinacién homloga 207 209 Enzimas implicadas en lp recombinscién homologs ‘+ REORGANIZACION DEL ADN Recombinacidn espectfiea de sitio ‘Transposicién via intermediarios de ADN Transposicion via intermediarios de ARN Amplificacién génica MEDICINA MOLECULAR: Cancer de colon y reparacién det ADN ExprRivENTO CLAVE: Reorganizacion de los genes de inmunoglok 6. Sintesis y maduracién del ARN # TRANSCRIPCION EN PROCARIOTAS, ARN polimerisr y WaTNCApCION Control negativo de la transeripeidn y represores Control positive de la transeripeién ARN POLIMPRASAS EUCARIOTICASY FACTORES DI TRANSCRIPCION GENERATES ARN polimienisis eucarioricas Factores de transcripeidn generales ¢ iniciacién de la transeripeién por la ARN polimerasa I Transcripcién por las ARN polimerasas I y IIL = REGULACION DE LA TRANSCRIPCION EN EUCARTOTAS: ulacion en cis: promorores y estimuladores Proteinas de regulacién transeripeional Estructura y funcién de los activadores de la transcripeion Represores eucaridticos Relacion entre Ia estructura cromatiniea y la transeripcidn Regulacion de la transcripcién por ARNS no codificantes Metilacion del ADN ‘= MADURACION Y RENOVACION DEL ARN Maduracidn de Tos ARNs ribosomieos y de transTerencia Maduracidn del ARNm en cucariot Mecanismos de corte y empalme o splicing, Corte y empalme alternative Correccidn del ARNcontenido Degradacién del ARN 24 EXPERIMENTO CLAVE: Aislamiento de un factor de transeripeién eu 251 EXPERIMENTO CLAVE: Descubrimignto del RNPsi 268 intesis de proteinas, procesamiento y regulacién # TRADUCCION DEL ARNM. 281 ARN de transferencia TT Ribosoma 283 ‘Organizacién de los ARNm mensajeros ¢ inicio de la traduccion, 289 Mecanismo de la traduceidn 201 Regulacidn de la traduccion 206 = PLEGAMIENTO ¥ PROCESAMIENTO DE PROTRINAS 298 ‘Chaperonas y plogamiento-de proveinas Enzimas y plegamiento de proteinas Escisidn de proteinas Glicosilacién, Anclaje de lipidos ‘> REGULACION DE LA FUNCION DE LAS PROTEINAS 307 Reegulacion por pequchas molecuTas Fostorilacién de proteinas Interaceiones proteinaeproteina = DEGRADACION DE PROTFINAS Ta de Te ubiquitina-proveasoma Protedlisis lisasémica EXPERIMENTO CLAVE: Papel catalitico del ARN ribos6mico MEDiciNs MOLECULAR: Antibidticos y sintesis de proteinas Seccién III. Estructura y funcién celulares 8. Micleo 323 # ENVUELTA NUCLEAR Y TRAFICO ENTRE EL NUCLEO Y EL CITOPLASMA..-- 323 Estructura do la cmvuctia nuclear Complejo del poro nuclear ‘Transporte selective de proteinas desde Regulacién del transporte de proteinas al nicleo Transporte de ARNS @ ORGANIZACION INTERNA DEL NUCLEO Tomosomas y estructura de OTGen superior de Ta CrOwaTna Dominios funcionales en el interior del nucleo. = NUCTEOLO, ‘Genes de ARN ribosomico y organizacion de Transeripeidn y procesamiento del ARNr Ensamblaje de ribosomas ‘* EL NUCLEO DURANTE LA MITOSIS ‘Disgregucion de la-envuelta nuclear Condensacién de los eromosomas nucleolo Reorganizacidn del nicleo interfasico Exprrimenro c1ave: Mentificacion de las sefiales de localizacién nuclear. Mrpicina MOLECULAR: Enfermedades de la limmina nuclearcontenido 9. Distribucién y transporte de proteinas: Reticulo endoplismico, aparato dé Golgi y lixosomas + RETICULO ENDOPLASMICO Reticulo endoplismico y seerecion de proteinas Mareaje de las proteinas para dirigirse al reticulo endoplismico Inserei6n de la proteinas en la membrana del RE Plegamiento y procesamiento de las proteinas en el RE RE liso y sintesis de lipidos Exportacion de proteinas y lipidas desde cl RE [APARATO DE GOLG Organizacion del Golet Glicosilacidn de proteinas en el Golgi Metabolismo de lipids y de polisacirides en el Golgi Distribueién y exportacién de proteinas desde el aparato de Golei [} MECANISMO DE TRANSPORTE DE LAS VESICULAS Aproximaciones experimentales al conocimiento del transporte de fas vesiculas ‘cin de la mereancia, proteinas de revestimiento y gemacién de vesiculas Fusian de las vesiculas = LISOSOMAS Hidrolasas lisosomicas acidas Endocitosis y formacién det lisosoma Fagocitosis ¥ autofagi Exren Mepicrns, IENTO CLAVE: Hipdtesis de la seal CULAR: Enfermedad de Gaucher 10. Bioenergética y metabolismo: Mitocondrias, cloroplastos y peroxisomas 399 + MITOCONDRIAS 309 ‘Onsanizacion y funcion de Tas mitocondrias 00 Sistema genético de las mitocondrias sol Internalizavién de proteinas y formacién de las mitocondrias 403 ‘+ MECANISMO DE LA FOSFORILACION OXIDATIVA 08 Cadena de transporte de electrones a8 Acoplamiento quimiosmético 410 Transporte de metabolitosa traves de la membrana interna 44 = CLOROPLASTOS V OTROS PLASTIDOS a5 Tstruetura y Tuncion de Tos coropTastos oT Genoma del cloroplasto 417 Interalizacion y distribucion de las proteinas del cloroplasto ag Otros plistidos 420 = FOTOSINTESIS cn Flujo de electrones Waves de Tos TorostsTeMaR TV TT 3 Flujo ciclion de eleetrones 425 Sintesis de ATP 426 = PEROXISOMAS, 6 Famnerones de Tos peroxtsomay IZ 229 Formacién del peroxisoma MEpicins MOLECULAR: Enfermedades de las mitocondrias: neuropatia Gptica hereditaria de Leber 406 Exrrnimeto ¢LavF: Teoria quimiosmotica 412 11. Citoesqueleto y movimiento celular BS ‘+ ESTRUCTURA Y ORGANIZACION DE LOS FILAMENTOS DE ACTINA 438 Tnsamblaje y desensamblaje de Tos Tlamentos de actina Th xicontenido nizacén de los filamentos de aetina 440 Asociacién de los filamentos de atina con la membrana plasmitica 4a Protuberancias de It superficie celle 45 [2XCTINA MIOSINA Y MOVIMIENTO CEEUTARE HT] Contraccin mise a7 Asociaciones contrctiles de actina y miosina en células no musculares 351 “Miosomas no convencionales 433 Migracion y arasire celular a4 = FILAMENTOS INTERMEDIOS 455 Proteinas de fos Mlamentorintermediow 35 Ensamblaje de los filaments intermedios 56 Onganizacion inracclular de Tos filamentosintermedios 437 Funciones de las queratinas y neutofiamientos: enfermedades de la piel y sistema nervioso 459 = MICROTUBULOS ar Taructura, ensamblaje e mestbiidad dinamica de Tos mictouabulos Tar Centrosoma, centiolosy orgaizacion de los microtibulos 464 Reorganizacin de los microtibulos durante fa mitosis 366 Estabilzaciin de los microtbuls y poaridad celular 467 [= MOTORES MICROTUBULARES ¥ MOVIMIENTOS 5] Tdentifcacion de las proteinas motores mierotubulares Tar Transporte de orginules y organizacinintacelular an Senaracidn de Tos eromosomas mitéicos a7 Cilios y Nagetos an Exprnivento cLavet La expresion de una gueratina mutante causa un desarrollo andmao de a piel 460 Expenivurvro craves Aislamiento de la quiesina 370 a 12. Superficie celular 483 “+ ESTRUCTURA DF LA MEMBRANA PLASMATICA 483. ‘Bicapa Tipiica aa Proteinas de membrana 486 Mowilidad de fas proteinas de Ia membrana 490 Giicocti an = TRANSPORTE DE MOLFECULAS PEOUFNAS, Ditusin paste pr Difusinfaciltada y proteinas transportadoras 494 496 Transporte activo dirigido por la hidrdtisis de ATP 503 Transporc ative driido por gradi 507 + ENDOCITOSIS 508 TFagocitosis. 7 tosis mediada por receptor sil Tritico de proteinas en la endocitosis 515 = PAREDES CELULARESY MATRIZ EXTRAC Paredes colulares acter Paredes celulares vegetales Matriz extracelular ‘= INTERACCIONES CRLULA-CELULA Proteinas de adhesion celular Unio Uniones de tipo gap. Adhesion de las eélulas vegetales y plasmodesmos Mrpicina MOLECULAR: Fibrosis quist Exrerimento cave: Receptor de las LDL TARcontenido Seccién IV. Regulacion celular ializacibn por Notch IZADORAS Y SUS RECEPTORES 541 alizacton eelala-eal 3 Hormonas esteroideas y superfamilia de receptores de esteroides 543 Oxido nitrico y mondxide de carbono 545 Neurotransmisores 546 Hormonas peptidicas y Factores de crecimiento 546 icosanoiies Sas Hormonas vegciales 9 FUNCIONES DF. LOS RECEPTORES DE LA SUPERFICIE CELULAR. 350 Receprores asociados a provers 331 Receptores proteina-titosina quinasa 553 Receptores dle citoquinas ¥ proteina-tirosina quinasas no reeeptoras 557 Receptores asociados a otras actividades enzimiticas 557 VIAS DE-TRANSDUCCION INTRACELULAR DE SENALES 558 Via del AMPc: segundos mensajeros y fosforlacion de profeinas 359 GMP ciclico 561 Fosfolipidos y Ca2¥ 502 Ras, Rat y via de las MAP quinasas 565 Via JAK/STAT 570 TRANSDUCCION DE SENALES ¥ CITOESQUELETO =] Tntcgrinas y transduvcein de sefales 377 Rogulacién del citoesqueleto de actina 574 SENALIZACION EN EL DESARROLLO ¥ EN LA DIFERENCIACION 35 Via del receptor tirosina quinasa/Ras/Rat ERK en Drosophila y en C. elezans 3S Hedgchog y W ee Se 578 14. Ciclo celular REGULACION DE LA MUERTE CELULAR PROGRAMADA, ‘Caspasas ¥ apoptosis 380 Receptores implicados en la muerte celular y la activacién de las easpasas 582 582 Sefalizacion de la supervivencia celular XPERIMENTO CLAVE: Proteina-tirosina quinasa Sre MEbicins MOLECULAR Cancer, transduccién de sefales y oncogenes ras ICLO CE so ses del cielo celular Sor Regulacin del ciclo celular por el crecimiento celular y por scfalesextracclulares sos Pantos de control del ciclo celui 506 Restrngir ba repicaciin del ADN a una ver por ciclo celular 598 = REGULADORES DE LA PROGRESION DEL CICLO CELULAR, 599 MPF: an dimero de Ce2y eclina So Familias de eicinas y quinasas dependientes de cicinas 03 Factores de erecimicntoy cielinas de tipo D «0s Inhbidores de ta progresién del ciclo cela 606 (=S0csos pra SE am] tapas de Tr mitosis am MPF y peogresin a a maf on Proteolisis einactivac telofase 613contenido Citocinesis an ‘© MEIOSIS ¥ FECUNDACION ots: Procesa de Ta cians ory Regulacisn de ka meiosis en los oocitos ols. Fecundacin 20 ‘+ CELULAS MADRE Y MANTENIMIENTO DE TEJIDOS ADULTOS et PROTTETRCTOW Ce Tas CTU THTETETCTAS Células madre Aplicaciones médicas de las células madre 624 EXPERIMENO CLAVE: Descubrimiento del MPF 600) MrpiciNa MOLECULAR: Cultivo de eélulas madre embrionarias 622 Tipos de cancer oT Desarrollo del céneer 633 ‘ausas del cdncer 634 Propiedades de las células cancerosas 636 Transformacién de las células en cultiva 640, ‘= VIRUS TUMORALES. a0. Virus de la hepatitis By C eal SV40 y poliomavirus, oa Papilomavirus 62 Adenovirus 683 Herpesvirus 643 Rotrovirus an ‘* ONCOGENES, at ‘Oncogencs retroviricos os Proto-oncogenes. 646 LLos oncogenes en el cdneer en el hombre 649 Funciones de los productos oncogénicos 633 * GENES SUPRESORES DE TUMORES 657 THRenUTIcacTon de Tos genes SUPICSOTES Ue TUMORS oS Funciones de los productos de los genes supresores de tumores 661 Papel de los oncogenes y de los genes supresores de tumores en el desarrollo del tumor 663 + APLICACIONES DE LA BIOLOGIA MOLECULAR PARA LA PREVENCION Y EL TRATAMIENTO DEL CANCER 664 Prevencion y deteccion precoz 6 Diagnéstico molecular 665 Tratamiento 6566 Experisteyro cLave: Descubrimiento de los proto- 648 MEDICIN\ MOLECULAR: STI-S71; Tratamiento del cincer dirigido contra el oncogén ber/abl 667 Respuestas a las cuestiones Glosario.Organizacion y caracteristicas de La Célula La Célla ha sido disefiado para ser un texto de ficil comprensién y ensefianza que puede set cubierto en un solo semestre, a la vez que permite a los estudiantes dominar el material de todo el libro. Damos por hecho que se poseen ciertos conocimientos generales de biologia y quimica aunque no supo- ica, bioquimica 0 biologia molecular. Muchos aspec~ 1s del libro nos ayudaran a acerearnos a la materia, Organizacion La Célula se divide en cuatro partes, cada una de ellas es independiente, por lo que el orden y los temas pueden variar ficilmente segin las necesidades de cada curso. La seceiéin / del libro aborda los origenes de la evolucién de tas cétulas, sus métodos de estudio, su composicién quimica y los findamentos de la biologia molecular moderna, Para aquellos estudiantes, que tengan una gran formacién en cursos de introduccién a la biologia 0 en cursos previos de biologia lat, pueden obviar varias partes de este libro o pueden usarlas de repaso, La seecidn Ise centra en la biologia molecular de las células asi como en la organi 6n de fragmentos de ADN, trascripeiin del ARN; y sintesis, procesos y regulacién de proteinas. Los capitulos estin ordenados siguiendo el mismo orden de wcidn y secuen- ccias del genoma; duplicacion, reparacién y combinak la informacién genética (ADN -» ARN ~* proteina) y proporciona un coneiso pero actual campo de vision de estas materias. La seccidn II analiza ta estructura y funcionamie icleo, organulos citoplasmiti~ 0s, citoesqueleto y superficie celular. Esta parte del libro comienza adaptando lo mencionado en la see cién II sobre biologia molecular a las eélulas eucaristicas y continiia a través de los orgiinulos del cito- plasma y citoesqueleto hasta la membrana plasmética, Sin embargo, estos capitulos son relativamente independientes y pueden textarse en distinto orden, sezan sean mas apropiados para un curso en concre to. Finalm nte, la seceidin IV comprende los mecanismos de regulacion de las actividades de la célu- la, tratando temas como los estimulos celulares, el ciclo de la eélula y la muerte controlada de células. Esta cuarta parte coneluye con un capitulo sobre el cai scuencias de los fallos de weer que sintetiza las los mecanismos bisicos de funcionamiento de las e¢lulOrganizacion y caracteristicas de La Célula Caracteristicas Para ayudar a los estudiantes a dominar ¢ integrar los contenido de La Célula, se han incorporado varias caracteristicas que se han organizado para guiar a los estudiantes en el trato eon este libro de la siguiente manera: Organizacién de capitulos, Cada capitulo se divide en cuatro o cinco secciones principales, las cua- les estin a su vez divididas en un niimero similar de apartados. Un esquema de las secciones principales al principio de cada capitulo muestra de modo rapido Ia organizacion de cada uno de ellos, Términos claves y glosario. Los términos claves aparecen en negrita a lo largo del capitulo, ademas dde enunciarse en el sumario y definirse en el glosario de final del libro. Iustraciones y microforografias. Se ha desarrollado cuidadosamente un completo programa de ilus- tracién a todo color y de microfotografias para complementar y reforzar visualmente el texto. Experimentos y ensayos de medicina molecular. Cada capitulo contiene dos Experimentos clave © ‘un Experimento clave y caracteristicas de Medi al lector en las bases experimentales de la eélula y la biologia molecular y sus aplicaciones a la medicina 1a molecular, Est practicas tienen por objeto el instruir moderna, Las pricticas también pueden utilizarse como bases itiles para discusiones de estudiantes, que pueden acompafiarse con una revisién del texto original sobre el que se basan los Experimentos clave, Resumen de capitulo. El sumario esta organizado a modo de esquema, que correspond a las suce- sivas div y apartados de cada capitulo. Este formato se acompafia de una lista con los jones en secciones ‘términos claves, proporcionando asi un conciso repaso del mater Preguntas y respuestas. Una extensa bateria de preguntas al final de cada capitulo (con las res puestas al Final del libro) tienen como propésito facilitar la revision del material de cada capitulo y animar aterial para predecir o interpretar los resultados experiments alos estudiantes a usar dicho n lo permiten el acceso rapido a las as bibliogrifieas del final de cada cay Bibliosgrafia ‘paginas correspondientes del libro, Para ayudar a identificar articulos de interés, las referencias estin orga nizadas de acuerdo con las secciones de los capitulos. Los articulos de interés y las paginas importantes se identifican con las iniciales [R] y [P] respectivamente. viLa CélulaSeccién I Introduccion 1 Visién global de la célula e investigacion celular 2 Quimica celular 3 Fundamentos de biologia molecularOrigen y evolucién de las células 4 Células como modelos experimentales 15, Instrumentos de la biologia celular 20, EXPEAIMENTO CLAVE: Cultvo celular animal 32 Mepicina mouccuLan: Vitus y cancer 35 cuyo entendimiento es fundamental para todas las ciencias biolégicas. Esto es cierto no sdlo desde el punto de partida de la ciencia basica, sino también respecto a un niimero creciente de aplicaciones practicas en agricultu- ra, biotecnologia y medicina. Especialmente tras haber completado la secuen: cia del genoma humano, el progreso de la biologia celular y molecular esta abriendo nuevos horizontes en la préctica médica. Ejemplos llamativos inoluyen 1 desarrollo de nuevos férmacos especialmente disefiados para interferir con el crecimiento de células cancerosas y con el uso potencial de células madre para sustituir tejidos dafiados y tratar pacientes que padecen condiciones como la diabetes, enfermedad de Parkinson, de Alzheimer, lesiones de la médula espi- nal y enfermedades cardiacas, Dado que la biologia celular y molecular es un campo de investigacién de rapido crecimiento, este capitulo se centrara en cémo se estudian las células, asi como serviré para revisar sus propiedades basicas. La apreciacion de las similitudes y diferencias entre las células resulta particularmente importante para entender la biologia celular. La primera seccién de este capitulo por lo tanto discutira la unidad y la diversidad de las células presentes hoy en dia en términos de su evolucién desde un ancestro comin. Por otra parte, todas las células comparten propiedades fundamentales que se han conservado a través de la evolucién. Por ejemplo, todas las células utiizan ADN como material ge- nético, estén rodeadas por una membrana piasmatica y usan los mismos meca- nismos basicos para el metabolismo energético. Por otro lado, las células ac- tuales han evolucionado en diferentes estilos de vida. Muchos organismos, como las bacterias, amebas y levaduras, se componen de céiulas Unicas capa- ces de autorreplicarse independientemente. Los organismos mas complejos estén compuestos por una coleccién de células que funcionan de manera coor dinada, con diferentes células especializadas para desartollar funciones part culares. El cuerpo humano, por ejemplo, esté compuesto de mas de 200 tipos diferentes de células, cada una de ellas especializada para cada funcién distint- va como la memoria, la vista, el movimiento, o la digestién. La diversidad exhibi- da por los diferentes tipos de células es sorprendente; por ejemplo, considere- mos las diferencias entre las bacterias y las células del cerebro humano. Las similtudes fundamentales entre los diferentes tipos de células proporcio- nan un marco comiin paral la biologia celular, permitiendo que los principios basi- cos aprendidos a partir de experimentos con un solo tipo de célula puedan ser extrapolados y generalizados a otros tipos de células. Diversos tipos de células y organismos son extensamente utlizados para estudiar los diferentes aspectos de la biologia celular y molecular; la segunda seccién de este capitulo ciscute algu- nas de las propiedades de estas oélulas que las hacen partcularmente valiosas 3 | BIOLOGIA MOLEGULAR DE LAS GELULAS es un area de investigacion activa4 @ Seccidn | * Introduccion como modelos experimentales. Finalmente, es importante reconocer que el pro- reso de la biologia celular depende también de los instrumentos experimentales que permiten a los cientificos hacer nuevas observaciones o desarrollar experi- mentos novedosos. Este capitulo de presentacién concluye por tanto con una discusién acerca de algunos experimentos utilizados para el estudio de las célu- las, a la vez que resume algunos de los descubrimientos hist6ricos que han lleva- do a nuestro conocimiento actual sobre la estructura de la célula y su funcion. Origen y evolucién de las células Las células se dividen en dos clases principales, inicialmente definidas segiin donde situaran al nucleo. Las eélulas procariotas (bacterias) carecen de en- voltura nuclear; las ¢élulas eucariotas presentan un niicleo donde el material genético esta separado del citoplasma. Las oélulas procariotas son general- mente mas pequefias y simples que las células eucariotas: ademas de la ausencia de nucleo, sus genomas son menos complejos y no contienen organu- los citoplasmaticos o citoesqueleto (Tabla 1.1), Al margen de estas diferencias, los mismos mecanismos moleculares basicos gobiernan las vidas de procario- tas y eucariotas, indicando que todas las células presentes hoy descienden de un ancestro primordial nico. ,Cémo se desarrollé la primera célula? g¥ como evolucionaron la complejidad y la diversidad que exhiben las células actuales? La primera célula Parece ser que la vida emergié hace, al menos, 3.800 millones de afios, aproxi- madamente 750 millones de afios después de que se formara La Tierra (Fig. 1.1). Como se origind la vida y cémo la primera célula se convirtié en un ser son cuestiones de especulacién, puesto que estos acontecimientos no pueden re- producirse en el laboratorio. No obstante, diferentes tipos de experimentos han proporcionado evidencias importantes sobre algunos pasos del proceso. En 1920 se sugirié por primera vez que moléculas orgénicas simples po- drian polimerizar espontaneamente y formar macromoléculas bajo las condicio- nes que se pensaba que existian en la atmésfera primitiva. En el momento en el que surgié la vida, la atmésfera de La Tierra se piensa que contenia poco 0 nada oxigeno libre, constando principalmente de CO. y N. ademas de peque- ‘tas cantidades de gases como H.,H,, y CO. Tal atmésfera proporciona condi ciones reductoras en las que las moléculas organicas, con una fuente de ener- {gia como la luz solar o descargas eléctricas, se pueden formar esponténeamente, La formacién espontanea de las moléculas organicas {ue demostrada por pri- mera vez experimentalmente en los afios 50, cuando Stanley Miller (un estu- diante graduado en aquel entonces) demostrd que la descarga de chispas eléc- tricas en una mezcla de H,, CH,, y NH,, en presencia de agua, conducia a la formacién de una variedad de moléculas organicas, incluyendo varios aminoa- cidos (Fig. 1.2). Aunque el experiment de Miller no reprodujo con precision las Caracteristicas Procariota Eucariota Nucloo Ausonto Presente Didmetro de una eélula pica 1 um 10-100 jm Gitoesqueleto| ‘Ausonte Presente Crgénulos ctoplasmétices ——_Ausentes Presentes Contenido de ADN (pares do 1 x 1085 x 108 15% 10725 x10? bases) (Cromosomas Una molécula de ADN Multiples motéculas de ADN ‘creulae linearCapitulo 1 * Visién global de la célula e investigacién celular @ 5 Pree ose S 100 ete = i t t Ciera é eo sae § 3.000 Fosintesis Pier cl 4.000 bec! 4.000 Foul dT 000 condiciones primitivas de La Tierra, claramente demostré la plausibilidad de la sintesis espontanea de las moléculas organicas, proporcionando los materiales basicos desde donde surgieron los primeros organismos vives. El siguiente paso en la evolucién fue la formacion de las macromoléculas, ‘Se ha demostrado que los bloques monomeéricos que constituyen las macromo- léculas se polimerizan espontaneamente bajo condiciones prebidticas plausi- bles. El calentamiento de mezclas secas de aminoacidos, por ejemplo, da como resultado su polimerizacién para formar polipéptidos. Pero la caracteristica fun- damental de la macromolécula de ia que surgio la vida debe tener la habilidad de replicarse por si misma. Solamente una macromolécula capaz de dirigir la sinte- sis de nuevas copias de si misma seria capaz de reproducirse y evolucionar. De las dos clases principales de macromoléculas que aportan informacion en las células actuales (acidos nucleicos y proteinas), solo los acidos nucleicos son capaces de dirigir su propia replicacién. Los acidos nucleicos pueden servir Figura 1.2 Formacién espontinea de las moléculas organicas. El vapor de agua se expulsaba a una atmésfera que consistia en CH,. NH, y H., en la que se descargaban chispas de ‘electricidad. El anilisis de los productos de la reaccion revelo ia formacion de varias molé~ culas organicas, incluyendo los aminodcidos alanina, acido aspartico, acido glutamico y glicina, Figura 1.4 Escala temporal de la evolucién. La escala indica e! momento aproximado en {1 que ocurrieron algunos de los acontec mientos més importantes en la evolucion de las células. fenirainto -— Motécuias orgsnicas arin Acido aspirico Acido gltémico lina Urea Acida\dctco — Acido acéteo ~Aeido térmico6 @ Seccidn | * Introduccion Figura 1.3 ‘Autorreplicacion propia del ARN. Las parejas complementarias entre los nu Cledtidos (adenina [A] con uracilo [U] y ‘quanina [G] con citosina {Cl} permiten ‘que una hebra de ARN sirva como molde para la sintesis de una nueva hebra con la Secuencia complementaria, Figura 1.4 Recubrimiento del ARN do cacién con una membrana de fosfoli dos. Se cree que la primera célula surgio dol recubrimiento del ARN autorreplicante y sus molaculas asociadas por una mem- brana compuesta de fosfolipidos. Cada rmolécula de fosfolipidos presenta dos lar- ‘92S Colas hidroldbieas unidas a un grupo hidrolfico, Las colas hidrofébicas estan ‘embebidas en la bicapa lipidica; las cabe- 22a8 hidrofilias estan expuestas al agua a ‘ambos lados de la membrana como molde para su propia sintesis como resultado del apareamiento de ba- ses especificas entre nuclestidos complementarios (Fig. 1.3). Uno de los pasos criticos en el aprendizaje de la evolucién molecular ocurris a principios de los afios 80, cuando se descubrié en los laboratorios de Sid Altman y Tom Cech que el ARN es capaz de catalizar numerosas reacciones quimicas, incluyendo la polimerizacién de nuclestidos. El ARN es, por tanto, el Unico capaz de servir como molde y catalizar su propia replicacién. Como consecuencia, se cree que el ARN ha sido el sistema genético inicial, y que una etapa temprana de la evolucién quimica estuvo basada en moléculas de ARN con replicacién propia —un periodo de la evolucién conocido como el mundo del ARN—. Las interao- ciones en orden entre el ARN y los aminodcidos evolucionaron a lo que hoy es el cédigo genético, y eventualmente el ADN reemplazé al ARN como el material genético La primera célula, se presupone, que surgié de la envoltura del ARN de replicaci6n propia en una membrana compuesta por fosfolipides (Fig. 1.4). Tal y como se discutira en detalle en el préximo capitulo, los fosfolipidos son los componentes basicos de todas las membranas bioligicas presentes hoy dia, incluyendo la membrana plasmatica de células procariotas y eucariotas. La ca- racteristica clave de los fosfolipidos que forman las membranas es que son moléculas anfipaticas, lo que quiere decir que una porcién de Ia molécula es soluble en agua y la otra porcién no. Los fosfolipidos presentan largas cadenas hidrocarbonadas insolubles en agua (hidrofébicas) unidas a grupos solubles Membrana de fostolipidosCapitulo 1 * Visién global de la célulae investigacion celular @ 7 en agua (hidrofilicos) que contienen fosfatos. En contacto con el agua, los {osfolipidos espontaneamente se agrupan en una bicapa con los grupos que contienen fosfatos en el exterior en contacto con el agua y sus colas hidrocarbo- nadas en el interior en contacto unas con otras. Esta bicapa fosfolipidica forma una barrera estable entre dos compartimentos acuosos —por ejemplo, sepa- rando el interior de la célula de su ambiente externo— La envoltura del ARN autorreplicantey las moléculas asociadas a una mem- bana lipidica se han mantenido, por tanto, como una unidad, capaz de reprodu- cirse a si misma y evolucionar. La sintesis de proteinas a partir del ARN pudo ya haber evolucionado, en cuyo caso la primera célula consistiria en un ARN de replicacién propia y sus proteinas codificadas. Evolucién del metabolismo Debido a que las células se originaron en un mar de moléculas organicas, éstas eran capaces de obtener alimentoy energia directamente de su ambiente. Pero Una situacién como ésta es limitada en si misma, por lo que las células necesi taron evolucionar sus propios mecanismos de creacién de energia y sintetizar las moléculas necesarias para su replicacion. La creacién y la utlizacién contro- lada de la energia metabélica es primordial para todas las actividades celulares, yy los procesos principales de metabolismo energético (discutidos en detalle en el Cap. 2) se han conservado practicamente intactos en las células actuales. Todas las células utilizan adenosina 5'-trifosfato (ATP) como fuente de ener- gia metabolica para llevar a cabo la sintesis de los constituyentes celulares y conducir otras actividades que requieren energia, como el movimiento (p. ej. la contraccién muscular). Los mecanismos utilizados por las células para generar ATP han evolucionado en tres etapas, correspondientes a la evolucién de la glicolisis, fotosintesis y metabolismo oxidativo (Fig. 1.5). El desarrollo de estos procesos metabélicos cambié la atméstera de la Tierra, en consecuencia alte- rando el curso de la evolucién. En la atmésfera anaerobia inicial de la Tierra, las primeras reacciones gene- radoras de energia presumiblemente implicaron la escision de moléculas orga- nicas en ausencia de oxigeno, Estas reacciones parecen ser una forma de la actual glicolisis —la rotura anaerobia de la glucosa a acido lactico, con la ga- nancia neta de energia de dos moléculas de ATP. Ademas de utilizar ATP como su fuente de energia quimica intracelular, todas las células actuales llevan a cabo la glicolisis, de acuerdo con la idea de que estas reacciones surgieron muy pronto en la evolucién, La glcolisis proporcioné un mecanismo mediante el cual la energia en molé- culas organicas ya formadas (p. ¢j., Ja glucosa) podia convertirse en ATP, que ar ea Ras * Figura 1.5 ee % Fe a de merle mele ns 660, + 6H,0 (GxBBY + co, Cosa en dcido lactico. La fotosintesis util dala energia del sol para conducla sin- fesis de la glucosa a partir del CO, y cl 110, liborando ©, coro producto. EI, ee eae, liberado por la fotosintesis !o utiliza el (BEY +00, ———r 600, + eno rd metabolsmo oxidative, en el que la gu- Cosa se rompe en CO. y H.0, liberanco ae mucha mas energia que la obtenida de la gledisie8 @ Seccidn | * Introduccion Figura 1.6 Microgratia electronica de E. coll. La ‘ceiula esta rodeada por una pared colviar dentro de la que se encuentra la membra- ‘na plasmatica. El ADN se encuentra en el rnucleoide. (Menge and. Wurtz/Biozen- trum, University of BaselScience Photo Library/Photo Researchers, Inc.) plastica Pare collar podia ser utilizado como fuente de energia para dirigir otras reacciones metabo: licas. El desarrollo de la fotosintesis fue el siguiente paso mas importante de la evolucién, que permitié a la oélula generar energia a partir de la luz solar y ser independientes de la utilizacién de las moléculas organicas ya existentes. La primera bacteria fotosintética, que evoluciond hace mas de 3 billones de aos, probablemente utilizaba H.S para convertir CO, en moléculas organicas —to- davia algunas bacterias utilizan un proceso de fotosintesis similar. La utilizacion de H,O como donante de electrones e hidrégeno para la conversion del CO, a compuestos organicos evolucioné mas tarde y tuvo la importante consecuencia de cambiarla atméstera de la Tierra. El uso de H,O en reacciones fotosintéticas produce O, libre; se cree que este mecanismo ha sido el responsable de hacer a la atmésfera de la Tierra tan abundante en O>. La liberacién de ©, como consecuencia de la fotosintesis cambio el medio en el que las células evolucionaron y se cree que determind el desarrollo de! metabolismo oxidativo. Altemativamente, ei metabolismo oxidative podria ha- ber evolucionado antes que la fotosintesis, y el aumento del O, atmosférico proporcionaria una importante ventaja selectiva a los organismos capaces de utilizar O, en las reacciones de generacion de energia. En cualquier caso, el O, es una molécula altamente reactiva, y e| metabolismo oxidativo, usando esta reactividad, ha proporcionado un mecanismo de generacidn de energia a partir de moléculas organicas mucho més eficiente que la glicolisis anaerobia. Por ejemplo, la rotura oxidativa completa de la glucosa en CO, y H,0 produce energia equivalente a 36 6 38 moléculas de ATP, en comparacién con las 2 moléculas de ATP que se forman en la glcolisis anaerobia. Con pocas excep: ciones, las células actuales utilizan reacciones oxidativas como fuente princi- pal de energ} Procariotas actuales Los procariotas actuales, que incluyen todos os tipos de bacterias, estan dividi- dos en dos grupos —las arquebacterias y las eubacterias— que se diferen- ciaron al principio de la evolucién. Algunas arquebacterias viven en condiciones extremas, que hoy en dia son inusuales pero que pudieron prevalecer en la primitiva Tierra. Por ejemplo, los termoacidsfilos viven en pozos calientes de sulfuro con temperaturas hasta de 80 ‘C y valores de pH de 2. Las eubacterias incluyenlas formas comunes que estan presentes en nuestros dias —un amplio grupo de organismos que viven en una gran variedad de ambientes, como la tierra, el agua, y otros organismos (p. e., los patogenos humanos). La mayoria de las células bacterianas son estéricas, en forma de bastén, 0 espiral, con diametros que oscilan de 1 a 10 um. Su contenido de ADN varia desde unos 0,6 millones a5 millones de pares de bases, cantidad suticiente para codificar unas 5.000 proteinas diferentes. Los procariotas mas grandes y com- plejos son las cianobacterias, bacterias en las que evolucioné la fotosintesis. La estructura de célula procariota tipica es la de Escherichia coli (E. coll), un habitante comin del tracto intestinal humano (Fig. 1.6). La célula tiene forma de bast6n, alrededor de 1 j1m de didmetro y cerca de 2 um de longitud. Como la mayoria de los otros procariotas, E. coli esta rodeada por una pared celular bacteriana rigida compuesta de polisacaridos y péptidos. Dentro de la pared celular se encuentra la membrana plasmatica, que es una bicapa de fosfolipi- dos y proteinas asociadas. Mientras que la pared celular es porosa y puede ser penetrada por una variedad de moléculas, la membrana plasmatica proporciona tuna separacién funcional entre el interior de la eélula y su medio externo. El ADN de E. coties una molécula circular Unica en el nucleoide, que, en compara- cidn con el nucleo de los eucariotas, no esta rodeado por una membrana que lo separe del citoplasma. El citoplasma contiene aproximadamente 30.000 ribo- ‘somas (ugar de la sintesis de proteinas), que destacan por su apatiencia gra- ular.