UNIVERSIDAD DEL VALLE NORMA: y DEPARTAMENTO DE QUIMICA oy LABORATORIO DE ANALISIS| FECHA DE REVISION: a, INSTRUMENTAL, aut DETERMINACION DE ETANOL EN UNA BEBIDA, ‘OHOLICA POR REFRACTOMETRIA, ELABORADO POR Departamento de Quiniea TREVISADO POR: Homers Espinal Ferny Gonzéler Femando Barons APROBADO POR: Diego Moses Norberto Berier 1. OBJE" 1VOS © Fortalecer los conceptos y bases te6ricas del fenémeno de refraccién de la medicién del indice de refraccién de una sustancia como flisis cualitativo yc © Establecer la utili instrumento de itativo de la misma, ‘© Determinar el nivel de alcohol etilico en una bebida alcohélica por refractometria, mediante una curva regular de calibracién y una curva de adicién de estndar. © Establecer la presencia o ausencia de efectos de matriz en la determinacién con la curva regular de calibracién, 2, INTRODUCCION La refraccién es el cambio en la direccién de propagacién de la luz cuando ésta pasa de un medio a otro, como se muestra en la Figura 1 rn Figural. Refraccién de la radiacién 86EI Angulo de incidencia (61) esta relacionado con el Angulo de refraccién (62) a través de Ia Ley de Snell: sen®,_ th _¥ send, Vs Donde vi y v2 corresponden a la velocidad de la luz en el medio I y el medio 2, respectivamente, y 1) y 12 los indices de refraccién en ambos medios. El indice de refraccién de un medio determinado (7) es la relaci6n entre Ia velocidad de la luz en el vaeio (c) y la velocidad de la luz en el medio (v) ¢ n v Al realizar la medida de los dngulos en el vacfo y considerando que el indice de refraccién del vacio es 1, tenemos: (send), Ue sen, Donde (772hue corresponde al indice de refracci6n del medio 2 respecto al vacio (medio 1), en términos précticos el indice de refracciGn se mide respecto al aire: nO), (auc = SenB, Alestablecer un dngulo de incidencia de 90° (del haz de luz) se puede hacer en forma directa Ja medicién del indice de refraccién del medio 2 (sen @; = 1) simplemente midiendo el éngulo del rayo refractado. thes funcidn de la temperatura del material y de la longitud de onda de la luz, generalmente se mide a 20 °C y con 4 =589.3 nm (linea D de sodio) El indice de refracciGn de una solucién acuosa de etanol es directamente proporcional a la concentracién de éste. Dicha proporcionalidad es analiticamemte til para determinar la cantidad de etanol presente en una muestra acuosa. 3. MATERIALES Y REACTIVOS Materiales Fiasco Lavador y escobiln Refraciometro (I) Gotero (1) Pienémeiro (1) Jeringa o macropipeteador (1) ‘Matra volumétrico de 25.00 mi (13) Reactivos Pipeta voluméiricas de 0.50 mL (1), 1.00 mL (1), 2.00 mE (1), 300 | Alcohol eilco estindar snl (1), 4.00 mb (1), 5.00 mL (1). y 10.00 mL). 874, PROCEDIMIENTO 4.1 CURVA DE CALIBRACION POR PATRON EXTERNO a) Registre la pureza del alcohol etflico esténdar y mida su densidad. b) En6 matraces de 25.00 mL prepare soluciones de etanol estindar entre 1.5 y 15.0% (p/v) enrasando con agua destilada, Considere para estos céleulos un 96% de pureza y una densidad de 0.805 g/mL (esta pureza y densidad deben confirmarse, ftem a). ) 4.2 PREPARACION DE LA MUESTRA a) Si hay alto contenido de gas enla muestra, desgasifique una porcién suficiente mediante agitacidn (con ultrasonido o agitador magnético), para el desarrollo de toda la prictica, 1b) Segtin el contenido de etanol que reporta la muestra problema, tome la alicuota pertinente para preparar 25,00 mL de una solucién cuya concentracién esté cereana al centroide de la curva de calibracién. 4.3 CURVA DE ADICION ESTANDAR Segiin la ctiqueta de la muestra problema, adicione la alicuota que corresponda (ver tabla) en cada uno de los 6 matraces de 25.00 mL, Posteriormente, agregue 0.00, 0.50, 1.00, 2.00, 3.00 y 4.00 mL de etanol estandar a cada matraz y enrase con agua destilada. Fe etanol (etiquetay =i = 30 =10, = ‘Cantidad (mL) z 3 10. 15 4.4. MEDICION DEL INDICE DE REFRACCION Por triplicado y alterndndose ta lectura con los miembros de su grupo, mida el indice de refraccién de cada una de las soluciones preparadas y del agua destilada, La medicion no se debe limitar a la simple observacién de la escala, cada estudiante tiene que ubicar la imagen y registrar su lectura, 5. TRATAMIENTO DE DESECHOS Descartar los desechos generados en la prictica por el vertedero, sin tratamiento previo. 886. CALCULOS Y¥ RESULTADOS, a) Segiin la dilucién realizada, la densidad experimental y la pureza del etanol estindar, calcule la concentracién de etanol (% viv 0 g/mL) de cada solucién patrén y elabore en la misma grifica las curvas de calibracién (indice de refraccién promedio vs. concentracién), tanto la de patrén externo como la de adicién de estindar, mostrando para cada punto las barras de error Nota: Incluya el punto obtenido para el agua destilada en la curva regular de calibracién y ubique el eje de la abscisa en este valor. b) Exprese de manera correcta las ecuaciones que definen cada recta mediante el método de minimos cuadrados. ©) Determine la concentracién de etanol en la muestra problema (% viv) a través de cada método de calibracién. Tenga en cuenta que al intercepto de la curva de adicién de esténdar debe restarle el indice de refraccién del agua antes de hacer la extrapolacién. d) Mediante la comparacién de pendientes, determine estadisticamente si existe evidencia de efectos de matriz. e) Calcule el LC (limite de cuanti icacién) del método. 7. PREGUNTAS a) {Se presenta alguna diferencia en las concentraciones de etanol encontradas por ambos métodos? b) Consulte el paper reportado en Ia parte final de la bibliografia y establezca si el método refractométrico esté exento de errores de tipo sistemético. Asuma el método colorimétrico como el método estindar reconocido. Realice los caleulos para cada uno de los cuatro ingredientes activos farmacéuticos (API). 8. BIBLIOGRAFIA RUBINSON, K. y RUBINSON, J. Anilisis Instrumental. Madrid:Pearson Educacién $.A, 2001 SKOOG, D.A.; HOLLER, FJ. y CROUCH, S.R. Principios de Andtisis Instrumental, Ged. Mexico: McGraw-Hill, 2008. STROBELI, H. y HEINEMAN, W. Chemical Instrumentation : A Systematic Approach. 3 ed. New York :John Wiley & Sons ,1989. 89.WILLARD, ERRIT, L.; DEAN, J. y SETLE, F.MétodosInstrumentales de Andi México : Grupo Editorial Iberoamérica S.A., 1991 HARRIS, D.C. Andi MILLER, J Y MILLER, J. Estadistica y quimiometria para quimica ani Pearson educaci6n, SA, 2002. SERWAY, A; JEWETT, J. Fisica; 6 ed. México: Thomson Learning; 1995; VL GREEN, M.; NETTEY, H. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 43 (2007) 105-110. isis quimico cuantitativo. 6ed. Barcelona: Reverte SA, 2007, tica, ded. Madrid: 90