1

SISTEM RESPIRASI
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUSLIM INDONESIA

PELATIHAN KETERAMPILAN KLINIK

MEMBUAT PREPARAT SPUTUM UNTUK

PEWARNAAN TAHAN ASAM MENURU
METODE ZHIEL NIELSEN (ZN)

PANDUAN PESERTA

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUSLIM INDONESIA
MAKASSAR
2020
 2

SISTEM RESPIRASI
KETERAMPILAN MEMBUAT PREPARAT SPUTUM UNTUK PEWARNAAN
TAHAN ASAM MENURUT METODE ZHIEL NIELSEN (ZN)

Sebelum melakukan CSL mengenai teknik pembuatan preparat sputum untuk

pewarnaan tahan asam menurut metode Ziehl Nielasen (ZN) terlebih dahulu instruktur
dan mahasiswa berdo’a bersama.

Tujuan Pembelajaran
Setelah selesai melakukan latihan keterampilan ini, mahasiswa diharapkan sudah
mampu membuat dan mewarnai praparat sputum

Target Pembelajaran
Setelah selesai melakukan latihan keterampilan ini, mahasiswa diharapkan sudah mampu:
1. Membuat preparat untuk pewarnaan Tahan asam
2. Melakukan pewarnaan ZN dengan benar dan efisien
 3

KETERAMPILAN MEMBUAT PREPARAT SPUTUM UNTUK PEWARNAAN

TAHAN ASAM MENURUT METODE ZHIEL NIELSEN (ZN)

PERSIAPAN ALAT DAN BAHAN

Disediakan set hal-hal di bawah ini
1. Sputum penderita batuk khronis
2. Sputum penderita batuk akut
3. Masker (dibawa sendiri oleh
mahasiswa)
4. Kertas Lensa (dibawa sendiri oleh
mahasiswa)
5. Spidol permanen (dibawa sendiri
oleh mahasiswa)
6. Air mengalir
7. Sabun antiseptik cair
8. Dua buah kaca benda untuk satu
mahasiswa
9. Sengkelit
10. Handuk kecil/tissue
11. Lampu spiritus
12. tempat sampah medis
13. tempat sampah non-medis
14. Rak pewarnaan

Zat Pewarnaan
 Larutan Crystal Violet
 Larutan Lugol
 Alkohol 96%
 Larutan Fuhsin Alkalis / Safranin
 Larutan Karbol Fuhsin/Kinjoun
 Alkohol Asam 3%
 Larutan Metilen Blue
 4

KETERAMPILAN MEMBUAT PREPARAT SPUTUM UNTUK PEWARNAAN

TAHAN ASAM MENURUT METODE ZHIEL NIELSEN (ZN)

Beri nilai untuk setiap langkah klinik dengan menggunakan kriteria sebagai
berikut:
1. Perlu perbaikan: langkah-langkah tidak dilakukan dengan benar dan
atau tidak sesuai urutannya, atau ada langkah yang tidak dilakukan.

2. Mampu: Langkah-langkah dilakukan dengan benar dan sesuai dengan

urutannya, tetapi tidak efisisen

3. Mahir: Langkah-langkah dilakukan dengan benar, sesuai dengan urutan

daan efisien.

TS Tidak Sesuai: Langkah tidak perlu dilakukan karena tidak sesuai dengan
keadaan.

No. LANGKAH / KEGIATAN PENILAIAN

PERSIAPAN 0 1 2
1. Melakukan persiapan alat dan bahan yang diperlukan
dengan benar
2. Pakai masker dan Hanscoen dengan benar
Bersihkan 2 objek gelas dan beri identitas, 1 untuk
pew. gram dan satunya untuk pewarnaan BTA
3. Pijarkan sengkelit dan ambil bagian sputum yang
paling kental,oleskan secara tipis ke kaca benda utk
pewarnaan gram dan ambil bagian yang kaseous
letakkan dipermukaan kaca benda kedua, tepat
ditengah, lakukan smear hingga sputum mengering
4. Buat hapusan yang agak tebal dan rata
5. Fiksasi preparat dengan melewatkan tiga kali pada
nyala api kemudian simpan untuk pewarnaan
MEMBUAT PEWARNAAN GRAM SPUTUM
1. Letakkan kaca benda mendatar diatas rak pewarnaan
2. Tuang preparat dengan larutan crystal violet dan
biarkan selama 1-2 menit
3. Buang zat warna dari preparat dan bilas preparat
dengan air mengalir
4. Tetesi seluruh permukaan apusan dengan lugol dan
biarkan selama 30 detik
5. Buang larutan lugol dan bilas preparat dengan air
 5

mengalir
6. Lunturkan zat warna dengan alkohol 96% sampai
semua zat warna luntur, kemudian bilas lagi dengan
air mngalir
7. Tetesi preparat dengan zat warna kontras yaitu fuhsin
alkalis atau safranin, biarkan selama 2 menit
8. Buang zat warna dan bilas preparat dengan air
mengalir
9. Keringkan preparat dengan kertas isap atau tissue
10. Bersihkan kembali meja kerja
11. Preparat dapat dilihat dibawah lensa emersi

MEMBUAT PEWARNAAN TAHAN ASAM METODE

ZHIEL NELSEN
1. Letakkan kaca benda berisi apusan sputum yang tebal
rata di rak pewarnaan
2. Tuangi preparat dengan karbol fuchsin/Kinjoun,
biarkan selama 3 – 5 menit,
3. Panaskan sebentar diatas api bunsen, jangan sampai
mendidih
4. Biarkan dingin 5 menit, dan Buang zat warna dengan
air mengalir
5. Lunturkan zat warna dengan alkohol asam 3%
sampai semua zat warna luntur
6. Segera bilas dengan air mengalir
7. Tuangi peparat dengan Methylen Blue, biarkan 3
menit
8. Cuci dengan air mengalir dan keringkan dengan
tissue atau kertas saring
9. Preparat dapat dilihat dengan lensa emersi.
10. Melakukan Cuci tangan rutin