Enzimas

Bioprocesos I
Unidad 2

Prof. Carlos Omar Parra

Prof. María Victoria Acevedo

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Producción de enzimas

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 Datos

➜ Producción de sake, salsa de soja, miso, entre otras

➜ Lugar húmedo
Aspergillus oryzae ➜ Hidroliza los constituyentes celulares de las plantas
➜ La primer enzima aislada fue la diastasa en 1833 en una
industria azucarera
➜ En 1896 en Japón se obtiene amilasa de Aspergillus oryzae 5
 Que es una Enzima?

➜ Proteínas de alto peso

molecular que actúan como
catalizadores en reacciones
biológicas
➜ 15000<PM<varios millones [Da]
➜ Son específicas, versátiles y
efectivas
➜ Velocidades de reacción mucho
mayores que los catalizadores
químicos
➜ Se conocen más de 2000
➜ Ribozimas: Moléculas en base a
ARN con actividad catalítica
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 Nomenclatura

➜ De manera general se ➜ Existen varias excepciones

nombran agregando el que se nombran con el
sufijo –asa con base en dos sufijo –ina.
características: ➜ Ptialina
➜ Por el sustrato que cataliza. ➜ Pepsina
Ej: Ureasa ➜ Bromelina
➜ Por la reacción que cataliza.
Ej: Alcohol deshidrogenasa.

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 Características y tipos de enzimas
➜ Varias enzimas tienen
más de una subunidad
➜ Algunas requieren un
grupo no proteico para
activarse
➜ Holoenzima = apoenzima
+ grupo no proteico
Apoenzima
Holoenzima
Grupo no proteico
➜ Isoenzima= enzimas con
diferentes estructuras que
catalizan la misma reacción
➜ Son sustrato especificas
➜ Especificidad de grupo o
especificidad absoluta
Moléculas orgánicas
complejas: NAD, FAD,
Coenzima CoA
Vitaminas
Iones metálicos Mg,
Cofactor
Zn, Mn, Fe
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 Oxidoreductasas Transferasas: Hidrolasas:
Rxns de oxido Transfieren un Catalizan rxn de
reducción grupo funcional hidrólisis
AX+B → BX+A AX+H20 →X-OH + HA

Clasificación
de las
Liasas: Ligasas
Enzimas Isomerasas
Remueven un doble
Cis/trans; L/D… Generan nuevos
enlace y añaden un
enlaces usando ATP
grupo funcional

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 Clasificación internacional EC

➜ Código numérico para ➜ Ej: alcohol deshidrogenasa

identificación internacional
➜ El primer numero indica a
cual clase pertenece
➜ El segundo numero indica la
subclase
➜ El tercer y cuarto numero se
refieren a los grupos
químicos específicos que
intervienen en la reacción

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 Hidrolisis del Almidón

➜ El almidón es un polisacárido formado por

unidades de glucosa
➜ Contiene dos estructuras principales: amilosa y
amilopectina

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 Hidrolisis del Almidón

➜ La hidrolisis enzimática consta de dos

etapas: licuefacción y sacarificación,
utilizando α-amilasas y glucoamilasas,
respectivamente.

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 Como funcionan las enzimas?
➜ Disminuyen la energía de activación de la reacción al
enlazarse con el sustrato y formar el complejo enzima-
sustrato
➜ No afectan el cambio de energía libre, ni la constante de
equilibrio

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 Ejemplo: Descomposición del peróxido de hidrogeno
𝑘1
2𝐻2 𝑂2 ՜ 2𝐻2 𝑂 + 𝑂2

Ea a 20°C:
➜ Sin catalizar: 75 kJ/mol
➜ Catálisis química (platino
coloidal): 54 kJ/mol
➜ Catálisis enzimática (catalasa):
29 kJ/mol
𝑣 = 𝑘1 ∗ 𝐻2 𝑂2
➜ Para la mismas concentración
de sustrato y temperatura, el ➜ Catálisis enzimática:
cambio se observa en la
constante de velocidad
𝐸𝑎
−𝑅𝑇
𝑘1 = 𝐴0 ∗ 𝑒
➜ Para mirar el aumento de la
velocidad de reacción debido
a las diferentes catálisis
basta con calcular la
proporción entre las k con
las diferentes Ea
➜ Catálisis química: 6711 veces
mas rápida
158838724 veces mas rápida
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 Con Sin
enzima enzima

Peptidasa

Aumentos enzimáticos de la velocidad. Escala log de los valores de Kcat y Kno (círculos blancos) a 25°C. La longitud
de cada barra representa el aumento conseguido por la enzima. ADC= arginina descarboxilasa; ODC= orotidina 5-
fosfato descarboxilasa; STN= nucleasa de estafilococos; GLU= α amilasa de papa; FUM= fumarasa; MAN= mandelato
racemasa; PEP = carboxipeptidasa B; CDA= citidina desaminasa; KSI= cetosteroide isomerasa; CMU: corismato
mutasa; CAN= anhidrasa carbónica 21
 Complejo Enzima-Sustrato

➜ Varios estudios en rayos x,

cristalografía y espectroscopia
Raman lo han demostrado
➜ La interacción enzima sustrato
se da por fuerzas débiles (no
covalentes) cuando entra en el
sitio activo de la enzima:
• Interacciones electrostáticas
• Fuerzas de Van der Waals
• Puentes de hidrógeno
• Fuerzas hidrofóbicas
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Sitio activo

➜ El sitio activo de una enzima es complementario en forma,

carga y polaridad con el sustrato
➜ Es generalmente un bolsillo o hendidura rodeada por
residuos de aminoácidos que facilitan la unión del sustrato
➜ La especificidad de la enzima se debe a su estructura terciaria
que le permite al sitio activo “reconocer” al sustrato
mediante interacciones de unión complementarias

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Modelos enzimáticos

Modelo llave cerradura Modelo de ajuste inducido

(Fischer 1894) (Koshland, 1958)

➜ La enzima acomoda al ➜ Lo que se ajusta mejor al

sustrato especifico de sitio activo es una
la misma manera que molécula de sustrato que
la cerradura lo hace se induce a adoptar una
con su llave específica configuración próxima al
➜ Explica la especificidad estado de transición
enzimática, mas no el ➜ La enzima distorsiona al
proceso catalítico en si sustrato y viceversa para
estabilizar el estado de
transición
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Modelo de ajuste inducido

➜ Efecto de Proximidad ➜ Efecto de orientación

➜ La enzima puede ➜ La enzima puede

atraer al sustrato de mantener al sustrato
modo que las regiones en ciertas posiciones o
reactivas de los ángulos y cambia su
sustratos estén cerca estructura
al sitio activo tridimensional para
mejorar la actividad
catalítica.

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En los sitios activos se encuentran a menudo cadenas laterales de aminoácidos que pueden impulsar la
adición o eliminación de protones. También pueden contener iones metálicos en la posición exacta para
participar en la catálisis.
Pasos:
1. Une el sustrato(s) La enzima debe poder liberar rápidamente
2. Reduce la energía del estado de transición los productos, y volver a su estado original
3. Impulsa la reacción
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Como disminuye la Ea?

➜ Catálisis electrostática: Unión preferente al

estado de transición mediante enlaces no
covalentes complementarios
➜ Ajuste inducido: deformación sustrato o sitio
activo
➜ Catálisis ácido base o por ion metálico
➜ Catálisis covalente: altera la ruta de reacción
para incluir estados intermedios

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ε

ε ε
∆𝑮 ≫ 𝜺
∆𝑮 = 𝟎 − −𝟒𝟔
ε
∆𝑮 = 46 ≫ 𝜺

1. 2𝐻𝐶𝑙 − 𝐻2 = 2(𝐶𝑟𝐶𝑙3 − 𝐶𝑟𝐶𝑙2 )

ε
T°= 410-780 K

2. 2 𝐶𝑟𝐶𝑙3 − 𝐶𝑟𝐶𝑙2 = 2 𝑀𝑛𝐶𝑙4 − 𝑀𝑛𝐶𝑙3

T°= 930- 1350 K
ε
3. 2 𝑀𝑛𝐶𝑙4 − 𝑀𝑛𝐶𝑙3 = 𝐶𝑙2
ε T° = 350-550 y 1350-1500
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Efecto de la T° y el pH en la reacción enzimática

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