Introducción

Glucólisis
¿Por qué necesitamos comer?

El destino de una molécula…

Dr. Octavio Loera Corral

Fuertes: https://www.ck12.org/book/CK-12-Conceptos-Biología/section/2.23/
http://archivo.trome.pe/escolar/descubre-mas-sobre-fotosintesis-2029067
 ¿Metabolismo?
• Proceso global en los seres vivos
• Obtención y uso de la energía libre para realizar sus funciones
✓ Trabajo mecánico
✓ Transporte activo de moléculas (vs gradientes)
✓ Biosíntesis de sus propias moléculas

Catabolismo
Degradación exergónica de compuestos (se captura la energía)

Anabolismo
Biosíntesis endergónica de moléculas nuevas desde metabolitos simples (se invierte energía)

Repaso con
Kahoot
 Rutas Metabólicas
Reacciones enzimáticas consecutivas que llevan a productos específicos

» Los reactivos, intermediarios y productos se llaman

metabolitos

» Algunos intermediarios o productos de una ruta puede ser el

inicio de otras rutas (bifurcación)

A B C D K

Las reacciones pueden

F G
ser reversibles

En cada paso participa una enzima que reconoce su sustrato y lo

convierte en el siguiente metabolito

https://es.slideshare.net/trenmx/vas-metablicas-integradas
 Reacciones de combustión
en presencia de O2
El O2 “roba” electrones a los moléculas con C:
Metano (Biogás o Gas natural)
liberación de energía: niveles de reducción

+ Energía calórica
(213 Kcal/mol)

Cuando se quema el gas propano (C3H8) de los cilindros de gas :

C3H8(g) + 5O2(g) → 3CO2(g) + 4H2O(g) + Energía

Cuando se quema la celulosa (C6H12O6)n del papel:

C6H12O6(s) + 6O2(g) → 6CO2(g) + 6H2O(g/líq) + Energía (686 Kcal/mol)

 Aportes de Lavoisier

• La glucosa se oxida hasta CO2….

• Las reacciones de oxidación liberan energía

¿de dónde viene esa energía?

Similar a la combustión de la celulosa del papel (C6H12O6) con oxígeno:

C6H12O6(s) + 6O2(g) → 6CO2(g) + 6H2O(g/líq) + Energía (~ 686 Kcal/mol) 1 ca = 4.18 J

http://www.lightdocumentary.com/images/human_processes.jpg
 ¿Por qué no nos quemamos al respirar?
Aunque sí liberamos algo de calor
¿por qué no el total como la combustión del papel?
¿dónde queda el resto?

• El metabolismo evoluciona para “atrapar” la energía en forma utilizable

• La energía se libera poco a poco en oxidaciones sucesivas

• Desde la “fuente de energía” disponible se guarda como ATP

• El ATP libera la energía según se requiere

 Trabajo
31 kJ/mol 31 kJ/mol
 El metabolismo
se analiza por bloques

Hay metabolitos ●
que conectan los
bloques

Los bloques pueden ser

reversibles:

• Rutas Catabólicas
• Rutas Anabólicas
• Rutas Anfibólicas

Generación o demanda
de energía para
Romper o fabricar
Moléculas nuevas

Aquí se produce
la mayor parte
de ATP
Iniciamos con la
Hay otros reacciones Glucólisis
que también producen
ATP
 Perspectiva Histórica de la Glucólisis
• Glucólisis: rompimiento de la glucosa

• La conversión de Glucosa a Etanol y CO2 en la historia

– Cerveza … restos en tumbas como indicios de nutrición

• Siglo XIX control de producción de vinos

– Los mecanismos se estudian porque implica $
• Los mecanismos se estudian a partir del s. XIX
– Louis Pasteur
• Fermentación: “cambio químico con efervescencia”
• Proceso debido a las LEVADURAS, pero no si se “pasteuriza” el
medio
• VITALISMO

Azúcar CO2 + Alcohol + Energía

Azúcar
X
 Eduard Buchner, bioquímico
alemán, premio Nobel en 1907

Extactos sin levaduras podían

fermentar … sin fuerza vital (!!!)

Los extractos aún hidrolizan el azúcar (sacarosa) y fermentan los

monosacáridos hasta alcohol… sin fuerza vital (???)

¿Cómo separar las biomoléculas de estos extractos?

 Diálisis: separación de biomoléculas

Trabajos de Arthur Harden y William Young (de 1905 a 1910)

Fracción Dializable:
COZIMASAS

• NAD+
Levaduras • ATP/ADP
molidas • Pi
• Iones metálicos
(Ca+2, Mg+2, Cu+2, etc)

TERMOESTABLES

Fracción No Dializable:
ZIMASAS
TERMOLÁBILES
¿Proteínas?

Las fracciones por separado no pueden fermentar

Separación por fracciones:

• No Dializables (Enzimas, termolábiles)

• Dializables (termoestables: NAD+, ATP/ADP, Pi, iones metálicos Ca+2,
Mg+2, Cu+2, etc)

1. Mezcla de Enzimas
2. Cofactores (NAD+, ATP, ADP, Iones Metálicos)

• Identificación de Intermediarios

Estrategia : INHIBIDORES Acumulación de intermediarios

Glucosa B C D ?
 Otras observaciones

• Los inhibidores actuaban en otros tipos de extractos celulares

• … intermediarios comunes (en distintos seres vivos)
• ¿bioquímica común?

Hacia 1940 habían mejores métodos de separación de compuestos

Elucidación de la RUTA COMPLETA DE LA GLUCÓLISIS : 10 reacciones

Contribución de la ciencia alemana

• Gustav Embden
Glucosa
• Otto Meyerhorf Glucosa
Glucólisis

• Jacob Parnas

Otto Warburg (inicios del s. XX)

muestra que la oxidación biológica
se realiza por ENZIMAS intracelulares
(Premio Nobel en 1931) Piruvato

La misma ruta en los seres vivos

 Glucólisis
Todos los compuestos presentes en los extractos de Buchner ¿Dónde están?
¿por qué requiere fósforo inorgánico para proceder in vitro?

Escriba la estequiometría de la reacción (Sustratos y Productos):

 La estrategia de la Glucólisis

• La Glucosa entra a las células por transportadores (reversibles)

• Las enzimas glucolíticas están en el citosol

• La glucosa puede salir de nuevo si no se etiqueta (primera reacción
de la glucólisis)
Estequiometría de la reacción:
________ + ____ ________ + ____
Estrategia de la Glucólisis
Para ganar hay que invertir

Ganancia neta de
más ATP
Formar
intermediarios
Fosforilados (con P):

ATP Pasan su P al ADP

ahorrado

Forman ATP
 La estrategia Química de la Glucólisis

1. Adición de P a la glucosa
2. Conversión a intermediarios fosforilados*
… ¿por qué?
3. Acoplamiento de estas transferencias a la formación de ATP
Go de la hidrólisis de fosfatos orgánicos

COMPUESTO Go (kJ/mol)

Fosfo-enol-piruvato -61.9
*
1,3-Bifosfo-glicerato -49.4
*
Fosfato de acetilo -43.1 Inversión de
Fosfato de creatina -43.1 energía para
formar ATP
Pirofosfato (PPi) -33.5
ATP AMP + PPi -32.2
ATP ADP + Pi -30.5
Fosfato-1-de Glucosilo -20.9
Fosfato-6-de Fructosilo -13.8
*
Fosfato-6-de Glucosilo -13.8
*
Fosfato-3-de Glicerilo -9.2
*

* Intermediarios de la glucólisis
 Dos etapas (Inversión y Recuperación)

I. Utilización de ATP para generar

2 triosas fosfatadas (2 GAP).
Rxs 1 a 5

II. Conversión del GAP a Piruvato,

formando ATP.
Rxs 6 a 10

Balance Global:

Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2NAD+

2Piruvato + 2ATP + 2NADH + 2H+ + 2H2O

 Reacción 1

Para otras reacciones

Enzima Hexoquinasa (HK)

Las HK´s trasfieren grupos fosforilo entre el ATP y un metabolito

Es irreversible en condiciones fisiológicas

∆Go´=-16 kj/mol
 Reacción 2

Enzima Fosfoglucoisomerasa (PGI)

La PGI transforma a una aldosa en una cetosa

Las formas lineal y cíclicas existen simultáneamente, predomina la cíclica

∆Go´=+1.7 kJ/mol, no se favorece la acumulación de ningún reactante

 Reacción 3

Enzima Fosfofructoquinasa (PFK)

La Rx es irreversible in vivo (∆Go´)

 Reacción 4

Enzima Aldolasa

¿Cómo se puede favorecer el avance de la Rx con semejante ∆Go´?

Concentraciones in vivo de DHAP y GAP muy bajas

Hay acumulación de FBP con inhibidores (ácido iodoacético)

 Reacción 5

Enzima Triosafosfatoisomerasa (TPI)

DHAP y GAP se interconvierten entre sí

Símil a la interconversión entre F6P y G6P (Rx 2)

A pesar del ∆Go´, [G3P] es muy baja in vivo

FIN de la Fase de Inversión de Energía

 Dos etapas (Inversión y Recuperación)

I. Utilización de ATP para generar

2 triosas fosfatadas (2 GAP).
Rxs 1 a 5

II. Conversión del GAP a Piruvato,

formando ATP.
Rxs 6 a 10

Balance Global:

Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2NAD+

2Piruvato + 2ATP + 2NADH + 2H+ + 2H2O

 Grupo acil-fosfato de alta energía

Reacción 6 ¿Qué átomo de C cambió el edo. de oxidación?

Enzima Gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH)

In vivo la Rx se favorece por la relación alta:

NAD+ / NADH [NAD+ ] elevada

El 1,3-BPG es el primer intermediario capaz de transferir el P al ADP

Para 1,3-BPG, ∆Go´ de transferencia del P = -49.4 kJ/mol

 La estrategia Química de la Glucólisis

1. Adición de P a la glucosa
2. Conversión a intermediarios fosforilados… ¿por qué?
3. Acoplamiento de estas transferencias a la
formación de ATP
Go de la hidrólisis de fosfatos orgánicos
COMPUESTO Go (kJ/mol)
Fosfo-enol-piruvato -61.9
*
1,3-Bifosfo-glicerato -49.4
*
Fosfato de acetilo -43.1
Fosfato de creatina -43.1
Pirofosfato (PPi) -33.5
ATP AMP + PPi -32.2
ATP ADP + Pi -30.5
Fosfato-1-de Glucosilo -20.9
Fosfato-6-de Fructosilo -13.8
*
Fosfato-6-de Glucosilo -13.8
*
Fosfato-3-de Glicerilo -9.2
*

* Intermediarios de la glucólisis
 Reacción 7

Enzima Fosfogliceratoquinasa (PGK)

1,3-BPG transfiere el P al ADP

“Fosforilación a nivel sustrato”

 Reacción 8

Enzima Fosfogliceratomutasa (PGM)

Las mutasas transfieren grupos funcionales en la misma molécula

El 2-Fosfoglicerato (2PG) es el intermediario para formar

al siguiente compuesto de “alta energía”

¿Por qué el 2PG no puede fosforilar el ADP?

 Reacción 9

Enzima: Enolasa

Las enolasas forman dobles enlaces entre Carbonos de una molécula

 La estrategia Química de la Glucólisis

1. Adición de P a la glucosa
2. Conversión a intermediarios fosforilados… ¿por qué?
3. Acoplamiento de estas transferencias a la
formación de ATP
Go de la hidrólisis de fosfatos orgánicos
COMPUESTO Go (kJ/mol)
Fosfo-enol-piruvato -61.9
*
1,3-Bifosfo-glicerato -49.4
*
Fosfato de acetilo -43.1
Fosfato de creatina -43.1
Pirofosfato (PPi) -33.5
ATP AMP + PPi -32.2
ATP ADP + Pi -30.5
Fosfato-1-de Glucosilo -20.9
Fosfato-6-de Fructosilo -13.8
*
Fosfato-6-de Glucosilo -13.8
*
Fosfato-3-de Glicerilo -9.2
*

* Intermediarios de la glucólisis
 Reacción 10 De Rx 1

Enzima: Piruvatoquinasa (PK)

Algunos puntos sobre la PK:

1. Genera otro ATP

2. Energéticamente favorable… “arrastra” a las 2 Rx´s anteriores

“Fosforilación a nivel sustrato”

Dos etapas:
I. Utilización de ATP para generar
2 triosas fosfatadas (2 GAP).
Rxs 1 a 5

II. Conversión del GAP a Piruvato,

formando ATP.
Rxs 6 a 10

Balance Global:

Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2NAD+

2Piruvato + 2ATP + 2NADH + 2H+

+ 2H2O
NAD+
Es el agente oxidante más importante de la Glucólisis

2Hº
+ H+

Debe ser reoxidado para su uso continuo por estas vías:

1. Fosforilación oxidativa ATP

2. Reducción de piruvato a lactato

3. Fermentación alcohólica
 Grupo acil-fosfato de alta energía

Reacción 6 ¿Qué átomo de C cambió el edo. de oxidación?

Enzima Gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH)

In vivo la Rx se favorece por la relación alta:

NAD+ / NADH [NAD+ ] elevada

El 1,3-BPG es el primer intermediario capaz de transferir el P al ADP

Para 1,3-BPG, ∆Go´ de transferencia del P = -49.4 kJ/mol

Destinos del Piruvato

Glucosa
Glucólisis
Glucosa

Piruvato

Ciclo de Krebs
o TCA (del inglés)
 Conversión de Piruvato a Lactato

por la Lactato Deshidrogenasa

¿Qué átomo modifica su nivel de reducción?

 Conversión de Piruvato a Etanol

por la Alcohol Deshidrogenasa

¿Qué átomo modifica su nivel de reducción?

Fermentación Homoláctica

Glucosa + 2 ADP + 2 Pi 2 lactato + 2 ATP + 2 H2O

∆Go´ = - 196 kJ/mol

Formación de 2 ATP, ∆Go´ = + 61 kJ/mol

31% de eficiencia

Fermentación Alcohólica

Glucosa + 2 ADP + 2 Pi 2 Etanol + 2 ATP + 2 CO2

∆Go´ = - 235 kJ/mol

26% de eficiencia

En condiciones fisiológicas la eficiencia se aproxima al 50%,

Disipación por calor… proceso irreversible
 Regulación Metabólica y Control

En el edo. estacionario, para cualquier metabolito “S”, [S] es cte.

[S] se modifica si: V1 < V2 ó V1 > V2 V → enzima

Alteración del edo. estacionario Activación del control metabólico

(Mantenimiento de Homeotasis)

¿Por qué las células mantienen la Homeostasis?

•Edo. de máxima eficiencia termodinámica

•Metabolitos que son intermediarios de varias rutas
•Variaciones grandes de [intermediarios] pueden alterar la osmolaridad

CONTROL A TRAVÉS DE LAS ENZIMAS

 Reacciones en la Glucólisis
¿Candidatas para regulación?
 Reacciones en la Glucólisis
¿Candidatas para regulación?

Rasgo común: reaccionan a la reserva energética

• Batería cargada : [ATP]
• Batería descargada : [ADP] o [AMP]

Tienen otros efectores específicos

 Trabajo
31 kJ/mol 31 kJ/mol
 Reacciones irreversibles: puntos de control

Reacción 1

Para otras reacciones

Enzima Hexoquinasa (HK)

Las HK´s trasfieren grupos fosforilo entre el ATP y un metabolito

Se regulan por alosterismo: inhibición si se acumula el producto G6P

Activación: ATP/AMP bajo (= poca cantidad de ATP)

Inhibición: ATP/AMP alto (= mucha cantidad de ATP)

Irreversible en condiciones fisiológicas ∆Go´=-16 kj/mol

 Reacción 3

Enzima Fosfofructoquinasa (PFK)

La PFK se regula por alosterismo

AMP (+), ADP (+), fructosa-2,6-bifosfato ó F2,6BP (+++)

ATP (--), citrato (--).

La Rx es irreversible in vivo (∆Go´)

 Reacción 10 De Rx 1

Enzima: Piruvatoquinasa (PK)

Algunos puntos sobre la PK:

1. Genera otro ATP

2. Energéticamente favorable… “arrastra” a las 2 Rx´s anteriores
3. Se regula por alosterismo:
FBP (+), producto de la Rx 3
ATP (--), alanina (--) y acetil-CoA (--)

“Fosforilación a nivel sustrato”

Ya conocemos las enzimas irreversibles
que contralan esta ruta

Rasgo común: reaccionan a la reserva energética:

• Batería cargada [ATP]
• Batería descargadad [ADP] o [AMP]

Tienen otros efectores específicos

Un destino del Piruvato: TCA

Glucosa
Glucólisis
Glucosa

Piruvato

Ciclo de Krebs
o TCA (del inglés)