JURNAL PRAKTIKUM

APLIKASI MIKROBIOLOGI DAN KEAMANAN PANGAN

MIKROBIOLOGI DASAR

NAMA : ANGELINA PAERENG

NIM : G031201038
KELOMPOK :3
ASISTEN : ADISYA INAYAH MUQITA

LABORATORIUM KIMIA ANALISA PENGAWASAN MUTU PANGAN

PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI PANGAN
DEPARTEMEN TEKNOLOGI PERTANIAN
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2022
 MIKROBIOLOGI DASAR
Angelina Paereng 1), Adisya inayah muqita2)
Program Studi Ilmu dan Teknologi Pangan, Departemen Teknologi Pertanian,
Fakultas Pertanian Universitas Hasanuddin
Abstrak
……………………………………………………………………………………………………………
………………………………………………………………………………………………………….
Kata kunci : aa,bb,cc
I. PENDAHULUAN
I.1 Latar Belakang
Organisme yang sangat kecil ini
disebut sebagai mikroorganisme, atau yang
sering disebut mikroba. Mikroorganisme
yang merugikan biasa disebut dengan
mikroorganisme patogen. Sterilisasi sendiri
merupakan upaya untuk membunuh
mikroorganisme termasuk sporanya yang
dapat membahayakan kesehatan. Adapun
upaya lain yang dapat dilakukan untuk
mendeteksi adanya mikroba di lingkungan
seperti pembuatan media (NA, PDA, PCA,
MRS), pengenceran bertingkat, inokulasi,
dan isolasi.
I.2 Rumusan Masalah
Rumusan masalah dari praktikum ini
yaitu:
1. Apa prinsip dari sterilisasi?
2. Bagaimana prosedur pembuatan media?
3. Apa saja tujuan dan prosedur
pengenceran bertingkat?
4. Bagaimana mengetahui metode
inokulasi?
5. Bagaimana mengetahui metode isolasi?
I.3 Tujuan dan Kegunaan
Tujuan dari praktikum ini, yaitu:
1. Untuk mengetahui prinsip sterilisasi
2. Untuk mengetahui prosedur pembuatan
media
3. Untuk mengetahui tujuan dan prosedur
pengenceran bertingkat
4. Untuk mengetahui metode inokulasi
5. Untuk mengetahui metode isolasi
II. METODOLOGI PRAKTIKUM
II.1 Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum mikrobiologi dasar
dilaksanakan pada Jumat, 11 Maret 2022
pukul 07.30 -10.00 WITA di Laboratorium
Kimia Analisa Pengawasan Mutu Pangan,
Program Studi Ilmu dan Teknologi
Pangan, Departemen Teknologi Pertanian,
Fakultas Pertanian, Universitas
Hasanuddin, Makassar.
II.2 Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada praktikum
ini adalah autoclave, batang L, bunsen,
bulb, cawan petri, erlenmeyer, hot plate,
laminar air flow, magnetic stirrer, ose
bulat, ose tusuk, pemantik api, pipet
volume, rak tabung reaksi, tabung reaksi,
dan timbangan analitik.
Bahan yang digunakan dalam
praktikum ini adalah akuades, alkohol
70%, aluminium foil, de man rogosa
sharpe (MRS), kapas, kertas, label, larutan
fisiologis, lateks, nutrient agar (NA),
potato dextrose agar (PDA), plat count
agar (PCA), spidol, dan tissue.
II.3 Prosedur Praktikum
II.3.1 Prosedur Sterilisasi Alat
II.3.2 Prosedur Pembuatan Media
II.3.3 Prosedur Pengenceran Bertingkat
II.3.4 Prosedur Inokulasi
II.3.5 Prosedur Isolasi
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
III.1 Hasil
Hasil yang diperoleh dari praktikum
mikrobiologi dasar yaitu : -
III.2 Pembahasan
III.2.1 Sterilisasi
Sterilisasi merupakan suatu proses
untuk membunuh mikroorganisme sampai
ke spora-sporanya yang terdapat didalam
bahan makanan maupun alat yang akan
digunakan terutama dalam laboratorium.
Sterilisasi dapat dilakukan dengan metode
kimia maupun fisika.
1. Sterilisasi kimia
Sterilisasi dengan menggunakan metode
kimia dapat dilakukan dengan
formaldehide atau hydrogen peroksida
yang digunakan untuk sterilisasi filter
HEPA pada BSCs. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Siregar (2017) bahwa
Sterilisasi kimia merupakan metode
desinfeksi alat atau instrumen dengan cara
merendamnya dalam larutan desinfektan.
1. Sterilisasi fisik
Pada sterilisasi dengan menggunakan
pemanasan dapat dilakukan dengan
pemanasan kering yaitu memanaskan alat
yang biasanya dilakukan dengan
menggunakan api bunsen, sedangkan
pemanasan basah adalah pemanasan
dengan menggunakan tekanan tinggi
seperti pada autoklav pada suhu 1210C
selama 15 menit. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Andriani (2016) bahwa
autoklaf adalah alat untuk mensterilkan
berbagai macam alat dan bahan yang
digunakan dalam mikrobiologi dengan
menggunakan uap air panas bertekanan.
III.2.2 Media
Adapun pembuatan media yaitu,
1. Media NA
Komposisi media NA yaitu, ekstrak
daging 250 ml, pepton 1,25 gram, dan agar
3,75. Nutrient Agar (NA) adalah salah satu
contoh media yang sering digunakan untuk
menumbuhkan dan mengembangbiakkan
bakteri.
2. Media PDA
Komposisi media PDA yaitu, ekstrak
kentang 250 ml, dextrose 2,5 gram, dan
agar 3,75. Cara pembuatan media PDA
adalah Dextrose dan agar ditimbang
sebanyak 2,5 gram dan 3,75 gram, serta
ekstrak kentang diambil sebanyak 250 ml.
Semua bahan dicampurkan ke dalam
tabung erlenmeyer. Potato Dextrose Agar
(PDA) merupakan media yang sering
digunakan untuk menumbuhkan dan
mengembangbiakkan yeast dan kapang.
3. Media PCA
Komposisi media PCA yaitu, 0,5%
trypton, 0,25% ekstrak ragi, 0,1% glukosa,
dan 1,5% agar-agar. Plate Count Agar
(PCA) mengandung nutrisi yang
disediakan oleh trypton, vitamin dari
ekstrak ragi, dan glukosa yang digunakan
sebagai sumber energi bagi
mikroorganisme sehingga mendukung
pertumbuhan dari bakteri. Plate Count
Agar (PCA) bukan merupakan media
selektif karena media ini tidak hanya
ditumbuhi oleh satu jenis mikroorganisme
tertentu seperti kapang dan kamir.
4. Media MRS
Komposisi media MRS yaitu, agar,
aquades, pepton, ekstrak daging, ragi,
K2HPO4, natrium asetat, amonium siliat,
dan glukosa. Cara pembuatan MRS adalah
agar dibuat dengan mengencerkan 62 gram
bubuk Pornadisa MRS agar dalam 1 liter
akuades. Setelah itu, diaduk menggunakan
stirer dan dipanaskan sampai bubuk
terlarut merata. Lalu medium MRS agar
disterilkan menggunakan autoclave selama
15 menit pada suhu 1210 C. kegunaan dari
MRS ini adalah untuk pertumbuhan bakteri organisme ini disebut sebagai
asam laktat. mikroorganise. Dalam praktikum
mikrobiologi dasar ini untuk
III.2.3 Pengenceran Bertingkat menghilangkan dan mendeteksi
Tujuan dari pengenceran bertingkat ini mikroorganisme ini diperlukan sterilisasi,
adalah mengurangi jumlah mikroba dalam pembuatan media berupa NA, PCA, PDA,
cairan yang akan digunakan sebagai bahan dan MRS,pengenceran bertingkat,
dalam penelitian. Prosedur pembuatan inokulasi dan isolasi.
pengenceran bertingkat adalah menyiapkan
sejumlah tabung reaksi yang masing- IV.2 Saran
masing tabung telah diisi dengan 9 mL Saran untuk praktikum selanjutnya,
pengencer. Pada tabung pertama diisi apabila ada pos-pos semoga kedepannya
dengan sampel yang belum diencerkan. praktikum dapat lebih terarah agar dapat
Ambilah sampel sebanyak 1 mL dari berjlan dengan semestinya.
tabung pertama menggunakan pipet
kemudian diisi kedalam tabung yang kedua
kemudian dihomogenkan. Prosedur ini DAFTAR PUSTAKA
dilakukan dengan cara yang sama hingga
mendapat pengenceran yang kita inginkan. Hendrawati, TY dan S. Utomo. 2017.
Hal ini sesuai dengan pernyataan Tyas OPTIMASI SUHU DAN WAKTU
(2018) bahwa digunakan perbandingan 1:9 STERILISASI PADA KUALITAS
untuk sampel pengenceran pertama hingga SUSU SEGAR DI KABUPATEN
selanjutnya sehingga didapat 1/10 sel BOYOLALI. Jurnal Teknolog. 9(2).
mikroorganisme dari pengenceran 97-102.
sebelumnya. Setelah pengenceran pada Andriani,R. 2016. Pengenalan Alat-Alat
tabung pertama selesai, 1 ml sampel Laboratorium Mikrobiologi Untuk
dituang ke dalam tabung kedua Mengatasi Keselamatan Kerja dan
menggunakan mikropipet, kemudian Keberhasilan Praktikum. Jurnal
dihogenkan dan menuang 1 ml sampel dari Mikrobiologi. 1(1).
tabung kedua ke tabung ketiga. Wulandari, NKM. 2016. Uji angka
lempeng total dan identifikasi
III.2.4 Inokulasi Escherichia coli dalam jamu gendong
Inokulasi merupakan proses perpindahan beras kencur yang dijual di pasar
mikroba dari lingkungannya ke media yang sambilegi wilayah maguwoharjo
baru. Jenis inokulasi ada dua yaitu spread kecamatan depok kabupaten sleman
plate dan pour plate. Dimana spread yogyakarta. Skripsi. Universitas
merupakan media padat yang Sanata Dharma Yogyakarta.
menggunakan metode sebar dipermukaan. Yogyakarta.
Sedangkan pour plate merupakan media
cair yang penyebarannya bisa sampai ke Fitri,A; dkk. 2014. Peralatan, Sterilisasi
dan Media Pertumbuhan Mikroba.
tengah hingga kedalam.
Yunita,M; Y.Hendrawan; dan
IV. PENUTUP R.Yulianingsih. 2015. Analisis
Kuantitatif Mikrobiologi Pada
IV.1 Kesimpulan
Makanan Penerbangan (Aerofood
Mikrobiologi merupakan ilmu yang ACS) Garuda Indonesia Berdasarkan
mempelajari mengenai organisme dimana
 TPC (Total Plate Count) Dengan
Metode Pour Plate. Jurnal keteknikan
pertanian tropis dan biosistem. 3(3).
237-248.
Tyas, DE dan N.Widyorini. 2018.
PERBEDAAN JUMLAH BAKTERI
DALAM SEDIMEN PADA
KAWASAN BERMANGROVE DAN
TIDAK BERMANGROVE DI
PERAIRAN DESA BEDONO,
DEMAK . JOURNAL OF
MAQUARES. 7(2). 189-196.