Professional Documents
Culture Documents
Bacteriologie Speciala II
Bacteriologie Speciala II
Minidefiniţie
- Bacili gram-negativi foarte mobili (flagel unic polar/flageli laterali)
- Catalaza+oxidaza pozitivi
- Nepretenţioşi nutritiv, fermentează zaharurile fără producere de gaz
- Cresc optim la pH alcalin
Habitat
- Microorganisme acvatice
- Unele specii sunt halofile (V. parahaemolyticus, V.vulnificus) – ape marine, estuare,
delte, porturi
- Altele nonhalofile- V. cholerae – şi în ape dulci (prezenţa tranzitorie)
În apele marine : 3 forme – liberă
- epibiotică – forma simbiontă asociată cu zooplanctonul, cu scoici,
fructe de mare
- dormantă - microvibrioni + celule viabile necultivabile în condiţii
obişnuite
V. cholerae , serogrupe holerigene : O:1, O:139
Caractere de cultivare
0
- Medii uzuale , preferenţial aerob, optim 37 C şi pH 8
- Rezistenţa la pH alcalin (9,5) + toleranţa la bilă + relativă salinitate = medii selective
Caracterele biochimice – 2 biovaruri : clasic şi El Tor
Structura antigenică şi biovaruri
- segrup O:1 – 3 serotipuri definite prin factorii antigenici A, B, C – Ogawa (AB), Inaba
(AC),
Hikojima (ABC)
O:139 – mutantă O a biovarului El Tor
Substanţe elaborate
- Enterotoxină termolabilă
- Neuraminidaza – favorizează fixarea pe microvili
Patogenitate naturală şi patogeneză
Holera TIA umană – 3 etape
8 9
- Ingestia şi depăşirea barierei acide gastrice – 10 - 10 vibrioni
- Intervenţia neuraminidazei (hidrolizează învelişul mucos protector eliminat prin
materii fecale) + aderenţa vibrioni la enterocite
- Enterotoxina termolabilă (TL) codificată cromosomal– peste 95% omologie
structurală şi imunochimică cu TL produsă de ETEC (plasmidic) – stimulează excreţia
clorului
- Holera
- - Incubaţia 2-5 zile
- Diaree apoasă, vărsături, pierdere hidro-electrolitică (1 L/oră) – “fiertură de orez “cu
flocoane de mucus – materii fecale apoase, clare, cu resturi de mucus (NA) ,fără
reacţie inflamatorie
- Forme clinice – hipertoxică (holera sicca)
- - moderate
- - inaparente
- Imunitatea
- Ig A scretori
Epidemiologie
- Rezervor – bolnavi, purtători asimptomatici, apa contaminată ( forma epibiotică şi
dormantă pot persista ani de zile în ape dulci şi salmastre)
- Transmitere – fecal-orală ( apă, alimente, mâini)
- Manifestare în populaţie
- Epidemic – zone uscate, populaţie lipsită de imunitate; cazuri de import prin
pelerinaje, emigrare. + 50%
- Endemic – zone umede ( delte, estuare, litoral marin)
Profilaxia
- Regim internaţional de carantină
- Măsuri de igienă individuală şi colectivă
- Vaccinare antiholerică – clasic inactivat
- administrare orală – o fracţiune saturează receptorii, alta
stimulează formarea IgA secretori
- Chimioprofilaxie – nitrofurani, sulfamide nerezorbabile, tetracicline
Diagnosticul de laborator
- Diagnosticul direct – urgenţă
Coprocultura - materii fecale, tampon rectal
Microscopie directă a preparat umed , frotiu colorat gram sau din bulionul de îmbogăţire
după câteva ore de incubare: vibrioni mobili, gram-negativi
Cultivare – mediu selectiv+ mediu de îmbogăţire
Colonii suspecte aglutinate cu ser anti O:1 -+ identificare prezumtivă
- teste biochimice confirmă diagnosticul specie, biovar
- Aglutinarea cu seruri monospecifice – precizează serotipul
Tratament
- Reechilibrare hidro-electrolitică – primară
- Doxiciclină, sulfamide nerezorbabile
V.cholerae , non-holerigen (VNH, NAG), non O:1
- Sindroame holeriforme benigne, infecţii ale plăgilor
- Sursa – ape nonsaline, bolnavi
Vibrioni halofili
- Specii marine -V. parahaemolyticus- TIA – peşte, scoici, crustacee ; septicemii
- V.vulnificus – infecţii ale plăgilor
SPIRILI
Genul Campylobacter
Gr. Kampylos - încurbat
Minidefiniţie
- Bacili gram-negativi încurbaţi până la helicoizi, mobili prin flageli mono-, amfi - rar
lofotrichi.
- Pretenţioşi nutritivi, microaerofili, carboxifili
- Cresc relativ lent la 37-420C, oxidazo+.
- Generează forme cocoide, necultivabile
Habitat
- Tub digestiv ( mamifere, păsări)
Campylobacter jejuni
- Specie foarte mobilă, monotrichă
- 2 antigene importante – termolabil, flagelar
- LPS
Patogenitate naturală
Factori de virulenţă – capacitate enteroinvazivă – inflamaţie
- enterotoxine
- Poate ajunge în sânge , este foarte sensibil la acţiunea bactericidă a serului –
excepţional septicemii
- Uzual determină diaree acută de tip invaziv (asemănătoare EIEC)
- La nou-născut şi sugar evoluiază epidemic în creşe
- Copii mari sdr. Pseudoapendicular
- Copmplicaţii – artrite, sdr. Guillain-Barre
Imunitate
- Infecţii repetate determină imunitate – explică portajul asimtomatic în ţările tropicale
Epidemiologie
- În ţări dezvoltate –infecţia cu rotavirus+ Campylobacter jejuni – principala cauză
BDA
- Consum crescut de carne de pasăre
- Lapte nepasteurizat+apă= epidemie
- În spitale a2-a cauză de BDA după Salmonella
Diagnostic
0
- Cultivare –mediu selectiv, incubare microaerofilă, 42 C
- Identificare – caractere de cultivare, morfologice, biochimice, sensibilitatea la
antibiotice (acid nalidixic, cefalotin)
Diagnostic serologic – de interes în complicaţii (artrite)
Tratament
- Macrolide
- Înfecţii sistemice: aminoglicozide, amoxicilină+acid clavulanic
Campylobacter coli
- 1/5 din campilobacteriozele diareigene
- Rezervor – porcii
Campylobacter fetus
- Poate fi izolat din materii fecale dar infecţia intestinală este doar un fenomen
- Determină septicemii la imunodeprimaţi
- La gravide –avort
- Tratament asemănător Campylobacter jejuni
Genul Helicobacter
-1982
- Gazde – om şi animale
Morfologie asemănătoare Campylobacter, este lofotriche
Cultivare - 370 C pe medii îmbogăţite
Patogenitate
- Factori de virulenţă – ureaza – eliberează amoniu liber, neutralizează aciditatea
gastrică
- citotoxine şi enzime cu acţiune directă asupra celulelor epiteliale
- mediatori ai inflamaţiei
- Infecţia cronică determină gastrită, frecvent asimptomatică, una din principalele
cauze ale ulcerului recidivant – favorizat de tabagism, factori genetici, terapie cu
antiinflamatorii nesteroidiene
- Semnificativ asociat adenocarcinomului gastric şi limfoamelor gastrice
Imunitate - inoperantă
Epidemiologie
Rezervor – stomac uman
Izolare – materii fecale şi gură. Nu a fost găsit în apă şi alimente.
Transmitere – fecal orală, oral-orală
Infecţia contractată precoce în copilărie şi evoluează cronic
Prevalenţa infecţiei în relaţie directă cu condiţiile socoi-economice
Diagnosticul de laborator
Metode invazive- biopsia mucoasei gastrice – testul ureazei
- frotiu colorat Gram
- cultivare +antibiogramă
- PCR
Metode noninvazive – testul respirator cu uree marcată
Tratament
- Niciun antibiotic nu are eficienţă suficientă in vivo
- Amoxicilină+claritromicină/ tetraciclină+metronidazol, la care se adaugă un
inhibitor al secreţiei acide gastrice (Omeprazol). Cură de 15 zile – definitivă
dacă absenţa bacteriei la controlul după 1 lună de la terminarea tratament.
Pseudomonade, Acinetobacterii
Pseudomonas
Burkholderia
Stenotrophomonas
Pseudomonade
-bgn drepţi sau uşor încurbaţi , mobili, nepretenţioşi nutritiv, strict aerobi.
- Metabolism oxidativ
- Catalazo-pozitivi, oxidazo-pozitivi.
Habitat
-larg răspândiţi în natură – adaptaţi la o mare varietate de compuşi organici ca unică sursă de
carbon şi energie, chiar şi în cantităţi minime aceşti compuşi permit creşterea în medii
0
cu pH-neutru la temperaturi 5-42 C
- Prezenţi - în apă de suprafaţă, subsoluri umede
- pe vegetale
- în alimente
- Fac parte din - microbiota indigenă a omului
- fondul microbian de spital, fiind izolaţi din apa distilată, soluţii saline,
soluţii de coloranţi, antiseptice şi dezinfectante, medicamente, soluţii perfuzabile,
coliruri, instalaţii tehnico-sanitare, apa florilor, etc
Cel mai frecvent izolat
Pseudomonas aeruginosa
- Bgn monotrich sau lofotrich, mobil
- Unele tulpini produc o substanţă extracelulară mucoasă, alginat, asemănătoare unei
capsule
Caractere de cultivare
0
- Strict aerob, optim 30-37 C
- Disociază spontan intraclonal cu formare de colonii de la mici la mari cu tendinţa de
invadare a mediului.
- Tulpinile care produc alginat formează colonii mucoide
- Formează 2 pigmenţi difuzibili – piocianina ( albastru)
- pioverdina ( galben-verde sau galben brun), dau
coloniilor şi progresiv mediului culoare verde strălucitoare. Ambii pigmenţi sunt
fluorescenţi
Coloniile mucoide sunt nepigmentate
Alţi pigmenţi hidrosolubili sunt produşi mai rar – piuorubina, piomelanina.
Pe agar sânge – multe tulpini hemolitice, colorează tardiv mediul în brun.
Tipic culturile au luciu metalic, degajă aromă caracteristică ( tei, iasomie) şi frecvent presărate
cu plaje de liză.
Structura antigenică
- Membrana externă conţine un complex LPS-proteic- suportul antigenului O somatic –
defineşte 16 serogrupe şi acţionează ca endotoxină
- Receptori specifici pentru bacteriofagi (suport al lizotipiei) şi bacteriocine (suport al
bacteriocinotipiei), markeri epidemiologici
- Antigenul flagelar H defineşte serotipuri
- Unele tulpini produc un exopolizaharid numit alginat
Substanţe elaborate şi factori de virulenţă
În afară de pigmenţi elaborează numeroase substanţe difuzibile
- Exotoxina A – inhibitor al sintezei proteice similar cu toxina difterică, efect necrozant şi letal
la animal de experienţă
Patogenitatea naturală
- imunodepresie
- cancer
- mucoviscidoză
Infecţii locale
Septicemii
- pot complica infecţiile localizate sau evolua aparent primitiv după translocare intestinală a
bacteriei la pacienţi cu hemopatii maligne
Epidemiologie
Profilaxia
Elemente de terapeutică
Alte pseudomonade
B. cepacia
Stenotrophomonas maltophilia
Ca şi piocianicul sunt prezenţi în medii umede, în mediul de spital fiind vehiculaţi prin apă
(robinete,dializă, instalaţii de umidifiere, etc)sau mai rar prin soluţii ( antiseptice,
soluţii injectabile, perfuzabile) deja contaminate.
Genul Acinetobacter
- Bacili gram-negativi, groşi,frecvent capsulaţi, strict aerobi, oxidazo-negativi
- 19 specii prezente în fondul microbian de spital – A. baumannii/calcoaceticus, A.
lwofii
Habitat
- Saprofite în sol şi apă dar pot să apară şi în flora flotantă a omului sănătos
( tegument, TR, TG)
- În mediul spitalicesc – aer, instalaţii sanitare, instrumentar medical; natural rezistentă
la multiple antibiotice – infecţii nosocomiale
Patogenitate
- Oportunist - gazda imunocompromisă ( ITR, ITU, septicemii)
- Infecţie nosocomială- secţii arsuri, ATI – pneumopatiile cele mai frecvente localizări
Epidemiologie
- Epifenomen al spitalului modern
Tratament
Caractere generale
- C.diphtheriae
- C.ulcerans
- C.pseudotuberculosis
C.diphtheriae
- 1883 –Klebs
- 1884 – Loeffler – izolează bacilul
- Diphteros –piele
Caractere de cultivare
Mediul Loeffler – bulion glucozat cu adaos de ser de bou cât să poată coagula în pantă
- bacilul difteric cultivă în 14-18 ore ( nici un patogen respirator nu cultivă în
acest interval)
- colonii cu aspect de spermanţet, albe lucioase, bombate
- numai pe acest mediu prezintă morfologia tipică deoarece are concentraţia
optimă de fosfaţi
Geloza sânge – colonii mici, granulare, cenuşii, margini neregulate, zonă îngustă de hemoliză
- morfologia este necaracteristică
Mediu selectiv – telurit de potasiu – colonii negre datorită reducerii intracelulare a
teluritului la telur metalic proprietate pe care o au şi alte specii ale genului; mediul
Tinsdale – conţine şi cistină – colonii negre în conjurate de halou cafeniu
Există 3 biotipuri diferenţiate prin caracterele de cultivare şi patogenitateC. diphtheriae
gravis, mitis, intermedius
Factori de virulenţă
- Conversia lizogenică – toxigeneza la C.diphtheriae, C.ulcerans
- profagul ß poartă gena tox care codifică la ambele specii aceeaşi
toxină proteică
- Toxina tip A-B – fragmentul B (ligandul) iniţiază pinocitoza fragmentului A după
fixarea pe receptori specifici, fragmentul A hidrolizează NAD şi transportă ADP –
riboza pe factorul de elongare 2 , controlează elongarea lanţului polipeptidic
- este activă doar pe ribozomii eucarioţi
- efect – sistarea sintezei proteice – necroza tisulară
Toate celulele sunt receptive la toxina difterică dar simptomatologia este dominată de
manifestările neurologice şi cardiace; moartea frecvent survine prin insuficienţă
cardiacă. Leziuni hemoragice şi necrotice pot fi remarcate la nivelul oricărui ţesut sau
organ.
Introducerea unei singure molecule de fragment A într-o celulă eucariotă determină moartea
acesteia în câteva ore.
Patogenitate naturală şi patogenie
- Difteria – boală foarte gravă, poarta de intrare faringiană foarte rar
conjunctivală
- toxina adsorbită pe mucoase necrozează epiteliul şi declanşează un răspuns
inflamator superficial. Pe suprafaţa leziunii se acumulează exsudat fibrinos, infiltrat cu
polinucleare şi hematii, numeroşi bacili. Acest exsudat se organizează sub forma unei
false membrane – depozit cenuşiu, greu detaşabil, care lasă suprafaţa sângerândă. Bacilii
din falsa membrană continuă să producă toxină care ajunge în sânge.
- efectele intoxicaţiei sistemice – infiltraţie grasă şi necroză miocardică, renală,
suprarenale, nervi, hemoragii importante în cavităţile seroase.
- Nevrita toxică difterică – paralizii ale palatului moale
- muşchi oculari - extremităţi
- Difteria plăgilor – evoluează benign, absorbţia toxinei scăzută
Clinic
- Angină şi febră
- Adenită cervicală importantă – “gât proconsular”
- Prostraţia şi dispneea apar precoce
- Falsele membrane pot coborî cu formare de crup laringian – asfixie mecanică –
traheotomie de urgenţă
- Faza sistemică – toxemie
- miocardită
Bacilii difterici pot fi izolaţi din leziunea faringiană sau cutanată împreună cu Streptococcus
pyogenes (30-75%).
Tulpinile netoxigene – endocardite(frecvent)
- faringite
- rar infecţii cutanate, bacteriemii, osteomielite
Imunitatea
- Anticorpi antitoxici în concentraţie de cel puţin 0,01 unităţi/ml sânge
- Cei cu titrul 0,01-0,9 unităţi antitoxice monitorizaţi anual
- peste 1 unitate/ml au protecţie de durată
Elemente de terapie etiotropă
Antitoxina difterică + antibiotic
Antibiotic – penicilină
- eritromicină
- cefalotină
- tetraciclină
- gentamicină sau ciprofloxacină
Epidemiologie
- sursa – om bolnav+purtător sănătos+convalescenţi (nas sau nasofaringe săptămâni
sau luni)
Rata portajului de bacil difteric toxigen 1% din populaţia generală imunizată
- Calea de transmitere – picături Flügge, obiecte contaminate cu secreţii
nasofaringiene
Profilaxia
- Specifică – vaccinarea şi chimioprofilaxia
- Vaccinarea –antidifterica între 6 şi 9 luni + 2 rapeluri
- după primovaccinare titrul anticorpilor sub 0,01 unităţi/ml creşte la 0,1
unităţi/ml după 2 rapeluri, dar scade semnificativ la vârsta adultului. De aceea este
necesară monitorizarea stării de imunitate antidifterică în populaţia generală şi
revaccinarea persoanelor neprotejate.
- Chimioprofilaxia – contacţi difterie
- eritromicină 7-10 zile sau benzatinpenicilină în
doză unică
- contacţi cu titru neprotector sunt şi vaccinaţi
C. ulcerans
- Patogen animal
- Tulpinile toxigene determină difterie
Tulpinile netoxigene – granuloame necrotice, faringite, endocardite
Specii difteroide
- În serviciile medicale care utilizează metode invazive infecţiile cu difterimorfi ocupă primul
loc
C. jeikeium
- Determină - bacteriemii
- endocardite
C. minutissimum
- Eritrasma – infecţie a tegumentelor axilare sau pubiene – fluorescenţă roz sub UV
- Cultura pe Mueller – Hinton –fluorescentă
Poate determina – bacteriemii
- peritonite de cateter
- endocardite
- infecţii respiratorii, ale sânului
C.urealyticum
- Infecţii urinare – formare de calcului vezicali datorită alcalinizării urinei
- Infecţii sistemice
C. pseudodiphthericum, C. xerosis, C. striatum
Genul Listeria
Listeria monocytogenes
Factori de virulenţă
Habitat natural
• Ubicvitară
• Prezentă în sol şi intestinul ierbivorelor
• Poate fi prezent în microbiota colonului, rar pe mucoasa vaginală sau tegument
Manifestări clinice
Clostridium tetani
Factori de patogenitate
• Bacterie neinvazivă
• Tetanospasmina, codificată plasmidic, reprezintă factorul major de virulenţă, care
difuzează de la nivelul leziunii către SNC
• Toxină de tip A-B, unică antigenic se leagă de receptorii gangliozidici de pe suprafaţa
neuronilor şi blochează eliberarea neurotransmiţătorilor cu efect inhibitor al influxului
nervos
• Determină contracturi spastice ale musculaturii striate
Habitat natural
• Bacterie ubicvitară
• Prezentă în flora intestinală la erbivore şi în sol, mai ales cele fertilizate cu gunoi de
grajd
Manifestări clinice la om
Imunitatea