GROSSMAN ‘Gna Dn Vaan! FORME DE VALIDAGION DE METODO ANALITICO PRODUCTO: TNFORHE No, IRV-16.008 BEDOYECTA TRI SOLUCION INYECTABLE PRINCIPIO AGTIVO’ CONGENTRAGION: HIDROXOCOBALAMINA 5000.00 pg/mL. TTS: [Revaiacin dat ttodo Analico para la valracién do Hidunuoubelanina ws Bedoyosa Ts Sohne Injectable, por Espoctofoiomaria UV/VEBIo. PROYECTO No RVALOOE TREFERENCI: Método Revaidado en Laboratos Grostman, S.A, CORCLOSION: 1 método analito cumple con os crt estabiecios polo que puede sor litzado en ands runaro ‘do conto de elas y monoreo da ested del producto para materia rina. Realzado pon Revisado por ‘QF. Roba Isola Heméndoz Ch (QF. Blanca Velaznucz ‘Quimica de Desarrollo Analtice ‘Geren de Conta de Calidad Nysico de México, S.A. de CV. LLaboratrios Grossman, S.A. Fecha 24 (ase |i Fecha: 251 AG0\'S Rovisado par ‘Aorobado por a QF, Siva eérasco FB. G var ‘Jefe de ContelFisicoquimico Gerente Aseguramiento de Calidad / Resp, Saitario Laboratorios Grossman, S.A Laboratrios Grossman, A. Feta: 25 (Goh Fooha:_25/4. Fecha de a Revaldacion: Fecha de Proxifia Revision Marzo, 2015 Marzo, 2020 “7GAOSSMAN ‘Una Ds Vaart REVALIDACION DEL METODO ANALITICO PARA LA VALORAGION DE HIDROXOGOBALAMINA EN 'BEDOYECTA TRI SCLUGION INYECTABLE, POR ESPECTROFOTOMETRIA UVIVISIBLE, SONTENIDO: Hosa 1. METOpO ANALITICO 3 |. VERIFICACION DEL SIS"EMA, 6 |W PRECISION DEL SISTENWA 7 1, UNEALIDAD DEL SISTEMA 8 V.LINEALIDAD DEL METOBO 0 VL. EXACTITUDY REPETIBILIDAD DEL METODO AL 100% 2 Vil PRECISION INTERMED 0 Vil, ESTABILIDAD DE La MUESTRA Y DELA SOLUCION PATRON DE REFERENCA “4 1X. ESPECIFICIDAD DEL METODO 6 x TOLERANCIA 6 XI, CONGLUSIONES FINALES ca Il, BIBLIOGRAFIA ” Xi, ANEXOS o an7GROSSMAN ‘Une Dio Vaan! |.METODO AWaLinico 4. Reactios Ava Hicraxocbalamina Acetatosustanela de referencia 2, Matec yEouoo Balanza nation Metracoe volumateos de 25,50 y 100 Pietns volmétricas de 2yS mi Espectofodmote Uv! Vila callrado igen, ‘Coda do evarz de 1 mn 3. Preparacn de Sluions. 31 Diente Aue. 82 Preparactin de asain pron dorterencia Proparar por dupieado Petar con exactiud aprovinadamenta 25.0 mg de Nérxocobalamina acetato sustancla de referencia 0 ‘stiar do taba (equbsante a eproximadamente 20.0 mg do eustencla pu a 100 %),Y ansforr« un ‘mate volumétreo de 100 i, alone 60 do duets, mezclar crane § minios, vara afro con rte y mezclar Transfrr una aicnota 50 mL a un matzz vluntico de 25 ml, dey vara foro con dente, ‘mezcer. Concentscinsproxinads 40.00 pnt de hidoxceobalamina acetal 33. Prepaarlasolucén muestra para materia prin Proparr por duped Pesar con exact aproxinedamente 28.0 mg de hcovocobalamina alata equieonte& aproximadaments 20.0 mg de sustanca pura a 100%) y Wansorra’un mataz volumetric de 100 ml, adilonar 60 de dente, ‘mozelar durante § minutos, levar al sfro con dente y mezcar. Transerie una alcuola 60 mk. a un mata volumébco de 25 mk, dry Tovar al afre con dluene, mezdae, Conoentacén aproximads 40.00 yg. de idroxocobaamina aca, 34 Preparaciin dela cokelén mossta para producto teinado Preparar por dead anrGROSSMAN ne Dose Vata Homogonsza ol conlenode 1 jernges, tanefrr 2 ml do la mucsra aun mataz vlunétioa de 60m, le {love a afora.concvens, merclar. De esta sluckin transfer § mi aun matraz vlumetion de 25 mL, Sey leva a foro con dene, ezcar. Conceritacén aproxinada: 40,00 i de hidroxocoblamin acto 4. Epfablidad de as salucones Lat goluconss muesiasy pari dereterencia sts para su ails eon estables durante 24 hen temperatura ambiente y protege: do laa 5. Provedimiente ‘54 Condiciones dei Expecrbtimeto UVIVsble Longitude onda 951 9m y 520 om ange 200/0m ~600 nm ‘Acco Manual Blane: Aus “Temafo den ol tom Encoder e equpo yf tirparae 15 minutos antes del ands '5.2Doterinar is asorbance do la sbi pain da raferacla a 251 nn wzand agua come Manco Determinar la absorbance dens solucones de eerenclay slucbn de a muesta a $20 nn, uzar gue como vanes, Colca a polencia de a souién dereforanci iran ol coefiente de extn de hroxocohstamina sctato 8.961 rm (e ovellent 68 de 187 9 una concentactn de 40.00 won) fm 100 mk 25 Folomin do acwnde dorvorren ~ A 92, 26m Donde: ‘Am: Absorbanca e lasoluin ptr de referenct, Pu: Peso de ls muasta en gramos, sar: Cosine do exinelén de hseoxoeobalaminaacotate a 351 nm Calcul conten de hidrxocobatnmina lizard la sigue fora saci tk Bak ese Donde: ‘Am: Absorbanca de a soluién muost, anrGROSSMAN (Ura ity lant AR: Absorbancia de a olin ptr de referencia, VM: Volumen dea meosta 6. ‘Suotancia de rfernci de Hekonocobolam No.delow: HOA-TatAC Valoracién: Sodelermin en cada andtsls Vioencia: — OCTHIS 7. Placabo placobo para la espoctcded, tneiod,exacitudy repelled del métadoanaltico fue prepared de acuerdo ala férmula yt pocedimiento de manutaclura dl depsiamento de Decale Farnocbiion de Nysoo de Mio, S.A. do Cv. Lote: ss8¥5201 8. Producto El producto para la especicliad,precistn intermedia det métod, estabidad de la mesa, robuslee y 14 do severdo Ia rata procadmlent de manufctics del ‘olrancia del métodoanalio fue pre Laboratories Grossman S.A Lote: 108678GROSSMAN ‘Une Dis Vaart I VERIFICACION DEL SISTEMA PARA HIDROXOCOBALAMINA ‘Concentacn: 4,04 yg mL. 02728 02728 02r8 o2rzr 02720 (Coetente de vaielén vom «30% Referonla: Expediente RVAL-15008 paquele 1 enGROSSMAN ‘Une Dien Yalan ‘PRECISION DEL SISTEMA PARA HIDROXOCOBALAMINA Coneentacn: 41.94 gm tecia Coetente de vartetn (2.9) 02% NA 518% Roforanca:Exposinte RVAL-5-008, paquete 2 a7GHOSSMAN ‘Une Dist lane |V LINEALIQAD DEL SISTEMA PARA HIDROXOCORALANINA (Gréfica No.1) 30 or 50 ost 80 best 1% 3146 8 3146 ts 3146 100 aio8 100 avon 400 aro8 125 ‘S288 28 203 25 28s 150 e201 180 e201 150 east Cootsonte de determinacén (4) 4.9000 Intrvalo de confanzaparnlapenenis (Cm) 9.0083 0.0074 2098 1 dob insu lero Referenia Expodente RVAL-15003, paquote 2 onGROSSMAN ‘Uo Von (GRAFIGA No. 4 LINEALIDAD DEL SISTEMA PARA HIDROXOCOBALAMINA UINEALIDAD DEL SISTEMA IDROXOCOBALAMINA = = 2 asso ‘CONCENTRACION fut) onrGROSSMAN ‘Une Dit alan \V.LINEALIDA DEL METODO PARA HIDROXOCOBALAMINA (Gréfiea No.2) | 29 5173 oor Be 5160 fos | 006 De 5.173, 0.6 ar To247 ‘a7 ar 4029 en Sas 10230 8.13 ee 18.201 09.15 es 15.281 818 | oz es 45.357 96.35 Poncionto(m veralo de ontienza para pendent (Km) orders al evign (b>) nervalo de conienza pa aordenada sein (1b) Cooisonte de determina") | odia a periontoracuperato Intralo do conianza par ametiapoblacional (10) cootienta do varia (CV) ogres oer, 14881 ose "1 ‘eb incu ia nidad “0 2be nc a oro 08 970-1030% <4 promedio aitstico fosuye on linea 330% 1G. para ead nol dobo ser nen 3.0% Reforoncla: Expasonte RVAL-16008, paquole 4 sonGROSSMAN ‘Une Din Valoant ‘GRAFICA No, 2 LINEALIDAD DEL. METODO PARA HIDROXOGOBALAMINA CANTIDAD RECUPERADA (mg) LINEALIDAD DEL METODO Bedoyecta Tri Solucién Inyectable Hidroxocobalamina mor — 150 | —__ 7 woo + — a 0 |. - y= 0.97644 + 0.0880 00 4 ao so saa 160 mo CANTIDAD ADICIONADA (mg) tinrGROSSMAN Une Dhiba Valant 4 {UD Y REPETIBN AL 100% PARA HIDR( Media del porno reaperado (2) 00.5% 970-1030 % Ietrvnn da oetanza pala mada goblaconal | 97.0 98.4 | ol promod atméico co) seine en eintarvalo Cosine de varie (C.) 00% 530% Referencs: Expedente RVAL-16-003, paquets S wTGROSSMAN ‘Una Din Valens 5 PRECISION INTERMEDIA PARA HIDROXOCOBALAMINA a rockin intermedia dl mélod ge evs a cabo witzand eat 108673 de Bedoyeca Te Soluce yecabe ‘Contenido wsrien: 6000.00 9 ‘Anal | Momendez yP. Guevara, Media) 108.7% Coon de varacin () 05% NA <30% Refeorea: Expedinte RVAL5-08, paqule 6 santGROSSMAN Une Die Valant vm, LaMUEsTRAY DELASt PATRON DE REFERENGIA Pf TIDROXOCOBALAMINA. Bedoyecte Ti! Soluctinnyectable. Las muesta sas para su ans se mankiviren a temperatura ambiente poleidas de la zon el abort Le aierenca absolute de 12 moda artmétca de cada Jondclan de amacenale respeco al andlisis ical eh deb cor 50% FRofrencs: Expotionte RVAL-18008, paquele 13, vanGROSSMAN Une Dio Valant IX ESPECIFICIDAD DEL METODO PARA TIAMINA CLORIIDRATO Se proparaon muestas del plaosbo, products leminade y materia pina; se anaizaren oblanéndose los siulontos restates 28) Blanco no ina cone respuesta dela leraccn de Hiexooobalamina, )Eptacebo no nteree con respuesta doa intracién do Hiroxecobalamina, 1 método 6s especto, ya quero hayntererencia de placebo en la Respuesta de Hitroxocobalaina a 520 0m, “Ver anexo Referencie Expesente RVAL-16-08, paqueto 12 sen7GROSSMAN Una Dein Vato X.TOLERANCIA PARA HIDROXOCOBALAMINA Spun results Equipo, Uso Espocko UN Pern Ener Mode: Lamba 28 ‘Nomero de serie so1sooroz21 Equipo, Cambio: spectro UVM: Agent Modal ‘or0sa 453) Nimrod ere ‘cnzzsoee00 Il | ‘Se modi variable del métodeaalico de manera independionte obleriende para Hroxocabalanina os 1086 1058 2 1078 sore 3 s075, sor. El covficente de varsciin de fas sole muostas en dos condiciones terarios no dove do sor mayor a 3.0%. Referencia:Expodionte RVAL-15008, paquete 10 lL, CONCLUSIONES FINALES tenzGAOSSMAN ‘Una Diet Vand 1. Elsstoma pata Hidoxoosbalamina es preciso para una concentracin de 41.94 yg con un C.0.2% 2. El sgloma os thea para Hiroxocobaaina on un intrvalo de concentacion de 20.87 3 62.91 wml, con Una de 0.000 y cumple cone ifrvla de conianza pare crenata ergen ya pone {El método es neat para eraxcentalamina en un nterala apraxia de §:217 mq a 15.05% mg (1200 @ {526 ug de concenteciin fn), con un CV. tll de Ok yuna e000, Los C2. para cada rive on ‘monaros a mile del erred aceptacin, Curple con olivate do coiianza para a media de penta Fecuperado en al ntevdo de tablo eeablecio, para la ordanada a gan y cumple oon eared ‘onfanza para la ponder, 4. El método para Hidroxosstelamina exaco y repetibla para una cantod aproximada do 10.434 mg como ‘soneentiactin tal (4.7 sgn), corespendante 100%, con une macia dal por clon rcuperado da OB 5% Yun GN. 60 0.9% cimpie oon al nlervao do coninza para la media poblacorl 5. El méodo renudtd prcito para _la fermulackin cuando. se determing en al fe 108573. do Bdoyeca Tf salucin Inecabla. £1 .V. toll do doce andi’ do de analsas on dos ondas dforonos v0 40.08 % para Hsroxocoalamia. 6. Las solucones pttén de referencia y solucones mucsta Isias paral andiss on estbles cuando menos or un perodo de 24 hess a temperatura ambiente yprtegkias de Ia iz, ya que cumple con los eros sible, 7. Elméode es expect qe eplacabo yl blanco no inelren con la oapuesta do la Hlroxacebalarina 8. Elméloo os folerantealreproduck ol andals de Hiroxocabaamina, para Bedoyecta TH sotcén inyectblo al cambier de Espodtfotrate Petkn Elmer y Ezpoctootomet Agent >a, BIBLIOGRAFIA 4 Ropets do Valtacin Ne OOVAL-82, 2, PNO GLF-0583, Valiain de Métodos Analiics, Labortevos Grossman SA. 3. PNO GLF-OT82, Elaborlén y Desarall de Prtocolo do Valdacién y Métodos Aralioos. Laboraoros Grossman $A 4, Guia de Valdacion de Mods Anaiticns, Colegio de Quimicos Famackutces Biogas México AC., 1 Ed Mayo 2002 5. Norma Ofissl Mexicana NOMOS®.SSA1-201S. Buonas Précteas do Fabrcaién de Motikamentos para Erlatlecimiontos dela Insta Quimico Farmachutiesdedlesdos a la Fabricalén de Medcarents. 6. ICH Harmeniod Trparte Guideline, Tex! on Valdaton of Analyical Procedures, by the ICH Steering CComittes, 27 October 1994 (Complementary Guideline on Methodology dated 6 November 1866 incorporate In November 2008). XIV. ANEKOS