Macrofagi associati al

tumore
(TAMs)
 Immunosorveglianza
Infiltrati linfocitari
attorno ai tumori e
nei linfonodi

Incidenza di alcune
neoplasie in soggetti
immunodeficienti

Cellule T e
anticorpi specifici
per alcuni tumori

Risposta positiva ad agenti

terapeutici che stimolano la
risposta delle cellule T dell'ospite
 Macrofagi Cellule NK

Immunità anti-tumorale

Linfociti T
citotossici (CD8+)
Anticorpi
Il microambiente tumorale
L'infiltrato dei TAMs è generalmente associato a cattiva prognosi

Melanoma
 Esistono “vari tipi” di macrofagi!
Risposta di tipo Th1
Uccisione dei patogeni fagocitati
Resistenza ai tumori
(Danno tissutale)

Linfociti Th1, macrofagi e NK Vari patogeni Macrofagi, cellule

del parenchima
IFN-γ LPS
GM-CSF

Recettori per citochine Citochine pro-infiammatorie Citochine

(es. IL15, IL2, IL6) (es. TNF, IL-1, IL-6, INFβ) (es. IL-1, IL-6, TNF)
Molecole di attivazione Chemochine Chemochine (es. IL-8)
(es. CD36) (es. CCL2, CXCL10, CXCL11) Presentazione
Molecole di adesione Molecole per presentazione dell'antigene, fagocitosi,
(es. ICAM-1) dell'antigene (es. MHC) attività microbicida
 M-CSF

Linfociti Th2,
eosinofili, basofili, Surrene Leucociti
macrofagi
Glucocorticoidi IL-10
IL-4 Complessi
immuni

Risposta Th2 Risposta Th2 Azione anti-infiammatoria

Risposta allergica e Immunità umorale Inibizione risposta Th-1
antiparassitaria Risposta allergica e Riparazione tissutale
Riparazione antiparassitaria Promozione tumorale
Fibrogenesi
Metabolismo e polarizzazione M1/M2
Mantovani et al., 2002
- Alta produzione IL-12/IL-23
- Bassa produzione IL-10
- Efficiente produzione di
molecole effettrici (es.
arginina → NO)
- Efficiente produzione di
citochine infiammatorie (TNF,
IL-1, IL-6)
- Chemochine e recettori per
chemochine
- Risposta Th1
- Resistenza a parassiti
intracellulari e tumori
- Bassa produzione IL-12/IL-23
- Alta produzione IL-10
- Variabile efficacia di
produzione di citochine
infiammatorie
- Alti livelli di espressione di
recettori scavenger e del
mannosio
- Impiego di arginina per
produzione di ornitina e
poliamine
- Clearance dei parassiti e
immunoregolazione
Polarizzazione o stato di
attivazione?

Le polarizzazioni complete a M1 e M2 rappresentano gli estremi di un

continuum di stati funzionali dei TAMs.

Fenotipo e stato di attivazione dei

TAMs – piuttosto che il loro numero –
Fasi precoci della hanno valore prognostico!
trasformazione Stadi avanzati della
neoplastica trasformazione
Regressione neoplastica

Inibizione
dell'angiogenesi Promozione
Attivazione della dell'angiogenesi
risposta Bassa azione
immunitaria “tumoricida”
Alta azione
“tumoricida”
Mantovani & Locati, 2013
 Origine dei TAMs

Chemokines

Tumor
and
stromal
cells
 Migrazione dei TAMs (M2)
1. Molecole con azione chemiotattica nei confronti dei TAMs, alcune delle quali
prodotte dalle cellule tumorali o da quelle stromali:

- CCL2 (MCP-1)
- CXCL12,CXCL8,CXCL1, CXCL13, CXCL5 (RANTES), CXCL17, CXCL22
- CSF-1 (M-CSF)
- PDGF
- Proteine del complemento
- Frammenti di elastina prodotti dalle MMPs
- Frammenti di collagene
TAMs e fibroblasti TAMs e c. tumorali

2. Dalle aree ipossiche vengono rilasciati elevati quantitativi di molecole ad

azione chemotattica che promuovono l'accumulo di TAMs, tra cui:

- EMAPII
- Endotelina
- VEGF-A
 1

Azione Blocco della

chemiotattica migrazione
Chanmee et al., Cancer 2014
 Distribuzione dei TAMs nella massa neoplastica

TAMs

Macrofagi M2

Macrofagi M1

I TAMs si accumulano PREFERENZIALMENTE nelle aree ipossiche della massa tumorale.

I TAMs arrivati “a destinazione”:

- mostrano ridotta espressione di CCR2 e CCR5 = ciò ne facilita il mantenimento nella 2
massa tumorale

- contribuiscono alla angiogenesi assieme alle cellule tumorali producendo VEGF, bFGF e
CXCL8 (attivazione delle vie HIF-1 e HIF-2 dipendenti).
 Altre funzioni delle chemochine prodotte nel contesto
neoplastico (M2)

Le chemochine prodotte dalle cellule neoplastiche svolgono altre

funzioni fondamentali:

1. induzione della sintesi di metalloproteasi (MMPs) nei monociti;

2. reclutamento di cellule orientate verso una risposta di tipo

Th2;

3. stimolo alla proliferazione e alla sopravvivenza delle stesse

cellule tumorali;

4. il reclutamento dei leucociti determina la digestione della

matrice extracellulare cosa che crea le premesse per la fase di
invasione delle cellule tumorali.
TAMs (M2) e soppressione della risposta immunitaria
contro le cellule neoplastiche
- Le cellule tumorali possono RECLUTARE e MODIFICARE la funzione delle cellule del
sistema immunitario in modo da renderle degli attivi collaboratori della trasformazione
neoplastica (Cancer immunoediting).

- Questo vale per i monociti attivati come TAMs, per le cellule dendritiche (maturazione
e differenziamento vengono inibite) e per il reclutamento di cellule Th2.

Mantovani et al., 2002

Contributo dei TAMs alla soppressione della risposta
immunitaria contro le cellule neoplastiche

1. I macrofagi M2 hanno una ridotta capacità di presentazione dell'antigene

2. Rilasciano mediatori che stimolano la polarizzazione M2

3. La produzione di CCL22 modula la migrazione dei linfociti Treg

4. Gli M2 sopprimono la risposta delle cellule T producendo prostaglandine, IL-

10 e TGF-β: la produzione di IL-10 si associa ad induzione dei Treg e ad un
aumento dell'espressione della molecola co-stimolatoria PD-L1 che inibisce
l'azione citotossica dei lifociti T (anergia)
Angiogenesi e linfoangiogensi

↑VEGF, TNF-α, bFGF,

CXCL8, PDGF,
CCL2,MMP-2, MMP-7,
MMP-9, MMP-12,
↓ angiostatina

Correlazione tra
vascolarizzazione
tumore (densità nuovi
vasi) e conta dei TAMs
infiltranti

↑VEGF-A, VEGF-C,
VEGF-D
Funzioni dei TAMs

Mantovani et al., 2002

MMP-9
 Contributo dei TAMs alla formazione della
“nicchia pre-metastatica”

Nicchia pre-metastatica: area “preparata” in cui avverrà la colonizzazione

delle cellule tumorali in un tessuto (metastasi)

Secrezione di lisil 3
ossidasi (LOX) da 1 2
parte delle cellule
tumorali

Formazione di
cross-link nella
membrana
basale della
“nicchia”
(collagene IV)

Adesione e
attivazione
TAMs
Frammentazione Prodotti ad
del collagene IV azione
(MMPs) chemiotattica
 Regioni perivascolari
Aree di invasione e aree ipossiche

Degradazione ECM Angiogenesi

TAMs

Nicchie pre-metastatiche

“Preparazione” insediamento
metastasi
 Altre funzioni dei TAMs

I TAMs controllano il mantenimento della popolazione delle cancer stem cells

(CSCs) e la loro chemioresistenza ai farmaci con complessi meccanismi che
coinvolgono citochine, chemochine e fattori di crescita.

I TAMs sono coinvolti nel controllo della transizione epitelio-mesenchimale.

Mantovani & Allavena, JEM 2015

Per riassumere: fattori che influenzano lo stato
funzionale dei TAMs

Mantovani & Allavena, JEM 2015

 TAMs come target di terapia antineoplastica

Tre differenti strategie:

Strategia 1 - Inibizione del reclutamento dei macrofagi

a. inibizione farmacologica di CCL2
b. antagonisti di recettori (es. met-CCL5)
c. inibizione selettiva di VEGF con anticorpo monoclonale specifico
d. terapia mirata al CSF-1R

Strategia 2 - Conversione (polarizzazione) del fenotipo pro-

tumorigenico M2 in quello antitumorale M1
a. attivazione di recettori Toll-like
b. zoledronic acid + sorafenib

Strategia 3 - Soppressione dei TAMs

Induzione di apoptosi dei TAMs con farmaci (es. Trabectedin (ET-
743) oppure con peptidi a funzione pro-apoptotica che si legano in
modo preferenziale ai macrofagi M2 (M2pep)
TAMs come target di terapia antineoplastica

Modificato da: Sica & Mantovani,

J Clin Invest, 2012
 Articoli di riferimento

Yang L, Zhang Y. Tumor-associated macrophages: from basic research to

clinical application. J Hematol Oncol. 2017; 10(1):58. doi: 10.1186/s13045-
017-0430-2.

Mantovani A, Marchesi F, Malesci A, Laghi L, Allavena P. Tumour-

associated macrophages as treatment targets in oncology. Nat Rev Clin
Oncol. 2017; 14(7): 399-416. doi: 10.1038/nrclinonc.2016.21

Chanmee T, Ontong P, Konno K, Itano N. Tumor-associated

macrophages as major players in the tumor microenvironment. Cancers
(Basel). 2014 Aug 13;6(3):1670-90.

Mantovani A, Sozzani S, Locati M, Allavena P, Sica A. Macrophage

polarization: tumor-associated macrophages as a paradigm for polarized
M2 mononuclear phagocytes. Trends Immunol. 2002 Nov;23(11):549-55.