Corectarea bulozei epidermolizei distrofice a câinilor

prin transplantul de autografe epidermice modificate

genetic

Epidermoliza distrofică buloasă (DEB) este o tulburare genetică caracterizată prin

fragilitatea extremă a pielii și mucoasei, care provoacă blistere și eroziuni fără încetare cu
vindecarea neîncetată a rănilor. Fragilitatea integumentă rezultă din aderența slabă a
epidermei la derm, ceea ce lasă țesuturile vulnerabile la deteriorarea cauzată de frecare
ușoară și traume. În DEB, blisterele se vindecă cu cicatrizare, iar vindecarea mutilantă
progresivă extinsă duce la creșterea dizabilității și deformării degetelor și a contracțiilor
articulare. Boala poate afecta și alte zone ale corpului (cum ar fi gura, gâtul, ochii etc.)
provocând disconfort și, adesea, dificultăți în desfășurarea activităților vitale.
DEB cuprinde forme dominante și recesive (RDEB) cauzate de mutații ale genei COL7A1
care codifică pentru colagenul de tip VII, componenta majoră a fibrilelor de ancorare ale
joncțiunii dermo-epidermice . Col7 este sintetizat de keratinocite bazale epiteliale și
fibroblaste dermice și permite aderența între epidermă și dermă.
Pacienții cu buloză distrofică dominantă exprimă întotdeauna molecule anormale de
Col7 care transportă mutații care exercită un efect dominant-negativ.
Nu este disponibil niciun remediu terapeutic pentru DEB. Investigațiile care vizează
dezvoltarea unui tratament eficient pentru DEB au propus mai multe abordări. Terapia
genică ex vivo, care se bazează pe transferul pe bază de vectori al ADN-c Col7 , a obținut cu
succes proteina recombinantă și corectarea fenotipică permanentă a keratinocitelor și
fibroblastelor RDEB in vitro.
Construcția de echivalente de piele transplantabile folosind celule RDEB modificate
genetic , expresia unui Col7 transgenic restabilește sinteza fibrilelor de ancorare funcțională
și rezistența mecanică la traumatisme timp de cel puțin 6 luni .
În articolul studiat s-a folosit pentru cercetare , pentru a avea o abordare curativă de
lungă durată a RDEB , o rasă de câini ,,Golden Retriever,, cu RDEB ușoară . Acești câini
poartă mutația homozigotă g1906S în domeniul colagenic al Col7 care duce la o scădere
semnificativă a depunerii col7 , formarea perturbs de fibrils au o ancorare funcțională, și
duce la dezvoltarea de piele și mucoase orale blistere și eroziuni ale tractului digestiv .Acești
câini oferă posibilitatea de a testa eficacitatea pe termen lung a terapiei ex vivo pentru
RDEB la un animal mare.
Terapia genică ex vivo prin înscrierea epiteliilor transgenice este aplicabilă RDEB și că
este necesară transducția extrem de eficientă a keratinocitelor cu expresie susținută a Col7
pentru tratamentul cu succes al afecțiunii .
Keratinocitele de câini RDEB modificate genetic au fost utilizate pentru a genera foi
epidermice autologe grefate ulterior pe doi câini RDEB purtând o mutație homozigotă
missense în gena col7a1 și care exprimă cantități de bază ale proteinei aberante. Celulele
transplantate au regenerat o epidermă de auto-reînnoire diferențiată și vascularizată
repopulată progresiv de celule dendritice și melanocite. Nu a fost detectată nicio reacție
imună adversă la niciunul dintre câini.
La câinele 1, epiderma grefată a aderat ferm la derm pe parcursul celor 24 de luni de
urmărire, ceea ce s-a corelat cu transducția eficientă (100%) a celulelor epiteliale foarte
clonogene și expresia transgenă susținută. La câinele 2, transducția mai puțin eficientă
(65%) a keratinocitelor primare a dus la pierderea epidermei transplantate și formarea de
vezicule a grefei la 5 luni după transplant.
Aceste date oferă dovada principiului pentru terapia genică ex vivo a pacienților RDEB cu
mutații missense în colagenul de tip VII prin grefarea epidermei demonstrează că
transducția este extrem de eficientă pentru terapia genică a bolilor de piele moștenite .