Avaliação Microbásica – 2021/1

Data: 02.12.21

Discentes: Nota:

1) (2,0) Sabemos que na replicação celular dos microrganismos podem

haver mutações genéticas determinadas por erros de inserções de
nucleotídeos seja pela DNA polimerase ou pela RNA polimerase.
Com relação às mutações e ao vírus da COVID-19 o pesquisador
entrevistado pela CNN declarou: “Definitivamente existem áreas
principais onde o vírus prefere realizar mutações no momento”, diz.
Mas só o fato de existirem várias mutações, não significa
necessariamente que elas resultem em um vírus pior.
(https://www.cnnbrasil.com.br/saude/por-que-mutacoes-da-omicron-
nao-necessariamente-significam-que-ela-e-pior/ ).

A respeito da afirmação do pesquisador, disserte sobre as mutações

mencionadas em aula e explique porque a ocorrência de uma mutação
não significa necessariamente que o microrganismo será mais
patogênico.

Os microrganismos possuem mecanismos a fim de se adaptarem ao

meio em que vivem, as bactérias e os vírus desenvolvem suas
próprias características/mecanismos a fim de se tornarem mais
resistente ou mais contagiosos, para assim manter a prole sempre viva
e a todo vapor. Por serem organismos que estão susceptíveis a sofrer
muitas mutações, seja por erro de RNA polimerase ou DNA
polimerase, essas mutações podem causar muitas alterações que
prejudiquem os microrganismos, ou que não altere nada ou até
mesmo que aumente muito mais sua virulência ou capacidade de
contágio. A mutação consiste na alteração da sequencia de
nucleotídeos do DNA, o que pode levar a diferentes tipos de
mutações. A primeira é a mutação silenciosa, mutação que muda as
bases, porém essa alteração não causa alteração do aminoácido,
assim quando for se ter a formação da proteína, não vai se ter
nenhuma proteína diferente, não alterando por exemplo seu
metabolismo. Uma outra mutação é a mutação que substitui um
aminoácido por outro, essa mutação leva a alteração de proteína seja
ela viral ou bacteriana, essa alteração pode levar a desastrosas
alterações enzimáticas ou aumentar a virulência, pode ser o fim desse
microrganismo ou pode ser o início de um novo ser vivo mais potente
e poderoso. Ainda se têm a mutação que causa a alteração do Frame
de leitura na hora de transcrever o DNA, essa alteração e causa pela
deleção ou inserção de bases, levando a mudança de aminoácidos,
assim se têm novamente a mudança de proteína, que pode gerar um
agente extremamente patogênico ou até mesmo a morte dele.
 A ocorrência de mutações novas nem sempre significa a criação de
vírus ou bactérias mais patogênicos, isso porquê essas mutações nem
sempre vem para o bem deles, a alteração de nucleotídeos pode gerar
uma diversidade enorme de novos seres ou podem ser simplesmente
irrelevantes. No caso do COVID-19 se teve milhares de pessoas
contaminadas, a todo momento eram milhares de vírus sofrendo
mutações ao mesmo tempo, e com a chegada das vacinas esse
número aumentou ainda mais, assim no meio disso tudo se teve vírus
que morreram, vírus que permaneceram iguais, e também as
mutações que os deixaram ainda mais patogênicos e contagiosos,
como podemos observar atualmente com essas novas variantes. Ou
seja, existe mutações que causam resistência, que causam alteração
de proteína que favorecem as proteína receptoras, e também existe as
que diminui sua virulência ou que causa sua morte.

2) (1,5) Os microrganismos multirresistentes podem adquirir essas

características por diferentes mecanismos de resistência: mutação,
conjugação, recombinação gênica, pressão seletiva, entre outros. Além
disso, esses mecanismos também são importantes quando se estuda a
variabilidade genética dos microrganismos.
No artigo
https://revistaseletronicas.fmu.br/index.php/ACIS/article/viewFile/
553/675, os autores informam que “Klebsiella pneumoniae
carbapenamase (KPC)A KPC é disseminada facilmente, pois, possui
uma grande capacidade de transferência de material genético por
possuir genes de resistência e localizados no plasmídeo
(SCHENKEL,2009)”. Assim, a prevenção e cuidados nos ambientes
hospitalares constituem a principal forma de combate a disseminação
desses microrganismos
(http://www.fiocruz.br/ioc/cgi/cgilua.exe/sys/start.htm?
infoid=926&sid=32&tpl=printerview).
A respeito dessas afirmações e com base nos conceitos abordados
na aula de genética microbiana, disserte sobre a importância de boas
práticas hospitalares a fim de evitar a disseminação desses
microrganismos para fora do ambiente hospitalar (para isso, utilize os
termos e conceitos abordados sobre conjugação bacteriana).

Ao não realizar boas práticas hospitalares, seja elas em hospitais ou

em qualquer outro lugar relacionado a saúde ou que possa ter
microrganismos multirresistentes, uma conduta errada pode
prejudicar toda sociedade local, ou até mesmo os entes queridos.
Como exemplo, temos o atual COVID-19, microbiologistas
(Virologista) que estudam essas novas cepas devem tomar muito
cuidado ao manusear todo material de armazenamento, primeiro
para não se contaminar ou contaminar pessoas fora desse espaço
 ou mesmo seus familiares. No caso dos médicos veterinários ou
médicos que estão lidando sempre com as mais diferentes
patogenias, podem estar sempre em contato com bactérias
multirresistentes, e ao executar qualquer erro hospitalar ou
laboratorial, pode levar a disseminação de bactérias em lugares
diferentes do hospital, para outros pacientes ou até mesmo a
disseminação fora desses hospitais, ao liberar esses microrganismos
com plasmídeos cheios de genes com resistência, essas bactérias
irão se conjugar com outras, transferindo assim o seu DNA com
inúmeras vantagens seletivas para as novas bactérias. Um
microbiologista que trabalha testando a ação de antimicrobianos em
bactérias que estão causando alguma patogenia resistente, devem
tomar muito cuidado e ter boas práticas hospitalares, pois num
simples detalhe como uma errada esterilização da alça, depois de
uma semeadura ou uma esterilização não bem realizada do que
restou de algum isolamento, isso pode levar ao contágio de pessoas
do mesmo laboratório, levando a alteração genética de bactéria
resistentes que antes não tinham qualquer resistência e agora
possuem.

3) As autoclaves utilizadas em laboratórios, hospitais e clínicas são

equipamentos que apresentam grande importância na morte de
microrganismos. Esses equipamentos podem ser horizontais ou
verticais. Sobre esses equipamentos, responda:
a) (0,5) Esse equipamento promove esterilização ou desinfecção dos
materiais? Explique.

Esterilização, por que as autoclaves possuem temperatura e pressão

suficientes para exterminar qualquer tipo de vida no seu interior por
meio da desnaturação das proteínas.

b) (1,0) Qual o mecanismo de ação desses equipamentos frente aos

microrganismos.

As autoclaves têm como seu princípio ativo de morte de

microrganismos a alta temperatura. A autoclave apresentada em aula
causa a destruição dos microrganismos devido a desnaturação das
proteínas em função do calor úmido, nela se utiliza uma temperatura
de 121C°, a uma pressão de 1 atm por 15 minutos. No final de
processo as proteínas vão estar todas desnaturadas, e como as
proteínas é um dos componentes estruturais e metabólicos dos seres
vivos, esses microrganismos morrem, pois perdem todo seu
 metabolismo e ter uma estrutura totalmente diferente da de antes,
graças a desnaturação das proteínas estruturais.

4) Ao visualizar uma lâmina corada pela técnica de coloração de Gram, o

estagiário Flick visualizou a seguinte imagem:

Com base na imagem, responda:

a) (1,5) Esse microrganismo é um Gram positivo ou negativo. Explique
descrevendo as etapas da coloração de Gram bem como a ação dos
corantes/descorantes nas estruturas que compõem dos
microrganismos.

É uma Gram positivo. Primeiro é realizado a fixação na lâmina,

depois é adicionado o corante cristal violeta corando todas as
bactérias presentes, independente de serem Gram positivas ou Gram
negativas, depois de ficarem coradas é retirado o excesso desse
corante com água, depois é adicionado o lugol, que vai aumentar
afinidade das células com o corante, formando então o complexo
cristal violeta-lugol, ficando numa tonalidade roxeada. Logo após
essa etapa, é tirado o excesso da coloração sobre a lamina com
agua e bastante cuidado, seguindo para o próximo passo que é o de
 descoloração, onde a lamina é colocada em imersão na solução de
álcool e acetona, ou essa solução é colocada sobre a lâmina, se as
bactérias forem Gram positivas vão permanecer coradas de roxo,
isso acontece devido essas células possuírem em sua parede celular
uma camada bem espessa/grossa de peptideoglicano, tendo
somente uma retração dessa camada, e se forem Gram negativas
vão ficar descoradas, isso devido as Gram negativas terem somente
uma fina camada de peptideoglicano, assim essa solução remove a
membrana externa e passa facilmente pela fina camada de
peptideoglicano, removendo então o complexo cristal violeta lugol.
Após isso vem a última etapa que é a de coloração de fundo, onde é
adicionado o contra corante, que por sua vez vai corar ambas as
células, porém só vai aparecer nas Gram positivas por estarem sem
coloração e ele não se sobressair a coloração roxa presente na
membrana das Gram positivas.

b) (0,5) Flick, pensativo perguntou a você:

Qual estrutura da morfologia bacteriana é responsável pela diferença
dos microrganismos visualizado na técnica de Gram?

A parede celular das bactérias, mais especificamente a diferença

entre camadas de peptideoglicano presente na parede celular das
Gram positivas e Gram negativa.

c) (1,5) Havendo a necessidade de repicar essa amostra do Caldo

Brain Heart Infusion (BHI) para meio sólido, qual agar você
escolheria: Agar Nutriente ou Agar MacConkey? Explique o porquê
de sua escolha.

Escolheria o Agar Nutriente, por que o Agar MacConkey possui sais

biliares e cristal violeta que inibem o crescimento de bactérias Gram
negativas. E como o nome já diz, o Agar nutriente é um Agar +
Nutriente.

5) (1,5) Dona Maria Augusta estava cuidando do neto João de 6 meses de

vida, quando o seu netinho pegou um resfriado. Muito preocupada ela
resolveu fornecer mel a ele para ajudar a melhorar desse resfriado.
Apavorada, a filha agiu antes que sua mãe desse a primeira colher de
Mel e informou à sua mãe que esse alimento não pode ser fornecido ao
João, porque pode levar à morte.
Assim, como bom aluno de microbiologia, explique detalhadamente com
base no conteúdo abordado em sala porque dona Maria Augusta não
deve fornecer mel ao João.
João não deve consumir o mel porque ele pode conter esporos de
bactérias patogênicas, como João tem somente 6 meses, ele tem um
sistema imunológico frágil, e por estar resfriado suas condições de
defesa imunológica estão ainda mais comprometidas. No mel que ele
quase consumiu pode ter esporos de Clostridium botulinum, esses
esporos permanecem nessa forma até encontrem condições
apropriadas, no caso do Clostridium, ele é anaeróbico, não faz nada
enquanto estiver em contato com o oxigênio, porem se João o consumir
no meio do mel, provavelmente essas bactérias vão consegui se ligar a
parede intestinal do João, devido ele não ter uma microbiota bem
desenvolvida e estar comprometido imunologicamente, assim esse
esporo passa para sua forma vegetativa e passa a produzir a toxina
botulínica, que é quase sempre fatal, principalmente para um bebê.