Estructura y función

de
aminoácidos y proteínas

Dra. Vanesa Herlax 1

Estructura y función de aminoácidos y proteínas
I) Aminoácidos
Clasificación. Isomería
Propiedades ácido-base
II) Estructura proteica
Enlace peptídico. Niveles de estructura
Pérdida de estructura: desnaturalización e hidrólisis
III) Relación estructura-función biológica
Proteínas globulares y fibrosas
IV) Técnicas de cuantificación, separación y purificación de proteínas
Electroforesis. Proteinograma sérico

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I) Aminoácidos

• Estructura general
y clasificación

3
4
• Isomería → enantiómeros

5
• Propiedades ácido-base

captar ceder

6
Curvas de titulación

Zona de capacidad
buffer

pI: valor del pH al cual el aa presenta carga neta cero

pH < pI: carga neta positiva
pH > pI: carga neta negativa
7
Curvas de titulación

1) aa neutro
pI= (pKa1 + pKa2) / 2

8
2) aa ácido +1 0 -1 -2

pI= (pK1 + pKR) / 2

9
3) aa básico
+2 +1 0 -1

pI= (pKR + pK2) / 2

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1) aa neutro 2) aa ácido 3) aa básico

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II) Estructura proteica

Enlace peptídico

Amida
Covalente
Plano 12
Resonancia
Carácter parcial de doble enlace

Cada enlace peptídico tiene carácter parcial de doble enlace

debido a la resonancia y no puede girar. Esto limita el número de
conformaciones posibles que puede adoptar una proteína. 13
Relación estructura - función

mioglobina hemoglobina anticuerpo

colágeno ATP sintasa ARN polimerasa 14

Niveles de estructura proteica

1) Estructura primaria:

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2) Estructura secundaria:

2 a) Alfa hélice

Puentes de H

-Proteínas fibrosas
- identidad de los aa

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2) Estructura secundaria:

2 b) Hoja B-plegada

paralela

anti-paralela

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2 c) Giros beta

18
Diagrama de Ramachandran

19
3) Estructura terciaria:

20
4) Estructura cuaternaria:

21
Definición
Fuerza estabilizadora

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Pérdida de estructura: desnaturalización e hidrólisis

Desnaturalización:

Hidrólisis:

Agentes desnaturalizantes
Físicos: Químicos:
Ultrasonido Sales concentradas y agentes
caotrópicos
Microondas
Detergentes
Radiaciones ionizantes
Solventes orgánicos
Temperaturas extremas (calor o
frío) Cambios de pH
Sustancias reductoras, alquilantes,
oxidantes

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Desnaturalización

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Clasificación de proteínas
1) Simples y conjugadas
2) Globulares y fibrosas
Simples:
Compuestas solamente por
aminoácidos
Ej: colágeno, actina, insulina
Conjugadas:
compuestas por aminoácidos y otra
sustancia de naturaleza no proteica que
recibe el nombre de grupo prostético.
Ej: lipoproteínas , glicoproteínas ,
nucleoproteínas , fosfoproteínas ,
hemoproteínas , flavoproteínas ,
metaloproteínas, fitocromos , citocromos
25
https://www.youtube.com/watch?v=s5JJTEei5cE Video de proteínas fibrosas

https://www.youtube.com/watch?v=lGRJD9yagTM Video de hemoglobina y mioglobina

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IV) Técnicas de cuantificación, separación y purificación de proteínas

Técnicas de cuantificación
• espectrofotometría

Técnicas de separación y purificación

Por carga:
• electroforesis
•cromatografía de intercambio iónico

Por tamaño:
• diálisis
• cromatografía de exclusión molecular

Por afinidad:
• cromatografía de afinidad

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Técnicas de cuantificación

Espectrofotometría

Ley de Lambert-Beer: A=LC

A = absorbancia de la sustancia a una longitud de onda determinada.

 = absortividad molar (coeficiente de extinción molar), absorbancia de una
solución 1M del compuesto (sv, T, l). Unidades: concentración x cm
L = longitud del camino óptico en la cubeta (en cm).
C= concentración de la sustancia en la solución

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En el caso de las proteínas los cromóforos son los residuos de
aminoácidos aromáticos (Trp, Tyr, Phe) y las uniones peptídicas.

DO 280 → máximo de absorción aa aromáticos y no absorbe el sv

(agua)

Cromóforo Long. de onda para la absorción

máxima (nm)
Triptofano 280
Tirosina 275
Fenilalanina 257
Unión peptídica 205

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 Técnicas de separación y purificación

1) Electroforesis

a) Condiciones: nativa o desnaturalizante

b) Soporte: papel o gel

https://www.youtube.com/watch?v=_8xftsCIwYo Electroforesis de poliacrilamida

https://twitter.com/i/status/1368567580500320257
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Condiciones:
pH = 8.6
Nativa
Soporte = papel

https://www.youtube.com/watch?v=ALPi5GUyR1E

31
Electroforesis de proteínas de suero humano

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Alteraciones de proteinogramas

Alb
α1
α2
β

"Principios de bioquímica clínica y patología molecular : 3ª edición" / Álvaro González Hernández. Barcelona : Elsevier,

https://www.youtube.com/watch?v=j8yrgDrgmeA
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Electroforesis de hemoglobina

Hb S: Un ácido glutámico es sustituido por valina en la posición 6 de la cadena

polipeptídica de globina beta, que conduce a la producción de una hemoglobina
funcionalmente defectuosa
Hb F: Hemoglobina mayoritaria del feto. α2γ2
Bibliografía:
Lehninger 4ta o 5ta edición
Stryer 6ta edición

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