El Microscopio

Se puede definir a la palabra microscopio como un elemento o instrumento que nos facilita la tarea de observar objetos que tienen como caracterstica principal ser demasiado pequeos para ser vistos por nuestros ojos. Existen distintos tipos de microscopios, por ende cada uno de ellos posee una funcin y caracterstica diferente. El microscopio ms comn y el primero en ser inventado es el de tipo tico; ste es un instrumento que posee una o varias lentes que nos permiten tener una imagen aumentada de la sustancia u objeto que estamos observando, su funcionamiento es por refraccin. La palabra Microscopio se relaciona con la palabra microscopo, ste es la ciencia de estudiar los

pequeos objetos mediante el uso de dicho instrumento.

Historia del microscopio

Se invent el microscopio cerca de los comienzos del 1600, por un ya conocido personaje llamado Galileo, aunque los holandeses afirman que el inventor fue Jansen; la palabra microscopio se us por primera vez por un grupo denominado Academia deiLincei, sta era una sociedad cientfica a la que Galileo perteneca, estos cientficos realizaron sus primeras observaciones con un microscopio De todas formas las primeras publicaciones importantes dentro del

campo de la microscopa se realizaron entre 1660 y 1665 cuando se prueba la teora Harvey sobre la circulacin sanquinea al observar en el microscopio los capilares sanguneos. En 1665, Robert Hooke hizo una observacin con el microscopio de un delgado corte de corcho y pudo notar la porosidad del material; dichos poros, en conjunto, formaban cavidades que eran poco profundas a modo de cajas, a las mismas las llam clulas. Lo que haba observado Hooke era clulas muertas. Un tiempo ms tarde, Marcelo Malpighi, un reconocido anatomista y bilogo italiano, pudo observar clulas vivas y fue el primer encargado de estudiar tejidos vivos en el microscopio. Inventor del microscopio

ediados del siglo XVII, un comerciante de origen holands Van Leeuwenhoek describi por primera vez bacterias, protoz espermatozoides y glbulos rojos mediante el uso de microscopios. Este hombre sin ningn tipo de preparacin cientfica, puede tomarse como el fundador de la bacteriologa. El mismo se encargaba de tallar sus lupas obre pequeas esferas de cristal, sus dimetros no llegaban a alcanzar el milmetro. Con estas diminutas distancias focales alcanzaba aumentos de 275 focales; examin por primera vez los glbulos rojos y descubri que el semen tena espermatozoides dentro; durante su vida jams revelo sus secretos ni sus mtodos, falleci en 1723, 26 de sus artefactos fueron donados ala Royal Society de Londres.

Durante el transcurso del siglo XVIII, el progreso dentro del campo de la microscopa continu y se lograron objetivos impensados, acromticos por asociacin de vidrios, por ejemplo. En esta poca dos conocidos como Newton y Euler empiezan sus estudios a travs del microscopio. Ya en el siglo XIX, al descubrirse que la refraccin y la dispensin podan ser modificadas con las combinaciones adecuadas de dos o ms medios pticos, se lanzan en el mercado objetos acromticos. Volviendo al siglo XVIII, debemos sealar que el microscopio involucr muchos adelantos mecnicos que lograron aumentar su estabilidad y su facilidad de uso aunque no pudieron desarrollarse mejoras pticas. Los avances ms importantes y relevantes de la ptica aparecieron recin en 1877 cuando Abbe publica la teora del microscopio y, por pedido de Carl Zeiss, mejora la microscopia de inmersin a travs de la sustitucin del agua por aceite de cedro. Esto permita obtener aumentos de 2000.
Limites tcnicos de los microscopios opticos

A principios de 1930 se haba alcanzado el lmite tcnico en cuanto a microscopios ticos se refiere, no consiguiendo aumentos superiores a 500% o 1000%, de todas formas, se tena el deseo cientfico de observar los detalles de las estructuras celulares. Historicamente el microscopio fue un invento que contribuy mucho a una rama que es fundamental para la vida del ser humano, la medicina, a travs de ellos se pudieron observar las primeras clulas cancergenas, por ejemplo, permitiendo de esta forma estudiar una compleja enfermedad y desarrollar mtodos para contrarestarla. Tambin influy mucho en ramas como la biologa y la paleontologa, dndonos la posibilidad de saber de dnde venimos y conocer con qu tipo de naturaleza estamos conviviendo.

El microscopio ptico es el ms utilizado, su nombre deriva del hecho de que depende de alguna fuente de luz para su funcionamiento, consta de tres sistemas: mecnico, de iluminacin y ptico. La parte mecnica se compone del pie, brazo, tubo del microscopio, platina, revolver y tornillos.

Elpie es una pieza maciza y pesada, sirve para asegurar la estabilidad del aparato y para soportar las dems piezas que componen al microscopio; en ocasiones esta provisto por unacharnela, que permite la inclinacin de la parte superior del microscopio. Elbrazoengrana el tubo principal del microscopio y ayuda al soporte al momento de transportarlo. En el tubo del microscopioesta instalado el sistema ptico. La platina es una pieza metlica, donde se colocan las preparaciones; tiene en el centro una abertura circular por donde pasan los rayos luminosos procedentes del sistema ptico. El revolver permite cambiar los objetivos sin desenfocar considerablemente ni quitar la preparacin. El tornillo macromtrico permite enfocar estructuras gruesas sin mucha precisin, a diferencia del tornillo micromtricoque enfoca detalladamente.

 

El sistema de iluminacin se compone de una lmpara o espejo, un condensador y un diafragma; tiene la misin de iluminar los objetos por medio de luz transmitida.  El espejo es redondo, con una cara plana y otra cncava, los expertos sugieren usar la parte plana para objetivos de poco aumento y fuentes de luz directa, y la parte cncava para objetivos con gran aumento y fuentes de luz indirecta; el espejo se puede mover y adaptar a diferentes posiciones segn la fuente luminosa. El condensador consta de un sistema de lentes de gran abertura sujetos a una montura, colocados entre la platina y el espejo, puede subirse y bajarse a voluntad y tiene la finalidad de concentrar los rayos de luz para dirigirlos hacia la preparacin. El diafragma se encuentra unido al condensador y regula la cantidad de rayos luminosos que inciden sobre la preparacin.

El sistema ptico se compone de oculares y objetivos, es decir, esta constituido por diferentes lentes que se encargan de corregir las aberraciones de la luz y de desviar correctamente los rayos luminosos para lograr una imagen amplificada.  El ocular se encuentra montado en la parte superior del tubo del microscopio, por medio de esta lente se observa la imagen amplificada. Los objetivos son los elementos ms importantes del microscopio, de ellos depende la mayor o menor ampliacin con que se pueda observar, son planoconvexas de foco muy corto, mientras mayor sea el aumento ms pequeo es el dimetro de la lente, existen diferentes tipos de objetivos segn el numero de aumentos que proporcionen por ejemplo: -Lupa: Aumenta en dimetros de 2.5 a 5 X -Objetivos en seco: Son los que se emplean ms frecuentemente, entre la lente y el cubreobjetos solo hay aire, pueden ser de dos tipos: seco dbil que aumenta en dimetros de 10 a 20 X y seco fuerte que aumenta en dimetros de 40 a 60 X. -Objetivos de inmersin: Se llaman as porque para poder observar se debe interponer entre la lente y la preparacin un lquido que por su ndice de refraccin permita una mayor luminosidad; estos objetivos tienen gran poder de aumento (hasta 100 X) y definicin. Para saber cual es el aumento en dimetros que un microscopio tiene se aplica la siguiente frmula: Aumento del microscopio = (Aumento del Ocular) x (Aumento del objetivo) Ejemplo: Ocular = 10X Objetivo = 60 X Aumento del microscopio = 10 x 60

Aumento del microscopio = 600X Por lo tanto para este ejemplo el aumento corresponde a 600X en dimetros. Los objetivos adems deben contar con tres cualidades: Definicin, Penetracin y Resolucin. La definicin consiste en poder presentar con limpieza y correccin los contornos de la imagen. La penetracin es la propiedad de presentar, sin variar el enfoque, perfectamente detallados varios planos de espesor de una preparacin. El poder de resolucin permite apreciar delicados detalles de la estructura.

El microscopio (de micro-, ?????, pequeo, y scopio, ??????, observar) es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico

que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin.

Partes del microscopio ptico. yOcular: Conjunto de lentes especializadas en aumentar la imagen previamente formada por el objetivo. Puede desmontarse a intercambiarse por otros con diferentes aumentos o funcionalidades: agujas para sealar, retculos para recuento . yCilindro: Tubo por cuyo interior avanza la luz desde el objetivo. En los modelos ms antiguos se mova, mediante una cremallera, para conseguir el enfoque de la muestra, cosa que hoy suele realizarse con la platina. Hoy da suele estar sustituido por varias piezas entre las que se incluyen prismas para conseguir el uso en una postura ms cmoda. yRevolver: Mecanismo giratorio en el que se pueden situar varios objetivos de manera que se consigan diferentes aumentos. yObjetivo: Conjunto de lentes responsables de aumentar y resolver (distinguir las diferentes partes) el objeto a observar. yMuestra: Objeto a observar que se coloca sobre una lmina de cristal (portaobjetos) y bajo otra an ms fina (cubreobjetos) la muestra ha de ser tan fina que la luz la atraviese (transparente) por ello se hace imprescindible el uso de colorantes: tcnicas de tincin. yPlatina: Soporte de la muestra. Puede moverse mediante tornillos de enfoque grueso (macromtrico) o fino (micromtrico). yCondensador: Conjunto de lentes que focalizan la luz sobre la muestra. yDiafragma: Sistema para controlar la cantidad de luz que llega al objeto. De esta manera se puede controlar la definicin que, en muchas ocasiones se consigue reduciendo la intensidad de la luz. 9. Iluminacin: Mediante un espejo (clsico) o mejor por una bombilla de diferente tipo. La luz ms usada

es blanca, aunque se puede conseguir una amplia mejora de la resolucin con luz azul (cosa que se consigue, por ejemplo con un filtro).

RESULTADOS: Los resultados obtenidos son el conocer las partes, conceptos y el debido manejo del microcopio, el alumno se familiarizar con las partes del microscopio. CONCLUSIONES: El uso correcto del microscopio nos brinda una imagen ms clara de lo que estamos buscando, as como su buen cuidado le alarga la vida y nos brinda ventajas a nosotros en este caso los universitarios al poder tener acceso a este material, que si no se cuidar de manera correcta no tendramos.
Los microscopios son instrumentos que permiten tanto la observacin del aspecto y forma de las clulas y tejidos como la cuantificacin de variables observadas, tales como

dimensiones, dimetros, longitudes, cantidades, entre otras. Adems de su uso en la biologa, tienen un sinfn de aplicaciones en medicina forense, mineraloga, ciencia de los materiales, entre otras.

Las limitaciones para el estudio de las clulas y tejidos han sido superadas a lo largo del tiempo gracias al desarrollo tecnolgico que ha permitido la construccin de instrumentos de laboratorio, tales como el microscopio, el cual permite la observacin y obtencin de imgenes aumentadas de esos especmenes diminutos, que a simple vista resultan invisibles. El microscopio ha sido y ser el instrumento de mayor utilidad en el estudio de las clulas y tejidos. Los orgenes del microscopio son inciertos; probablemente en Holanda, en la ciudad de Middelburg entre 1590 y 1610, algunas personas relacionadas con el mundo del espectculo inventaron tanto el microscopio compuesto como el telescopio. Hans Janssen y su hijo Zacharias, fabricantes de anteojos, se mencionan como posibles inventores. Sin embargo, algunos atribuyen a Galileo Galilei su invencin en la primera mitad del siglo XVII, gracias a que l difundi el microscopio y su uso. El microscopio compuesto original consista en dos o ms lentes colocadas en un tubo rgido (17). Los primeros usuarios bien conocidos fueron M. Malpighi, de Italia, A. van Leeuwenhoek, de Holanda; Hooke y N. Grew, de Inglaterra. Leeuwenhoek fabric un microscopio simple (17) (fig. 4-1) y Hooke utiliz un microscopio compuesto. Los instrumentos empleados por Leeuwenhoek eran superiores a aquellos utilizados por Hooke, en parte debido a que se desconoca el efecto de las aberraciones de las lentes y como corregirlas. El microscopio compuesto de Hooke sumaba los defectos de los dos juegos de lentes (objetivo y ocular), dificultando la observacin, de manera que en la historia de la microscopa fue Leeuwenhoek quien realiz la mayor cantidad de descubrimientos con su microscopio simple. Sin embargo, el microscopio compuesto sera el instrumento con ms futuro. El instrumento de Hooke del ao 1665 tena las partes bsicas, dos lentes (una que aumentaba la imagen de la otra), una estructura mecnica, mecanismos de enfoque y un frasco esfrico para concentrar la luz (fig. 4-2). Mejoras considerables se han realizado desde entonces. Aunque algunos fabricantes como Culpeper y Cuff crearon microscopios apropiados y mejorados por modelos con bases en trpode y la conocida base en herradura; no obstante, el verdadero microscopio til apareci con la invencin de las lentes acromticas, desarrolladas en Inglaterra por Chester Moore Hall en 1729. El desarrollo de los instrumentos de ptica es inseparable del de la industria del vidrio y la fabricacin de las lentes (61). Sin embargo, an era difcil fabricar lentes acromticas poderosas y a finales del siglo XVIII Jan y Harmanus van

Deyllo lograron e iniciaron la comercializacin de objetivos acromticos. Las lentes con mayores aperturas numricas fueron realizadas alrededor de 1890. Un fabricante famoso de microscopios de calidad superior era la firma de Powell y de Lealand, quienes elaboraron objetivos de alto poder, apocromticos y de inmersin con una apertura numrica de 1,50. Otros creadores fueron Ross y Smith. Karl Zeiss Jena realiz objetivos de inmersin diseados por Ernst Abbe quien fue el fundador de la teora ptica de las lentes del microscopio y desarroll el diseo de las mismas basado en un procedimiento matemtico riguroso (62). A finales del siglo XIX los microscopios de campo claro fueron modificados para obtener campo oscuro y polarizacin, detalles que permitieron incrementar el contraste. A principios del siglo XX la fabricacin de microscopios se concentr en Alemania y en los aos sucesivos se desarroll la fluorescencia, contraste de fase, interferencia, holografa, luz ultravioleta, rayos X, mtodos con electrones y protones, microscopios computarizados para la observacin, cuantificacin y anlisis tridimensional. Estos instrumentos abrieron muchas posibilidades en el campo de la microscopa. Los fabricantes (Leitz, Zeiss, Olympus, y otros) respondieron a muchas necesidades, haciendo microscopios ms efectivos, de uso universal, capaces de utilizar el tipo de radiacin (luz visible o no) que revele de la mejor manera posible la naturaleza del espcimen y convierta detalles invisibles de la imagen en un patrn visible que pueda ser analizado.

Figura 4-1.-Microscopio de Leeuwenhoek. La lente est instalada entre dos placas de bronce. Lo que se quiere observar se coloca en la punta de un tornillo, de manera que se puede regular en forma precisa la distancia entre el objeto y la lente; el observador tiene que acercar el ojo al instrumento y mirar a travs de la lente. Modificado de imgenes. Ministerio de Educacin y Ciencia. Espaa (60).

Figura 4-2.-Microscopio utilizado por Hooke. Tomado de Lanfranconi, M. Historia de la Microscopa. (18).
El microscopio es el instrumento insigne en el estudio histolgico y uno de los principales objetivos de la Histologa es permitirle al estudiante la comprensin de la estructura microscpica de las clulas, tejidos y rganos, al mismo tiempo que se relaciona la morfologa con la funcin (1). Los numerosos descubrimientos han hecho posible que el ser humano logre ver ms all de sus capacidades, observando tanto aquellos objetos que estn muy lejanos, como tambin los que por su reducido tamao, se escapan a la capacidad del ojo humano para formar una imagen de los mismos. Los hallazgos en el campo de la fsica y sobretodo en una de sus ramas, la ptica, que estudia la naturaleza de la luz, sus caractersticas y sus manifestaciones, han permitido comprender el comportamiento de la misma, su interaccin con la materia y notablemente su rol en la formacin de las imgenes (2, 3, 4, 5). El funcionamiento de muchos microscopios ha sido interpretado de una manera ms efectiva al entender el proceso de la visin y la formacin de las imgenes (6), estableciendo diferencias entre lo que es el objeto que se observa y la imagen que se forma a partir de l cundo ste es iluminado. El fundamento de la microscopa es efectivamente la formacin de imgenes a partir de un espcimen (7, 8, 9, 10).