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O condicionamento de sementes com ácido salicílico e H2O2 alivia a tolerância à deficiência de Fe através
da modulação do crescimento, capacidade de acidificação radicular e desempenho fotossintético em
Sulla carnosa
Nahida Jelali, Rim Ben Youssef, Nadia Boukari, Walid Zorrig, Wissal Dhifi, Chedly abdelly
PII: S0981-9428(20)30596-9
DOI: https://doi.org/10.1016/j.plaphy.2020.11.039
Referência: PLAFIA 6493
Para aparecer em: Plant Physiology and Biochemistry
Data de recebimento: 23 de julho de 2020
Data de aceitação: 21 de novembro de 2020
Por favor, cite este artigo como: N. Jelali, R. Ben Youssef, N. Boukari, W. Zorrig, W. Dhifi, Chedly abdelly, ácido salicílico
e H2O2 priming de sementes alivia a tolerância à deficiência de Fe através da modulação do crescimento, capacidade de
, Fisiologia Vegetal et
acidificação da raiz e desempenho fotossintético em Bioquímica de Sulla carnosa, https://doi.org/10.1016/j.plaphy.2020.11.039.
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© 2020 Publicado por Elsevier Masson SAS.

Contribuição do autor
Nahida Jelali escreveu o manuscrito e analisou todos os dados. Rim Ben Youssef, realizou os experimentos.
Nadia Boukari ajudou nos experimentos; Walid Zorrig ajudou na análise estatística; Wissal Dhifi revisou o ms
e Chedly Abdelly: supervisora da obra.
1 O condicionamento de sementes com ácido salicílico e H2O2 alivia a tolerância à deficiência de Fe através da
2 modulação do crescimento, capacidade de acidificação das raízes e
3 desempenho em Sulla carnosa
5 Nahida Jelalia *, Rim Ben Youssefa , Nádia Boukaria , Walid Zorriga , Wissal Dhifib , Chedly
Abdelya 6
Laboratório de Plantas Extremófilas, Centro de Biotecnologia de Borj-Cedria, BP 901, Hammam-Lif 2050,

uma
8
9 Tunísia.
b
10 UR Ecophysiologie Environnementale et Procédés Agroalimentaires, Institut Supérieur de Biotechnologie de
11 Sidi Thabet, BiotechPole de Sidi Thabet, Université de la Manouba, Ariana, Tunísia
12
13
14
15
16 *Autor correspondente: Jelali Nahida
17 E-Mail: nahidajelali@yahoo.fr
18
19 Tel: 216 79 412 848
20 Fax: 216 79 412 638
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22
23
24 Running Head: Alterações fisiológicas associadas ao condicionamento de sementes em Sulla carnosa sob Fe
25 condições de deficiência.
26
27 Palavras-chave: Sementes de condicionamento; ácido salicílico; peróxido de hidrogênio; deficiência de Fe; crescimento;
28 atividade fotossintética; Sula carnosa.
29
1
1 Resumo
2 O ferro (Fe) é um dos nutrientes essenciais para o crescimento das plantas que está envolvido em diversas
3 funções fisiológicas. Portanto, há esforços intensivos para melhorar a tolerância das plantas ao Fe
4 deficiência, por triagem genotípica e pelo uso de ferramentas fisiológicas adaptadas. A intenção
5 do estudo atual foi explorar o efeito do primer de sementes com ácido salicílico (SA 0,25 mM)
6 e peróxido de hidrogênio (H2O2 20 mM), aplicados separadamente ou combinados, na planta
7 , estado nutricional dos elementos (Fe e potássio K), acidificação radicular e
8 atividade fotossintética em duas cultivares de S. carnosa (Sidi Khlif e Kalbia) com diferentes
9 tolerância a tal restrição. Sob condições sem primer, a deficiência de Fe diminuiu a
10 crescimento, concentração de clorofila, além dos teores de Fe e K. Além disso, afetou a
11 atividade fotossintética inibindo a taxa líquida de assimilação de CO2 e aumentando a
12 taxa de transpiração de ambas as cultivares, seguindo uma redução da eficiência do uso da água. As mudanças
13 acima descritos foram muito menos pronunciados em Sidi Khlif do que em Kalbia. O estômato
14 aumentou em folhas deficientes em Fe de ambas as cultivares, sugerindo que a
15 o comprometimento da fotossíntese deve ser atribuído a fatores não estomáticos. Curiosamente, priming
16 sementes com ambos os agentes melhoraram significativamente o desempenho de crescimento e a rizosfera
17 acidificação de plantas deficientes de S. carnosa . No entanto, o tratamento D+SA+H2O2 teve o maior
18 efeito benéfico no crescimento de plantas de S. carnosa . O grau desta estimulação pode variar
19 dependendo da cultivar, do tecido e do primer aplicado. Isso pode ser devido
20 a modulação do desempenho fotossintético, levando a uma absorção de nutrientes mais eficiente.

21
22
23
24
25
26 Abreviaturas: SA, ácido salicílico; H2O2, peróxido de hidrogênio; CHL, Clorofila; CARRO,
27 carotenóides; E, taxa de transpiração; Gs, condutância estomática; A, assimilação líquida de CO2 ; WUE,
28 eficiência no uso da água; IWUE, eficiência intrínseca do uso da água; ROS: espécies reativas de oxigênio.
2
1 1. Introdução
2 O Fe absorvido pelas plantas constitui a principal fonte para animais e humanos (Briat et.
3 al., 2015). Este micronutriente essencial está envolvido em muitas funções metabólicas, especialmente para
4 crescimento e desenvolvimento das plantas (Jiménez et al., 2009; Zhu et al., 2017). Fe é o quarto
5 na crosta terrestre, e algumas condições do solo, como solos ácidos, podem causar excesso de Fe.
6 No entanto, outras condições do solo, como solos calcários, podem causar baixa disponibilidade de Fe (Briat,
7 2007; Wasli et al., 2018). Para lidar com essas condições adversas, as plantas desenvolveram
8 respostas fisiológicas apropriadas, como estimulação da raiz da atividade de duas enzimas
9 responsável pela redução do Fe e capacidade de acidificação (Dell'Orto et al., 2000).
10 Como o Fe é um componente da cadeia fotossintética e um fator necessário para
11 biossíntese da clorofila, sua deficiência prejudica seriamente o metabolismo da fotossíntese. Folha
12 A clorose de Fe é um sintoma comum de deficiência de Fe causada pela diminuição significativa de
13 teor de clorofila (Bavaresco e Poni, 2003). Assim, a produtividade da planta foi restringida
14 levando à redução do rendimento das culturas (Schmidt, 1999; Zocchi et al., 2017). Para evitar esse problema,
15 a aplicação de quelatos de Fe(III) é uma prática agronômica frequentemente utilizada; no entanto, estes
17
16 produtos são muito caros o que limita seu uso a produções de alto rendimento.
Além disso, sua utilização pode induzir sérios riscos ambientais (Rakshit et al.,
18 de 2009). Assim, abordagens alternativas foram recentemente propostas. Entre essas abordagens,
19 técnicas de priming são capazes de gerar desenvolvimento de desempenho das culturas sem se deteriorar
20 recursos naturais. De fato, muitos compostos de primer eficientes são usados para estender essa
21 técnica em áreas agrícolas. O ácido salicílico (SA) e o peróxido de hidrogênio (H202) são
22 considerados como moléculas sinalizadoras ativamente envolvidas no crescimento, germinação de sementes e frutos
23 rendimento. Além disso, ambos os agentes de iniciação demonstraram estar envolvidos na promoção fenólica
24 biossíntese em resposta à infecção microbiana em plantas (Zhu et al., 2015). Em particular, S.A.
25 tem sido amplamente investigado por seu papel crucial na mediação de reações de plantas a patógenos
26 infecções (Metwally et al., 2003; Yang et al., 2013; Bernal-Vicente et al., 2019). SA também é
27 implicado na melhoria da tolerância da planta a condições salinas (Gunes et al., 2007; Gautam
28 e Singh, 2009; Wasti et al., 2012; Palma et al., 2014; Rady e Mohamed., 2015), pesado
29 metais (Drazic e Mihailovic, 2005; Belkhadi et al., 2014; Sinha et al., 2015; Taghizadeha
30 et al., 2018) e estresse hídrico (Singh e Usha, 2003; Pál et al., 2014; Chen et al., 2014).
31 Outra abordagem para melhorar a tolerância à deficiência de Fe em plantas é a molécula sinalizadora
32 H2O2. Nesta perspectiva, Mittler, (2017) recentemente acrescentou que as espécies reativas de oxigênio (ROS)
33 desempenham um papel crucial na preparação e germinação de sementes (Hossain et al. 2015). Estudos adicionais
34 focados em H2O2 revelaram a capacidade desta molécula de aumentar a tolerância da planta a vários
3
1 estresses ambientais (He et al., 2005). Por exemplo, Yu et al., (2018) relataram recentemente que
2 sementes de priming com melhoria da tolerância da planta mediada por H2O2 a solução salina e cádmio
3 induziram estresses oxidativos no alcaligrama halófito (Puccinellia tenuiflora). Alternativamente,
4 León et al., (1995) descobriram anteriormente que H2O2 quando aplicado in vitro a 6 mM, gerava
5 Acúmulo de ácido salicílico (SA) em células cultivadas de folhas de tabaco. Esses achados foram posteriormente
6 confirmado por Hao et al., (2014) em culturas de células de Salvia.
7 O desenvolvimento de métodos e estratégias para remediar os efeitos deletérios dos nutrientes
8 deficiência de estresse em plantas tem recebido atenção considerável, especialmente entre as
9 espécies cultivadas (Yang et al., 2013; Formenti et al., 2018). No entanto, existem poucos estudos
10 (Ellouzi et al., 2017) relacionados às respostas de crescimento espontâneo de halófitos naturais
11 em ambientes difíceis. Por outro lado, o interesse se concentrou na pesquisa de
12 culturas tolerantes se expandiram nos últimos anos que mediam a redução das mudanças climáticas
13 em condições marginais. Em particular, a estratégia original do chamado “cash crop
14 halófitos contribuem para benefícios econômicos garantindo a segurança alimentar e nutricional futura
15 (Koyro e Huchzermeyer, 2004, Manaa et al., 2019).
16
Na Tunísia, S. carnosa que é cultivada em regiões semi-áridas devido à sua tolerância à seca
17 é considerada uma espécie importante utilizada na agricultura de leguminosas pastoris.
18 Além disso, as plantas de Sulla também são exploradas para proteção e enriquecimento do solo devido ao seu teor de N2
19 propriedades de fixação (Gaddour et al., 2011). Esta leguminosa halófita revelou tolerar
deficiência de 20 Mg, além da capacidade de dessalinizar solos afetados por sais (Jlassi et al., 2013;
21 Farhat et al., 2015). Curiosamente, o cultivo desta leguminosa forrageira cultivada mesmo em
22 solos recentemente gerou grande interesse, uma vez que solos marginais em condições ambientais extremas
23 condições existem em grande parte na Tunísia (Ben Abdallah et al., 2018).
24 Com esse objetivo, no presente trabalho, focamos no impacto do priming de sementes com SA ou
25 H2O2, aplicado isoladamente e em combinação, no comportamento do estádio vegetativo de duas S. carnosa
26 cultivares (Sidi Khlif e Kalbia) quando cultivadas em condições de escassez de Fe.
27
28 2. Materiais e métodos
29 2.1. Condições de crescimento da planta e tratamentos
30 Sementes de ambas as cultivares de S. carnosa : cv. Sidi Khlif: SK e cv. Kalbia (halófitas locais) foram
31 coletados respectivamente de Sebka Sidi Khlifa (36°14'20"N/10°26'15"E) e Kalbia (35°50'N
32 10°17'E). As sementes foram escarificadas mecanicamente e depois embebidas separadamente por 4h em SA
33 (0,25 mM), solução de H2O2 (20 mM) ou (SA+H2O2) . A partir daí, sementes sem primer e sem primer
34 (UPS e PS, respectivamente) foram germinados por 5 dias a 20°C em placas de Petri. Depois disso,
4
1 mudas de cinco dias de idade foram movidas para solução nutritiva aerada com meia força por 7 dias.
2 Posteriormente, mudas de tamanho semelhante foram selecionadas e espalhadas em grupos de 8 plantas por
3 recipientes de 5 L, cultivados em soluções de meio aerado de força total durante 30 dias. Neste
4 vezes, as plantas estavam no estágio de terceira folha e diferentes ações foram iniciadas e divididas em 2
5 grupos (Tabela 1). Cada grupo continha 64 plantas (8 repetições por tratamento) durante 8 dias.
6 O primeiro grupo correspondeu às plantas controle (presença de Fe a 50 µM:C), enquanto o
7 segundos para plantas deficientes (1 µM Fe: D). Para cada grupo, foram estabelecidos 4 tratamentos
8 (Tabela 1). A solução do meio é preparada da seguinte forma: 1,25 mM Ca(NO3)2, 1,25 mM KNO3,
9 MgSO4 0,5 mM, KH2PO4 0,25 mM e H3BO3 10 mM, MnSO4 1 mM, ZnSO4 0,5 mM, 0,05
10 mM (NH4)6Mo7O24 e 0,4 mM CuSO4. Fe foi fornecido como fórmula Fe(III)–EDTA. Aerado
11 culturas hidropônicas foram mantidas em câmara de crescimento com regime dia/noite de 16/8 h,
12 24 Regime 8C/18 8C, PPFD de 200 mmol m-2 s-1 e 70% para a umidade relativa.
13
14 2.2. Determinação dos índices de clorose
15 Durante o período de tratamento da deficiência de Fe, os sintomas de clorose detectados nas folhas de D
16 plantas foram usadas para determinação de índices de clorose como já mencionado em Jelali et al.,
17 (2011).
18
19 2.2. Medição da taxa de crescimento relativa
20 A taxa de crescimento relativo (RGR) representa a taxa de aumento do peso seco por unidade de
21 peso seco da planta (PD) e foi calculado de acordo com a seguinte equação:
22 RGR (d-1 )= (ln DW2 – ln DW1)/ (t2 ÿ t1).
23 DW (g): matéria seca em diferentes tecidos vegetais (parte aérea e raízes) e todo o órgão vegetal.
24 t = duração do tratamento em dias (d), e os índices 1 e 2 = colheita inicial e final.

25
26 2.3. Análise de elementos minerais
27 Para determinar os teores de Fe e K, tecidos de plantas de S. carnosa (parte aérea e raízes) foram moídos após
28 secagem em estufa com um moedor de ágata e digerido com uma mistura de ácido nítrico/perclórico (2,5:1,
29 v/v) para extração de nutrientes. As quantidades do elemento foram determinadas por uma absorção atômica
30 espectrofotômetro (VARIAN 220 FS) conforme ilustrado em Farhat et al., (2015).
31
32 2.4. Medições de Clorofila
5
1 Para medições de clorofila, 100 mg de folhas frescas foram extraídas em acetona. Então,
2 concentrações de clorofilas (CHLa e b) e carotenóides (CAR) foram determinadas por
3 como descrito em Lichtenthaler (1987).

4
5 2.5. Acidificação da raiz
6 A capacidade de acidificação das plantas de S. carnosa foi determinada medindo-se diariamente o pH em
7 cada vaso conforme apresentado na figura 3A e B. Observando que, para todos os tratamentos, o pH foi
8 inicialmente ajustado para 6,0 com NaOH. Em seguida, para reforma, foi ajustado ao valor correspondente
9 valor de pH da solução antiga.
10
11 2.6. Parâmetros de troca de gás
12 Os parâmetros de troca gasosa (conforme descrito na legenda da Tabela 4) foram avaliados nos mais jovens
13 folhas usando um sistema de fotossíntese portátil (LC pro+). Em seguida, as medidas foram
14 realizado em folhas previamente iluminadas por 2 h sob irradiação saturante de 1200 µmol
-1
15 fóton m-2 s que resultou ser saturante em plantas de controle (dado em intensidade constante
17
16 por uma fonte de luz). As curvas de resposta à luz da fotossíntese foram produzidas em vários níveis de luz
(0, 400, 600, 800 e 1200 µmol fóton m-2 s
-1
PAR) (Koyro, 2006). Medição
18 condições foram as seguintes: área de superfície foliar, 6,2 cm2 ; concentração ambiente de CO2 ,
19 350 µmol. mol-1 ; temperatura da folha, 28 ± 2 °C e pressão atmosférica (P), 1015 mBar. o
20 eficiência intrínseca do uso da água (IWUE) foi calculada como a razão entre assimilação e
21 condutância estomática (A / Gs).

22
23 2.7. Análise estatística
24 ANOVA de uma via foi usada para comparação de médias. Diferenças significativas foram ainda
25 analisaram usando o teste de Duncan para identificar diferenças entre os tratamentos tanto para S. carnosa
26 cultivares. Todos esses testes usaram um alfa de 0,05 e foram realizados com a versão do software XLSTAT
27 2014 (Addinsoft, França). Para todos os parâmetros fisiológicos analisados, seis repetições para
28 cada tratamento e cultivar foram realizados (n=6). Uma Análise de Componentes Principais (PCA)
29 foi feito usando o software XLSTAT, considerando variáveis centradas em suas médias e
30 normalizado com desvio padrão de 1.
6
1 3. Resultados
2 3.1. Parâmetros de crescimento
3 Os sintomas de clorose foram mais graves e observados pela primeira vez em Kalbia, após 3 dias de Fe
4 tratamento de deficiência (Fig 1A). Vale ressaltar que as plantas SK cultivadas a partir do D+SA+H2O2
5 apresentou os menores valores de pontuação clorótica (Fig.1B). Os sintomas de clorose foram
6 concomitante às variações de crescimento em plantas D (Fig. 2A-D). Nossos resultados indicaram que o Fe
7 afetou particularmente a RGR da parte aérea das plantas D, quando comparadas às não condicionadas
8 controle (C) como apresentado na Fig 2A. No entanto, este parâmetro foi melhorado em plantas
9 obtido de PS, em comparação com D, independentemente do agente de iniciação (Fig. 2A). De acordo
10 com resultados de pontuação de clorose, o aumento da RGR da parte aérea foi particularmente evidente com
11 Tratamento D+SA+H2O2 , especialmente na cultivar SK (441 % do controle). Ao contrário dos tiros,
12 raízes não foram afetadas negativamente pela deficiência de Fe, uma vez que a RGR deste órgão foi melhorada em
Plantas 13 D de PS, em comparação com C (Fig 2B). É importante notar que, em raízes, RGR foi
14 mais aprimorados na cultivar SK, principalmente com o tratamento D+SA+H2O2 atingindo 120% do D
15 (Fig. 2B). Em todo o nível, um leve aumento de RGR foi notado para as plantas D, em comparação com as C,
16 independentemente da cultivar (Fig. 2C). No entanto, a TGR e a razão parte aérea/raiz de plantas preparadas
17 aumentou da mesma forma percebida nos brotos (Fig. 2C e D).
18
19 3.2. Teor de Fe e K
O teor de 20 Fe foi notavelmente maior nas plantas C do que nas plantas D, independentemente da cultivar
21 (Tabela.2). Após 8 dias de deficiência de Fe, o teor de Fe diminuiu em todos os órgãos da planta com
22 pequena variação entre as duas cultivares e uma taxa de redução de quase 40%. Concentração de Fe
23 também foi melhorado em plantas D preparadas com SA+H2O2. Esses achados estão de acordo com
24 resultados de crescimento e pigmentação. Este enriquecimento de Fe foi maior na parte aérea do que nas raízes, com
25 extensão importante do aumento encontrado em SK do que em Kalbia (339 e 259%, respectivamente), como
26 em relação ao C (Tabela.2). Ao contrário do estado de Fe, o equilíbrio K não foi perturbado por
Deficiência de 27 Fe em tecidos D para ambas as cultivares (Tabela.2). Da mesma forma, PS com SA+H2O2
28 iniciaram um maior acúmulo de teor de K em brotos e raízes SK chegando a 0,68 e 0,72-
29 Aumento de dobra dos sem primer, respectivamente. No entanto, a extensão do aprimoramento foi menor
30 importantes em tecidos Kalbia em comparação com os SK (Tabela.2).
31
32 3.3. Capacidade de acidificação
33 A fim de avaliar o impacto de diferentes agentes de primer (SA, H2O2 e SA+H2O2) no
34 capacidade de acidificação, especialmente em plantas D, os valores médios de pH foram medidos em um tempo
7
1 experimento de curso (Fig. 3A, B). No meio controle, notamos um aumento dos valores de pH
2 em ambas as cultivares (Fig. 3A, B). No entanto, ocorreu uma acidificação no meio de plantas D e
3 também naqueles iniciados com diferentes agentes, após 4 dias de tratamento de deficiência de Fe e
4 continuou até 8 dias em ambas as cultivares (Fig. 3A, B). Curiosamente, ao final do tratamento,
5 o maior decréscimo dos valores de pH foi registrado nas plantas D, em comparação com o C, seguido por
6 Tratamento D+SA+H2O2 (Fig. 3A, B). É importante mencionar que diferenças significativas
7 foram registrados entre as duas cultivares apenas com o tratamento D+SA+H2O2 a partir de 6 dias em
8 plantas cultivadas a partir de sementes preparadas (Fig. 3A, B).
10 3.4. Concentração de pigmento da folha
11 A concentração de pigmentos foliares como CHLa, CHLB e CAR foram significativamente reduzidas
12 após todos os tratamentos aplicados, independente da cultivar (Tabela 3). Mesmo assim, Fe
13 tratamento de deficiência (D) afetou mais CHLb do que CHLa, aumentando assim o CHLa/CHLb
14 em SK e Kalbia em 62 e 83%, respectivamente. Em plantas cultivadas a partir de PS, a redução
15 foi menor nas folhas SK do que em Kalbia, especialmente com o tratamento D+SA+H2O2 (ca. 49,2
16 e 65,2%, respectivamente). Da mesma forma, o conteúdo do CAR perturbado por tal restrição,
17 revelaram um efeito depressivo menor na cultivar SK preparada com SA+H2O2 do que na
18 Kalbia (ca. 36,8 e 56,2%, respectivamente), conforme mostrado na Tabela. 3.
19
20 3.5. Parâmetros de troca de gás
21 De acordo com a composição dos pigmentos fotossintéticos, modificações significativas foram
22 observado para parâmetros de troca gasosa sob estresse por deficiência de Fe. Na verdade, a assimilação de CO2
23 (A) foi significativamente reduzida em folhas D de ambas as cultivares de S. carnosa (64,7 e 54,1%,
24 respectivamente em SK e Kalbia, em comparação com C (Tabela 4).
25 Tanto o Gs quanto a taxa de transpiração (E) não foram afetados por tal restrição nas folhas D do
26 ex. No entanto, aumentou neste último (Tabela 4). A eficiência do uso da água (EAU) foi
27 reduziu em folhas D de ambas as cultivares com uma taxa de decréscimo que foi menos pronunciada em SK do que em
28 em Kalbia (61 e 79%, respectivamente). O IWUE também foi afetado pela deficiência de Fe em ambos
29 cultivares (Tabela 4).
30 No entanto, é importante mencionar que em plantas cultivadas a partir de PS, tanto A quanto Gs
31 parâmetros foram melhorados, particularmente em folhas D de SK preparadas com SA+H2O2 (152 e
32 136% dos sem primer), respectivamente (Tabela 4). Além disso, o WUE foi aprimorado em D
33 folhas de ambas as cultivares, independente do agente primário, ao contrário do IWUE que foi quase
34 inalterado (Tabela. 4).
8
1 3.6. Análise de Componentes Principais e Análise de Correlação
2 Análise de Componentes Principais (PCA) considera todas as características fisiológicas: parâmetros de crescimento,
3 pigmentos fotossintéticos, valores de pH e análise de elementos minerais (Tabela 5; Fig. 4). Resultados
4 mostrados por PCA e matriz de correlações são concomitantes com os obtidos por traço por traço
5 análises. De fato, notamos um grande efeito do tratamento D na RGR, especialmente nos brotos
6 (coeficiente de correlação de Pearson R= -0,669). Os resultados da PCA também mostraram uma grande redução na
7 parâmetros fotossintéticos nestas condições, notadamente em Gs (R= -0,703). No entanto, um
8 foi percebida correlação positiva para a taxa de transpiração E (R= 0,494). Conforme
9 resultados de análises de traço por traço, o tratamento D+SA+H2O2 pareceu estar positivamente correlacionado
10 com a maioria dos parâmetros estudados (RGR, teor de Fe e K, capacidade de acidificação),
11 versus os demais tratamentos de primer (D+SA e D+ H2O2) (Tabela. 5; Fig. 4).
12
13 1. Discussão
14 Plantas de S. carnosa cultivadas em condições deficientes em Fe exibiram sintomas clássicos de
15 clorose de dois dias de tratamento (Fig. 1A e B). Esses sintomas que ocorrem em jovens
16 folhas são devido à diminuição dos teores de clorofila. Este fato pode representar uma estratégia de sobrevivência
17 adotado por plantas D. Essa abordagem é necessária para aumentar a disponibilidade de Fe por meio de sua
18 mobilização dos órgãos maduros e senescentes para os mais jovens (Abadía et al., 2011).
19 Além disso, a deficiência de Fe geralmente afeta o RGR em várias espécies de plantas
20 cultivadas em condições naturais ou de laboratório (Nenova V, 2006). Em todo o nível da planta,
21 RGR foi reduzido no tratamento D (R = -0,585). No entanto, vale a pena
22 mencionam que a RGR em brotos deficientes e raízes foi particularmente melhorada em plantas SK
23 crescido a partir de PS com SA+H2O2 (Fig. 2; Fig. 4). No presente trabalho, o efeito positivo
24 observado para o agente priming pode ser explicado pela capacidade desta espécie em aumentar a
25 eficiência de absorção de raízes para nutrientes não facilmente disponíveis sob tal restrição. Em outros
26 espécies de halófitas, Ellouzi et al. (2017) relataram recentemente que a melhora da tolerância de
27 salinidade e estresse por seca são mais confiáveis pelo condicionamento de sementes com H2O2 do que manitol em Cakile
28 maritima quando comparado com Eutrema salsugineum. A este respeito, Shakirova et al., (2003)
29 relataram a melhora do crescimento radicular encontrada em condições de salinidade em mudas de trigo
30 crescido a partir de PS com SA por uma atividade mitótica ativa. Em estudos recentes (Jisha e Puthur.,
31 2014; Boukari et al., 2019) autores acrescentaram que a eficácia da abordagem de sementes de priming é
32 extremamente dependente da espécie vegetal, fisiologia da semente e natureza do agente primário.
33 Em concomitância com essas adaptações, a deficiência de Fe iniciou uma grande diminuição de Fe
34 na parte aérea e nas raízes (R= -0,803 e -0,702, respectivamente) que foi menor
9
1 pronunciado para o teor de K (R= -0,530 e -0,575, respectivamente). Curiosamente, plantas D de S.
2 carnosa cultivada a partir de PS, especialmente aquelas preparadas com SA+H2O2, induziu o acúmulo de
3 ambos os nutrientes. Assim, a estimulação de crescimento observada em plantas de S. carnosa D cultivadas a partir de PS
4 pode estar relacionado ao enriquecimento em teores de Fe e K que foi especialmente maior na parte aérea
5 do que nas raízes (Fig. 2; Tabela. 2). Em conjunto, o efeito positivo do PS no crescimento das plantas
6 desempenho pode ser atribuído à preservação da nutrição ideal de Fe e K. No
Na literatura, poucos estudos foram focados no efeito da deficiência de Fe no estado mineral de plantas cultivadas
8 de PS, especialmente Fe e K. De fato, com exceção de poucas investigações (Dong et al.
9 de 2016; Ellouzi et al., 2017; Boukari et al., 2019), os agentes primários foram geralmente aplicados
10 exogenamente no meio de cultura (Drazic e Mihailovic, 2004; Manaa et al., 2014; Rady
11 e Mohamed, 2015). Nesse sentido, Drazic e Mihailovic (2004) relataram que, em
12 soja, os efeitos tóxicos devido ao estresse por cádmio são corrigidos por meio de SA. Isto pode ser
13 atribuídos ao fornecimento de regulação de K e Mg. No entanto, sob estresse salino, feijão e
14 crescimento de plantas de tomate foi aliviado respectivamente pela aplicação exógena de SA+Ca
15 (Manaa et al., 2014) e extrato de folha de Moringa e/ou SA (Rady e Mohamed, 2015).
16
17
Por outro lado, a absorção de nutrientes envolve uma membrana plasmática radicular H+
enzima que gera o potencial eletroquímico para o fluxo de íons transmembrana por H+
-ATPase
18 simporte e H+ -mecanismos antiport (Dell'Orto et al., 2000). Sob condições de deficiência de Fe,
19 a capacidade aprimorada de acidificação das raízes foi descrita como uma importante abordagem subjacente
20 tolerância a tal restrição em plantas de estratégia I (Jelali et al., 2010). Este parâmetro foi
21 estudados em raízes de S. carnosa (Fig. 3). No presente trabalho, foram encontradas diferenas significativas
22 entre plantas C e D de S. carnosa, independente da cultivar. De fato, a aptidão para
23 acidificar a rizosfera através da redução dos valores médios de pH tem sido recomendado como
24 valiosas características intra-específicas para triagem de genótipos tolerantes à deficiência de Fe, especialmente em
25 espécies de leguminosas (M'sehli et al., 2009; Ben Abdellah et al., 2018). Em harmonia com o
26 parâmetros fisiológicos previamente estudados, esta acidificação foi dependente do agente priming.
27 Curiosamente, a análise de PCA mostrou uma correlação positiva (R= -0,74) entre a acidificação
28 e o tratamento primário SA+H2O2 em plantas de S. carnosa .
29 De fato, como mencionado acima, as sementes pré-embebidas com SA+H2O2 induziram o transporte de
30 a solução nutritiva nas plantas permitindo aumentar os teores de Fe e K.
31 Assim, a estimulação da absorção de nutrientes em plantas de S. carnosa cultivadas a partir de PS pode ser
32 devido ao aumento de H+ Atividade ATPásica. Em plantas de amendoim, a SA aumentou significativamente
33 a atividade do H+ -ATPase em raízes (Dong et al., 2016). Além disso, Li et al. (2016) acrescentou que
10
1 A acidificação citosólica induzida por SA que contribui para o aumento de ácidos fenólicos na Sálvia
2 células de miltiorriza .
3 Conforme antecipado por Mahmoudi et al., (2007), o Fe é extremamente necessário para manter
4 produção de clorofila e fotossíntese nas folhas para o crescimento das plantas. No trabalho atual, o
5 resultado mais marcante do tratamento de deficiência de Fe D é a redução dos teores de CHL(a e b)
6 (R= -0,425 e -0,601, respectivamente). A diminuição observada no pigmento fotossintético
7 concentração ocorrendo não apenas para CHL, mas também para CAR, sugere que todo o
8 sistema fotossintético de plantas de S. carnosa é afetado e sofre modificações estruturais.
9 Foi explorada a possibilidade de que, além de tais mudanças estruturais, também
10 modificações da maquinaria fotossintética podem ocorrer. Os resultados do PCA confirmaram a
11 diminuição prejudicial de Gs (R = -0,703) sob condições de deficiência de Fe, juntamente com A e E em
12 ambas as cultivares de S. carnosa (R= -0,482 e -0,494, respectivamente) (Fig. 4; Tabela.4 e.5). UMA
13 resultado semelhante foi relatado anteriormente em folhas de ervilha com deficiência de Fe e foi explicado como um
14 consequência da redução dos complexos captadores de luz e de um transporte de elétrons reduzido
15 (Iturbe-Ormaetxe et al., 1995). Além disso, a redução significativa do WUE (R= -
16 0,416), particularmente na cultivar Kalbia (Tabela 4 e 5), indica um Fe mais prejudicial
17 deficiência em A do que E (Larbi et al., 2006). Esses dados, além do aumento observado na
O parâmetro 18 E (R= -0,494) permite sugerir que o declínio observado para A não pode ser
19 atribuídos a fatores estomáticos (Fig.4; Tabela 5). Em vez disso, pode ser devido à redução
20 complexos de captação de luz, como sugerido pelo aumento no CHLa/CHLb
21 razão (R = -0,446). Alternativamente, o declínio A pode estar ligado ao elétron fotossintético
22 atividade de transporte. Esta atividade é afetada particularmente em membranas tilacóides isoladas. Esses
23 resultados apoiaram relatórios anteriores (Kouni et al., 2017; Hafsi et al., 2017) mostrando que S.
24 carnosa é capaz de preservar sua capacidade fotossintética quando submetida a bicarbonato
25 tratamento e condições salinas. Curiosamente, este é o primeiro trabalho que trata da
26 modificação do sistema fotossintético sob estresse de Fe em plantas de S. carnosa cultivadas a partir de PS. Dentro
27 fato, de acordo com nossos resultados, o aumento de Gs em plantas de S. carnosa D preparadas com SA+H2O2 pode
28 ser uma estratégia adotada por esta espécie para melhorar o turnover do gás, evitando que o CO2 se torne um
29 fator limitante para a fotossíntese.
30 Conclui-se que o priming de sementes com SA e/ou H2O2 melhorou a deficiência de Fe
31 tolerância de plantas de S. carnosa com uma tolerância relativa de cultivar SK em comparação com Kalbia
32 (Fig. 4). Isso pode ser em parte provocado pela aptidão para prometer uma nutrição adequada em Fe
33 e K, juntamente com capacidade fotossintética melhorada. Nossos achados indicam que SA e H2O2
34 condicionamento de sementes pode ser uma solução eficaz para mitigar os efeitos deletérios da deficiência de Fe
11
1 em plantas de S. carnosa . No entanto, uma vez que melhorou todos os parâmetros fisiológicos
2 estudados em condições de deficiência de Fe, o tratamento D+SA+H2O2 pareceu ser o melhor
3 agente primário.
4
5 Agradecimentos
6 Este trabalho foi realizado no Laboratório de Plantas Extremófilas (LPE: Laboratoire des
7 Plantes Extrêmophiles, Tunísia) do Centro de Biotecnologia de Borj-Cedria (CBBC:
8 Centre de Biotechnologie de Borj-Cédria, Tunísia), e apoiado pelo Ministério da
9 Ensino Superior e Pesquisa Científica (LR15CBBC02). Agradecemos a equipe do Centro
10 de Biotecnologia de Borj-Cedria (CBBC) para apoio técnico e administrativo.
11
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7 Legenda da figura
8 Figura 1. Efeito do condicionamento de sementes de SA e/ou H2O2 no índice de clorose em folhas jovens de duas cultivares de S. carnosa :
9 Kalbia (A) e Sidi Khlif (B) cresceram na ausência de Fe por 8 dias. Os dados são médias de 6 réplicas ± SE. Significa
10 de ambas as cultivares foram comparadas em cada dia. Barras marcadas com as mesmas letras minúsculas e as mesmas
11 números não são significativamente diferentes em P ÿ 0,05 de acordo com o teste de Duncan. D: Deficiente (1 µM Fe); SA:
12 Ácido salicílico (0,25 mM) e H2O2: Peróxido de hidrogênio (20 mM).
13
14 Figura 2. Efeito do condicionamento de sementes de SA e/ou H2O2 na taxa de crescimento relativo (RGR) de (A) brotos, (B) raízes, (C)
15 planta inteira, e (D) Relação broto/raiz de duas cultivares de S. carnosa (cv. Kalbia e Sidi Khlif) cultivadas no
16 ausência de Fe por 8 dias. Os dados são médias de 6 réplicas ± SE. Meios seguidos por letras distintas são
17 significativamente diferente em P ÿ0,05 de acordo com o teste de múltiplas faixas de Duncan em 95%. C: Controle (50 µM Fe); D:
18 Deficiente (1 µM Fe); SA: Ácido salicílico (0,25 mM) e H2O2: Peróxido de hidrogênio (20 mM).
19
20 Figura 3. Efeito do condicionamento de sementes de SA e/ou H2O2 nos valores de pH do meio de cultura de duas S. carnosa
21 cultivares: Kalbia (A) e Sidi Khlif (B) cultivadas na ausência de Fe por 8 dias. Os dados são médias de 6 réplicas ±
22 SE. As médias das duas cultivares foram comparadas em cada dia. Barras marcadas com as mesmas letras minúsculas e o
23 mesmos números não são significativamente diferentes em P ÿ 0,05 de acordo com o teste de Duncan. C: Controle (50 µM Fe); D:
24 Deficiente (1 µM Fe); SA: Ácido salicílico (0,25 mM) e H2O2: Peróxido de hidrogênio (20 mM).
25
26 Figura 4. Análise de Componentes Principais de duas cultivares de S. carnosa (cv. Kalbia e Sidi Khlif) cultivadas no
27 ausência de Fe por 8 dias sob efeito do condicionamento de sementes de SA e/ou H2O2 . D: Deficiente (1 µM Fe); SA: Salicílico
ácido 28 (0,25 mM) e H2O2: Peróxido de hidrogênio (20 mM). Os círculos (•) representam diferentes parâmetros de análise.
29 Quadrados (ÿ) representam os diferentes tratamentos (D, D+SA, D+ H2O2 e SA+ H2O2). Parâmetros de análise e
30 tratamentos são projetados no plano fatorial principal F1-F2 que explica 59,67% da variação.
31 Abreviaturas: RGR do rebento: taxa de crescimento relativo do rebento; RGR da raiz: taxa de crescimento relativo da raiz; RGR total: total
32 taxa de crescimento relativa; Broto/Raiz: razão entre broto e raiz; Atire Fe: atire o conteúdo de Fe; Fe de raiz: teor de Fe de raiz;
33 Filmar K: filmar conteúdo K; Raiz K: conteúdo de Raiz K; CHLa: clorofila a; CHLb: clorofila b; CHL a/b:
razão de 34 clorofila aeb; CHL a+b: clorofila a+b; CAR: teor de carotenóides; pH: valores médios de pH;
35 Clorose: escore de clorose; E: taxa de transpiração; Gs: condutância estomática; A: assimilação líquida de CO2 ; WUE:
36 eficiência no uso da água; IWUE, Eficiência intrínseca do uso da água.
37
38
39 Tabelas
16
1 Tabela 1. Diferentes tratamentos aplicados às mudas de S. carnosa . (+) Indica presença e (ÿ) ausência de
2 solução considerada. C: Controle (50 µM Fe); D: Deficiente (1 µM Fe); SA: Ácido salicílico (0,25 mM) e H2O2:
3 Peróxido de hidrogênio (20 mM).

4
5 Tabela 2. Efeito do condicionamento de sementes de SA e/ou H2O2 no teor total de Fe e K na parte aérea e nas raízes de duas S. carnosa
6 cultivares (cv. Sidi Khlif e Kalbia) cultivadas na ausência de Fe por 8 dias. Os dados são médias de 6 réplicas ± SE.
7 Médias seguidas por letras distintas são significativamente diferentes em P ÿ0,05 de acordo com o teste de múltiplas faixas de Duncan
8 a 95%. C: Controle (50 µM Fe); D: Deficiente (1 µM Fe); SA: Ácido salicílico (0,25 mM) e H2O2: Hidrogênio
9 peróxido (20 mM).

10
11 Tabela 3. Efeito do condicionamento de sementes de SA e/ou H2O2 no pigmento da folha (CHL a, b, razão CHL a/b, CHL (a+b), e
12 concentrações de CAR de duas cultivares de S. carnosa (cv. Sidi Khlif e Kalbia) cultivadas na ausência de Fe por 8
13 dias. Os dados são médias de 6 réplicas ± SE. Médias seguidas por letras distintas são significativamente diferentes em P
14 ÿ0,05 de acordo com o teste de alcance múltiplo de Duncan a 95%. C: Controle (50 µM Fe); D: Deficiente (1 µM Fe); SA:
15 Ácido salicílico (0,25 mM) e H2O2: Peróxido de hidrogênio (20 mM).
16
17 Tabela 4. Efeito do condicionamento de sementes de SA e/ou H2O2 nos parâmetros de troca gasosa em folhas de duas S. carnosa
18 cultivares (cv. Sidi Khlif e Kalbia) cultivadas na ausência de Fe por 8 dias. Os dados são médias de 6 réplicas ± SE.
19 Médias seguidas por letras distintas são significativamente diferentes em P ÿ 0,05 de acordo com o teste de múltiplas faixas de Duncan
20 a 95%. C: Controle (50 µM Fe); D: Deficiente (1 µM Fe); SA: Ácido salicílico (0,25 mM) e H2O2: Hidrogênio
21 peróxido (20 mM).

22
23 Tabela 5. Matriz de correlação de Pearson. RGR da parte aérea: taxa de crescimento relativo da parte aérea; RGR da raiz: crescimento relativo da raiz
taxa de 24 ; RGR total: taxa de crescimento relativo total; Broto/Raiz: razão entre broto e raiz; Atire Fe: atire o conteúdo de Fe; Raiz Fe
25 : teor de Fe da raiz; Filmar K: filmar conteúdo K; Raiz K: conteúdo de Raiz K; CHLa: clorofila a; CHLb:
26 clorofila b; CHL a/b: clorofila: razão clorofila aeb; CHL a+b: clorofila a+b; CAR: carotenóides
27 conteúdos; pH: valores médios de pH; Clorose: escore de clorose; E: taxa de transpiração; Gs: condutância estomática; UMA:
28 assimilação líquida de CO2 ; WUE: eficiência no uso da água; IWUE, eficiência intrínseca do uso da água.
29
30
17
tabela 1
Ácido salicílico H2O2 Fe
(0,25 mM) (20 mM) (50 e 1 µM, respectivamente para plantas C e D)
- - +
C (Controle)
C+SA + - +
C+H2O2 - + +
C+SA+H2O2 + + +
- - -
D (deficiente)
D+SA + - -
D+H2O2 - + -
D+SA+H2O2 + + -
C: Controle; SA: Ácido salicílico; H2O2 : Peróxido de hidrogênio e D: deficiente em Fe.
mesa 2
Fotos Raízes
Kalbia Sidi Khlif Kalbia Sidi Khlif
Teor total de Fe
(µg. g-1 DW)
C 1540±21f 1471±77g 1738±19c 1736±36c
D 943±19h 865±13i 1052±18f 1040±8g
D+SA 1482±27g 2337±55d 1392±52e 1555±127d
D+ H2O2 1917±25e 2817±43b 1800±30b 2320±94a
D+SA+H2O2 2449±69c 2933±69a 1745±80c 2348±80a
Teor de K
(mg. g-1 DW)
C 8,64±0,25fg 8,69±0,71fg 2,02±0,20g 2,27±0,24f
D 8,16±1,06g 8,93±1,17ef 2,43±0,41e 2,63±0,24d
D+SA 10,58±0,17d 11,27±0,32c 3,15±0,08c 4,06±0,06b
D+H2O2 8,81±0,02f 9,37±0,22e 2,54±0,04de 3,03±0,05c
D+SA+H2O2 12,93±0,08b 15,06±0,2a 4,05±0,05b 4,55±0,05a
Os valores são médias ± SE (n = 6) e as diferenças entre as médias de ambas as cultivares foram comparadas pelo teste de Duncan
em (P < 0,05). No caso de interação significativa entre tratamento e genótipo, os valores seguidos de letras diferentes são estatisticamente
diferentes.
Tabela 3
C D D+SA D+H2O2 D+SA+H2O2
Kalbia
CHL a
c b
0,47 ±0,03a 0,38±0,0 cd 0,36±0,0 de 0,33±0,02 0,44±0,02
(mg g-1FW)
c b
CHL b 0,25 ±0,02 uma
0,11±0,01 0,16±0,03b 0,11±0,01c 0,14±0,01

(mg g-1FW)
de
CARRO b 0,16±0,02 ef 0,05±0,01 ef 0,05±0,01 f 0,04±0,02 0,07±0,02
(mg g-1FW)
c
proporção CHL a/b 1,90±0,17 3,48±0,34 uma
bc 2,31±0,08 3,07±0,32 uma
3,14±0,19 uma
d b
0,52±0,03c 0,45±0,02 0,58±0,02
c
0,72±0,04 uma
0,50±0,03
CHL (a+b)
(mg g-1FW)
Sidi Khlif
CHL a
0,46 ±0,02ab f 0,22±0,01 d 0,34±0,02 0,31±0,01e 0,45±0,01ab
(mg g-1FW)
c
CHL b 0,24±0,02 uma
0,07±0,01d 0,15±0,01b 0,10 ±0,02 0,16 ±0,03b

(mg g-1FW)
c
CAR 0,19±0,02 uma
d 0,08±0,01 d 0,09±0,01 ef 0,05±0,03 0,12±0,01
(mg g-1FW)
c c
proporção CHL a/b 1,91±0,2 3,11±0,37 uma
2,26±0,08 3,07±0,66 uma
2,85±0,62ab
e c d b
CHL (a+b) 0,71±0,01 uma
0,30±0,02 0,50±0,02 0,41±0,03 0,61±0,03

(mg g-1FW)
Os valores são médias ± SE (n = 6) e as diferenças entre as médias de ambas as cultivares foram comparadas pelo teste de Duncan em (P <
0,05). No caso de interação significativa entre tratamento e genótipo, os valores seguidos de letras diferentes são estatisticamente diferentes.
Tabela 4
Tratamentos C D D+SA D+H2O2 D+SA+H2O2
Kalbia
UMA
8,16±0,02b 3,74±0,03f 5,84±0,02c 4,89±0,01de 4,76±0,03e
(µmol CO2.m-2s 1 )
G 0,17±0,01e 0,30±0,02c 0,30±0,01bc 0,32±0,01abc 0,33±0,02ab
(mol. m-2 s-1)
E 1,30±0,01g 2,94±0,01a 2,46±0,03f 2,74±0,02b 2,23±0,02e
(mmol H2O. m-2s 1 )
WUE 6,26±0,06b 1,27±0,01g 2,37±0,03e 1,78±0,01f 2,13±0,02ef
(µmol. mmol-1)
IWUE 47,31±4,48b 12,51±0,87h 19,28±1,01efg 15,15±0,83fgh 14,47±0,92gh
(µmol. mmol-1)
Sidi Khlif
UMA
6,18±1,8a 5,6±0,11e 8,2±0,11b 6,22±0,12c 8,56±0,12b
(µmol CO2.m-2s 1 )
0,26±0,2d 0,25±0,1d 0,32±0,02abc 0,31±0,02bc 0,34±0,01a

Gs (mol. m-2 s-1)
E
(mmol H2O. m-2s 1 ) Pré-prova do diário
2,56±0,08c 2,37±0,1cd 1,84±0,09h 1,92±0,1f 1,24±0,1g
WUE 6,30±0,72b 2,36±0,08e 4,46±0,26c 3,23±0,26d 6,90±0,83a
(µmol. mmol-1)
IWUE 62,42±9,18a 22,44±1,35cde 25,66±0,74e 19,87±0,71def 24,95±1,03cd
(µmol. mmol-1)
Os valores são médias ± SE (n = 6) e as diferenças entre as médias de ambas as cultivares foram comparadas pelo teste de Duncan
em (P < 0,05). No caso de interação significativa entre tratamento e genótipo, os valores seguidos de letras diferentes são estatisticamente
diferentes.
Tabela 5
Variáveis D D+SA D+H2O2 D+SA+H2O2

Atirar RGR -0,6699 0,0777 -0,2945 0,8632
RGR raiz -0,0814 -0,2769 -0,3342 0,6896
RGR total -0,5857 0,0055 -0,3231 0,8828
Atirar/enraizar -0,8053 0,2724 -0,1648 0,6694
Atire o conteúdo de Fe -0,8039 -0,0685 0,2931 0,5510
Teor de Fe raiz -0,7026 -0,2771 0,4890 0,4660
Atire conteúdo K -0,5304 0,0624 -0,4154 0,8648
Conteúdo da raiz K -0,5755 0,2166 -0,4115 0,7502
CHLa -0,4252 -0,0316 -0,2846 0,7414
CHLb -0,6012 0,5270 -0,3488 0,4231
CHL a/b 0,4464 -0,7336 0,1871 0,1001
CHL a+b -0,5180 0,1590 -0,3283 0,6873
CARRO -0,0828 0,0276 -0,5246 0,5798
pH -0,6734 0,2053 -0,2744 0,7425
Clorose 0,3533 -0,0672 0,0380 -0,3241
E 0,4943 -0,0771 0,1259 -0,5432
G -0,7032 0,0248 0,1572 0,5212
UMA -0,4821 0,3861 -0,1564 0,2525
WUE -0,4167 0,1151 -0,1852 0,4868
IWUE Pré-prova do diário

-0,2252 0,3946 -0,2213 0,0518
As variáveis foram centradas em torno de suas médias e normalizadas com desvio padrão de 1, n = 6. Os valores em negrito
representam correlações significativas no nível 0,05.
Destaques da Pesquisa
1- Impactos da deficiência de metais nas plantas.
2- Respostas fisiológicas das plantas à deficiência de Fe.
3- Melhoria da produtividade das plantas pelo uso de ferramentas fisiológicas adaptadas.
4- Preparação de sementes de leguminosas.
5- Atividade fotossintética.
Os autores confirmaram:
«Declarações de interesse: nenhuma».

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Para aparecer em: Plant Physiology and Biochemistry

Data de recebimento: 23 de julho de 2020

Data de aceitação: 21 de novembro de 2020

© 2020 Publicado por Elsevier Masson SAS.

2 modulação do crescimento, capacidade de acidificação das raízes e

3 desempenho em Sulla carnosa

Laboratório de Plantas Extremófilas, Centro de Biotecnologia de Borj-Cedria, BP 901, Hammam-Lif 2050,

16 *Autor correspondente: Jelali Nahida

19 Tel: 216 79 412 848

20 Fax: 216 79 412 638

28 atividade fotossintética; Sula carnosa.

6 e peróxido de hidrogênio (H2O2 20 mM), aplicados separadamente ou combinados, na planta

7 , estado nutricional dos elementos (Fe e potássio K), acidificação radicular e

9 tolerância a tal restrição. Sob condições sem primer, a deficiência de Fe diminuiu a

10 crescimento, concentração de clorofila, além dos teores de Fe e K. Além disso, afetou a

11 atividade fotossintética inibindo a taxa líquida de assimilação de CO2 e aumentando a

14 aumentou em folhas deficientes em Fe de ambas as cultivares, sugerindo que a

17 acidificação de plantas deficientes de S. carnosa . No entanto, o tratamento D+SA+H2O2 teve o maior

19 dependendo da cultivar, do tecido e do primer aplicado. Isso pode ser devido

20 a modulação do desempenho fotossintético, levando a uma absorção de nutrientes mais eficiente.

8 respostas fisiológicas apropriadas, como estimulação da raiz da atividade de duas enzimas

9 responsável pela redução do Fe e capacidade de acidificação (Dell'Orto et al., 2000).

10 Como o Fe é um componente da cadeia fotossintética e um fator necessário para

11 biossíntese da clorofila, sua deficiência prejudica seriamente o metabolismo da fotossíntese. Folha

12 A clorose de Fe é um sintoma comum de deficiência de Fe causada pela diminuição significativa de

31 Outra abordagem para melhorar a tolerância à deficiência de Fe em plantas é a molécula sinalizadora

3 induziram estresses oxidativos no alcaligrama halófito (Puccinellia tenuiflora). Alternativamente,

6 confirmado por Hao et al., (2014) em culturas de células de Salvia.

7 O desenvolvimento de métodos e estratégias para remediar os efeitos deletérios dos nutrientes

8 deficiência de estresse em plantas tem recebido atenção considerável, especialmente entre as

10 (Ellouzi et al., 2017) relacionados às respostas de crescimento espontâneo de halófitos naturais

11 em ambientes difíceis. Por outro lado, o interesse se concentrou na pesquisa de

13 em condições marginais. Em particular, a estratégia original do chamado “cash crop

15 (Koyro e Huchzermeyer, 2004, Manaa et al., 2019).

17 é considerada uma espécie importante utilizada na agricultura de leguminosas pastoris.

23 condições existem em grande parte na Tunísia (Ben Abdallah et al., 2018).

25 H2O2, aplicado isoladamente e em combinação, no comportamento do estádio vegetativo de duas S. carnosa

26 cultivares (Sidi Khlif e Kalbia) quando cultivadas em condições de escassez de Fe.

29 2.1. Condições de crescimento da planta e tratamentos

31 coletados respectivamente de Sebka Sidi Khlifa (36°14'20"N/10°26'15"E) e Kalbia (35°50'N

32 10°17'E). As sementes foram escarificadas mecanicamente e depois embebidas separadamente por 4h em SA

6 O primeiro grupo correspondeu às plantas controle (presença de Fe a 50 µM:C), enquanto o

10 mM (NH4)6Mo7O24 e 0,4 mM CuSO4. Fe foi fornecido como fórmula Fe(III)–EDTA. Aerado

14 2.2. Determinação dos índices de clorose

19 2.2. Medição da taxa de crescimento relativa

24 t = duração do tratamento em dias (d), e os índices 1 e 2 = colheita inicial e final.

26 2.3. Análise de elementos minerais

30 espectrofotômetro (VARIAN 220 FS) conforme ilustrado em Farhat et al., (2015).

32 2.4. Medições de Clorofila

2 concentrações de clorofilas (CHLa e b) e carotenóides (CAR) foram determinadas por

3 como descrito em Lichtenthaler (1987).

5 2.5. Acidificação da raiz

6 A capacidade de acidificação das plantas de S. carnosa foi determinada medindo-se diariamente o pH em

9 valor de pH da solução antiga.

11 2.6. Parâmetros de troca de gás

21 condutância estomática (A / Gs).

23 2.7. Análise estatística

2 3.1. Parâmetros de crescimento

5 apresentou os menores valores de pontuação clorótica (Fig.1B). Os sintomas de clorose foram

11 Tratamento D+SA+H2O2 , especialmente na cultivar SK (441 % do controle). Ao contrário dos tiros,

17 aumentou da mesma forma percebida nos brotos (Fig. 2C e D).

28 iniciaram um maior acúmulo de teor de K em brotos e raízes SK chegando a 0,68 e 0,72-