Guía Lab 1-2022

Catálogo
RE-10-LAB-244 MICROBIOLOGIA GENERAL v5.pdf ····················································································· 1

RE-10-LAB-376 FARMACOGNOSIA v2.pdf ··································································································· 46
RE-10-LAB-378 ANALISIS QUIMICO v2.pdf ·································································································· 87
RE-10-LAB-406 QUIMICA ORGANICA DE LOS PROCESOS BIOQUIMICOS I.pdf ··································· 149
GUIAS DE PRÁCTICA CIENCIAS DE LA SALUD QUIMICA
Código de registro: RE-10-LAB-244 Versión 5.0
UNIVERSIDAD DEL VALLE
LABORATO4RIO DE MICROBIOLOGIA GENERAL
Práctica No. 1
BIOSEGURIDAD EN LABORATORIOS DE MICROBIOLOGIA
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.-
Los laboratorios de microbiología constituyen medio ambientes de trabajo

especiales, generalmente únicos, que pueden presentar riesgos de
enfermedades infecciosas identificables para las personas que se encuentren en
o cerca de ellos. Durante todo el transcurso de la historia de la microbiología, las
infecciones se han contraído en el laboratorio. Los informes publicados hacia
fines del siglo pasado describieron casos de fiebre tifoidea, cólera, muermo,
brucelosis y tétano adquiridos en el laboratorio. En 1941, Meyer y Eddie
publicaron un estudio de 74 infecciones de laboratorio con brucelosis que se
habían producido en los Estados Unidos, y concluyeron que la “manipulación de
cultivos o especímenes o la inhalación de polvo con contenido de organismos de
Brucella constituye un peligro inminente para quienes trabajan en los
laboratorios”. Algunos casos se atribuyeron al descuido o a malas técnicas en la
manipulación de materiales infecciosos.
En 1913, Eyre fue el primer autor que publicó un libro de texto en el que incluyó
prácticas de seguridad para el laboratorio de microbiología, como
recomendaciones sobre la necesidad de: 1) usar guantes, 2)lavarse las manos
después de trabajar con materiales infecciosos, 3) desinfectar todos los
instrumentos inmediatamente después de su uso, 4)utilizar agua para humedecer
los rótulos de las muestra, en lugar de saliva, 5)desinfectar todos los residuos
contaminados antes de su descarte y 6) informar a todo el personal afectado
sobre cualquier accidente o exposición a agentes infecciosos.
Estas pautas, que aún se incorporan en los programas de seguridad del
laboratorio del siglo XXI, se expandieron hasta incluir no solo el manejo adecuado
de los peligros biológicos enfrentados al procesar las muestras o manejar
microorganismos infecciosos.
Bioseguridad consiste en las precaucione sobre seguridad, salud y trabajo. Las
medidas preventivas están destinadas a proteger la salud de los recursos
humanos, de los riesgos por agentes biológicos, físicos, químicos y/o factores
humanos. El cumplimiento de estas normas unidas al empleo de técnicas de
laboratorio adecuadas disminuye el riesgo para el personal y para la integridad
de los productos.
Principios de Bioseguridad
El término “contención” se utiliza para describir métodos seguros para manejar
materiales infecciosos en el medio ambiente del laboratorio donde son
manipulados o conservados. El objetivo de la contención es reducir o eliminar la
exposición de quienes trabajan en laboratorios u otras personas, y del medio
ambiente externo a agentes potencialmente peligrosos.
La contención primaria, la protección del personal y del medio ambiente inmediato
del laboratorio de la exposición a agentes infecciosos, es provista tanto mediante
buenas técnicas microbiológicas como a través del uso de equipos de seguridad
adecuados. El uso de vacunas puede brindar un mayor nivel de protección del
personal.
La contención secundaria, la protección del medio ambiente externo al laboratorio
de la exposición a materiales infecciosos, se logra a través de una combinación
del diseño de la instalación y prácticas operativas. Por lo tanto, los tres elementos
de contención incluyen prácticas y técnicas de laboratorio, equipos de seguridad
y el diseño de la instalación. La evaluación del riesgo del trabajo a realizar con un
agente específico determinará la combinación apropiada de estos elementos.
NORMAS DE SEGURIDAD
Las precauciones estándares y las prácticas seguras del trabajo de laboratorio se
basan en los siguientes fundamentos:
▪ No comer, beber, fumar o aplicarse cosméticos (incluso brillo labial)
▪ Es imprescindible el uso de bata de laboratorio.
▪ Al iniciar y finalizar las prácticas, el estudiante se lavará las manos con
agua y jabón.
▪ El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado. Antes de
comenzar cada practica es conveniente desinfectar la superficie de trabajo
con los desinfectantes químicos( Hipoclorito de sodio y alcohol etílico)
▪ No colocarse o quitarse lentes de contacto
▪ No morderse las uñas o masticar lapiceras
▪ No pipetear con la boca
▪ Limitar el acceso al laboratorio solo al personal capacitado
▪ Presuponer que todos los pacientes están potencialmente infectados por
HIV y otros patógenos transportados por la sangre
▪ Los microorganismos deben manejarse siempre alrededor de la llama
▪ Usar precauciones de barrera adecuadas para impedir la exposición de la
piel y las membranas mucosas, por ejemplo, siempre lavar guantes y
máscaras, anteojos, batas o guardapolvos si hay riesgo de salpicaduras o
formación de gotitas.
▪ Lavarse adecuadamente las manos y otras superficies de la piel tras
quitarse los guantes e inmediatamente después de cualquier
contaminación
▪ Tener cuidado especial en evitar lesiones con objetos cortantes, como
aguja y escalpelos.
▪ Libros, carpetas, abrigos y cualquier otro material que no se utilice en la
realización de la práctica deben estar apartados del lugar de trabajo.
▪ En caso de accidente (ruptura de material, derramamiento de
microorganismos, etc.) se comunicará inmediatamente al instructor.
Desechos generales o comunes son aquellos que no presentan un riesgo
adicional para la salud humana y el ambiente y que no requieren de un manejo
especial como papel, cartón, plásticos, restos de alimentos.
Desechos peligrosos o especiales son aquellos que presentan un riesgo para la
salud humana y el ambiente y que requieren de un manejo especial como
sangre y hemoderivados
Desechos cortopunzantes son aquellos representa un peligro para la salud como
hojas de bisturí, agujas, lancetas
Desechos especiales como frascos de antibióticos
2. COMPETENCIAS.-
➢ Define los principios básicos de bioseguridad en laboratorios de
microbiología
➢ Aplica de forma correcta las precauciones estándares en los laboratorios
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.-
▪ Manual de bioseguridad
4. TECNICA Ó PROCEDIMIENTO.-
Todos los estudiantes antes de entrar a las aulas deben cumplir las
precauciones estándar mientras trabajan dentro del laboratorio las siguientes
pautas:
▪ Usar guantes y guardapolvo de laboratorio
▪ Manipular con cuidado todos los materiales e instrumentos
▪ Descartar el material infeccioso y punzo cortante en los recipientes
identificados respectivamente.
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA.-

200 Minutos
6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS.-
No aplica
7. CUESTIONARIO.-
1. Cite las normas de Bioseguridad recomendadas durante el trabajo con

agentes Infecciosos
2. Como eliminaría residuos infecciosos
3. Que cuidados se debe tener durante el transporte hasta el laboratorio de
una muestra (Ej. muestras de sangre).
Práctica No. 2
MATERIALES E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
El trabajo en un laboratorio de Microbiología es significativamente diferente al de

otros laboratorios, requiriendo de unos cuidados especiales ya que se debe
trabajar en condiciones que se evite la contaminación del operario, de las
muestras y del ambiente. Por todo ello es necesario reconocer cada uno de los
materiales que son utilizados en laboratorio de Microbiología y reconocer el uso
que se le da en el mismo. Es cierto que muchos materiales se comparten con
otros laboratorios, sin embargo en microbiología se le da un uso especial porque
el objetivo es diferente. Ejemplo: el caso de un mechero, que se utiliza para
esterilizar.
2. COMPETENCIAS.-
➢ Describa el material utilizado en el laboratorio de microbiología, a través de
la resolución de problemas
➢ Indica el empleo del material descrito en trabajos microbiológicos, a través de
la resolución de problemas.
EQUIPOS y MATERIALES
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
1 PORTAOBJETOS 10 PIEZAS
2 CUBREOBJETOS 20 PIEZAS
3 TUBOS DE ENSAYO 10 PIEZAS
4 TUBOS DE HEMÓLISIS 10 PIEZAS
5 CAJAS PETRI 10 PIEZAS
6 ASAS BACTERIOLÓGICAS 10 PIEZAS
MATRACES ERLENMEYER
7 DE 250 mL 5 PIEZAS
8 PIPETAS DE 5 mL 10 PIEZAS
9 GRADILLAS 5 PIEZAS
10 VARILLAS DE TINCIÓN 2 PIEZAS
11 FRASCOS GOTEROS 10 PIEZAS
12 PROBETA DE 100 mL 10 PIEZAS
13 ESPÁTULA DE DRIGASKI 10 PIEZAS
14 PINZAS DE RASPASO 10 PIEZAS
15 MICROSCOPIOS 5 PIEZAS
16 AUTOCAVE 1 EQUIPO
HORNO DE CALOR SECO
17 (ESTUFA) 1 EQUIPO
18 INCUBADORAS 1 EQUIPO
19 BAÑO MARÍA 1 EQUIPO
CÁMARA DE CÁMAR
20 ANAEROBIOSIS 1 A
21 MECHERO A GAS 5 PIEZAS
22 BALANZA DE 400g 4 PIEZAS
Descripción ordenada de cada uno de estos y realizar el correspondiente dibujo.
• Procedimientos de lavado, secado y protección de los mismos.
• Señalar los usos de cada uno de los materiales a utilizar en el laboratorio de
Microbiología.
200 minutos

No se aplica
7. CUESTIONARIO.-
.- Dibuje y cual su utilizada
MATERIALES USOS DIBUJO
Portaobjetos
Cubreobjetos
Tubo de ensayo
Tubos de hemolisis
Caja petri
Pipetas graduadas
Práctica No. 3
TOMA DE MUESTRA PARA UN ANALISIS MICROBIOLOGICO CLINICO

El laboratorio de microbiología debe recolectar la muestra para ser sometida a un
aislamiento y cultivo de microorganismos causante de procesos infecciosos,
aplicando la metodología es necesario tener un protocolo que permita la adecuada
manipulación de muestras que serán enviadas al laboratorio y los resultados
obtenidos estarán, estrechamente relacionados con el éxito del informe
Consideraciones importantes para la recolección de muestras son las
siguientes:
• Si el paciente recolectara la muestra las instrucciones deberán ser claras
(Mejor si son por escrito)
• La muestra deberá ser representativa del proceso infeccioso
• La recolección deberá realizarse antes de comenzar la terapia antimicrobiana
o suspender el antibiótico 48-72 horas antes de la toma de muestra
• Cuando se realice cultivo y aislamiento de gérmenes el material deberá
recolectarse en recipientes estériles
• Una vez recolectada la muestra deberá ser llevada al laboratorio lo más rápido
posible
• Etiquetar correctamente las muestras
• Toda muestra deberá como si fuera potencialmente patógena
• Cuando se realiza cultivo de material deberá conocerse el lugar de donde
proviene la muestra: Zonas corporales que normalmente son estériles
(sangre, punción de medula ósea, líquido cefalorraquídeo, liquido sinovial,
liquido pleural, liquido peritoneal, tracto respiratorio inferior, orina recolectada
por punción supra púbica), Zonas corporales que poseen flora normal
comensal (boca, nariz, tracto respiratorio superior, piel, tracto genital, tracto
gastrointestinal, orina recolectada por micción media, sondas o bolsas
recolectoras)
2. COMPETENCIAS.-
➢ Aplica la metodología adecuada para la recolección de muestras

➢ Aplica los métodos correctos para la conservación de las
muestras.
1 BAJALENGUAS 20 PIEZAS
2 HISOPOS ESTÉRILES 20 PIEZAS
POR MESON
4 MECHEROS BUNSEN 4 PIEZAS SOLAMENTE
5 GUANTES 5 PARES
6 JERINGAS DE 5mL 10 PIEZAS
7 TUBOS DE HEMÓLISIS 40 PIEZAS
8 CENTRIFUGADORA 1 EQUIPO
GRADILLA PARA TUBOS DE
9 HEMÓLISIS 1 PIEZA
10 ALGODÓN 100 gr
11 ALCOHOL MDICINAL 100 mL
12 LIGADURAS 5 PIEZAS
Instrucciones
Muestra Preparación del paciente
especiales
Orina chorro Mujeres: limpiar la zona con agua y El recipiente donde

medio jabón, luego enjuagar con agua, se recolecta la
colocar tampón vaginal, muestra deberá ser
Manteniendo separados los labios estéril, boca ancha y
mayores y comenzar A evacuar en no tocar la piel del
el inodoro; recoger el chorro medio paciente.
después de eliminar los primeros ml En el caso de niños
de orina. se podrá emplear
Varones: limpiar el glande con agua bolsa recolectora de
y jabón, luego enjuagar con agua; orina.
retraer la piel del glande; recoger el
chorro medio después de eliminar
varios ml.
Sangre venosa Limpiar el sitio de punción venosa Extraer sangre

con alcohol al 70 % o con alcohol durante el episodio
yodado. febril, extraer dos
muestras, de brazo
izquierdo y derecho,
no extraer más de
tres muestras en un
periodo de 24 horas.
Tracto Limpiar la piel antes de Se puede aspirar el

genital la recolección. líquido o se puede
femenino realizar un hisopado,
o recolectar las
secreciones con
ayuda de un hisopo.
Tracto Limpiar el glande con agua y jabón.

Recolectar las
genital
secreciones con
masculino hisopo o en tubo.
Vías respiratorias Enjuagar con agua antes de la Pasar el hisopo por

superiores recolección de la muestra la faringe posterior y
faringe las amígdalas, con la
ayuda de un baja
lengua, sin tocar
paladar, úvula y
dientes.
La muestra recolectada es Esputo. El paciente debe

Vías respiratorias
Enjuagar o hacer gárgaras con agua obtenerlo por tos
inferiores
antes de la recolección. profunda.
Extracción de una muestra de sangre

Realización de un hisopado faríngeo
Recolección una muestra de orina
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA.-
200 minutos

No se aplica
7. CUESTIONARIO.-
• Cite otras recomendaciones para la extracción de muestras
• Que otras muestras se toman para un análisis microbiológico en los seres
vivos
• Cite los medios de transporte
Práctica No. 4
COLORANTES EMPLEADOS EN BACTERIOLOGIA
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.

Los colorantes son sales organicas cuya estructura fundamental es un anillo
bencénico con distintos radicales, los colorantes se clasificn en básicos, acidos
y neutros. En bacteriología las mas empleados son colorantes básicos como
fusina básica, cristal violeta y azul de metileno.
Acido alcohol resistentes
Solución A: fucsina básica 4 g en 20 ml de etanol al 95%
Solución B: fenol (90%) 6.7 ml en 100ml de agua desionizda ( temperar
ligeramente parafacilitar la disolución; no calentar en exceso ya que es inflamable
Mezclar ambas soluciones en un reciiente tapado( mediante agitación constante
durante varias horas). Filtrar con papel de filtro
Alcohol clorhídrico
Alcohol etílico (95%) 970ml
Acido clorhídrico 30 ml
Mezclar en cámara ventilada (extractora)
Azul de metileno
Azul de metileno 3 g
Agua desionizada 1000ml
Disolver completamente 3 g de azul de metileno en 1000 ml de agua desionizada
Dejar reposar durante 24 horas y filtrar con papel de filtro
Crista violeta
Solución A cristal violeta en 200 ml de etanol (95%) (utilizar mortero)
Solución B 8 g de oxalato amónico en 800 ml de agua desionizda (utilizar mortero)
Mezclar ambas soluciones. Filtrar con papel filtro
Lugol
Yodo resublimado 1 g
Yoduro de potasio 20 g
Triturar y mezclar finamente: 1 g de yodo resublimado con 20 g de yoduro de
potasio. Disolverlo a continuación en 1000ml de agua desionizada. Filtrar con
papel defiltro
Safranina
Safranina 0.25 g
Etanol 10 ml
Disolver 0,25 d de safranina en 10 ml de etanol (95%). (utilizar mortero). Anadir
agua desionizda hasta un volumen total de 100 ml . una vez disuleta tras
agitación, filtrar con papel filtro
2. COMPETENCIAS.-
➢ Preparar una solución de azul de metileno
➢ Aplicando las técnicas y precauciones durante la preparación de un
colorante.
VASO DE PRECIPITADO
1 DE 250 mL 1 PIEZA
FRASCO DE VIDRIO
2 ÁMBAR DE 100mL 1 PIEZA
3 ESPÁTULAS 2 PIEZAS
4 PISETA DE AGUA 2 PIEZAS
5 PROBETA DE 100 mL 1 PIEZA
6 BALANZA 1 PIEZA
7 EMBUDO 1 PIEZA
8 PAPEL FILTRO 1 PLIEGO
9 AZUL DE METILENO 20 mL
Pesar el colorante
Anadir la cantidad de agua
Dejar reposar
Filtrar la solución
Colocar en el frasco y rotular
200 minutos
No se aplica
7. CUESTIONARIO
Investigue la estructura química de la fucsina básica, cristal violeta, azul de
metileno
Cite las tinciones mas empleadas en microbiologia
Práctica No. 5
TINCION DE GRAM
Con el objeto de incrementar el contraste y facilitar la observación de las muestras

en microscopia de campo claro, se pueden utilizar colorantes. Los colorantes son
compuestos orgánicos y cada tipo de colorante suele tener afinidad por
determinas estructuras celulares. Muchos de los colorantes utilizados con
frecuencia en microbiología están cargados positivamente catiónicos; esto es,
que en un campo eléctrico se desplazan hacia el cátodo (-) y se combinan
fuertemente con componentes celulares cargados negativamente, como los
ácidos nucleicos y los polisacáridos. Entre los colorantes catiónicos se pueden
citar el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Dado que las envolturas
externas de los microorganismos están por lo general cargadas negativamente,
estos colorantes se combinan con estructuras de la superficie celular, y son por
lo tanto excelentes colorantes de aplicación general.
Las tinciones más simples se realizan sobre preparaciones presecados. Sobre un
portaobjetos con una suspensión seca de microorganismos se derrama una
pequeña cantidad de una solución diluida del colorante y se mantiene el contacto
durante uno o dos minutos; se lava varias veces con agua y se seca. Este tipo de
preparación suele observarse con un objetivo de inmersión.
Se denominan tinciones diferenciales aquellas que no tiñen de manera
homogénea a todos los tipos de células, Las más importante tinción diferencial
utilizada en microbiología se denomina tinción de Gram, en honor al microbiólogo
que la describió. Dependiendo del resultado de esta tinción, las bacterias pueden
dividirse en dos grandes grupos: Gram positivas y Gram negativas. Una vez
determinada la tinción de Gram, las bacterias Gram positivas aparecen de color
violeta o púrpura, mientras que las Gram negativas presentan color rosa.
La distinta tinción de estos dos grupos de bacterias se basa en las profundas
diferencias que presentan sus paredes celulares. En bacterias Gram positivas el
peptidoglicano representa hasta el 90 % de la pared, aunque pequeñas
cantidades de ácidos teicoicos suelen también formar parte de la misma. Si bien
se cree que algunas Bacterias poseen una sola capa de peptidoglicano, muchas
Bacterias, especialmente las Gram positivas, tienen varias capas de
peptidoglicano. En Bacterias Gram negativas el peptidoglicano constituye solo
alrededor del 10 % de la pared.
Fundamento de la Gram: Este método divide las bacterias en dos grupos: Gram
positivos y Gram negativas. Al colocar los agentes como cristal violeta o violeta
de genciana y añadirles una solución débil de yodo (lugol), se combinan con
algunos componentes de la célula bacteriana que son retenidos por la membrana
citoplasmática cuando se tratan con alcohol acetona; otros, en cambio liberan
rápidamente el colorante, por lo que no aparecerán a la visión microsocopica.a
no ser quese contratiñeran con algún otro tinte biológico como safranina o
fucsina. Por lo tanto los microorganismos que conservan el cristal violeta o violeta
de genciana se observa de violeta Gram positivo y los que no lo hacen Gram
negativos muestran un color que corresponde al colorante de contraste de color
rosado.
La tinción de Gram requiere cuatro soluciones:
1. Primer colorante. Es un colorante básico que en contacto con las células

cargadas negativamente, reacciona con ellas coloreándolas. El más
utilizado es el cristal violeta o violeta de genciana.
2. Solución mordiente. Fija las tinciones y aumenta la afinidad entre el

colorante y las células. Los mordientes empleados suelen ser sales
metálicas, ácidos o bases, como, por ejemplo, una solución diluida de yodo
o Yodo de Gram.
3. Agente decolorante. Es un disolvente orgánico, por ejemplo, alcohol-

acetona (1:1).
4. Colorante de contraste. Es un colorante básico de distinto color que el

primer colorante, como, por ejemplo, la safranina o fucsina básica. Los dos
grupos bacterianos a los que anteriormente nos referíamos difieren en el
color con el que finalmente aparecen. Las bacterias Gram positivas se
teñirán de azul por el cristal violeta y no perderán esta coloración durante
los pasos sucesivos. Las bacterias Gram negativas perderán la coloración
inicial del cristal violeta en los siguientes pasos y se teñirán de rosa debido
a la safranina. La diferencia está determinada por la composición de su
envoltura celular.
Una de las precauciones al realizar esta tinción es la de trabajar con cultivos en
fase exponencial. De lo contrario se pueden obtener resultados falsos. Por
ejemplo, las bacterias Gram positivas en fase estacionaria pueden aparecer
como Gran negativas.
2. COMPETENCIAS.-
➢ Diferencia bacterias Gram positivas y Gram negativas, a través de la

resolución de problemas
➢ Realiza el manejo con desenvoltura de los microscopios ópticos, a
través de la resolución de problemas.
PORTAOBJETOS 20 PIEZAS
ASAS BACTERIOLÓGICAS 5 PIEZAS
MECHERO BUNSEN POR
MESÓN 4 PIEZAS
COLORANTES DE GRAM 1 KIT
VARILLAS DE TINCIÓN 2 PIEZAS
HISOPOS ESTÉRILES 15 PIEZAS
BAJALENGUAS 10 PIEZAS
MICROSCOPIOS 10 PIEZAS
ACEITE DE INMERSIÓN 5 mL
Preparación de un frotis bacteriano

1. Colocar una pequeña gota de agua en un portaobjetos limpio.
2. Con el asa de siembra previamente flameada transferir una pequeña cantidad

del cultivo bacteriano en medio sólido a la gota. Remover la mezcla hasta
formar una suspensión homogénea y extenderla para facilitar su secado.
Nota: si el material de partida es un cultivo en medio líquido, no es necesario
realizar estos dos primeros pasos. Basta con colocar y extender una muestra
de la suspensión bacteriana directamente sobre el portaobjetos.
3. Esperar hasta que la fina película de líquido se evapore o bien acelerar este
proceso con un ventilador o un secador. No eliminar el líquido calentando el
portaobjetos a la llama pues las células pueden deformarse o romperse.
4. Fijación de las bacterias al vidrio portaobjetos por calor. Pasar tres veces el
portaobjetos por la llama durante unos segundos. Dejar enfriar el portaobjetos
entre los pases.
Pasos de la Tinción Gram
1. Teñir con cristal violeta (1 minuto)
2. Lavar con abundante agua el exceso de colorante.
3. Cubrir con Lugol o solución de yodo (1 minuto)
4. Lavar con agua el exceso de Lugol.
5. Decolorar con alcohol-acetona hasta que la preparación deje de perder color
(unos 30 segundos).
6. Lavar con abundante agua para eliminar el resto del disolvente.
7. Teñir con safranina (1 minuto)
8. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste.
9. Secar la preparación.
10. Examinar al microscopio. Dibujar la morfología y el color que toman los
distintos tipos bacterianos en estudio.
200 minutos
Cálculos de preparación de colorantes
7. CUESTIONARIO.-
1. Cual la utilidad de la tinción de GRAM para el diagnóstico microbiológico
2. ¿Cree Ud., que existen bacterias que no pertenecen a ninguno de los grupos
(Gram positivas o Gram negativas)?.Justifique su respuesta.
3. Que cuidados se debe tomar en cuenta al momento de elegir el cultivo

bacteriano.
4. Que cuidados se debe tomar en cuenta al realizar una tinción de GRAM
5. Cite 3 medios de transporte y cual su utilidad
6. Cite cuales son los componentes de los reactivos y las soluciones y como se
prepara.
Práctica No. 6
TINCION ACIDO ALCOHOL RESISTENTE
La mayoría de las eubactacterias se encuentran englobadas en dos grandes

grupos según la tinción de Gram; sin embargo, algunas bacterias de los grupos
Micobacteria y Actinomicetos no puede ser clasificado por aquella tinción. Para
poder observar y diferenciar con detalle estos grupos bacterianos. Robert Koch
ideó una tinción que fue denominada como tinción para bacilos alcohol acido
resistente. En la actualizad la técnica más utilizada es una modificación de la
original, que recibió el nombre de tinción de Ziehl Neelsen
Fundamento
Los bacilos alcohol acido resistentes son teñidos fucsina fenicada, retienen el
colorante y no se decoloran por acción de los ácidos, se tiñen de color rosado,
los no ácidoresistentes se tiñen con el colorante de contraste de color azul.
2. COMPETENCIAS.-
➢ Estudia la morfología y la capacidad tintorial de las bacterias ácido
alcohol resistente.
➢ Comprueba la capacidad de discriminar esta bacteria en una muestra
contaminada.
COLORANTES DE ZIEHL
2 NELSSEN 1 KIT
3 PINZAS ANATÓMICAS 5 PIEZAS
MECHERO BUNSEN POR
4 MESÓN 4 PIEZAS
5 MICROSCOPIOS 10 PIEZAS
6 ACEITE DE INMERSIÓN 5 mL
TAMAÑO
7 PAPEL FILTRO 1 HOJA OFICIO
8 MECHERO DE ALCOHOL 2 PIEZAS
1. Preparar un frotis de los microorganismos a observar
2. Cubrir completamente con fucsina fenicada
3. Calentar la preparación cuidadosamente en un mechero Bunsen, sin que

hierva la muestra, durante 5 minutos
Nota: añadir más fucsina fenicada ésta se evapora; la preparación no
debe quedar seca en ningún momento.
4. Lavar con abundante agua el exceso de colorante.
5. Decolorar con la solución ácido-alcohol hasta que la muestra adopte un

color rosa claro (unos 30 segundos).
6. Lavar con agua para detener la decoloración.
7. Teñir con azul de metileno (1 minuto)
8. Lavar con agua el exceso de colorante.
9. Secar la preparación
10. Examinar al microscopio. Anotar las diferencias existentes entre los dos
grupos bacterianos.
200 minutos
Cálculos de dilución de porcentaje
7. CUESTIONARIO.-
1. ¿Por qué es necesario que la muestra no hierva durante la tinción fucsina

y como actúa la carbofucsina?
2. Cite las muestras empleadas para realizar una tinción de Zielh
3. Cuál es el colorante de contraste
4. Las bacterias acido alcohol resistentes de qué color se teñirán?
5. Cite como se prepara los reactivos.

Práctica No. 7
ESTERILIZACION Y DESINFECCIÓN
La esterilización puede definirse como la destrucción y eliminación de todos los

microorganismos incluyendo las esporas generalmente por métodos físicos.
Dicho de otro modo: Carente de vida y una técnica estéril significa, el uso o
transferencia de materiales sin introducir ningún organismo extraño. Tome en
cuenta además que en el laboratorio de Microbiología, el uso de términos como
técnica aséptica condiciones asépticas se usa como sinónimos de estéril.
La desinfección destruye solo formas vegetativas y no esporas, generalmente por
substancias químicas.
2. COMPETENCIAS.-
➢ Conoce los diferentes tipos de esterilización.
➢ Esteriliza diversos materiales de uso corriente en el laboratorio.
Aplica los diferentes agentes químicos en un proceso de desinfección

1 AUTOCLAVE 1 EQUIPO
MECHEROS BUNSEN EN CADA
2 MESON 4 PIEZAS
3 ESTUFA DE ESTERILZACIÓN 1 EQUIPO
5 SOLUCIÓN DE LUGOL 10 mL
SOLUCIÓN DE LAVANDINA AL CANTIDAD
6 1% NECESARIA
7 ALCOHOL EN GEL 50 mL
8 CAJAS PETRI 20 CAJAS
9 PAPEL ALUMINIO 1 ROLLO
METODOS DE ESTERILIZACIÓN
Esterilización por calor seco:
- Por simple flameado; para esterilizar agujas, espátulas bocas de tubos de
ensayo, matraces, etc. En el caso de un asa de inoculación, colocar este en
el centro de la llama azul del mechero, con un ángulo de 90 ºC
aproximadamente, dejar que el asa llegue al rojo vivo y luego dejar enfriar
dentro del área de esterilización.
- Por medio de aire caliente; En este caso se hace uso de los hornos
bacteriológicos, donde se esteriliza vidriería en general. Los cuales se colocan
en cilindros ó cajas metálicas que se colocan en el horno por espacio de dos
a tres horas de 170 a 180ºC, después de transcurrido ese tiempo apagar el
aparato y sacar el material cuando la temperatura interior esté a 40ºC ó
menos. Tampoco abrir la puerta mientras el horno esté a altas temperaturas,
porque al contacto con el aire frío, los materiales de vidrio pueden romperse.
Esterilización por calor húmedo:
- Por ebullición con agua; Este método tiene el inconveniente de que a 1

atmósfera de presión el agua hierve a 100ºC y aún más, pero en nuestro
medio el agua hierve a 92ºC; este factor hace que no nos asegure una perfecta
esterilización. Sin embargo por un tiempo mayor a 15 minutos pueden
esterilizarse jeringas, pinzas, etc.
- Por el vapor de agua a presión; Se utiliza las llamadas autoclaves, donde se

esterilizan los medios de cultivo, y aquellos materiales que no toleran el calor
seco como delantales, guantes de goma, etc., Para ello tomar en cuenta lo
siguiente:
o Que los materiales estén convenientemente preparados, en lo posible
use papel kraft para evitar el humedecimiento del material.
o Que haya suficiente espacio entre los materiales para asegurar una libre
circulación de aire.
o Los recipientes con contenido no deben exceder de las 2/3 partes del
volumen del frasco, para evitar rebalses del contenido por una ebullición
violenta.
o La esterilización de los materiales limpios y sucios deben efectuarse por
separado, nunca juntos.
o Antes de colocar en funcionamiento el aparato, verificar que el nivel del
agua
esté aproximadamente en el nivel medio.
o Cerrar herméticamente el aparato o Que la temperatura llegue a 121ºC
y una atmósfera de presión y sólo a partir de este momento controlar 15
minutos.
o Al cabo de ese tiempo apagar el aparato y dejar que la presión llegue a
cero, (puede descompresiones manualmente, pero teniendo el cuidado
de no hacerlo violentamente, sino los frascos con contenido pueden
llegar a ebullición y rebalsar), para extraer el material esterilizado.
o Por el vapor de agua sin presión (vapor fluente; en este caso se puede
utilizar el autoclave, manteniendo la espita (tapa) abierta.
o Se esterilizan por este método aquellas sustancias que se destruyen a
elevadas temperaturas, como por ejemplo medios de cultivo
azucarados y productos poco contaminados.
Filtración:
o Este método se basa en el paso de líquidos a través de sustancias
porosas ó membranas de celulosa, que retienen a los microorganismos.
o Se emplean principalmente para eliminación de bacterias de los sueros
líquidos asépticos, extractos de tejidos y soluciones de hidratos de
carbono.
o No se aconseja esterilizar líquidos turbios ó viscosos.
o Para la presente práctica el alumno usará una membrana de celulosa
de 0,22 micrones de porosidad.
Radiaciones ultravioleta:
o Estas ejercen efectos letales y mutagénicos en las bacterias,
presentando su mayor efectividad como agente bactericida alrededor
de 2600 Armstrong de longitud de onda de la región espectral. o Se
puede esterilizar cajas petri no autoclavables por espacio de 15 minutos.
o Cabe aclarar que este método presenta dificultades técnicas.
o Evite que el operador ó alumno se exponga a la radiación.
METODOS QUIMICOS
Para la esterilización de un ambiente cerrado use formol con una exposición de
un día (Hágalo en ausencia del personal).
El formol también puede ser usado para esterilizar material contaminado,
contenidos en recipientes no autoclavables.
Las soluciones en base a cloro también pueden ser usados con el mismo
propósito que el anterior caso.
También la solución de fenol al 5 % puede ser usado como agente bactericida
para limpiar superficies como mesones de trabajo.
Llenar en el siguiente cuadro lo que se efectuó en la práctica.
MÉTODO DE TIEMPO Y/O TIPO DE EFECTO SOBRE LOS

ESTERILIZACIÓN TEMPERATURA MATERIAL MICROORGANISMOS
DE
EXPOSICIÓN
Autoclave
Aire caliente
Flama directa
Ebullición
Pasteurización
200 minutos
No se aplica
7. CUESTIONARIO.-
1. Indique como se puede verificar si el material de trabajo, como también los

medios de cultivo están realmente estériles.
2. Investigue en que consiste la tindalización.

3. El metanol también es un químico que se usa para la esterilización
especialmente de material de acero inoxidable para uso de campo.
Averigüé el proceso y las condiciones de esterilización.
4. Que diferencias existen entre los términos bactericida, y bacteriostático.

Que diferencias existen entre: estéril, desinfectado y aséptico
Práctica No. 8
MEDIOS DE CULTIVO Y ALMACENAJE
Los métodos de laboratorio directos, como la microscopia, proporcionan

información preliminar acerca de las bacterias involucradas en una infección, si
bien por lo común se requiere crecimiento bacteriano para la identificación y
caracterización definitivas.
En el laboratorio los nutrientes e incorporan dentro de los medios de cultivo en el
que desarrollan las bacterias. Si un medio de cultivo cubre los requerimientos de
una célula bacteriana, ésta se multiplicará en cantidades suficientes para permitir
la visualización a simple vista. De hecho, el desarrollo bacteriano después de la
siembra también requiere que los medios sean dispuestos en condiciones
ambientales óptimas.
Ya que algunas bacterias patógenas tienen necesidades nutricionales diferentes,
se desarrollaron diversos tipos de medios de cultivo para su uso en el diagnostico
microbiológico. En el caso de ciertas bacterias las necesidades son relativamente
complejas y para su desarrollo deben utilizarse componentes excepcionales en
los medios. Las bacterias con este tipo de requerimientos se denominan bacterias
exigentes (con requerimientos especiales de cultivo fastidios). A su vez, las
necesidades nutricionales de la mayoría de las bacterias importantes en clínica
son relativamente básicas y sencillas. Estas bacterias son consideradas no
exigentes
FASES DE LOS MEDIOS DE CRECIMIENTO
Los medios de crecimiento son utilizados en dos fases: liquida (caldo) o sólida
(agar). En algunos casos se utiliza un medio bifásico que contiene una fase
líquida y otra sólida.
En los medios líquidos los nutrientes se disuelven en agua y el crecimiento
bacteriano se manifiesta con un cambio en el aspecto del caldo, de límpido a
turbio. La turbidez del caldo se debe a la deflexión de la luz por las bacterias
presentes en los cultivos. Cuanto mayor es el crecimiento bacteriano, mayor es
la turbidez.
Los medios sólidos se elaboran agregando un agente solidificante a los nutrientes
y al agua. La azarosa, el agente solidificante más común, tiene la propiedad
singular de fundirse a temperaturas elevadas (mayores a 95ºC) pero sólo se
vuelve a solidificar después que su temperatura disminuye por debajo de 50ºC.
Los medios se clasifican de acuerdo con su función y uso. En el diagnostico
bacteriológico hay cuatro categorías generales de medios: enriquecimiento,
apoyo, selectivo y diferencial.
Clasificación de los Medios de Cultivo
a. Medios Enriquecidos: Favorece el crecimiento de un determinado tipo
de microorganismo, sin llegar a inhibir totalmente el crecimiento del
resto
Agar Sangre (AS): Permite el crecimiento de Gram (+) y (-) y permite
observar el tipo de hemólisis. Sirve para: Estreptococos, Estafilococos,
Haemophillus influenzae, Gardnerellavaginalis.
Agar Chocolate (AC): Este medio es más rico en nutrientes que el
anterior y resulta adecuado para el cultivo de organismos delicados,
por ejemplo Estreptococos.
Müller Hinton (MH): Es utilizado para antibiogramas porque desarrollan
tanto Gram (+) como (-).
b. Medios Selectivos: Permiten el crecimiento de un determinado tipo de
microorganismos, inhibiendo el desarrollo de los demás
MacConkey (Mac): Útil para Enterobacterias
Medio de Cisteína y Lactosa deficiente en electrolitos (CLDE):
Azul de Metileno (AME): Los tres son selectivos para
Enterobacterias, contienen lactosa y un indicador, por lo tanto
permiten la diferenciación entre gérmenes que fermentan y que no
fermentan la lactosa, una reacción importante para la identificación de
las Enterobacterias.
Salmonella- Shigella (S-S): Para desarrollo de Salmonella o Shigella.
Thayer Martin (TM): Para desarrollo de Neisseria gonorrhoeae y
Neisseria meningitidis.
Agar sangre con Violeta Cristal: Sirve para la diferenciación de
Estreptococos cuando en la muestra pueden existir otros gérmenes.
c. Medios Para Microorganismos Anaerobios:
Caldo de Tioglicolato:
Caldo para Anaerobios delicados (CAD): Ambos medios contienen
agentes reductores que ayudan a mantener el estado anaerobio sirve
para Clostridium.
d. Medios Especiales: Son aquellos en los que se ponen de relieve
propiedades que un determinado tipo de microorganismo posee.
Sabouraud (Sap): Este medio tiene pH bajo que facilita el desarrollo de
hongos e inhibe el desarrollo de la mayoría de las bacterias.
Lowenstein Jensen y Middlebrook: Ambos medios contienen
glicerol y verde malaquita constituyentes que favorecen el crecimiento
de la Micobacterias como el Mycobacterium tuberculosis.
Agar con Tiosulfito, Citrato, Sales Biliares y Sacarosa (TCBS):
Para desarrollo de Vibrio cholerae.
e. Medios de Identificación y/o Pruebas Bioquímicas:
Kligler o TSI (agar triple, azúcar, hierro): Sirve para observar la
fermentación de azúcares y producción de ácido sulfhídrico.
Urea: Para observar la utilización de urea.
Citrato: Para ver la utilización de citrato.
Indol: Para observar el uso de triptófano.
Fenilalanina: Para ver la utilización de fenilalanina.
f. Medios de Transporte:
Stuart: Para transportar las muestras hasta el laboratorio.
2. COMPETENCIAS.-
➢ Aplica la metodología para el crecimiento y aislamiento de todas las

bacterias presentes en una muestra
➢ Prepara adecuadamente medios de cultivo artificiales, a través de la
resolución de problemas
1 AGAR NUTRIENTE 15 gr
2 AGAR EMB 15 gr
3 AGAR MAC CONKEY 15 gr
4 AGAR TSI 5 gr
AGAR CITRATO DE
5 SIMMONS 5 gr
6 MEDIO SIM 5 gr
TUBOS CON TAPA ROSCA
7 DE 15mL 20 PIEZAS
8 PIPETAS DE 10mL 5 PIEZAS
9 GRADILLA 3 PIEZAS
10 CAJAS PETRI DE VIDRIO 20 PIEZAS
FRASCOS SCOTT DE 250
11 mL 5 PIEZAS
12 PROBETAS DE 100mL 5 PIEZAS
13 BALANZA 1 PIEZA
14 ESPÁTULAS GRANDES 5 PIEZAS
15 HORNILLA 1 PIEZA
Casi todos los medios están disponibles en el comercio, listos para usar
en placas de agar o en tubos con caldo. Si no se adquieren en el comercio, el
personal de laboratorio puede preparar los medios sólidos y líquidos
utilizando polvos deshidratados que se reconstituyen con agua
(destilada o desionizada) de acuerdo con las recomendaciones del fabricante.
1. Para preparar medios de cultivo sólidos utilizar Erlenmeyer

en los cuales solamente se ocupe hasta 2/3 del volumen del envase.
2. Disolver una cantidad especificada del medio en polvo, que

habitualmente contiene todos los componentes necesarios, en agua
destilada, de acuerdo a las instrucciones del fabricante.
3. Llevar a ebullición para disolver el polvo, pero deben

seguirse exactamente las instrucciones específicas del
fabricante impresas en los prospectos de los envases.
4. Enfriar el medio de cultivo hasta por lo menos 45ºC y medir el pH del medio
de cultivo.
5. La mayoría de los medios requiere esterilización. El tiempo de
esterilización en la autoclave debe comenzar cuando la temperatura
alcanza los 121ºC y por lo común requiere un mínimo de 15 minutos.
6. Una vez completado el ciclo de esterilización, el agar fundido se deja

enfriar a cerca de 50ºC antes de distribuirse en las placas Petri individuales
(por lo común 25 mL de agar fundido por placa)
7. Si se intenta agregar otros ingredientes (p. ej., suplementos como sangre
de carnero o vitaminas específicas, nutrientes o antibióticos) deben
incorporase cuando el agar fundido se enfrió, justo antes de distribuirlo en
placas.

400 minutos
Registro de la composición de los medios de cultivo empleados en la

práctica.
7. CUESTIONARIO.-
1. ¿Cuáles son las características de los medios de cultivo diferenciales?
2. ¿Cuáles son las características nutricionales que todo medio de cultivo

debe tener?
3. Por qué se coloca solamente hasta 2/3 partes de los envases en los
cuales se esterilizara los medios de cultivo?
4. ¿Cómo verificamos que hemos realizado una adecuada esterilización del

medio de cultivo?
Práctica No. 9
TIPOS DE SIEMBRA
El proceso de cultivos bacterianos implica el uso de medios artificiales y

condiciones de incubación óptimas, para aislar e identificar las etiologías
bacterianas de una infección con tanta rapidez y precisión como fuere posible.
Se entiende por siembra, la operación que consiste en “colocar” a los
microorganismos en un medio adecuado, el cual permite que se desarrollen y
reproduzcan. Esta operación se realiza teniendo en cuenta el tipo de medio y tipo
de siembra que se debe efectuar.
PRECAUCIONES PARA REALIZAR SIEMBRAS BACTERIANAS
1. Efectuar la siembra en ambientes cerrados, evitar corrientes de aire.
2. Trabajar cerca de la llama del mechero.

3. Evitar hablar.
4. Esterilizar a la llama el asa antes y después de realizada la siembra; el

flameado debe hacerse también en la parte del mango cerca al hilo.
5. Flamear la boca de los tubos antes y después de realizada la siembra.

6. Marcar convenientemente los tubos y placas a sembrar.
Existen diferentes tipos de siembras, entre los que se tienen:
- Siembra en profundidad.
- Siembra en superficie.
- Siembra en picada.
- Siembra por emulsión.
Agar inclinado Pruebas

En tubo
Pico de flauta bioquímicas
En superficie
Barrido con hisopo Antibiograma
Agotamiento por Recuento de
En placa
estrías colonias
Siembra con pipeta Aislamiento
Puncion o Pruebas
En tubo
Picadura bioquímicas
En
profundidad
Recuento de
En placa Siembra con pipeta
colonias
2. COMPETENCIAS.-
✓ Realiza diferentes siembras, según el caso requerido a través de la

resolución de problemas que se presentan en el campo de trabajo del
profesional
✓ Evalúa las siembras realizadas
1 ASAS DE PLATINO 5 PIEZAS
2 MECHERO BUNSEN 4 PIEZAS
PREPARADAS
EN LA
PRÁCTICA
3 PLACAS DE AGAR NUTRITIVO 10 PLACAS ANTERIOR
PREPARADAS
EN AL
PRÁCTICA
4 PLACAS DE AGAR MACCONKEY 10 PLACAS ANETRIOR
PREPARADAS
EN AL
PRÁCTICA
5 PLACAS DE EMB 10 PLACAS ANETRIOR
Siembra en profundidad
- Pipetear la muestra (diferentes diluciones), en una caja petri.
- Echar el agar de 10-15 ml, el cual debe estar a una temperatura
entre 40 a 45ºC.
- Mezclar en la forma de un número ocho y circunferencialmente por

lo menos 20 veces.
- Dejar solidificar e incubar. Siembra en superficie
- Con la ayuda del asa de platino, previamente esterilizada, transferir

un poco de la muestra al agar sólido (lugar de descarga).
- Realizar los diferentes tipos de estriaciones, ya sea para un

reaislamiento o para un recuento, de acuerdo a las instrucciones
del profesor.
- Llevar a incubar.
En caso de que la muestra sea liquida:
- Colocar 0,1 ml de la muestra sobre el agar o de las diferentes
diluciones.
- Extender la muestra, con la ayuda de una espátula Drigalski
previamente esterilizada en los sentidos de los radios de una
bicicleta.
- Dejar un momento la placa en reposo y luego llevarlos a incubar.

Siembra en picada
- Esterilizar la aguja de bacteriológica.

- Tomar los tubos, tanto el de la muestra como aquel en el que se
realizará la siembra.
- Destapar y flamear las bocas.

- Recoger la muestra con la aguja y pasarla al medio estéril en línea
recta hasta el fondo, sin tocar las paredes del tubo.
- Desde el fondo trazar una línea continua hasta que se termine el

medio de cultivo.
- Flamear las bocas nuevamente, cerrar e incubar.

Siembra por emulsión
- Con el asa de platino estéril, tomar la muestra de una colonia

aislada.
- Transferirla al tubo con medio líquido en línea recta sin tocar las
paredes.
- Depositar la descarga en la pared del tubo.
- Emulsionar la muestra, rimero con una pequeña gota del medio,
luego con más cantidad hasta que ya no queden vestigios de la
muestra.
- Homogenizar e incubar.
400 minutos
No se aplica
7. CUESTIONARIO.-
1. Indique tres razones principales por las cuáles se deben tomar

precauciones en la siembra de microorganismos.
2. Diferenciar :
-siembra de aislamiento, siembra de re-aislamiento, y siembra de recuento
total de microorganismos.
3. Qué características deben tomarse en cuenta para determinar si sus

aislamientos han sido efectivos?.
4. En el caldo lactosado y caldo verde bilis brillante, como se evidencia el

crecimiento bacteriano.
Práctica No. 10
RECUENTO DE MICROORGANISMOS
DILUCIONES SERIADAS
Frecuentemente las muestras que hay que estudiar tienen un número muy
elevado de microorganismos, por lo que se requiere diluirlas para poder contarlos.
Para ello se realizan diluciones seriadas, que posteriormente se siembran en
placas con medio de cultivo.
Esta técnica de recuento nos permite conocer el número de microorganismos
viables en Microbiología se define como la capacidad del microorganismo para
multiplicarse en un medio sólido formando una colonia. Debemos tener en cuenta
que las condiciones concretas del ensayo pueden limitar la capacidad de
reproducción de algunas de la células viables de la muestra inicial. Es
fundamental procurar que la viabilidad inicial no se vea afectada por el
procedimiento experimental, intentando mantener los microorganismos en las
mismas condiciones ambientales a las que están adaptados. Por tanto, si
trabajamos con una muestra clínica, las diluciones debemos realizarlas en
solución salina, pero, si el recuento lo realizamos a partir de una muestra de agua
corriente, sería más apropiado diluir los microorganismos en agua con un pH
neutro o solución fosfato salina . También es muy importante no aumentar la
carga microbiana inicial, por lo que todas las manipulaciones se realizarán en
condiciones de esterilidad. Aun así, es fundamental recordar que solo vamos a
cuantificar los microorganismos que se multipliquen en las condiciones concretas
del experimento (Temperatura, solvente de las diluciones, medio de cultivo,
atmosfera, etc.).
A diferencia de la técnica de turbidimetría que nos informa sobre todos los
microorganismos presente en la muestra, esta técnica determina sólo
microorganismos viables, aunque proporciona más información (p.ej., el aspecto
de las colonias) y la posibilidad de ampliar el estudio de las colonias hasta su
completa identificación.
La siembra en placa puede ser de dos tipos. Las primera, para aerobios, consiste
en extender por la superficie de la placa previamente solidificada un volumen
conocido procedente de una dilución. La otra técnica consiste en mezclar una
cantidad conocida de una dilución con el medio de cultivo fundido y atemperado,
y posteriormente verterlo en una placa de Petri y dejarlo enfriar. El método de la
extensión en superficie tiene la ventaja adicional de permitir tomar las colonias
para su resiembra en otro medio o para su identificación posterior.
2. COMPETENCIAS.-
➢ Aplica los métodos de siembra, en placa puede ser de dos tipos a
través de la resolución de problemas
➢ Realiza las diluciones más apropiadas de la muestra dependiendo del
tipo de muestra problema.
➢ Calcula el número de UFC/ ml de muestra problema a partir del
recuento de colonias de las placas

1 TUBOS CON TAPA ROSCA 20 PIEZAS
2 PIPETAS GRADUADAS DE 1 mL 10 PIEZAS
3 ALCOHOL AL 96% 100 mL
4 CAJAS PETRI 20 CAJAS
5 PAPEL ALUMINIO 1 ROLLO
6 FRASCO SCOTT DE 250 mL 3 PIEZAS
7 PEPTONA 5 gr
8 BALANZA DE 400 gr 2 PIEZAS
9 PROBETA DE 100mL 2 PIEZAS
10 FRASCO DE VIDRIO DE 500mL 2 PIEZAS
AGAR PARA REUENTO EN
12 PLACA 10 gr
13 ESTUFA DE CULTIVO 1 EQUIPO
MICROPIPETA AUTOMÁTICA DE
14 100 A 1000 µL 2 PIEZAS
1. Tomar 1 ml de la muestra de agua problema con una pipeta estéril y
añadirlo a uno de los tubos con 9 mL de solución salina estéril. Es muy
importante que los volúmenes sean lo más exactos posible.
2. Agitar el tubo para homogenizar totalmente la suspensión. De esta forma,

hemos conseguido diluir la muestra inicial 10 veces (dilución 10 -1).
3. Repetir la misma operación a partir de esta primera dilución para conseguir

la dilución 10-2, y así sucesivamente. Según la carga microbiana que
sospechamos que exista en la muestra problema debemos hacer distinto
número de diluciones.
4. Sembrar al menos dos placas de AN con 0,1 ml de cada una de las tres
últimas diluciones realizadas. Este inóculo debe extenderse de forma
homogénea por toda la superficie de la placa para lo cual utilizaremos el
asa de drigalski impregnándola en alcohol y pasándola por la llama del
mechero.
5. Incubar las placas a 37 ª durante 24 horas.
6. Contar las colonias de las placas que presentan un número entre 30 y 300
colonias. Un número menor de 30 colonias por placa puede suponer la
presencia de errores debido a fluctuaciones estadísticas. Por otro lado, un
número mayor de 300 puede ser excesivo para poder contarlas
exactamente.
7. Calcular con estos datos el número de UFC iniciales. Por ejemplo, si en

la placa correspondiente a la dilución 10-3 hemos contado 200 colonias y
23, colonias en la dilución 10-6 UFC/ mL

400 minutos
Registro de datos de la practica en una hoja de resultados
7. CUESTIONARIO.-
1. Se obtendría el mismo resultado si cuantificáramos las bacterias de
una muestra por turbidimetria o por diluciones seriadas?
2. Aplicando la técnica que se ha descrito en esta práctica, se

sembraron 2 placas de medio de cultivo a partir de las diluciones 10 -4
y 10-5. Tras incubación de las placas a 37 ºC durante 24 horas, no
aparición ninguna colonia ¿Cómo se puede explicar este resultado?.
PRACTICA Nº 11
METODO DE DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO.-
El diagnostico bacteriológico es muy importante dentro de la práctica de la materia de

microbiología general, es importante encontrar el agente etiológico de ciertas
patologías, desde hace mucho tiempo atrás los investigadores empezaron a
encontrar a contribuir con sus conocimientos empleando cada uno de ellos un método
para llegar al diagnóstico bacteriológico.
El hallazgo microbiológico de un agente etiológico se basa en los siguientes pasos
Características morfológicas de los microorganismos
Características del crecimiento y desarrollo del germen
Características fisiologicas del microorganismo
2. COMPETENCIA(S)
➢ Aplica las técnicas adecuadas para la recolección de una muestra de orina.
➢ Realiza el cultivo de la muestra de orina aplicando las técnicas adecuadas
➢ Identifica las características de crecimiento de microorganismos aislado
➢ Aplica las pruebas de identificación de la bacteria aislada
➢ Interpretados resultados de las pruebas bioquímicas de identificación de la bacteria
aislada
1 AGAR EMB 10 gr
2 AGAR DE CLED 10 gr
3 AGAR KLIGER 10 gr
4 AGAR DE CTRATO DE SIMMONS 10 gr
5 AGAR TSI 10 gr
6 MEDIO SIM 5 gr
7 MEDIO MR-VR 5 gr
8 PORTAOBEJTOS 10 PIEZAS
9 CAJAS PETRI 20 PIEZAS
11 MICROSCOPIO 6 PIEZAS
12 COLORANTES DE GRAM 1 KIT
13 FRASCOS SCOTT DE 250 mL 6 PIEZAS
15 ESPÁTULA 2 PIEZAS
16 BALANZA 1 PIEZA
17 PROBETA DE 100mL 2 PIEZAS
18 HORNILLA 1 PIEZA
19 PICETA DE AGUA 2 PIEZAS
20 PAPEL ALUMNIO 1 ROLLO
21 TUBOS DE TAPA ROSCA 30 PIEZAS
22 AGUJA BACTERIOLÓGICA 5 PIEZAS
4. TECNICA O PROCEDIMIENTO
• Recolección de una muestra de orina

• Siembra de la muestra de orina en un medio de cultivo
• Identificación de microorganismo
• Realización de la serie bioquímica para la identificación de la bacteria aislada
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA
400 minutos
6. MEDICION; CALCULOS Y GRAFICOS
El estudiante realizara la lectura de la serie bioquímica
7. CUESTIONARIO.-
Que significa bacteriuria significativa
Porque que se utiliza un asa calibrada para realizar un urocultivo
Porque que son importantes las medidas de asepsia en la recogida de la muestra.
Por que debe procesarse lo antes posible
PRÁCTICA Nº 12
PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LOS AGENTES ANTIMICROBIANOS
(Antibiograma)
Una vez aisladas las bacterias en cultivo puro es posible determinar su sensibilidad o
resistencia a los antibióticos en el laboratorio.
El antibiograma es el conjunto de procedimientos que nos permite determinar la
sensibilidad o la resistencia bacteriana in vitro ante determinados quimioterapicos y/o
antibióticos.
Eso se suele hacer exponiendo una cepa de los organismos sometidos a prueba,
sembrados en una placa de agar, a los antibióticos contenidos en discos de papel de
filtro. Durante la incubación por 18 a 24 horas, los organismos crecen y se multiplican,
y los antibióticos difunden desde los discos e inhiben el crecimiento alrededor del
disco
Esta prueba está basada en la inhibición del crecimiento de un microorganismo en la
superficie de un medio de cultivo inoculado alrededor de un disco de papel de filtro
impregnado con un agente antimicrobiano. El germen aislado se siembra en un medio
de cultivo cuya composición asegura el desarrollo óptimo del microorganismo y no
interfiere con la acción del antibiótico, se pone en contacto con discos de papel de
filtro impregnados con agentes antimicrobianos en concentraciones ya establecidas
y se miden los diámetros de las zonas de inhibición del desarrollo del microorganismo.
Los tamaños de las zonas se comparan con las tablas de referencia llamadas CLSI
(clinical and laboratory standards institute actualizado), y los resultados se registran
como: S (susceptible o sensible), I (intermedio) o R (resistente).
2. COMPETENCIA (S)
✓ Interpreta y analiza la repuesta de los microorganismos a los antimicrobianos a través
de la resolución de problemas en relación con su contexto.
✓ Determina la importancia del antibiograma en el análisis microbiológico y su aplicación
en el tratamiento.
✓ Selecciona en antibiótico más adecuado de acuerdo con los resultados de un
antibiograma, a través de la resolución de problemas en relación con su contexto.
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

1 PLACAS PETRI 10 CAJAS
2 FRASCOS SCOTT DE 250mL 2 PIEZAS
3 ESPÁTULA 2 PIEZAS
4 HORNILLA 1 PIEZA
5 BALANZA 2 PIEZAS
7 PROBETA DE 100mL 1 PIEZA
8 AGAR MULLER HINGTON 15 gr
DISCOS PARA
ANTIBIOGRAMA DE
9 GENTAMICINA 10 DISCOS
10 CIPROFLOCXINA 10 DISCOS
SULFAMETOXAZOL
11 TRIMETOPRIMA 1’ DISCOS
12 NITRIFURANTOÍNA 10 DISCOS
131 TETRACICLINA 10 DISCOS
4 ÁCIDO NALIDÍXICO 10 DISCOS
15 ERITROMICINA 10 DISCOS
16 CEFALEXIMA 10 DISCOS
17 VANCOMICINA 5 DISCOS
18 CLORANFENICOL 5 DISCOS
19 CEFRIAXONA 5 DISCOS
AMOXICILINA/AC.
20 NALIDÍXICO 5 DISCOS
21 CEFOXITINA 5 DISCOS
22 ESTUFA DE CULTVO 1 EQUIPO
MICROPIPETA DE 100 A
23 1000µL 2 PIEZAS
SOLUCIÓN FISIOLÓGICA
24 ESTÉRIL 100 mL
TUBO D ETAPA ROSCA DE 10
25 mL 8 PIEZAS
26 ASA BACTERIOLÓGICAS 3 PIEZAS
PINZA ANATÓMICA DIENTE
27 DE RATÓN 3 PIEZAS
28 HISOPOS ESTÉRILES 10 PIEZAS
Preparación del inóculo:
La cepa se obtiene de la placa original donde se sembró el material problema.
La colonia aislada se suspende en solución fisiológica de manera de obtener
una turbiedad final equivalente al 0,5 de la escala de Mac Farland, es decir, 150
millones de gérmenes por ml
Preparación de la placa:
Antes de la siembra la placa deberá estar a temperatura ambiente.
Siembra en placa:
Por escobilladura: Se distribuye el material uniformemente en tres direcciones,
con hisopo de algodón previamente mojado en el inóculo y eliminado el exceso
de caldo por presión contra las paredes del tubo.
Aplicación de los Discos:
Se los coloca sobre la superficie, oprimiéndolos suavemente contra ella. La
distancia que separe los discos debe ser suficiente para impedir una
superposición de los halos de inhibición, y nunca será inferior a 1,5 cm del borde
de la placa.
Incubación:
Debe ser de 18 a 24 horas a 37 C, colocada la cápsula en posición invertida.
Dependiendo del tipo de bacteria identificada.
Lectura e Interpretación de los Resultados:
Con una regla se miden los halos de inhibición al milímetro más cercano,
recurriéndose luego a la tabla correspondiente para determinar si el germen es
sensible, resistente o intermedio para cada antibiótico. Así cepa sensible es
aquella que, después de ser tratada en el curso de una infección general a las
dosis habituales del antibiótico, responde favorablemente al tratamiento, cepa
intermedia es la que en las mismas condiciones necesita dosis superiores a las
habituales para obtener una respuesta terapéutica adecuada y cepa resistente
es la que en las condiciones antedichas no se obtiene ninguna respuesta
terapéutica.
5. . TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

200 minutos
6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS
Medición de los halos de inhibición y comparación con tablas de referencia
7. CUESTIONARIO.-
Interprete los resultados de los siguientes antibiogramas comparándolos con la tabla
que aparece al final e indique el tratamiento antimicrobiano adecuado:
1. Paciente femenino de 24 años, se solicita urocultivo el cual reporta crecimiento de
Escherichia coli, el antibiograma:
• Trimetoprim y Sulfametoxazol: Resistente
• Ceftriaxona: Sensible
• Ampicilina: Resistente
• Gentamicina: Sensible
• Acido Nalidixico: Sensible
• Amikacina: Sensible
• Nitrofurantoína: Sensible
¿Que antibiótico elige? Debe justificar su elección ( vía de administración, costo,
toxicidad, etc)
GUIAS DE PRÁCTICACIENCIAS DE LA SALUD QUIMICA
LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA
Práctica No. 1
DETERMINACIÓN DE SUCIEDAD

Antes de su adquisición las drogas analizadas e inspeccionadas por las industrias
farmacéuticas para asegurar la alta calidad de las materias primas que se
emplean en sus producciones. La pureza de las drogas depende de la ausencia
de materias extrañas (suciedad).
2. COMPETENCIAS.-
Determina la presencia de suciedad en diferentes muestras vegetales (materia
prima) mediante dos técnicas de laboratorio.
Identifica la materia extraña presente en las muestras vegetales mediante el uso
del microscopio.
1 Percolador 1 pza
Frasco trampa de
2 Wildman(matraz 1 pza
3 Erlenmeyer 250 ml) 1 unidad
4 Microscopios 10 unidades
5 Portaobjetos 20 unidades
6 Cubreobjetos 40 unidades
7 Vidrios reloj pequeños 5 pzas
Vasos de precipitado de
8 100ml 5 pzas
Trabajo en
9 Gotero o cuentagotas 5 pzas equipos de 4
Trabajo en
10 Hornilla 5 pzas equipos de 4
Trabajo en
11 Tapones de corcho 5 pzas equipos de 4
Trabajo en
12 Tapones de goma 5 pzas equipos de 4
Trabajo en
13 Varillas de vidrio 5 pzas equipos de 4
14 Muestra vegetal (droga) 200 gramos
15 Cloroformo 100 Ml
16 Vaselina líquida 100 Ml
17 Pizeta más agua 5 frascos
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO.-
PRIMERA PARTE: SEPARACIÓN DE IMPUREZAS POR SEDIMENTACIÓN
UTILIZANDO EL PERCOLADOR
Se tapa con tapón de corcho el fondo del recipiente (percolador) y se llena hasta
unos 2/3 con cloroformo, se agrega muestra (droga), se agita vigorosamente y
se deja sedimentar. Luego se introduce desde arriba un tapón de corcho con una
varilla metálica, como se observa en la figura 1, quedando las impurezas
aprisionadas entre los dos corchos, las mismas se deben retirar para su examen
microscópico sacando el corcho inferior.
SEGUNDA PARTE: SEPARACIÓN DE IMPUREZAS POR FLOTACIÓN

UTILIZANDO EL FRASCO TRAMPA DE WILDMAN
En el frasco trampa se coloca la muestra (droga en hojas) y se hierve con agua.
Después de enfriar, se llena el frasco casi hasta el cuello con agua, se agregan
25 a 50 mi de nafta o vaselina líquida y se agita vigorosamente con la varilla
metálica unida al tapón de goma (Figura 2a). Elevando el tapón de goma con la
varilla a la posición indicada en B de la figura 2, separándose fácilmente la capa
oleosa que contiene impurezas para su observación microscópica

100 minutos

Utilizando el microscopio determinar que tipo de impurezas contiene la muestra
(droga)
7. CUESTIONARIO.-
1.- Qué características y propiedades posee el cloroformo para haber sido
utilizado en la práctica
2.- Porqué algunos materiales flotan y otros se sedimentan en la práctica?
3.- Porqué se utilizó vaselina en la práctica?
FIGURA 1 FIGURA 2
Práctica No. 2
PLASTOS O PLASTIDIOS
(cloroplastos, cromoplastos y leucoplastos)
En la masa citoplasmática existen diversos orgánulos, entre ellos los plastos, que
se caracterizan por su pigmentación. Hay diversos tipos de plastos y su
clasificación se hace de acuerdo con el material encontrado en su interior. Los
cloroplastos son usualmente verdes debido a los pigmentos de clorofila, los
cromoplastos presentan coloración vanada, conteniendo otros pigmentos; los
plastos incoloros llamados leucoplastos, están representados por los
amiloplastos, oleoplastos y proteoplastos
2. COMPETENCIAS.-
Observa e identifica las diferentes clases de plastos que se caracterizan por su
pigmentación, y esto permite la resolución de problemas que se presentan en el
campo de trabajo
Describe las características de los cloroplastos, cromoplastos y leucoplastos que
se presentan en el campo de trabajo del profesional.

Trabajo en
1 Microscopios 5 unidades equipos de 4
2 Bisturí más hoja 5 pzas
3 Porta y cubreobjetos 20 pzas
4 Cuentagotas 5 unidades
5 Vidrios reloj pequeños 5 unidades
6 Vasos de precipitado 100 ml 5 unidades
7 Pizeta más agua destilada 5 unidades
8 Lugol
Hojas de musgos o algas
9 filamentosas 5 unidades
10 Frutos de locoto 5 unidades
11 Pimentón y tomate 5 unidades
12 Raíz de zanahoria y yuca 5 unidades
13 Tubérculo de papa 5 unidades
Semillas de cereales:
granos de trigo, maíz, arroz,
14 frijol, 5 unidades
15 Banana 5 unidades
Tallos de flor de Navidad,
rayo de oriente, higo o
cualquier otra planta que
16 contenga látex 5 unidades
4. TÉCNICA Ó PROCEDIMIENTO.-
4.1. HOJAS DE MUSGOS Y ALGAS FILAMENTOSAS
En un portaobjetos colocar una gota de agua y dejar bien extendidas unas hojas
de musgo o filamentos de algas, poner el cubreobjetos y observar al microscopio.
4.2. PULPA DE TOMATE Y RAÍZ DE ZANAHORIA
Cortar transversalmente el tomate y con el bisturí o navaja sacar un pequeño
trozo de 1 a 2 mm de grosor de la parte pulposa. Llevar sobre un portaobjetos sin
poner agua, comprimir suavemente la preparación con el cubreobjetos. Observar
al microscopio.
Obtener cortes finos de la zanahoria, colocar entre porta y cubreobjetos con
agua. Observar al microscopio.
4.3. LOCOTO Y PIMENTÓN
Realizar cortes superficiales muy finos del tejido epidérmico del locoto o
pimentón, montar en agua y observar al microscopio.
4.4. SEMILLAS DE LEGUMBRES, CEREALES, TUBÉRCULO DE
PAPA, FRUTO DE PLÁTANO Y LÁTEX DE RAYO DE ORIENTE O HIGO.
Partir una papa y raspar con la punta del bisturí, depositar el producto obtenido
en un portaobjetos, añadir una gota de agua y una gota de lugol, poner el
cubreobjetos y observar al microscopio.
Raspar una semilla de frijol, un grano de trigo, maíz, arroz, etc., y proceder del
mismo modo que con la papa.
Raspar el plátano y proceder igual que en el caso anterior.
Colocar una gota del látex de rayo de oriente o del higo y proceder de la misma
forma que con la papa.
200 minutos.
Para todos los casos dibujar, describir y explicar lo observado.
7. CUESTIONARIO.-
1. Definir lo que son plastos o plastidios.

2. ¿En qué tipo de tejido se encuentran los cloroplastos?
3. Describir la estructura química y anatómica de un cloroplasto.
4. Explicar si los cloroplastos funcionan igual fuera de las células.
5. Explicar la función de los cromoplastos en las plantas e indicar los pigmentos
que contienen.
6. Investigar el posible uso medicinal de los diferentes plastos.
Práctica No. 3
OBTENCIÓN DE ALMIDÓN DE PAPA Y YUCA
El almidón es un polisacárido vegetal, de hecho es el único asimilable por el

cuerpo humano, y por ello es un nutriente que tenemos tan presente en
nuestra dieta, ya que es muy rápido de asimilar y aportan grandes
cantidades de beneficios al organismo como la energía necesaria para poder
hacer frente a las pruebas que se ponen delante nuestro cada día. El almidón
tiene apariencia de polvo blanquecino compuesto por micro partículas que son
las que le dotan del valor biológico que tiene.
El almidón lo contienen muchos alimentos que forman parte importante en
nuestra dieta, de hecho la mayoría de ellos constituyen la base de la pirámide
alimenticia. Entre ellos vamos a destacar los cereales, el arroz, las patatas...
Fuentes de energía necesarias para mantener unos niveles de glucosa en
sangre adecuados, a los que el almidón contribuye en gran medida, ya que
en su composición esta sustancia está formada por partículas de glucosa
que se dividen en dos, la amilosa o glucosa simple y una variedad ramificada
de glucosa que se conoce con el nombre de amilopeptina. Esa cualidad es la
que convierte al almidón en una buena fuente de energía para el organismo.
2. COMPETENCIAS.-
Los estudiantes Realizan una extracción de almidón a partir de la yuca, como
producto orgánico a través de la resolución de problemas

1 Papa, yuca 5 unidades
2 Licuadora 1 unidad
3 Balanza 5 unidades
4 Cuchillo 5 unidades
5 Vasos precipitados 250 ml 5 unidades
6 Embudo tamaño mediano 5 unidades
Cuadrados de
7 Papel filtro 10 cm 5 unidades 10*10cm
8 Varilla de vidrio 5 unidades
9 Espátula 5 unidades
10 Lugol 100 ml
Lavar las papas y las yucas, pelar y pesar (por separado).
Cortar las papas y las yucas en pequeños pedazos y proceder a licuar los
mismos utilizando una licuadora, agregando un poco de agua a medida
que se efectúa la molienda.
Es necesario licuar o moler muy bien para que la lechada sea homogénea,
densa y de partícula lo más fina posible.
Vaciar la lechada (contenido de la licuadora) en un vaso de precipitado,
dejar reposar por lo menos 10 minutos y luego filtrar.
Dejar secar el sólido retenido y pesar.
5. TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRÁCTICA.-

100 MINUTOS

• Comparar el peso inicial y el peso final.
• Comprobar que el sólido obtenido es almidón utilizando unas gotitas de
lugol.
7. CUESTIONARIO.-
1. ¿Qué es el almidón?
2. ¿Qué aplicaciones tiene el almidón en la medicina y en la industria?
Práctica No. 4
EXTRACCIÓN DE ACEITE
1. CONOCIMIENTO TEÒRICO REQUERIDO.-

La extracción es la técnica más empleada para separar un producto orgánico de
una mezcla de reacción o para aislarlo de sus fuentes naturales. Puede definirse
como la separación de un componente de una mezcla por medio de un
disolvente. En la práctica es muy utilizada para separar compuestos orgánicos
de las soluciones o suspensiones acuosas en las que se encuentran.
3. COMPETENCIAS.-
Los estudiantes realizan una extracción de aceite de nueces, como producto
orgánico a través de la resolución de problemas
1 Nueces 12 a 14 Unidades
2 acetona 20 ml
3 Alcohol metílico 20 Ml
4 Mortero 5 unidades
5 Tubos de ensayos grandes 5 Unidades
6 Vidrio de reloj 5 Unidades
7 Papel filtro 10 cm 5 Pzas 10 x10 cm
8 Embudos medianos 5 Unidades
Vasos de precipitación 250
9 ml 5 Unidades
10 Hornillas eléctricas 5 Unidades
a. Colocar dentro de un mortero 12 nueces.
b. Agregar 20 ml de acetona o alcohol metílico.
c. Moler las nueces en el solvente lo más finamente posible, durante
algunos minutos.
d. Luego, verter el líquido en un tubo de ensayo y filtrarlo recogiéndolo
en un vidrio reloj grande o en otro recipiente.
e. Colocar el recipiente o el vidrio reloj sobre un vaso de precipitado con
agua caliente durante 15 minutos.
100 MINUTOS
6.MEDICIÓN, CÁLCULOS Y GRAFICOS.-
Observar atentamente lo que ocurre y explicar.
7.CUESTIONARIO.-
• ¿Qué diferencia existe entre extracción y separación - purificación?

• ¿Qué propiedades tiene la acetona o el alcohol en la experiencia?
• Explicar en qué consiste la destilación fraccionada.
Práctica No. 5
DETECCIÓN DE FLAVONOIDES

Los flavonoides sin ser metabolitos primarios, se encuentran casi en cualquier
vegetal superior, se ubican preferentemente en las vacuolas y por tanto son
hidrofílicos. Para su detección se aplicará uno de los métodos químicos de
laboratorio.
2. COMPETENCIAS.-
Los estudiantes podrán:
- Detectar la presencia de flavonoides en diferentes especies vegetales.
- Reconocer las características de los flavonoides con la aplicación de
métodos químicos de detección.
3.MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.-
Material vegetal: tallos y
hojas de diferentes especies
(al menos 3)
1
2 Metanol 100 Ml
3 Etanol 96% 100 Ml
4 Cloroformo 100 Ml
5 Papel filtro 10 cm 5 pzas 10X10 cm
6 Matraces Erlenmeyer 5 unidades
7 Embudos medianos 5 unidades
Vasos de precipitado 250
8 ml 5 unidades
9 Morteros pequeños 5 unidades
10 Varillas de vidrio 5 unidades
11 Hornilla 5 unidades
Pipeta graduada 10 ml
12 HCL Concentrado 50 ml
13 - Mg CSP
a. Las diferentes especies vegetales se trituran en un mortero por separado

se mezclan con metanol, etanol y finalmente con cloroformo. Esta mezcla
se calienta lentamente durante 5 a 10 minutos, luego la suspensión se
vierte sobre el filtro y se recoge el filtrado.
b. Macerar en un mortero aproximadamente 5 g del material vegetal
finamente
c. picado, pasar a un beaker o erlenmeyer, adicionar suficiente cantidad de
etanol
d. que cubra la muestra; calentar al baño maría durante cinco minutos, enfriar
y
e. filtrar.
f. Tomar un 1 ml del filtrado etanólico en un tubo de ensayo, agregar varias
g. limaduras de magnesio y por la pared del tubo dejar caer lentamente HCl
h. concentrado (37%) la aparición de colores: naranja, rojo, violeta ó rosado,
i. indican que la prueba es positiva (+) para flavonoides.
El docente debe indicar el tiempo de duración de la práctica desde el inicio de la

misma hasta su culminación.
• Observar si hay algún cambio de color en el preparado.
7. CUESTIONARIO.-
• Indicar la estructura general de los flavonoides
• ¿Qué características, propiedades y funciones presentan los flavonoides?
¿Qué propiedades tienen el Mg y HCL y por que se utiliza en esta práctica?
Práctica No. 6
IDENTIFICACIÓN DE ALGUNOS METABOLITOS SECUNDARIOS:

ANTOCIANINAS, TANINOS Y QUINONAS

Las antocianinas constituyen los pigmentos principales de las flores y de las
hojas, sus colores van desde el rojo hasta el azul, son glucósidos de poli
hidroxiflavilio. La biosíntesis de las antocianinas ha sido objeto de muchos
estudios por el interés comercial que representan.
Los taninos son compuestos fenólicos que poseen propiedades astringentes y

antiinflamatorias, por lo tanto, son muy útiles ante diarrea o gastroenteritis.
Además, tienen acción antioxidante que protegen a las células ante los radicales
libres y permiten reducir el riesgo de enfermedades degenerativas, sin embargo,
no debemos abusar de los alimentos ricos en taninos, ya que en cantidades
excesivas, pueden reducir la absorción de nutrientes como el hierro o las
proteínas, y ser causantes de carencias.
Las quinonas son PIGMENTOS ORGÁNICOS que se caracterizan por ciertas

semejanzas estructurales que les proporcionan sus colores brillantes,
normalmente ROJO, AMARILLO o ANARANJADO. Las quinonas existen de
forma natural en plantas, hongos y bacterias, e incluso algunas se encuentran
en los animales, como la vitamina K, que participa en la coagulación sanguínea.
Las quinonas se utilizan en tintes, reveladores fotográficos, medicinas, fungicidas
y otros productos. La mayoría son TÓXICAS.
2. COMPETENCIAS.-
• Realiza la detección de las antocianinas, taninos y quinonas de diferentes
especies vegetales, para la solución de problemas que se presentan en el
campo de trabajo del profesional.
• Describe las características que constituyen los pigmentos principales de
las flores y de las hojas, los taninos y quinonas para la solución de
problemas que se presentan en el campo de trabajo.
Distintas flores y hojas de
colores vistosos, plantas
que contengan taninos y Trabajo en
1 quinonas. 5 Unidades equipos de 4
2 Metanol 100 Ml
3 Etanol 96 % 100 Ml
4 H2S04 al 10% 100 Ml
5 Tolueno 100 Ml
6 Hidróxido de sodio al 5 % 100 Ml
7 Amoníaco al 2% 100 Ml
8 Cloroformo 100 Ml
9 Sales de plomo 100 Gramos
10 H CL al 2% 100 Ml
11 Éter 100 Ml
12 Acido acético 100 Ml
13 Tricloruro férrico al 10% 100 Ml
14 Agua destilada 1000 Ml
16 Matraz Erlenmeyer 250 ml 5 unidades
17 Vasos de precipitado 100ml 5 unidades
18 Vasos pp 100 ml 5 unidades
20 Tubos de ensayo grandes 5 unidades
Gradillas para tubos
21 grandes 5 unidades
22 Papel filtro 10 cm 5 undades 10X10 cm
23 Embudo medianos 5 unidades
24 Goteros 5 unidades
26 Morteros 5 unidades
27 Balanzas 5 pzas
28 Se hará uso de campana 1
ANTOCIANINAS
Moler por separado las distintas flores y hojas y mezclar ya sea con
metanol, etanol o cloroformo, esta mezcla hervir durante 5 a 10 minutos.
Hervir en baño maría y posteriormente filtrar, al filtrado añadir sales de plomo
y después ácido acético.Moler por separado 5 gramos de las distintas flores
con H CL 1% en metanol, esta suspensión trasladar a un matraz Erlenmeyer
o a un vaso deprecipitado y colocar en baño maría, retirar la suspensión, dejar
enfriar y proceder a filtrar, añadir al filtrado éter.
TANINOS
Tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco, macerar en un mortero
hidratando la muestra para facilitar el rompimiento de los tejidos, pasar la muestra
completamente macerada a un matraz y adicionar cantidad suficiente de agua
para cubrir la muestra, calentar en baño maría de 10 a 15 minutos, filtrar en
caliente. Tomar 1 ml del filtrado en un tubo de ensayo y adicionar dos (2) gotas
de solución de tricloruro férrico (FeCL).
QUINONAS
Pesar aproximadamente 0,5 g de material vegetal en polvo en un matraz de 100
ml, adicionar 20 ml de etanol al 95% y calentar en baño maría durante 5 minutos
hasta ebullición para realizar la extracción de la muestra, filtrar en caliente, tomar
5ml del filtrado y adicionar aproximadamente 3 ml de H2SO4 al 10%, calentar en
baño maría, durante 15 minutos hasta ebullición para producir la hidrólisis; enfriar
la muestra y realizar la extracción de las quinonas con 5 ml de tolueno (usar el
tolueno bajo campana extractora) agitar suavemente sin emulsionar, tomar 2ml
de la fase orgánica en un segundo tubo de ensayo, adicionar aproximadamente
1 ml de hidróxido de sodio al 5% en amoníaco al 2%. Luego de agitar se obtiene
un color rojo cereza en la capa acuosa, lo que Indica la presencia de quinonas
en las muestras
300 minutos.
6. MEDICIÓN, CÁLCULOS Y GRÁFICOS.-

Observar si hay cambios de color y presencia de precipitados.
7. CUESTIONARIO.-
1. Investigar los usos de las antocianinas, taninos y quinonas en la industria
alimenticia y medicinal.
2. ¿Qué son los glucósidos?
Práctica No. 7
EXTRACTOS COLOREADOS PROCEDENTES DE FLORES COMO
INDICADORES ACIDOS - BASES.

Los compuestos extraídos de diferentes especies vegetales tienen diferentes
usos tanto en la industria farmacéutica, medicinal y alimenticia. Uno de esos usos
es la aplicación de extractos coloreados como indicadores de ácidos y bases.
2. COMPETENCIAS.-
Realizar la extracción de compuestos coloreados de distintas flores y comprobar
la efectividad de sus propiedades indicadoras frente a distintas sustancias
básicas y acidas.

Trabajo en
equipos de 5
1 Acetona 50 Ml personas
Flores y hojas de colores
brillantes como la "Santa
2 Rita" 100 unidades
4 Etanol 500 Ml
5 Papel filtro 5 Pzas
6 Embudo 5 unidades
7 Gotero 5 unidades
8 Jugo de limón 250 Ml
9 Jugo de naranja 250 Ml
10 Tumbo 10 unidades
11 Jugo de mandarina 250 Ml
12 Vinagre 250 Ml
13 Jugos envasados 1 lata
14 Ácido clorhídrico 100 Ml
Bicarbonato de sodio
15 Hidróxido de sodio 100 gramos
a.Seleccionar flores y hojas de colores brillantes como la "santa Rita"
(Buganvilla sp)
b. Exprimir o moler una de las flores u hojas en un mortero con una mezcla
preparada con 2 ml de acetona y 2 ml de etanol
c. Filtrar y recoger el filtrado
d. Repetir la operación con las otras flores de diferentes colores
e. Poner una mancha de extracto coloreado de flores sobre un papel filtro y
dejarla secar. Colocar sobre la misma una gota de jugo de limón
f. Observar si hay algún cambio de color y explicar.
Realizar el mismo experimento con otros jugos como jugo de naranja, tumbo,
mandarina, vinagre, jugos envasados y ácido clorhídrico
h. Poner un poco del filtrado original sobre otro trozo de papel de filtro, una
vez seco, colocar sobre la mancha bicarbonato de sodio, i. Observar si hay
algún cambio de color y explicar, j. Realizar el mismo experimento con
hidróxido de sodio.

200 MINUTOS.
Para todos los casos observar y detectar si hay algún cambio de color, comparar
con la escala de acidez y basicidad estandarizada y explicar
7.CUESTIONARIO.-
• ¿Qué son los indicadores?

• ¿Qué efecto tendría el indicador universal en todas las soluciones realizadas
en la práctica?
• ¿Qué es el pH?
Práctica No. 8
DETECCIÓN DE SAPONINAS

Se llaman saponinas a un grupo de sustancias glicosídicas que se disuelven en
agua y poseen la propiedad de formar espuma al agitar la solución. Estos
compuestos se aislan de diferentes fuentes vegetales. Las saponinas tienen
diferentes aplicaciones en la preparación de detergentes no alcalinos, fármacos,
agentes espumantes y venenos para peces.
2. COMPETENCIAS.-
- Detectar la presencia de saponinas en diferentes especies vegetales.
Reconocer las características de las saponinas con el método químico aplicado

Material vegetal (hojas de
zarzaparrilla, tomate,
1 pimentón, etc.) 5 Gramos De cada uno
2 Metanol 100 Ml
3 Etanol 96% 100 Ml
4 Cloroformo 100 Ml
5 Papel filtro 10 cm 5 unidades 10X10 cm
6 Matraces Erlenmeyer 5 unidades
8 Embudos 5 unidades
11 Hornilla elctrica 5 unidades
12 Pipeta graduada 10 ml 5 unidades
• Las diferentes especies vegetales se trituran en un mortero por separado
se mezclan con metanol, etanol 96% y finalmente con cloroformo. Esta
mezcla se calienta lentamente durante 5 a 10 minutos, luego la suspensión
se vierte sobre un filtro y se recoge el filtrado.
• Tomar alícuotas de 0,2 mi del filtrado y diluir en un volumen de agua 2

veces mayor y sacudir 30 segundos.
100 minutos.
• Observar y describir cuidadosamente si ocurre algo especial al

agitar el preparado.
• Tomar el tiempo de permanencia de la espuma formada, explicar.
7. CUESTIONARIO.-
• ¿Qué significa la espuma que se forma en el preparado?

• Investigar algunas especies vegetales que contengan saponinas.
• ¿Qué función cumple el metanol, etanol y cloroformo?
Práctica No. 9
DETECCIÓN DE ALCALOIDES
MÉTODO RÁPIDO DE WEBB PARA ALCALOIDES:
Los alcaloides abundan en los tejidos de intensa actividad celular, hojas raíces,
semillas, pero hay variaciones en cuanto a su concentración y naturaleza, de
acuerdo a factores como madurez, suelo, método de cultivo, variaciones
estacionales, etc. Generalmente la presencia de alcaloides se determina
mediante pruebas químicas sobre los extractos ácidos de las plantas. Los
reactivos más frecuentes que pueden ser usados tanto para la detección de
alcaloides por reacciones de color, como para precipitarlos y recuperarlos son:
Dragendorff, Wagner y Meyer.
2. COMPETENCIAS.-
Los estudiantes podrán detectar y reconocer alcaloides en hoja de coca y otras
muestras vegetales.

1 Hojas de coca pulverizadas 10 Gramos
2 HCLaM% 100 Ml
4 Termómetro 5 unidades
5 Hornilla electrica 5 unidades
7 Pipeta graduada 5 unidades
8 Vidrio reloj 5 unidades
9 Papel filtro 5 unidades
Reactivo de Dragendorff,
10 Wagner y Meyer 100 Ml
11 Líquido de Prollius 100 ml
12 Vasos de precipitado 5 unidades
13 Parafilm 20 unidades
Pesar 5 gramos de hoja de coca seca y pulverizada y mezclar con suficiente
HCL al 1 % para formar una suspensión y obtener después unos 2 ml de
filtrado
b. Trasladar la suspensión a un matraz Erlenmeyer o a un vaso de
precipitado y colocar en baño maría a 80 C
c. La mezcla se debe calentar por 4 horas y sacudir periódicamente.
Después se retira la suspensión, se deja enfriar y proceder a filtrar
d. Por separado tomar alícuotas de 0,2 ml del filtrado con volúmenes de 0,1
ml de reactivos de Mayer, Wagner y Dragendorff
MÉTODO LENTO DE WEBB, USANDO LÍQUIDO PROLLIUS PARA

ALCALOIDES:
a.Mezclar 5 gramos de hoja de coca seca y pulverizada con 20 ml de
líquido de Prollius en un matraz el cual se tapa herméticamente con
parafina.
b.Dejar a temperatura ambiente 10 horas y agitar con frecuencia
c. Después filtrar la suspensión y el filtrado mezclar con HCL al 1 %. Luego
tomar alícuotas de 0,2 ml de éste y hacer ensayos con 0,1 ml de
reactivos para alcaloides (Mayer, Wagner y Dragendorff).
200 minutos.
Observar los cambios de color y la presencia de precipitados con los distintos

reactivos, explicar
7. CUESTIONARIO.-
• ¿Qué es un reactivo y qué características y qué propiedades tiene?

• ¿Qué propiedades tienen los alcaloides?
• ¿Qué función cumple el HCL y el líquido de Prollius?
• ¿Por qué la suspensión deber ser calentada?
Práctica No. 10
EXTRACCIÓN CASERA DE PRODUCTOS NATURALES

El conocimiento popular de muchas propiedades curativas de las plantas ha
llevado a la práctica de distintas técnicas de extracción de los principios activos
de las distintas especies vegetales utilizando como vehículos, materiales caseros
y sencillos que se encuentran a mano en cualquier hogar tales como agua,
vaselina o harina, obteniéndose los conocidos mates o infusiones tan utilizados
por todos.
2. COMPETENCIAS.-
- Realiza una investigación de las propiedades curativas de distintas
especies vegetales, a través de la resolución de problemas que se
presentan en el campo de trabajo del profesional.
- Obtiene muestras de las especies vegetales investigadas y
aplicadiferentes técnicas de extracción casera, para la realización de
análisis de datos y posibles estructura
- Elabora distintos preparados, para la solución de problemas que se
presentan en el campo de trabajo del profesional.

Distintas especies vegetales
(investigadas) y semillas de
1 chirimoya 25 unidades
Vasos de precipitado 100 ml
2 5 unidades

6 Cuchillos 5 unidades
7 Espátulas 5 unidades
10 Embudo 5 unidades
11 Papel filtro 5 unidades
13 Vaselina sólida 100 Gramos
14 Lanolina 100 gramos
15 Glicerina 100 Ml
16 Eucaliptol 100 Ml
17 Esencia de almendras 100 Ml
18 Ron de quemar 100 Ml
19 Bórax 100 Gramos
20 Bicarbonato de sodio 100 Gramos
Peróxido de hidrógeno al
21 3% 150 Ml
22 Harina 250 Gramos
23 Sal 100 gramos
4.1. TÉ O MATES
Extraer los principios activos de las plantas a través de tres procesos:
a. Infusión: Hervir agua y verter esta sobre la hierba en un vaso de
precipitado, tapar, dejar reposar por 15 minutos y filtrar.
b. Decocción: Colocar la hierba (hojas y flores) en un vaso de
precipitado, añadir agua fría, hervir durante 10 a 20 minutos, dejar
reposar por más de 10 minutos y filtrar.
c. Tisana: Adicionar la hierba (raíces, rizomas, tallos o semillas) sobre
agua hirviendo, dejar reposar 5 minutos y filtrar.
4.2. MACERACIÓN ACUOSA
Colocar las hierbas en contacto con agua durante 10 o 12 horas, mezclar
y volver a dejar reposar por 24 horas, filtrar.
4.3. POMADAS MEDICINALES
Moler o licuar las hojas y añadir vaselina y lanolina, mezclar y
homogeneizar.
4.4. CREMA BLANQUEADORA DE MANOS
Depositar 30 gramos de lanolina, 20 gramos de glicerina, 10 gramos de bórax, 2
gramos de eucaliptol, 1 gramo de esencia de almendras, en un recipiente.
Revolver con una espátula hasta obtener una mezcla cremosa. Cubrir las manos
y dormir con los guantes puestos.
4.5. PASTA DENTAL

a) Mezclar 1 cucharada de sal, 4 cucharadas de bicarbonato de sodio y 3
cucharadas de peróxido de hidrógeno al 3% y revolver bien hasta que el
preparado adquiera aspecto y consistencia pastosa. Luego agregar las hierbas
aromáticas como salvia, menta, estevia, hierbabuena, etc., las cuales le
otorgarán a la pasta dental casera un aroma y sabor riquísimos.
4.6. CATAPLASMA
Formar una pasta de la planta triturada con agua caliente y harina y
colocar sobre la parte afectada.
4.7. PIOJICIDA
Machacar las semillas de chirimoya en un mortero y luego colocar en un frasco.
Agregar el ron de quemar y agitar bien. Dejar macerar durante una semana.
Aplicar humedeciendo una porción de algodón y frotando todo el cuero cabelludo.
Al día siguiente pasar el peine y recoger los piojos muertos.

300 minutos.

Realizar la investigación y los distintos preparados y aplicar las pruebas
organolépticas.
7. CUESTIONARIO.-
1. Indicar las propiedades y usos medicinales de las plantas investigadas con

las cuales se realizaron los distintos preparados.
2. ¿Qué son los principios activos?
3. ¿Qué son productos naturales?
Práctica No. 11
INCLUSIONES CELULARES LÍQUIDAS Y SÓLIDAS

(inulina y cristales de oxalato de calcio)

El citoplasma de una célula vegetal puede contener acumulación de sustancias
diversas, en general llamadas "inclusiones". Muchas de estas inclusiones son
materiales de reserva que pueden almacenarse en gran cantidad,
particularmente en las células de los órganos acumuladores (tubérculos, bulbos
y semillas).
Las inclusiones de las vacuolas son por lo general productos del metabolismo o
sustancias de reserva en algunos casos. Estas sustancias líquidas o sólidas
pueden aparecer y desaparecer en diferentes períodos de la vida de la célula.
2. COMPETENCIAS.-
Observa y constata la presencia de inulina en forma de cristales esferoidales
de color anaranjado, que se presentan en el campo de trabajo. Identifica los
granos de almidón en las células del látex de diferentes plantas, que se presentan
en el campo de trabajo del profesional
Reconoce las diversas formas de cristales de oxalato de calcio en las diversas
especies vegetales, y esto permite la resolución de problemas en el campo de
trabajo del profesional

1 Microscopios 5 unidades
2 Bisturí más hoja 10 undades
3 Porta y cubreobjetos 20 unidades
5 Vidrios reloj pequeños 10 unidades
7 Glicerina 100 Ml
8 Lugol 100 Ml
9 Alcohol 100 Ml
10 Raíz de dalia o raíz de 10 unidades

diente de león conservada
en alcohol o glicerina (por
unos 10 días)
Plantas (hojas y tallitos) de
11 verdolaga o gongona 10 unidades
Hojas de begonia con sus
12 peciolos 10 unidades
13 Tallo tierno de floripondio 10 unidades
14 Penca de tuna, sábila 10 unidades
4.1. RAÍZ DE DALÍA
Obtener un corte transversal de un pedazo de la raíz de dalia conservada en
alcohol o glicerina (por unos 10 días) montar en agua y observar al microscopio.
4.2. HOJAS DE VERDOLAGA O GONGONA
Realizar un corte superficial del borde de la lámina de la hoja o un corte
transversal del tallito, montar en agua y observar al microscopio.
4.3. PECÍOLO DE HOJAS DE BEGONIA
Realizar un corte transversal muy fino del pecíolo de las hojas de begonia, montar
en agua y observar al microscopio.
4.4. TALLO TIERNO DE FLORIPONDIO
Realizar un corte transversal muy fino de un segmento de tallo, montar en agua
y observar al microscopio.
4.6. PENCA DE TUNA O SÁBILA
Realizar un corte transversal de un trozo de la penca (tallo) de tuna o sábila y
montar en agua. Observar al microscopio.

200 minutos.
Para todos los casos dibujar, describir y explicar detalladamente lo observado.

7. CUESTIONARIO.-
1. ¿Qué papel tienen la presencia de inclusiones en la célula?
2. Señalar los diferentes tipos de cristales de oxalato de calcio que pueden
encontrarse en las células.
3. Químicamente ¿qué son las inulinas?
4. ¿A qué se llaman inclusiones celulares?
5. ¿Todas las células vegetales llevan todas las inclusiones celulares?
Práctica No. 12
GOMAS MUCÍLAGOS Y RESINAS

Las plantas excretan sustancias al exterior como las resinas, o producen
sustancias que acumulan en el interior de los tejidos (mucílagos). Estas
sustancias e sirven a las plantas como protección contra agentes patógenos o
como reservorios de agua, minerales y otras sustancias. En la industria estas
sustancias son utilizadas para fabricar barnices, agares, o excipientes de
medicamentos.
2. COMPETENCIA.-
Los estudiantes podrán identificar las características y diferencias de las gomas,
resinas y mucílagos.

Muestras de distintas
sustancias de excreción y
exudados de diferentes
1 muestras vegetales. 10 muestras
3 Hornillas 10 unidades
6 Vidrios reloj 10 unidades
8 Espátulas 10 unidades
9 Cuchillos 10 unidades
10 Alcohol 200 Ml
11 Metanol 100 ml
12 Acetona 50 Ml
13 Pipetas 10 unidades
- Días previos a las práctica los estudiantes deben investigar sobre
distintas especies vegetales de nuestro medio que presenten resinas,
gomas y mucílagos. También deben investigar que parte de las plantas
presentan éstas sustancias para con precisión extraer las sustancias de
donde correspondan.
- En el laboratorio cada muestra debe ser descrita; color, olor, forma y
deben ser sometida a la acción del agua, alcohol y los otros solventes y
observar si presentan solubilidad. Describir lo observado.
- Cada muestra debe ser llevada a la acción del calor y observar

100 MINUTOS
Observar los cambios ocurridos en las diferentes muestras.
7. CUESTIONARIO.-
• Investigar las propiedades medicinales de las diferentes resinas,
mucílagos y gomas de la práctica.
Práctica No. 13
DETECCIÓN DE ACEITES ESENCIALES

La mayor parte de los olores y aromas característicos que desprenden las
plantas, son originados por la presencia de ciertos terpenos llamados "aceites
esenciales" los cuales son elaborados por el plasma y vertidos en las vacuolas y
secretados al exterior a través de células especiales llamadas glándulas. Los
aceites son altamente volátiles y se evaporan rápidamente de la superficie de los
órganos de las plantas.
2. COMPETENCIAS.-
- Detectar la presencia de aceites esenciales en diferentes especies
vegetales.
- Reconocer las características de los aceites esenciales.
Hojas y cascaras de
diferentes plantas cítricas:
naranjas, mandarinas y
1 limones 100 gramos
4 Vaso precipitado 250 ml 10 unidades
a. Colocar 2 o 3 hojas de las diferentes especies vegetales en un vaso de
precipitado con agua y llevar a hervir.
b. Colocar trozos de las cascaras de las frutas cítricas en un vaso de
precipitado con agua y llevar a hervir.
100 MINUTOS.
Observar si hay incremento de aroma y la formación de gotas de aceite.
7. CUESTIONARIO.-
• ¿Qué función ecológica cumplen los aceites esenciales?
Práctica No. 14
DESTILACIÓN SIMPLE
La destilación simple se utiliza cuando la mezcla de productos líquidos a destilar

contiene únicamente una sustancia volátil, o bien, cuando ésta contiene más de
una sustancia volátil, pero el punto de ebullición del líquido más volátil difiere del
punto de ebullición de los otros componentes en, al menos, 80 ºC.
El resultado final es la destilación de un solo producto, ya sea:
• porque en la mezcla inicial sólo había un componente, o

• porque en la mezcla inicial uno de los componentes era mucho más volátil
que el resto
2. COMPETENCIAS.-
Los estudiantes podrán comprender los principios básicos de la destilación
simple en el área de la farmacognosia

Matraz de destilación de 150
ml o matraz de fondo
1 redondo de 200 mi 10 unidades
2 Soporte universal 10 unidades
3 Tubo refrigerante 1 unidad
4 Pinzas 10 unidades
5 Termómetro 10 unidades
6 matraces colectores 10 unidades
7 Goma (mangueras)
8 Aro y tela de amianto 10 unidades
9 Pipetas graduadas 10 unidades
10 Propipetas 10 unidades
12 Mechero 10 unidades
Vidrio de reloj 10 unidades
Trocitos de plato poroso 200 gramos
Agua 500 Ml
Acetona 35 Ml
Vino tinto 100 ml
PRIMERA PARTE
En un matraz de destilación de 150 ml o en un matraz de fondo redondo
de 200 ml echar 35 ml de agua, 35 ml de acetona y 2 o 3 trocitos de plato
poroso o perlas de ebullición.
Sujetar el matraz de destilación con unas pinzas a un soporte sobre una
rejilla (tela de amianto) colocada sobre un aro.
Montar el resto del aparato como muestra la figura 1.
Para las uniones se pueden utilizar tapones de goma o de corcho.
Se hace pasar a continuación una corriente de agua suave con la entrada
del refrigerante conectando con una goma (manguera) el grifo de agua con
la entrada del refrigerante. Mediante otra goma (manguera) unida a la
salida del refrigerante se conduce el agua al desagüe.
Numerar o etiquetar 5 matraces colectores pequeños para recoger las
siguientes fracciones:
Calentar el matraz de destilación con una llama pequeña de forma que se

mantenga una destilación constante y sin interrupciones, recogiéndose en
el colector una gota de destilado por segundo aproximadamente.
Cuando se llegue a las temperaturas indicadas para cada intervalo, se
cambia rápidamente de colector.
Cuando se alcance la temperatura de 95°C se interrumpe la destilación y
se enfría el matraz de destilación, dejando que el líquido condensado que
puede retener la columna de fraccionamiento caiga de nuevo en el matraz.
SEGUNDA PARTE
- En un matraz de destilación de 150 ml o en un matraz de fondo redondo
de 200 ml colocar 80 ml de vino tinto y 2 o 3 trocitos de plato poroso.
- Luego seguir los mismos pasos que en la primera parte.

100 minutos.
• Con una probeta graduada medir el volumen de cada una de las fracciones.
• La primera fracción es prácticamente acetona pura. Se puede comprobar, si
una pequeña muestra de cada fracción colocada en un vidrio de reloj arde al
acercarle una llama. El olor característico de la acetona es también un
indicador.
• Comparar los resultados.
• Igualmente para el experimento del vino, medir en una probeta graduada el
volumen de la fracción obtenido. Esta fracción es alcohol y se puede
comprobar, si una pequeña muestra colocada en un vidrio de reloj arde al
acercarle una llama. El olor característico del alcohol es también un indicador.
7. CUESTIONARIO.-
1. ¿En qué consiste la destilación fraccionada y al vacio?
2. ¿Qué es el punto de ebullición?
3. ¿Por qué se debe tomar en cuenta el punto de ebullición en la
destilación?
Práctica No. 15
OBTENCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE ACEITE DE ROMERO (DESTILACIÓN

POR ARRASTRE DE VAPOR)

El romero Rosmarinus officinalis L., es una planta aromatizante ampliamente
utilizada en la industria alimenticia. Por otra parte la esencia de romero tiene
propiedades bactericidas y fungicidas. La esencia de romero se extrae con el
método de destilación por arrastre de vapor que logra separar entre el 94 al 96%
del aceite esencial.
2. COMPETENCIAS.-
- Conocer el fundamento del método de destilación por arrastre de vapor.
- Aplicar el arrastre de vapor para obtener e identificar el aceite esencial del
romero.
3. MATERIALES.-
Materia prima: planta de
1 romero 100 Gramos
Equipo para destilación por
2 arrastre de vapor 1 pza
3 Matraz Erlenmeyer 500 ml 1 pza
5 Hornillas 5 unidades
6 Balanzas 5 unidades
La materia prima debe encontrarse en perfecto estado, libre de cualquier plaga
y/o enfermedad para su posterior pesado y acondicionamiento
Selección
En esta etapa se elimina plantas extrañas al romero, tallos gruesos y la tierra que
se pueda encontrar adherida a la planta, seleccionando así las ramas de romero
que sirvan para el proceso.
Pre-tratamiento y secado
El romero puede someterse al secado a temperatura ambiente, en un lugar con
buena ventilación y evitando la luz directa del sol. El romero puede ser utilizado
fresco.
Deshojado
Consiste en la separación de las hojas y tallos de la planta, con la finalidad de
uniformizar la materia prima para el proceso de extracción en el cual solo se
utilizaran las hojas.
Pesado
El pesado se realiza en una balanza de precisión, e la cual se pesara 1kg. De
hojas de romero que posteriormente será colocado en las rejillas del destilador
para la extracción del aceite esencial.
Extracción
El aceite esencial de romero se extrae por medio de la destilación por arrastre
con vapor inerte (figura 1), que al ser introducido reduce la presión parcial de los
componentes volátiles, disminuyendo así la temperatura de destilación, el
correspondiente vapor inerte debe ser inmiscible con el aceite esencial de
romero; comúnmente se suele emplear vapor de agua porque es una materia
prima abundante, de bajo costo, fácilmente separable y puede suministrar el calor
necesario para la vaporización. La destilación por arrastre de vapor logra separar
el 94 a 96% del aceite esencial.
Condensación
EL vapor de agua volatiliza el aceite esencial que se encuentra en las hojas de
romero y junto con este pasa por una tubería a un condensador, el mismo que
viene a ser un intercambiador de tubos paralelos, refrigerado por agua a
temperatura ambiente, por el cambio brusco de temperaturas, la mezcla gaseosa
de agua y aceite se condensa saliendo en estado liquido
Separación
Para recibir los fluidos condensados se utiliza un tanque receptor que opera de
la siguiente manera: Conforme se efectúa la destilación se va recibiendo la
mezcla de aceite y agua en el tanque, como el agua y el aceite tienen diferente
densidad se producirá la siguiente separación quedando el aceite en la parte
superior debido a su menor densidad, mientras que el agua ocupara la parte
inferior; al llenarse este tanque el agua saldrá por un tubo que se encuentra en
la parte inferior para no derramar el aceite. Hay que tener en cuenta que el factor
muy importante en la separación es la temperatura ya que si el condensado está
a temperaturas muy elevadas el aceite y el agua esta propensos a emulsionarse.
Envasado
El aceite esencial de romero se envasara en frascos de vidrio de color caramelo,
bien sellados para evitar el contacto de la luz y el oxígeno.
Almacenamiento
Debe almacenarse en lugares secos y bien ventilados, evitando los rayos solares
directos.
FIGURA 1

100 MINUTOS

Determinar las características del aceite esencial del romero: color, olor, sabor.
Medir la cantidad de aceite esencial obtenido.
7. CUESTIONARIO.-
• Investigar las propiedades medicinales e industriales del aceite de romero
• Investigar el fundamento de la destilación por arrastre de vapor
Práctica No. 16
CROMATOGRAFÍA EN PAPEL COMO TÉCNICA DE SEPARACIÓN

De los métodos más empleados, tanto para la separación como la purificación de
extractos, la cromatografía tiene lugar prioritario. El principio básico de la
cromatografía consiste en una distribución desigual entre 2 fases estacionaria y
móvil de un determinado compuesto. Esto permite separar una mezcla en sus
componentes de acuerdo a sus diferentes distribuciones en un sistema de dos
fases dado.
Uno de los métodos cromatográficos más comunes es la cromatografía en papel
donde la muestra a separar es absorbida sobre el punto de aplicación del soporte:
papel el cual retiene el agua (fase estacionaria), pero se puede saturar con otra
fase estacionaria, antes de permitir el flujo del eluyente: fase móvil.
2. COMPETENCIAS.-
- Conocer el fundamento de la cromatografía en papel.
- Aplicar la técnica de cromatografía en papel para separar pigmentos
vegetales.

1 Hojas y pasto 100 Gramos
3 Acetona 50 ml
4 Tiras de papel filtro 10 unidades 10x10 cm
5 Tubos de ensayo 10 unidades
7 Alcohol 100 ml
8 Benceno 100 ml
a. Juntar algunas hojas y pasto (dejarlas secar si es posible).

b. Romper o cortar las hojas en pequeños trozos y colocarlos en un mortero.
c. Agregar 5 ml de acetona y moler bien, hasta obtener una solución de color verde
oscuro (no agregar mucho solvente por que la solución debe ser lo más
concentrada posible).
d. Tomar una tira de papel de filtro (o cortar) lo suficientemente larga como para
poder suspenderla en un tubo de ensayo sin que llegue a tocar el fondo del
mismo.
e. Emplear un gotero fino y poner una gota de la solución concentrada sobre un
punto de la tira situado a 1 cm por encima del fondo como puede observarse en
la figura 1; agitar con suavidad para que se seque rápidamente. Luego, agregar
otra gota en el mismo lugar; secarla y agregar más gotas, dejando siempre secar
la anterior antes de colocar una nueva, hasta obtener una mancha pequeña y
concentrada de las sustancias coloreadas procedentes de las hojas y el pasto.
f. Seguidamente colocar 1 ml de solvente en un tubo de ensayo.
g. Colocar dentro del tubo de ensayo la tira de papel absorbente con su extremidad
apenas sumergida en el solvente y con la mancha, bien por encima del nivel de
éste como puede apreciarse también en la figura 1.
h. Repetir la experiencia reemplazando la acetona por alcohol y después con
benceno.

100 minutos.
Observar la marcha del cromatograma, fijándose la posición que van
ocupando los distintos pigmentos, explicar.
7.CUESTIONARIO.-
• Investigar con más detalle en que consiste la cromatografía en papel
• Explicar los términos: absorbente, soporte y eluyente
• Explicar qué función cumple el papel filtro

Práctica No. 17
CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN

Técnica de análisis que consiste en separar las substancias disueltas en una
mezcla por absorción o concentración selectiva, de forma que produce manchas
de diferente color en ella.
La cromatografía es un método de análisis químico basado en la separación por

métodos de absorción de los componentes de una mezcla fue descubierto en
1909, por el botánico M. Tswestt, que utilizo los principios de la absorción
selectiva para separar los pigmentos fuertemente coloreados de las hojas de las
plantas. El nombre se sigue empleando, aunque aplicado también a substancias
incoloras.
El método se fundamenta en poner en contacto dos fases o componentes

mutuamente inmiscibles, que no reaccionen químicamente, una de las cuales es
móvil y la otra estacionaria. La fase estacionaria, un liquido un sólido o un gel,
esta contenida en una probeta de largo cuello(llamada colector), formando una
columna. La fase móvil consiste en una disolución de material que se desea
analizar en una disolvente apropiado que no se absorba a la fase estacionaria. A
medida que la fase móvil pasa a través de la fase estacionaria, se va produciendo
una absorción selectiva: aquellos componentes de la fase móvil que muestren
mayor afinidad de absorción con la fase estacionaria quedaran retenidos en las
capas superiores de la columna, y aquellos que muestren menor afinidad se
absorberán mas tarde, mas abajo en la columna. El resultado es una columna
graduada o cromatograma en donde cada especie quimica se ha absorbido en
una capa concreta. Estas capas reciben el nombre de platos.
Entre los materiales que se utilizan como absorbentes se encuentran la alúmina

y la sílice, tanto en estado pulverulento como en diversos geles. Cuando la fase
estacionaria la forman líquidos, la columna resultado, se puede a su vez utilizar
para hacer otras cromatografías, proceso que se denomina partición
cromatografía.
2. COMPETENCIAS.-
- Conocer el fundamento de la cromatografía de adsorción
- Aplicar la técnica de cromatografía de adsorción para separar
pigmentos vegetales.
1 Naranja de metilo 50 Ml
2 Azul de metileno 50 ml
3 Éter de petróleo 100 ml
4 Benceno Etanol 100 ml
Columna de alúmina
5 (AI203) 1 pza
6 Tubo de vidrio vertical 1 pza
7 Depósito para la solución 1 pza
8 Depósito para la solución 1 pza
9 Matraz Erlenmeyer 500 ml 1 pza
10 Soporte universal 1 pza
11 Algodón o lana de vidrio 1 pza
♦ Preparar una solución de partes ¡guales del naranja de metilo y azul de metileno
y disolverla con éter de petróleo
♦ Hacer pasar la solución a través de la columna de alumina AI203 figura 1.
♦ Interrumpir la adición de solución y pasar a través de la columna el benceno
puro hasta que comiencen a separarse los colorantes. Para la extracción o
elusión utilizar etanol.
♦ Para llevar la mezcla de compuestos a la columna se utiliza un disolvente poco
polar (éter de petróleo); para el desarrollo del cromatograma, un disolvente algo
polar (benceno), para la elusión de los productos adsorbidos un disolvente más
polar todavía (etanol).
5.TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA.-

200 minutos.
6.MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS.-
Observar el desarrollo del cromatograma, separar los colorantes y explicar el

proceso.
7.CUESTIONARIO.-
1. ¿Qué es la cromatografía de adsorción?

2. ¿Qué diferencia existe entre adsorción y absorción?
3. ¿Qué factores deben tomarse en cuenta en la elección de un absorbente?
4. ¿Qué es la polaridad de un disolvente y que propiedad le brinda?
UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA: BIOQUÍMICA Y FARMACIA
GUÍAS PRÁCTICA DE FARMACOGNOSIA
DOCENTE: Lic. Patricia Rojas Navi
Cochabamba, Bolivia
GUIAS DE PRÁCTICA CIENCIAS DE LA SALUD - QUIMICA
Código de registro:RE-10-LAB-378 Versión 2.0
LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO
Práctica No. 1
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES, NORMAS DE BIOSEGURIDAD

ROTULACION DE REACTIVOS, MANEJO DE BALANZAS EN EL
En análisis cualitativo y en general en todo análisis químico, es necesaria e

importante la preparación de soluciones, debido a que la mayoría de las técnicas
de análisis están basadas en reacciones en medio líquido. Para esto el alumno
deberá tener conocimientos básicos de: concepto de solución, unidades de
concentración de soluciones, preparación de soluciones, etc.
2. COMPETENCIAS.-
- El alumno será capaz de realizar cálculos necesarios para la preparación

de soluciones.
- En base a los cálculos realizados, el alumno podrá preparar las soluciones
requeridas en la práctica.
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS. –

Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
1 Pipetas de 5 y 10 mL 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
2 Peras 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
Cantidad solicitada para 25
estudiantes , para cada grupo de la
3 Propipetas 6 asignatura a-1, a-2.
4 Vasos de precipitado 100, 250, 500 ml 8 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
5 Matraces aforados 50 ml 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
6 Vidrio de reloj 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
7 Espátulas 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
8 Probetas de 100 y 250 ml 8 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
9 Goteros 10 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
Micropipetas Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
10 3 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
11 Picetas 4 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
12 Puntas para micro pipetas 40 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
13 Embudos 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
14 Varillas 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
Papel filtro varios Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
16 Pinzas de madera 10 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
17 Frascos de orina estéril 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
Cola de zorro Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
19 Morteros 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
20 Centrifugadora 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
21 Jeringas descartables 5ml 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
22 Algodón torundas 10 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
23 Balanza analítica 3 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
24 Balanza semianalitica 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
INSUMOS

1 HCl 5 ml 1 asignatura a-1, a-2
2 H2SO4 5ml 1 asignatura a-1, a-2
3 NaOH 5 gr 1 asignatura a-1, a-2
4 NaCl 5 gr 1 asignatura a-1, a-2
5 Lugol 15 ml 1 asignatura a-1, a-2
6 Permanganato de potasio 15 ml 1 asignatura a-1, a-2
7 Etanol 70% 15 ml 1 asignatura a-1, a-2
8 Ácido acético 15 ml 1 asignatura a-1, a-2
10
11
12
13
- De acuerdo a las indicaciones del docente, realizar los cálculos de las

soluciones indicadas.
- Pesar (en el caso de sólidos) ó medir (en el caso de líquidos) la cantidad
de soluto necesario.
- Agregar el soluto al material de vidrio adecuado y aforar con agua
destilada hasta el volumen solicitado por el docente.
- Colocar en el envase de la solución datos como nombre de la solución,
concentración, nombre de la persona que lo realizo y fecha.
El tiempo de duración de la práctica es de 150 min.

Presentar las concentraciones de las soluciones preparadas en la práctica en:

Concentración Molar: M
Concentración Normal: N
Concentración molal: m
% en peso
7. CUESTIONARIO.-
1. ¿Cuál es la importancia de la preparación de soluciones en la asignatura?

2. ¿Cuáles son las unidades de concentración físicas y químicas de las
soluciones?
Práctica No. 2
DETERMINACIÓN DE pH DE ALGUNAS SOLUCIONES Y COMPARACIÓN

DE LAS MISMAS
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO. -
El pH es una medida indirecta de la concentración de iones hidrogeno en una

determinada solución. Muchas reacciones químicas y bioquímicas se producen
a valores específicos o en rangos determinados de pH, por lo cual es de
importancia la medida de este parámetro.
La medida del pH puede realizarse a través de mediciones potenciométricas
(peachimetro) y por cambios de coloración de los compuestos (papel tornasol,
indicadores químicos).
El estudiante deberá ser capaz de medir el nivel pH que producirá una solución
de un compuesto determinado.
2. COMPETENCIAS. -
- El alumno aprenderá el concepto de pH, las diferentes formas de medición

y se familiarizará con equipos y materiales necesarios para la medición de
este parámetro.
- Por las características del compuesto, el alumno podrá predecir el nivel de
pH de la solución que obtendrá a partir de esta.
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS. –

Cantidad solicitada para 25 estudiantes,
para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
25 Tubos de ensayo 30
26 Gradillas de metal o madera 4 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
27 Papel tornasol , tiras de Ph 15

28
Estufas y rejillas de amianto 4
29 Pchmetro 2
31 Balanza analítica 3 Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,

para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
INSUMOS


1 HCl 5 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
2 H2SO4 5ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
3 NaOH 5 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
4 NaCl 5 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
5 Lugol 15 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
6 Permanganato de potasio 15 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
7 Etanol 70% 15 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
8 Ácido acético 15 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
9 NH4 CL 10 ml 1
10 Fenoftaleina 2 ml 1
11 Naranja de metilo 2 ml 1
12 Rojo de bromo cresol 2 ml 1
13
- De acuerdo a las indicaciones del docente, realizar los cálculos de las

soluciones indicadas.
- Pesar (en el caso de sólidos) ó medir (en el caso de líquidos) la cantidad
de soluto necesario.
- Agregar el soluto al material de vidrio adecuado y aforar con agua
destilada hasta el volumen solicitado por el docente.
- Colocar en el envase de la solución datos como nombre de la solución,
concentración, nombre de la persona que lo realizo y fecha.
- De una cantidad necesaria de la solución proceder a la medición del pH
de la misma usando el peachimetro, anotar el valor.
- A esta misma cantidad de solución medir el pH con ayuda del papel
tornasol, anotar el valor.
- Colocar la solución en tubos de ensayo, adicionar 2 a 3 gotas de los
indicadores químicos y observar.

La fórmula del pH es:

pH = - log([H+]
A partir de esta se despeja la concentración de iones hidrogeno como:
[H+] = 10-pH
7. CUESTIONARIO.-
1. ¿Por qué la solución del acetato de sodio presenta un pH básico?

Realice las reacciones respectivas. Estime el valor del pH en forma
teórica a partir del equilibrio acido-base de este compuesto.
2. ¿Por qué la solución del cloruro de amonio presenta un pH ácido?
Realice las reacciones respectivas. Estime el valor del pH en forma
teórica a partir del equilibrio acido-base de este compuesto.
Práctica No. 3
VERACIDAD DE LAS MEDICIONES Y CALIBRACIÓN DE MATERIAL DE

VIDRIO
En el análisis químico los datos están constituidos por medidas de propiedades

como peso, volumen, densidad, conductividad eléctrica o absorción de energía
radiante. Después de realizadas las medidas debe estudiarse la veracidad de
estas con respecto al valor real de la medida, que en la práctica es desconocido,
debido a este motivo, los datos deben ser tratados estadísticamente, de modo de
obtener un valor central y el error que contemplan estos.
Los valores centrales más utilizados son: Media aritmética, Moda y la Mediana.
El error de la determinación es obtenido a través de las desviaciones presentadas
por los datos con respecto a algún valor central. El error dependerá
principalmente del número de datos y de la precisión con la que son obtenidos.
El estudiante deberá saber diferenciar los conceptos de precisión y exactitud,

además, de tener en cuenta los diferentes tipos de errores, como los errores
sistemáticos y los accidentales.
4. COMPETENCIAS.-
- El alumno aprenderá el procedimiento de la calibración de materiales

volumétricos de vidrio del laboratorio, familiarizándose con la obtención de
datos de laboratorio y percibiendo las diferentes fuentes de error en la
determinación de estos.
- Mediante herramientas estadísticas los datos obtenidos en el laboratorio
serán tratados para que representen los resultados del análisis.
5. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS. -

Termómetros Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
Buretas 25 ml Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
Soporte para buretas Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
19 Pinzas para soporte 3 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
3 Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
20 Balanza semianalitica para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
Balanza analítica

- Pesar un vaso de precipitado cuyas paredes estén perfectamente secas,

con una precisión de +/- 1mg.
- Cargar el material volumétrico a calibrar con agua destilada y escurrir el
contenido en el vaso de precipitados.
- Pesar el vaso de precipitados con el agua que se ha adicionado.
- Repetir esta operación entre 10 a 20 veces (dependiendo de la capacidad
del vaso y de la balanza utilizada).
- Leer la temperatura del agua y con ayuda de una tabla termodinámica,
determinar la densidad del agua pura correspondiente a esta temperatura.

A partir de los datos de masa del agua, determinado por diferencia de pesos entre
cada adición, y la densidad del agua pura obtenida de las tablas, calcular el
volumen del material de vidrio.
Con estos datos determinar:
- La media aritmética de los datos;
- El valor de la mediana;
- Las desviaciones de absolutas de los datos;
- La desviación estándar;
- La varianza.
9. CUESTIONARIO.-
1. En la determinación de cloruros de una muestra de KCl se han obtenido

los siguientes resultados, en términos de % de cloro:
47.48; 47.56; 47.50; 47.62; 48.25
Determine con los datos de esta experiencia:
- La media aritmética de los datos;
- El valor de la mediana;
- Las desviaciones de absolutas de los datos;
- La desviación estándar;
- La varianza.
Práctica No. 4
MARCHA ANALÍTICA DE CATIONES
Para propósitos de análisis cualitativo sistemático, los cationes se dividen en

cinco grupos, sobre la base de su comportamiento frente a ciertos reactivos.
Mediante el uso de los llamados “reactivos de grupo” se puede decidir sobre la
presencia o ausencia de grupos de cationes y además, separar estos grupos para
un examen más profundo.
Los reactivos que se usan para la clasificación de los cationes más comunes son
el ácido clorhídrico, el sulfuro de hidrogeno, el sulfuro de amonio y el carbonato
de amonio. La clasificación se basa en que un catión reacciona con estos
reactivos mediante la formación o no formación de precipitados. Por lo tanto se
puede decir que la clasificación se basa en las diferencia de las solubilidades de
sus cloruros, sulfuros o carbonatos.
Los cinco grupos de cationes y las características de estos son las siguientes:
Grupo1: Los precipitados de este grupo forman precipitados con el ácido

clorhídrico diluido. Los iones de este grupo son el plomo, mercurio (I) y la plata.
Grupo2: Los cationes de este grupo no reaccionan con el ácido clorhídrico

diluido, pero forman precipitados con el sulfuro de hidrogeno en un medio ácido
mineral diluido. Los iones de este grupo son: mercurio (II), cobre, bismuto,
cadmio, arsénico (III y V), antimonio (III y V), estaño (II y IV). Los primeros cuatro
forman el subgrupo IIa que son insolubles en poli-sulfuro de amonio y los otros
seis iones que forman el subgrupo IIb son solubles en poli-sulfuro de amonio.
Grupo3: los cationes de este grupo no reaccionan con el ácido clorhídrico diluido
ni con el sulfuro de hidrogeno en medio acido mineral diluido. Sin embrago,
formar precipitados con el sulfuro de amonio en un medio neutro o amoniacal.
Los cationes de este grupo son: cobalto(II), niquel(II), hierro(II y III), cromo(III),
aluminio, zinc y manganeso(II).
Grupo4: los cationes de este grupo no reaccionan con los reactivos de los grupos
1,2 y 3. Forman precipitados con carbonato de amonio en presencia de cloruro
de amonio en medio neutro o ligeramente ácido. Los cationes de este grupo son:
calcio, estroncio y bario.
Grupo5: los cationes comunes que no reaccionan que no reaccionan con los
reactivos de los grupos previos, forman el último grupo de cationes, que incluyen
a los iones magnesio, sodio, potasio, amonio, litio e hidrogeno.
Propiedades del ion Plata: la plata es un metal blanco, maleable y dúctil. Tiene
densidad alta y funde a 960.5ºC. es insoluble en ácido clorhídrico, ácido sulfúrico
diluido (2M) o ácido nítrico diluido (2M). Se disuelve en ácido nítrico más
concentrado (>2M) y en ácido sulfúrico concentrado (>2M) y caliente.
La plata esta en soluciones en forma de iones monovalentes que son incoloros.
Los compuestos de plata (I) son inestables, pero juegan un papel importante en
los procesos de oxidación-reducción catalizados por plata. El nitrato de plata es
fácilmente soluble en agua y el sulfato de plata menos soluble. Todos los otros
compuestos de plata son prácticamente insolubles, con la excepción de los
complejos. Los haluros de plata son sensibles a la luz, estas características son
ampliamente utilizadas en fotografías.
2. COMPETENCIAS.-
- Se estudiara a los diferentes cationes según la clasificación por grupos,

estudiándose en primera instancia a los cationes del primer grupo,
empezando por el ion plata.
- Se determinaran los cambios físicos ocurridos al ion plata cuando
reaccione con los diferentes reactivos.
3 Propipetas 6 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.


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29 Pchmetro 2

INSUMOS

Lugol Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
5 15 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2

9 TINTURA DE MERCURIO 10 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
11 K2CrO4 5gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
KCN Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
12 5gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
NaCl Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
13 5 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
LUGOL Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
15 NH3 5 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
16 KI 5 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
17 AgNO3 5 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
18 CaCO3 5 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
19 HNO3 5 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
20 Fecl3 2gr 1

21 Reactivo feihling A , B 5 ml 1
22 Limadura de magnesio 10 1

23 EDTA 5 gr 1
Hidróxido de potasio , sulfato cuprixo , tartrato Cantidad solicitada para 25 estudiantes,

24 sodico 5gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
4. TECNICA Ó PROCEDIMIENTO. -
Reacciones del ión Plata: Para el estudio de estas reacciones se usara una
solución de nitrato de plata 0.1 M. Esta solución se colocara en 7 tubos de ensayo
numerados, alrededor de 5 mL en cada tubo, a los cuales se les agregaran los
reactivos de la siguiente forma:
Tubo_1: 3 a 4 gotas de ácido clorhídrico diluido (1M). Notar que ocurre con ácido
concentrado en mayor cantidad.
Tubo_2: 3 a 4 gotas de solución de amoniaco (1M). Notar que ocurre en exceso

de reactivo y con la adición de ácido nítrico.
Tubo_3: 3 a 4 gotas de hidróxido de sodio (1M). Notar que ocurre en exceso de

reactivo y con la adición de una solución de amoniaco concentrado y de ácido
nítrico.
Tubo_4: 3 a 4 gotas de ioduro de potasio (1M). Notar que ocurre al adicionar

cianuro de potasio.
Tubo_5: 3 a 4 gotas de cromato de potasio en solución neutra (1M).
Tubo_6: 3 a 4 gotas de cianuro de potasio (veneno, manejar solo en

soluciones neutras o básicas, nunca adicionar ácidos) (1M). Notar los que
ocurre en exceso del reactivo.
Tubo_7: 3 a 4 gotas de carbonato de sodio (1M).
Determinación de azucares.
Está formado por dos soluciones acuosas que son: sulfato de cobre cristalizado
y sal seignette o tartrato mixto de potasio y sodio; es importante tener en cuenta
que ambas se guardan separadas hasta el momento en el que vayan a ser
utilizadas para de esa manera evitar la precipitación del hidróxido de cobre.
Su acción se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de los
aldehídos el cual se oxida a ácido y se reduce la sal de cobre en medio alcalino
a óxido de cobre, formando un precipitado de color rojo.
El reactivo de Fehling se fundamenta principalmente, en su reacción, la oxidación
de cobre, el poder reductor de los azúcares, sea este en monosacáridos,
polisacáridos, aldehídos, y en ciertas cetonas.
Determinación de proteínas.
Para la preparación de la solución, siempre es adecuado trabajar con los
materiales
volumétricos adecuados para tal fin. Elementos fundamentales son: Erlenmeyer,
vasos
de precipitación, vidrio de reloj, balanza granataria, espátulas, guantes etc. Los
reactivos sólidos a usar se disponen en farmacia o ferreterías.
Preparación de solución de sulfato de cobre
Se requiere de una solución de cuso4 al 10% preparada en agua, almacenarla
en lo
posible en heladera, en frascos color ámbar.

Preparación de la solución de hidróxido de sodio
Se requiere de una solución de NaOH al 10% en agua destilada.
Determinación de flavonoides.
Coloque 20 gotas del extracto A en un tubo de ensayo (o en una placa de toque),
agregue 2 a 3 virutas de Magnesio y unas gotas de ácido clorhídrico concentrado.
Observe el cambio de coloración
Determinación de taninos.
Pesar 2 gramos de la muestra
Colocar la muestra en un erlemeyer (de 1000 ml) con 200 ml de agua, agitando
para disolver la muestra.
Colocar la preparación en la cocinilla hasta ebullición por 4 horas. Luego entibiar
la muestra.
Filtrar la muestra.
Tomar 25 ml de la solución liquida y adicionar 20 ml de indicador, y 750 ml de
agua destilada.
Titular con permanganato de potasio hasta obtener color amarillo.
Preparar un blanco con agua, adicionada de los reactivos en las mismas
cantidades
Determinación de antraquinonas.
Se pesaron, en balanza analítica, 5g de droga cruda y se procedió a la hidrólisis

y extracción de las antraquinonas mediante la adición de 100 mL de agua y
reflujo de la mezcla obtenida en baño de agua hirviendo durante 15 min.
Transcurrido este tiempo se logró una solución de la que se extrajeron 2
porciones de 20 mL, a una de estas se le adicionaron 20 mL de ácido clorhídrico
0,1 mol/L y 1,2g de tricloruro férrico (solución I), a la otra porción sólo se le
añadieron los 20 ml de ácido clorhídrico 0,1 mol/L (solución II).
Las soluciones I y II fueron reflujadas durante 1 h, posteriormente se le realizaron
3 extracciones sucesivas con éter. Las fases etéreas fueron lavadas 2 veces con
agua (10 mL) y evaporadas, los residuos fueron redisueltos con 100 mL de una
solución de hidróxido de potasio 1 mol/L, obteniéndose así las soluciones II y III.
De estas soluciones fueron pipeteados 20 mL respectivamente, a cada porción
se le añadieron 5 gotas de solución de permanganato de potasio al 5 %,
calentando sobre baño de agua luego de cada adición. Este proceder se repitió
hasta no observarse decoloración del agente oxidante.

Escribir las reacciones que ocurren en cada tubo, además de los cambios físicos
que ocurren en estos.
7. CUESTIONARIO.-
a- Describa la formación de un precipitado. Use ejemplos de las reacciones

producidas durante la práctica.
b- ¿Cómo se define un complejo metálico? Formule reacciones de formación
de complejos.
Práctica No. 5
MARCHA ANALITICA DE ANIONES
Para el caso del análisis cualitativo sistemático de los aniones, no existe una
clasificación analítica única de estos. Cada autor posee su propia clasificación
con ciertas variaciones entre uno y otro.
La clasificación de aniones que adoptaremos, basada en el uso de iones Ag+ y
Ba2+ como reactivos generales del grupo y que tiene sus antecedentes en las
clasificaciones de Bumsen y Fresenius, comprende 3 grupos.
Grupo1: Integran aquellos aniones que precipitan con iones Ba2+ y Ca2+ o con
una mezcla de estos iones en medio neutro o débilmente alcalino. Estos aniones
son: carbonatos, boratos, fluoruros, oxalatos, tartratos, silicatos, arseniatos,
arsenitos, cromatos, sulfitos y tiosulfatos.
Grupo2: Incluyen los aniones que precipitan con iones plata en medio de ácido
nítrico diluido y frio y son: sulfuros, ferrocianuros, ferricianuros, cianuros (este
anión en medio básico o neutro), sulfocianuros, yoduros, cloruros y bromuros.
Grupo3: Comprenden los aniones que no precipitan con los iones bario y plata
en los medios indicados anteriormente y son: acetatos, nitritos, nitratos, cloratos,
percloratos y bromatos.
2. COMPETENCIAS.-
- Se estudiara a diferentes aniones según la clasificación por grupos,

adicionando los reactivos generales de identificación, iones bario e iones
plata, en sus respectivas condiciones.
- Se determinaran los cambios físicos ocurridos al adicionar los reactivos
generales y se identificaran las reacciones ocurridas.


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29 Pchmetro 2

INSUMOS

5 Lugol 15 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
9 TINTURA DE MERCURIO 10 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
11 K2CrO4 5gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
KCN Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
12 5gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
LUGOL Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
15 NH3 5 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
16 KI 5 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
BaCL2 Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
HNO3 Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
- Se prepararan soluciones de varios compuestos de distintos aniones, los

cuales se colocaran en tubos de ensayo.
- Se añadirá unas gotas del reactivo general (en sus condiciones
requeridas) a cada tubo de ensayo.
- Se observara los cambios físicos ocurridos en el tubo.
Escribir las reacciones que ocurren en cada tubo, además de los cambios físicos
que ocurren en estos.
7. CUESTIONARIO.-
c- Describa la formación de un precipitado. Use ejemplos de las reacciones

producidas durante la práctica.
d- ¿Cómo se define un complejo metálico? Formule reacciones de formación
de complejos.
Práctica No. 6
ESTANDARIZACION DE SOLUCIONES DIVERSAS
Análisis Volumétrico
El conocimiento de la concentración exacta de los reactivos que se emplean para
calcular la concentración de otros reactivos o productos, es básico si se quieren
conseguir medidas comparables. El procedimiento se denomina estandarización,
titulación o valoración y es necesario prácticamente siempre, ya que es raro que
los productos empleados normalmente en laboratorio tengan pureza del 100%.
Se efectúa mediante el uso de una sustancia considerada estándar o patrón.
Estas sustancias son compuestos muy puros y estables, por lo general, de
elevada masa molecular.
Cuando se prepara una disolución de una determinada concentración es fácil
preparar a partir de ella otra disolución de menor concentración, es decir preparar
disoluciones más diluidas, para ello se emplea la ley de las diluciones:
Cc*Vc = Cd*Vd
Estandarización de ácidos
Los ácidos más empleados son: ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido
perclórico, y en menor proporción el ácido nítrico.
Para la estandarización de ácidos el patrón 1º más utilizado es el carbonato de
sodio, que se lo encuentra de manera natural en minerales. Otros patrones
empleados son: óxido de mercurio II, tetra borato de sodio decahidratado.
Estandarización de bases
Las bases más empleados son: hidróxido de sodio, hidróxido de potasio,
hidróxido de bario.
Existen varios patrones 1º para estandarización de bases:
- El Ftalato de potasio (KHC8H4O4, ó KHP) es uno de los estándares
primarios más usados. Este compuesto es una sal del ácido ftálico
(H2C8H4O4, ó H2P).Esta sal reacciona con el hidróxido de sodio de la
siguiente manera:
OH-+ HP- ------ H2 O + P-2
Se produce el ion ftalato divalente, el cual es el causante de la basicidad
de la solución en el punto de equivalencia, se usa fenolftaleína como
indicador.
Esta misma reacción es empleada para determinar problemas de ftalato

ácido de potasio impuro, lo cual suele llamarse determinación de acidez
total de una sustancia.
• Ácido Benzoico: es poco soluble en agua por lo que generalmente se
disuelve en etanol antes de la disolución en agua
• Iodato de hidrógeno y potasio: KH(IO3)2
2. COMPETENCIAS.-
El estudiante será capaz de estandarizar soluciones acidas o básicas por medio

de sus patrones primarios.

21 Buretas25 ml 4 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
22 Pinzas para bureta y soportes 4 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.

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INSUMOS

Fenolftaleína, naranja de metilo, verde de bromo
cresol. Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
Estandarización de la solución de hidróxido de sodio
1. Hierva aproximadamente 1 litro de agua destilada durante 5 minutos. Permita

que se enfrié tapando con un vidrio de reloj. Transfiérala, mientras está
caliente (40ºC) a un frasco de un 1 litro;
2. Coloque aproximadamente 7 ml de una solución saturada de hidróxido de
sodio 1:1, transparente, al frasco con ayuda de una pipeta y adicione agua
destilada hasta completar 1 litro de solución. Agite perfectamente y
manténgalo tapado, la solución formada tendrá una concentración de 0.1 N
aproximadamente;
3. Seque 4 a 5 gramos de estándar primario ftalato ácido de potasio en una
capsula de porcelana y lleve a una estufa a 110ºC por dos horas. Permita que
se enfrié 30 min en un desecador antes de pesarlo;
4. Pese tres muestra de entre 800 a 900 mg de ftalato ácido de potasio y
colóquelos en matraces de erlenmeyer de 250 ml. Esta cantidad corresponde
a 4 o 4.5 miliequivalentes y deberá titularse con 40 a 45 ml de solución de
hidróxido de sodio 0.1 N. Disuelva el ftalato en 50 ml de agua destilada,
caliente si es necesario;
5. Añada 3 a 4 gotas de indicador de fenolftaleína al primer matraz con la
muestra de ftalato y titule con la solución de hidróxido de sodio hasta alcanzar
el punto final. En este punto ocurrirá un cambio de color en la solución, de
transparente a rosa pálido, en la que el rosa deberá persistir por lo menos
durante unos 20 segundos. Alcanzado el punto final suspenda la adición de
hidróxido y anote el volumen gastado de la solución de hidróxido de sodio.
Proceder de la misma forma con las otras dos muestras de ftalato;
6. Calcular la normalidad del hidróxido usando el peso equivalente del ftalato
como 204.22;
Determinación de la acidez total
1. Colocar 5 ml de una muestra de vinagre en un Erlenmeyer de 250 ml,

añadir 3 a 4 gotas de fenolftaleína y titular con la solución de hidróxido de
sodio estándar;
2. Si el consumo de la solución de hidróxido supera los 50 ml, disminuir el
volumen de la muestra de vinagre y repetir el paso 7;
3. Si no se sobrepasaron los 50 ml, proceder a la titulación de 2 muestras
más de vinagre.
- Presente la concentración de la solución de hidróxido de sodio en forma

estadística.
- Considerando que la acidez del vinagre proviene del contenido de ácido
acético, determine el porcentaje de ácido acético en el vinagre.
7. CUESTIONARIO.-
a. ¿Cuál es la importancia del método de estandarización?

b. ¿Cuál es la función del indicador químico en la titulación?
Práctica No. 7
TITULACIÓN DE UN ACIDO FUERTE CON UNA BASE FUERTE

EMPLEANDO UN INDICADOR VISUAL
La acidez titulable se define como los compuestos ácidos susceptibles a

neutralizarse con el hidróxido de sodio a temperatura ambiente. Esta es
ampliamente utilizada para la determinación de la acidez de jugos de frutas
naturales o reconstituidos y bebidas cítricas no alcohólicas. Los equivalentes de
los ácidos titulados son considerados como provenientes del ácido cítrico, por lo
que la concentración obtenida se la presenta en función de este compuesto. La
acidez puede también ser aplicada a la determinación de ácidos orgánicos como
el ácido acético en el vinagre, como del ácido úrico presente en la orina.
2. COMPETENCIAS.-
Determinar la concentración de los distintos ácidos en las muestras dadas.

21 Buretas 25 ml 4 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
22 Pinzas y soportes para bureta 4 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.

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INSUMOS


a. Medir 10 ml de muestra (en caso necesario efectuar diluciones con

agua destilada) y vaciarla al vaso de precipitados;
b. Añadir 3 a 4 gotas fenolftaleína;
c. Titular con hidróxido de sodio 0.1 N;
d. Calcular la acidez, expresándola en % de ácido cítrico.
%ácido cítrico =V*0.060

Donde:
V=ml de NaOH gastados en la titulación
7. CUESTIONARIO.-
a. ¿Por qué se considera al ácido titulado como ácido cítrico?

b. Escriba la reacción que se formó.
Práctica No. 8
TITULACIÓN DE UN ÁCIDO DEBIL POR RETROCESO
El método de valoración por retroceso se usa cuando se invierte el sentido de la

valoración, cambiando la sustancia a valorar. En vez de valorar el analito original
se añade un exceso conocido de reactivo estándar a la disolución, y luego se
valora el exceso. Este método es útil si el punto final de la valoración por
retroceso es más fácil de identificar que el punto final de la valoración normal. Se
usa también si la reacción entre el analito y la sustancia titulante es muy lenta.
2. COMPETENCIAS.-
El estudiante será capaz de Titular un ácido débil por retroceso.


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INSUMOS


Estandarización de la solución de hidróxido de sodio
1. En un matraz Erlenmeyer de 250ml transferir una tableta de aspirina

molida, con ayuda de un poco de agua introducir totalmente la masa de
esta.
2. Agregar 20ml de NaOH 0,5N calentando a ebullición por cerca de 10
minutos, enfriar la solución con chorro de agua (precaución con las
quemaduras).
3. Agregar fenolftaleína como indicador y titular el exceso de NaOH con HCl
0,5N, hasta que del viraje del color rosado a transparente.
4. Calcular por diferencia el contenido de ácido acetil salicílico de la tableta
de aspirina.
- A partir de los datos, determinar la de ácido acetil salicílico en la tableta

de aspirina. Realice un análisis estadístico de los resultados.
7. CUESTIONARIO.-
a. ¿Cuál es la diferencia entre una valoración directa y una retro

valoración?
b. ¿Por qué el ácido acetil salicílico no pudo valorarse directamente?
Práctica No. 9
DETERMINACION DE CARBONATOS Y BICARBONATOS
Los bicarbonatos y carbonatos juntamente con sales de ácidos débiles y bases

fuertes son compuestos que conforman la alcalinidad de las aguas.
Generalmente la alcalinidad se la expresa en función de la concentración de
carbonatos y bicarbonatos. Es de importancia en el análisis de estos compuestos
en muestras de aguas potables, aguas residuales y cuerpos de agua en general.
El análisis de estos compuestos se basan en el equilibrio acido base de la
disociación de ácido carbónico, el cual presenta dos puntos de equivalencia, para
lo cual se requiere el uso de dos indicadores químicos que varían en intervalos
de pH que contiene a sus puntos de equivalencia
2. COMPETENCIAS.-
El alumno será capaz de obtener la alcalinidad por medio de la valoración de

carbonatos y bicarbonatos con un ácido fuerte usando dos indicadores químicos.


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INSUMOS


4. TECNICA O PROCEDIMIENTO.-
1. Preparar una solución 0.1 N de ácido clorhídrico, estandarizar esta solución

con su patrón primario;
2. En 3 matraces Erlenmeyer de 250 ml, tomar 100 ml de la muestra, llevarlas
sobre la hornilla eléctrica hasta cerca del punto de ebullición.;
3. Adicionar a cada matraz 3 gotas de fenolftaleína y valorar con el HCl hasta
el viraje de rosa a transparente, anotar el volumen gastado;
4. Adicionar 3 gotas de naranja de metilo, continuar la titulación con el HCl
hasta viraje de la solución de rojo fucsia a amarillo, anotar el volumen
adicional.
- Mostar las reacciones producidas durante la valoración.

- A través de cálculos estequiométricos calcular la concentración de
carbonatos y bicarbonatos en la muestra.
7. CUESTIONARIO.-
a. Realice un mapa conceptual del proceso de valoración de

carbonatos y bicarbonatos.
b. ¿Por qué fue necesario la utilización de los dos indicadores
químicos en esta valoración?
Práctica No. 10
TITULACION IODOMETRICA DIRECTA: DETERMINACIÓN DE ACIDO

ASCORBICO
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

Una valoración redox se basa en la reacción de oxidación-reducción o reacción
redox entre el analito y una disolución de oxidante o reductor que sirve de
referencia. Para determinar el punto final, usan un potenciómetro o un indicador
redox aunque a veces o bien la sustancia a analizar o la disolución estándar de
referencia tienen un color suficientemente intenso para que no sea necesario un
indicador adicional. Dentro de las volumetrías de óxido reducción encontramos:
permanganometrías (emplean Permanganato de potasio), dicromatometrías
(emplean dicromato de potasio), yodometrías (emplean solución de yodo),
cerimetrías (emplean hidróxido de cerio), etc.
2. COMPETENCIAS
El estudiante será capaz de aplicar titulación yodométrica en ejemplos prácticos
para luego resolver ejercicios de yodometría directa en base a la práctica
realizada.
3. MATERIALES, REACTIVOS y EQUIPOS.


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INSUMOS


Tintura de iodo, lugol Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
4. TÉCNICA:
+ Triturar una tableta de vitamina C de 1000 mg en un mortero
+ Vaciar todo el polvo de la tableta en el Erlenmeyer, ayudarse con un poco de
agua destilada
+ Añadir unas gotas de solución de almidón al 1%, como indicador
+ Valorar la solución con una solución de yodo 0.01 N, hasta aparición de
coloración azul
+ Anotar el volumen gastado
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA:
Tiempo: 150 minutos
6. CUESTIONARIO:
El estudiante deberá tomar el volumen gastado del titulante y realizar los cálculos
correspondientes
Práctica No. 11
TITULACIÓN POR PERMANGANOMETRIA
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

El Permanganato de potasio es un compuesto químico formado por iones potasio
y permanganato. Es un fuerte agente oxidante.
Tanto sólido como en solución acuosa presenta un color violeta intenso. Es
empleado como agente oxidante en muchas reacciones químicas en el
laboratorio, también se utiliza como desinfectante y en desodorantes. Se utiliza
para tratar algunas enfermedades parasitarias de los peces, así como en el
tratamiento de agua potable y como antídoto en caso de envenenamiento por
fósforo. En química analítica, una solución acuosa estandarizada se utiliza con
frecuencia como titulante oxidante en titulaciones redox debido a su intenso color
violeta.
2. COMPETENCIAS:
El estudiante será capaz de aplicar titulación permanganométrica en ejemplos
prácticos para luego resolver ejercicios de permanganometría en base a la
práctica realizada.
3. MATERIALES, REACTIVOS y EQUIPOS:


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INSUMOS


4. TÉCNICA:
Determinación de ión ferroso con permanganato de potasio

+ Pesar exactamente 1g de Sulfato ferroso y disolverlo en una muestra de 25ml
de ácido sulfúrico diluido y 25ml de agua destilada.
+Valorar con solución 0,1N de Permanganato de potasio hasta obtener una
coloración rosada permanente.
+ Anotar el volumen de permanganato gastado
+ Realizar los cálculos.
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA:
150 minutos.
6. CUESTIONARIO:
El estudiante deberá tomar el volumen gastado del titulante y realizar los cálculos
correspondientes.
Práctica No. 12
TRATAMIENTOS TERMICOS: DESECACIÓN Y CALCINACIÓN

(DETERMINACIÓN DE HUMEDAD)
El agua o los elementos que la conforman, pueden encontrarse en una amplia

variedad de materiales. La importancia del análisis del agua y el método a utilizar
en cada caso viene condicionada en cierto modo por el estado del agua en la
muestra.
Los tipos de agua que se puede encontrar se dividen en:
Agua no esencial
Es el agua retenida mediante fuerzas no químicas. Generalmente se denomina

como humedad de la muestra y su presencia afecta el porcentaje de los
constituyentes encontrados en el análisis.
- Agua higroscópica: Esta absorbida sobre la superficie de las partículas,

usualmente se determina por desecación en estufa a unos 110ºC, aunque
este tratamiento no garantiza que toda la humedad haya sido expulsada,
además, algunas sustancias, especialmente ciertos hidratos puedan
perder agua a temperaturas inferiores a 100ºC.
La desecación en estufa se utiliza normalmente para reducir el contenido

de humedad de la muestras a un nivel bajo y controlado con objeto de
efectuar la pesada de las muestras con vistas a su análisis.
- Agua incluida (u ocluida): es un componente habitual de los minerales y

los precipitados que se forman por cristalización en disolución acuosa. El
agua en este estado no se elimina por calentamiento a 100ºC. Para
conseguir su eliminación se necesita una temperatura mucho más alta, por
lo que puede efectuarse una calcinación intensa para lograr su
eliminación, siempre que la estabilidad de la muestra lo permita.
Agua esencial
Es el agua (o los elementos que la conforman) que existe como parte de la

composición estequiometria de los compuestos. No es preciso que el hidrogeno
y el oxigeno se encuentre necesariamente en la relación 1:2 para que puedan
formar el agua.
- Agua de hidratación: En los hidratos, el agua está unida mediante

fuerzas coordinadas que normalmente son más débiles que las fuerzas
electrovalentes o covalentes primarias, por lo tanto el agua de hidratación
es relativamente fácil de eliminar por acción del calor.
Si el agua puede ser eliminada en forma completa por desecación en

estufa, sin descomposición del material anhidro, su determinación podrá
hacerse de forma en directa tomando en cuenta la pérdida de peso.
- Agua de constitución: el hidrogeno y el oxigeno (o el oxidrilo) están

unidos dentro de los compuestos por fuerzas de valencia primaria, que se
pueden convertir con frecuencia en agua, por la descomposición del
compuesto, por ejemplo la descomposición del bicarbonato de sodio, la de
la sacarosa, carbohidratos en general, etc.
2. COMPETENCIAS.-
Determinar el agua de hidratación de un hidrato por calentamiento en estufa.


28
29 Pchmetro 2

INSUMOS

1 Cualquier sustancia deshidratada. 10 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
2 H2SO4 5 ml 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2

1. Marcar o numerar los crisoles;

2. Llevar el crisol y su tapa a una estufa de desecación a 130ºC, durante 30
min;
3. Retirar el crisol y dejarlo enfriar en un desecador, durante 20 min;
4. Pesar con exactitud el crisol y su tapa (balanza analítica);
5. Colocar 1g de muestra (sustancia hidratada) en el crisol;
6. Pesar el crisol con la muestra;
7. Llevar el crisol destapado y su tapa a la estufa a 130ºC, durante 1 hora;
8. Enfriar el crisol con la muestra en un desecador, durante 20 min;
9. Pesar el crisol tapado con la muestra;
10. Si el peso no se estabiliza, repetir los pasos desde 7 a 9.
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA. -
6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS. -
- Determine el número de moléculas de agua presente en la muestra.

- Determine el % de agua en la muestra original.
7. CUESTIONARIO. -
Realizar el tratamiento estadístico de los datos obtenidos entre todos los grupos
y comentar sobre los tipos de agua encontrados en cada muestra.
Práctica No. 13
DETERMINACIÓN GRAVIMETRICA I: CLORUROS
1. INTRODUCCION
El ion cloruro en disolución se determina por precipitación con nitrato de plata, de
una disolución débilmente acidificada con ácido nítrico. Luego de un período
convenientemente de digestión, se filtra el cloruro de plata por un filtro inerte, se
lava y se deseca a peso constante.
Cuando se sigue el procedimiento adecuado, prácticamente pueden eliminarse
todas las fuentes de error y el método es uno de los más exactos entre los
gravimétricos.
PRECIPITACION Y DIGESTION
La precipitación se lleva a cabo en disoluciones diluidas del cloruro, con 0,2-0,5
g de muestra en 150 ml de agua. Si la solución de la muestra es alcalina, se
neutraliza primeramente con ácido nítrico, añadiendo luego un exceso de 1 mL
de ácido nítrico 6M. De esta manera se tendrá
una solución 0,04M en ácido nítrico.
A partir de este momento la muestra no debe recibir luz directa ni intensa. A esta
disolución se añade el nitrato de plata 0,1M necesario para la precipitación
completa de los cloruros y luego exceso de ion plata. La precipitación se realiza
siempre en frío porque, si es en caliente o con demasiado ácido nítrico, el ion
cloruro puede oxidarse por acción del ácido nítrico.
La solubilidad del cloruro de plata es tan pequeña, que la pérdida por solubilidad
es despreciable. La solubilidad aumenta con la temperatura y con la
concentración del ácido nítrico.
Un pequeño exceso de ion plata hace disminuir la solubilidad por efecto del ion
común.
Al precipitar el cloruro de plata da lugar siempre a un sistema coloidal, por
aglomeración rápida de los numerosos núcleos que se forman. Se digiere la
mezcla a una temperatura cercana a la ebullición y luego se deja sedimentar el
precipitado.
Cuando ha coagulado de forma adecuada el precipitado, se sedimenta
rápidamente después de agitarlo en la disolución, quedando ésta completamente
transparente.
FILTRACION Y LAVADO
La filtración se realiza con crisoles filtrantes porcelana porosa o asbesto (filtro de
Gocch). Al ser precipitado un coloide coagulado, puede volver a peptizarse, con
lo que pasaría a través del filtro durante el lavado. Por ello, el agua de lavado
debe contener un poco de ácido nítrico para evitar la peptización.
El lavado del precipitado debe prolongarse hasta que las aguas de lavado estén
exentas de ión plata, lo cual puede ponerse de manifiesto por ensayo con ión
cloruro.
DESECACION
Normalmente, el cloruro de plata se deseca a 110-130 C, temperatura que elimina
prácticamente la totalidad del agua. El cloruro de plata es estable aún por encima
de su punto de fusión (455 C), por lo que puede ser fundido para eliminar los
últimos vestigios de humedad, si fuera necesario.
DESCOMPOSICION FOTOQUIMICA
Los haluros de plata son sensibles a la luz. Mientras se manipula el cloruro de
plata deben tomarse precauciones para proteger al precipitado de la luz solar
directa y de la luz artificial intensa, especialmente de la luz azul. Aún trabajando
bajo iluminación tenue, el cloruro de plata no es totalmente blanco, sino que toma
un color grisáceo. Esta alteración es superficial y no da a lugar a un cambio
significativo de peso para los análisis ordinarios.
luz de longitud de onda pequeña

2 AgCl ----------------------------- 2 Ag + Cl2
2. COMPETENCIAS
El alumno será capaz de determinar la cantidad de cloruros mediante el método

de precipitación.
3. MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPOS.


28
29 Muflas 2
Pchmetro Cantidad solicitada para 25 estudiantes,

30 2

INSUMOS

4. TECNICA OPERATIVA
+ Pesar una muestra de 0,2 g y transferirla a un vaso de precipitados de 400mL
cubierto con vidrio de reloj.
+ Disolver la muestra con agua destilada y diluir hasta unos 150 mL. Agitar para
disolver la muestra.
+ Añadir 1mL de ácido nítrico 1:1para acidificar la solución.
+ Desde una bureta, agregar lentamente y con agitación constante un ligero
exceso de nitrato de plata 0,25N (unos 20mL de nitrato de plata 0,25N serán
suficientes para la precipitación completa de una muestra de 0,2 g). De esta
manera, los iones cloruro en la disolución
precipitarán en forma de cloruro de plata.
+ A partir de este momento se debe evitar la luz directa.
+ Sobre una hornilla provista de amianto, calentar la suspensión a una
temperatura próxima a la de ebullición, agitando unos minutos para que el
preparado coagule. La
digestión debe prolongarse hasta que el precipitado sedimente en forma rápida
luego de una agitación, dejando un líquido transparente.
+ Retirar la hornilla y dejar sedimentar el precipitado.
+ Verificar si la precipitación de los cloruros ha sido total. Para ello se agregan
unas gotas de nitrato de plata sobre el liquido sobrenadante. Si se forma
precipitado, añadir un poco más de nitrato de plata y repetir el calentamiento. Si
no se forma precipitado, se deja la solución en reposo durante una hora. (El
reposo puede prolongarse por una noche, o bien de una sesión de laboratorio a
otra, evitando la luz directa).
+ Preparar la solución de lavado 1-2mL de ácido concentrado en unos 600 mL
de agua destilada.
+ Retirar el sobrenadante de la digestión, por filtración con ayuda de una varilla
de vidrio, a través de un crisol filtrado de vidrio porcelana , previamente y secado
a 130 C por unos 30min. Procurar que el precipitado se mueva lo menos posible.
+ Añadir al precipitado que sigue en el vaso unos 25mL de la solución de lavado.
Agitar enérgicamente, dejar asentar el precipitado y retirar el líquido
sobrenadante por filtración sobre el crisol filtrante. Utilizar para la transferencia
pequeñas porciones de solución de lavado.
+ Continuar lavando el precipitado en el crisol hasta obtener reacción negativa
de catión plata, por adición de unas gotas de HCl diluido.
+ Colocar el crisol con su precipitado en un vaso de precipitados y dejarlo en la
estufa a 130 C durante 2 horas.
+ Enfriar el crisol en el desecador, hasta que alcance la temperatura ambiente.
+ Pesar el crisol con el precipitado.
+ LLevar el crisol con el precipitado a la estufa, por una hora, luego al desecador
y finalmente determinar el peso, tantas veces sea necesario hasta obtener pesos
constantes -+ 0,3 mg.
OBSERVACION
Por el mismo método se puede determinar cuantitativamente la presencia de la
plata en
una muestra la presencia de la plata en una muestra. En este caso, el reactivo
precipitante será una
solución de HCl.
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA.
El tiempo estimado es de 200 min.
6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS.
Determinar la cantidad de cloruros, tomando en cuenta la relación esteqiométrica

a partir de la
muestra.
7. CUESTIONARIO.
- Qué es la peptización
- Cuál es la importancia de la digestión y del filtrado
- Qué tipo de precipitado es el que se forma
- Cuáles son los procedimientos utilizados para minimizar la co-precipitación en

ésta práctica.
Práctica No. 14
DETERMINACIÓN GRAVIMETRICA II: SULFATOS
1. INTRODUCCION
El sulfato en disolución se determina por precipitación de cloruro de bário en una
disolución caliente, débilmente acidificada con ácido clorhídrico, el precipitado se
digiere y filtra en caliente, se lava, se calcina y se pesa como sulfato de bario.
SO4= + Ba2+ --------------> BaSO4
Esta determinación presenta muchas dificultades a causa de la precipitación de

otras sustancias. Solo se consiguen determinaciones cuantitativamente exactas
con soluciones de ácido sulfúrico o de sulfato de sodio en condiciones muy bien
definidas, aun así pueden aparecer errores.
PRECIPITACION Y DIGESTION
Cuando el sulfato de bario se forma en disoluciones diluidas, se originan

partículas cristalinas relativamente grandes. La solubilidad del sulfato de bario a
100ºC es 50% que a temperatura ambiente. Además la segunda ionización del
ácido sulfúrico es medianamente débil, por lo tanto el ion hidrogeno hace
disminuir la concentración del ion sulfato, aumentando la solubilidad del sulfato
de bario.
BaSO4 + H+ --------> B2+ + HSO4-
Precipitando el sulfato de bario en soluciones calientes y en presencia de un poco

de ácido clorhídrico, la sobresaturación relativa disminuye un poco y se obtiene
un precipitado más adecuado.
Cuando se analiza ácido sulfúrico por este método, no debe añadirse nada de
HCl. Si la muestra es sólida e insoluble en agua, pero soluble en ácidos, o si la
muestra se disuelve disolución alcalina, se añade HCl gota a gota en la cantidad
necesaria para disolver la muestra o para neutralizar su disolución, poniendo
luego un exceso de ácido para que la disolución quede aproximadamente 0.06M
en HCl.
Se calienta hasta ebullición incipiente y se precipita por adición de un ligero
exceso de disolución de cloruro de bario.
Se digiere el precipitado al menos durante una hora (mejor toda la noche) a una
temperatura cercana del punto de ebullición, para que dicho precipitado
envejezca y se purifique.
FILTRACION Y LAVADO
Se utiliza un medio filtrante de alto retenimiento. Se filtra en caliente y se lava con

agua hasta que las aguas de lavado estén exentas del ión cloruro.
CALCINACIÓN
El papel filtro que contiene el sulfato de bario se deseca, se carboniza a baja
temperatura y luego se quema el carbón con un buen acceso de aire en el crisol.
2. COMPETENCIAS
El alumno será capaz de determinar sulfatos de una muestra, por medio del
método gravimétrico.
3. MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Materiales:


28
29 Pchmetro 2 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
30 Muflas 2

INSUMOS

4. TECNICA OPERATIVA
+ Pesar una muestra de 400 mg seca (si es sólida) y transferirla a un vaso de
precipitado de 400 mL. Añadir 50mL de agua destilada.
+Si la muestra es completamente soluble en agua, añadir 1mL de HCl
concentrado. Si es insoluble, añadir HCl concentrado, gota a gota y con agitación
hasta que la muestra se disuelva completamente. Luego añadir 1mL de HCl
concentrado. Este exceso de ácido evita la precipitación de sales de bario de
otros aniones (carbonatos, fosfatos,….)
+ Diluir con agua destilada hasta 200mL. Sobre una hornilla llevar la muestra a
ebullición. La precipitación en caliente da lugar a partículas de precipitado más
grandes y más puras.
+ Desde una bureta dejar escurrir la solución de cloruro de bario 0.25M, gota a
gota y con agitación constante.
+ Después de añadidos 20mL de solución de cloruro de bario, retirar de la hornilla
y dejar en reposo el precipitado para lograr su sedimentación. Verificar si la
precipitación fue completa; añadiendo unas gotas de cloruro de bario sobre el
líquido sobrenadante. Si se forma aún precipitado añadir aún más gotas de
cloruro de bario, agitar enérgicamente, dejar asentar y verificar nuevamente.
+ Cuando la precipitación es completa, tapar los vasos con vidrio de reloj y dejar
la mezcla en caliente (sobre la hornilla, no a ebullición) durante una hora o más,
hasta lograr un liquido sobrenadante perfectamente transparente.
+ Al final del periodo de la digestión, verificar nuevamente que la precipitación es
completa. (En este momento la determinación puede ser interrumpida hasta la
siguiente sesión de laboratorio).
+ Si el tiempo de que se dispone, permite la filtración en la misma sesión de
laboratorio, fíltrese la disolución en caliente, inmediatamente después de la
digestión.
+ Utilizar para la filtración papel filtro sin cenizas, sobre un embudo. Debajo del
embudo colocar un vaso de precipitado. Retira el liquido sobrenadante por
filtración, tratando de mover lo menos posible el precipitado que está en el vaso.
Verificar si la precipitación ha sido total. Si prueba es negativa, desechar el
precipitado y lavar el vaso que la contiene.
+ Lavara el precipitado en su vaso (por decantación) 3 o 4 veces con pequeñas
porciones de agua caliente.
+ Llevar el precipitado sobre el papel filtro, con ayuda de un poco de agua
caliente, lavar el precipitado con agua caliente varias veces sobre el filtro.
+ En un tubo de ensayo recoger un poco de las aguas de lavado y verificar la
presencia del ion cloruro, por adición de unas gotas de solución de nitrato de
plata. Si el ensayo es positivo, continuar con los lavados con agua caliente.
+ Retirar con cuidado el papel filtro del embudo (no tocar el interior del papel
filtro).
+ Aplastar el papel, doblar su borde superior y plegarlo en pequeños segmentos.
+ Colocar con el precipitado en un crisol previamente calcinado, enfriado y

pesado.
+ Colocar el crisol sin tapa sobre un triángulo y calentarlo con una llama suave,
de modo que el papel se seque antes de que empiece a carbonizarse (en este
momento puede interrumpirse hasta la próxima sesión de laboratorio).
+ Elevar gradualmente la temperatura para carbonizar el papel filtro evitando una
combustión con llama. Si aparece llama, tapar el crisol.
+ Elevar la temperatura y quemar todo el carbón. Durante esta operación y hasta
el final, inclinar el crisol en el triángulo y calentar aplicando la llama al fondo del
crisol, de modo que los gases de la llama no rodeen la boca del crisol.
+ Enfriar el crisol y su contenido en un desecador, durante 30 min.
+ Pesar con exactitud en la balanza analítica.
+ Repetir el calentamiento al rojo durante 10 min, enfriar y pesar hasta conseguir
peso constante en 0.3 mg.
5. TIEMPO DE DURACIÓN DE PRÁCTICA

Tiempo estimado 200 min.
6. MEDICION Y CALCULOS
Calcular y anotar el tanto por ciento de SO3= en la muestra. El resultado del
análisis de los oxianiones se refiere generalmente al anhídrido del ácido
correspondiente; por esta razón el sulfato se expresa como SO 3=.
7. CUESTIONARIO.
- Qué es la coagulación, existe esta en la práctica.
- Cuál es la importancia de la digestión y del filtrado en la práctica.
- Qué tipo de precipitado es el que se forma.
- Cuáles son los procedimientos utilizados para minimizar la co-precipitación en
ésta práctica.
Práctica No. 15
DETERMINACION COMPLEJOMETRICA DE LA DUREZA DEL AGUA
1. INTRODUCCION
En la mayoría de las industrias el principal problema que se presenta es el de la
dureza del agua. La dureza es caracterizada comúnmente por el contenido de
calcio y magnesio y expresada como carbonato de calcio equivalente.
Estos elementos causan dos principales problemas:
- Cuando el agua es calentada, ellos se precipitan fuera de la solución, y forman
una costra dura, de apariencia rocosa (sarro). Esta costra acelera la corrosión,
restringe el flujo, y reduce la transferencia de calor.
- Cuando ellos se combinan con el jabón, reaccionan para formar un cuajo, que
interfiere con el efecto de la limpieza, seca la piel, y forma depósitos en cañerías
y ropas.
La dureza es indeseable en algunos procesos, tales como el lavado doméstico e
industrial, provocando que se consuma más jabón, al producirse sales insolubles.
En calderas y sistemas enfriados por agua, se producen incrustaciones en las
tuberías y una pérdida en la eficiencia de la transferencia de calor.
2. COMPETENCIAS
El alumno será capaz de determinar la concentración de iones calcio y magnesio
en muestras de aguas potable, salobres y destilada mediante una titulación
complejométrica con ayuda del complejante Acido Etilendiamino Tetraacético
(EDTA).
2. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.

25 Capsulas de porcelana 4

28
29 Pchmetro 2 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2.
30 Muflas 2

INSUMOS

EDTA Cantidad solicitada para 25 estudiantes ,
9 Murexide 10 gr 1 para cada grupo de la asignatura a-1, a-2
Reactivos:
Solución de NaOH 4 N:
Disolver 16 g de NaOH en agua destilada y aforar a 100mL.
Indicador de Muréxide:
Mezclar 0,5g de muréxide en 50 g de K2SO4
Solución de EDTA 0,01N:
Disolver 0,2 g de EDTA (sal sódica) y 0,005 g MgCl2.6H2O en agua destilada y
aforar a 100mL.
Solución de CaCl2 0,001 N:
Disolver 0,05 g de CaCO3 secado a 100ªC durante 2 horas y disolverlo en 1 mL
de HCl 3N.
Aforarlo a 100mL con agua destilada.
Cantidad solicitada para 25 estudiantes, para cada grupo de la asignatura a-1, a-
4. TECNICA.
Estandarización del titulante:
+ Colocar 5 mL de muestra de la solución de CaCl2 0,01N en una matraz
Erlenmeyer de
125mL, anñadirle 5 gotas de NaOH 4N, enseguida agregarle 50 mg de Muréxide
y finalmente
titular con EDTA (sal disódica) hasta un cambio de viraje de rosa a púrpura.
Titulación:
+ Colocar una muestra de 5mL de agua (destilada y potable) en un matraz
Erlenmeyer de
125mL . Agregar 5 gotas de NaOH 4 N

+ Añadir 50mL de muréxide.
+ Titular con EDTA 0,01 N. Hasta que vire de rosa a púrpura.
+ Realizar los cálculos correspondientes.
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA.

El tiempo es de 200 min.
6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS.
Meq/litro de Ca++= V.N.1000/M
Donde:
V: mL. gastados de la solución de EDTA
N: Normalidad de la solución de EDTA
M: mL de muestra de agua utilizada
7. CUESTIONARIO.
- ¿Qué diferencia existe entre la dureza temporal y la dureza permanente?
- ¿Por qué se agrega hidróxido de sodio?
- ¿Cuánto es el tiempo de titulación?
Código de registro: Versión 2.0
LABORATORIOS DE QUIMICA ORGANICA DE LOS PROCESOS BIOQUIMICOS I
ÍNDICE
Pág.
PRESENTACIÓN ............................................................................................. 1
OBJETIVOS ...................................................................................................... 1
EVALUACIÓN .................................................................................................. 2
NORMAS DE SEGURIDAD ............................................................................. 3
CUADERNO DE LABORATORIO ..................................................................... 5
PRACTICA Nº 1 ................................................................................................ 7
INTRODUCCIÓN AL LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA –
MATERIALES DE LABORATORIO ................................................................. 7
PRACTICA Nº 2 ................................................................................................ 12
DETERMINACIÓN DE PUNTO DE FUSIÓN. ................................................... 12
PRÁCTICA Nº 3 ................................................................................................ 15
DETERMINACIÓN DEL PUNTO DE EBULLICIÓN .......................................... 15
PRACTICA Nº 4 ............................................................................................... 18
DESTILACIÓN SIMPLE ................................................................................... 18
PRÁCTICA Nº 5 ................................................................................................ 22
DESTILACIÓN FRACCIONADA. ..................................................................... 22
PRÁCTICA Nº 6 ................................................................................................ 26
DESTILACIÓN POR ARRASTRE DE VAPOR ................................................. 26
PRACTICA Nº 7 ................................................................................................ 29
PH METRIA ...................................................................................................... 29
PRÁCTICA N° 8 ............................................................................................... 33
FILTRACIÓN .................................................................................................... 33
PRACTICA Nº 9 ................................................................................................ 33
EXTRACCIÓN .................................................................................................. 33
PRÁCTICA Nº 10 .............................................................................................. 42
CRISTALIZACIÓN ........................................................................................... 42
PRÁCTICA Nº 11 .............................................................................................. 48
CROMATOGRAFÍA ......................................................................................... 48
0
1
PRESENTACIÓN
El aprendizaje de la química orgánica debe estar articulado con los nuevos

paradigmas respecto a la ciencia y la tecnología, se la plantea por lo tanto como
una ciencia teórica experimental lo que permitirá al futuro profesional desarrollar la
capacidad de un amplio manejo de instrumental de laboratorio, equipos, reactivos y
otros accesorios propios de la química experimental, por lo que su aprendizaje debe
realizarse con el trabajo en laboratorio, para conseguir esta meta los estudiantes
deben verse comprometidos activamente con el aprendizaje de la química orgánica
experimental; olvidada en los niveles que preceden a la universidad.
OBJETIVOS
1.- Instruir al estudiante en la preparación, desarrollo y registro del trabajo
experimental en química orgánica, llevando a cabo:
a) Estudio y manipulación de los compuestos de carbono: dominio de las
técnicas básicas de laboratorio de química orgánica: separación, purificación,
caracterización de compuestos orgánicos.
b) Estructura y reactivación de los compuestos orgánicos, síntesis, aislamiento,
purificación y caracterización de los compuestos orgánicos obtenidos.
2.- Desarrollar la capacidad del alumno para analizar los resultados obtenidos,
extraer conclusiones y potenciar al espíritu crítico, extraer conclusiones y potenciar
el espíritu crítico necesario en cualquier actividad científica.
3.- Potenciar las habilidades del alumno para el trabajo en equipo.
4.- Fomentar la expresión tanto oral como escrita.
EVALUACIÓN
Las clases de laboratorio se dan como apoyo a las clases de teoría del curso de
Química Orgánica y como tal se considerarán los siguientes apartados:
A) Participación en seminarios, trabajo de laboratorio y resultados.
Se tendrá en cuenta la observación de las normas de seguridad, la actitud, la
preparación, el trabajo en el laboratorio y los resultados obtenidos. Para ello hay
que tener en cuenta las siguientes normas generales:
2
- El alumno deberá conocer y respetar las normas generales y de seguridad
indicadas en el manual de prácticas para el trabajo en el laboratorio y deberá
ir provisto obligatoriamente de: Bata, guantes de goma, gafas de seguridad,
cuaderno de laboratorio, lápiz y calculadora.
- Es obligatorio la presentación de la tarea previa al ingreso del laboratorio.
- Las sesiones de laboratorio no se recuperan, por lo que las faltas de
asistencia y puntualidad deberán ser debidamente justificadas.
- Es condición indispensable para comenzar una sesión que el alumno esté en
posesión del cuaderno de laboratorio debidamente completado.
- Al principio de cada sesión habrá un examen previo sobre la práctica a
realizar.
- Durante la sesión de prácticas y si el proceso experimental lo permite, habrá
seminarios para comentar algún aspecto particular de la experiencia o
relacionado con la misma se comentarán resultados y observaciones en
grupos.
- Tanto al comienzo de la sesión de prácticas como al finalizarse deberán a
cabo las tareas generales asignadas para el buen funcionamiento del
laboratorio y se efectuará un recuento del material por grupos de trabajo, en
caso de faltar material se informará al profesor y posteriormente al encargado
de laboratorio para su reposición y se llevará a cabo la limpieza y ordenación
del puesto de trabajo.
- Al finalizar la sesión de laboratorio cada alumno presenta un reporte de la
experiencia realizada en el cuaderno de laboratorio.
B) Exámenes Prácticos: realización de un trabajo experimental.
C) Exámenes Escritos: cuestionario relacionado con las prácticas.
NORMAS DE SEGURIDAD
3
Las siguientes normas son de obligado y estricto cumplimiento y por tanto deben
ser seguidas en todo momento por el alumno. EL INCUMPLIMIENTO DE
CUALQUIERA DE ESTAS NORMAS PUEDE IMPLICAR LA EXPULSIÓN DEL
ALUMNO DEL LABORATORIO.
1) Al entrar por primera vez en el laboratorio deben localizarse las Salidas de

Emergencia, Duchas de Emergencia, Lavaojos, Extintores y manta ignífuga.
2) Antes de la realización de la práctica el estudiante debe conocer las
características y peligrosidad de los compuestos a utilizar, así como de los
compuestos que pueden formarse durante el experimento.
3) Queda terminantemente prohibido fumar o consumir alimentos en el laboratorio.
4) La bata y las gafas de seguridad deberán usarse en todo momento durante la
estancia en el laboratorio. Las lentes de contacto pueden resultar muy peligrosas
en caso de salpicaduras accidentales a los ojos. Por tanto deben usarse gafas
graduadas y gafas de seguridad adecuadas.
5) Los guantes deberán usarse siempre durante la manipulación de productos o
material que los contenga. Con objeto de evitar contaminaciones no se debe salir
del laboratorio con los guantes puestos.
6) Debe revisarse el material de vidrio para comprobar posibles fisuras,
especialmente antes de su uso a vacío o a presión.
7) Los frascos de reactivos y disolventes deben cerrarse inmediatamente después
de su uso. Hay que evitar la inhalación de vapores tanto de sólidos como de líquidos
así como de partículas sólidas. Si algún producto desprende vapores tóxicos, debe
manejarse en vitrina.
8) Si algún líquido o sólido se derrama se deberá limpiar inmediatamente de la
forma adecuada. En caso de rotura de termómetros, avisar al profesor para eliminar
el mercurio.
9) Deben utilizarse embudos de vidrio para el trasvase de líquidos. Si han de
usarse pipetas, utilícense las peras de goma apropiadas. No pipetear jamás líquidos
con la boca.
4
10) Los residuos o material desechable deben separarse de la siguiente manera: a)
Disolventes orgánicos: Perforan las cañerías, se verterán en los bidones destinados
a tal fin.
b) Residuos sólidos: en las papeleras, nunca en las pilas.
c) Material de vidrio roto y capilares en los recipientes habilitados para ello. En caso
de rotura de un termómetro se comunicará a los profesores para eliminar el
mercurio.
d) Disoluciones de metales pesados: en los bidones disponibles a tal fin.
11) Es necesario mantener perfectamente limpio y seco el puesto de trabajo y el
material a utilizar dado que se usa material eléctrico. La manipulación de cualquier
elemento de dicho material deberé hacerse con el aparato en cuestión
desconectado de la red.
12) En las calefacciones con manta calefactora o agitador se debe utilizar un gato
o taco de madera debajo de la misma para poder retirarlo y enfriar rápidamente en
caso necesario.
13) Los disolventes orgánicos no deben calentarse nunca directamente sino por
medio de baños de agua y se deben manipular siempre en matraces erlenmeyer o
tubos de ensayo, NUNCA EN VASOS DE PRECIPITADOS.
14) No deberán manipularse jamás productos o disolventes inflamables en la
proximidad de mantas y placas calefactores que no estén a temperatura ambiente.
No utilizar los reguladores eléctricos a más de media potencia sin consultar con el
profesor.
15) No tener jamás en marcha mantas o placas calefactores en vacío, es decir, sin
un recipiente (vaso, matraz, etc.).
16) En los montajes de reflujo y destilaciones deberá añadirse el germen de
ebullición ("plato poroso") en frío. Antes de comenzar la calefacción, deberá
verificarse que el montaje, particularmente que las juntas esmeriladas, estén bien
ajustadas.
17) iiNo abandonar jamás el puesto de trabajo mientras se esté llevando a cabo
alguna reacción o destilación!!
5
CUADERNO DE LABORATORIO
Durante la realización de trabajo en el laboratorio es fundamental la confección de
un cuaderno de laboratorio el cual debe estar en posesión del alumno durante toda
su estancia en el laboratorio el cual:
1.- Se redactará a mano con letra clara y presentación ordenada en cuadernos de
espiral anillados o similares, nunca en hojas sueltas. Es conveniente dejar espacios
en blanco al final de los distintos apartados para poder incluir anotaciones o
aclaraciones posteriores.
2.- Los montajes, esquemas o tablas de la bibliografía pueden incluirse

fotocopiados.
3.- Si se desea se pueden separar en bloques, las técnicas de laboratorio, las

características del producto y las prácticas de síntesis, organizando de forma que el
alumno debe poder localizar rápidamente la información deseada.
Como debe prepararse o complementarse.

Se tomará como base las prácticas descrita en el manual en el que distinguiremos
las siguientes partes.
1.- Introducción (conocimiento teórico requerido)

2.- Objetivos y bases de la técnica.
3.- Procedimiento experimental para llevar a cabo la técnica.
4.- Notas al procedimiento experimental:
a) Material necesario
b) Datos de reactivos, disolventes y productos.
c) Notas adicionales: precauciones especiales, operaciones en vitrinas.
5.- Observaciones experimentales. Escritas ordenadamente.
7.- Resultados: solamente del compuesto objetivo si no se indica lo contrario,
nombre, fórmulas del producto/s obtenido (p.f., p.eb.)
6
8.- Ejercicios y cuestiones propuestos en el manual (cuestionario), comentarios y
conclusiones.
9.- Bibliografía: Indicar las referencias bibliográficas completas utilizadas.
PRACTICA Nº 1
INTRODUCCIÓN AL LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA – MATERIALES
DE LABORATORIO
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO
7
En los laboratorios de Química Orgánica, tan importante es el conocimiento de la
reactividad de los compuestos orgánicos, con el que es posible postular los
productos que se van a formar en una reacción concreta, como el dominio de las
técnicas experimentales necesarias para la preparación de las reacciones,
aislamiento de los productos de reacción y purificación de los mismos. Siendo
imprescindible, por tanto, un conocimiento de las características físicas de los
productos que estamos manipulando. En general los trabajos que se desarrollan en
los laboratorios se pueden clasificar en dos grupos principales: aquellas
operaciones y dispositivos para llevar a cabo las reacciones y las técnicas de
separación, aislamiento y purificación de los compuestos de las mezclas de
reacción. Con esta filosofía se ha organizado el presente módulo.
En un primer lugar estudiaremos las técnicas para la manipulación de las mezclas,
con una mezcla problema desconocida, y posterior purificación de los componentes
de la misma, mientras que en la segunda parte del curso abordaremos ejemplos
concretos de Síntesis en Química Orgánica, montando dispositivos y aplicando las
técnicas aprendidas en el cuatrimestre anterior.
Esta forma de presentar el curso tiene la ventaja de que permite al estudiante
familiarizarse con las técnicas principales, sin asociarlas a ejemplos concretos, lo
que Se proporciona una visión más general de las posibilidades de las mismas. Lo
que se pretende con este primer apartado es que el estudiante conozca, practique
y domine las principales técnicas de separación, aislamiento y purificación de los
compuestos orgánicos que son las técnicas que se emplean habitualmente en todos
los laboratorios de Química Orgánica. Estas operaciones, en realidad son
manipulaciones físicas.
En este apartado vamos a hacer un planteamiento general de lo que va a ser el
presente curso. En una sesión, abordaremos los aspectos principales del trabajo en
el laboratorio de Química Orgánica, como son las medidas de seguridad, la correcta
manipulación de los compuestos orgánicos así como el material y demás utensilios
de! laboratorio. Nos situaremos en el laboratorio y estableceremos los criterios de
trabajo y evaluación del curso.
8
2. COMPETENCIAS
1.- Se familiariza con el material de laboratorio de uso más frecuente.
2.- Identifica y reconoce los materiales y equipos de laboratorio de uso común.
3.- Conoce las normas de seguridad necesaria en todo trabajo de laboratorio.
4.- Conoce las características y propiedades de los reactivos, forma de empleo y
su mantención en laboratorio.
5.- Usa de manera adecuada los materiales e instrumentos de laboratorio
3.EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS

MATERIAL DE VIDRIO DIBUJO DEFINICIÓN UTILIZACIÓN
Matraz de fondo redondo 100 mL
(14/23) .
Cabeza de destilación + rosca
Refrigerante (14/23)
Colector acodado
Termómetro
Varilla de vidrio
Pipeta Pasteur + chupetín
Vidrio de reloj
Embudo de decantación + Tapón
Erlenmeyer 100 mL
Erlenmeyer 250 mL
Vaso de precipitados 100 mL
Vaso de precipitados 200 ó 300 mL
Embudo conico
Kitasatos
MATERIAL DE POUPROPILENO(PP)
9
Erlenmeyer 250 mL
Vaso de precipitados 250 mL
Embudo de solidos
Embudo Büchner (de cerámico o
PP)
MATERIAL DIVERSO
Aro de corcho
Soporte metálico Pinza metálica +
nuez
Aro + nuez
Clip metálico grande
Taco de madera
Manta calefactora 100 mL
Manta calefactora 250 mL
Regulador de potencia para mantas
Agitador magnético
EQUIPOS Y APARATOS DE USO GENERAL
Cabina de seguridad
Rota evaporadora
Baño maría
Estufa de secado de material
4. TÉCNICAS O PROCEDIMIENTOS
a) El laboratorio de Química Orgánica. Química Orgánica Aplicada. Objetivos
y limitaciones del trabajo experimental. Diferencias con otros laboratorios. El
espacio y su uso.
10
b) Seguridad en el Laboratorio. Normas de Seguridad y su cumplimiento.
Localizar en el plano las salidas de emergencia, extintores, lavaojos etc.
Utilización de mantas, extintores etc. Etiquetado y almacenado. Almacenado
y destrucción de residuos.
c) Funcionamiento: Asistencia. Normas de comportamiento. Preparación de la
práctica (Cuaderno). Trabajo individual y el trabajo en equipo. Asignación de
Tareas. Evaluación.
d) Material:
1. Material por puesto de trabajo.
Ejercicio a llevar a cabo en el laboratorio:

Recuento. Limpieza y secado.
2. Material común. Localización y utilización (baños, placas calefactores,
rotavapores, etc.).
3. Material adicional fijo: papel de aluminio; gomas elásticas; papel de pH,
algodón, rotulador vidrio; papel de filtro etc. Localización y utilización.
e) Reactivos (producto de partida, sustrato). Disolventes y Productos
(productos finales)
1. Características físicas, químicas y seguridad.
Ejercicio a llevar a cabo en el laboratorio: Búsqueda y ordenación de los datos

de los compuestos.
2. Información en el etiquetado.
3. Manipulación de sólidos y líquidos.
5. TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRÁCTICA

- 100 minutos
6. MEDICIONES, CÁLCULOS Y GRÁFICOS

Esquemas de materiales, equipos y reactivos en los ambientes de laboratorio
7. CUESTIONARIO
11
1. ¿Con que mide el volumen de un líquido?
2.- ¿Cómo leer el volumen de un líquido?
3.- ¿Si usted desea medir un volumen en el orden de los microlitros que material
utilizaría?
4.- ¿Cómo se limpia el material de vidrio?
5.- Investigar cual es la composición y las proporciones de la mezcla sulfonitrica y
sulfocromica.
6.- ¿Cuándo requiere pesar un sólido con mucha precisión, que balanza utilizaría?
7.- ¿Cómo deben eliminarse los diferentes tipos de desechos?
8.- Esquematizar y clasificar los diferentes tipos de pictogramas de seguridad en el
laboratorio de química orgánica.
12
PRACTICA Nº 2
DETERMINACIÓN DE PUNTO DE FUSIÓN.
1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO.
Las constantes físicas de una sustancia, permiten caracterizar sus propiedades

y establecer diferentes tipos de clasificación en función de la propiedad física
que se tome como referencia y con frecuencia son utilizados como indicador de
la pureza de los compuestos, entre las que podemos mencionar.
• Punto de ebullición (p.e.)
• Punto de fusión (p.f.)
• Densidad (g)
• momento dipolar (u)
• constante dieléctrica (g)

otras propiedades como viscosidad, tensión superficial, calor de vaporización,
polarizabilidad conductividad específica e índice de refracción son menos
significativas en el trabajo en un laboratorio de química orgánica.
Punto de fusión.
El punto de fusión (p.f.) De un sólido se define como la temperatura a la que un
sólido pasa al estado del líquido a la presión de 1 atmósfera. También se puede
definir como la temperatura a la cual las fases sólida y líquida coexisten en
equilibrio a la presión de 1 atmósfera.
En esta parte usted debe efectuar una revisión de los conceptos adquiridos
previamente en su curso de química sobre el significado de los términos calor y
temperatura: que significa cada uno de ellos, que representa, como se miden,
en qué unidades se expresan, son equivalentes o no, etc.
2. COMPETENCIAS.
Al finalizar la práctica el estudiante.
• Aplicará procedimientos para determinar constantes físicas de las

sustancias sólidas y líquidas.
• Identifica y aprende la manipulación de los materiales equipos y reactivos

de laboratorio de química orgánica.
13
3. EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS
1 Mechero Bunsen 4 pzas
2 Termómetro 4 pzas
3 Tubos de Thielle 4 pzas
4 Soporte universal 4 pzas
5 Pinzas completas Capilares 4 pzas
6 Mortero con pilon 4 pzas
7 Balanza 4 pzas
8 Espatula 4 pzas
9 Vidrio de reloj 4 pzas
REACTIVOS
Compuesto Orgánico Puntos de Fusion (ºC)
Urea 132.5
Acido salicílico 159.8
Naftaleno 80.8
Acido benzoico 121-122
Acido oxálico 101-102
Aceite
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO.
Determinación de puntos de fusión para sustancias puras.
Esa determinación se efectúa introduciendo un poco de la sustancia en el interior
de un tubo capilar cerrado por un extremo. El capilar se une a la altura del bulbo
de un termómetro. El termómetro más el capilar, que contiene la muestra a
determinar, se introduce en un tubo de Thielle (figura A) que contiene aceite
como baño.
14
El líquido del baño se calienta lentamente hasta que la sustancia del capilar
empieza a fundirse, anotar la temperatura (T 1) y cuando se funde completamente
(T2) este intervalo de temperatura se conoce como límite de fusión.
15
Efectuar las mismas determinaciones para las demás muestras.
Los datos obtenidos, registrarlos en la siguiente tabla.
TEMPERATURA DE FUSIÓN DE LAS SUSTANCIAS UTILIZADAS.
SUSTANCIA Tº PUNTO DE FUSIÓN
1. sustancia
2. sustancia
3. sustancia
SUSTANCIA Tº FUSIÓN Tº FUSIÓN % ERROR

TEORICA EXPERIM.
5. TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRÁCTICA.
El tiempo de duración de la práctica es de 100 minutos.
6. MEDICIÓN CÁLCULOS Y GRÁFICOS.
Tomar nota de los datos de la práctica elaborar tablas y graficar.

7. CUESTIONARIO.
1. Explicar cómo se hace la calibración de un termómetro para la determinación
de la temperatura de fusión?.
2. Cual es la importancia de determinar las propiedades físicas de las
sustancias como las que se hicieron en estos experimentos.
3. Mencionar los factores de error que posiblemente se pudieron cometer al
realizar la práctica?.
4. Porque la temperatura de fusión de un sólido permanece invariable durante
el cambio de estado?.
5. Porque es aconsejable usar un baño de aceite para la determinación de la
temperatura de fusión? ¿Por qué debe ser muy lento el calentamiento del
baño de aceite?.
6. Además del aceite es posible utilizar otro líquidos para esta misma práctica?
¿Cuáles? ¿Qué criterios deben tenerse en cuenta para su selección?.
7. ¿Por qué la temperatura de fusión de muchos sólidos se reporta como un
rango? (Ej. Acetanilida: 113-114 ºC)
8. Cuáles la influencia de una impureza insoluble en la temperatura de fusión
de un sólido?.
9. Cuáles son las escalas más comunes para medir la temperatura?.
10. Qué aplicación tiene el descenso del punto de congelación?.
PRÁCTICA Nº 3
16
DETERMINACIÓN DEL PUNTO DE EBULLICIÓN
Punto de ebullición, temperatura a la que la presión de vapor de un líquido se

iguala a la presión atmosférica existente sobre dicho líquido. A temperaturas
inferiores al punto de ebullición (p.e), la evaporación tiene lugar únicamente en
la superficie del líquido. Durante la ebullición se forma vapor en el interior del
líquido, y sale a la superficie en forma de burbujas, con el característico hervor
tumultuoso de la ebullición. Cuando el líquido es una sustancia simple o una
mezcla Azeotropica, continúa hirviendo mientras el aporte calor, sin aumentar la
temperatura; esto quiere decir que la ebullición se produce una temperatura y
presión constante con independencia de la cantidad de calor aplicada al líquido.
Cuando se aumenta la presión sobre un líquido el p.e. Aumenta. El agua,

sometida a una presión de 1 atmosfera (101.325 pascales), hierve a 100 °C,
pero a una presión de 217 atmosferas el p.e. Alcanza su valor máximo, 374 °C
por encima de esa temperatura, (la temperatura crítica del agua) el agua en
estado líquido es idéntica al vapor saturado. Al reducir la presión sobre un
líquido, bajo el valor del p.e. A mayores alturas, donde la presión es menor, el
agua hierve por debajo de 100 °C si la presión sobre una muestra de agua
desciende a 6 Pascales, la ebullición tendrá lugar a 0 °C los puntos de ebullición
se dan dentro de un amplio margen de temperatura. El p.e. Más bajo es el del
hielo, -268,9 °C el más alto es probablemente el del volframio unos 5900 °C
Factores que afectan al punto de ebullición.
El punto de ebullición de un líquido se afecta por varios factores, entre ellos
están ciertas propiedades propias de las moléculas.
• Peso molecular.
• Polaridad de la molécula.
• Estructura y forma de la molécula.

2. COMPETENCIAS.
• Conoce los constantes físicas.
17
• Aplica procedimientos para determinar el punto de ebullición de
diferentes líquidos.
• 4 pizetas
• 4 vasos precipitados
• 4 hornillas
• 4 termometros
• 4 soportes universales
• 4 pinzas de sujeción y nuez
Reactivos
• Agua destilada
• Dicloro metano
• Acido benzoico
• Etanol
• Acido acético
1 P0izetas 4 Pzas
2 Vasos precipitados 4 Pzas
3 Hornillas 4 Pzas
4 Termometros 4 Pzas
5 Soportes universales 4 Pzas
6 Pinzas de sujeción y nuez 4 pzas
7 Agua destilada Csp Ml
8 Dicloro metano Csp Ml
9 Acido benzoico Csp Ml
10 Etanol Csp Ml
11 Acido acético csp Ml
Determinación de puntos de ebullición para sustancias puras.
Medir 20 ml de cada una de las sustancias líquidas a utilizar (agua, Etanol,

Metanol, Acido Acetico) en un vaso de precipitación de 50 ml, y llevar a una
hornilla calentara hasta observar la ebullición (formación de burbujas) en el
líquido. Controlar la temperatura con un termómetro todo el tiempo, y determinar
18
el punto de ebullición el momento en el que empieza bullir la sustancia. Realizar
una tabla comparativa de estas.
TEMPERATURA DE FUSIÓN DE LAS SUSTANCIAS UTILIZADAS.

SUSTANCIA Tº PUNTO DE FUSIÓN
4. sustancia
5. sustancia
6. sustancia
SUSTANCIA Tº FUSIÓN Tº FUSIÓN % ERROR

TEORICA EXPERIM.

6. MEDICIÓN, CÁLCULOS Y GRÁFICOS.
Tomar nota de los datos de la práctica elaborar tablas y graficar.

7. CUESTIONARIO.
1. Explicar cómo se hace la calibración de un termómetro para las
determinaciones de las temperaturas de ebullición.
19
2. Como se haría la determinación del punto de ebullición de una mezcla de dos
sustancias.
3. Cual es la importancia de determinar las propiedades físicas de las
sustancias como las que se hicieron en estos experimentos.
4. Cómo influye la presencia de impurezas solubles en el punto de ebullición?.

5. Porque la presión atmosférica influye sobre el punto de ebullición?.
6. Donde se cocinará más rápido un huevo:en el Himalaya (presión
atmosférica=300 torr), en la luna (presión atmosférica=20torr) o en Bolivia
(presión atmosférica=560 torr)? Explique su respuesta.
7. Porque los alimentos se cocinan más fácilmente en una olla a presión?.
8. Podría identificarse plenamente una sustancia con base únicamente en los

puntos de fusión y ebullición? Explique.
9. Que son fuerzas intermoleculares y como se clasifican?.
10. Investigue que son sustancias polares y no polares. Que son los puentes de
hidrógeno. Qué relación tiene la polaridad con el punto de ebullición?
20
PRACTICA Nº 4
DESTILACIÓN SIMPLE
La destilación es un método que se utiliza con el propósito de purificar sustancias

líquidas o en otras palabras separar líquidos a partir de una mezcla.
La destilación consiste en someter a calentamiento un líquido para convertirlo

en vapor y luego condensar estos por enfriamiento.
Existen diferentes tipos de destilación usados especialmente en química

orgánica como por ejemplo la destilación simple, destilación fraccionada, por
arrastre de vapor, a presión reducida o al vacío.
Destilación simple o diferencial.- Se utiliza cuando se requiere separar los

componentes de una mezcla líquida o de un sólido en solución, teniendo en
cuenta que deben poseer puntos de ebullición que difieran ampliamente entre
sí. Ejemplo: la separación de una mezcla alcohol agua, aceite acetona, etc. el
aparato en el que se realiza esta operación se muestra en la figura.
21
2. COMPETENCIAS.
Al finalizar la práctica el estudiante
- aplica procedimientos y técnicas de destilación como método de

purificación de disolventes orgánicos
Materiales reactivos.
4 pizetas agua
5 pipetas de 5 ml etanol
5 pipetas de 10 ml perlas de ebullición
4 propipetas
4 probetas de 100 ml
4 Equipos de destilación simple
4 soportes universales
4 capsulas de porcelana
20 tubos de ensayo
4 gradillas
4 termometros
4 hornillas
1 Pizetas 4 Pzas
2 Pipetas de 5 ml 5 Unidades
3 Pipetas de 10 ml 5 Unidades
22
4 Propipetas 4 Unidades
Probetas de 100 ml
5 5 Unidades
Equipos de destilación simple
6 2 Unidades
Soportes universales
7 4 Pzas
Capsulas de porcelana
8 4 Unidades
Tubos de ensayo
9 20 Unidades
Gradillas
10 4 Unidades
Termometros
11 4 Unidades
Hornillas
12 4 Unidades
13 Agua Csp Ml
14 Perlas de ebullición csp Unidades
15 Etanol csp Unidades
1. Proceda a armar el equipo de destilación simple tal como se indica en la

figura.
2. Colocar 100-150 ml de vino, en el balón de destilación y agregar las perlas

de ebullición.
3. Conectar el agua al refrigerante y calentar el balón hasta que la solución

hierva suavemente sobre el manto calefactor.
4. Anotar la temperatura a la cual destila la primera gota en el tubo de ensayo.
5. Recoger el destilado cada dos minutos, anotar la temperatura y medir el

volumen; cambiar el tubo de ensayo y repetir la misma operación, hasta que
termine el proceso de destilación.
23
Elabore una tabla en la que reporte la temperatura, el tiempo (min) y el
volumen obtenido.
6. Apreciar el olor que presentan los distintos tubos de ensayo e indique en cuál
de ellos el olor es más pronunciado, anote sus observaciones.
7. Deposite en una cápsula de porcelana gotas del destilado y préndale fuego,

observe el tiempo de ignición el color de la llama y anote si el destilado
contiene o no alcohol.
8. Repita el proceso para cada uno de los tubos de ensayo obtenidos. Anote
sus observaciones..
Tomar nota de los datos de la práctica elaborar tablas y graficar
7. CUESTIONARIO.
1. ¿En qué consiste un proceso de destilación?.
2. Explicar cuál es la misión del refrigerante en un equipo de destilación?.
3. ¿Por qué el agua de refrigeración debe ingresar por la parte inferior del
refrigerante?.
4. Un balón de destilación no puede llenarse más allá de la mitad de su

contenido. ¿Por qué?.
5. Para que se añaden las perlas de ebullición en el matraz de destilación?.
6. ¿Qué es una mezcla azeotropica?.
7. Cual es el factor más relevante que afecta el punto de ebullición de un líquido.
24
8. ¿Por qué el punto de ebullición del agua en Cochabamba, es diferente de
100 °C? Justifique su respuesta.
9. Realizar los cálculos teóricos para determinar el punto de ebullición del agua
en la ciudad de Cochabamba. Comprobar con él obtenido en la práctica.
10. Averiguar cuál es la composición química del vino.
25
PRÁCTICA Nº 5
DESTILACIÓN FRACCIONADA.
La destilación fraccionada es un una técnica en la cual se combinan una serie

de destilaciones simples en una sola operación sencilla y continua, mediante la
utilización de una columna de fraccionamiento la que proporciona una gran
superficie para el intercambio de calor en las condiciones de equilibrio, entre el
vapor ascendente y el condensado descendente; lo que posibilita una serie
completa de evaporaciones y condensaciones parciales a través de la columna
de fraccionamiento.
Cada ciclo de evaporación condensación es equivalente a una destilación
simple. Si consideramos cada uno de estos ciclos de evaporación condensación,
como operaciones distintas, podemos definir este ciclo como un plato teórico.
Puesto que cada plato teórico corresponde a un ciclo de evaporación
condensación, todo aquello que aumente la posibilidad de condensación sin
afectar adversamente la etapa de evaporación, aumentará la eficacia de la
columna. Por lo tanto todo aquello que aumente la superficie de la columna
aumentará la condensación y la eficacia global de la columna.
Para aumentar la eficacia de la columna de fraccionamiento, se ha diseñado
diferentes tipos de columnas aumentando la superficie de contacto, siendo las
más comunes Vigreux (A) y la columna de relleno (B) representados en la
siguiente figura.
26
2. COMPETENCIAS.
Aplica procedimientos y técnicas de destilación fraccionada como método de

purificación de disolventes orgánicos.
3. EQUIPOS,MATERIALES E INSUMOS
1 Pizetas 4 Unidades
2 Probetas de 100ml 4 Unidades
3 Equipos de destilación fraccionada 4 Pzas
4 Termómetros 4 Unidades
5 Perlas de ebullicion csp Unidades
6 Eter csp Ml
7 Alcohol etílico csp Ml
8 Agua csp Ml
1. Armar el equipo de destilación fraccionada.
2. Colocar 200-250 ml de una mezcla de alcohol etílico, éter y agua y agregar

perlas de ebullición.
3. Conectar el agua al refrigerante y calentar el balón hasta que el líquido hierva

suavemente. Una vez que se inicie la destilación anotar la temperatura a la
que empezó el proceso.
4. Cuando el termómetro marque 30 - 40 °C se recoge la fracción que destila

éter a una temperatura constante, cuando supere los 40 °C cambiar de la
matraz y recoger la fracción que destila entre 70 78 °C que será el alcohol.
Cuando nuevamente vuelva a subir la columna mercurial se retira el
recipiente para colocar otro con el objeto de recibir el agua.
27
5. Medir el volumen de cada fracción.
6. Elabore una tabla en la que reporte el volumen obtenido en cada rango de

temperatura.
Tomar nota de los datos de la práctica, elaborar tablas y graficar.
7. CUESTIONARIO.
1. Explicar en qué situaciones se utiliza la destilación fraccionada.
2. Explicar qué ocurre a medida que se lleva a cabo el proceso de destilación

en la columna de fraccionamiento.
28
3. Como se puede aumentar la eficacia de una columna explique.
4. Para que se añaden perlas de ebullición en el matraz de clasificación?.
5. Explique la destilación fraccionada del petróleo.
6. Qué método elegiría para separar una mezcla de dos líquidos de p.e. 77 °C
y 111 °C? Que líquido destilarías en primer lugar. Justifica tu respuesta.
7. Explique qué tipo de sustancias se someten a una destilación por arrastre

de vapor de agua y en qué ley se basa esta operación.
29
PRÁCTICA Nº 6
DESTILACIÓN POR ARRASTRE DE VAPOR

1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO
La destilación por arrastre con vapor con agua es una técnica usada para separar
sustancias orgánicas insolubles en agua y ligeramente volátiles, de otras no volátiles
que se encuentran en al mezcla, como resinas o sales inorgánicas y otros
compuestos orgánicos no arrastrables.
La destilación es una operación utilizada con frecuencia para la purificación y
aislamiento de líquidos orgánicos. La destilación aprovecha las volatilidades y
puntos de ebullición de los compuestos líquidos a separar. La destilación por
arrastre con vapor también se emplea con frecuencia para separar aceites
esenciales de tejidos vegetales. Los aceites esenciales son mezclas complejas de
hidrocarburos, terpenos, alcoholes. Compuestos carbonílicos, aldehidos aromáticos
y fenoles, y se encuentran en hojas, cáscaras o semillas de algunas plantas.
La obtención de aceites esenciales es realizada comúnmente por la tecnología
llamada de destilación por arrastre con vapor en sus diferentes modalidades. La
pureza y el rendimiento del aceite esencial dependerán de la técnica que se utilice
para el aislamiento.
30
2. COMPETENCIAS
- Aislar el aceite esencial de una sustancia orgánica utilizando la destilación por
arrastre de vapor.

Equipo de destilación por arrastre
de vapor 3 PZAS
Balanza 3 PZAS
Probeta graduada 3  25 ml 3 PZAS
Hornilla 3 PZAS
Vaso precipitado 100 ml 3 UNIDADES
Soporte universal 3 PZAS
Pinzas para soporte 3 PZAS
Hornillas de hierro 3 PZAS
Telas de asbesto 3 PZAS
Matraz erlenmeyer 100 ml 3 UNIDADES
Canela en polvo – hojas de
eucalipto y menta CSP GRAMOS
Eter etílico CSP ML
Sulfato de sodio anhídrido CSP GRAMOS
Solución y saturada de cloruro de
sodio CSP ML
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
1. Armar el equipo indicado por el profesor. En el balón de arrastre coloque 250
gr. de material vegetal.
2. Caliente el balón generador de vapor (donde ha depositado 150 ml de agua)
y se hace pasar entonces una corriente de vapor constante a través del balón
de arrastre, de tal forma que destile tanto líquido como lo permita la
capacidad de refrigerante.
3. Cuando ya no se recojan mas gotas del destilado, se desconecta el
generador de vapor con cuidado y se deja enfriar.
31
4. En el destilado recogido se observan 2 fracciones, una de las cuales
corresponde al compuesto orgánico (en el caso de los hidrocarburos en la
capa superior, en la anilina en la capa inferior) el cual se separa por
decantación.
5. Una vez separado el compuesto orgánico se mide el volumen obtenido.
Anote sus observaciones.

- 100 minutos
6. MEDICIONES, CÁLCULOS, ECUACIONES Y CÁLCULOS
Tomar nota de los datos de la práctica y realizar las observaciones y cálculos
respectivos en el cuaderno de laboratorio.
7. CUESTIONARIO
1. A que se llama destilación por arrastre con vapor.
2. ¿Qué es un aceite esencial? Ejemplos.
3. ¿Cuáles son los componentes mayoritarios del aceite esencial de eucalipto?
4. Explique que tipo de sustancias se someten a destilación por arrastre de
vapor con agua y en que ley se basa esta ley.
5. ¿Qué es lo que dice la Ley de Dalton? Conteste con palabras y
matemáticamente.
6. ¿Explique el material que utiliza y que resultados obtuvo en su destilación
por arrastre con vapor de agua, cuantos mililitros y teóricamente cuanto se
puede obtener del producto, es rentable, para la producción y en que se
puede utilizar el destilado?
7. Mencione 5 productos que deban obtenerse por destilación por arrastre de
vapor y cuál es la temperatura a la cual debe controlarse, realice una tabla.
32
PRACTICA Nº 7
PH METRIA
1.- CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO
La acidez es un parámetro físico-químico que indica la capacidad que tiene las
sustancias de ceder o aceptar protones.
De acuerdo a la teoría de Lowrry y Bronsted la sustancias que ceden un protón H +
se denominan acido, y aquellas que aceptan un protón H- son bases de acuerdo a
este parámetro loas ácidos y las bases según la fuerza pueden ser – ácidos fuertes,
ácidos débiles, bases fuertes y bases débiles.
Las propiedades y el comportamiento químico de una solución puede variar
enormemente con la alteración de la concentración de los inanes H +, un cambio de
esta concentración puede provocar modificaciones en la solubilidad de un
compuesto, facilitar o evitar la formación de compuestos complejos, acelerar o
retardar una reacción química. Por consiguiente, el conocimiento de la
concentración de iones H+ es de vital importancia para muchos procesos.
El logaritmo decimal negativo de la concentración de iones H3O+ (abreviado H+) se
conoce como pH.
pH = - log (H+)
pH de algunas soluciones
H+ pH H+ pH
Jugo gástrico 10-1 1 Orina 10-6 6
Jugo de limón 10-2 2 Saliva 10-7 7
Vinagre 10-2 2 Sangre 10-7 7
Jugo de naranja 10-3 3 Agua pura 10-7 7
Jugo de tomate 10-4 4 Solución de jabón 10-10 10
Café negro 10-5 5 Amoniaco casero 10-11 11
Agua de mar 10-8 8
Ionización del agua

H2O ===== H+ + OH-
33
La constante de equilibrio para esta reacción a 25 ºC viene dada por la relación.
La anterior ecuación puede simplificarse

(H+)(OH-) = 55.5 X 1.8 X 10-16 = 1 X 10-14 = Kw
En el punto de equilibrio (H+) = (OH-)
Consiguientemente (H+)2 = 10-14
De esta manera (H+) = 10-7
pH = -log (10-7)
en la solución neutra el PH es 7. De acuerdo a la concentración de H+, el PH podrá
variar su valor en el rango de 0 a 14, según la siguiente escala:
pH acido pH neutro pH básico
0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14
La medida del pH de una disolución se plantea en muchas ocasiones en el
Laboratorio, para ello habitualmente se utiliza papel indicador universal o para ser
mas exactos el pH metro.
2.- COMPETENCIAL
Al finalizar la practica el estudiante.
- Conoce y aplica las diferentes formas de medir el pH.
- Determina el pH de diferentes sustancias y productos.
- Aprende el correcto uso y manejo del pH metro.
3.- MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

2 Balanzas
4 Espátulas
4 Vidrio de reloj
4 Pizetas
1 Balanzas 2 PZAS
34
2 Espátulas 4 UNIDADES
3 Vidrio de reloj 4 PZAS
4 Pizetas 4 PZAS
4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

4.1.- - En tres vasos precipitado medir 80 ml de agua mineral, agua destilada y
agua de grifo.
- Medir el pH de cada muestra y elaborar una tabla.
4.2.- - Medir en 2 vasos precipitado 80 ml de coca cola con gas y coca cola
desgasificada.
- Medir el pH de cada muestra y elaborar una tabla para comparar los valores
obtenidos.
4.3.- Medir el pH del champú puro, en una probeta medir 5 ml de champú y verter
en un vaso precipitado y añadir 45 ml de agua destilada y medir el pH,
comparar este valor con el obtenido sin diluir.
4.4.- Pesar dos comprimidos de aspirina, molerlos en un montero, volver a pesar

1 gramo de la muestra y disolver en 100 ml de agua destilada, verter en un
matraz aforado de 250 ml, tomar una alícuota de 80 ml de solución y medir
el pH.
4.5.- Medir 20 ml de cada solución en una probeta graduada colocar en 4 vasos

de precipitación de 50 ml y agregar a cada solución 3 ml de HCl 1M y medir
su pH.
4.6.- Pesar en 4 vidrios de reloj 0,1 g de carbonato de sodio, agregar la cantidad

pesada a cada solución pura después que se haya medido su pH (gaseosa,
agua de grifo, jugo de naranja, agua destilada) y medir su pH.
Anotar los datos en la tabla 1 y 2.
Calcular la concentración de iones H+ según.
35
(H+) = antilog(-PH) = 10-PH
Tabla 1
Solución pH de solución Concentración de H+
Tabla 2
pH solución pH solución pH solución pH solución
Solución
inicial diluida con HCl con Na2CO3
5.- TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRACTICA

100 minutos
6.- MEDICIÓN, CÁLCULOS Y GRÁFICOS
7.- CUESTIONARIO
1) Representar las reacciones de disolución de un acido fuerte y débil, y de una
base fuerte y débil.
2) Que iones están presentes en el agua pura.
3) Definir: ácido y base según.
a) Arrhenius b) Bronsted – Lowry c) Lewis
4) Que es neutralización ejemplo.
5) Que son indicadores acido-base, como actúan cita ejemplos.
6) Que significa pH y que es el pH de una disolución
36
7) Como varia el pH de una disolución al aumentar su acides aumenta o
disminuye? Justifique su respuesta.
8) Que pH presenta el jugo del limón y el yogurt y a que componente se debe
su valor.
9) Calcular los pH de las soluciones de la tabla 2 y exponer los resultados en
una nueva tabla.
10) Calcular el pH de una disolución preparada al mezclar 20ml de amoniaco
1,0M con 10Ml de cloruro de amonio 0,5M
37
PRÁCTICA N° 8
FILTRACIÓN
1.- CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO

Filtración.- Es el método simple para separar los componentes de una mezcla o
combinación y consiste en hacer pasar la mezcla sólido-líquido a través de un
medio poroso (papel de filtro) que retenga las partículas sólidas. Para esta
operación se emplea un embudo, un papel de filtro (el que se dobla dos veces y
en forma cónica), se coloca en el embudo; en este caso debe preocuparse
siempre que quede una zona estrecha del embudo sin cubrir, el filtro jamás debe
sobresalir el borde del embudo. Después de la filtración el sólido que queda
adherido sobre el papel de filtro se denomina residuo y el líquido que atraviesa se
llama filtrado.
Este tipo de filtración es adecuado en los siguientes casos:
a) Filtración de las impurezas insolubles en un proceso de cristalización
b) Filtración del agente desecante en un proceso de secado
c) Filtraciones en las que se descarta el sólido e interesa la disolución
El procedimiento para llevar a cabo una filtración por gravedad se indica en la

figura. La mezcla sólido líquido se transfiere al embudo con ayuda de una varilla
de vidrio procurando que resbale sin salpicar, la varilla no debe tocar el papel
filtro ya que puede agujerearlo.
Modo operatorio para realizar una filtración por gravedad
El método descrito anteriormente es muy lento, especialmente si el resido tiene
muchas partículas pequeñas, para acelerar la operación de filtración, se utiliza
un trampa de agua, matrás de filtración al vacío, embudo Buchner, papel de filtro,
tal como se indica en la Fig. Cuando el agua del grito pasa por la trampa frente
al orificio que comunica con el sistema, de filtración, se produce un vacío parcial
38
dentro del sistema, lo que origina una succión que propicia la aceleración de la
filtración.
Este tipo de filtración se utiliza en los siguientes casos:
• Filtración de los cristales en un proceso de cristalización
• Filtración de un sólido en un proceso de precipitación
• Filtraciones en las que interesa aislar el sólido independientemente de que

la disolución se descarte o no
2.- COMPETENCIAS
Al finalizar la práctica el estudiante
• Aplicará procedimientos de separación de mezclas teniendo en cuenta sus
competencias.
• Aplicará las técnicas de filtración como método de separación de un

sólido y líquido
3.- EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS

1 Embudos de vidrio 4 Pzas
2 Pizeta 4 Pzas
3 Vaso precipitado 100 ml 4 Pzas
4 Probetas de 100 ml 4 Pzas
5 Vidrio de reloj 4 Pzas
6 Espátulas 4 Pzas
7 Soporte universal 4 Pzas
8 BalanzaVarillas de vidrio 4 Pzas
9 Papel filtro 4 Pzas
10 Matraz Erlenmeyer 250 ml 4 Pzas
11 Balanza 4 Pzas
39
4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
4.1.-Separación líquido Sólido (Separación por filtración)
En un vaso de precipitado, se toman 75 ml de agua y se mezclan con 10 g de
arena, se agita con una varilla de vidrio. Se realiza el montaje de filtración. Con
la ayuda de una varilla de vidrio y un frasco lavador, se pasa por el embudo la
mezcla de agua y arena. Sobre el papel filtro (que previamente se pesa) deberá
quedar la arena se toma el papel filtro que contiene la arena y se lleva a la
estufa a 105° C, durante 30 minutos. Luego se pesa el papel filtro y se obtiene
la cantidad de arena recuperada después de la filtración. Con una probeta se
mide la cantidad de agua recuperada que queda en el Erlenmeyer.
4.2.- En otro vaso precipitado se toma 75 ml de agua y se mezcla con 10 g de
arena y se filtra sin agitar. Comparar el tiempo de filtración de cada una.
4.3.- Filtración al vacío.- Arme un equipo de filtración al vacío con una matraz
kitasato,, embudo Buchner, papel filtro y trampa para vacío, el papel filtro debe
estar completamente adherido y sin pliegues en la base del embudo.
Conecte la salida del matraz kitasato a una trampa de agua y abra la llave de
agua del grifo que pone en funcionamiento la trampa de agua.
Terminada la filtración desconecte el Kitasado de la trampa de agua y solo
entonces desconecte la llave de la trampa de agua.
5.- TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRÁCTICA
100 Minutos
6.- MEDICIÓN CÁLCULOS Y GRÁFICOS
Completar los datos y cálculos en las siguientes tablas
Experimento 4.
Peso de papel filtro (gramos)
Peso del papel filtro arena (gramos)
40
Peso de la arena recuperada
% de recuperación de la arena
Volumen recuperado de agua (ml)
% de recuperación de agua
7.- CUESTIONARIO
1. Que es filtración
2. Se procede a efectuar una filtración y se observa que el líquido filtrado

sale turbio después de volver a filtrar tres a cuatro veces ¿A qué puede
atribuirse?¿Cómo puede solucionarse?
3. Uno de los factores que influyen en la velocidad de filtración es la

temperatura, ya que aumentando ésta, disminuye la fricción del líquido en
los poros del filtro. Así por ejemplo, la fricción interior del agua a los 100° C
es casi seis veces menor que a 0°C. De acuerdo a esto, ¿será conveniente,
siempre que sea posible, una filtración en caliente o en frío?
4. En qué se diferencia la filtración por succión de la filtración por

gravedad?
5. Investigar otros métodos de separación de un sólido y un líquido. Explicar

en qué consiste en cada caso.
6. Efectuar un comentario de la técnica de filtración.
41
PRACTICA Nº 9
EXTRACCIÓN
La extracción es la técnica para separar un producto orgánico de una mezcla o para

aislarlo desde sus fuentes naturales. El término extracción se define como
transferencia de una sustancia de una fase a otra. También pueden definirse como
la separación de unos componentes de una mezcla por medio de un disolvente.
Este método permite separar el producto que se desea y dejar en la mezcla los
productos secundarios o bien extraer los productos secundarios y dejar el principal.
Para lo cual hay que tener en cuenta la regla de solubilidad: “lo semejante disuelve
a lo semejante'', es decir que los solutos polares solo pueden disolverse en
solventes polares y/los no polares en los no polares.
Por extracción se aíslan y purifican numerosos productos naturales, como
Vitaminas, alcaloides, grasas, hormonas, colorantes, así como las sustancias que
intervinieron o se formaron en una síntesis orgánica.
Para conseguir una buena extracción debe utilizarse un disolvente con un buen
poder separativo, es decir que disuelve la sustancia que queremos extraer y no
disolvente y la sustancia a extraer.
Los métodos de extracción son 2 tipos:
• Extracción liquido – liquido
• Extracción solido – liquido
Coeficiente de reparto o de distribución:

A una temperatura dada, la relación que guardan las concentraciones del soluto en
cada disolvente, se denomina “coeficientes de distribución o de partición K”. Así si
(cA) es la concentración del compuesto en el disolvente (A) y (B) es la concentración
del mismo en el disolvente (B), entonces:
K= CA /CB = Coeficiente de distribución (a una temp. Dada)
42
La Cte. K. depende de la naturaleza del soluto, del disolvente y de la temperatura.
Los extractos obtenidos de soluciones acuosas, usualmente se desecan y luego se

filtran antes de eliminar el disolvente. Para desecarlos se utilizan diversas
sustancias higroscópicas, las cuales deben seleccionarse cuidadosamente para
evitar posibles reacciones con el material extraído.
Elección del disolvente
A la hora de elegir un disolvente para realizar ¡a extracción de un compuesto

orgánico disuelto en agua hay que tener en cuenta que debe cumplir los siguientes
requisitos:
a) Ser inmiscibles en agua
b) Polaridad de los compuestos, basándose en el principio general de lo similar

disuelve lo similar. Los solventes polares, disuelven solutos iónicos o
altamente polares; los solventes no polares disuelven a solutos apolares o
poco polares.
c) Disolver mejor que el agua la sustancia que se pretende extraer
d) Tener un punto de ebullición bajo de manera que pueda eliminarse

fácilmente.
e) No reaccionar con el producto que se quiere extraer
f) No ser inflamable ni tóxico.
2. COMPETENCIAS
Al finalizar la práctica los estudiantes.
• Conocen los disolventes utilizados en un proceso de extracción.
• Aprenden las diferentes técnicas de extracción.
43
• Aplican procedimientos para realizar extracciones a partir de fuentes
naturales y productos elaborados.
Embudos de separación 4 PZAS
Embudos corrientes. 4 PZAS
Probetas de 100 ml. 4 PZAS
Probetas de 25 ml 4 PZAS
Vaso precipitado 250 ml 4 PZAS
Erlemeyer de 250 ml 4 PZAS
Soporte universal 4 PZAS
Pipetas 10 ml 4 UNIDADES
Propipetas 4 UNIDADES
cuenta gotas 4 UNIDADES
viales 4 UNIDADES
Di cloro metano CSP ML
Agua destilada CSP ML
ENSAYOS DE EXTRACCIÓN DE LA CAFEÍNA DE DISTINTAS
a) Extracción de la cafeína del té: A una cucharadita de té finamente triturado

se le añaden 5 ml. de diclorometano y se calienta suavemente la mezcla
durante 2.3 minutos (hay que tener la precaución de no quedarse sin
disolvente). Separar la fase orgánica con un cuentagotas a un vial y dejar
evaporar parte del disolvente en vitrina.
b) Extracción de la cafeína de un café soluble: A una cucharadita de café soluble

se le añaden 10 ml. de diclorometano. Calentar suavemente durante 2-3
minutos, y filtrar en caliente o separar con un cuentagotas a un vial. Dejar
evaporar el disolvente (al menos en parte) en vitrina.
EXTRACCIÓN DE LA CAFEÍNA DE LA COCA COLA
44
1. Se vierte unos 200 ml. de coca cola en un vaso de precipitado de 250 ml. y
se agita con una varilla para eliminar la mayor cantidad de dióxido de.
Carbono.
2. En un embudo de separación se coloca 100 ml de coca cola, agregar 25 ml.

de diclorometano repetir el proceso una vez más.
3. Agitar suavemente (unas 3 veces) destapando el embudo-cada vez que se

agite. Después de esto dejar en reposo el embudo hasta la total separación
del líquido, en dos fases.
4. Separar la capa inferior que corresponde al diclorometano, recibiendo el

líquido en un balón, concentrar la muestra en el rotaevaporador, hasta
obtener un volumen de unos 3 a 5 ml. Trasvasar el mismo a un tubo de
ensayo y dejar que se evapore el disolvente.
5. TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRACTICA
100 minutos.
6. MEDICIÓN – CÁLCULOS Y GRÁFICOS
45
7. CUESTIONARIO
1. Haga un esquema de cada uno de los experimentos.
2. Que diferencie existe entre una extracción continua y otra discontinua.
3. En el proceso de extracción de la cafeína ¿Cuál es la fase orgánica, la

inferior o la superior?.
4. Dibuje la estructura de la cafeína y determine si hay algún protón acido, en

caso afirmativo.
5. Que características debe tener en solvente para una buena extracción
6. Que desventaja presentaría un disolvente cuya densidad fuese muy

semejante a la del disolvente
7. Investigar cual es el proceso de extracción de los alcaloides presentes en la

hoja de coca
8. ¿Qué es un agente desecante? Nombre 3 Ejemplos
9. Se tiene 2 compuestos: CH3 – CH = CHOH y CH3 –CH2 –COOH ¿Cómo se

los podría separar sabiendo que ambas son líquidos solubles entre sí?
10. Porque no deben eliminarse los disolventes por el drenaje ¿Cuáles es la

manera correcta de hacerlo?
46
PRÁCTICA Nº 10
CRISTALIZACIÓN
CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO
Los compuestos orgánicos, una vez aislados, deben caracterizarse para disponer
de una correcta descripción de los mismos, mediante el uso de técnicas que vamos
a estudiar ahora es necesario también proceder a su purificación ya que los
productos aislados según los procesos que hemos estudiado puede que no estén
completamente puros, por tanto, debemos proceder a su purificación que
obviamente, seguirán procedimientos distintos según sea la naturaleza del sustrato
(sólido o líquido). Procedemos posteriormente a la identificación de los mismos.
En primer lugar procederemos al aprendizaje de la técnica de purificación de
sustratos sólidos mediante el proceso de cristalización que es un método de
separación de cristales de una disolución de una sustancia o mezcla de sustancias.
Elección del disolvente
En base a la regla empírica “semejante disuelve a la semejante”, se
eligeexperimentalmente el disolvente a utilizar para la recristalización de una
sustancia.
Los disolventes orgánicos que más se emplean son: la ligroína, el cloroformo,
elalcoholetílico, el benceno y el ácido acético. Debido a su alta inflamabilidad, el
alcohol etílico y elbenceno deben calentarse siempre en un baño de María.
Preparación de la solución
La norma general es disolver el soluto en la menor cantidad posible de disolvente a
sutemperatura de ebullición. Para esto: coloque la sustancia pulverizada finamente
en unErlenmeyer, añada un trozo de material poroso y cubra el sólido con lo que se
juzgue comocantidad insuficiente del disolvente elegido para disolverlo.
Caliéntelo (en baño María o una placa eléctrica, en base a su punto de ebullición)
agitandola mezcla constantemente mediante la rotación del matraz. Cuando la
solución hierva,añada pequeñas porciones del disolvente sin dejar de agitar. Deje
intervalos de tiempoentre cada adición para dar oportunidad al soluto a que se
disuelva. Continúe añadiendodisolvente hasta que se disuelva todo el soluto a la
47
temperatura de ebullición de aquel.
Decoloración
La solución está coloreada, con frecuencia, por impurezas orgánicas de elevado
peso molecular, las cuales pueden existir naturalmente junto con el producto
deseado ohaberseformado como productos de descomposición o subproductos
durante la síntesis.
La ebullición durante cinco a diez minutos con unos gramos por litro de un carbón
decolorante (activado), suelen eliminar el color.
Debe añadirse la mínima cantidad posible de carbón puesto que también adsorbe
algo delproducto que interesa. La adición del carbón a una mezcla que esté
hirviendo o próxima asu punto de ebullición produce una ebullición violenta o la
formación de espuma.
Filtración de soluciones calientes
La solución caliente debe filtrarse de manera que no cristalice nada del soluto en el
papel filtroo en el embudo. Para ello se requiere una filtración rápida, con un mínimo
de evaporación, através de un embudo calentado y provisto de un papel filtro
doblado dos veces.
Enfriado
El objetivo del proceso de enfriado es conseguir la cristalización de la máxima
cantidad de lasustancia deseada con la mínima cantidad de impurezas. El proceso
debe efectuarse en unErlenmeyer cubierto con un vidrio de reloj para evitar la
evaporación.
El Erlenmeyer puedeenfriarse en agua fría o en un baño con hielo para acelerar su
enfriamiento y proporcionar unatemperatura más baja para el fina! de la
cristalización. El enfriamiento rápido favorece laformación de cristales pequeños; el
lento permite que crezcan cristales grandes.
Secado de los Cristales
Los cristales se sacan del embudo Buchner y se comprimen entre varias hojas de
papel filtro, acontinuación se los deja secar al aire o en un desecador que contenga
un agente desecanteadecuado.
48
2. COMPETENCIAS
El estudiante analiza ¡as propiedades de solventes para realizar una buena elección
y poder llevar a cabo la cristalización de solutos
Espatulas 5 Pzas
Pizetas 5 Pzas
Tubos de ensayo pequeño 30 unidades
Gradillas
5 Pzas
Mecheros de alcohol 5 Pzas
Pipetas 5 ml 5 Pzas
Varillas de vidrio 5 Pzas
Hornillas electricas 5 Pzas
Embudos de vástago corto 5 Pzas
Pizetas de papel filtro 5 Pzas
0.5g Acido benzoico 0.5 Gramos
Antraceno (C14H10)
Compuesto orgánico solido csp
25ml Benceno 25 ml
5 g Acetanilida 5 Gramos
4.1 Elección del disolvente para Ja cristalización
Ensayar las solubilidades del ácido benzoico (C6H5COOH), antraceno (G14H10) y
otro
compuesto sólido en agua, etanol y benceno. En la siguiente tabla indicar la fórmula
molecular y el punto de ebullición de dichos solventes.
Solvente Fórmula molecular Punto de ebullición Inflamabilidad
Agua
Etanol
Benceno
49
Proceder de la siguiente manera: con una espátula pequeña transfiera una pequeña
cantidad que parezca unos 0,1 g del sólido finamente pulverizado a un tubo de
ensayo pequeño y añada el disolvente gota a gota, con agitación continua (puede
usar una varillade vidrio). Cuando haya añadido más o menos 1 mi, observe la
mezcla. (1 mi de agua = 20gotas, 1m. De C6H= 25 gotas)
Si el disolvente frío ha disuelto todo el sólido no es adecuado para la cristalización.
Si no se ha disuelto todo el sólido, caliente suavemente la mezcla hasta el punto de
ebullición, agitando. Si se ha disuelto todo el sólido considérelo fácilmente soluble
en caliente. Si no se ha disuelto, añada más disolvente en porciones de 0,5 mi hasta
que sedisuelva todo el sólido o hasta que haya cerca de 3 ml del disolvente.
Si quedase algo de sólido sin disolver califíquelo de muy poco soluble y busque
otrodisolvente.
Si el sólido se ha disuelto en menos de 3 ml del disolvente caliente puede
considerarlo
como moderadamente soluble.
Observe y anote el grado de solubilidad en cada disolvente, en frío y en caliente.
Elegir el mejor disolvente para cada sustancia.
Tabular los resultados de las solubilidades de la siguiente manera:
Soluto Agua Etanol Benceno
Frío Ebullición Frío Ebullición Frío Ebullición
Acido
Benzoico
Antraceno
Muestra
En todos los casos en los que haya conseguido una solución del sólido en el
disolvente caliente, déjelas enfriar lentamente, rascando las paredes del tubo con
una varilla (lo cualproporciona minúsculos fragmentos de vidrio que actúan como
núcleos de cristalización). Observe la facilidad de cristalización y la cantidad de
cristales en cada caso. Anote lasproporciones relativas del sólido y de disolvente
50
que han dado los mejores resultados.
Sobre estos datos como base, elija el disolvente mejor para la cristalización de cada
sustancia.
4.2 CRISTALIZACIÓN DEL ÁCIDO BENZOICO.
1. Colocar en cada tubo de ensayo 0.1 gr de ácido benzoico (utilizar tres tubos
de ensayo)
2. agregar 1 ml de disolvente, agitar y observar. Utilizar como disolvente en un

tubo agua destilada, en otro etanol y en el tercero éter de petróleo.
3. Si el sólido no se disuelve, agregar 1 ml más de disolvente en cada caso.
4. Calentar a baño María cada uno de los tubos hasta que la disolución se
vuelva transparente.
5. Dejar enfriar y observar si en alguno de los tubos se forman cristales de ácido

benzoico, anotar y elegir el disolvente de cristalización.
6. Proceder al proceso de cristalización del ácido benzoico con el disolvente

elegido.
7. Filtrar y dejar secar los cristales de la muestra.
5. TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRACTICA

100 minutos
6. MEDICIÓN, CALCULO Y GRÁFICOS

Secar y pesar los cristales
Escribir las ecuaciones
7 CUESTIONARIO
1. Definir correctamente que es la cristalización.
2. Qué factores afectan la solubilidad de un soluto en un solvente dado?

Explique cada caso.
51
3. Porque para cristalizar una sustancia normalmente se disuelven en caliente?
Explicar.
4. Qué condiciones deben reunir el solvente para ser utilizado en una

determinada recristalización?
5. Como se procede para seleccionar el solvente adecuado.
6. Al finalizar el proceso de cristalización, después de secar los cristales de la

muestra, se debe calcular el porcentaje de rendimiento. ¿Por qué cree que
es necesario hacerlo? El dato que se obtendrán de información nos podrá
proporcionar?
52
PRÁCTICA Nº 11
CROMATOGRAFÍA

La cromatografía es una técnica fundamental en los laboratorios de Química
Orgánica tanto en su vertiente analítica como en su potencial para la separación de
mezclas. En esta sesión estudiaremos la capacidad separadora de la misma cuando
se han aislado mezclas de compuestos orgánicos con comportamiento similar, y
que, por tanto, no se han podido separar mediante un proceso de extracción. Esta
técnica constituye otra herramienta indispensable en el trabajo de los laboratorios
de Química Orgánica. Y como indica la bibliografía es el método más general para
la separación y purificación de compuestos orgánicos, tanto sólidos como líquidos,
a escala preparativa.
La cromatografía (del griego CHROMA = color y GRAPHOS = escritura)

esencialmente es un método físico de separación de los componentes de una
mezcla debido a la influencia de dos efectos contrapuestos retención y
desplazamiento (figura 9.1):
• Retención: Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una
fase estacionaria que puede ser un sólido o un líquido anclado a un
soporte sólido.
• Desplazamiento: Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por
una fase móvil, que puede ser liquido o fas.
Desplazamiento
Fase móvil Mezcla

A, B, C...
Retención
53
Fase estacionaria
Figura 9.1 Efectos involucrados en la cromatografía

La cromatografía supone, en esencia, la distribución de una mezcla de
componentes entre dos fases, una fase móvil y una fase estacionaria. La mezcla a
separarse se deposita sobre la fase estacionaria y la fase móvil atraviesa el sistema
desplazando a los componentes de la mezcla a distinta velocidad, dependiendo de
la magnitud de sus interacciones relativas con ambas fases.
La repetición sucesiva de las operaciones elementales de retención y
desplazamiento a lo largo del sistema cromatografico da lugar a la separación de la
mezcla original. El fenómeno de migración de los componentes de una mezcla
(muestra) a lo largo de la fase estacionaria, impulsado por la fase móvil recibe el
nombre de elusión.
Las ventajas de la técnica cromatográfica son:
- Conocer el número de componentes de una mezcla y su identificación por
comparación con patrones.
- Separar mezclas de compuestos tanto a pequeña como gran escala y como
método de purificación e identificación.
En forma general, el proceso cromatográfico consta de cinco etapas principales y
según la técnica empleada, habrá consideraciones especiales, las etapas son.
1. Armado de la placa o columna, que implica la distribución que adoptará la
fase estacionaria.
2. Siembra, se refiere al contacto inicial de la mezcla a separar con la fase
estacionaria.
3. Desarrollo o elución: es el pasaje de la fase móvil a través de la fase
estacionaria.
4. Revelado, implica la visualización de las zonas en que se encuentran los
compuestos ya separados, cuando estos no poseen color intrínseco.
5. Evaluación, implica poder expresar los resultados de forma que puedan ser
comprendidos.
54
En todos los tipos de cromatografía se emplea un soporte a fase estacionaria y un
elemento o fase móvil. La distancia total recurrida por el solvente o frente
cromatográfico y la distancia recorrida por un componente permite calcular el Rf
(rate factor) relación de frentes que tiene un valor constante para cada compuesto
permitiendo de esta manera su identificación.
Rf = Distancia recorrida por el compuesto = x .
Distancia recorrida por el disolvente y
En ocasiones y por necesidades de tiempo en los laboratorios de prácticas no se

lleva a cabo la separación cromatográfica, aunque sea una operación necesaria en
el trabajo de síntesis, como hemos indicado en párrafos anteriores. Por esta razón
hemos considerado oportuno incluir como ejemplo en un curso introductorio, de esta
manera damos una visión real del trabajo sintético en química orgánica.
Cromatografía en papel
La cromatografía en papel está relacionada con la de capa fina, en ella cambia la
ventaja de efectuar simples separaciones en hojas de papel filtro. Esta
cromatografía en general envuelve tanto los procesos de adsorción como de
partición. El papel filtro está constituido por fibras de celulosa que contienen el 20%
al 25% de agua absorbida que está unida por puente hidrógeno a los oxhidrilos
libres del polisacárido, y es el agua absorbida la que constituye la fase estacionaria
y la fase móvil es un disolvente o una mezcla de disolventes que se desplaza a lo
largo de ella.
La cromatografía en papel presenta dos ventajas: que es barata y que es útil para
sustancias muy polares. Sin embargo, el principal inconveniente es que el proceso
de elución es muy lento, lo que lo hace menos satisfactorio que cualquier otra
técnica analítica moderna.
Cromatografía en capa fina

En este tipo de cromatografía, el absorbente más común de uso es el gel de sílice
G (fase estacionaria), el cual se deposita formando una capa fina de espesor
uniforme (0.1-0.2 mm), sobre una placa de vidrio, plástico o una lámina metálica.
55
Sobre la placa se dibuja con lápiz una línea base a todo lo ancho (aprox. 1 cm de
distancia del borde inferior), sobre esta línea se deposita la mezcla a analizar con la
ayuda de un capilar. (figura 9.3).
2. COMPETENCIA
- Conocer las diferentes técnicas de cromatografía, suscaracterísticas y los
factores que en ella intervienen.
- Aplicar la técnica de cromatografía para separar colorantes orgánicos como
criterio de pureza e identificación.
1 Cámara cromatográfica 2 Pzas
2 Papel filtro Csp
3 Cromatofolio para TLC 3 1 Pzas
4 Probeta de 25 ml 5 Pzas
5 Capilares 5 Pzas
6 Regla 5 Unidades
7 - Hidroxido de sodio Csp Ml
8 - Fenoftaleína Csp Ml
9 - Metil naranja Csp Ml
10 Rojo de metilo Csp Ml
11 Etanol Csp Ml
56
12 - Agua destilada Csp Ml
13 Diclorometano Csp ml
14
57
Cromatografía en papel
1. En una tira de papel cromatográfico de 3 x 6 cm y trazar una línea con lápiz
paralela a la base de papel a una distancia aproximada de 1 cm.
2. Sobre la línea depositar las muestras a separar (líquida) con la ayuda de un
capilar, una de cada colorante y una que sea la mezcla de todos.
3. Colocar el papel filtro en el interior de una cámara cromatográfica (frasco de
vidrio), la que se debe encontrar previamente saturada con el sistema de
elución y cerrar herméticamente. Esperar que desarrolle el cromatograma.
4. Cuando el frente el solvente ha recorrido hasta 0.5 cm del borde superir, se
retira el cromatograma y con un lápiz señalar altura que ha alcanzado el
frente (calcular el Rf).
5. Dejar que se evapore el solvente y marcar las manchas que presenta el
cromatograma y determinar los correspondiente Rf.
6. Anote sus observaciones y saque sus conclusiones.
C C D = Cromatografía en capa delgada

Muestra. Tomate, zanahoria, pasto común, anaranjado de metilo, azul de metilo.
Extracción. Zanahoria, pasto común, triturar la mezcla con cloroformo o con etanol,
filtrar, concentrar la mezcla.
Placas cromatográficas.- Soporte = portaobjetos absorbentes = 10 gr de gel de
sílice + agua o cloroformo o tetracloruro de carbono. En un vidrio de reloj preparar
una suspensión bien dispersada y embadurnar el portaobjetos (que deben estar
limpios y secos previamente). Las placas embadurnadas se secan y activan
calentándolas a 80 – 110 ºC durante unos 15 minutos.
Aplicación. Mediante una micropipeta colocar la muestra formando un punto a una
banda por toques sucesivos a 1 a 2 cm de distancia del borde.
-La placa se coloca verticalmente o en un ángulo de 80º en una cámara
cromatográfica que ya contiene el disolvente apropiado. El disolvente debe quedar
a unos 3 – 5 mm de distancia del punto en que están las muestras.
58
Muestra Disolvente
Carotenos Cloroformo
Clorofila Benceno
Azul de metileno y Etanol + gotas de benceno
anaranjado de metilo
- El disolvente asciende por la placa arrastrando los componentes de la

muestra, cuando al frente del disolvente se aproxima a unos 10-15 mm del
extremo superior de la placa se retira esta.
- La placa se seca a temperatura ambiente.
- Examinar la placa visualmente, buscándose manchas coloreadas en seguida
se observa debajo de una luz ultravioleta.
- Anote sus observaciones y saque sus conclusiones.

- 100 minutos
6. MEDICIÓN, CÁLCULOS Y GRÁFICOS
Se miden las distancias recorridas por cada mancha y la recurrida por el disolvente.
El cociente de la distancia recorrida por la mancha sobre la segunda nos da el Rf
de la muestra y es una característica para cada sustancia.
7. CUESTIONARIO
1. Defina: a) cromatografía b) cromatografía de reparto, c) cromatografía de gases,
d) cromatografía de capa fina, e) cromatografía de participación.
2. Que se entiende por:
a) Cámaras cromatográficas, b) cromatofolio, c) sistema cromatográfico, d) soporte,
e) absorbente, f) eluyente, g) frente de disolvente.
3. Un colorante desconocido se piensa que pueda ser azul de metileno
59
¿Cómo se podría comprobar esta suposición utilizando un procedimiento basado
en una técnica cromatográfica?
4. Cuál es la importancia de conocer el valor de Rf de un compuesto o

elemento.
5. ¿Si la mancha no fuera visible, que proceso se tendría que realizar?
6. Efectúe un comentario de la cromatografía en papel.
7. ¿Cual es la función de un revelador en la cromatografía en capa fina?
60

Guía Lab 1-2022

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Catálogo

RE-10-LAB-244 MICROBIOLOGIA GENERAL v5.pdf ····················································································· 1

BIOSEGURIDAD EN LABORATORIOS DE MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.-

Los laboratorios de microbiología constituyen medio ambientes de trabajo

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.-

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA.-

1. Cite las normas de Bioseguridad recomendadas durante el trabajo con

MATERIALES E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.-

El trabajo en un laboratorio de Microbiología es significativamente diferente al de

6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS.-

.- Dibuje y cual su utilizada

MATERIALES USOS DIBUJO

TOMA DE MUESTRA PARA UN ANALISIS MICROBIOLOGICO CLINICO

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.-

➢ Aplica la metodología adecuada para la recolección de muestras

Orina chorro Mujeres: limpiar la zona con agua y El recipiente donde

Sangre venosa Limpiar el sitio de punción venosa Extraer sangre

Tracto Limpiar la piel antes de Se puede aspirar el

Tracto Limpiar el glande con agua y jabón.

Vías respiratorias Enjuagar con agua antes de la Pasar el hisopo por

La muestra recolectada es Esputo. El paciente debe

Extracción de una muestra de sangre

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA.-

6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS.-

COLORANTES EMPLEADOS EN BACTERIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.

6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS.-

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.-

Con el objeto de incrementar el contraste y facilitar la observación de las muestras

1. Primer colorante. Es un colorante básico que en contacto con las células

2. Solución mordiente. Fija las tinciones y aumenta la afinidad entre el

3. Agente decolorante. Es un disolvente orgánico, por ejemplo, alcohol-

4. Colorante de contraste. Es un colorante básico de distinto color que el

➢ Diferencia bacterias Gram positivas y Gram negativas, a través de la

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.-

Preparación de un frotis bacteriano

2. Con el asa de siembra previamente flameada transferir una pequeña cantidad

6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS.-

Cálculos de preparación de colorantes

1. Cual la utilidad de la tinción de GRAM para el diagnóstico microbiológico

3. Que cuidados se debe tomar en cuenta al momento de elegir el cultivo

4. Que cuidados se debe tomar en cuenta al realizar una tinción de GRAM

5. Cite 3 medios de transporte y cual su utilidad

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.-

La mayoría de las eubactacterias se encuentran englobadas en dos grandes

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.-

1. Preparar un frotis de los microorganismos a observar

2. Cubrir completamente con fucsina fenicada

3. Calentar la preparación cuidadosamente en un mechero Bunsen, sin que

4. Lavar con abundante agua el exceso de colorante.

5. Decolorar con la solución ácido-alcohol hasta que la muestra adopte un

6. Lavar con agua para detener la decoloración.

7. Teñir con azul de metileno (1 minuto)

8. Lavar con agua el exceso de colorante.

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA.-

6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS.-

Cálculos de dilución de porcentaje

1. ¿Por qué es necesario que la muestra no hierva durante la tinción fucsina

2. Cite las muestras empleadas para realizar una tinción de Zielh

3. Cuál es el colorante de contraste

4. Las bacterias acido alcohol resistentes de qué color se teñirán?

5. Cite como se prepara los reactivos.