Proyecto: Día 1

Poner los materiales en la

Los materiales son: pinzas, laminas de icopor, aluminio, tubo falcon, alfileres,
1. Esterilización: Materiales cabina de extracción entre
discos reloj, microespatula, beaker, agitador de vidrio, mortero entre otros..
20 a 30 minutos

En autoclave: se emplea como una olla a presión. 120 grados y

Medios de cultivo
15 o 20 libras de presión. (se hace despues de preparados)

Buffer de fosfato En autoclave (se hace

despues de preparado)

Se lavan en etanol con hielo (en su

2. Disección de la Poner 5 larvas en una lamina Al momento que esten quietas llevarlas el
superficie) dejan un momento y
larva: de icopor y punzarlas estereoscopio para hacer la debida extracción.
finalizar el lavado

Con ayuda de las pinzas transferir 5 intestinos al medio En el mortero esteril se

minimo de sales (sln madre) (25 mL en el tubo falcon), de ahi lavan con buffer de Con pinzas esteriles se toma el tracto intestinal
se toma 2ml para el medio PET en polvo, 2ml para medio fosfato de sodio y se lleva a un mortero esteril
PET en lamina y 2ml para medio glucosa Se dejan incubando esterilizado con ayuda
por 7 días a 120 rpm (shaker) a 37°C de una micropipeta

se hace repeticiones con otros 5

intestinos y se siembran en un
nuevo medio PET polvo y lamina
tambien se dejan incubando 7 dias

Agregar 200 ml de Agua Suspender las siguentes sales: 60mg de Cloruro de amonio, 30mg de
3. Preparación de la destilada en el beaker de 1000 cloruro de sodio, 180 mg de KH2PO4, 360mg de NaHPO4, 9 mg de Ajustar a pH 7
solución madre: ml con agitación cloruro de calcio, 30 mg de sulfato de magnesio

Repartir la solución
para los tubos falcon
En un frasco shot con agitacion y Agregar 50mg de que serán para
4. Preparación
calentamiento (para diluir la glucosa y 50 ml de la preparar los medios
control glucosa:
glucosa) solución madre