Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios No.

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Nombre del submódulo:

Realiza los análisis físicos, químicos y microbiológicos pertinentes.

Nombre de la practica:
Practica experimental “Conteo de colonias en placas de jugo de fruta”

Nombre del docente:

Mayra Guadalupe Fuente Gómez

Nombre del alumno:

Silvia Paola Ibarra López

Grado y grupo:
5°D

Fecha de entrega:
27/11/2021

La Paz, B.C.S. MEX.

Objetivo:

El objetivo de esta práctica es hacer una siembra microbiológica con diferentes tipos de
diluyentes, observarlos y analizarlos para ver si hay o existe un crecimiento bacteriano
tomando en cuenta los factores ambientales, entre otros.

Material:

Equipo:
o Estufa
o Marcador de punta fina permanente

Medio de cultivo:
o 9 tapas de garrafón
o Plástico Film
o 1 cuchara de metal
o 1 cacerola pequeña (1 litro almacenamiento)
o 1 olla (2 litros o más)
o 1 recipiente graduado para medir volumen.
o 1 sobre de gelatina
o 350 ml de agua.

Diluyente
o Sal (8.5 g)
o Cubo de Consomé de pollo (1/4 parte)
o 2 vasos de vidrio
o 2 jeringas de 5ml
o 1 litro de agua.

Muestra de jugo en buen estado y

descompuesta
Procedimiento:

1. Comenzar desinfectando el área de trabajo.

2. Reunir todos los materiales de la etapa 1 (medio de cultivo)
3. Empezar lavando muy bien las tapas con agua y jabón.
4. Tomar la olla y calentar 2 litros de agua hasta ebullición. Una vez llegado a este punto,
apagar la estufa y sumergir las tapas.
5. Por otro lado, con nuestro biberón (que hará la función del recipiente graduado), medir
350 ml de agua y agregarlos en otra cacerola. Calentar hasta ebullición.
6. Para preparar la gelatina, abrir el sobre y añadir poco a poco. Mezclar con la cuchara
de metal hasta que se disuelva completamente.
7. Dejar enfriar por unos 15 minutos.
8. Sacar las tapas del agua caliente y dejar secar en un lugar limpio por unos minutos.
9. Cuando las tapas se encuentren secas, repartir el liquido de la gelatina uniformemente.
10. Dejar enfriar las tapas con la gelatina en él, y cortar 9 pedazos de papel film
11. Cubrir las 9 tapas con el papel film e introducirlas en el refrigerador.
12. Para preparar el diluyente, calentar un litro de agua hasta ebullición y agregar ¼ del
cubo de consomé de pollo. Añadir los 8.5 gramos de sal y revolver bien hasta que
quede disuelto.
13. Con la jeringa, tomar 9 ml de la solución diluyente y agregarla a nuestros 6 vasos de
plástico, limpios y desinfectados.
14. Tomar otra jeringa y medir 1 ml del alimento que analizaremos (en este caso el jugo en
buen estado) y lo colocarlo en un vaso con los 9 ml de la solución del diluyente,
agitamos y esta será nuestra dilución 1/10. De la dilución 1/10, tomar 1 ml y agregarlo
a otro vaso con 9 ml, agitar y aquí obtendremos nuestra dilución 1/100. Repetir el mismo
paso hasta obtener nuestra dilución 1/1000.
15. Rehacer el paso anterior con el alimento a analizar (en este caso el jugo que se
encuentra en mal estado).
16. Para hacer la siembra microbiología, es importante sacar las tapas de gelatina del
refrigerador y con la jeringa, agregar un ml de las muestras (1/10, 1/100, 1/1000 del jugo
en buen estado) en cada tapa y repetimos este proceso con el jugo en mal estado.
17. Dispersar la muestra con movientes circulares por toda la superficie de la placa y cubrir
con el papel film.
18. Con un rotulador negro, marcar las tapas que contienen las siguientes diluciones:
Placa testigo (gelatina)
Muestra sin diluir (jugo en buen estado y jugo en mal estado)
Dilución 1/10, 1/100,1/1000 (jugo en buen estado)
Dilución 1/10, 1/100, 1/1000 (jugo en mal estado)
19. Introducir las placas en el refrigerador y dejar por unos 3 días. Tomar notas sobre el
proceso.
Anexo 1
Diagrama de flujo
Cálculos:
En esta practica la formula que utilizamos para calcular la concentración microbiana del
alimento es la siguiente:
UFC/ml= (Numero de colonias por placa) (Factor de dilución)

Nombre de la placa UFC

Muestra testigo 0

Muestra sin diluir del jugo en 0

buen estado

Dilución 1/10 0

Dilución 1/100 0

Dilución 1/1000 0

Muestra sin diluir Jugo en 0

mal estado.

Dilución 1/10 0

Dilución 1/100 0

Dilución 1/1000 0

Resultados:

Debido a que en esta practica no se obtuvieron resultados como tal, considero que hubo
factores que alteraron el crecimiento como los siguientes: Creo que el principal fue la
temperatura, ya que en la práctica decía que tenía que encontrarse en una temperatura
ambiente, pero si dejaba afuera las tapas con la gelatina se iban a derretir. Debido a lo
anterior estuvieron los tres días adentro del refrigerador a temperaturas bajas las cuales no
fueron óptimas para que hubiera un crecimiento de colonias. Lo siguiente que puedo
rescatar es puede que la gelatina no tuviera los nutrientes necesarios para que creciera o se
desarrollara algo ahí, en caso de tener un medio de cultivo ahí si crecerían microorganismos
Reflexión

Contesta las siguientes preguntas:

• ¿Qué aprendiste}
Aprendí a preparar diluciones (1/10,1/100, 1/1000) y considero también que con la teoría que
se nos proporcionó a contar colonias, aunque no haya podio hacerlo debido a mis resultados
• La práctica ¿te fue de ayuda? Explica tu respuesta.
Si, en efecto me ayudó a entender cosas que creo que simplemente leyendo no las hubiera
entendido al cien por ciento ya que aquí lo estamos llevando en acción. Puedo decir que si
tengo que volver a hacer una práctica como está ya no surgirían tantas dudas como esta
primera vez.
• De la escala del 0 al 10, ¿qué grado de dominio tienes sobre el tema?
Considero que un 8, porque aun me faltó el contar las colonias, aplicar la formula y plasmar
los resultados bien en una tabla o grafica.
• ¿Qué puedes hacer para dominarlo al cien por ciento?
Creo que leer más acerca del tema, porque aun cuando no hubo un crecimiento bacteriano
en mis tapas, sigue estando la pregunta de ¿Por qué no tuve resultados?, y claramente esto
se debe a ciertos factores, los cuales algunos conozco y otros no.
• ¿Cómo te sentiste haciendo esta práctica en casa?
Me sentí bien, creo que el hecho de usar la bata, los guantes y seguir las normas como si
estuviera en el laboratorio de la escuela hace que se sienta mas real; Aunque no tuve los
resultados que esperaba, aprendí como hacerlo de manera autónoma y esto me sirve de
preparación para el futuro.

Conclusión:
Para finalizar con esta práctica, he de decir que no era lo que esperaba en cuanto a los
resultados. El objetivo era precisamente observar y analizar si había algún crecimiento de
colonias, el cual al pasar de los días no hubo rastro de ninguno. Esto me llevó a pensar que
todo el desarrollo de la práctica que había hecho estaba mal. Después de estudiar un poco
más sobre este tema llegué a la conclusión de que muy probablemente no hubo un
crecimiento de bacterias porque la temperatura no era la adecuada o la gelatina no tenia
los nutrientes necesarios para que creciera algo ahí.
Bitácora:

Domingo 21 Lunes 22 Martes 23 Miércoles 24 Jueves 25 Viernes 26

6:57 p.m. 12:00 pm 9:48 am 1:06 p.m. 8:12 a.m.

Inicié la He sacado Este es el primer Las tapas
práctica las tapas del día que están siguen de la Este es el
empezando refrigerador las muestras en misma manera, último día en
por el medio Lucen bien el refrigerado, creo que se el que estaré
de cultivo y (la gelatina aparentemente debe a que evaluando
siguiendo las ya ha siguen como las están en el las tapas y al
instrucciones cuajado). dejé la noche refrigerador y parecer
al pie de la anterior. no hay como siguen de la
letra. Esperaré que un cambio misma
algunas horas de forma.
más a ver si hay temperatura.
algún cambio.
8:10 p.m. 12:25 p.m. 10:07 pm. 11:00 pm 10:30 pm
Terminé la Estoy No hay ningún Las he checado Es viernes en
primera haciendo la crecimiento de por ultima vez y la noche. El
parte de la dilución del colonias (tal vez no presentan un día anterior
práctica y ya consomé de necesiten más crecimiento se supone
introduje las pollo. Lo tiempo). bacteriano. que seria el
tapas en el separé en - ultimo que
refrigerador. vasos y tomaría en
Las dejaré agregué las cuenta, pero
ahí toda la muestras del quise esperar
noche hasta jugo bueno un poco más
que cuaje la y el jugo a ver si había
gelatina. malo. algún
Concluí con cambió y no
lo solicitado. fue así.
 Anexos
Anexo 1