INFORME #3 MECANISMO DE ACCIÓN DE LAS ENZIMAS

MARÍA JOSÉ AGUDELO CABRERA

HERNANDO ACOSTA LOMELÍ
HANI NICOL PINO MURCIA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
LABORATORIO DE BIOLOGÍA

2022
 RESUMEN

Se determinó experimentalmente los

efectos que tienen sobre la actividad
enzimática, la temperatura y el pH,
analizando su actividad mediante la
absorbancia medida con espectrofotómetro
al colocarle un sustrato y realizar cambios
en dichas variables utilizando la enzima ABSTRACT
fosfatasa alcalina, se observó un notable
The effects they have on enzymatic
cambio en la actividad enzimática al cambio
activity, temperature and pH were
de temperatura y pH y se determinó así
experimentally determined, analyzing their
mismo los valores óptimos de estas dos
activity by means of the absorbance
condiciones para dicha enzima.
measured with a spectrophotometer when
Palabras clave: Absorbancia, enzima, placing a substrate and making changes in
pH, temperatura said variables using the enzyme alkaline
phosphatase, a notable change was observed
in the enzymatic activity to the change of
temperature and pH and the optimal values
of these two conditions for said enzyme
were also determined.

Keywords: Absorbance, enzyme, pH,

temperature.
 INTRODUCCIÓN
Las enzimas son proteínas altamente
especializadas que tienen como función la
catálisis o regulación de la velocidad de las
reacciones químicas que se llevan a cabo en
los seres vivos. En las piñas hay una enzima
llamada bromelina que es la responsable de
la ruptura del colágeno, la Bromelina es una
enzima que cataliza la hidrólisis de los
enlaces peptídicos en proteínas, es una
glicoproteína que se encuentra en la piña y
pertenece a la familia de las bromeliáceas.
Esta enzima se encuentra distribuida tanto
en la pulpa, cascara y el tallo de la piña. Su
pH óptimo se encuentra en un rango de 5 a
8, tiene un peso molecular de 24.5 kDa,
compuesta por cinco enzimas proteolíticas
que se diferencian entre sí por su actividad
de óxido reducción (Cisteina, Actina,
Miosina, Elastina y Reticulina), contiene
212 aminoácidos reductores, incluyendo 7
cisteínas; actúa de manera preferencial sobre
los aminoácidos básicos y aromáticos de las
proteínas, principalmente sobre cadenas de
péptidos cortos, su tolerancia térmica es
baja. La enzima cuenta con la facultad de
digerir aproximadamente 1,000 veces su
peso en proteínas, llegando a tener una
actividad enzimática análoga.
En la saliva existe una enzima denominada
Alfa amilasa la que se encarga de desdoblar
o romper al almidón y a otros polisacáridos
ingeridos en la dieta, hasta producir
moléculas más pequeñas como la glucosa.
La gelatina está hecha de una proteína
llamada colágeno. Cuando la gelatina se
calienta y después se enfría, forma una masa
semi-sólida.
METODOLOGÍA
- Se prepara una tabla para
anotar datos con sus respectivas observaciones.
A la izquierda, prepara una lista de: a) tubos de
ensayo del 1 al 6, b) el sustrato-gelatina o
almidón, c) la sustancia que se añade, d) los
cambios.
- En un beaker, se recoge la
saliva de los compañeros hasta completar 5 ml.
Se añade 5 ml. de agua destilada a la saliva.
- Solicite al profesor 3 tubos de
ensayo, cada uno con 2 ml. de gelatina
solidificada. Rotule los tubos 1, 2 y 3. Añada 2
ml. de solución de saliva al tubo 2. Al tubo 3,
añada 3 ml. extracto de piña.
 - Tres minutos después, pique intervalos de 1 min. Hasta que se observaron

suavemente los tubos de ensayo con un cambios. Después se anotan los datos, y se

agitador. Se limpió el agitador cada vez que se lavan los tubos de ensayo.

cambió de tubo. Y se repitió dicha actividad a

ANÁLISIS DE RESULTADOS Y DISCUSIONES

Experimento 1
Las enzimas son moléculas orgánicas que actúan como catalizador de las reacciones
químicas, estas están compuestas de bloques de aminoácidos; Bender (1977). En la ilustración 1,
en el tubo de ensayo no se observó ninguna reacción porque la gelatina al adicionarse agua solo
funciona como un solvente mas no se lleva a cabo ninguna reacción , en la ilustración número 2,
al cabo de 8 minutos de estarla agitando cada lapso de tiempo, la saliva se disuelve de una
manera más rápida con la gelatina a comparación de la gelatina con agua, esto ocurre ya que la
saliva tiene la capacidad de mejorar el contenido de agua del sistema, aumentando así el área de
superficie disponible para la difusión de compuestos de sabor. Este efecto se encontró para el gel
de gelatina ya que era un gel rígido y la adición de saliva parece nivelar la influencia de la
rigidez del gel; (Boland et al. 2004). En la ilustración 3, después del tiempo transcurrido la piña
se disuelve de una manera mucho más rápido a comparación de los otros tubos de ensayo, la piña
contiene una sustancia química llamada bromelina, que contiene dos enzimas capaces de digerir
las proteínas, llamadas proteasas. Jell-O y otras gelatinas obtienen su estructura de enlaces
formados entre cadenas de colágeno, que es una proteína.
Cuando agrega piña a Jell-O, las enzimas rompen los enlaces en
el colágeno tan rápido como se forman; García (2012)

Ilustración 1: El tubo de ensayo 1 contiene, el tubo 2 gelatina

más agua, gelatina más solución de saliva y el tubo 3 contiene
gelatina más jugo de piña

Experimento 2
El almidón es un glúcido formado a partir de la unión de una gran cantidad de moléculas de
glucosa. El tubo 1, el Lugol con el almidón, el almidón es un carbohidrato que se encuentra en
las plantas, consiste en dos tipos diferentes de polisacáridos que se componen de unidades de
glucosa que están conectadas de dos maneras diferentes. Una es la amilosa lineal y la otra es la
amilopectina ramificada, la amilosa es el compuesto responsable del color azul; Sheri Madhu
(2016), en el tubo 2 la saliva con el lugol tomó una coloración azul, un poco más tenue que la
anterior, esto sucede ya que La amilasa salivar es una enzima que hidroliza al almidón
rompiendo sus enlaces y liberando glucosa y maltosa, haciendo que esta tome la coloración azul.
En el tubo 3, el extracto de piña con el almidón tardó un poco más en tomar su coloración y en
reaccionar, finalmente esta se torna de azul que a comparación con los otros dos tubos esta es de
un azul más fuerte.

Ilustración 2: El tubo de ensayo 1 contiene almidón y lugol, el tubo2 almidón con

solución de saliva y dos gotas d elugol, el tubo 3 contiene almidón con extracto de piñas más
dos gotas de lugol.

TUB SUSTRATO SUSTANCIA CON REACTIVO

O ENZIMAS
NO. CAMBIO
GELATIN ALMIDÓ SALIV EXTRACT LUGO BENEDIC
S
A N A O DE PIÑA L T
 La
1 X gelatina
se deshizo
con
mayor
facilidad.

Al
2 X X mezclar
saliva con
gelatina
no sucede
nada
porque la
gelatina
es una
proteína,
la saliva
tienen
ptialina
que
degrada
azúcar.

La piña se
asentó al
3 X X fondo del
tubo y
formó una
capa en el
 inicio.

Color azul
4 X X oscuro
casi
negro.

Luego de
agregar el
5 X X X Lugol se
hizo una
sustancia
oscura.

Luego de
agregar el
Lugol
quedó una
sustancia
6 X X X muy
clara, se
añadieron
tres gotas
más de
Lugol
para
lograr una
sustancia
oscura.
 CONCLUSIÓN

Se logró evidenciar cómo actúan las de la forma en que se esperaba ya que la

enzimas en cada uno de los reactivos que se
manejaron, se comprobó que la piña y la
gelatina reaccionaron de una forma más
rápida ya que la piña descompone de una
manera más rápido la gelatina, en el
experimento número dos en el tubo 3, de
almidón junto con la piña, no reaccionaron
reacción se tornó a un color diferente de lo
esperado, por lo cual se le agregó más lugol,
podemos decir que esto ocurrió por la
velocidad de reacción, también puede que el
lugol no atrapó las enzimas de la piña y la
temperatura que tenían los tubos.

CUESTIONARIO

1. El color observado en el tubo 4 indica la presencia de almidón. ¿De los tubos 5 y

6 cuál no muestra la presencia de almidón?
Rta: el tubo 5 no muestra almidón el lugol fija el almidón.
2. ¿En cuál de los tubos con gelatina, es la superficie distinta a la de la gelatina del
tubo 1?
Rta: en el tubo 3 se puede observar que la superficie es diferente ya que está
medio coagulada.

3. Cuál sería la fuente de la enzima que reacciona con el almidón y cuál la de la

proteína?
4. Identifique los sustratos usados en esta práctica.
5. Cómo muestra esta actividad los efectos de las enzimas sobre los sustratos?
6. ¿Qué otros factores, además de la temperatura y el pH, influyen en la actividad de
una enzima?
7. Cite cinco enzimas con los sustratos respectivos sobre las cuales actúan.
 BIBLIOGRAFÍA
Bender, M. L., & Brubacher, L. J. (1977). Catálisis y acción enzimática. Reverté.
García TBE, Delfín SO, Lavandero EAM, et al. Principales proteínas salivales:
estructura, función y mecanismos de acción. Revista Habanera de Ciencias Médicas.
2012;11(4):450-456.
Sheri Madhu, Hayden A. Evans, Vicky VT Doan-Nguyen, John G. Labram, Guang Wu,
Michael L. Chabinyc, Ram Seshadri, Fred Wudl, Infinite Polyiodide Chains in the
Pyrroloperylene-Iodine Complex: Insights into the Starch -Complejos de yodo y perileno-yodo ,
Angew. química En t. ed. 2016 , 55 , 8032–8035.
DOI: 10.1002/anie.201601585