BAB I

1.1 Latar Belakang

Coenzyme Q10 (CoQ) adalah lipid redoks-aktif di mana-mana dalam membran sel
dan lipoprotein pengangkut kolesterol. Ini terdiri dari cincin benzokuinon dan poliisoprenoid
rantai samping yang terdiri dari sepuluh unit pada manusia. CoQ terlibat dalam beberapa
fungsi biologis. Ini memainkan peran penting dalam fungsi rantai pernapasan mitokondria
karena mengangkut elektron dari kompleks I dan II ke kompleks III. CoQ juga bertindak
sebagai antioksidan membran yang kuat dan terlibat dalam banyak proses seluler lainnya,
termasuk modulasi pori-pori permeabilitas mitokondria dan aktivasi mitokondria
memisahkan protein.

Defisiensi CoQ dapat didefinisikan dengan penurunan kadar CoQ dalam sampel
biologis. Mengingat fungsi esensialnya, defisit dalam molekul ini dikaitkan dengan berbagai
kelainan bawaan atau kondisi patologis yang didapat, yang diklasifikasikan sebagai primer
(karena mutasi) pada gen yang terlibat dalam biosintesis CoQ) atau sekunder (karena mutasi
pada gen yang tidak terkait dengan biosintesis CoQ atau penyebab nongenetik) defisiensi
CoQ. Dengan demikian, demonstrasi biokimia defisiensi CoQ dalam sampel biologis
memiliki nilai klinis, karena memungkinkan inisiasi pengobatan dini dan dapat mengubah
riwayat alami pasien dengan Defisiensi CoQ.

Konten CoQ dapat dianalisis dalam spesimen biologis manusia yang berbeda, di
mana: plasma, otot rangka, dan fibroblas kulit yang dikultur adalah sampel yang paling
umum untuk mendeteksi status defisiensi CoQ. Analisis sampel lain juga telah dilaporkan,
seperti sel urin, sel mononuklear darah (BMC), trombosit dan cairan serebrospinal (CSF).

Prosedur standar emas untuk identifikasi biokimia defisiensi CoQ adalah: pengukuran
kadar CoQ dalam sampel biologis yang disebutkan di atas dengan kromatografi cair kinerja
tinggi (HPLC). Dua sistem deteksi utama biasanya digunakan: detektor ultraviolet (UV) dan
elektrokimia (ED). Metode pertama yang dilaporkan didasarkan pada deteksi UV, di mana
CoQ diukur pada 275 nm. Sebagai ubiquinol (bentuk CoQ yang dikurangi) tidak dapat
ditentukan dengan prosedur ini karena absorptivitas molar, metode HPLC-ED dikembangkan.
Banyak dari mereka telah dilaporkan, baik menggunakan detektor koulometrik atau
amperometrik. Beberapa metode berdasarkan pada kromatografi cair-tandem spektrometri
massa (LC-MS/MS) juga telah dilaporkan, dengan hasil yang sebanding dengan HPLC-ED
 mengenai selektivitas dan sensitivitas. Prosedur lain, termasuk pengukuran fluoresensi dan
chemiluminescence, memiliki: juga telah dikembangkan.

HPLC-ED memiliki keuntungan yang signifikan karena merupakan prosedur yang

lebih sensitif daripada UV; dengan demikian, ini menghasilkan hasil yang lebih akurat, dan
hanya jumlah sampel minimal yang diperlukan. Selain itu, ini memungkinkan deteksi
simultan dari bentuk tereduksi dan teroksidasi CoQ (ubiquinol dan ubiquinone, masing-
masing). Selama bertahun-tahun, banyak penelitian mengandalkan penggunaan ESA
Coulochem ED dan sel analitik dan penjaganya untuk tujuan yang berbeda, termasuk
penentuan CoQ. Namun, karena produksi sel elektrokimia dihentikan, detektor ini tidak lagi
tersedia di sebagian besar laboratorium.

1.2 Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk menstandarisasi prosedur HPLC-ED baru untuk penentuan
CoQ menggunakan Peralatan Thermo Scientific dengan sel elektrokimia baru, detail semua
aspek teknis dan pemecahan masalah, dan menilai kinerjanya dalam spesimen biologis yang
berbeda. Kita juga bertujuan untuk menilai partisipasi kami dalam skema kontrol kualitas
eksternal (EQC) baru untuk penentuan CoQ plasma dan bandingkan hasil kami dengan yang
diperoleh dengan menggunakan metode LC-MS/MS.
1.3 Manfaat Penelitian