128 ANALES DE QUIMICA vou. 75 DITERPENOS, TRITERPENOS Y FLAVONAS DEL EUPATORIUM JHANII (*) A. G, GONZALEZ, J. M. ARTEAGA, B. M. FRAGA y M. G, HERNANDEZ Departamento de Quimica Organica y Bioauimics Universidad de La Laguna, Instituto de Productos Naturales Organicos, CS.L.C,, Tenerife ecibigo & 6 de junio de 1978 ESUMEN.—De! Eupatorim shanti, 2 abtuvo un nuave diterpeno, el scido hnico,y se determing su structure como Il. También se aislaron lar conocidae surtanciae cerpénicas sentato de lupe, upenona, lupeel, sitosterol y el ido hardwickiico,y ls #lavonassalvigenina, 3. Om eupatorin, SUMMARY. —Feom Eupatorium phan! we have obta! Iheupatorina y 18a new diterpane,jnanic aed, determining Its structure as IIL We have also isolated the known terpene substanees lupeo! acetate, lupenone, lupeol, sitostero| and harawickiicaeid, and the Hlavones Salvigenin, 3 Omethyleupatorn and eu INTRODUCCION Dentro de la familia de las Compuestas el torium se caracteriza por contener lactonas sesquiterpéni ‘cas con actividad antitumoral (1) (2). También se han aislado de especies de este género, sustancias de tipo flavonoide (3). En anteriores publicaciones nosotros he- mos dado cuenta del aislamiento a partir del Eupatorium {hanii de cinco nuevos diterpenos con esqueleto de dxi de labdano (4) y de una nueva lactona terpénica (5). En ‘esta comunicacion presentamos los resultados finales obte- niidos en el estudio de esta especie. A efectos de descrip cién utilizaremos el orden diterpenos, triperpenos y fla- Del Eupatorium jhanii hemos obtenido dos acidos di ‘terpénicos que fueron separados en forma de sus metil ‘steres. El primero de ellos es un producto aceitoso de férmula empirica C21H3003 (M" 330) a]p~ 99, que pre- senta en el IR bandas a 1.500 y 875 cm! que son caracteristicas de un anillo furdnico f-sustituido. Esta asig- rnacién se confirma en el espectro de AMN en el que se observan sefiales a 7,40 (2H, m) y 6,35 (1H, m) tipicas de dicho agrupamiento. Este espectro muestra ademés la pre- sencia en la molécula de un protén vinilico a bajo campo, dot metilos angulares y de un metilo terciario. El espectro de RMN de '°C confirma los anteriores asertos; asf las resonancias a 143,7, 138,4, 125.6 y 110,9 son caracteristi- 28 del anillo furénico. (7) Parte 40 en in sarie “Quimica de Int Compuestas”. Pare parte 9 ver: A. G. Gonsias y 8, Garcia Matteo, Estos ANALES, 74,1121 (1978) Revisads a bibliograffa quimica se encontré que nues- tro dcido podia tratarse del dcido hardwickiico (1), (6), (7), (8). Comparacién de los datos espectrales con aque- Hlos obtenidos del metil ester de una muestra auténtica establacieron su identidad. Et segundo de lot dcidos aislados como metil ester es también un diterpeno de formula empirica C3 sH300s. En su espectro infrarrojo se observan las absorciones ca racter‘sticas de un anillo furdnico, de dobles enlaces y del ‘grupo ester, El espectro de RMN proténica muestra sefa- les asignables aun furano, a dos dobles enlaces, uno endociclico y otro exociclico, a un metilo sobre un doble enlace y a un metilo angular. El espectro de RMN de '°C (tabla I) presenta sefiales ‘caracteristicas de un ciclo furdnico, tres singuletes que ‘corresponden a carbonos cuaternarios, dos de los cuales forman parte de dos dobles enlaces, dos dobletes debidos 2 carbonos terciarios, uno de ellos originado por un carbo: ‘no olefinico, y ocho tripletes metilénicos, uno de los ‘cuales pertenece a un doble enlace exociclico. Asimismo se observan les sefales correspondientes a un grupo carbo nilico y @ un agrupamiento OCH. 'No se ha encontrado descrito en la literatura ningun producto con las caracteristicas anteriormente seflaladas, para esta sustancia, por lo que debe tratarse de un nuevo diterpeno, al que s@ le denominé dcido jhénizo. Teniendo fen cuenta las consideraciones expuestas anteriormente se le asigné la estructura III, El doble enlace metilénico debe1979 ‘estar en C-10 y no en C8 por consideraciones biogenéti cas, pues es més probable que este ultimo que no ha intervenido en la ciclacién retenga la misma forma y ‘configuracién que el precursor ¢rans-geranil-geraniol. El compuesto XIV relacionado biogenéticamente con 1 écido jhdnico, ha sido aislado por Bohimann y col, del Hebecliniurm macrophylum, una especie que pertenece tambien a la tribu Eupatorieve (Compuesta). Sustancias con estructura semejante, pero de tipo sos ‘uiterpénico, come son el trans-y-monocielofarnesol (XVI ¥ el acide presiccanochroménico (XVI) han sido aislados del honge Het minthasporum siccans D. Por reduccidn del metil éster del acido jhanico (IV) con hidruro de aluminio y litio se obtuvo el alcohol V que por foxidacién con el clorocromato de piridina condujo at aldehido VI. Por reduccian de Huang-Minlon de este citi ‘mo se Hlagé al compuesto VII. El espectro de RMN proto: rica de VII presenta las sefales correspondientes al grupo gem-dimetilo 2 0,84 y 0,92, y el doble enlace exociclico a 4,76 y 4,56 5. Estas son las mismas posiciones de resonan- cla que presenta el trans-7-monociclofarnesol (XV) para dichos agrupamientos, En la tabla | damos las asignaciones provisionales de las posiciones de resonancia de los carbonos en el espectro de RMIN del metil éster del dcido jhénico. Estas se han establecido teniendo en cuenta los desplazamientos quimi cos, [a multiplicidad observada y la comparacién con los spectros de otras sustancias de estructura establecida TABLA! 5 del metiléster del dcido jhénico (ppm desde ef TMS) Carbono Desplazamientos ‘Multipticidad 1 28,62 t 2 2430 t 3 379 t 4 49,4 5 5 48,2 a é 344d t 7 34,16 t 8 135.9 5 9 124,0 d 10 147.7 . u" 2670 t 2 52a t 3 124.2 5 4 110.5 d 15 138.5 d 16 143,2 dq v7 160 c 18 19,1 c 19 78 5 20 109,3 t ts asignaciones pueden ser intercambiades. Los triterpenos obtenidos de esta especie pertenecen a la serie del lupeno. En los espectros de RMN se puede ‘apreciat la presencia del doble enlace metilénico y det ‘grupo metilo sobre este enlace. Por comparacién con muestras auténticas se identificaron como el acetato de DITERPENOS, TRITERPENOS ¥ FLAVONAS DEL "EUPATORIUM’ 129 lupeol, la tupenona y el lupeol. Cuando se realizaron los espectros de RMN de las muestras triterpénicas brutas, s2gun fueron abtenidas de las columnas cromatograficas se puede apreciar también la existencia en muy pequefia cantidad de los correspondientes triterpenos amirénicos. Todas {as flavones aisladas prosentan on RMN el protén hidroxilico del C:5 asociado con el grupo carbonilico de fa ‘ypirona, También se observa la presencia en el anillo A de dos grupos metoxilo en las posiciones 6 y 7. Asi tenemos que de su estudio espectral se deduce que solo se diferen. cian entee ellas en el sustituyente en el C3. Por compara cién con los espectros obtenidos de muestras auténticas se identificaron como la salvigenina (Xt) (12), la 3-O-metil- eupatorina (X11) (3) y la eupatorina (XIII) (3). Estas flavonas han sido también aisiadas anteriormente de espe: cies del género Eupatorium (13) PARTE EXPERIMENTAL, Lot auntos de fusion so determinaron ea un Bloque de Kotler, ¥ astn sin eorregi. Las eristalasciones se relizaron en retanol Iientrat no #8 indique lo contrario. Las actividades optics: 50 fhidieron en CHCl, #n un polarimetra Parkin-Eimer 11. Los spectros se relizaren en Ios siguientes aaratos: [Ren un 267, los UWien EtOH en un 402 y los de RMN protonica en CDCI en un 8-128 y en un 8-32, todos ellos do Perkin-Elmer; los de AMIN de C8 en'un Varign CFT-20 y los de masas en un Howlett Packard 5930°A, dotado de inyaceién diets, Todor los abrorventes cro matogrfieos utizados fueron productos Merck El rvelodor 03° Ia eromatogratia on eapa fina fue una mezela dH; SOq-AcOH. HO (4:80.16). Para Ia cromatogratla preparstiva en colurnna se utli26 gol de slice 0.2.0.5 mm y pare aquellas en columna seca gel e lice do 0,050.2 mm El Eupotorium jhanii Robinson fue racagido en juni en “E! Delgadito”, estado de Mérida (Venezuela Se extrajo con EIOH en tun soxhiet'y el extracto se concent6 a Sequedsd a varie, dando tn liquido siruposo de color verde oscuro. Este extracto se percols Sobre gel de slice utlizando come sluyente acetato de til, liminandore ar glucéridos y algunos colorants. Les fracciones abtenidas en pereolado anterior se reuniaron 'y $9 coneentraron a sequedad, dando un peso dé 400 ar. Por Cromatogratia en gel de slice yempeando como eluyentes ster de petréleo, bencen, scetato de etilo y mezcias de estos disolventes ft logré avid el extracto anterior en grupot oe fustancig. Estas Su vez se recromatogratiaron en columna seca, obreniéndose los siguientes productos en orden de elucién: seatato de lupeol, lupe ona, acetato de jhanol (4), jhanlactone (6), lupeol monoacetato de ihanigiol (4), anol (8), Bitosterol, una’ mezcia de fs écidos Jhdnico y harcwickico, y hanidiol (4). Las tracciones que conte- Ilan lot scidos fueron metiladas con diazometano y cromatogre- fiados en columna seca de gel de sfice utiizando como eluyente ‘ter de petréleo-benceno (508). Las fiavonas se aisaron en ol orden siguiente: salvigenine, --Ormetiteupatorins y eupatorine s@ obtuvieron gor cristaizacion de las Fracciones de la crometogratla goneral que las contanian. Loe productos acecato de lupeol, lupenona, lupeol y fitoste- ‘ol s0 identificaron por 408 datos expectrses y comparacién con ‘ruoetr auténticas. Maxi! ester del écido herdwickico (1V).-Se obtuve como un serie, [alg 99 (, 0,98). vm oT 172,130, 80,140, 120,170, 180,170, 1040, 1090, 875, 760 cm-l, RMIN (60 Mel 6 7,40 (2H, m), 6.65 (3H, 6,95 (1H, ml, 7,72 (3H, 3), 1,28 (3H, #), 0,82 (3H, 6, Ha), 0,78 (9H, #1. EM m/e 330 iM, 315, 314, 283, 271, 235, 203, 176. i ‘Mati exter de! éido inérico (1VO).—Aesite, (@}or18 (c 0,84). in fl gogo, 1730, 1650, 1506, 1280, 1240, 900, 880 y 780 emt, AMN (60 Me) & 7,32 (2H, m, 18 y 16H), 6.92 (1H, m, YeHi, 5.7 (1H, H8), 485 y 4/85 (cada uno 1H, 5. ancho, 20130 .@. GONZALEZ. J. M, ARTEAGA, 8..M. FRAGA Y MG. HERNANDEZ Ha), 3.68 (3H, s, -OMel, 1,87 (3H, 3. ancho, 17 Ha) y 1,05 (3H 5.19 Ha). EM m/e, 30, 318, 312, 200, 299, 271, 253, 21 Reduccion del’ metil ester del dci2o jhinico.— | metl ester [380 magi en éter seco (50 mil) se trat6 con AlLilg (200 mg) a ‘ellujo durante 3 horas. El exeeto de reactvo se destruyo akodiéw. ole euidadosamente agua. Se teste la mezcla con CH 3N so ‘extrajo con éter de Ia forma usual. Se obtuvo as el alcohol V (240 ma) MN (60 Mel 6 7.92 (2H. mm, 15 y 16H), 6.32 (1H, on, 14:4), 5,19 (1H, &, H.9), 4.80 y 4,60 (cada uno 1H. s ancho, 20-H) 3.54 y 3.40 (cada uno 1H, dd, 18-2), 1,62 (3H, x. ancho, 17-Hsl ¥/ 085 (3H, 5, 19-H3), EM mle 302, 287, 271, 262, 189, 162 y 147, Oxiaacién cel steonos V con el rasctive de Corey.~E! alcohol {370 mg) en diclorometano (S mi) se trat con el elorocromate de pindina 400 mq) disuelta en ciclorometano {7 mil. Se Cel0 9 a temperature ambiente y con sgitaci6n durante 1 hore. Tenscurr Go este tiempo se le aad eter sutirica ceca y se percol6 a traves ‘do una column de enita. De esta forma se obtuve e sdehige VI 110mg) y el producto de partida (40 ma. RMN 160.Mc) 6 9,47 (1H, 5, 19:H1, 7,32 (2H, m, 15 16H) 6.32 (1H4,m, 16H), 5,18 (1H, ¢. 1-91, 4/87 y 4,70 (cada uno 1H, « ‘ancho, 20+Ha), 1,60 (3H, 5. nano, 17-Hy)'v 0.85 (GH, 5, 19H EM mie 300, 285, 271, 263, 188, 147 : : vt cho ri xvi vou. 75 Reduecién de Huang-Minlon del aldehido Vi.—E\ aldenico 90 mal en cietiengicot IS mil tele aadio hicracina (6 ey se fefluy6 durante 2: horas. A continuacion ie. le ohadio KOM (210 mal y se refluys curante 15 minutos mos. Se eliind el agua Y el exceto de hidracina por destilacién 2 200° y luego ve continue 1 reflujo durante 2 horas més. Se dejo enti. se destl6 a pH dy 58 extrajo con éter de a forma ual, Se obtwe at! e procucts Wil Ome) R060, 1640, 1500, 1980, 1370, 890,870 y 760m"! AMN (60 Me) 6 7,22 (2H,m, 15y 164, 6.39 (1H, m, #18) 5,18 (1H 1, H9), 4.76 v 4.56 (cada uno 1H, s. ancno, 20-Ha1, 1/60 (3H, 2 faneno, V7-Hs}y 0.88 (BH, s, 18H) EM mle 286,271 9 177 Solvigenina iShidroxi6, 7.4" wimetoxitlavone) (XI) —P F ICH ao40, 2040, 1050, 1560, 1480, max 1450, 160, 1900, 1260, 1180, 1130. 1030. 980, 910 y 840 en! LY ax, 294, 282 nm, RMN (90 Me) 6.12.78 IM. §) 789 y 1,02 (toda uno 2H, d, J =8 Hel, 6.60 (1H, 6,56 (1H, 9,397, 3182 v 389 leada uno 3H, 3). F-Omenteupstoring (Shidroxi6,7,9!xetrametoxiflavons) 194-195 (Lit 190-191) 112). IR» ys (X11 PF. 182-494° (Lit 190-1919 (31.18 SHC 3000, 2970, 2340, 2840, 1650, 1610, 1590, 1510, 1490, 1460, 1430, 1360, 41330, 1300, 1270, +200, 1180. 1150, 1120, 1080, 1030, 1010. 990, 950, 850 y 820 onrt. RMN 5 12,73 (1H, 3,739 (1H, #, 1.54 y 7,00 lcada uno 1H, 4, J=9 Ha), 662 1H, 1,683 (1H, 3), 9198 (6H, 5) y 359 (3H, «) Eupatorina (3',5-dihidroxi-6,7,4"-trimetoxi-flavona cHeiy mtx 2040, 2840, 1650, 1610, 1590, 1510, 1490, 1460, 1440, 1270, 1330, 1290, 1270, 1130, 1040, 1030, 1010, 880, 960, 890 y 850 err. RMN (90 Mel 6 12,70 (1H, si, 743 (1H, 1, 7.38 y 6,90 {cade uno 1H, d, J=8 Ha), 2.97 (6H, i y 7.94 (3H. 4, (0101. ~P.F, 189-1919 (Lit. 196-198°) (3). 18 3540, AGRADECIMIENTOS Los autores agradecen al doctor A. Morales, Universi: dad de Mérida (Venezuela) el envio del material que se estudid y su interés en este trabajo y al doctor D. Billet (Museo de Historia Natural, Paris) el envio de los espec- 10s del dcido hardwiekiico, IBLIOGRAFIA 1. HERZ, W.y SHARMA, R. 2. TALAPATRA, S. R., BHAA, D.'S.y TALAPATRA, B: Australian J. Chem. 27,1137 (1874) ‘3. KUPCHAN, S. M, SIGEL, W., KNOX, J. Ry UDAYAMUR- 4 ftrahedron 41, 1028 (1976) THY. M. S241. Org. Cham. 34,1460 (1968). GONZALEZ, A.'G, ARTEAGA, J. M,, FRAGA, 8. M. Phyrochem. 18, 107 (197). GONZALEZ, . G. ARTEAGA, J. M., FRAGA, 8. M. HERNANDEZ, M. G.: Experientia 24, 554 (1978). ©. MISRA, A, PANDEY, RC. y SUKH DEV.: Tetranecron Lett 3751 (1964), 7. Ibid. 2681 (1968) 8. FERGURSON, G., MARSH, W. C., MeCRINDLE, R. y NA- TAMURA, E.; Chem. Comm. 299 11975). % NOZOE, Sy SUZUKI, K. Tz Tetrahedron Lett 2457 (1969), 10, Ibid. Chem. Comm. 527 (1971) 11, BOHLMANN, Fy GREUZ, M: Chem, Ber. 110, 1921 (1977) 12. BOLLENWEBER, E. y WASSUM, M. Tetrahedron Lett. 797 (1972), 13, ARENE, E. 0. PETTIT, GR. y ODE, A.H.; Lioydie 41, 186 (1978) y referencia a etaces, RETON, JL. y