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Los centros de atención médica producen desechos sólidos y líquidos los cuales, para
fines prácticos son clasificados en comunes, peligrosos y especiales.
Los desechos Especiales son mobiliario y equipo en desuso, objetos de gran tamaño,
fármacos y reactivos de laboratorio vencidos y otros que no deben ser depositados en
los recipientes normales de desechos.
NORMAS
1. Lavado de manos.
2. Cada grupo de prácticas se responsabilizará de su zona de trabajo y de su
material.
3. El uso de la bata es de carácter obligatorio, ya que evita posibles proyecciones
de sustancias químicas lleguen a la piel. Por supuesto, además, evitarás posibles
deterioros en tus prendas de vestir.
4. Si tienes el pelo largo, es conveniente que lo lleves recogido.
5. En el laboratorio está terminantemente prohibido: fumar, tomar bebidas, comer y
jugar con sus compañeros.
6. Se debe de llevar zapatos cerrados.
7. Trabajar con guantes.
8. Presentarse a la hora indicada por el docente
9. No entrar bolsas, maletas o mochilas.
10. No abrir las vitrinas con materiales o reactivos.
11. Tapar los microscopios después de usarlos
12. Manejar los equipos y materiales cuidando su conservación y orden.
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1. Cuidado con los bordes y puntas cortantes de los tubos u objetos de vidrio.
2. El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio frío. Para evitar
quemaduras, dejarlo enfriar antes de tocarlo.
3. Las manos se protegerán con guantes o trapos cuando se introduzca un tapón en
un tubo de vidrio.
4. Si tienes que calentar a la llama el contenido de un tubo de ensayo, observa
cuidadosamente estas dos normas:
a.Tener sumo cuidado y tener en cuenta que la boca del tubo de ensayo no
apunte a ningún compañero. Puede hervir el líquido y salir disparado, por lo
que podrías ocasionar un accidente.
UTILIZACIÓN DE LA BALANZA
INCLUIR EN INVESTIGACIÓN
No. 2 ESPECTROFOTOMETRIA
Objetivo
Definición de espectroscopia
La energía viaja en ondas y corresponden a una luz blanca que en el interior del
aparato se hace pasar a través de un prisma, el cual descompone la luz, separándolas en
sus colores constituyentes (según longitud de onda), formando un abanico de colores, en
los experimentos de física de luz.
Luz visible
La luz, que llega a nuestros ojos y nos permite ver, es un pequeño conjunto de
radiaciones electromagnéticas de longitudes de onda comprendidas entre los 400 nm y
los 750 nm.
Espectrofotómetro
Después de la rejilla esta el espacio donde se colocan los tubos de ensayo con las
sustancias que se están estudiando. No se usara luz blanca (policromática) que emite la
bombilla (monocromática).
El tubo de ensayo (cubeta óptica) recibe un rayo de luz monocromática que posee
una determinada cantidad de energía, en función de su color. El contenido de la cubeta
óptica (solvente y soluto) podrá absorber alguna parte de la energía de ese rayo
luminoso a su paso a través de la misma, y la luz que logre atravesar la solución seguirá
su curso hasta chocar contra un dispositivo (foto celda o tubo fotoeléctrico) sensible a la
cantidad de energía que logra pasar, convirtiéndola en electricidad y trasladándola, por
medio de un galvanómetro, a una pantalla donde el movimiento de una aguja demuestra
los cambios en la cantidad de energía que logró llegar a la foto celda.
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Ventajas de la espectrofotometría:
Usos de la espectrofotometría
Transmitancia:
1. Cuando la luz blanca choca con un objeto una parte de los colores que la
componen son absorbidos por la superficie y el resto son reflejados. Los
componentes reflejados son las que determinan el color que percibimos.
2. Si la refleja toda es blanco y si la absorbe todas es negro. Un objeto es rojo
porque refleja la luz roja y absorbe las demás componentes de la luz blanca. Si
iluminamos el mismo objeto con luz azul lo veremos negro porque el cuerpo
absorbe este componente y no refleja ninguna.
3. Las unidades de absorbancia van de 0 a 2.
4. La absorbancia se relaciona con la transmitancia como:
Ejemplo:
Una sustancia que absorbe el 30% de la energía del rayo mostraría en la pantalla
un 70% de transmitancia y un 30% de absorbancia. El concepto se aplica de la misma
forma y por esa razón una sustancia que logre absorber el 50% de la engría del rayo
luminoso nos dará una transmitancia del 50%.
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Como norma general siempre se utiliza la Absorbancia, debido a que las cifras
obtenidas en logaritmos pueden graficarse en mejor forma cuando el procedimiento de
fonometría es utilizado en estudio de investigación médica.
Ley de Beer:
Ley de Lambert:
Long Io / I = e c I
Donde:
Ley de Lamber-Beer:
Supone que la luz incidente es paralela, monocromática y que las moléculas del
solvente y el soluto están orientadas al azar de manera uniforme.
El uso del espectrofotómetro se puede obtener los datos para elaborar una
gráfica del espectro de absorción de cualquier sustancia, en la cual podemos comparar
objetivamente las diferencias de cada sustancia en función de su coeficiente de
absorción molar y de la longitud de onda del rayo empleado.
Debe tenerse en cuenta que la ley de Beer, no toma en cuenta la luz dispersada o
reflejada y no se cumple por altas concentraciones del material absorbente.
1. Tubo blanco.
2. Tubo estándar.
3. Tubo muestra.
Tubo blanco
Tubo estándar:
Tubo muestra:
Contiene lo mismo que el tubo blanco, sólo que en este caso se agrega la
sustancia en estudio (muestra), cuya concentración no se conoce.
De la del X de la
Muestra Estándar Estándar
Absorbancia de la Muestra
A= 2-Log de %T
BIBLIOGRAFÍA
da después de una comida, pero se regula por medio de la insulina que lleva la glucosa a
los tejidos para su almacenamiento ya que es el principal combustible celular.
Las causas principales de hipoglucemia en una persona sana son muy obvias,
como por ejemplo ayunos prolongados, desnutrición, por vómitos y diarrea, ejercicio en
exceso, etc.
En el caso de una persona que se le suministre insulina tendrá que ser muy bien
controlada ya que, al darse en gran cantidad, y sí no hay buenos niveles de glucosa en
sangre la insulina en exceso que entró se encarga de la poca glucosa que existe
poniendo en riesgo al paciente, causándole una hipoglucemia severa.
Otro gran problema es la cetosis por los cuerpos cetónicos que pueden llegar a
causar la muerte en especial a los de diabetes tipo I.
Métodos de medición:
MATERIALES
Algodón.
Hipoclorito de sodio al 4.72% (dilución 1:10).
Jabón antiséptico.
Descartador de puntas de pipeta.
Gradillas.
Liga.
Guantes.
Bata.
Jeringas para punción venosa de 5cc.
Micropipetas de volumen variable.
Papel absorbente.
Puntas de pipeta para micropipetas de volumen variable.
Recipiente descartador para punzocortantes.
Tubos vacutainer sin anticoagulante.
Viales de almacenamiento
Alcohol
Espectrofotómetro
Centrífuga
Agua Destilada
Reactivo de Glucosa
PROCEDIMIENTO
un tubo si anticoagulante el cual se deberá de centrifugar por 10 minutos para separa las
células sanguíneas y obtener el suero el cual servirá para prepara el tubo de muestra.
Para LCR la muestra debe ser 20 µL, ya que la concentración es baja. Luego el
resultado obtenido se le divide entre 2.
Estándar= 100 mg/dl
Valores de referencia
60 a 110 mg/dl
BIBLIOGRAFÍA
Polisacáridos:
Los polisacáridos son compuestos de peso molecular elevado, formados por gran
número de unidades de monosacáridos, combinados para dar una molécula grande o
polímero.
Almidón:
Degradación enzimática
Las enzimas más importantes de la digestión son las amilasas, las cuales
degradan el almidón (y el glicógeno) a fragmentos de maltosa. El nombre de la amilasa
se utiliza como denominación de grupo:
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BIBLIOGRAFÍA.
PRÁCTICA DE LABORATORIO:
HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA DEL ALMIDÓN
PRUEBA CUALITATIVA DE GLUCOSURIA.
Lectura Obligatoria: Texto “Bioquímica Médica” 4ª. Ed. de Baynes, Capítulos 3 y 6.
INFORMACIÓN GENERAL
Debido a que se necesitan muy bajas concentraciones de enzima para catalizar una
reacción dada, pocas enzimas pueden medirse directamente. Por consiguiente, la presencia de
una enzima se demuestra generalmente midiendo los cambios de concentración, conforme ocurre la
desaparición del sustrato o la aparición del producto de su acción catalizadora.
C ua nd o se a g re ga su stanc ia qu e lleva
alm idó n a un a soluc ió n d e yo d o (lugo l),
estas s e tiñ en d e c olo r a zu l in ten so . E sto
es deb id o a qu e lo s áto m o s d e yo d o se
intro du ce n en las e sp ira les (a m ilo sa ),
d ánd o le es a co lo rac ió n . E l co lo r
d es ap arece , al c alen ta r la
d is olu ció n , vo lviéndo s e tran sp a re nte,
p o rq u e los áto m os d e yod o s e s a len
d e la es pira l. A l en friar la d iso luc ió n
reto rna el co lo r a zu l.
REACTIVOS DE LABORATORIO:
Solución de Lugol
Solución de Benedict
Solución de Glucosa al 1%
Solución de almidón al 1%
Una muestra de Orina normal y
Una muestra de Orina de un paciente diabético descompensado.
PROCEDIMIENTO
Observaciones: Indique que solución y reactivo agrego en cada tubo y explique el porqué
de la reacción observada.
Tubo 1:
Tubo 2:
Tubo 3:
Tubo 4:
Observaciones: Indique que solución y reactivo agrego en cada tubo y explique el porqué de
la reacción observada.
Tubo 5:
Tubo 6:
Tubo 7:
BIBLIOGRAFÍA:
OBTENIDO MANUAL DE BIOQUÍMICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICA
1) Díaz Zagoya I. C., y J. Gómez. Bioquímica 2ª. Ed. 1995 Interamericana. México, D. F.
750 págs.
3) Murray R. et al. Bioquímica de Harper 16ª y 17ª Ed. 2007. El Manual Moderno. México,
D. F.
5) Donald Voet, et al. Fundamentos de Bioquímica. 2ª. Ed. Editorial Médica Panamericana,
Argentina, 2008
NOTAS IMPORTANTES
Resultado:
Conclusión:
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Las cetonas están usualmente presentes en la orina, pero por debajo del nivel de
detección de los métodos de análisis de rutina. Sin embargo, se observan cuerpos
cetónicos positivos en sujetos normales en ayunas y hasta en un 30% de las muestras de
orina de la mañana en las mujeres embarazadas.
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Niños o adultos:
Para tomar la muestra de orina, la persona recoge una cantidad limpia ("de la
mitad de la micción"). Para esto, los hombres y los niños deben tener limpia la cabeza
del pene, mientras las mujeres y las niñas deben lavar el área que hay entre los labios de
la vagina con agua y jabón y enjuagar muy bien. Cuando se inicie el proceso de
eliminación de la orina, se debe dejar que una pequeña cantidad de ésta caiga a la taza
del baño (así se limpia la uretra de sustancias contaminantes). Posteriormente, en un
recipiente limpio se recomienda recoger aproximadamente una o dos onzas (30 a 60 ml)
de orina y retirarlo. Finalmente, se debe entregar este recipiente.
Bebés:
Las cetonas urinarias se miden usualmente como una "prueba rápida" con una
tirilla (tira de orina) que contiene una zona sensible al color impregnada de químicos
específicos que reaccionan con los cuerpos cetónicos. Un cambio de color es un
indicador cualitativo de la presencia de cetonas.
Los tres cuerpos cetónicos se presentan casi siempre juntos en la orina y tienen
esencialmente la misma significancia. Las pruebas usuales para la cetonuria investigan
la acetona, el ácido acetilacético o ambos a la vez. La reacción de nitroprusiato revelará
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BIBLIOGRAFÍA.
El colesterol por ser una grasa es poco soluble en agua, por lo que si se
transportara libre por la sangre sería en forma de gotas de colesterol y se vería en
nuestra sangre como gotas de grasa. Pero el caso, es que la naturaleza ha ideado una
manera de hacer soluble en agua al colesterol y transportarlo por la sangre y esto es por
medio de lipoproteínas.
Método de medición:
Valores de Referencia:
Mujeres > de 35 mg/dl
Hombrs > de 45 mg/dl
Las LDL, producto del metabolismo de las VLDL en plasma, son las encargadas
del transporte del colesterol exógeno (y en mucho menor proporción, endógeno) hacia
el interior de las células.
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Entre más bajo sea el valor de colesterol LDL, es mejor para el paciente, esto
significa que está transportando menos colesterol hacia los tejidos periféricos.
BIBLIOGRAFÍA.
Luego de comer, el organismo digiere las grasas de los alimentos y libera triglicéridos a
la sangre. Estos son transportados a todo el organismo para dar energía o para ser
almacenados como grasa. El hígado puede cambiar cualquier fuente de exceso de
calorías en triglicéridos.
La biosíntesis de triglicéridos
Algunas drogas como los anticonceptivos, esteroides, diuréticos causan aumento en los
niveles de los triglicéridos.
Algunas formas de altos niveles de triglicéridos ocurren entre miembros de una misma
familia.
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Observaciones
MATERIALES
Jeringas
Liga
Alcohol
Algodón
Centrifuga
Tubos de ensayo plásticos
Micropipeta manual de 10 ml
Micropipeta manual de 1000 ml
Viales
Puntas plásticas
Espectrofotómetro
Rejilla plástica
Agua destilada
Reactivo de triglicéridos
PROCEDIMIENTO
Se extrae el suero y se coloca en un vial de almacenamiento.
Con la Micropipeta de 1000 µl extraemos el reactivo de trigliceridos y lo
colocamos en un vial.
Con la Micropipeta de 10 µl extraemos el suero y se agrega al reactivo de
triglicéridos. Agitar.
Se incuba por 10 minutos a 37°C.
Se lee en el espectrofotómetro
Interpretación de resultado.
Los niveles de triglicéridos varían con la edad, y también dependen de qué tan reciente
ingirió alimentos antes del examen.
BIBLIOGRAFÍA
Cuando hay una elevación de bilirrubina directa en sangre, entonces se puede filtrar por
el riñón y aparece en orina, con lo que ésta puede coger un color anaranjado. La
presencia en orina de bilirrubina y urobilinógeno se puede detectar de forma fácil
cualitativamente empleando tiras reactivas.
3. Ictericia hepática. Es un estado intermedio entre las dos anteriores. Puede ser
debido a toxinas o infecciones como, por ejemplo, la hepatitis vírica o bloque de
la excreción de la bilis. Pero el defecto se encuentra en le hígado en sí y puede
ser heredado o adquirido. Habrá un aumento de bilirrubina directa e indirecta en
sangre. En orina habrá una elevación de bilirrubina y el urobilinógeno estará
poco aumentado o incluso puede estar disminuido
Método de medición:
Valores de Referencia
Bilirrubina Total hasta 1 mg/dl
Bilirrubina directa hasta 0.25 mg/dl
Bilirrubina indirecta hasta 0.85 mg/dl
Observaciones
BIBLIOGRAFÍA.
. Materiales y Métodos
sangre
Aguja
Algodón
Alcohol
Liga
Tubos de ensayo sin coagulante
Centrífuga
Pipetas Automáticas de 5 a 50µ, 10 a 100µ y 100 - 1000µ.
Tips
Espectrofotómetro
Agua destilada
Viales
Reactivos
Ácido Pícrico
Reactivo de Creatinina o Buffer.
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Procedimiento
Observaciones
Los adultos con mucha masa muscular pueden tener más creatinina en la sangre que la
población normal. Las personas ancianas, por otro lado, pueden tener menos creatinina
en la sangre de lo normal.
BIBLIOGRAFIA.
1. Murray, Robert et al. Bioquímica de Harper, 17ª. Edición. El Manual
Moderno, México DF. 2007.
2. Inserto de reactivo.
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Nutrición: constituyen una porción del fondo común de los aminoácidos del
cuerpo.
Transporte: enlazando iones metálicos, hormonas y lípidos.
Mantenimiento de presión osmótica coloidal: sirve para mantener un volumen
normal de sangre y un contenido normal de agua en el líquido intersticial y los
tejidos.
Mantenimiento del balance ácido-base.
Coagulación de la sangre y cicatrización de las heridas.
Herencia.
Importancia clínica:
En los estados patológicos el total de proteínas puede variar, por ejemplo:
El médico puede solicitar un valor de proteínas totales o bien requerir los valores
de las fracciones de albúmina o globulina y la proporción de ellos A/G.
Métodos de Medición:
Valores de Referencia:
6.3-8.3 g/dl.
Observaciones:
Las pruebas para la determinación de proteína no deben realizarse con sueros
hemolisados, lipémicos ni ictéricos.
BIBLIOGRAFÍA.
Gota:
La gota es una enfermedad metabólica persistente, que produce un aumento del ácido
úrico circulante, este se deposita en las articulaciones produciendo:
Depósitos de ácido úrico que se convierten en cristales afilados en las articulaciones o
coyunturas, y frecuentemente se acumulan en el dedo gordo del pie.
Depósitos de ácido úrico (llamados tofo gotoso) que aparece como un chichón debajo
de la piel. Piedras (cálculos) renales debido a los cristales de ácido úrico en los riñones.
En las personas con gota, el ácido úrico se acumula y forma cristales puntudos que se
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pueden acumular alrededor de las articulaciones. Esto causa dolor e hinchazón en las
articulaciones afectadas.
Este problema se suele asociar también a la diabetes, obesidad y enfermedades renales.
La gota tiene cuatro etapas: la asintomática (sin síntomas), la aguda, la intercrítica y la
crónica.
Reactivos
Reactivo de ácido úrico: 1000µl
Muestra de suero sanguíneo: 20µl
Materiales
Liga
Jeringa de 3cc
Algodón
Alcohol
Espectrofotómetro
Centrífuga
1 pipeta automática de 100-1000 µl
1 pipeta automática de 10 – 100 µl
Tips
Viales
Tubos de ensayo
Procedimiento
Colocar 1000 µl de reactivo de ácido úrico en un vial.
Colocar 20 µl de suero en el vial que contiene reactivo.
Mezclar ligeramente
Se deja reposar por 5 minutos.
Al transcurrir los 5 minutos se coloca en el espectrofotómetro para realizar la
prueba.
Se leen los resultados y se interpreta la prueba.
Valores de referencia
Hombres: 3.4-7.0 mg/dl
Mujeres: 2.4- 5.7 mg/dl
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Los mecanismos de ajuste pueden ser lentos, requiriendo de 3 a 4 días para instalarse,
por depender de la cantidad de enzimas presentes, o rápidos, bajo control hormonal,
instalados en minutos, en este caso en relación con mayor acopio de sustratos, sobre
todo de acetilglutamato, el modulador alostérico positivo de la carbamilfosfato sintetasa
que forma carbamilfosfato, alimentador del ciclo.
Se conocen algunos cuadros clínicos por bloqueos parciales del ciclo de la urea. Se
caracterizan por hiperamonemia, retraso mental, vómitos y aversión a comidas ricas en
proteínas. Se mejoran si disminuyen las proteínas en la dieta y se suministran
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En caso de que la sangre portal no pase por el hígado, el amoníaco en sangre sistémica
puede elevarse a niveles tóxicos. Esto puede ser consecuencia de una disminución
pronunciada en la función hepática, o al desarrollo de comunicaciones colaterales entre
venas porta y sistémicas, como sucede en la cirrosis.
Los síntomas de intoxicación por amoníaco incluyen temblor, lenguaje poco entendible,
visión borrosa y en casos graves, coma y muerte. Estos síntomas se asemejan a los del
coma hepático, que se presenta cuando los niveles de amoníaco en sangre y en cerebro
se elevan en forma significativa.
Al disminuir el -cetoglutarato, baja el ritmo de actividad del ciclo de Krebs, así como
el de las oxidaciones de sustratos en las células, lo que acarrea una grave inhibición de
la respiración en el cerebro y un aumento en la producción de cuerpos cetónicos por el
hígado.
El cuerpo produce en promedio 25 a 30 gramos de urea al día algo más en personas que
comen dieta rica en proteínas, menos en personas con dieta pobre en proteínas.
Los dos factores principales que establecen el ritmo de excreción de urea son:
Una elección muy importante, que debe aprenderse de estas relaciones, es que en
pacientes con insuficiencia renal es importante considerar la intensidad de filtrado
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Las enfermedades renales muchas veces dificultan el filtrado correcto de la urea. Esto
causa niveles altos de urea en sangre.
El análisis también se realiza a pacientes que están sometidos a diálisis renal para ver si
se está realizando bien esta función.
Ciertos medicamentos alteran las funciones de ciertos órganos como el riñón y este
estudio ayuda a monitorear si los medicamentos y la dosis son correctos.
Este análisis se debe pedir cuando se sospecha de problemas renales, o cuando se quiere
saber sobre la dieta del paciente, muchas veces alta en proteínas, aunque también es
indicador de malnutrición en concentraciones bajas de urea.
Método de medición:
En presencia de tiosecarbazida:
La urea forma un color rojo en solución de ácido diacetilmonoxima, lo que se mide
espectrofotométricamente.
Ureasa: Utiliza la enzima ureasa que pasa la urea a amoníaco y dióxido de carbono. El
amoníaco en presencia de nitroprusiato forma un compuesto coloreado verde, cuya
absorbancia es medida; o bien los iones amonio formados reaccionan con fenol e
hipoclorito de sodio (reacción de Berthelot), formando un compuesto de color azul,
medido también espectrofotométricamente.
Valores de Referencia:
BIBLIOGRAFÍA.
1. LAGUNA, J, et al. Bioquímica. 4ta edición. JGH RDITORES. Pp. 117 a 121.
2. MURRIA. RK, et al. Bioquímica de Harper. 15ª ed. Pastrana VM, trad.
México: El manual moderno, 2007. pp. 365 373.
3. GUYTON: A,C. Fisiología Médica. 5ta edición. EDITORIAL
INTERNACIONAL. Pp.460.
4. Murray, Robert et al. Bioquímica de Harper, 17ª. Edición. El Manual
Moderno, México DF. 2007.
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Fue descubierto a principios del siglo XX por Kart Lanndsteiner, que demostró que
cuando se combinan dos muestras de sangre, en algunos casos se mezclaban sin signos
apreciables de reacción, pero en otro se producía aglutinación de los glóbulos rojos. En
e suero esta aglutinación se atribuye a la presencia de antígeno en los glóbulos rojos y
anticuerpos en el suero.
El grupo sanguíneo ABO es el grupo más importante para medicina transfusional. Este
sistema involucra tres antígenos: A, B, H. el antigeno H es convertido en el grupo A o B
por acción de las transferasa A (N-acetil-galactosamina) o la transferasa B (D-
galactosa), el fenotipo O es el resultado de una glicosiltransferasa inactiva, la cual es
capaz de glicosilar al antígeno (l-fucosa).
Grupo sanguíneo A B AB O
Glóbulos rojos
De la misma manera, el factor Rh es otra proteína que existe en los glóbulos rojos de
algunas personas. Su nombre viene del mono en el que fue descubierta, el macacco
rhesus. El factor Rh positivo es un factor hereditario dominante.
Este asunto tiene especial importancia en donaciones de sangre. Como hemos visto, un
individuo A tiene en su plasma anticuerpos anti-B, así que no podrá recibir sangre de un
individuo B, pues estos anticuerpos provocarían la coagulación de la sangre del donante
en los vasos sanguíneos de la persona receptora.
RECEPTOR
D grupo A grupo B grupo AB grupo O
O grupo A SI NO SI NO
N
A grupo B NO SI SI NO
N grupo AB NO NO SI NO
T
E grupo O SI SI SI SI
Materiales:
Técnica1:
1. Colocar en la tarjeta o portaobjetos una gota se suero anti-A, una de anti-B, una
mezcla de anti-A y anti-B, y una gota de anti-D, cada una en su casilla
correspondiente, como se indica en la
FIGURA 1.
FIGURA 1
2. Pinchar la yema del dedo, previa desinfección con alcohol o agua oxigenada.
Depositar una gotita de sangre en cada casilla y mezclar con los sueros.
FIGURA 2.
50
FIGURA 2
FIGURA 3.
FIGURA 3
51
Técnica 2:
No. 14 VENOPUNCIÓN
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Para obtener por venipuntura, la muestra se extrae directamente de una vena del
paciente, con aguja hipodérmica estéril y una jeringuilla o un tubo al vacío. La vena
seleccionada debe ser grande y accesible y cerca de la superficie de manera que pueda
verse o palparse.
Las venas son la fuente de sangre para un número mayor de análisis sanguíneos
y como vía de introducción de agentes terapéuticos. El paciente debe estar acostado y si
está sentado deberá apoyar el brazo.
Equipo a Utilizar:
a. Jeringas hipodérmicas de calibre 20 y 21
b. Tubos vacutainer en extracciones en gran número
c. Alcohol etílico al 70%
d. Ligadura
e. Algodón
f. Tubos o frascos para recolección de sangre.
Preparación:
a. Lavarse las manos con agua y jabón
b. Etiquetar el frasco
c. Colocarla aguja estéril en la jeringa pero mantenerla tapada hasta utilizarla
d. Inspeccionar y limpiar el área de la punción
e. Inspeccionar la aguja y la punta de esta, que no este húmeda para evitar
hemólisis.
Procedimiento:
a. Colocar la ligadura alrededor del brazo del paciente 2 pulgadas arriba del codo y
apretarla. PRECAUCIÓN: no dejar que el torniquete permanezca en su lugar
por más de 2 minutos
b. Instruir al paciente para abrir y cerrar la mano varias veces (si no se hace
palpable la vena a puncionar).
c. Localizar la vena deseada por medio de palpación o inspección.
d. Limpiar con algodón y alcohol el área seleccionada.
e. Pedir al paciente que cierre el puño y estire el brazo.
f. Fijar la vena elegida con los dedos índice y pulgar. NO TOCAR EL AREA
DESINFECTADA.
g. Sostener la jeringa con la mano derecha aproximadamente a un ángulo de 30
grados con respecto al brazo del paciente, introduzca a través de la piel
inmediata adyacente a la vena que se va a puncionar.
h. Si la presión de la vena es baja habrá necesidad de sacar un poco el embolo para
asegurar que la aguja a entrado en la vena.
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i. Introducir la aguja un poco más adentro de la vena para evitar para evitar que se
salga de la vena mientras se extrae la sangre. PRECAUCIÓN: NO
TRASPASAR LA VENA
j. Aflojar EL torniquete. Colocar un algodón con alcohol en el lugar de la punción,
pedirle al paciente que abra la mano, sacar la aguja y oprimir el algodón con la
otra mano por 3 a 5 minutos o pedir al paciente que lo haga. PRECAUCIÓN:
quite el torniquete antes de sacar la aguja de lo contrario se puede formar un
hematoma en el sitio de la punción.
k. Si uso anticoagulante, invertir inmediatamente el tubo varias veces.
l. Descartar adecuadamente en bote rojo y la jeringa en bolsa roja.
Causas de error:
a. Uso del torniquete por más tiempo del debido
b. Hemólisis de los eritrocitos, por uso de jeringas o tubos húmedos.
c. Lipemia
d. Ictericia
e. Contaminación bacteriana
f. Usos equivocados de los anticoagulantes.
1. mediana básica,
2. mediana cefálica
3. cubital o radial
Basílica
Cefálica Mediana basílica
Mediana cefálica
Cubital anterior
Radial
Mediana
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PUNCIÓN CAPILAR
Lugar de la punción:
Los lugares más adecuados son la superficie palmar o lateral de la punta del dedo, en los
infantes se realiza la misma en el talón o dedo gordo del pie.
Equipo a utilizar:
a. Algodón
b. Alcohol
c. Lanceta
d. Cubre o porta objetos, tubos capilares heparinizados, pipetas especiales.
Procedimiento:
a. El lugar de punción debe estar caliente
b. Limpiar el lugar de la punción con alcohol
c. Aplicar presión al área y luego hacer la punción perpendicular
d. Limpiar la primera gota que aparezca
e. No apretarse ni escurrir el algodón
f. Colocar un algodón con alcohol para controlar la salida de sangre
g. El muestreo de sangre en recién nacidos o niños pequeños presenta un problema
especial. SANGRE CAPILAR: se obtiene mejor la sangre por punción venosa
del talón o primer dedo del pie. En recién nacidos los valores de hemoglobina de
la sangre capilar son mucho mayores que los valores obtenidos en la sangre
venosa de cordón umbilical.
Recomendaciones:
a. Utilizar lanceta desechable
b. No puncionar un dedo de la mano que haya estado hacia abajo
c. Realizar la punción en el lado lateral del dedo.
d. Si una muestra no puede ser procesada de inmediato, el tubo que la contenga
debe de taparse y refrigerarse. Para algunas pruebas es necesario separarse el
plasma de los glóbulos rojos. Las muestras para recuento de plaquetas,
determinación de índice de sedimentación y tiempo de protrombina no debe de
guardase más de dos horas.
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ANTICOAGULANTES
Citratos: Actúan como anticoagulantes por la combinación de calcio formando una sal
insoluble de calcio, el citrato trisódico no se usa como anticoagulante de rutina sino para
investigación de coagulación.
BIBLIOGRAFÍA.
1. Stites, Daniel P.; Terr, Abba I.; Parslow, Tristram G. Inmunología Básica y Clínica,
Manual Moderno, 10a. edición. 2002.
2. Goldsby, Richard A. Thomas. et al. Inmunología, 5ta. Edición. McGraw-Hill
Interamericana S. A. de C. V. México D. F. 2003.
3. Levinson, Warren. Microbiología e Inmunología Médica. 8va. Edición. . McGraw-
Hill Interamericana S. A. España. 2006.