ISEN 0104-2468 Veterinaria Noticias, Uberiandia,v 41, n 4, p. $967, 2005 VALORES SANGUINEOS DE REFERENCIA E INVESTIGACAO SOBRE A PRESENCA DE ANTIGENOS ERITROCITARIOS CANINOS (DEA - dog erythrocyte antigen) EM LOBOS-GUARAS (Chrysocyon brachyurus) E CACHORROS-DO-MATO (Cerdocyon thous) Reference blood values and investigation on the ocurrence of dog erythrocyte antigen (DEA) in the maned wolf (Chrysocyon brachyurus) and the crab eating dog (Cerdocyon thous) Adriana Alonso Novais’, José Jurandir Fagliar®, Aureo Evangelista Santana? RESUMO propésito desse estudo foi verificar os valores, sangilineos normais © a ooorréncia do antigen eritrocitario canino (dog erythrocyte antigen - DEA) nna superficie dos eritrécitos de espécies de cées silvestres, na expectativa de adicionar novos dados sobre valores sangilineos de referéncia e investigar as relagdes flogenéticas entre os caninos sivestres e domésticos. Para tanto, obtiveram-se amostras de sangue de 32 lobos-guarés e 16 cachorros-do- mato, pertencentes aos zoolégicos de Sao Carlos- SP, Rio de Jansiro-RU, Sao José do Rio Preto-SP. Brasilia-DF, Belo Horizonte-MG, Americana-SP ¢ Sorocaba-SP, @ também do criadouro conserva- cionista da Companhia Brasileira de Metalurgia e Mineragao (CBMM), localizado em Arax-MG. Os valores sanguineos encontrados para lobos-guaras @ expressos como média e desvio padréo foram: Hemvdcias: 5,50 + 0,93 x 10%/mL; Hb: 13,30 £ 5,69 gidL; VG: 41,30 + 1,83 %; VCM: 75,00 + 8,84 fL; HM: 27,00 * 4.04 pg: CHCM: 32,00 + 4,15 gid: Leucdcitos: 14,80 + 4,50 x10¥/mL; Neut. segm. 10,20 £ 3,50 x10%mL; Nout. bast.:0,10 + 0,10x10") mL; Linf.: 3,60 1,70 x10%ImL; Eos.: 0,70 + 0,70 x10%/mL; Mon.; 0,20 + 0,20 x102/mL; Bas.: 0,03 + 0,05 x10%mL; uréia: 55,00 + 18,31 mg/dL; creatinina: 1,40 + 0,31 mg/dL; PT: 7,60 #0,61 gidl: albumina: 3,40 + 0,54 g/dL; ALT: 70,00 + 26,51 U/ mL; AST: 49,00 # 14,77 UimL; ALP: 33,00 # 26,49 UrmL; BT: 0,12 4 0,06 mg/dL; BD: 0,04 + 0.03 mg! dL. Os valores sangdineos encontrados para cachorros-do-mato foram: Hemadcias: 4,80 £ 0,60, x10%ImL; Hb: 14,00 + 5,64 gldL; VG: 42,00 + 1,96, %; VCM: 89,00 * 5,90 fL; HCM: 29,00 + 1,35 pg; CHCM: 33,00 + 1,56 g/dL; Leucécitos: 9,50 + 1,35 x10%TmL; Nout. sogm.: 6,90 # 0,88 x10"”7mL; Nout. bast. 0,10 # 0,11 x10°mL; Linf.: 4,30 + 0,42 x10 mL; Eos.: 0,20 # 0,07 x10%/mL; Mon: 0,10 + 0,06 x10%mL; Bas.: 0x10%mL; urdia: 44,00 + 23,84 mg/ dL; creatinina: 0,90 + 0,18 mg/dL; PT: 7,50 + 0,56 g/dL; albumina: 3,30 + 0,31 g/dL; ALT: 51,0 + 17,46 UrmL; AST: 25,0 & 12,81 UimL; ALP: 22,08 4,42 U/ mL; BT: 0,16 0,06 mg/dL; BD: 0,06 + 0,02 mg/dL. Os antigenos eritrocitérios caninos foram obser- vados nas duas espécies silvestres pesquisadas. A freqdéncia dos grupos sanguineos caninos, entre- tanto, variou entre as espécies. No quo se refers ao grupo DEA 1, a grande maioria dos cées silvestres {oi positiva para o subgrupo 1.2. O antigeno DEA4 esteve presente om alta frequéncia nas duas espécies @ houve baixa incidéncia dos outros antigenos eritrocitarios caninos, assim como ocorre nos caes domésticos. A semelhanga antigénica encontrada para os antigenos de grupo sanguineo de cdes domésticos, lobos-guaras e cachorros-do- mato aproxima estas espécies, sugerindo que tenham evoluido a partir de um ancestral comum, (teoria monofilética). Entretanto, serao necessarios estudos moleculares para confirmar a presenga dos antigenos ertrocitérios caninos nas hemédcias dos canideos silvestres. Palavras-chave: hematologia, bioquimica clinica, Grupos sangulineos, caes, lobo- guard, cachorro-do-mato. Doutoranda do Curso do Pés-Gracuaco om Medicina Veterindria, Area de Concentracao om Clinica Veterinaria, FCAVIUNESP ~ Campus de Jaboticabal S® > Protescores Doutores do Departamento de Clinica e Cirurgia Vetennaria, FCAV/UNESP ~ Campus de JaboticabalSP, 59NOVAIS. AA, FAGLIARI, JJ, SANTANA, AE ABSTRACT ‘The goal of this study was to verify normal blood values, ‘and the occurrence of dog erythrocyte antigen (DEA) ‘onto the red cal surface of wid canids, for investigation of phylogenetic relationship between wild and domestic dogs. For this purpose, blood samples from 32 mand wolves and 16 crab eating dogs were ‘obtained, from zoos located in Sa0 Carlos-SP, Rio de Janeiro-RJ, S20 José do Rio Preto-SP, Braslia- DF, Bolo Horizonte-MG Americana-SP and Sorocaba- SP, ealso from a conservationist criatory of Brazilian ‘Company of Metallurgy and Mineration (CBMM- ‘Araxa/MG), Obtained blood values for maned wolves: were: RBC: 5.50 + 0.93 x 10"mL; Hb: 13.30 + 5.69, idl; PCV: 41.30 + 1.83 %; MCV: 75.0 + 5.84 IL; MCH: 27.00 + 4.04 pg; MCHC: 32.00 + 1.15 g/dL; WBC: 14.80 + 4.50 x10'/mL; Sagmented neutrophils: 10.20 + 3.50 x10°/mL; Bastonets: 0.10 £ 0.10 x10 mL; Lymphocytes: 3.60 + 1.70x10°/mL; Eosinophils: 0.70 + 0.70 x10°mL; Monocytes: 0.20 + 0.20 x10") mL; Basophils: 0.03 + 0.05 x10imL; Urea: 55.00 + 18.31 maidL; Creatinin: 1.40 + 0.31 mg/dL; TP: 7.60 +£0.61 gidL; Albumin: 3.40 + 0.54 gidL; ALT: 70.00 + 26.51 UlmL; AST: 49.00 + 14.77 UimL; ALP: 33.0 + 26.49 UlmL; TSB: 0.12 + 0.06 mg/dL; DSB: 0.04 + 0.03 mg/dL. Obtained blood values for crab eating dogs were: RBC : 4.80 + 0.60 x10"/mL; Hb: 14.00 + 5.64 g/dL; PCV: 42.00 + 1.96 %; MCV: 89.00 + 5.90, fL; MCH: 29,00 + 1.35 pg: MCHC: 33.00 + 1.56 gid: WBC: 9.50 + 1.35 x10"/mL; Segmented neutrophils: 6.90 # 0.88 x10%mL; Bastonats: 0.10 + 0.11 x107 mL; Lymphocytes: 1.30 + 0.42 x10°/mL; Eosinophils: 0.20 + 0.07 x10°/mL; Monocytes: 0.10 + 0.06 x10) mL; Basophils: 0 x10?mL; Urea: 44.00 + 23.84 ma! dL: Creatinin: 0.90 + 0.18 mg/dL: TP: 7.50 + 0.56 g/ dL; Albumin: 3.30 + 0.31 g/dL; ALT: 51.00 + 17.46 UI mL; AST: 25.00 # 12.81 U/mL; ALP: 22.00 + 4.42 UI mL; TSB: 0.16 # 0.06 mg/dL; DSB: 0.06 + 0.02 mg! dL. Dog erythrocyte antigens were observed in the ‘two wild species, but the prevalence of blood groups: has varied: the majority of dogs was positive for DEA and DEA, while few were positive for DEA 3, DEA Sand DEAT. The antigenic similarity observed may approximate maned wolf, crab eating dog and domestic dog, suggesting thal they may have evolved from a common ancestor, likewise the monophyletic, theory. Nevertheless, molecular studies are necessary to confirm the antigen’s occurrence onto the red cell surface of these wild dogs. Keywords: hematology, clinical biochemistry, blood groups, dogs, maned wolf, crab eating dog. INTRODUGAO lobo guara (Chrysocyon brachiurus) 6 0 maior canideo da América do Sul, chegando a medi 120 om de altura @ 140 cm de comprimento. Tam um porte esguio, destacado pelas peas com- pridas. Os pélos sao espessos com tonalidades castanhas e brilhantes, quase avermelhadas. E um animal de habitos notumos, muito timido e solitario, mas nao ¢ feroz e $0 ataca quando acuado ¢ com medo (CARVALHO, 1976), No Brasil, esta espécie vive nos cerrados abertos onde caminha livremente @ se alimenta de pequenos animais e de frutas silvestres como a lobeira. Ha alguns anos, 0 lobo- ‘quaré podia ser encontrado do Piaui ao Rio Grande do Sule Mato Grosso, além do Paraguai, Argentina © Bolivia (CARVALHO, 1976). Infelzmente, a espécie encontra-se em franca extingao em decorréncia da caga predatéria € devastagao dos cerrados (CAVINATO, 1999), (O cachorro-do-mato (Cerdocyon thous) & um animal pequeno que geraimente pesa de 5a 8 kg e mede cerca de 65 cm de comprimento. Sua cor & predominantemente cinza-amarelada com o dorso, ocinho, pescogo € cauda negros. Sao animais de habito noturno @ solitarlo, abrigando-se em tocas, fendas e ocos de arvores. Ocupam em média uma area de 60 hectares, vivendo em florestas, campos © matas de galeria que ocorrem em paises como Colémbia, Venezuela, Guiana, Suriname, leste do Peru, Bolivia, Paraguai, norte da Argentina e Brasil, com excecao da planicie amazénica. Quanto a alimentagao sao animais onivoros, alimentando-se principalmente de insetos (cupim), caranguejos, Pequenos mamiferos, aves @ outros animais peque- nos, além de ovos de aves e tartarugas, carnica @ {rulas (RODRIGUES; AURICCHIO, 1994), Raros sao os trabalhos que abordam parémetros hematolégicos e bioquimicos dos canideos silvestres. Hoehne e Rosenfeld (1953) realizaram um estudo hematolégico em quatro ‘exemplares de cachorro-do-mato. Busch (1980) felatou valores hematolégicas e bioquimicos de lobos-auaras pertencentes ao Parque Zoolégico Nacional de Washington, D.C. Wallace e Boever (1983) apresentaram valores hematolégicos de diferentes canideos silvestres, estabelecidos por diferentes autores. Cavaliero et al. (1989) determi- naram os parémetros hematologicos e bioquimicos séticos de seis lobos-guards, em condigoes de cativeiro, pertencentes ao Jardim Zoolégico Silvio Hollembach, em Belo Horizonte/MG. Santos (1999) ublicou parametros hematologicos bioquimicos séticos de cachorros-do-mato aduttos, sendo alguns 60Issn 01042469 Vet Not, Userlindia, v 11, n 7p S087, 2005 mantidos em cativeiro no Criadouro de Animais Silvestres da ltaipu Binacional e outros de vida live no Parque Nacional do Iguacu, ambos em Foz do lguacuiPR, ‘A despeito dos numerosos estudos sobre sistematica, as relagbes entre muitas espécies de canideos permanece nao resolvida. Através do ‘estudo do caristipo das espécies de canideos, tom- se tentado reconstruir sua evolucao filética & fomecer melhores critérios para a organizacao, taxonémica. Contudo, os canideos representamuma familia de carnivoros incomum, uma vez que seus ‘aaridtipos variam consideravelmente em numero e morfologia cromossomial (CHIARELLI, 1975. WAYNE et al., 1997). Cestudo de Wayne etal. (1987) apresenta uma arvore flogenética assumindo que um cariétioo canino, semelhante ao do lobo cinza e com alto ndmero dipldide, seria primitivo para 0 lobo-guara, 0 ‘cachorro-do-mato e cao doméstico Um estudo morfolégico apresentado por Tedford etal. (1995) também indica que o lobo-guara, ‘© cachorro-do-mato 8 0 cao doméstico derive de um ancestral semelhante 20 lobo, e apresenta uma ‘vore fiogenética em concordancia com os estudos: cariotipicos @ biomoleculares. Ou seja, que essas ‘rs espécies constituem um grupo monofilético & ossuem o mesmo padrao de ramificagao evolutiva. A investigagao sobre a presenca de anti ‘genos ertracitarios de ces domésticos, nas esp ies silvestres citadas, pode contribuir para o estudo das relagdes flogensticas entre caninos e corroborar as suspeitas de evolucao monofilética de caes, domeésticos, lobos-guaras e cachorros-do-mato. MATERIAL E METODOS Foram obtidas amostras de sangue de 32 lobos-guaras € 16 cachorros-do-mato, pertencentes 08 zoolégicos de Sao Carlos-SP, Rio de Janeiro- RJ, Sao José do Rio Preto-SP, Brasilia-DF, Belo Horizonte-MG, Americana-SP @ Sorocaba-SP, € também do criadouro conservacionista da Compa- nihia Brasileira de Metalurgia e Mineracao (CBMM). localizado em Araxé-MG. ‘Acoheita do sangue dos canideos sivestres * Contador automatico Coulter ACTS. © LABTEST, Bolo Horizonte - MG * Espectrototometto semi-automatico LABQUEST. {oi realizada pelo veterinario responsavel de cada Zool6gico, apés contengao fisica dos animais, procedendo-se a pungao e a colheita de 5 mL de sangue da veia cefdlica, utiizando-se seringas agulhas descartaveis. Logo apés a colhelta, con- feccionou-se um esfregaco sanghiineo em lamina de vidro e este foi fixado em alcool absoluto. Em seguida, 1 mL do sangue foi colocado em frasco contendo solucao anticoagulante-preservante CPDA-1, destinado as contagens globais do hemograma e a tivagem sangainea. Os 4 mL. restantes foram acondicionados em frascos sem anticoagulante e mantidos em posi¢ao inclinada a temperatura ambiente, durante duas horas, visando a separacao do soro sangiineo, o qual foi enviado para as analises bioquimicas. As amostras foram mantidas em refrigeracao durante o transporte por correio aéreo (VASP EXPRESS), até chegarem a Laboratério de Patologia Clinica do Hospital Vete~ rinario “Governador Laudo Natel", FCAV/UNESP, onde foram realizados os exames. As ccontagens globais do hemograma foram realizadas em amostras de 1 mL de sangue com anticoagulante CPDA-1, utiiizando-se contador automatico®, Para a contagem diferencial de leucd- citos, os estregagos sanguineos foram corados com corante Rosenfeld’. As analises bioquimicas foram feitas utlizando-se soro sanguineo obtido a partir dos 4 mL de sangue sem anticoagulante. Aferiu-so a concentracao sérica de proteinas totais e albumina por meio dos métodos de biureto e verde de bromocresol, respectivamente. As atividades das enzimas aspartato aminotransferase alanina aminotransferase foram determinadas através do métoco de Reitman @ Frankel, e dafosfatase alcalina pelo método de Bowers e McComb modificado. Para lanto, ulilzou-se conjunto de reagentes de uso comercial’. Os métodos utiizados para a determi nacao das concentragbes de uréia, creatinina, bilirrubina total e direta foram, respectivamente, 0 método da urease, o método de Lustosa-Basques 2 0 método de Sims-Horn. A biliubina indireta foi calculada subtraindo-se a concentragao de bilirrubina direta da bilirrubina total. Aleitura das amostras foi realizada por meio de espectrofotomatria®, com luz de comprimento de onda especifico para cada constituinte. CColoraeo cuja composigde contém metancl e corantes May Grunwald e Giensa 61NOVAIS. AA, FAGLIARI, JJ, SANTANA, AE Embora o ntimero de aliquotas de sangue proveniente dos lobos-quaras tenha sido igual a 32, somente foi possivel realizar a andlise hematolégica dos valores sanguineos de 29 animais, devido a problemas de conservagao que acarretaram hemé- lise durante o transiado, ‘As amostras de sangue para tipagem san- ‘auinea foram submetidas a trés lavagens consecut!- ‘vas com 1,5 volume de solugao tampiio fosfato (PBS). seguidas pela centrfugacao a 2.000 rpm, durante {rs minutos, @ preparacao da suspensao de hema- cias a 4% (80 mL de papa de hemacias diluidos em 2,0 mL de PBS).Atipagem sanguinea foi realizada or melo do teste de aglutinagao em tubos, padro- nizado pelo "The Immunohematology and Serology Laboratory’ de Michigan State University (NOVAIS, 1996), empregando-se os reagentes especificos fornecidos pelo referido laboratério e adquiridos medi- ante importagao.A letura foi realizada utlizando-se © esquema que se segue: negative (-), uma cruz (+1), duas cruzes (+2), tr8s cruzes (+3) ¢ quatro ‘cruzes (+4), significando, respectivamente, nenhuma reagao, varios grumos pequenos em sobrenadante avermelhado, varios grumos um pouco maiores em sobrenadante ligeiramente avermelhado, um grumo médio e alguns grumos pequenos em sobrenadante quase limpido ¢ um grumo grande em sobrenadante limpido. Somente no caso da tipagem para o grupo DEA 1 (sub-grupos 1.1 e 1.2), nos tubos em que o grau de reagao encontrado foi negativo ou +1, submeteu-se a lavagem com PBS, por trés vezes consecutivas, @ a adicao do reagents de Coombs, que consiste em imunoglobulinas (IgG) de coelho ant-1oG de cao, com 0 objetivo de promover a aglut nagao de hemacias sensibilizadas com anticorpos. RESULTADOS Foram tipados 32 lobos-ouaras, obtendo-se 0s seguintes resultados: 1 (3%) 10i positivo para DEA. 1.1:31 (97%) foram positives para DEA 1.2 0u DEA 1.3; 24 (75%) foram positives para DEA 4; 1 (3%) foi positivo para DEA 5 7 (22%) foram positivos para DEA (Tabela 1).A frequéncia de combinagdes entre 08 grupos sanguiineos esta descrita na tabela 2 Tabela 1. Prevaléncia dos grupos sangdiineos caninos no lote de lobos-guaras (n = 32) (Jaboticabal, 2003). Grupos sangiineos Nede animais Porcentagem (%) DEA14 1 3 DEA 1.20013, 31 7 DEAS 0 0 DEAS a 5 DEAS 1 DEAT 7 2 Total 2 4100 Tabela 2. Freqléncia de combinagdes entre grupos sangliineos caninos no lote de lobos-guars (n= 32) (Jaboticabal, 2003). ‘Combinagdes de grupos sangulineos Node animais Porcentagem (%) DEA 1.2/1.5 DEA4 7 3 DEA 1.21.3 5 7 DEA 1.2/4.3, DEA4e DEAT 4 12 DEA 1.21.3e DEAT 2 6 DEA 1.10DEA4 1 3 DEAS 1 3 DEA 1.2/4.3, DEA3, DEA4 @ DEAT 1 3 DEA 1.2/1.3, DEA4 @ DEAS 1 3 Total 2 700 62Issn 01042469 Vet Not, Userdndia, v 11, 1, p 5087, 2005 Foram tipados 16 cachorros-do-mato, obten- do-se os saguintes resultados: 1 (6%) foi positive para DEA 1.1; 15 (84%) foram positives para DEA 1.2 ou DEA 1.3; 16 (100%) foram positives para DEA 4; 3 (19%) foram posttivos para DEA 5. 7 (44%) foram positivos para DEA 7 (Tabela 3). A frequiéncia de combinagdes entre 0s grupos sanguineos esta descrita na tabela 4 Os resultados do hemograma, da determi nnagao das concentragoes séricas de proteinas totais, albumina, uréia, creatinina e bilirubinas, bem como da atividade sérica de aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT) @ fosfatase alcalina (ALP) dos lobos-guaras e cachorros-do-mato encontram-se descritos nas tabelas 5 e 6. Tabela 3. Prevaléncia dos grupos sanatiineos no lote de cachorros-do-mato (n = 16) (Jaboticabal, 2003). Grupos sangitineos Node animais Porcentagem (%) DEAT. 1 6 DEA 1.20013, 6 a DEAS 0 0 DEAS 6 100 DEAS 3 19 DEAT 7 4 Total 6 400 Tabela4. Frequéncia de combinagoes entre grupos sangUineos caninos no lote de cachorros-do-mato (n= 16) (Jaboticabal, 2003). Combinagdes de grupos sanghineos Nede animais Porcentagiem (%) DEA1.2/1.36DEA4 8 50 DEA 1.2/1.3, DEA4@ DEAT 5 2 DEA 1.2/1.3, DEA4, DEAS @ DEAT 1 6 DEA 1.4, DEA4@DEA5 1 6 DEA4, DEA5eDEAT 1 6 Total 16 100 Tabela 5. Média desvio-padrao dos constituintes do hemograma de 29 lobos-guaras (Chrysocyon brachyurus) € 16 cachorros-do-mato (Cerdocyon thous) (Jaboticabal, 2003). Parametros Lobo-guaré Cachorros-do-mato Eritrécitos (<10%7mL) 5502093, 4,800.60 Hemoglobina (aid) 19,3025,69 14,00 5,64 Volume globular (%) 41,308 1,83 42,00 1,96 Vem (tt) 75,002 5,84 89,00:5,90 HOM (pg) 27,004,040 29,00 1,35 CHEM (%) 32,00 4,15 33,00 1,56 Leucécitos (x 102imL) 14,804.50 9,50 1,35 Neutroflos segmentados (x 10/mL) 10,2023,50 690+ 0,88, Neutrofilos bastonetes (x 10°/mL) 0,100.10 0,1020,11 Linfécitos (x 102/mL) 3,602 1,70 1,3020,42 Eosindfilos (x 10°/mL) 0,70 0,70 0,200.07 Monécitos (x 10°/mL) 0,20£0,20 0,10 0,06 Baséfilos (x 10°/mL) 0,03 + 0,05 = ‘VCW- volume corpuscular médio; HCM-hemoglobina corpuscular média; CHCM- concentracao de hemogiobina corpuscular média 63NOVAIS. AA, FAGLIARI, JJ, SANTANA, AE Tabela 6, Média e desvio-padrao das concentragdes séricas de proteinas totais (PT), albumina, uréia, creatinina e bilirrubinas total (BT), direta (BD) e indireta (BI), bem como da atividade enzimatica ‘de aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT) e fosfatase alcalina (ALP) de 29 lobos-guaras (Chrysocyon brachyurus) e 16 cachorros-do-mato (Cerdocyon thous) (Jaboticabal, 2003). Parametros Lobo-guard Cachorros-do-mato PT (g/dL) 7,6020,61 7,50 0,56 Albumina (g/dL) 3,40 + 0,54 3,30£0,31 ALT (U/mL) 70,00 + 26,51 51,00 17,46 AST (UimL) 49,002 14,77 25,002 12,81 ALP (UimL) 33,00 26,49 22,0024,42 Uréia (mg/dL) 55,00 18,31 44,00 + 23,84 Creatinina (maid) 1,400.31 0,90 20,18 BT (mg/dL) 0,120,068 0,16 £0.06 BD (mg/dL) 0,04 + 0,03 0,06 + 0,02 DiscussAo Por outro lado, nas espécies silvestres, a Os resultados da tipagem sanguinea das duas espécies silvestres pesquisadas, utilizando- se 0s reagentes para antigenos eritrocitarios cani- ‘nos, foram posttivos e semelhantes aqueles obser- vados em cdes domésticos. A frequiéncia dos grupos, sangilineos caninos, entretanto, variou entre as espécies. Noque se refere ao grupo DEA 1, agrande maioria dos aes silvestres foi positiva para 0 sub- ‘grupo DEA 1.2/1.3, enquanto poucos foram positivos, para DEA 1.1. Estas freqdéncias se invertem em ‘aes domésticos, dentre os quais ha maior preva léncia do subgrupo 1.1. Esta simples observacao levanta uma questa interessante a respeito do processo evolutivo das espécies doméstica silvestres estudadas. Por que ocorre esta invers2o de frequléncias? Seré que ela representa uma evo- lugao ou um retrocesso? Sabe-se que 0 processo evolutivo das espécies domésticas nao ocorre atra- vés da selego natural, a qual prevalecenas espécies silvesties. A interferéncia humana oriou padroes raciais voltados para caracteristicas especificas, gerando uma alteracao na prevaléncia dos grupos sangliineos, Além disso, a consanguinidade dentro, das ragas de caes domésticos direcionou a ocorrén- cias dos antigenos ertrocitérios. Ou seja, os genes de grupos sangdineos que estavam ausentes nos primeiros representantes de cada raga que chega- ram.no Brasil, tomaram-se pelo menos temporaria- mente excluidos do genoma dos descendentes da- uoles individuos. Consequientemente, sea ocorrén- ia de um antigeno ja era baixa, tomourse inexistente presenga de um antigeno de grupo sanguineo, como por exemplo o DEA 1.1, pode determinar a nao sobrevivencia de um flhote de mae DEA 1 negativa, 50 ocorrer isoeritrdlise neonatal, Neste caso, a mae previamente sensibilizada produz anticorpos anti- DEA 1.1, 08 quais sao absorvidos pelo fihote através do colostro @ provocam a sua morte devido a anemia hemolitica. Este fato poderia nos conduzir a pensar que nao seria vantajoso possuir este antigeno eritrocitario, ¢ a propria selegao natural provocaria © seu desaparecimento. Enquanto isso, como os outros alelos do grupo DEA 1 nao seriam respon- saveis por esse problema, sua ocorréncia tenderia a aumentar ao longo do tempo. Esta poderia ser uma explicagao para a inversao entre as prevaléncias dos subgrupos DEA 1.1 @ DEA 1.2/1.3, obsorvada nesta pesquisa Oantigeno DEA 4 esteve presente emalta frequéncia nas duas espécies e houve baixa incidéncia dos outros antigenos eritrocitarios cani- os, assim como ocorre nos caes domésticos. No que diz respeito as combinacdes de grupos sangtineos sobre a superticie dos eritrécitos, DEA 1.2/1.3 € DEA 4 foi a combinagao mais frequente, tanto em lobos-guaras quanto em cachorros-do-mato, representando aproximada- mente 50% dos animais. Esta ocorréncia possi- velmente se deve a maior prevaléncia desses antigenos nas duas espécies. Além disso, a alta freqdéncia da combinagao DEA 1.2/1.3, DEA4 pode ‘nos indicar que esta seria uma associacao favoravel para a sobrevivéncia dessas espécies, uma vez que 64Issn 01042469 Vet Not, Userlindia, v 11, n 7p S087, 2005 ‘ambas foram suometidas ao processo de sele¢ao natural ao longo do tempo. Apartir desses resultados, acredita-se que 08 antigenos eritrocitarios dos caes domésticos estejam presentes sobre as hemacias das espécies sivestres estudadas. O padréo de reatividade, quanto @ Intensidade das reagoes de aglutinagao fol semelhante 8, no que se refere ao grupo DEA 1, as, reagdes inicialmente negativas foram amplificadas através da utlizagao do teste da antiglobulina de ‘Coombs, apresentando resultado final positivo. ‘Sabe-se, entretanto, que o resultado positive da reagao sorolégica nao significa que os antigenos ‘encontrados possam ser exatamente os mesmos, uma vez que os anticorpos policionais utilizados podem ter se ligado a epitopos diferentes sobre a superficie das hemdcias dessas espécies sivestres, ‘8 quais poderiam apresentar alguma semelhanga antigénica com os grupos sanguineos dos caes domiésticos. Esta divida s6 serd elucidada apés analise molecular dos antigenos de membrana eritrocitaria das espécies silvestres, e comparagao ‘com os resultados obtidos para caes domésticos. Embora os estudos sobre a filogenia dos canideos sejam altamente controvertidos, e as relagbes filéticas entre eles ainda nao sejam con- clusivas, a semelhanca antigénica ou homologia encontrada para os antigenos de grupo sanguineo de caes domésticos, lobos-guaras e cachorros-do- mato aproxima estas espécies, sugerindo que tenham evoluldo a partir de um ancestral comum, (teoria monofiltica).A partir dai, 6 provavel que tenha ocarrido 0 fendmeno de especiagao, no qual s80, formadas novas espécies a partir de segregagdes génicas e mutagoes, as quais ocorrem em grupos diferentes de individuos que se tornam isolados por barteiras fisicas ou reprodutivas. Os resultados obtidos sugerem que os genes para grupos sangliineos sao relativamente estaveis, sofrendo pouca alteragao ao longo do proceso evolutivo. Além disso, a aparente compa- tibilidade entre grupos sangaineos, encontrada entre essas trés espécies de caninos, merece ser melhor investigada, uma vez que possibilta a realizacao de transfusao sangdinea empregando-se sangue heterdlogo, Esta possibilidade seria de grande ajuda para os clinicos de animais silvestres, pois s20 frequentes as mortes causadas por anemia devido a0 ectoparasitismo nos individuos mantidos em. zoolégicos, No que diz respeito aos pardmetros hemato- légicos, verifica-se que os valores encontrados para ‘ondmero de eritrécitos em lobos-guaras adultos se assemelharam aqueles obtidos por Busch (1980). mas diferiram dos enoontrados por Wallace e Boever (1983) ¢ Cavalioro ot al, (1989), os quais apresen- taram resultados inferiores e superiores, respect vamente. Uma explicagao possivel pode ter sido 0 ato dos primeiros autores terem trabalhado com lum grupo de lobos-guaras adultos jovens, o que explicaria um numero de eritrécitos ligeiramente inferior aos obtidos para animais adultos. J& Cava- liero et al. (1989) trabalharam com coletas seriadas semanais e, durante 0 periodo experimental (apro- ximadamente dois meses), realizaram a desver- minagao dos, animais e o fomecimento de dieta balanceada. E possivel que este tratamento possa terinterferido nos resultados causando elevagao do rndimero de eritrécitos. Os valores encontrados para hematécrito foram superiores aos descritos por Wallace © Boever (1983) 9 inferiores aos citados por Busch (1980) e Cavaliero et al. (1989). Como Busch (1980) havia descrito um nimero de eritro- citos semelhante, a explicagao para um hematé- crito elevado é dada por um volume corpuscular médio (VCM) superior encontrado. O teor de hemo- globina foi semelhante aos descritos por Busch (1980), Wallace @ Boaver (1983) Cavaliero et al (1989). Quanto aos indices hematimétricos, o valor ‘obtido para 0 VCM fol semelhante aquele descrito por Cavaliaro et al. (1989), porém inferior ao obtido or Busch (1980), como ja foi mencionado, Quanto 0s demais indices (HCM, CHCM), nao houve dis- crepancia entre os resultados obtidos. Os valores de leucdcitos totais obtidos para lobos-guaras foram superiores 2queles desoritos por outros autores. Assim como nos céles domésticos, ‘0s neulrofilos segmentados apresentaram-se como a variedade leucocitéria numericamente mais ‘expressiva, seguida dos linfécitos. Os valores encon- trados para neutrofilos segmentados também foram superiores aqueles descritos por outros autores. Uma possivel explicacao para este aumento pode ter sido 0 estresse sofrido pelos animais durante a captura, manejo e colheita de sangue, uma vez que nao foram utilizados sedativos para contencao quimica. O numero de linfécitos foi semelhante a0 descrito por Wallace e Boover (1983), mas superior a0 descrito por Busch (1980), ¢ Cavaliero et al (1989). Os valores enoontrados para eosinéfilos, monécitos e basdflos nao diferiam daquoles citados naliteratura. Quando comparados com os valores deseritos para ces domésticos, os resultados obtidos para contagem leucocitaria de lobos-guarés foram semelhantes entre estas duas espécies. Os valores encontrades para proteinas totais e albumina foram semelhantes aos descritos por Busch (1980) ¢ Cavaliero et al. (1989). As 65NOVAIS. AA, FAGLIARI, JJ, SANTANA, AE atividades de ALT, AST @ ALP também corroboram, ‘com aquelas j4 desoritas, bem como os niveis de uréia, creatinina e bilirrubinas total e indireta. Nao foi encontrado, na literatura consultada, valor refe- rente 2 bilirrubina direta. Os resultados obtidos para bioquimica clinica de lobos-guaras assemelharam- se aqueles descritos para caes domésticos, mas foram superiores aqueles descritos para cachortos- do-mato, No que diz respeito aos cachorros-do-mato, ‘8 valores encontrados para o niimero de eritrécitos foram compativeis aqueles obtidos por Hoehne & Rosenfeld (1953) Santos (1999), mas dferiram dos ‘encontrados por Wallace e Boever (1983), os quais, apresentaram resultados superiores. Os valores, encontrados para hematdctito foram semelhantes queles desoritos por Santos (1999), mas superiores: 05 descritos por Wallace Boever (1983) e infe- riores aos citados por Hoehne ¢ Rosenfeld (1953). A oxplicacao para estas diferencas residiu no valor encontrado para VCM, 0 qual foi inferior 2quele ‘obtido por Hoehne e Rosenfeld (1953), mas seme= Ihante a0 citado por Santos (1988), uma vez que este indice hematimétrico é obtido em fungao dos, valores de hematécrito € nimero de eritrécitos. O teor de hemoglobina foi semelhante ao encontrado por Santos (1999), mas ligairamente superior aos valores encontrados por Hoehne ¢ Rosenfeld (1953) @ Wallace © Bosver (1983). Quanto aos demais, indices (HCM, CHCM), nao houve discrepancia entre 08 resultados obtidos nesse estudo e aqueles de Santos (1999). Contudo, em conformidade com 0 valor obtido para teor de hemoglobina, Hoehne & Rosenfeld (1953) também obtiveram HCM inferior. E interessante notar que 0 volume corpuscular médio dessa espécie é superior ao dos ces domésticos € lobos-guarés, os quais apresentam VCM seme- Ihante entre si. Esta parece ser a tinica diferenga marcante no eritrograma entre as trés espécies de canideos estudadas. valor obtido para leucécitos totais em cachorros-do-mato fo ligeiramente superior aqueles descritos por Hoehne e Rosenfeld (1953) ¢ Wallace ‘ Boover (1983), mas ligeiramenta inferior ao referido por Santos (1999), Assim como nos cées domésticos € lobos-guards, os neutrétilos segmentados apre- sentaram-se como a variedade leucocitaria nume- ricamente mais exprassiva, sequida dos linfécitos. Os valores encontrados para neutréfilos segmen= tados foram semelhantes aos valores descritos por Santos (1999), mas superiores aqueles descritos por Hoehne e Rosenfeld (1953) ¢ Wallace e Boever (1983). Os valores obtidos para linfécitos foram ligairamente inferiores aos descritos pelos outros autores. O valor encontrado para eosinéfilos foi inferior ao descrito por Hoehne @ Rosenfeld (1953) 8 Santos (1999), mas superior ao encontrado por Wallace e Boever (1983), Quanto aos monécitos, Hoehne @ Rosenfeld (1953) descreveram numero superior, mas os valores encontrados por Wallace € Boever (1983) ¢ Santos (1999) foram semelhan- tes. O numero de baséfilos nao diferiu daquele descrito na literatura. Pode-se observar que os valores obtidos para leucocitos totais, neutrofilos segmentados @ linfécitos no cachorro-do-mato foram inferiores aqueles descritos para lobos-guards e caes domésticos, mas a relacao neutrdfilorlinfécito permanceu semelhante, variando de 2:1 até 4:1 nas {rs especies. A explicagao para a contagem leuco- citaria inferior pode ser um menor grau de estresse soffido por esta espécie, devido ao procedimento de captura e colheita de sangue, quando compa- rados aos lobos-guarés. Os valores encontrados para proteinas totais e albumina foram semalhantes aos descritos, por Santos (1999). As alividades de ALT, AST vari- aram ligeiramente, enquanto os niveis de uréia @ creatinina se assemelharam aqueles descritos pelo mesmo autor. Nao foi encontrada na literatura cor sultada valor referente a atividade de ALP e teores de bilirubina totale fragdes. Veriticou-se que 05 re- sultados de bioquimica clinica obtidos em cachorros- do-mato foram ligairamente inferiores aqueles observados em lobos-guars e cées domésticos, CONCLUSOES 1. Os resultados da tipagem sanguinea das duas espécies silvestres pesquisadas, utlizando-se ‘0s reagentes para antigenos eritrocitarios aninos, foram positivos © semelhantes aqueles observacios em caes domésticos. A freqiéncia dos grupos sangdineos caninos, entretanto, variou entre as espécies. 2. Embora os estudos sobre a filogenia dos canideos sejam altamente controvertidos ¢ as relagbes filéticas entre eles ainda nao sejam conclusivas, a semelhanca antigénica ou homo- logia, encontrada para os antigenos de grupo ‘sangllineo de caes domésticos, lobos-guaras @ cachorros-do-mato, aproxima estas espécies, sugerindo que tenham evoluido a partir de um ancestral comum (teoria monofilstica). 3. Os resultados obtidos sugerem que os genes pata grupos sangUineos sao relativamente ‘estaveis, sofrendo pouca alteragao ao longo do processo evolutivo. 66Issn 01042469 Vet Not, Userlindia, v 11, n 7p S087, 2005 4, Aaparente compatiblidade entre grupos sangul= neos encontrada entre essas trés espécies de caninos merece ser melhor investigada, uma vez que possibilita a realizagao de transfusao sangUi- nea empregando-se sangue heterdlogo. 5. O volume corpuscular médio de cachorros-do- mato € superior ao do lobo-guara, 0 qual apre- senta VCM semelhante ao do cao doméstico, 6. Assim como nos ces damésticos, os neutréfilos, segmentados apresentaram-se como a varie- dade leucocitaria numericamente mais express va, Seguida dos linféctos, tanto em lobos-guaras ‘como em cachorros-do-mato. 7. Os valores obtidos para leucécitos totais, neutré- filos segmentados @ linfécitos em cachorras-do- mato sao inferiores aqueles descritos paralobos- guards, mas a relacao neutrofilollinfécito per- mance semelhante, variando de 2:1 até 4:1 nas duas espécies. 8. Verificou-se que os resultados de bioquimica clinica obtidos em cachorros-do-mato foram ligeiramente inferiores aqueles observados em lobos-guaras e caes domésticos. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS BUSCH, H. Medical mangement of maned wolves: (Chrysocyon brachyurus). In: AMERICAN ASSOCIA- TION OF ZOOVETERINARIANS. Proceeding, p. 132-134, 1980. CARVALHO, C. T-Aspectos faunisticos do cerrado =o lobo guard, Boletim Técnico IF., Sao Paulo, v. 21, p. 1-18, 1976. CAVALIERO, I. C. et al. Valores hematolégioos, bioquimicos do soro e temperatura intema de lobos ‘uaras (Chrysocyon brachyurus). Ars Veterinaria, Jaboticabal, v. 5.1. 1, p. 25-32, 1989, CAVINATO, M. L. Espécies ameagadas: guia pratico, Sao Paulo: Ed. Nobel S.A, 1999, 64p, CHIARELLI,A. B. The chromosomes of the canidae. In: FOX, M. W. (Ed.). The Wild Canids. New York: \Van Nostrand Reinhold, p. 40-53, 1975. HOEHNE, L., ROSENFELD, G Estudos de hema- tologia comparada. I. Dados hematolégicos do cachorro-do-mato (Cerdocyon thous azarae). Mem. do Instituto Butantan, v.25, n. 2, p. 55-57, 1953. NOVAIS, A.A. Prevalencia do grupo sanguineo DEA 4 (subgrupos 1.1 e 1.2) em caes (Canis familiaris) (Linnaeus, 1758). Dissertagao (Mes- trado em Medicina Veterinaria) ~ FCAV/UNESP, Jaboticabal, 1996, 62 p. RODRIGUES, A. S. M., AURICCHIO, P. Canideos: do Brasil. Colecao Terra Brasilis. Série zoologia Zool. Mamiferos do Brasil. Aruja: Terra Brasil, 1994, 13. SANTOS, L.C. Laboratorio Ambiental. Cascavel Edunioeste, 1999, 341 p. TEDFORD, R.H., TAYLOR, B.E., WANG, X. Phylogeny of the caninae (Camivora:Canidae): the living taxa. American Museum Novitates, Now York, n. 3146, p. 1-37, 1995, WALLACE, J. D., BOEVER, W. J. Canids. In: __. Diseases of exotic animals — medical and sur- gical management. Philadelphia: W. B. Saunders, 1983, p. 409, WAYNE, R.K., NASH, W.G.. O'BRIEN, S.J Chromosomal evolution of the canidae |. Species with high diploid numbers. Cytogenet. Cell Genet. Basel, v.44, p. 125-133, 1987. WAYNE, RK. et al. Molecular systematics of the canidae. Syst. Biol., v. 46, n. 4, p. 622-653, 1997. 67