- FUNCION El nicleo es la estructura que almacena el ADN, cantiene el conjunto de informacién genética o “genoma”. El nucleo realiza el contro! génico al transmitir la informacion genética desde e! ADN a otras moléculas por (ARNm, ARNt, ARNr), La informacién genética ADN, se divide en partes para formar cromosomas. Su funcién permite importar y exportar material génico por hacia su interior (nucleoplasma) y exterior {citosol celular). - ESTRUCTURA El nicleo es redondeado en células embrionarias y cdbicas, eliptico en células cilindricas, fusiforme en fibroblastes y musculo y aplanado en epitelios planos y endotelios. La posicién del niicieo en la célula es casi siempre central, pero puede variar debide a la polarizacién celular y a la influencia de otros componentes. El tamafio del nuicleo es de 5 a 10 um de didmetro; su forma es relativa, en células redondas y cubicas es esférico y circular, sin embargo, en células cilindricas y ahusadas tienen nucleo prolongado. Comprende en su interior un conjunto de estructuras moleculares situadas en su membrana nuclear (envoltura nuclear) y (nucleeplasma). - CELULAS DE UN GLANGIO LINFATICO 3 | ae E: EUROCROMATINA n / ¢ H: HETEROCROMATINA HN: HETEROCROMATINA ENLAZADA AL NUCLEOLO RER: RETICULO ENDOPLASMATICO RUGOSO. G: COMPLEJO DE GOLGI G: CENTRIOLO M: MITOCONORIA LN: LAMINA NUCLEAR EN: ENVOLTURA NUCLEAR H: HETEROCROMATINA- ENVOLTURA NUCLEAR Y POROS CARACTERIZACION GENERAL DE LA ESTRUCTURA Y FUNCION: - ENVOLTURA NUCLEAR Membrana nuclear 0 nucleolema, integra das membranas concéntricas, la cual se establece come la linea que limita el nucleo del citosol circundante, contiene cuatra tipo de estructuras (lamina nuclear, espacio perinuclear, membrana nuclear interna y externa), En su interior (nucleoplasma) se encuentran los nucléolos, elementos nucleares redondos y baséfilos. Los nucléolos se estructuran de cromatina; distintes tipas de cromatinas como (heterocramatina y eucromatina). En su membrana se adjunta una - CISTERNA PERINUCLEAR La cisterna perinudear comprende el espacio delimitado medialmente por la membrana interna y externa del nucleo, es decir, es el espacio o compartimiento entre ambos lados de la membrana. Su caracteristicas son similares a las de clase estructural en el RER. en relacién a los ribosomas adheridos y el tipo de morfologia que presenta en su perimetria,- LAMINA NUCLEAR Lamina nuclear 0 lamina fibrosa, se presenta en la membrana de la cara interna de la erwoltura nuclear presenta, adosado a su cara as interna, la cual su funcién esta inducida con la segregacién de la cromatina densa periférica, Se presenta como una estructura similar a la malla fibrasa y con un espesor de 15 a 80. nm. La lamina nuclear comprende en su interior una serie de compigjos proteicos, se clasifican en: - LAMINA A (72KDA) Lamina nuclear de clase A, se combina en conjunto y relacién especifica secuencial con la lamina de clase C, para formar dimeros y tetrémeros que se organizan como los de las laminas B, Los tetrameros de ldminas AC se intercalan entre los de laminas B, Esta organizacién de las ldminas configura una malla cuadrangular de filamentos, a diferencia de lo que ocurre can os filamentas intermedios tipicos, que forman haces, ~ LAMINA B1 (65 KDA) Y LAMINA B2 (79 KDA) Las maléculas de lamina B farman dimeros, que poseen un dominio en forma de varilla y cabezas glabulares en un extremo, Estos dimeras se sitdan unos a centinuacién de otros, y se disponen antiparalelamente a ctros dimeros para formar tetrameros, estructuréndose de forma beta can respecto a [a limitacién superior de la envoltura nuclear. Su estructura est& conectada esté conectada con la membrana nuclear asimilindose a una proteina de membrana - LAMINA C (62 KDA) Lamina nuclear de clase C, se unifica en conjunto con las laminas de clase A, para crear dimeros y tetrameros, Este tipo de limina trabaja de forma secuencial con las laminas de clase A, la cual por unién en puntos especificos configuran un conjunto de enlaces intercalados de flamentos, creando una estructura que delimita en forma beta a la envoltura nuclear.- PORO NUCLEAR = ESTRUCTURA En la membrana nuclear se situan los poros nucleares, las cuales, estableciendo un conjunto de 11 poros nucleares por um2, lo cual equivaldiria a 3,000 - 4,000 poros por nucleo, Los pores pueden estar acluides por una laminilla o completamente cerrados. Se relaciona can el complejo del poro, Sendo un espacio parcialmente circular que forman las membranas al sintetizarse entre si, sienda de unos 80 nm - FUNCION Su funcién primordial es la comunicacién entre los espacios intracelular y extracelular, correspondientes al ndcleo y citoplasma. Repara el ADN del ciclo celular, como también el orden de la cromatina y su estructura uniforme, e incluso en la transcripcién det ADN yla correccién de procesos anémalas o material genético defectuoso en el ADN. - TRANSPORTE El transporte de moléculas se da por medio de las proteinas que forman los poros. Su transporte permite el paso de moléculas complejas como ARN y Ribosimas, movimiento de complejos proteicos (ADN polimerasas y |minas), carbohidrates, lipides y moléculas de sefial, desde el ambiente intracelular (ndcleo) al ambiente extracelular (citoplasma), Las moléculas pequefias pasan a través de difusién simple, sin embargo, las moléculas mas complejas son reconocidas mediante secuencias de sefales especificas para luego ser difundidas con la presencia de las nucleoparinas de forma intra o extra-nuclear.JAULA NUCLEAR = ANILLO NUCLEAR presenta como un conjunto de filamentos ubicados en el ambiente interior al nticleo, incorporando 8 filaments que se unen con un anillo terminal estructurado de Proteinas, la cudl tiene como funcién dar forma y firmeza a la estructura. El anillo nuclear crea una estructurs alfa-8 nuclear, en su cara posterior. ~ FILAMENTO DE LACESTA Son pequefias fibras de filamentos que se unen con el anillo nuclear y el anillo termina con la funcién de mantener conectadas ambas estructuras y permitir el movimiento e moléculas a través del espacio intermembrana del nuicleo. - ANILLO TERMINAL Su estructura esta delimitada inferiormente en la cara interior al nucleo, se presenta Mo una base que recibe o sostiene 8 filamentos proyectadas del anillo nuclear a su estrCtUra, SU estructura es con base a proteinas. ANILLO CITOPLASMATICO. Su estructura esta delimitada superiormente al espacio ctaplasmatico, la cual proyecta 8 filamentos de forma beta al citosol, siendo estas de caracter proteico. Su funcién es dar soporte a los filamentos proteicos que actuaran como sefial para el t membrana TAPON CENTRAL ansporte de moléculas a través dela Es la subunidad estructural adjunta en la parte medial de! poro nuclear, a es redonda y céncava, delimita la parte medial de la estructura proteica del poro, en su periferia se adhiere a las paredes de la envoltura nuclear. Su funcién es penmitir el traspaso de moléculas a través de MEMBRANA NUCLEAR EXTERNA Es el tipo de cobertura o capa de la envoltura nuclear, interpreta la capa del lado exterior (citoplasma) en la estructura del niicleo. Su funcién es brindar forma y proteccién al niscleo y al citoplasma. su estructu la membrana. MEMBRANA NUCLEAR INTERNA Es el tipo de cobertura 0 capa de fa envoltura nuclear, interpreta la capa del lado interior (nucleaplasma) en la estructura del ndcleo. Su funcién es tansportar al exterior el material producide dentro del niicleo al exterior del mismo (citoplasma, mitocondrias y otros organulos).CORTE TANGENCIAL DEL NUCLEO CELULARCOMPONENTES QUE SE IMPORTAN DENTRO DEL NUCLEO > s a través de los no regulada). Las a activa, por lo que entan une 0 varias canales acuo fn agua difunden (transport Los complejos del poro nuclear px bles ales las pequefas moléculas moléculas de mayor peso molecular son transportadas en for requieren energia y moléculas transportadoras Entre ellos se encuentran los siguientes componentes. Las proteinas sintetizadas en el citoplasma necesarias para ensamblar los ribosomas. ranscripcién reque \6m 0 inactivaci6n de los genes jos en la acti Los factor: Los factores de empalme necesarios en el proceso de maduraciin de los ribosomas el nucleo al Las moléculas y macromoléculas ensambladas y exportadas desd citoplasma incluyen: Las subunidades ribosomales ARNm ARN de transferencia Factores de transcripcién que son devueltos al citoplasma para ser reutilizados MECANISMOS IMPLICADOS EN EL TRANSPORTE DE PROTEINAS Y ARN Los mecanismos implicados en ef transporte a través del poro sor diferentes al transporte de proteinas en las membranas de otros organelos . Par ejemplo, las proteinas nucleares son transportadas a avés del paro manteniende su conformacién plegada, por el contrario proteinas que no se localizaran en el nucleo se despliegan durante el tiansporte. En la siguiente pagina se hablara del transporte de proteinas a través del poro. Los complejos de poro nuclear hacen de la envoltura nuclear ur barrera selectiva entre el niicieo y el citoplasma, & ‘onstituyen la principal via de comunicacién entre el compartimiento parte las se de gran tamafio deben poseer una etiqueta para ingresar por e! canal central 'staS proteinas sintetizadas en el citaplasma contienen fa sefial de tos complejos nuclear y ctoplasmético de la célula entre el pesado tran molecular. Cuando las proteinas pequefias y otras mol 5 periféricos, las proteina avés de lo’ movil canal lo izacién nuclear“U[MPORTACIONDEPROTEINAS==st—=“‘“CSOS™S™S*é‘é‘é‘NSNNSS™S™O™~“‘(™ IMPORTINAS Las importinas son heteradimeros, formados por dos subunidades, la subunidad-a se une a la NSL de a proteina nuclear permitiends la unién con la subunidadad-b, Esta Uunién origina una “importina funcional” que lleva unida a la proteina nuclear a ser transportada, El complejo importina funcional establece comunicacién estructural con los filamentos ctosdlicas, donde guiado par las nucleoporinas, llega al poro central, La translocacién de complejo importina/carga es regulado por la pequefia enzima RanGTPasa |, que se adhiere a la subunidad b de la importina, Esta b-importina interactéa con el poro nuclear provocando su dilataci6n y posbiltando el ingreso de la proteina nuclear. La translocacién de proteinas es un proceso activa, Cuando el complejo penetra al interior del niicleo, las subunidades de importina se separan y [a carga es liberada, La disociacién de las subunidades causa entonces un nuevo cambia en su forma, dejando al descubierto la NES de cada subunidad, RUTA DE TRANSPORTE EN EL MECANISMO. DE IMPORTACION POR EL PORO NUCLEAR El complejo del pora transporta las moléculas proteicas por medio de complejo importina, la cual se activa al unir sus cofactores alfa y beta, para realizar el proceso de transporte.EXPORTACION DE ARN en el transporte de ARN, los rionucelétides maduros se asacian a proteinas llamadas transpertinas, las cuales actian como transbordadores permitienda el pasaje de ARN al citoplasma. Los ARNm maduros que presentan la poli Ase asocian con varias proteinas, formando una particula de ribonucleoproteina (RNP). Estas particulas se mueven linealmente a través de la canasta nuclear, Al igual que las impartinas, las RNP son recicladas hacia el ndcleo. En el citoplasma, las CREP o bien el transporte de proteinas hacia ef citoplasma, reemplazan a las RNP para guiar alos ARNs a sus destinos citosdlicos correctas. RUTA DE TRANSPORTE EN EL MECANISMO DE IMPORTACION DEL ARN POR EL PORO NUCLEAR A NUCLEO proteina Jo unién 1 pal-A | En el transparte de ARN se observa el exporte de! ARN al citoplasma, por medio de la proteina de unidn a poli-A y delimitado inferiormente por el ARNm, el ribosoma encabeza la parte superior y anterior de la estructura.“= NUCLEOPLASMA - NUCLEOLOS FUNCION Son un tipo de subunidad nuclear que se encuentra en la parte interior del nticleo, cconsiste en una estructura macromolecular, en el su funcién consiste en el ensamblado de subunidades ribosémicas y la sintesis mayoritaria de ARN ribosomal, que partiendo de ello, ocurre el ensamblaje de las subunidades ribosémicas. La estructura de un nucléolo es variada, en la célula pueden haber de uno a cinco nuciéolos en una misma célula, siendo por factores fisiolégicos. ESTRUCTURA ‘Sus dimensiones varian segiin la actividad celular que se realice dentro de ella, siendo asi que su forma o estructura incremente en tamafio y forma, dependiendo de la actividad celular, este se encontrara en estado normal 0 grande en términos de ‘estructura por micrémetros de didmatro, Estos se componen de cromatinas, las cuales ‘se explicaran acontinuacién, - NUCLEOLOS EN EL NUCLEO CELULAR Y COMPONENTES ADYACENTES 4; ENVOLTURA NUCLEAR 2: RIBOSOMAS 3: POROS NUCLEARES 4: NUCLEOLO 5; CROMATINA 6: NUCLEO 7: RETICULO ENDOPLASMATICO RUGOSO 8. NUCLEOPLASMANUCLEOSOMA Comprende la unidad bdsica organizacional de la cromatina, los nucleosomas son la unidad base de las cromatinas, constituye el pilar de la estructura de la cromatina. Se encuentran formados por ADN ¢ Histonas, entre 140 y 147 pares de bases nitrogenadas de ADN, se enrollan levégiramente en aproximadamente 1.7 vwueltas alrededor de un complejo de 8 histonas, es decir, un octdmero de histonas, a este ADN se le conoce como (ADN central). Entre cada una de las asociaciones del ADN histonas, existe un ADN libre lamado ADN espaciador 0 ADN internucleosomal, de una longitud variable de entre 20 a 100, en promedio 60 pares de nucledtidos o pares de bases, que garantizan flexibilidad. Sola las células eucariotas poseen nucleosoma. Los organismos procariatas como las bacterias no poseen nucleosoma, debida a que son ausentes de membrana y nticleo, HISTONAS: Son pequefias proteinas ricas en aminodcidas basicos, arginina y listna que le confieren una carga positiva lo que permite que las histonas estén fuerternente unidas por interaccién electrostética al ADN, cabe mencionar que el ADN posee una carga negativa, por tanto, fuerzas opuestas se atraen, Estén muy reservadas a través de la escala flogenética. ESQUEMA DE LOS NIVELES ESTRUCTURALES DEL NUCLEOSOMA 4 Yau ee FRetiaio erdopiagrico EI nucleasoma en las células eucariatas principia por la unién de monémeros de histonas, para formar un nucleosoma, luego a formar una estructura cuaternaria (solenoides), uniéndose entre si en la Interfase para formar (cromatinas) y por ende, crear cromosomas en la metafase. Todo esto ena Mitosis.ORGANIZACION A NIVEL ESTRUCTURAL DEL NUCLEOSOMA AON eoret 1 Fenn, 0-847) SINTESIS DE HISTONAS EN LA FORMACION DEL NUCLEOSOMA H: HISTONA Al unirse varias subunidades o mondmeras de histonas y formar un conjunto de 8 histonas, es decir, un octamero, se crea el nticleo nucleosémico (core). Las organizaciones se dividen por 2 regiones, las cuales son (niicleo fucleosémico y region internucleosémica), juntas forman al nucleosoma,ENSAMBLAJE RIBONUCLEOPROTEICO TEMPRANO DE LAS SUBUNIDADES RIBOSOMALES 1 ensambiaje de ribonucleoproteinas propicia desde la estructuracién ribosomal, la cual en células eucariotas se mide cada ribonuclestido por un coeficiente de sedimentacién expresados en S, en la que se forman por el acoplamienta de 2 subunidades, siendo la subunidad mayor la de 40s y la subunidad mayor 60s. Su forma ‘es iregular. fl proceso comienza por dos a sos subunidades, una mayor (60s) y otra 1 menor de (405), las cuales se dividen en poliribonucledtides, que son pequefios J flamentos de ARN distribuides cada uno en distintos tipos de clase solo se van a unir por un tipo de ARNm, siendo <8 -® ‘estos los siguientes: ‘ \_ZZIN ARN 18s - 2000 nucledtidos nwo vos anova Ames Ane Se Ss 60s wont — ARN 5.85 - 160 nuclestidos ARN 28s - 5000 nuclestides ARN 5s - 120 nuclestidos Bouma sapere ESQUEMA DE LOS DESTINOS FINALES DE LAS UNIDADES RIBOSOMALES ene tanseanatin || Aroinomas Sprmie | f / ‘ | \ CGaropiawon NBciee voces jon \ anbranasCROMOSOMAS Y CROMATINA El niicleo contiene los cramosomas de la célula. Cada cromosoma consiste en una molécula Unica de ADN con una cantidad equivalente de proteinas, Colectamente, ADN con sus proteinas asociadas se denomina cromatina, La mayor parte de las teinas dela cromatina consisten en copias multiples de cinco clases de histor proteinas bdsicas son ricas en residues de arginina y lisina cargados vamente. Por esta razén se unen estrechamente con los grupos fosfetos (cargados amente) del ADN. La cromatina también contiene pequefias cantidades de una amplia variedad de protefnas no histénicas y RNP. La mayoria de ellas sen factores de transcripcién (por eptor esteroide), siendo su asociacién con el ADN pasaera, Estos factares regulan que parte del ADN serd transcripta en ARN - NIVELES DE ORGANIZACION DE LA CROMATINA HETEROCROMATINA Y EUCROMATINA 3 eucromatina se encontraria al menos:en dos representa alrededor del 10%, dande se encu ados, la eucromatina accesible, que tran los genes que se estan os que la transcribienda y la eucrematina poco accesible, mas condensada (pero mer heteracromatina), donde estan los genes que la célula no esta transcribiende Si el nticleo celular se incubs con nucleasas, enzimas que digeren el ADN, las ‘uencias que primero se digieren son las que pertan los genes expresadas por la yrobora el menar grado de condensacién de la eucromatina jula, lo que ct MICROFOTOGRAFIA ELECTRONICA DEL NOCLEO DE UN HEPATOCITO A: Eucromat B: RER €. MitocondriaMICROFOTOGRAFIA ELECTRONICA DEL NUCLEO DE UN LINFOCITO A: Eucromatina B: RER C. Mitocondria SU ESTRUCTURACION MOLECULAR Alrededor del centro de histonas, 146 pares de bases del ADN se enrollan en dos yueltas, La unidn de Jas histonas al ADN no depende de una secuencia particular de nucledtidos, sino de la secuencia de aminodcidos de la histona, Las histonas son unas de las moléculas mas conservadas durante el transcurso de la evolucién La histona H4 en el ternero difiere de la H4 dela planta de porato en séle 2 residuos de aminodcidos de una cadena de 102, Alrededor de 60 pares de bases de ADN unen un nucleosoma con el préximo, Cada regién de unién es el ADN espaciador, La quinta histona, la H1, conecta a los nucleosomas y actua como una banda de goma, manteniéndolos juntos dentro de una misma cuerda enrollada. Esta estructura se conoce coma fibra de 10nm, sienda el primer grado del empaquetamiento de la cromatina, CARACTERISTICAS DE HETEROCROMATINA Y EUCROMATINA Heterocromatina | _condensada Metilada Silents. Fase 5 tardianicleo globular COOH H1 se une a una regidn especifica del nucleosoma ‘nucleosoma el empaquetamiento de los nucleosomas esta mediado por la histona H1 Los nucleosomas estén formados por un centro o "core" de histonas. Dicho centro posee dos copias de cada una de las siguientes histonas: H2A; H2B; H3 yH4 rT Lo ’ autre (ecato) ucle superenroliado topoisomerasa I SARIMAR EMPAQUETAMIENTO DE LA FIBRA DE 30 NM La unién entre la cromatina y la matriz se da a nivel de zonas altamente _conservadas, denominadas secuencias SAR 0 MAR (scaffold associated regions/ matrix attachment regions) Las SAR son regiones de varios cientos de pares de bases ricas en residuos de adenina y timina, abundantes en la heterocromatina 16MODELO DE EMPAQUETAMIENTO DE LA CROMATINA a 20m b c soem d 200 9m e 700 nm f 1400 nm Cada bucle de cromatina representa un dominio funcional o unidad de replicacién. Estos dominios contienen alrededor de 100.000 pares de bases, extension de ADN suficiente para acomodar varios genes de tamafio promedio. Algunos genes, sin embargo, pueden abarcar varios dominios adyacentes de un nosoma. Cad cro cromosoma puede tener cien o mas dominios. Durante la nsada, alcanzando profase, los cromosomas aparecen en forma mas c cromatina su mayor nivel de condensacién en metafase. La organizacién de los cromosomas envuelve la fosforil de la H1 y otras proteinas, lo cual causa el plegamiento y empaquetamiento atin mas compacto de la cromatina. El andamiaje o matriz nuclear se convierte en el centro de la estructura del cromosoma, y como la compactacién continua, éste se pliega modo de acorde6n.SISTEMA ENDOMEMBRANAS DEFINICION Y ORGANIZACION: ORGANELOS MEMBRANOSOS INVOLUCRADOS El citoplasma, a su vez, se encuentra recorrido en todas direcclones por un sistema de sacos y tubulos, cuyas paredes de membrana ofician de limite entre la matriz citoplasmatica y la luz o cavidad del sistema. Este conjunto de estructuras membranosas, incluida la envoltura nuclear, se conoce como sistema de endomembranas (SE) o sistema vacuolar citoplasméatico (SVC) Reticulo endoplasmatico granular o rugoso (REG o RER). Es un grupo de cisternas aplanadas que se conectan entre si mediante tUbulos. Presente en todos los tipos celulares, se halla especialmente desarrollado en las células secretoras de proteinas. El REG ofrece una cara citosdlica tachonada de ribosomas, a los que debe su aspecto rugoso. Los ribosomas se unen a las membranas del REG por su subunidad mayor, mediante receptores especificos, as proteinas integrales de las membranas cisternales conocidas como riboforinas. Reticulo endoplasmatico agranular 0 liso (REA o REL). Su aspecto es mas tubular y carece de ribosomas. Es poco conspicuo en la mayoria de las células, pero alcanza un notable desarrollo en las células secretoras de hormonas esteroides. Aparato o complejo de Golgi. Constituido por sacos discoidales apilados, como minima en numero de tres, rodeados por pequefias vesiculas. Cada saco presenta una cara convexa y otra céncava, esta Ultima orientada hacia la superficie celular. En las células animales se ubica tipicamente entre el nticleo y el polo secretor de la célula, en tanto en las células vegetales aparece fragmentado en varios complejos denominados dictiosomas 0 golgiosomas. Envoltura nuclear. Doble membrana que encierra una cavidad, la cisterna perinuclear, en directa continuidad con la luz del REG, del cual se considera una dependencia. Al igual que éste, presenta ribosomas sobre la cara citosdlica. Durante la division celular se desorganiza y se fragmenta en cisternas que se incorporan al REG. Al finalizar la division, la envoltura nuclear se reconstituye a partir de aquél.EL SISTEMA ENDOMEMBRANOSO Reticulo endoplasmatice Lis = APARATO DE GOLGI Lisosomas ‘Aparato de Golgi LisoFUNCIONES DEL SISTEMA ENDOMEMBRANAS El sistema de diversos tipos de macromoléculas: proteinas y glucoproteinas en el REG, Iipidos enel RELy glticidos complejos en el aparato de Golgi. A la vez, el SVC proporciona intracelular para la circulacién de sus productos y una seccién de “empaque" para la exportacién de algunos de ellos. Por Ultimo, maneja un de sefiales que le permite dar a los mismos el destino final para el cual fueron sintetizados, ya sea en el interior de la célula o en el medio extracelular. Algo asf como un “estampillado", un sistema de cédigos postales que guia a las moléculas en la direccién correcta La Via de trénsito intracelular implica un transporte desde el RE hasta el aparato de Golgi; a partir de éste hay dos caminos posibles: hacia las vesiculas de secrecién y desde alli a la membrana plasmatica, o bien hacia los lisosomas endomembranas es asiento de enzimas que participan en la sintesis una v tema ViAS DE TRANSITO INTRACELULAR EN EL SISTEMA ENDOMEMBRANAS Plasmatica t CSE, vesicuas ees O vesiculas de C wansvone Reticulo Endoplasmatico Rugoso Cisterna Perinuclear f OY }*.TRANSPORTE VESICULAR El transporte en el SVC se lleva a cabo por medio de vesiculas, pequefias bolsas limitadas por membrana que se desprenden como brotes de un compartimento dador y viajan por el citosol hasta alcanzar el compartimento receptor; entances se fusionan a este ultimo. RUTA DEL TRANSPORTE VESICULAR EN LA CELULA EUCARIOTA CISTERNA RECEPTORA Fusion CISTERNA DADORA TRAFICO VESICULAR El tréfico vesicular interviene en las membranas de la célula, de tal forma que permite el paso de moléculas a través de las células por medio del sistema endomembranoso, actuando de manera mévil por medio de varios tipos de vesiculas, las cuales se explicaran mas ampliamente acontinuacién.CARAS DEL SISTEMA DE ENDOMEM| CELULAR Como consecuencia del trénsito vesicular, las moléculas de membrana sintetizadas en el RE (liso y rugoso) 0 en el aparato de Golgi, llegan a integrarse a la membrana celular. Sabemos, por otra parte, que la membrane plasmatica es asimétrica: los componentes lipidicos de ambas monocapas interior citosélica y extracelular son diferentes, los dominios proteicos tienen una orientacién definida dentro de la bicapa y los restos glucidicos de glucolipidos y glucoprotefnas sélo se orientan hacia el medio extracelular. Se genera en los compartimientos de origen, donde los componentes de membrana adoptan su orlentacién definitiva; luego, el transporte vesicular se limita a mantener dicha orientacién. De esta forma, todo aquello que tiene una posicién luminal en el sistema de endomembranas, pasa a una ubicacién extracelular en la membrana celular, en tanto que los componentes de la cara citosdlica del sistema se integran a la cara citosdlica de la membrana celular. ASIMETRIA DE LAS MEMBRANAS DEL SE Y MEMBRANA PLASMATICA © REG at + semenTIPO DE MOLECULAS EN EL TRANSPORTE VESICULAR Cada vesicula tiene un continente (la membrana) y un contenido (su naturaleza dependera de cual sea el compartimento dador); ambos se desplazan de un compartimento a otro. Cuando se produce la fusién al compartimento receptor, el contenido de la vesicula se vuelca al lumen del mismo. La membrana vesicular, por su parte, se incorpora a la membrana receptora. Si la estructura diana es la membrana plasmatica, entonces el contenido es vertido al medio. VESICULAS REVESTDIAS CISTERNA RECEPTORA CISTERNA BROTACION EN EL SISTEMA ENDOMEMBRANAS Las vesiculas que participan en el transporte, cualquiera sea el compartimento de origen, son vesiculas revestidas, Se entiende por tales a las vesiculas que llevan una cubierta formada por subunidades proteicas ensambladas a modo de enrejado sobre la cara externa de la membrana vesicular Dicho revestimiento es adquirido en el momento en que se produce la gemacién o protrusion de la vesicula y es su misma causa: a medida que las subunidades se ensamblan generan la curvatura de la membrana que da origen al brote. El revestimiento se desensambla inmediatamente después de la brotacién; este paso es necesario, pues mientras las vesiculas se hallan revestidas no pueden fusionarse con otra membrana.Se conacen hasta el momento dos tipos de vesiculas revestidas: las vesiculas con revestimiento de clatrina y las vesiculas con revestimiento de coatémero. VESICULA REVESTIDA DE CLATRINA El revestimiento de clatrina se ensambla a partir de subunidades constituidas por seis cadenas proteicas enlazadas, los trisqueliones, que forman alrededor de la vesicula un enrejado donde alternan hexagonos y pentagonos, con el aspecto de una cUpula geodésica. Llevan cubierta de clatrina las vesiculas que brotan del aparato de Golgi hacia los lisosomas, las vesiculas de secrecién regulada y las formadas por endocitosis. VESICULA REVESTIDA DE COATOMERO El revestimiento de coatémero se forma a partir de las COP (por proteinas del coatémero), Esté presente en las vesiculas que viajan del RE al aparato de Golgi, las que realizan transporte dentro de este complejo, las destinadas a la secrecién continua y en todas las vesiculas recicladoras. Tanto la cubierta de clatrina como la de coatémero se unen a membrana sélo después de que otra molécula, el ARF (factor de ribosilacién del ADP) se haya fijado. a la misma. El revestimiento promueve la deformacién de la membrana y la gemacién de la vesicula, en tanto que el ARF le sefiala dénde y cuando hacerlo. PARTICIPACION DE LA CLATRINA Y LAS COP EN LA SELECCION DEL CARGAMENTOSINAPSIS PROTEINAS DE FUSION: PROTEINAS SNAREV Y SNARET Las protefnas SNARE forman una superfamilia de proteinas pequefias con 25 miembros en la levadura Saccharomyces cerevisiae, 36 miembros en humanos y 54 miembros en la crucifera Arabidopsis thaliana. Poseen una estructura de simples dominios y un motivo caracteristico SNARE, evolutivamente conservado, de 60-70 aminodcidos dispuestos en heptadas repetidas. En su regién C-terminal la mayoria de las proteinas SNARE poseen un dominio transmembrana unido al motivo SNARE mediante una conexién corta al extremo carboxilo, mientras que al extremo amino de dicho motivo pueden afiadirse diversos dominios que constituyen la principal fuente de variabilidad entre las proteinas SNARE. Existen, no obstante, algunas excepciones a este patrén estructural. Es el caso de las brevinas, que carecen de dominio aminoterminal, 0 de SNAP-25 (25-kDa synaptosome-associated protein), una SNARE neuronal que carece de dominio transmembrana, pero que posee dos motivos SNARE unidos por un region conectora palmitoilada que posibilita su anclaje a las membranas celulares ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS SNARE Dominio Motive Dominio N-terminal SNARE transmembrana SSS D o-svere i ap @ -. “SNARE =-_ avon oe — Nicleo —_endoplasmatico Reticulo GolgiRETICULO ENDOPLASMATICO RUGOSO SINTESIS DE PROTEINAS Todas las proteinas sintetizadas en la célula (excepto las codificadas por ADN de mitocondria y cloroplasto) son iniciadas por ribosomas libres del citosol. Muchas de ellas, las proteinas nucleares, las citosdlicas y las que estén destinadas a cloroplastos, mitocondrias 0 peroxisomas, concluyen su sintesis en dichos ribosomas para luego dirigirse, por el citosol, hacia sus compartimentos diana. Otras, en cambio, como las proteinas integrales de membrana, las de secrecién y las enzimas lisosomales, terminan su sintesis en el REG. SINTESIS DE PROTEINAS - HIPOTESIS DE LA SENAL Ribosoma —_ ARNm 4. Libre 5 3 Proteina Naciente NH, te "Som hay “nea Sefial Péptido Sefal PERMANENCIA AI REG EN CITOSOL Proteinas: Proteinas - de membrana - del citosol - lisosomales ~ nucleares - de secrecién - de mitocondria - de cloroplasto - de peroxisomaSINTESIS DE PROTEINAS - COTRASLACION Y POSTRALACION Las proteinas que carecen de péptido sefial no son reconocidas por la PRS; por este motivo no se dirigen hacia el sistema de endomembranas y su sintesis se completa en el citosol. Muchas de ellas atraviesan otras membranas con posterioridad (postraslacién) para alcanzar su localizacién definitiva. Se han encontrado otras secuencias aminoacidicas, distintas del péptido sefial, que actian como marcas para dirigirlas a sus respectivos destinos. MEMBRANARES Y LUMINALES O SOLUBLES Las membranares permanecen incluidas en la membrana, en algunos casos ligadas a ella mediante el péptido sefial; en otras, secuencias de aminodcidos internas a la cadena funcionan como péptidos de anclaje, deteniendo la translocacién de la proteina por el canal. Segun la cantidad de secuencias de anclaje que presentan, hay proteinas de paso Unico 0 proteinas multipaso. PROTEINAS INTRINSECAS Las proteinas intrinsecas insertas en la membrana a nivel del REG se retienen como componentes de este organoide o son transportadas en vesiculas, formando parte del “envase”, hasta incorporarse a otras membranas del sistema o a la propia membrana plasmitica. INSERCION DE PROTEINAS INTEGRALES EN LA MEMBRANA DEL REGINSERCION DE PROTEINAS INTEGRALES DE MULTIPLE PASO EN LA MEMBRANA DEL REG Las proteinas solubles no conservan el péptido sefial ni poseen otros péptides de anclaje. Cuando el péptido sefial es escindido de la cadena (en este corte acta una peptidasa sefial ubicada en la cara luminal de las cisternas), ésta pierde contacto con la membrana y se vuelca por completo al lumen. Si las proteinas solubles no son residentes del REG, entonces siguen su ruta, en este caso como contenido de las vesiculas transportadoras. Podemos citar en este grupo a las proteinas de secrecién y a las hidrolasas lisosomales. Proteina Multipaso GLICOSILACION La mayor parte de las protetnas sintetizadas en el REG incorporan cadenas glucidicas a su paso por el mismo. La presencia en la cadena polipeptidica de la secuencia de aminoacidos asparagina-x-serina 0 asparagina-x-treonina (x es otro aminodcido cualquiera), sefial de glicosilacién, marca el sitio donde se uniré el glucido. Todas las glucoproteinas sintetizadas en el REG reciben el mismo oligosacérido: una cadena ramificada de doce unidades de monosacérido. ume —- 9 toghenid my tonnehic Tenth eras er sia Era i trode protein rscute ransrvertare gretein In eR membranePROCESO Esta se sintetiza sobre un lipido de membrana -el dolicol-fosfato -, y luego es transferida en bloque a la asparagina de la sefial de glicosilacién (se forma un enlace N-glicosidico). En la sintesis del oligosacérido y su posterior transferencia participan las enzimas glicosiltransferasas. El glicido se adiciona tantas veces como aparezca en la proteina la sefial de glicosilacién. Mientras la glucoproteina atin se halla en el REG, enzimas glicosidasas remueven algunas unidades de monosacarido, al tiempo que distintas glicosiltransferasas afiaden otras nuevas. Se produce asi la diversidad de cadenas a partir del primer bloque transferido. Un nticleo del oligosacérido original, no obstante, se conserva hasta el final en todas las glucoproteinas, de alli que esta glicosilacion reciba el nombre de glicosilacién nuclear. RUTA ESQUEMATICA DE LA GLICOSILACION NUCLEARAPARATO DE GOLGI El aparato de Golgi es la estacién distribuidora final del sistema. Las macromoléculas sintetizadas en REL y REG llegan a é| mediante transporte vesicular y son recibidas en la cara convexa del aparato 0 cara de recepcién, donde se encuentra una zona de transicién con el RE, la red cis. Desde alli, por el mismo mecanismo, son enviadas a la cisterna cis, luego a la medial, y por Ultimo al compartimento trans del complejo de Golgi, que se corresponde con su cara céncava. A partir de otra zona de transicién, la red del trans Golgi, brotan las vesiculas que contienen los productos definitivos. FUNCION GLICOSILACION TERMINAL Es la modificacién secuencial, por remocién y adicién de monosacéridos, de las glucoproteinas sintetizadas en el REG. También se edicionan nuevos bloques oligosacaridicos construidos por completo en el aparato de Golgi, proceso denominado O-glicosilacién (el enlace entre el gldcido y el resto de aminodcido es unién O-glicosidica). SINTESIS DE HETEROPOLISACARIDOS Los heteropolisacéridos constituyentes de los glicosaminoglicanos (GAG) se sintetizan en e| aparato de Golgi y se unen a las proteinas provenientes del REG, ensamblando moléculas complejas como el acido hialurénico o el condroitin-sulfato destinados a la matriz extracelular de las células animales. En las células vegetales, el aparato de Golgi sintetiza polisacdridos de la pared celular, por ejemplo hemicelulosas y pectinas. SINTESIS DE GLUCOLIPIDOS. e adiciona la porcién glucidica a la ceramida sintetizada en el REL. Cara cisLas vesiculas que brotan de la cara trans portan los productos acabados destinados al medio extracelular. La fusién de dichas vesiculas con la membrana plasmética exocitosis- da como resultado la secrecién o exportacién de diversas. sustancias: enzimas, hormonas, moléculas de la matriz extracelular o de la pared celular, anticuerpos y otras, segtin el tipo celular. Hay dos rutas secretorias: la continua o constitutiva y la discontinua o regulada. SECRECCION CONTINUA O CONSTITUTIVA La secrecién continua o constitutiva est presente en todos los tipos celulares. Las vesiculas que siguen esta ruta se exocitan en forma continua, a medida que brotan del aparato de Golgi. Por ejemplo, se secretan por esta via las moléculas que se incorporan a la matriz extraceluler. SECRECCION DISCONTINUA O REGULADA La secrecién regulada, en cambio, es propia de células secretoras especializadas. En estos casos, las vesiculas se acumulan en el polo secretor de la célula, como granulos de secreci6n, y la exocitosis se dispara sélo ante sefiales muy especificas. Por ejemplo, las células b de los islotes de Langerhans (en el pancreas), contiene granulos de insulina que son exocitados en respuesta a una elevacién de la glucemia. La secrecién regulada requiere también un aumento de la concentracién de calcio citosdlico ESQUEMA GENERAL EN LA SECRECCION ] MOLECULAR POR EL APARATO DE GOLGIEL LISOSOMA Los lisosomas son vesiculas membranosas que contienen enzimas hidroliticas. Estas enzimas digieren particulas que la célula incorpora por fagocitosis. Los lisosomas también digieren organelas envejecidas, como por ejemplo mitocondrias. Las enzimas hidroliticas que degradan proteinas, Acidos nucleicos, lipides y carbohidratos se forman en el reticulo endoplasmatico, luego son transportadas en vesiculas hacia el aparato de Golgi. Los lisosomas se originan en el aparato de Golgi. Cuando un virus 0 bacteria ingresa por fagocitosis, un lisosoma se fusiona a la vesicula que contiene al material fagocitado, liberando las enzimas que hidrolizan al material, Los lisosomas también se fusionan a organelas defectuosas o mitocondrias no funcionales. La destrucci6n de estas estructuras permite el reciclado de materiales. FORMACION DE LISOSOMAS PRIMARIOS Los lisosomas primarios son organoides derivados del sistema de endomembranas. Cada lisosoma primario es una vesicula que brota del aparato de Golgi, con un contenido de enzimas hidroliticas (hidrolasas). Las hidrolasas son sintetizadas en el REG y viajan hasta el aparato de Golgi por transporte vesicular. Alli sufren una glicosilacién terminal de la cual resultan con cadenas glucidicas ricas en manosa-6-fosfato (manosa 6-P). La manosa 6-P es el marcador molecular, la “estampilla” que dirige a las enzimas hacia la ruta de los lisosomas Se ha estudiado una enfermedad en la cual las hidrolasas no llevan su marcador; las membranas del aparato de Golgi no las reconocen como tales y las empacan en vesiculas de secrecién para ser exocitadas. Quienes padecen esta enfermedad acumulan hidrolasas en el medio extracelular, mientras sus células carecen de ellas. FAGOLISOSOMA Se origina de la fusién del lisosoma primario con una vesicula procedente de la fagocitosis. Se encuentran, por ejemplo, en los glébulos blancos, capaces de fagocitar particulas extrafias que luego son digeridas en estos cuerpos. ENDOSOMA TARDIO Surge al unirse los lisosomas primarios con materiales provenientes de los endosomas tempranos. Los endosomas tempranos contienen macromoléculas que ingresan por los mecanismos de endocitosis inespecifica y endocitosis mediada por receptor. Este ultimo es utilizado por las células para incorporar, por ejemplo, las lipoproteinas de baja densidad o LDL.ENDOSOMA TEMPRANO Y TARDIO Vesicula endocitica Reciclaje de \ receptores de membrana \_4~, 0 Endosoma temprano ( ©) + Lisosoma Endosoma ( tardio AUTOFAGOLISOSOMA Es el producto de la fusién entre un lisosoma primario y una vacuola autofégica. Algunos organoides citoplasmaticos son englobados en vacuolas, con membranas provistas por las cisternas del RE, para luego ser reciclados cuando estas vacuolas autofagicas se unen con los lisosomas primarios. La digestién que tiene lugar en los lisosomas secundarios, ya se trate de una heterofagia hidrélisis de sustancias de origen exégeno o de una autofagia degradacién de componentes celulares da origen a moléculas més sencillas que atraviesan la membrana lisosomal, es decir son absorbidas por el citosol para su posterior asimilacién Lo que queda del lisosoma secundario después de la absorcién es un cuerpo residual Los cuerpos residuales contienen desechos no digeribles que en algunos casos se exocitan y en otros no, acumulandose en el citosol a medida que la célula envejece. Un ejemplo de cuerpos residuales son los granulos de lipofuscina que se observan en células de larga vida, como las neuronasLa activacién de las hidrolasas requiere un medio mas dcido que el citosol, de pH 5, que se logra por la accién de una bomba de protones situada en la membrana lisosomal. Po! otra parte, la membrana de los lisosomas es impermeable a las enzimas y resistente a le accién de éstas. Ambos hechos protegen normalmente a la célula de una bateric enzimatica que podria degradarla. Existen, sin embargo, algunos procesos patolégicos, como la artritis reumatoidea, que causan la destruccién de las membranas lisosomales, con la consecuente liberacién de las enzimas y la lisis celular. En otros casos, la liberacién de las hidrolasas cumple ur papel fisiolégico, permitiendo la reabsorcién de estructuras que ya no son utiles, por ejemplo la cola de los renacuajos durante la metamorfosis. RUTA DEL PROCES DE AUTOFAGIA Y HETEROFAGIAPEROXISOMA ESTRUCTURA LLos peroxisomas, organoides presentes en todas las células eucariontes, son vesiculas ovoideas de aproximadamente 0,5 mm, que al igual que los lisosomas estan rodeadas por una membrana simple y contienen enzimas en su interior. Esta quiza sea la unica similitud, pues se originan al igual que las mitocondrias por un proceso de fisién binaria, en este caso de peroxisomas preexistentes. Las enzimas que contienen en su matriz se incorporan desde el citosol, siendo sintetizadas en ribosomas libres. Segun el tipo de enzimas que posean, existen muchos tipos de peroxisomas. La principal enzima de los peroxisomas es la catalasa, que descompone el peréxido de hidrégeno producido en el peroxisoma o el originado en otras localizaciones, como el citosol, RE y las mitocondrias. La actividad de la catalasa es la Unica comin a todos los tipos de peroxisomas, FUNCION Y PROCESO En el peroxisoma, se reduce el oxigeno molecular en dos pasos. En el primero una oxidasa elimina los electrones de varios sustratos, como aminodcidos 0 cido Urico. En el segundo, la catalasa, convierte el peréxido de hidrégeno, formado en el primer paso en agua. La catalasa también participa en la neutralizacién de los aniones superéxido, 02- (radicales libres). Estos radicales son primero eliminados con formacién de H202 por la superéxido dismutasa, y luego la catalasa de los peroxisomas convierte al H202 en H20 y O2. La catalasa también neutraliza con consumo de H202, sustancias téxicas, como fenoles, formaldehido y el etanol de las bebidas alcohdlicas, por eso son mas numerosos en el tejido hepatico y renal.GLIOXISOMA Y ENZIMAS HIDROLITICAS CARACTERISTICAS Contiene ademas diferentes oxidasas, como la D-aminooxidasa, urato oxidasa y las responsables de la b-oxidacién de los acidos grasos (este proceso tiene lugar principalmente en la mitocondria), Todas estas enzimas oxidan sus sustratos produciendo energia térmica en lugar de ATP. En las células vegetales, encontramos glioxisomas, que son peroxisomas especializados en el metabolismo de los triacilgliceridos Las enzimas de los glioxisomas, transforman los Acidos grasos de las semillas en hidratos de carbono por la via del glioxilato. Los glioxisomas, también juegan un papel central en la fotorrespiraci6n (se denomina asi dicho proceso por requerir luz y O2 y liberar CO2), que tiene lugar en las hojas de las plantas verdes en los dias de calor intenso y baja humedad ambiente En los glioxisomas, se cataliza la oxidacién del glicocolato a H202 y glioxilato con consumo de oxigeno. Luego el H202 formado es descompuesto y el glioxilato es transformado en glicina, la cual ingresa al ciclo de Krebs. ESQUEMA DE REDUCCION DEL PEROXISOMA EN LA MITOCONDIRA PEROXISOMA MITOCONDRIA Acil graso-CoA, H,0; En2-FAD Enz-FAD = - Oy Enz-FADH, » -FADH fr" = NADH + HY “i ep = Acil graso-CoA,.2) + i}-_—_ acetil-CoA NADH +H? exportado para su reoxecibn 43CITOCROMO El citocromo son un tipo de proteinas que realizan funciones de catélisis oxidoreductivas, como también interpretan funciones de transporte energético dentro de la célula. Su no met esquema se presenta porfirinas, que son proteinas que presentan uan estructura compuesta por 4 pirroles, denominado porfirina, la cual encierra un étomo metélico por enlaces coordinados. Esta estructura es del tipo hemo (hierro) en donde su estado de activacién varia de +3 a +2, en la estructura del anillo. El tomo metélico es el el color oscuro caracteristico, Hay tres grandes tipos de citocromos que da al citocromo llamados a, b y ¢, clasificados en funcién del espectro de absorcién y del tipo de grupo hemo. ESTRUCTURA * Citocromo b, contienen hierro-protoporfirina IX (existen 15 clases de porfirinas aunque solo la IX aparece en la naturaleza), conocida como hemo B * Citocromo c contienen el grupo hemo C, que a diferencia de los otros hemos se une directamente (y no por enlaces coordinados) a la proteina, concretamente a través, de dos cisteinas que forman sendos enlaces tial. * Citocromo a, contienen hemo A que es una forma modificada de la protoporfirina IX. Es importante mencionar que los citocromos a de la cadena de transporte estén asociados a Atomos de cobre, que serdn oxidados 0 reducidos por los étomos de hierro de las porfirinas, pero nunca el cobre formara parte de los grupos hemo. ESTRUCTURA DEL CITOCROMO 44El citocromo P-450 (P-450) es el principal responsable del metabolismo oxidativo de los xenobidticos. Todos los P-450s conocidos se nombran siguiendo un criterio comin y se agrupan en familias y subfamilias en funcién de la similitud en la secuencia del ADN que los codifica. Las familias 1, 2 y 3 estan constituidas por enzimas encargados de la biotransformacién de xenobiéticos, mientras que el resto de familias incluyen P-450s que intervienen en la biosintesis y el metabolismo de compuestos endégenos. CARACTERISTICAS las caracteristicas ms significativas de los P-450 que metabolizan xenobisticos es su baja especificidad, lo que permite que sean capaces de metabolizar un ntimero casi ilimitado de substratos, principalmente a través de reacciones de oxidacién, pero también de reduccién e hidrdlisis. Las oxidaciones catalizadas por el P-450 son reacciones de monooxigenacién dependientes de NADPH y para las que utiliza oxigeno molecular. PROCESOS Y EXPRESION Como consecuencia de estas reacciones el P450 acelera la eliminacién del organismo de gran numero de farmacos y compuestos toxicos, pero también es el responsable de la activacién de toxinas 0 precarcindgenos. En el hombre, los P-450s estan ampliamente distribuidos por todo el organismo, si bien el higado es el organo con mayor expresién de estos enzimas. Su expresion esta dad por factores genéticos (algunos presentan polimorfismos genéticos), isiopatolégicos (regulacién hormonal, enfermedades) o ambientales (factores nutricionales, induccién, inhibicién). ESTRUCTURA DEL CITOCROMO P450 uuduLuuvoovuuUuNd RevueSe trata de compuestos de naturaleza quimica muy variada, algunos de los cuales son de origen natural, entre los que destacan las micotoxinas 0 los alcaloides, si bien la inmensa mayoria son productos originados por la propia actividad humana, como los contaminantes ambientales 0 los compuestos quimicos de sintesis. Al conjunto de procesos enziméticos a los que se ven sometidos los xenobiéticos en el organismo tendentes, en general, a su neutralizacién y eliminacién se les conoce como reacciones de biotransformacién 0 de metabolizacién de xenobisticos FUNCION Se trata de una serie de enzimas no integrados en las vias del metabolismo energético 0 intermediario del organismo y cuyos substratos son los xenobisticos. Su funcién es la de convertir los xenobiéticos en moléculas ms polares, mas hidrosolubles y, por tanto, mas facilmente excretables. EI papel de estos enzimas es clave para la supervivencia celular. De no existir tales vias metabélicas, una vez en el interior del organismo los xenobiéticos tenderian a acumularse alterando el equilibrio celular y provocando alteraciones funcionales e incluso la muerte celular. PROCESO OXIDOREDUCTIVO Tradicionalmente estos procesos se han agrupado en dos fases 0 etapas. En la fase 1 los xenobiéticos son modificados mediante reacciones de oxidacién, reduccién o hidrélisis y convertides en productos més hidrosolubles gracias a la aparicién de nuevos grupos funcionales de caracter polar (hidroxilo, amino, carboxilo). En la fase 2 los xenobiéticos, 0 los metabolitos generados por las reacciones de la fase 1, se combinan con moléculas endégenas de cardcter polar para formar productos de conjugacién que son répidamente excretados PARTICIPACION RELATIVA DE DIFERENTES ENZIMAS DE FASE 1 EN EL METABOLISMO XENOBIOTICOS reductasas peroxidasas hidrolasas Flavin- monooxigenasa Citocromo P450 46CYP450 - CARACTERISTICAS EN EL PROCESO OXIDOREDUCTIVO P-450 interviene fundamentalmente en reacciones de oxidacién, también es capaz de catalizar reducciones, hidrataciones 0 hidrdlisis. Salvo contadas excepciones, el P-450 requiere oxigeno molecular y NADPH para oxidar el substrato. Se trata de reacciones de monooxigenacién en las que sdlo uno de los atomos de oxigeno es incorporado en la molécula del substrato, mientras que el otro es reducido hasta agua A las enzimas que catalizan este tipo de oxidaciones se les conoce como monooxigenasas u oxidasas de funcién mixta. Estas reacciones difieren de las catalizadas por las oxidasas del metabolismo intermediario, con formacién de perdxido de oxigeno, y de las reacciones peroxidacién en las cuales el 4tomo de oxigeno introducido en el substrato procede de perdxidos y no del oxigeno molecular. CYP450 - OXIDACIONES CATALIZADAS Entre las oxidaciones catalizadas por el P-450 se incluyen hidroxilaciones arométicas y alifaticas, N- y S-oxidaciones, epoxidaciones, O-, N- y S-desalquilaciones, desaminaciones, desulfuraciones, deshalogenaciones y deshidrogenaciones. CYP450 - SUBSTRATOS Entre sus substratos se incluyen tanto moléculas peque/ias como otras mucho mayores (p. e. etanol y ciclosporina, con pesos moleculares de 40 y 1203 D, respectivamente), aromiaticas 0 lineales, tanto planas como globulares, que contengan o no heteroatomos. LOCALIZACION CELULAR Y FUNCION METABOLICA DEL CITOCROMO P-450 Los P-450s son hemoproteinas cataliticas en las cuales un grupo tiol del aminoacido cistefna sirve como quinto ligando al dtomo de hierro del grupo hemo y el sexto ligando es una molécula de agua. En general los P-450s de eucariotas tienen un peso molecular que oscila entre 50 y 60 KD. La similitud en la secuencia de aminodcidos entre los diferentes P-450s es relativamente baja, llegando a ser menor del 20% en algunos casos. El extremo C-terminal de la molécula presenta una conservacién de las secuencias de aminodcidos entre los distintos P-450s mayor que la regién N-terminal. El menor grado de conservacién corresponde a las secuencias intermedias. Un 30% de identidad de la secuencia en la zona intermedia puede considerarse como significativa, mientras que un 50% de homologia en la regién C-terminal podria considerarse como baja..MECANISMO ENZIMATICO DEL P-450 El centro catalitico de los P-450 es el atomo de hierro hexacoordinado (con los 4 anillos de la protoporfirina IX, con el grupo tiol de un residuo de cisteina de la cadena polipeptidica y con el solvente, normalmente agua). El primer paso del proceso catalitico consiste en la unidn del substrato y el desplazamiento del solvente en la sexta posicién de coordinacién del atomo de hierro. Como consecuencia de ello se originan cambios en el estado de spin, en el potencial redox y en el maximo de absorbancia de la hemoproteina. En el segundo paso se produce la reduccién del complejo hemoproteina-substrato al estado ferroso (el Fe3+ del grupo hemo pasa a Fe2+) gracias al aporte de un electrén y al aumento en el potencial redox originado en el paso anterior. El tercer paso es la unin del oxigeno molecular para formar un complejo superéxido y en el cuarto paso se produce el aporte de un segundo electrén con la formacién de una especie activada de oxigeno. A partir de este punto el mecanismo no se conoce con certeza. CICLO CATALITICO DEL CITOCROMO P-450LAS ENZIMAS P-450 IDENTIFICADOS EN LA ESPECIE HUMANA 123 4 9 at 26 27 39 48 51 tar 18 | 384 a = id me) Eid, te 3A5 1A 1181 3a 112 3Aa3 4A11 481 4F2 4¥2 4x1 421 2744 2781 2701 4020 4F3. 4022 AFB 4F1 aFi2 4F22 2A8 286 2C8 26 2E1 2F1 202 2R1 281 201 24 2a7 2c9 2A13 2018 2019 PRINCIPALES P-450S DE METABOLIZACION DE FARMACOS EN EL HiGADO HUMANO cop Abandancia Variabifidad peas Metabolismo de _Activacién de en higado (%} interindividual * wee firmacos(%F —— prre-carcinigenos IA2 0 0 Inducible, polimérfico 4 i 2A6 5 100 Poliméfico (2a3om Protofipita (a5nm) Fliamentos intermedios FILAMENTOS EN LA DIVISION CELULAR papel prepondera Pe ite en celular, estos vuelven a @ hai observado imiento que causa envejec padecimiento prematuro evan é bilidad nuclear que llevaria cidad de reparacién de un tejido,DT MICROTUBULOS Los microtdbulos son cilindros constituidos por la proteina tubulina; presentan un diametro de alrededor de 25 nm y son més rigidos que los otros componentes del citoesqueleto.. POLIMERIZACION Se forman por la polimerizacion de unidades de tubulina, compuestas por dimeros de a y B tubulina unidas fuertemente por uniones no covalentes, éstas se polimerizan formando 13 protoflamentos paralelos entre s{; cada protoflamento tiene una polaridad estructural, con la a tubulina expuesta en un extremo (negativo) y la B tubulina en el otro extremo (positivo) lo que le da la polaridad al microtdbulo. Cada dimero de tubulina contiene unida una molécula de GTP (trifosfato de guanosina) que por su actividad de GTPasa, se hidroliza a GDP (difosfato de guanosina) poco después 0 una vez que se agrega al microtuibulo. POLIMERIZACION PRECOZ Y PROLONGACION AMPLIA Cuando la polimerizacién es répida, la tubulina se une més rdpido de lo que el GTP se hidroliza y entonces el tbulo esté formado por tubulina-GTP y se favorece el crecimiento en direccién al extremo positivo. Esta polaridad permite al microtubulo crecer (polimerizar) por la adicién de dimeros de tubulina al extremo positivo, mientras que se acorta (despolimeriza) por pérdida de los mismos en el extremo negativo y forma parte de la poza de tubulina disponible para su polimerizacién. Asi, cuando la polimerizacién es rapida el tGbulo esta compuesto sélo por tubulina-GTP ANOMALIA EN LA POLIMERIZACION DEL MICROTUBULO La modifcacién de la polimerizacion- despolimerizacién de los microtdbulos puede tener un profundo efecto en su ae organizacién y funcién celular. Un ejemplo dlasico es la exposicié ion a la colchicina, este compuesto se une fuertemente a los hewn ono dimeros de tubulina libre en el citoplasma anise y previene su polimerizacién, lo que lleva a la desaparicién del huso acromatico, estructura que guia a los cromosomas durante la mitosis, lo que resulta en la Merotubule incapacidad de la célula a separar los cromosomas y por tanto se detiene la 56 divisién celular~ WOVIMIENTO ENLOSWiRCROTORULOS MEDIADO POR PROTEINAS Los microttibulos crecen y se extienden hacia la periferia de la célula, a partir de una estructura en el centro de la misma que se denomina centrosoma, o centro organizador de los microtébulos (MTOC, por sus siglas en inglés), formando un sistema por el cual se transportan diferentes componentes (vesiculas, organelos, microttibulos, etc.) a través de la célula. Estos movimientos son mediados por proteinas motoras que se asocian a los microtubulos y los estabilizan o desplazan a lo largo de los microtUbulos. Las proteinas motoras son variadas y se caracterizan por el tipo de microtubulo al que se unen, direccién en que se desplazan y componente que transportan. PROTEINAS MOTORAS - DINEINA Y CINESINA Transportan en direccién al extremo positive (hacia la periferia de la célula)y las dineinas que transportan en direccién al extremo negativo del microtubulo (al centro de la célula). Estas proteinas motoras, son generalmente dimeros que tienen dos regiones globulares que unen ATP y una cadena ligera que se une a algin componente celular que transportan. Estas proteinas hidrolizan el ATP, energia que lleva a un cambio de conformacién de la molécula y le permite moverse a lo largo del microtabulo. ESQUEMA DE UNA PROTEINA MOTORA Se representa la interaccién de una proteina motora con un microtébulo y en el otro extremo con un organelo; su deslizamiento sobre el microtabulo requiere de ATP. PROTEINAS MAP Los microtibulos se asocian con numerosa proteinas _accesorias (MAP, por sus siglas en inglés) que pueden estabilizarlos o facilitar su despolimerizaci6n; la mas sobresaliente de estas proteinas accesorias es la proteina Tau, que en condiciones patolégicas se separa de los microttibulos y se hiper fosforila © agrega, como ocurre en enfermedades neurodegenerativas. ProteinaCILIOS Y FLAGELOS - MOTILIDAD Y MOVIMIENTO CELULAR Adicionalmente, los microtdbulos forman estructuras estables como los cilios y fagelos que parten del cuerpo basal o axonema, el cual funciona como centro organizador de los microtébulos, éstos se extienden hacia fuera de la superfcie celular y sirven como propulsores o desplazan el fuido sobre la superfcie celular. ESTRUCTURA Los cilios y fagelos estén formados por microtdbulos acomodades en un patrén que en un corte transversal se revela, por microscopia electrénica, como nueve pares de tubos periféricos que rodean a un par central, estructura denominada 9+2 (2). El movimiento de cilios y fagelos se produce por la defexidn de su centro y los microtubulos periféricos se deslizan uno sobre otro, la dineina es la proteina que genera la inclinaci6n Esta disposicién se refiere a los 9 pares fusionados de microtdbulos periféricos y de 2 microtébulos no fusionados en el centro. Brazos de dineina sirven como motores moleculares (proteina accesoria motora). Si los brazos de dineina son defectuosos ( a causa de una mutacién en los genes de la dineina), las cilias y los flagelos son inméviles, lo que provoca problemas en el tracto respiratorio (bronquitis crénicas), e infertilidad en la mujer y el varén (flagelos de los espermatozoides inméviles y cllias de las trompas uterinas inméviles) ESTRUCTURA CUERPO BASAL (a) Corte transversal de un centrosoma o cuerpo basal con su estructura tipica, "9+0" Nueve tripletes periféricos y ninguno en el centro. Cada triplete esta formado por tres microtébulos. b) Esquema de un centrosoma o cuerpo basal p a bDISTRIBUCION DE LOS MICROTUBULOS EN CILIOS Y CUERPOS BASALES. Cilio Cuerpo basal (flagelos y cilias tienen una disposicién de tUbulos de "0+2". Esta disposici6n se refiere a los 9 pares fusionados de microtabulos periféricos y de 2 microtubulos no fusionados en el centro. Brazos de dineina sirven como motores moleculares (proteina accesoria motora). ESQUEMA DE UN CILIO - CORTE TRANSVERSALANOMALIAS EN LAS PROTEINAS MOTORAS DE LOS FLAGELOS (Si los brazos de dinefna son defectuosos (a causa de una mutacién en los genes de la dineina), las cilias y los flagelos son inméviles, lo que provoca problemas en el tracto respiratorio (bronquitis crénicas), e infertilidad en la mujer y el varén (flagelos de los espermatozoides inméviles y cilias de las trompas uterinas inméviles). MICROFOTOGRAFIAS ELECTRONICAS DEL FLAGELO DE UN ESPERMATOZOIDE NORMAL Y CON DINEINA DEFECTUOSA Corte transversal de la cola de un espermatozoide con dineina defectuosa > Corte transversal de la cola de un espermatozoide con dineina normal La célula en movimiento puede tomar también un aspecto poligonal por modificaciones en los filamentos de actina corticales, formandose laminas citoplasmaticas, llamadas lamelipodios con prolongaciones denominadas filopodios. Lamelipodios y filopodios alteran periodos de crecimiento y acortamiento, base de la motilidad celular. Los axones crecen en su extreme distal por una especializacién, llamada cono de crecimiento que responde a estimulos fisicos y quimicos. 60Las proteinas accesorias motoras, son motores proteicos que ligan dos moléculas y que utilizando ATP , provocan el desplazamiento de una molécula con respecto a la otra. Estas proteinas tienen un extremo motor que unen al citoesqueleto (microtuibulos y actina) y por el extremo ligante pueden unirse a diferentes tipos de estructuras moleculares, como por ejemplo organelas, vesiculas u otras proteinas del citoesqueleto. - Miosina que se une a actina - Quinesina o Kinesina que se une a microtdbulos - Dineina que se une a microtubulos MOVIMIENTO DE PROTEINAS MOTORAS SOBRE LOS MICROTUBULOS Cuando se conectan a otros microtubulos, las proteinas motoras pueden causar movimiento si los extremos estan fijos (cilias y flagelos) 0 extender la longitud de los paquetes de fibras si los extremos estan libres. + Microtubulo - 4a Cadenas LivianasDisposicién de los microtubulos en el axén de una neurona. Observe los distintos tipos de transporte, uno anterégrado del cuerpo celular a la terminal sindptica y un transporte retrégrado, de la terminal al cuerpo celular. Los microtibulos junto con las proteinas motoras transportan los distintos materiales, por ejemplo vesiculas con neurotransmisores. KiFsKIFIB Kinesina KIF? japiq ° Citoplasmatica Dendritas DICROTUBULOS ASOCIADOS A PROTEINAS MOTORAS. D(a) Los extremos fijos de los microtdbulos permiten a los motores proteicos mover las fibras (b) Los extremos libres de los microtébulos permiten a los motores proteicos extender la longitud de las fibras.SOCIACIONES DE LAS MIOSINAS | Y Il CON LOS FILAMENTOS DE ACTINA. (a) Los filamentos de actina transcelulares (que atraviesan toda la célula), sirven como vias de transporte para organoides en el citoplasma. Para esto necesitan de la proteina motora miosina, que consume ATP para provocar el movimiento (b) En los filamentos de actina que actudn como fibras tensoras, se localizan numerosas unidades de miosina ||. Estos filamentos de actina se unen a estructuras localizadas en la membrana plasmatica, llamadas contanto focales. De esta forma se generan leves movimientos pero continuos Vesicula Miosina IICENTROSOMA ESTRUCTURA Y LOCALIZACION El centrosoma, localizado cerca del nucleo de la célula, consiste de un par de centriolos rodeados por una matriz de proteinas que incluye cientos de estructuras anulares formadas por la proteina y tubulina; cada uno de estos anillos funciona como punto de inicio (nucleacién) para la polimerizacién de las subunidades a y B de la tubulina que da lugar a los microtubulos, cuyo extremo negativo, se embebe en el centrosoma y el extremo positivo crece hacia el citoplasma. El centrosoma y componentes asociados determinan la geometria del arreglo de los microtubulos en la célula a través del ciclo celular; participa en la forma, polaridad y motilidad celular, asi coma en la formacién del huso acromatico y segregacién de los cromosomas en la mitosis. ANOMALIAS EN EL CENTRIOLO/CUERPO BASAL El par de centriolos, perpendiculares entre si, son estructuras de 200-500 nm de longitud, formados por microtdbulos, funcionan como centros organizadores para la formacién de cilios y flagelos (cuerpos basales), y el huso acromiatico. La alteracién del centriolo/cuerpo basal seasocia a una gama de enfermedades que incluyen las ciliopatias, enfermedades cerebrales y cancer. Los cilios pueden ser de dos tipos, los méviles y el cilio primario. Los cilios méviles se presentan en gran ntimero en células epiteliales de la traquea y oviducto y generan el movimiento del fuido. Los fagelos, presentes en muchos protozoarios y en espermatozoides, presentan una estructura similar a los cilios pero son mucho més largos; su funcién permite el desplazamiento o motilidad de la célula. SENALES EXTRACELULARES - CILIOS PRIMARIOS El cilio primario no es movil, aunque presenta una estructura semejante a los cilios méviles; esta presente en practicamente todas las células del cuerpo humano. Se caracterizan por funcionar como sensores de sefiales extracelulares que incluyen hormonas, factores de crecimiento, morfégenos, y responden a estrés mecanico.Se visualiza el par de centriolos y la formacién de un nuevo centriolo, perpendicular al original. Los puntos amarillos representan los satélites centriolares. DUPLICACION DEL CENTRIOLO Y FORMACION DEL CILIO 2 Se visualiza una célula (circulo) y los pasos que ocurren durante las fases del ciclo celular (G1, S, G2, M). En el centrosoma, el par de centriolos (cilindros azules) con sus apéndices (ufias negras) estd rodeado por una matriz pericentriolar (sombras verde y amarilla) a partir de la cual crecen los microttbulos (cadenas amarillas). Un nuevo par de centriolos se forma en la fase S del ciclo celular; al fnalizar la mitosis (M) cada una de las células que se forman contiene un par de centriolos, En G1 (derecha), el centriolo se localiza en el centrosoma; el centriole puede funcionar como cuerpo basal que da origen a un cilio o fagelo (triangulo rayado en G1, izquierda)BIOGENESIS DEL CENTRIOLO La tubulina acetilada es el constituyente mas importante del centriolo. Durante la divisién celular, se forma un nuevo centriolo adjunto a cada uno de los preexistentes. FASE G1YS La duplicacién del centriolo empieza en la transicién de la fase G1 a la S del ciclo celular, con la formacién de un precentriolo, lo que ocurre bajo el control de la cinasa PLK4; ésta fosforila a la proteina FBXWS, la que a su vez lleva a la estabilizaci6n de SAS-6, proteina que le confere la simetria radial al centriolo. Los procentriolos se alargan en la fases S y G2, lo que depende de diferentes proteinas, hasta alcanzar la madurez por la adquisicién de los apéndices distal y sub distal, importantes para anclar los microtubulos. Durante la fase S ocurre la unién del procentriolo y su madre adyacente, hecho que previene la duplicacién de otro centriolo. La separacién de los centriolos ocurre hasta la division celular lo que requiere de la cinasa PLK1 (relacionada con la PLK4 mitotica) y la separasa (proteasa responsable de la separacién). CELULA FOTORRECEPTORA DE LA RETINA DE LOS VERTEBRADOS En el segmento interno de la célula se encuentra el nticleo (N) y otros organelos. El cilio primario de la célula forma el segmento externo del fotorreceptor que contiene multiples discos membranosos (regién fotosensible), éste requiere de un intercambio continuo de moléculas que mantiene su estructura y funcidn. Una variedad de proteinas se sintetizan en el reticulo endoplasmico y Golgi (G) que son transportadas en vesiculas (puntos azules y rojos) por diferentes proteinas motoras (puntos amarillos) que se deslizan sobre los microtuibulos (verde) a lo largo del segmento externo (cilio modifcado).CILIOGENESIS El cilio primario se origina del centriolo, éste migra hacia la superfcie de la Célula, se asocia a proteinas de vesiculas que se fusionan a la membrana plasmatica, en la que se anclan a la corteza de actina. Los microtbulos del axonema crecen y sobresalen del soma, la parte central forma una red de microtdbulos que se prolongan y forman una extensién de la membrana ELONGACION La elongacién del clio (0 cilio modifcado) requiere del transporte de proteinas ciliares hacia la punta de éste; el crecimiento del cilio es dinamico, nuevas moléculas de tubulina se incorporan continuamente en la punta del cilio a través de un recambio continuo, lo que ocurre por un transporte en ambas direcciones que es mediado por diferentes tipos de cinesinas y dineinas, PROTEINAS CAP EN LA PERIFERIA En la punta del cilio se localizan unas proteinas llamadas “cap” las cuales participan en la regulacién del crecimiento y reabsorcién de los microtubulos; adicionalmente, el transporte a lo largo de los micratubulos se regula mediante las diferentes modifcaciones post traduccionales a las que esta sujeta la tubulina. TRAFICO VESICULAR POR PROTEINAS RABS Ocurre un tréfco de vesfculas especializadas, provenientes del aparato de Golgi, en el que participan varias proteinas como la Rab8, lo que parece controlar el paso de las distintas proteinas ala matriz del cilio ESQUEMA DEL TRANSPORTE INTRAFLAGELAR kara 05M-3 enonus CHE oe es onecner mM BRS xupat KLP20! @rwiciets | raciers — Qcepaiarimins — © Caprarurrmencens GGSe MICROFILAMENTOS FUNCION Y LOCALIZACION Los flamentos de actina o F-actina, son polimeros helicoidales de la proteina globular actina (G-actina) , estan presentes en todos los eucariontes y por su asociacién con otras proteinas forman flamentos estables, que se pueden organizar en una variedad de haces paralelos unidireccionales, antiparalelos, redes bidimensionales o geles tridimensionales, como en el caso del sistema contractil de las células musculares, en la formacién de microvellosidades de las células epiteliales o en la formacién de lamelipodias. LOCALIZACION Los flamentos de actina se concentran justo debajo de la membrana plasmatica 0 corteza brindéndole a ésta la forma y movimiento de la superfcie, aunque también forman estructuras temporales como es el anillo contractil que separa las células animales cuando se dividen, un proceso conocido como citocinésis; estos movimientos generalmente requieren de la asociacién con miosinas (un tipo de proteinas motoras). ESTRUCTURA Los flamentos de actina 0 F-actina, son polimeros helicoidales de la proteina globular actina (G-actina) , estan presentes en todos los eucariontes y por su asociacién con otras proteinas forman flamentos estables, que se pueden organizar en una variedad de haces paralelos unidireccionales, antiparalelos, redes bidimensionales o geles tridimensionales, como en el caso del sistema contractil de las células musculares, en la formacién de microvellosidades de las células epiteliales 0 en la formacién de lamelipodias. Los flamentos de actina usualmente son cortos, con un didmetro aproximado de 7 nm; cada flamento (actina- F o fbrilar) consiste de una cadena de monémeros de actina (actina-G 0 globular) los cuales tienen la misma direccién, lo que le proporciona polaridad al flamento.POLIMERIZACION Y DESPOLIMERIZACION DE LOS FILAMENTOS DE ACTINA La actina constituye alrededor del 5% de la proteina total de una célula animal. Al igual que los microtdbulos, la velocidad de crecimiento del flamento es mayor en el extremo positivo, el crecimiento del flamento se favorece por la uni6n de los monémeros a ATP. La unién a ADP disminuye la estabilidad del polimero, facilitando la despolimerizacién y liberacién de monémeros desde del extremo negativo. La nucleacién de actina es catalizada por varios factores: La proflina se une a monémeros de actina y favorece su unin al ATP, el complejo proflina- actina interactia con la formina, la que promueve la polimerizacién y el crecimiento del flamento en forma lineal. Filamento de Actina PROFILINA Y EL COMPLEJO ARP2/3 La proflina favorece la presentacién de actinaal complejo Arp?/3; este complejo constituido por siete subunidades proteicas, estabiliza el extremo negativo del flamento permitiendo la rapida elongacién del flamento en el extremo positive. El complejo Arp 2/3 es esencial en la generacién de ramifcaciones de la red de flamentos de actina en distintos procesos La coflina causa la despolimerizacién del flamento en su extremo negativo, creando un mayor numero de extremos positivos debido a la fragmentacin del flamento; los monémeros pueden ser re polimerizados mediante la participacion de la proflina y el complejo Arp2/3. Asimismo, la gelsolina como la coflina, facilita la despolimerizacién en pequefios flamentos lo que hace al citoplasma més fuido.PROTEINAS CAPZ, ANKIRINA Y ESPECTRINA Una variedad de proteinas interacttian con la actina; asi, la proteina Cap Z se une al extremo mas positivo del flamento e impide el crecimiento del mismo. Otras proteinas se unen al polimero (flamento) controlando su comportamiento como lo hacen la espectrina y ankirina en la region cortical de las células. De manera semejante, la distrofna une a la actina con otras proteinas de soporte en el sarcolema (membrana plasmatica de la célula muscular), proporcionando estabilidad a la fora muscular. IMPORTANCIA EN EL TRANSPORTE MOLECULAR . La interaccién con distintas proteinas permite la formacién de haces de flamentos acomodados de forma diversa favoreciendo estructuras particulares, ya sea por estabilizar los flamentos o por impedir su polimerizaci6n. Esta variedad de interrelaciones regulan una gama de funciones tales como la endocitosis, el movimiento y forma celular, asi como la asociaci6n con proteinas motoras y el transporte de organelos CITOCALISINA D Y LATRUNCULINA El desciframiento de estas interacciones se ha favorecido por el descubrimiento de una variedad de toxinas obtenidas de hongos y esponjas, las cuales alteran la funcién de los microflamentos, tales como la citocalasina D y la latrunculina que previenen la polimerizacion de actina; 0 bien compuestos como la faloidina y la falacidina que estabilizan los flamentos y favorecen su crecimiento e impiden su despolimerizacin CITOESQUELETO CORTICAL Elimpiden su despolimerizacién (26). El citoesqueleto cortical infuye en la movilidad y organizacién molecular de la membrana, cerca de 19 proteinas pueden anclarse directa o indirectamente al citoesqueleto de actina. Este puede generar barreras que detienen la difusién de proteinas y lipidos