Тема лекции:

Имунологические реакции.
Реакции AG-AC в vitro
 Иммунологический (иммунобиологический)
метод

Кожно-
Серологические реакции ( in vitro ) аллергическ
ие пробы:

Выявление антигенов
Методы
микроорганизмов: выявление
Выявление оценки
специ- иммунного
антител в
фической статуса
в чистой сыворотке
в пат. м-ле гипер-
культуре больного
(экспресс- чувстви-
(серол. (сероди-
диагности- тельности
иденти- агностика)
ка) (аллергии)
фикация)
 ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

• Иммунологические методы используют, как для

выявления титра антител в сыворотке крови
(серодиагностика), так и для обнаружения антигенов в
биологических жидкостях.

Общие закономерности иммунологических методов (ИМ):

• Исследование производится in vitro;
• Проявляются при иммунологическом соответствии
(гомологичности) антигена и антитела;
• Протекают в 2 фазы (невидимая и видимая).
• Для количественной характеристики иммунологических
методов исследования используют такие понятия, как
чувствительность и специфичность.
• В идеале чувствительность и специфичность
иммунологических методов приближается к 100%.
 Реакции антиген-антитело в vitro

Реакция Aг-Aт опрелеляется специфическим взаимодействием

между эпитопами Аг и паратопами Ат.

В данном процессе проявляются

4 типа связей:
• водородные связи,
• электростатические связи,
• силы Van der Waals,
• гидрофобные связи.

Связь Aг-Aт обладает тремя

характеристиками:
• бывает экзотермической,
• специфической
• обратимой.
 Иммунологические реакции

• Обнаружение в сыворотке крови больного антител к

возбудителю инфекции или соответствующего антигена
позволяет установить причину заболевания.

• Свойство веществ к интесивному реагированию (Avidite)

одного Aт к другому специфичному Aг характеризует с
какой скоростью проявляется реакция Aг-Aт
(появление осадка, агглютинация и т.д.).
Данная реакция зависит от:
• постоянной асоциации,
• валентности Aт,
• количества эпитопов,
• температуры,
• pH,
• ионной силы среды.

Важно:
один паратоп может скомбинирваться только с одним эпитопом,
называемым “специфичный”.
Таким образом, если известен хотя бы один из элементов
реакции - Aг или Aт, может быть определён другой.
• Сродство одного Aт к другому специфичному Aг
характеризует интенсивность межсвязовых сил в
комплексе Aг-Aт. Она зависит от стерической
комплиментарности между паротопом и эпитопом.
 Реакции Aг-Aт (серологические реакции)
имеют два практических пути к применению:

I. Сероидентификация:
Определение и дозирование Aг (неизвестный элемент -
выделенные микробные штаммы из определенных проб)
посредством известных специфичных Aт.

Возможны два источника Aт: Aт моноклонные,

абсолютно однородные, которые распознают
всего лишь один эпитоп и Aт поликолнные,
которые содержатся в имуных сыворотках
(антисыворотки), которые предполагают связи с
высокой захватываемостью (авидностью) с Aг.
• Имуные сыворотки получяются после введения(инекции)
лабораторному животному определеного известного Аг.

• После определенного периода сыворотка полученая от

данного животного будет содержать антитела против данного Аг.

• Но точная природа полученного Aт из данной сыворотки не

известна в полном объеме (это поликлональные Aт).

• Специфичность данной антисыворотки должно постояно

проверяться при этом нежелательные Aт должны
абсорбироваться.
II. Серодиагностика:
Определение и титрование Aт из сыворотки болного
(неизвестный компонент) по отношению к определенному
специфичному Aг (определенного после установки
диагноза).

Некоторые реакции Aг-Aт проявляются напрямую и могут

быть замечены исследователем:
к примеру:
• выпадение осадка или агглютинация комплексов
Aг-Aт,
• дезинтеграция (лизис) некоторых несуших клеток Aг на их
мембране (гемолиз, бактериолиз, и т.д.).
• Другие реакции Aг-Aт не проявляются “спонтанно” in vitro.

• В данном случае прибегают к искуственным процедурам,

таким как применение “меченным” Aт:

• Флюорохромом - меченные Aт: имунофлюоросценция.

• Радиоактвно-изотопно-меченные Aт:
радио-имунный анализ.

• Ферментно- меченные Aт :

имунноферментный анализ.
 ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ АНТИГЕН-
АНТИТЕЛО

I. Специфическая фаза:
имеет место взаимодействие между Aг и соответствующим
специфичным Aт. Это быстротекущий феномен, невидимый,
общий для всех реакций Aг-Aт.
Протекает при температуре в 37 C, в присутствии электролита
(физиологический р-р).

II. Неспецифическая фаза:

видимая для реакции Aг-Aт, проявляется посредством
выпадения осадка, агглютинации, дезинтеграции и др. явлений,
зависящих от определенных условий (валентность Ac, размеров
Ag, и т.д.).
 Реакция агглютинации
из латыни – agglutinatio – склеивание
• Реакции агглютинации — это простые реакции
склеивания корпускулярных антигенов с помощью
антител.
• Различают:

— прямые реакции агглютинации, которые используют для

выявления антител в сыворотке крови больного.
Добавление взвеси убитых микробов к сыворотке больного
вызывает образование хлопьевидного осадка
(положительная реакция склеивания микробов антителами).
 РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ

• Реакция Aг-Aт может проявляться посредством

агглютинации тогда, когда антигенные детерминанты
проводяться фигурными частицами (нерастворимые,
корпускулярные Aг), при этом специфичные Aт являются
полноценными (по крайней мере бивалентные).

• Аглютинация определена формированием некоторой

рещетки между Aг и Aт, что позволит приблизить
достаточное количество фигурных частиц для получения
видимой не вооруженным глазом агглютинации.
Aт IgM с 10 эпитопами потенциально агглютирует более
эфективно чем Aт IgG.
• Классификация реакций агглютинации

1. “Активная” агглютинация, в которой фигурная частица

(корпускулярная Aг) непосредственно является
носителем специфичных антигенных детерминантов
(эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, спериатозоиды,
бактерии)

2. “Пасивная” агглютинация, в которой частица является

основой для закрепления на ней растворимого
антигенного детерминанта, который закрепляется на её
поверхности. Чаще всего в качестве основы
используются формалиновые эретроциты, частицы из
латекса или холестироловые кристалы.
 • Активная (непосредственная)реакция
агглютинации
• Качестенный аспект
Реакция может быть проведена на предметном стекле или в
пробирках.
Реакция на предметном стекле
Перемешиваются капля сыворотки и капля антигенной
суспензии в капле физ. раствора (электролит).
Наблюдение проводится под микроскопом или
невооруженным глазом.
В случае положительной реакции появляются аглютинаты, а
жидкость становится позрачной;
• О Аг соматический, термостабильные– мелкозернистый
осадок
• H Аг жгутиковый, термолабильные – рыхлые, крупные
хлопья
• В случае отрицательной реакции препарат остается мутным.
 Реакция аглютинации в пробирках

Для определения Ат в сыворотке крови больного. В ряде

пробирок производят серийное разведение сыворотки к
которой добавляют диагностикум (взвесь убитых м/о или
частицы с сорбированными Аг).

Позитивная реакция проявляется посредством образования

осадка в виде перевернутого зонтика на дне пробирки (через
20-24 часа) и осветления жидкости. Оценка интенсивности
реакции проводится по системе 4 плюсов (++++).

Неаглютинированнные клетки оседают на дне пробирки в

виде кнопки или кольца (негативная реакция). Изучение
проводится невооруженным глазом или с помощью вогнутого
зеркала микроскопа.
 • Количественный аспект
Метод последовательных разбавлений

Первоначально осуществляются последовательные

разведения сыворотки (1/50, 1/100, 1/200) в которую
вводятся впоследствии в равных количествах Aг.
Далее термостат – 2 часа и при комнатной температуре 18-
20 часов.

Оценка:
самое большое разведение сыворотки в которой
проявляется агглютинация по меньшей мере 3 “+” (+++)
называется титр антител агглютирования (титр
агглютированой сыворотки).

• Прямое агглютирование применяется при определении

группы крови или при диагностике инфекционных
болезней (сероидентификация Aг или выявление и
титрование Aт из сыворотки больного) .
 • Реакции пассивной агглютинации
(непрямые)
реакция агглютирования
• Пасивная агглютинация предпологает расположение
одного растворимого Aг (или одного Aт) на инертную
корпускулярную основу, которая не восприимчева к
реакции Aг-Aт. В качестве инертной основы могут
служить:
эритроциты,
латексные частицы,
кристалы холестерола.

• Суспензия обогащенная с Aг или с Aт частиц вступает в

контакт с имунной сывороткой (соответстенно с Aг), по
аналогии случая непосредстенного агглютирования.
• Плюсы косвенных реакций: простота в наблюдении и
высокая чувствительность.
 • Косвенная (пасивная) реакция
гемаглютинации – РHГА / PПГА

• Некоторые антигены полисахарного происхождения

присоединяются спонтанно на поверхности эритроцитов,
после короткого срока инкубации. Белковые присоединяются
лишь после предварительной подготовки эритроцитов (к пр.:
обработка танином, формол).

• РHГА проводят в лунке полиэстеровой пластины.

• Позитивная реакция проявляется посредством агглютинации
чувствительных эритроцитов (перевернутый зонтик
коричневого цвета на дне лунки).
 Реакция аглютинации

— реакция торможения гемагглютинации основана на

способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать
вирусы, которые в результате теряют свойство склеивать
эритроциты. Используется для диагностики вирусных
болезней;
 Реакция латекс-агглютинации (РЛА)

• Носители антигенов или антител - частицы полистирольного

латекса, которые служат носителями антигена и при
образовании иммунных агрегатов играют роль “мостиков”
между молекулами антител.

• Латексные частицы являются как бы искусственными

эритроцитами, но более устойчивы к внешним воздействиям.
• Реакция латексной агглютинации используется для
идентификации ревматоидного фактора у больных, у
которых есть подозрение на ревматоидный полиартрит, в
бактериологии для быстрой идентификации м/o или их Aг
в анализе, или идентификация изолированных штаммов,
также для серодиагностике некоторых инфекций.
 Реакции преципитации

• Имуно - осаждение проявляется лишь в том случае когда

растворимый Aг смешиваемся с соответствующим Aт.

• Реакцию можно наблюдать в жидкой фазе или твердой и

носит или качественный, или количественный характер.

• Это специфичные реакции с низкой чувствительностью,

требующие значительного количества антител.

• Осаждение результирующих молекулярных комплексов из

связей Aг-Aт будет представлять трехмерную решетку из
Aг объединенных посредством Aт.
 Условия образования решетки
преципитации:

• Aт должен быть по крайней мере бивалентнным (Aт парные)

• Aг – многовалентнный (хаптены не могут выпадать в
осадок)
• Максимальное осаждение соответствует зоне
эквивалентности, в которой Aт и Aг обладают оптимальным
соотношением по концентрации, что позволяет осаждение
всех молекул Aт с соответствующими Aг.
При избытке Aг или Aт осадка не будет.

• Применение:
в мед. практике (видовая принадлежность различных белков:
кровь, сперма и т.д.), в пищевой гигиене (определение
пищевого фальсификата), при диагностике инфекционных
заболеваний и т.д.
 ОСАЖДЕНИЕ В ЖИДКОЙ СРЕДЕ

• Реакция кольцевой преципитации

В пробирке диаметром в 5 миллиметров вводят иммунную
сыворотку; пробирка наклоняется и на её стенки медленно
вводится раствор Aг, чтобы не перемешался с сывороткой.
Если Aт из сыворотки соответствует Aг, в отдельных зонах двух
жидкостей образуется белое кольцо, которое означает
осаждение комплекса Aг-Aт.
Преимущество метода – быстрота и простота.

Практическое применение:
Идентификация пятен крови,
Обнаружение фальсификации пищевых продуктов,
Обнаружение полисахаридного антигена агента
Сибирской язвы (реакция Ascoli).
 • Реакция флокуляции (по технике Ramon)

Проводится последовательное разбавление иммунной

сыворотки (Aт) к которой добавляются равные доли Aг.
Образцы помещаются в термостат и периодически
проверяются, чтобы выявить пробирку в которой появится
первичный осадок (зона экивалентности).

Применение: для определения количества токсинов,

антитоксинов, анатоксинов.
 Преципитация в твердой фазе (в геле)

• В данных реакциях Aг и Aт дифузируют один по

направлению к другому, перемешиваются посредством геля
и в зоне оптимальной концентрации этих двух реактивов
появляется осадок в виде бело-серых полос.

• Если в реакции присутствуют несколько комплексов Aг-Aт,

проявиться ряд линий осаждения.

• Может использоваться для качественного анализа состава

Aг в каком-то растворе.
 Двойная иммунодиффузия
(техники Ouchterlony и Elek)

Стеклянная пластинка покрывается агаром или наливается

агар в чашку Petri.
• В технике Ouchterlony Aг и Aт диффундируют из лунок
расположенных на расстоянии 15 mm один от другого.
• В технике Elek 2 реактива диффундируют с поверхности
бумажных полос расположенных на поверхности агара.
• Молекулы диффундируют в гель в зависимости от их массы и
образует линии осаждения для системы Aг-Aт,
соответствующие в зоне равновесия.
• Если 2 Aг идентичны, их линии объединяются, но если они
разные – отдаляются
• Применение – обнаружение токсинов (токсигенез),
антитоксин, белковые Aг
 • Контраммунноэлектрофорез (CIEF)

Полезна при исследовании комплексных антигенных

растворах. Изучение возможно после 90 минут.

Агар залит на стеклянную пластину, Aг и Aт представлены в

циркулярных резервуарах по 2 mm в диаметре, на
расстоянии в 10 mm.
Во время электрофореза Aг, заряженный отрицательно,
мигрирует к позитивному полюсу, встречая Aт которые
мигрируют к катоду.
В взаимодействии гомогенных Aг и Aт имеет место
образование линии осажденияare.
CIEF необходим для исследования компонентов Aг в
биологических жидкостях: LCR, моча, плевральная
жидкость и т.д.
 • Реакция COOMBS

Некоторые Ac (моновалентные) не аглютинируют в

нормальных условиях (пр.: антитела анти-Rh,
ответственные за плодо-материнскую несовместимость в
системе Rh).
Они могут быть выявлены благодаря тестам Coombs.

Возможны 2 техники, в зависимости от способа отбора проб:

кровь у новорожденого или у беременной женщины.
 - По основной технике Coombs.

- У новорожденного определяется наличие анти-Rh материнских

Aт закрепленных на эритроцитах, если мама является Rh-.
- К этим подозрительным эритроцитам добавляется человеческая
сыворотка анти-Ig.
- Это сыворотка не будет аглютинировать с нормальными
эритроцитами, а даже наоборот, вызывает аглютинирование
эритроцитов на которых закреплены анти-Rh Ac
 - Непрямая техника Coombs.

- У беременной женщины с Rh- , анти-Rh Aт присутствуют

в сыворотке.
- Изначально к данной сыворотке добавляются эритроциты
Rh+ (для формирования комплекса Aг-Aт), далее
применяется сывороткаapoi анти-Ig.
 Реакция нейтрализации
• Реакция нейтрализации основана на способности антител
иммунной сыворотки нейтрализовать повреждающее
действие микроорганизмов или их токсинов на
чувствительные клетки или ткани.
• При отсутствии повреждающего эффекта смеси антител и
микробов или их токсинов на культуру клеток говорят о
специфичности взаимодействия комплекса антиген-
антитело
 Серологические реакции с использованием
меченных Aт

В некоторых случаях невозможно обнаружить реакцию Aг-

Aт: некоторые Aт не осаждаются, другие и не осаждаются и
не аглютинируют, существуют комплексы Aг-Aт которые не
фиксируют C.

Для таких случаев могут использоваться меченные Aт, что

позволить распознать соответствующий Aг.
Комбинирование Aт с меченными не влияет на их
иммунологические свойства.

Данные реакции проводятся на жестких поверхностях

(лезвия, пластические пластины)
Наиболее часто Используемые маркеры:

- Флорохромы (родамин, флуоресцеин), которые излучают

красно-оранжевый или зелено-желтый свет при попадании в
UV излучение (Иммунно-флюорисцентная реакция)

- Ферменты (щелочная фосфатаза, пероксидаза),

предрасположенные изменить цвет подложки (substrat)
(Иммунно-ферментная реакция)

- Радио-изотопы (125J sau 3H), которые соответственно

излучают гамма и бета лучи (Радио – иммунный анализ)
• Реакция иммунофлюоресценции
(RIF, reacţia COONS)
Прямой метод (только с целью сероидентификации).
Из материала, содержащего Aг (чистая культура, тканевая
биопсия) готовится мазок, на который применяют
специфическую иммунную сыворотку с Aт
маркированный флюорохромом .
Через 20 мин инкубации во влажной камере препарат
изучается под люминесцентным микроскопом.
В случае позитивной реакции обнаруживается местная
люминесценции.
Недостаток – потребность в иммунной сыворотке
маркированной специфично для каждой Aг.
• positive test for rabies • negative test for rabies
• Непрямой метод.

Используется для сероидентификации и серодиагностики.

На мазок с Aг наносят соответствующие немеченные Aт.
Через 20 мин тщательно вымывается препарат, далее
добавляется anti-Ig флорисцент, который комбинируется с Aт
из этого комплекса.
Данный реактив может использоватся неоднократно.
Anti-Ig получены иммунизацией кроликов (или других
животных) посредством Ig.
 Реакция с использованием меченых
антител или антигенов

Используют также ферменты, разлагающие не только

хромогенный, но и люмогенный субстрат.

В этом случае при положительной реакции появляется

свечение.

Подобно иммунофлюоресценции иммуноферментный

метод применяют для обнаружения антигенов в клетках
или титрования антител.
• Техника основанная на фиксации:
Флуоресцентный маркер- антикомплементная сыворотка,
которая будет связана с комплементом фиксированном на
комплексе Aг-Aт.

• RIF используется для быстрой идентификации Aг из

биосубстрата или для серодиагностики .
 Реакция с использованием меченых
антител или антигенов

В иммуноферментном анализе вместо

флюорохромов иммунную сыворотку можно метить
ферментом (пероксидазой хрена или щелочной
фосфатазой).
Реакцию оценивают по окрашиванию раствора в
желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый
(фосфотаза) цвет.
 • Иммуноферментная реакция (RIE, ELISA –
Enzyme Linked Immunosorbent Assay).

Прямая RIE (метод sandwich).

- Используемая лишь в сероиндентификации Aг.
- В лунки из полиэстеровых пластинок в которых фиксированы
Aт ( известные Aт) наливается раствор с неизвестными Aг.
- Инкубируется 1час.
- После тщательного промывания добавляются
Aт маркированные ферментами Aт, которые фиксируются
на свободные эпитопы поливалентного Aг.
- После 30 мин-1ч инкубации, лунки снова моются. Наличие
комплекса Aт-Aг-Aт-маркированного обнаруживается с
помощью хромогенного субстрата (вначале бесцветное
вещество,но которое красится под действием фермента,
ex. Перекись водорода и ортофенилэндимин).
 - RIE непрямая.

- Применяется лишь при серодиагностики Aт.

В лунках на полистероловой поверхности в которых
зафиксированы известные Aг наливается раствор
неизвестного Aт.
- Далее 1час инкубации.
- После тщательной промывки лунок добавляю меченные
ферментами лиганды, (анти-Ig ) которые фиксируются на
Aт.
- После инкубации в 30 мин-1час сново промываются лунки.
- Присутствие меченного комплекса Aг-Aт-Aт определяется
при помощи хромогенного субстрата (бесцветное
вещество, которое меняет цвет под воздействием фермента,
пр. перекись водорода и орто-фенилендиамин ).
 ELFA (Enzyme-Linked Fluorescent
Assay)
• Более чувствительная и быстрая чем ELISA
• Фермент (щелочная фосфатаза), конъюгированная с
антителами разлагает субстрат (MUP – 4-метил
умбелиферил фосфат) с образованием флуоресцентного
соединения (метил умбелиферил), которое может быть
обнаружено с помощью спектрофлуориметра
 Иммуноблоттинг

• применяют для выявления антител к отдельным антигенам

или «узнавания» антигенов по известным сывороткам.

Метод состоит из 3 этапов:

- разделения биологических макромолекул (например, вируса)

на отдельные белки с помощью электрофореза в
полиакриламидном геле

- переноса разделенных белков из геля на твердую подложку

(блот) путем наложения пластины полиакриламидного геля на
активированную бумагу или нитроцеллюлозу
(электроблоттинг
 Иммуноблоттинг

- выявления на подложке искомых белков с помощью прямой

или непрямой иммуноферментной реакции.

Как диагностический метод иммуноблоттинг используют

при ВИЧ-инфекции. Диагностическую ценность имеет
обнаружение антител к одному из белков внешней оболочки
вируса.
 Иммунологические методы

• Преимущества:
методы экспресс-диагностики, позволяющие определить
антигены возбудителей в течение нескольких минут или
часов.

• Недостатки:
- Несмотря на гибель бактерий после проводимой
этиотропной терапии, антигены возбудителей могут
персистировать в организме от 3 до 4 недель и выявляться
данными методами
 Недостатки:

- Существует широкое антигенное родство между родами и

видами внутри каждого семейства бактерий и даже среди
различных семейств. Это может привести к получению
ложноположительных результатов

- Определение антигенов бактерий не позволяет установить

чувствительность возбудителей к антибиотикам, что также
снижает значимость этих методов.
 Недостатки:

- Серологические реакции имеют лишь относительную

достоверность, так как могут быть неспецифическими или
положительными у лиц, перенесших соответствующую
инфекцию в прошлом (анамнестическая реакция), а также у
получивших профилактические прививки (прививочная
реакция).
 Молекулярно-генетическая диагностика

Возможности :

- качественный скрининг
- количественный анализ ( вирусная нагрузка)
- типирование
- прогноз заболевания
- терапевтический мониторинг
 Молекулярно-генетические методы
исследований
Среди большого многообразия гибридных методов
молекулярный анализ нуклеиновых кислот ( МАНК ) –
синоним ПЦР наиболее широко используется в
микробиологической диагностике.

В основе метода ПЦР лежит природный процесс -

комплементарное достраивание ДНК матрицы,
осуществляемое с помощью фермента ДНК-полимеразы.
Эта реакция носит название репликации ДНК.
 Молекулярно-генетическая
диагностика
Естественная репликация ДНК включает в себя
несколько стадий:

• Денатурация ДНК (расплетение двойной спирали,

расхождение нитей ДНК);

• Образование коротких двухцепочечных участков ДНК

(затравок, необходимых для инициации синтеза ДНК);

• Синтез новой цепи ДНК (комплементарное достраивание

обеих нитей)
Спасибо за внимание!
 ИММУНИТЕТ.
ОРГАНЫ И КЛЕТКИ ИММУННОЙ
СИСТЕМЫ.
АНТИГЕНЫ и АНТИТЕЛА.
 клеточная теория иммунитета

Механизм развития защиты организма от инфекций длительное время

оставался неизвестным. В 1882 году Илья Ильич Мечников обнаружил явление
фагоцитоза. В 1883 году он сделал первое сообщение о фагоцитозе – “пожирании”
микробов клетками макроорганизма.
На основании своих наблюдений И.И. Мечников разработал клеточную
(фагоцитарную) теорию иммунитета. Согласно этой теории, основную функцию
защиты организма от инфекции выполняют амебовидные клетки, способные
активно захватывать внедрившиеся микроорганизмы, разрушать их с помощью
собственных ферментных систем и выводить продукты распада из организма.
Фагоцитарную функцию у человека выполняют макрофаги, дендритные, тучные и
другие клетки.
Илья Ильич Мечников

2
 Фагоцитоз
Клетки – фагоциты:
Фагоцитоз – это процесс, при Макрофаги
Моноциты
котором клетки захватывают и Нейтрофилы
переваривают твердые частицы. Эозинофилы
Этапы фагоцитоза:
-Хемотаксис
-Адгезия фагоцитов к объекту
-Активация мембраны
-Погружение
-Образование фагосомы
-Образование фаголизосомы
-Киллинг и расщепление
-Выброс продуктов деградации

Виды фагоцитоза:
Слияние
-Неспецифический и иммунный фагоцитоз.
-Завершенный и незавершенный фагоцитоз
 гуморальная теория иммунитета

Защита организма от внедрившегося возбудителя происходит не

только с помощью фагоцитов. В 1897 году немецкий ученый Пауль Эрлих
разработал гуморальную теорию иммунитета, согласно которой в ответ на
внедрение микроорганизмов или их токсинов в организме вырабатываются
специфические защитные вещества – антитела. За труды по иммунитету в
4

1908 г. И.И. Мечников и П. Эрлих стали лауреатами Нобелевской премии.

Пауль Эрлих
Жюль Борде, понятие “антиген”

В 1898 году бельгийский бактериолог Жюль Борде показал, что при

введении в организм кролика эритроцитов барана или чужеродной
сыворотки у них вырабатываются антитела.
Так появилось понятие “антиген” - чужеродное вещество, в ответ
на введение которого в организме вырабатываются антитела.

5
Жак Миллер

В 1961 году австрийский ученый Жак Миллер произвел

неонатальную тимэктомию у мышей, после чего развивался
синдром иммунологической недостаточности, в первую
очередь клеточного иммунитета.

В последующих многочисленных исследованиях он доказал,

что тимус является центральным органом иммунной системы.
Интерес к тимусу особенно возрос после открытия в 70-х
годах его гормонов, Т- и В- лимфоцитов.
 Рольф Цинкернагель и Питер Дохерти

В 1974 г. они обнаружили, что Т-лимфоциты

распознают антигены в сочетании с молекулами главного
комплекса гистосовместимости. Они установили, что для
распознавания инфицированных клеток Т-киллеры должны
распознать две молекулы на поверхности клетки - не только
вирусный антиген, но и молекулу МНС.
За открытие двойного распознавания в иммунологии
как природной функции молекул главного комплекса
гистосовместимости они получили Нобелевскую премию 1996
года. Таким образом они установили, что молекулы главного
комплекса гистосовместимости являются объектом
первичного иммунологического распознавания в реакциях Т-
Рольф Цинкернагель и Питер Дохерти
лимфоцитов на различные антигены.
 Нобелевская премия 2011 года

Брюс Бётлер и Жюль Хоффманн открыли

рецепторные белки (патоген-распознающие
рецепторы), способные распознавать патогенные
микроорганизмы и активировать врожденный
иммунитет – первый шаг в иммунном ответе
организма.
Ральф Стайнман Брюс Бётлер Жюль Хоффман

Ральф Стайнман в 1973 году открыл дендритные клетки (дендроциты), способные захватывать
антигены и преподносить их Т-лимфоцитам. Лимфоциты “инспектируют” предъявленные фрагменты.
В случае опознания “образа врага” развивается мощный иммунный ответ.
 Иммунитет и его развитие

Иммунитет – защита организма от генетически чужеродных веществ (антигенов)

экзогенного или эндогенного происхождения с целью сохранения и поддержания гомеостаза,
структурной и функциональной целостности организма, а также биологической (антигенной)
индивидуальности и видовых различий.

Схема развития иммунного ответа:

1) Первичное узнавание “чужого” и/или “измененного своего”.
2) Процессинг и презентация антигена. Вторичное распознавание “чужого”.
3) Развитие адаптивного иммунного ответа.
4) Накопление иммунокомпетентных клеток и концентрация антител в очаге воспаления.
5) Деструкция иммунокомпетентными клетками и эффекторными молекулами антигенов и клеток,
поврежденных патогеном.
6) Выведение продуктов распада общеорганизменными системами выделения.
7) Регенерация. Выздоровление. Поствоспалительная иммуносупрессия с сохранением иммунологической
памяти.
 Главные задачи иммунной системы:

1. Быстрое распознавание чужеродного агента.

2. Нейтрализация веществ и уничтожение клеток, генетически отличных от

собственных структур организма.

3. Элиминация чужеродного агента из организма.

 Иммунитет

Врожденный Приобретенный

специфический неспецифический пассивный активный

естественный искусственный естественный искусственный

(Ig G - от матери плоду) (после введения (постинфекционный) (поствакцинальный)
Ig A - с молоком матери) иммунных
сывороток)
 ОСНОВНЫЕ СВОЙСТВА ВРОЖДЕННОГО И
ПРИОБРЕТЁННОГО ИММУНИТЕТОВ

Характеристика Врожденный иммунитет Приобретённый иммунитет

Условия Формируется в онтогенезе Формируется в ответ на
формирования вне зависимости от ≪запроса≫ «запрос» (поступление чужеродных
агентов)
Объект Группы чужеродных молекул, связанных Индивидуальные молекулы
распознавания с патогенностью (антигены)
Эффекторные Миелоидные, частично лимфоидные Лимфоидные клетки
клетки клетки
Тип реагирования Популяция клеток реагирует Реакция на антиген клональная
популяции клеток как целое (не клонально)
Распознаваемые Образы патогенности; стрессорные Антигены
молекулы молекулы
Распознающие Патогенраспознающие Антигенраспознающие
рецепторы рецепторы рецепторы
Угроза аутоагрессии Минимальная Реальная

Наличие памяти Отсутствует Формируется иммунологическая

память
 Особенности иммунной системы:

1. Иммунная система многокомпонентна, она генерализована по всему телу, но

функционально выступает как единое целое.
2. Её клетки постоянно рециркулируют по всему организму через кровоток.
3. Иммунная система имеет мультивариантную регуляцию, многократное
дублирование функций компонентами, ее составляющими.
4. Иммунная система – открытая система функционирования.
5. Она обладает уникальной способностью вырабатывать строго специфические
молекулы антител, различные в своей специфике в отношении каждого
антигена.
 Компоненты иммунной системы:

1. Органы иммунной системы:

a) Центральные (костный мозг, тимус).
b) Перифирические (селезенка, лимфатические узлы, лимфоидная
ткань слизистых оболочек).

2. Иммунокомпетентные клетки
Т- и В-лимфоциты, NК, макрофаги, нейтрофилы, дендритные клетки и др.

3. Биологически активные макромолекулы:

a) Медиаторы иммунных реакций (интерлейкины).
b) Ростовые факторы (интерфероны и др.)
c) Гормоны.
 Органы и ткани иммунной системы

Центральные органы:
Кольцо
Пирогова Тимус
•костный мозг;
•вилочковая железа (тимус);
Костный мозг
•сумка Фабрициуса у птиц.

Периферические органы:
Лимфати-
•селезенка;
Печень
ческие узлы
•лимфатические узлы;
Селезенка •неинкапсулированная лимфоидная
ткань слизистых оболочек и кожи;
Пейеровы
бляшки
•печень;
•периферическая кровь.
Центральные органы иммунной системы

Все клетки крови происходят из общей клетки-

предшественницы – стволовой кроветворной клетки
(СКК).
На территории костного мозга проходит полный
«курс» :
•эритропоэза (заканчивается эритроцитами);
•миэлопоэза (заканчивается лейкоцитами –
нейтрофилами, моноцитами, эозинофилами,
базофилами);
•мегакариоцитопоэза (заканчивается тромбоцитами);
•образуется общая клетка – предшественник всех
лимфоцитов.
 Клетки функциональной системы иммунного
гомеостаза

1. Иммунокомпетентные клетки:
a)Т-лимфоциты;
b)В-лимфоциты;

2. Антигенпрезентирующие клетки:
a)макрофаги крови (моноциты) – презентируют АГ, участвуя в развитии
гуморального иммунного ответа через Th2;

b)нефагоцитирующие А-клетки (клетки Лангерганса, вуалевидные

клетки, отростчатые клетки, дендритные клетки, тканевые
макрофаги) – играют антигенпрезентирующую роль для развития
клеточного иммунного ответа через Тh1, Tctl, EK.

3. Вспомагательные клетки (тучные клетки, базофилы, эозинофилы,

тромбоциты) – участвуют в развитии воспалительной реакции.
 Основные периоды онтогенеза
иммунной системы
Период Характеристика Сроки

I Закладка первичных органов и 4-5 неделя – 9 месяц

начальная дифференциация внутриутробного периода
клеток иммунной системы

II Совершенствование и С момента рождения до

формирование зрелой иммунной 16-18 лет
системы

III Зрелость, максимальная От 16-18 до 55-60 лет

функциональная активность
иммунной системы

IV Старение, снижение функций После 55-60 лет

иммунной системы
 Двухступенчатый иммунный ответ
1 Врожденный иммунитет:
-быстрый; 2
-блокирует инфекцию;
-не имеет памяти.
Компоненты микробов
связываются со специальными
рецепторами, расположенными
на клетках макроорганизма,
что активирует врожденный
иммунитет и запускает
воспалительный процесс и
разрушение
чужеродныхагентов.
Микроорганизм
рецептор
Адаптивный иммунитет:
-более медленный;
-инактивирует инфекцию;
-“самообучается”.
Дендритные клетки активируют
Т-лимфоциты, которые
запускают адаптивный
иммунитет. Затем работает
каскад иммунных реакций,
формируя антитела и клетки
памяти.
Дендритная
клетка
Т-лимфоцит
 Общая характеристика
адаптивного иммунитета
Система врожденного иммунитета не всегда обеспечивают элиминацию патогена и последующую
невосприимчивость к данной инфекции. В таких случаях защиту организма от повторного развития
заболевания обеспечивает адаптивный иммунитет, который реализуется клетками, сформированными в
организме в процессе онтогенеза. Таким образом, адаптивный иммунитет включается, когда неэффективны
механизмы врожденного иммунитета.

Адаптивный иммунитет – это способность организма распознавать и обезвреживать чужеродные и

потенциально опасные агенты (в том числе микробы и молекулы токсинов), которые уже попадали в
организм ранее.
Адаптивный иммунитет развивается в результате встречи клеток с антигеном, выработки антител и
формирования клеток памяти. Формирование иммунологической памяти – главное преимущество
адаптивного иммунитета.
Адаптивный иммунитет является результатом работы системы высокоспециализированных клеток
(лимфоцитов), расположенных по всему организму.
Адаптивная иммунная система высоко специфична для каждого конкретного патогена, для каждой
индивидуальной антигенной детерминанты, с которой столкнулся организм.
 …

Приобретённый иммунитет бывает:

Антибактериальным, антивирусным, противогрибковым, антитоксическим,
противоопухолевым и т.д.
В зависимости от наличия микроорганизмов:
- Стерильный иммунитет – проявляется после удаления патогенных
агентов из организма ( например, корь)
- Нестерильный иммунитет – невосприимчивость сохраняется лишь на
период нахождения м/o в конкретном органе ( например туберкулёз,
сифилис)

22
 Развитие адаптивного иммунного ответа

Основные этапы развития адаптивного

иммунного ответа:
I. Индуктивная фаза:

Индуктивная фаза
-Доставка и презентация антигена;
-Выбор пути иммунного ответа;

Формирование эффекторных клеток и клеток памяти.

II. Эффекторная фаза:
-Реализация иммунной защиты (клеточный или

Эффекторная фаза
гуморальный ответ);
-Формирование иммунологической памяти.
 Антигены – что это?

Антигены – это биополимеры органической природы, которые являются генетически чужеродными

для макроорганизма, при попадании в организм распознаются системой адаптивного иммунитета и
вызывают иммунные реакции, развивающиеся системой адаптивного иммунитета и направленные на их
устранение.
Антигенами могут выступать как поступающие извне чужеродные агенты: бактерии, грибки
(экзогенные антигены), так и образующиеся в макроорганизме измененные биомолекулы и клетки (эндогенные
антигены). Антигены могут иметь корпускулярную природу (различные клетки, бактерии, грибки и др.) и
растворимую природу (белки, полисахариды и др.).

В организме антигены могут располагаться внеклеточно и внутриклеточно.

Внеклеточные антигены: Внутриклеточные антигены:

- бактериальные токсины; - фагоцитированные и сохранившиеся в фагоцитах микробы;
- микробы, циркулирующие в кровяном русле; - вирусы;
- фагоцитированные и разрушенные возбудители. - опухоль-трансформированные клетки.
 Антигены бактерий

1. Структурные (корпускулярные) антигены:

- соматический О-антиген - грамположительных бактерий он
представляет концевую часть тейхоевых и липотейхоевых кислот, Н-антиген
у грамотрицательных бактерий – концевую олигосахаридную часть К-антиген
(капсульный) (жгутиковый)
липополисахарида клеточной стенки;
- жгутиковый Н-антиген - имеется только у подвижных бактерий,
Vi-антиген
локализуется в жгутиках и состоит из белка флагеллина; (вирулентности )
- капсульный К-антиген - располагается на поверхности капсульных
клеток, имеет мукополисахаридную или белковую природу;
О-антиген
- Vi-антиген – разновидность капсульного антигена.
(соматический)

2. Секретируемые (растворимые) антигены:

-экзотоксины
-экзоферменты

Термолабильные белковые антигены, обладающие сильной

иммуногенностью выделены у возбудителей сибирской язвы, чумы,
бруцеллеза, туляремии.
Используются для изготовления химических вакцин. Протективный антиген B. anthracis
 Антигены вирусов

Антигены просто устроенных вирусов представлены

капсидными белками и нуклеопротеинами.

У сложно устроенных вирусов выделяют капсидные и

суперкапсидные белковые антигены, М-белок,
гликопротеиновые антигены шипов.

При инфицировании вирусами клетки выявляют

также антигены, образующиеся при репродукции вируса
(неструктурные вирусные белки).

Структура и антигены вируса гепатита В

 Классификация антигенов

По способности включать в
По химической иммунный ответ разные По физическому
По молекулярной популяции лимфоцитов:
природе: структуре: -тимусзависимые (участие Т- и В- состоянию:
-белковые; лимфоцитов); -корпускулярные;
-глобулярные; -тимуснезависимые (без
-небелковые. -фибриллярные. участия Т-лимфоцитов). -растворимые.

По степени чужеродности:
По направленности По степени - ксеногенные
По 27
(гетерологичные);
действия: происхождению: иммуногенности: - аллогенные
-иммуногены; -экзогенные; -полноценные; (гомологичные);
-толерогены; -неполноценные - изогенные
-эндогенные. (индивидуальные);
-аллергены. (гаптены). -аутоантигены
 Свойства антигенов

Антиген – генетически чужеродное для организма вещество (белок, полисахарид, липополисахарид,

гликопротеин, липопротеин, нуклеопротеин) с характерными химическими группировками, которое может
вызывать в организме антителообразование и другие формы иммунного ответа, а также взаимодействовать
с антителами и антигенраспознающими рецепторами Т- или В-лимфоцитов

Специфичность –
Чужеродность – отношение Антигенность – Иммуногенность –
способность антигена
конкретного антигена к способность антигена способность
связываться с
конкретному организму стимулировать индуцировать
определенным участком
(кроличий альбумин для образование специфических развитие
антитела и вызывать
морской свинки будет клонов Т- и В-лимфоцитов иммунного ответа
иммунный ответ к данному
чужеродным антигеном)
эпитопу антигена
 Структура антигенов
Антигены представляют собой молекулу органического вещества. В составе молекулы любого антигена содержатся два
структурных компонента:
- высокомолекулярный носитель (шлеппер) – чаще всего белок, определяющий антигенность и иммуногенность антигена;
- антигенные детерминанты (эпитопы) - участки, которые распознаются клетками иммунной системы и связываются с активным центром
антител или антиген-распознающим рецептором лимфоцита. Чем выше молекулярная масса белка, тем больше эпитопов присутствует в
молекуле.
На одной молекуле антигена может находиться до нескольких сотен эпитопов, имеющих различную специфичность. Чем сложнее молекула
антигена и чем больше у нее эпитопов, тем больше вероятность развития полноценного иммунного ответа.

Растворимый антиген Корпускулярный антиген

По расположению на молекуле антигена эпитопы подразделяются на внешние и внутренние

(скрытые).
У антигенов белковой природы эпитопы состоят из 6-20 аминокислотных остатков. Они
образуют на поверхности белковой молекулы выступы или петли.
У полисахаридных антигенов эпитопы состоят из выступающих О-цепей в составе ЛПС.
Они представляют собой олигосахариды, содержащие 4-6 остатков сахаров.
К каждому эпитопу образуются свои антитела.
Количество эпитопов, приходящихся на одну молекулу антигена, определяет валентность
антигена.
 Полные антигены
Антигены, которые обладают всеми характеристиками - полные Aг.

Требования к полным Aг:

- Чтобы были генетически чужерожными веществами

- Чтобы были сформированы из группы carrier (носителей) и имели эпитопы
(антигенные детерминанты)
- Чтобы имели крупный молекулярный вес более 10 kDa
- Чтобы имели сложную химическую структуру (белки, полисахариды, LPZ, и
т.д.)
- Чтобы имели стабильную пространственную конформацию
 Неполные антигены – гаптены

Неполные антигены (гаптены) обладают антигенностью, но лишены иммуногенности

- Имеют маленькую молекулярную массу
- Могут стать иммуногенными комбинируясь с макромолекулами (белки или
полисахариды)
Примеры гаптенов: соли тяжелых металлов(Cr, Ni), вещества растительного
происхождения, медикаменты, красители, олигонуклеотиды.

Суперантигены – отдельные белковые молекулы (эктеротоксин стаффилококка,токсин

шока стаффилококка, эксфолиативный токсин стафилококка, нуклеокапсид вируса
бешенства), способные стимулировать большое число Т-лимфоцитов (10-40%).
Суперантигены провоцируют иммунопатологические реакции.
- Aг гетерологичные (xeno-Aг, hetero-Aг) – Aг происходящие из организма
другого вида.
- Изо-Aг (aлo-Ag) – Aг группы в пределах одного вида (система ABO и Rh)
- Идиоантигены–антигены специфичные одному индивиду. Соответствуют
молекулам MHC
- Аутоантигены – собственные Aг одного организма, ставшие имуногенными
в определенных условиях (сперматозоиды, тироглобулин, инсулин,
кристалин, нервная ткань, и т.д.)
- Экзоантигены (бактерии, грибы, простейшие)
- Эндоантигены (внутриклеточные паразиты-бактерии, вирусы, раковые
клетки...)
 Антигены организма человека
Аутоантигены - собственные антигены организма, которые в норме не проявляют своих антигенных свойств, но в определенных условиях (травма,
опухолевый процесс) вызывают образование антител (аутоантител).
Различают:
- Естественные - вещества, имеющие гематологический барьер и в норме не контактируют с иммунной системой (белок хрусталика, белок миелин
серого вещества головного мозга, белок сперматозоида, белок тиреоглобулин).
- Неестественные - вещества, реструктуризованные в организме человека в результате инфекционного процесса, использования лекарственных
препаратов или наркотических веществ, интоксикации любой этиологии.

КЛАССИФИКАЦИЯ АНТИГЕНОВ ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА

- Аутоантигены;
- Изоантигены (изолирующие);
- Опухолевые антигены;
- Антигены главного комплекса
гистосовместимости ( HLA ).
 Тимусзависимые и тимуснезависимые
антигены
Активация В-клеток без помощи Т клеток
Тимусзависимые антигены (TD):
Для активации В-клеток нужны Т-хелперы и АПК.
Индуцируют гуморальный и клеточный иммунный ответ.
Вызывают синтез иммуноглобулинов всех классов.
Формируют иммунологическую память.
Представлены белками.
Большинство природных антигенов являются тимусзависимыми.
В отсутствии Т-лимфоцитов они лишены иммуногенности.

Тимуснезависимые антигены (TI):

В-клетки активируются без участия Т-хелперов.
Индуцируют только гуморальный иммунный ответ.
Вызывают синтез только IgM.
Не формируют иммунологическую память.
Бывают двух типов TI1 и TI2. Сшивание BcR
Одновременная активация
Представлены полисахаридами и липополисахаридами. BcR и других рецепторов В-клетки повторяющимисяполисахаридными
вызывает их пролиферацию и или белковыми эпитопами
дифференцировку
Характеристика эпитопов

Линейные – состоят из непрерывной последовательности аминокислотных

остатков в составе полипептидной цепи . Могут быть как на повернхности, так и
внутри белковой молекулы

Конформационные эпитопы – имеют пространственное расположение структур,

образующееся при свертывании молекулы. Они могут быть только на поверхности
белковой молекулы

Неоантигены – могут быть только на неоантигене, который может быть частью

новообразованный антиген, ранее не распознанный иммунной системой структур. Он
часто ассоциируются с опухолевыми антигенами и обнаруживаются в онкогенных
клетках. Неоантигены и неоантигенные детерминанты могут образовываться,
когда белок подвергается дальнейшей модификации в рамках биохимического
пути, такого как гликозилирование, фосфорилирование или протеолиз.

Эпитопы соединяются с паратопами антител

 Т-клеточные и В-клеточные эпитопы

Т-клеточные эпитопы находятся внутри свернутой молекулы

антигена. Относятся к линейному типу, то есть
представляют собой линейную последовательность
аминокислотных остатков (11-16 мономеров). Распознаются
TcR.
В-клеточные эпитопы находятся на поверхности молекулы
антигена. Относятся к конформационному типу, то есть
обладают третичной структурой и составляют часть общей
пространственной организации антигенной молекулы.
В состав такого эпитопа входят остатки гидрофильных
аминокислот (6-8 мономеров), образующих β-структуру
пептидной цепи антигена. Распознаются BcR.
 Агретоп

Представляемый и распознаваемый антигенный пептид имеет

два участка: один – для распознавания молекулами МНС
(агретоп) и другой – для распознавания Т-клеточным рецептором
(эпитоп).

Агретоп - часть антигенного пептида, взаимодействующая с

молекулами МНС в процессе экспрессии пептида на поверхность
антигенпрезентирующей клетки (АПК).

Эпитоп - часть антигенного пептида, непосредственно

распознаваемая Т-клеточным рецептором (TcR).
 Валентность антигена

Эпитопы

Количество эпитопов, приходящихся на одну молекулу

антигена, называется валентностью антигена.
Антигены, содержащие один эпитоп, называются
моновалентными, а содержащие несколько эпитопов –
поливалентными (мультивалентными). Антиген
 Типы антигенной специфичности

Видовая специфичность обусловлена совокупностью антигенов, одинаковых у всех особей данного вида.

Групповая специфичность обусловливает антигенные различия особей внутри вида; например, по

антигенам групп крови.

Типовая специфичность – понятие, имеющее отношение, в основном, к микроорганизмам. Например,

пневмококки по специфичности полисахаридных антигенов делятся на типы 1, 2, 3, 4 и т.д.

Органоспецифичность и тканеспецифичность – антигенные различия отдельных органов и тканей

организма.

Стадиоспецифичность – наличие антигенов, характерных для определенных стадий развития организма

(альфа-фитопротеин эмбрионального периода во взрослом состоянии свидетельствует о раковом
заболевании печени).

Гетероспецифичность (перекрестная) – наличие общих антигенов у представителей различных видов.

Патологическая специфичность – измененная под воздействием различных факторов специфичность

собственных тканевых антигенов (например, в результате ожога, переохлаждения, воздействия излучений).
Участники развития адаптивного иммунного ответа

1.Клетки:
Антигенпрезентирующие клетки (АПК):
- Профессиональные АПК (дендритные клетки, макрофаги, В-лимфоциты).
- Непрофессиональные АПК (эпителиальные клетки, эндотелиальные клетки,
фибробласты, тучные клетки).
Т-лимфоциты (Т-хелперы, цитотоксические Т-лимфоциты).
В-лимфоциты. Презентация антигена осуществляется с помощью антиген-
презентирующих рецепторов (молекул МНС 1 и 2 классов).

2.Гуморальные факторы:
- Антитела.
- Цитокины.
Структуры, распознающие антиген:
- Т-клеточный рецептор.
- В-клеточный рецептор.
 Доставка и презентация антигена

Контакт антигена (патогена) с антигенпрезентирующей клеткой (АПК) происходит в

месте входных ворот инфекции. При этом клетки, поглотившие антиген (патоген),
транспортируют его в ближайшие лимфатические узлы (лимфоидную ткань), где
происходит так называемая “встреча” антигена с другими клетками иммунной
системы.
Переработка антигена обозначается термином процессинг, а представление антигена
другим клеткам иммунной системы называется презентацией. Процессинг антигена
протекает при транспортировке антигена в лимфоидную ткань, а презентация –
непосредственно в лимфоидной ткани.

Процессинг (разрушение, переработка) антигена происходит с помощью ферментных

систем клетки. Образующиеся фрагменты (в частности, эпитопы антигена)
выносятся на поверхность клетки и представляются (презентируется) другим
клеткам, участвующим в иммунном ответе.

В презентации участвуют молекулы главного комплекса гистосовместимости тканей

(МНС). Эти молекулы называются антигенпрезентирующими молекулами.
 Антитела
Антитела (иммуноглобулины) – это белковые молекулы, способные к
специфическому связыванию с антигенами. Они синтезируются В-лимфоцитами и их
потомками - плазматическими клетками по сигналу других клеток иммунной системы.
Шарнирная
Паратоп
У млекопитающих существует 5 классов иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA, IgE, область
IgD. Иммуноглобулин G имеет 4 подкласса (G1, G2, GЗ и G4), а иммуноглобулин А имеет 2 N
подкласса (А1 и А2). Иммуноглобулины разных классов различаются по строению и N
свойствам.

Молекула состоит из двух легких (L) и двух тяжелых (Н) цепей. Между собой легкие и
тяжелые цепи соединены попарно дисульфидными связями.

Участок тяжелых цепей, соединенных между собой дисульфидными связями, называется

шарнирной областью. Этот участок позволяет молекуле иммуноглобулина изменять
свою конфигурацию. Шарнирный участок отвечает за взаимодействие с первым
компонентом комплемента (С1) и его активацию по классическому пути. Тяжелая цепь Легкая цепь

Легкие и тяжелые цепи имеют N и C концы. На N-концах легких и тяжелых цепей

находится активный центр антитела (паратоп), то есть центр связывания антитела с
антигеном. Паратоп антитела связывается с эпитопом антигена.

C помощью папаина молекула расщепляется выше шарнирной области на 3 фрагмента:

два фрагмента содержат легкую цепь и часть тяжелой цепи (Fab-фрагменты),
а третий фрагмент состоит только из двух частей тяжелой цепи (Fc-фрагмент).
43
 Продуценты антител

В процессе превращения В-клеток в антителопродуцирующие клетки ядро В-лимфоцита уплотняется, объем

цитоплазмы увеличивается, в клетке развивается сеть мембран эндоплазматического ретикулума, образуется
большое количество рибосом. Такая клетка синтезирует и секретирует антитела одной антительной
специфичности, то есть антитела против того антигена, который вызвал эту дифференцировку.
 Антителобразующие клетки

Покоящийся лимфоцит Активирующийся лимфобласт

Плазматическая клетка Апоптоз плазматической клетки

 Строение антител

Легкие цепи (L)

Молекула иммуноглобулина состоит из двух легких (L) и двух тяжелых (Н)
цепей. Каждая легкая цепь включает до 220 аминокислотных остатков, а каждая тяжелая Шарнирная
цепь содержит 550-660 аминокислотных остатков. Между собой легкие и тяжелые цепи область
соединены попарно дисульфидными связями (-S-S-связями). Между тяжелыми цепями также
имеется дисульфидная связь.
Участок тяжелых цепей, соединенных между собой дисульфидными связями,
называется шарнирной областью. Этот участок позволяет молекуле иммуноглобулина
изменять свою конфигурацию. Шарнирный участок отвечает за взаимодействие с первым
компонентом комплемента (С1) и его активацию по классическому пути. Легкие и тяжелые
цепи имеют N и C концы. На N-концах легких и тяжелых цепей находится активный центр
антитела (паратоп), то есть центр связывания антитела с антигеном, место связывания
паратопа с эпитопом. С помощью папаина молекула расщепляется выше шарнирной
области на 3 фрагмента: 2 из них содержат легкую цепь и часть тяжелой цепи (Fab-
фрагменты, антигенсвязывающие фрагменты), а третий фрагмент состоит только из двух
частей тяжелой цепи (Fc-фрагмент).
В легких и тяжелых цепях аминокислотные последовательности образуют
глобулярные структуры (домены). Различают С-домены (постоянные домены) и V-домены
(изменчивые домены). В составе легкой цепи содержится по одному V- и C-домену (VL, CL),
а в составе тяжелой цепи содержится один V-домен и 3-4 С-домена (VH, CH). Каждый домен
состоит из 110 аминокислотных остатков.
 Активный центр антител

Важная роль в молекуле иммуноглобулина принадлежит Паратоп

активному центру, то есть участку связывания антитела с антигеном
(паратопу). Активный центр антитела (паратоп) образован
вариабельными доменами легкой и тяжелой цепей. Он представляет
собой полость определенной конфигурации.
Размер, форма и распределение зарядов в активном центре
определяет его специфичность, то есть способность связываться с
определенной антигенной детерминантой. Конфигурация активного
центра зависит от аминокислотных последовательностей
вариабельных доменов как легкой, так и тяжелой цепей, поэтому
замена даже одной аминокислоты в этой области может привести к
изменению специфичности активного центра.
Эпитопы
 Аффинность антител
• Аффинность – прочность связи одного
антигенсвязывающего центра с
индивидуальным эпитопом АГ.

• Зависит от степени комплементарности

антигенсвязывающего центра и эпитопа.

• Аффинность антител повышается в процессе

иммунного ответа в связи с селекцией
наиболее специфичных клонов В-лимфоцитов.
 Авидность антител
• Авидность – прочность связывания АТ и АГ (суммарная сила).
• Определяется аффинностью и числом антигенсвязывающих центров.
• Поливалентность АГ и АТ существенно усиливает прочность их соединения,
поскольку для диссоциации иммунных комплексов необходим разрыв сразу всех
связей.
Иммуноглобулины

Антитела (иммуноглобулины) – это белковые молекулы,

способные к специфическому связыванию с антигенами.
Антитела входят в состав гамма-глобулиновой фракции
белков сыворотки крови. Они синтезируются потомками В–
лимфоцитов (плазматическими клетками) по сигналу
других клеток иммунной системы.

У млекопитающи существует 5 классов иммуноглобулинов:

IgG, IgM, IgA, IgE, IgD. Иммуноглобулин G имеет 4
подкласса (G1, G2, GЗ и G4), а иммуноглобулин А имеет 2
подкласса (А1 и 2). Иммуноглобулины разных классов
различаются по строению и свойствам.
 Иммуноглобулины класса А
Иммуноглобулин класса A (IgA) доминирует в секретах организма (слюне, пищеварительном соке, выделениях Сывороточный IgА:
слизистой носа и молочной железы). В сыворотке крови IgA присутствует в мономерной форме, в секретах – в димерной 15 – 20 % всех сывороточных Ig.
форме. Мономер IgA имеет типичную для антител структуру и состоит из двух тяжелых цепей и двух легких цепей. Главная Период полураспада IgА – 6 дней.
функция IgA — первая линия защиты на слизистых оболочках организма, препятствующая проникновению патогенов. IgA
принимают участие в нейтрализации бактериальных токсинов.

Наличие IgA в грудном молоке обеспечивает специфический иммунитет новорожденных. IgA участвует в
развитии воспалительных процессов, антитело-зависимой цитотоксичности, дегрануляции эозинофилов и базофилов, в
развитии фагоцитарных реакций моноцитов, макрофагов и нейтрофилов.
 Секреторный иммуноглобулин А
Особая роль принадлежит секреторному IgA (sIgA), который способствует поглощению и доставке
антигенов в составе иммунных комплексов из просвета кишечника дендритным клеткам,
расположенным в лимфоидной ткани, ассоциированной с кишечником (GALT).

Свойство sIgA связывать антиген и проникать с помощью М-клетки в Пейерову бляшку, называется
обратным трансцитозом.

Конъюгация антигенов с лигандами для рецепторов М-клеток может опосредовать их доставку в М-клетки
и индуцировать усиленные иммунные ответы слизистой оболочки после перорального введения.

М-клетки являются идеальными мишенями для компонентов мукозальных вакцин, которые

обеспечивают защиту слизистых оболочек в дополнение к основному иммунитету, что являются идеальной
стратегией для предотвращения инфекционных заболеваний, большинство из которых инициированы
вторжением патогенов через слизистую оболочку кишечника.
 Иммуноглобулины класса G
Иммуноглобулины G (IgG) являются наиболее часто встречающимися в кровотоке
и межклеточной жидкости антителами. Они составляют главную часть
гуморального иммунитета.

IgG — главный тип антител против патогенов (бактерий, вирусов, грибков). IgG
составляет 70 – 75 % иммуноглобулинов сыворотки крови, 50 % содержится в
тканевой жидкости. Период полураспада – 21 день.

Связывание IgG с патогенами вызывает их иммобилизацию и связывание друг с

другом. Опсонизация патогена молекулами IgG позволяет фагоцитам распознать,
поглотить и уничтожить его. Кроме того, IgG определяет классический путь
активации системы комплемента, который приводит к гибели патогена.

Молекулы IgG также способны к связыванию и нейтрализации токсинов.

IgG — единственный вид антител, способный к проникновению через плаценту

при помощи специальных рецепторов, обеспечивая защиту плода.

В течение первых шести месяцев младенец имеет, по сути, иммунитет матери и

защищен от тех патогенов, с которыми сталкивалась мать.
 Иммуноглобулин класса G

• IgG синтезируется зрелыми B-лимфоцитами (Вγ) и плазматическими клетками,

хорошо определяется в сыворотке крови на пике первичного и при вторичном
иммунном ответе.
• IgG составляют большинство АТ вторичного иммунного ответа и антитоксинов.
• IgG обладает высокой аффинностью, связывает комплемент, может быть
неполным антителом.
• IgG легко проходит через плацентарный барьер, способен выделяться в секрет
слизистых оболочек путем диффузии.
• Обнаружение высоких титров IgG к АГ конкретного возбудителя указывает
на то, что организм находится на стадии реконвалесценции или
инфекционное заболевание перенесено недавно.
 Иммуноглобулины класса М

Молекулы IgM являются самыми тяжёлыми и наиболее сложно организованными

иммуноглобулинами. IgМ – составляет 10 % всех сывороточных Ig.

Молекула свободного IgM представляет собой пентамер, каждый мономер которого состоит из
двух тяжелых цепей и двух легких цепей.

Мономеры объединены в пентамер посредством дисульфидных мостиков и J-цепи. При

первичном попадании в организм антигена IgM из всех антител образуются первыми. Кроме
того, они первыми появляются в онто- и филогенезе.

В плоде человека они начинают синтезироваться на 20-й неделе. У человека IgM синтезируется
плазматическими клетками, находящимися в селезенке.

IgM наиболее активны в антибактериальном иммунитете. Они не проходят через плаценту.

Наличие в плазме крови IgM против определенных возбудителей свидетельствует о ранних

этапах инфекции, а в крови новорожденного – о внутриматочном инфицировании.
 Иммуноглобулины класса D
Сывороточный IgD

Молекула IgD представляет собой мономер с двумя тяжелыми и двумя легкими

цепями.

Заякоренные в мембране IgD могут активировать врождённый и адаптивный

иммунитет, функционируя в составе В- клеточного рецептора.

Экспрессия IgD начинается в тот момент, когда B- клетки покидают костный мозг и
направляются в периферические лимфоидные ткани.

В зрелом состоянии B-клетка ко-экспрессирует IgM и IgD.

IgD могут дополнять функции IgM и даже функционально замещать IgM в случае
нефункциональности последних.
 Иммуноглобулины класса Е
Молекула иммуноглобулинов E (IgE) состоит из двух тяжелых и двух легких цепей.
Их основная роль заключается в развитии аллергических реакций. Кроме того, они Иммуноглобулин IgE
участвуют в иммунном ответе против паразитов (гельминтов).

Fc-участки IgE взаимодействуют со специфическими рецепторами на тучных

клетках и базофилах. После связывания IgE с аллергеном тучные клетки начинают
секрецию гистамина, лейкотриенов и некоторых интерлейкинов, что приводит к развитию
аллергических реакций.

Уровень IgE повышен при некоторых аутоиммунных заболеваниях (системная красная

волчанка, псориаз).

Базофил
 Иммуноглобулин класса Е

• IgЕ – реагины – около 0,002 % всех циркулирующих Ig,

IgЕ — мономер.
• IgЕ синтезируется зрелыми B-лимфоцитами (Вε) и
плазматическими клетками преимущественно в
лимфоидной ткани бронхолегочного дерева и ЖКТ. IgЕ
не связывает комплемент, не проходит через
плацентарный барьер.
• IgЕ – типична цитофильность (тропность к тучным
клеткам и базофилам) → аллергическая реакция I
типа (анафилактическая).
• Антигельминтозный иммунитет.
 Свойства иммуноглобулинов
Класс иммуноглобулинов
Свойства иммуноглобулинов IgG IgM IgA IgD IgE
Молекулярная масса 160 900 170-350 160 190
Скорость седиментации, S 7 19 7-13 7 8
Количество мономеров 1 5 1,2,4 1 1
Период полураспада, сутки 21 5 6 3 2
Термостабильность + + + - -
Прохождение через плаценту + - - - -
Активация комплемента по классичес-кому + + - - -
пути
Нейтрализация токсинов + + - - -
Агглютинация, преципитация антигенов + + - - -

Бактериолиз, опсонизация + + - - -
Цитофильность + - + ? +
 Нормальные антитела

• Нормальные (естественные) АТ – базальный уровень иммуноглобулинов.

• Изогемагглютинины – АТ, направленные против эритроцитарных АГ групп
крови (система АВО), а также против бактерий кишечной группы, кокков и
некоторых вирусов.
• Нормальные АТ постоянно образуются в организме без явной антигенной
стимуляции: отражают готовность макроорганизма к иммунному
реагированию или свидетельствуют об отдаленном контакте с АГ.
 Эффекторные функции антител

Основные функции антител в иммунной системе:

-нейтрализация, при которой нейтрализующие антитела
блокируют бактериальную клетку или вирусную частицу и
делают их неактивными;

-агглютинация, при которой антитела склеивают чужеродные

клетки в комки, которые уничтожаются путем фагоцитоза;

-преципитация, при которой антитела собирают растворимые в

плазме крови антигены в скопления, выпадающие в осадок,
подвергающийся фагоцитозу;

-активация системы комплемента, при которой антитела

присоединяются к поверхности патогенной клетки, благодаря
чему ее могут атаковать компоненты системы комплемента,
вызвать ее лизис и запустить воспаление.
 Нейтрализация микробов и токсинов

Антитела способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или их токсинов на чувствительные

клетки и ткани, что связано с блокадой микробных антигенов антителами, то есть их нейтрализацией.

При этом антитела связывают ту часть патогена (токсина, вируса), которая взаимодействует с соответствующим
рецептором на клетке хозяина. В результате этого нарушается взаимодействие патогена и клетки-мишени.

Связывание токсина Эндоцитоз комплекса Высвобождение активного Нейтрализация антителами

с клеточным рецептором токсин - рецептор компонента токсина связи токсина с рецептором
 Опсонизация, стимулирующая фагоцитоз

Опсонизация - это процесс адсорбции опсонинов на поверхности микроорганизмов и других инородных

частиц. Опсонины – это вещества, которые стимулируют и облегчают фагоцитоз этих частиц.

Функцию опсонинов могут выполнять антитела или комплемент. Антитела связываются с патогеном
своими Fab-фрагментами, а Fc-фрагментом – с соответствующими рецепторами фагоцитов.

Фагоцит

Fc-рецептор
 Антитело-зависимая клеточная цитотоксичность
NK-клетка

Fcγ-рецептор
Антитело

Гранула
Перфорин

Гранзим
Клетка-мишень

При антитело-зависимой клеточной цитотоксичности NK-клетки с помощью Fcγ-рецептора атакуют клетку - мишень,
покрытую IgG;
эозинофил, имеющий Fcε- рецепторы, атакует гельминт, покрытый IgE;
нейтрофил и макрофаг атакуют микроб, покрытый IgG.
Таким образом могут действовать и другие клетки, имеющие на своей поверхности Fc-рецепторы.

Например, через эти рецепторы NK-клетки связывают Fc-фрагменты IgG, прикрепленные к поверхности
инфицированных или опухолевых клеток и запускают перфорин-гранзимовый механизм цитотоксичности, уничтожая
клетку-мишень.
 Комплемент-зависимый цитолиз

Антиген, расположенный на клетке, узнается антителами классов IgG и IgM.

Антитела прикрепляются Fab-фрагментами к антигенам на поверхности

клетки. При их взаимодействии образуется комплекс “клетка – антиген –
антитело”.

Комплекс “антиген-антитело” активирует комплемент по классическому

пути. При этом к Fc-фрагменту антител присоединяется комплемент с
образованием анафилатоксинов (С3а - С5а) и мембрано-атакующего
комплекса (МАК), состоящего из компонентов С5-9.

Происходит комплемент-зависимый цитолиз.

 Иммунный фагоцитоз
к

Феномен иммунного фагоцитоза основан на поглощении фагоцитами антигенов,

входящих в состав иммунных комплексов.

Иммунный комплекс представляет собой комплекс антигена с антителом. При этом

антигенами могут быть как отдельные молекулы, так и цельные бактериальные Бактерия с
антителами IgG
клетки или их обломки.

Иммунный фагоцитоз осуществляется с участием молекул иммуноглобулинов

(антител).

Фагоциты имеют на клеточной мембране соответствующие рецепторы к Fc-

фрагменту антител, поэтому узнают и захватывают иммунные комплексы -
комплексы антигена с антителом, в которых антиген соединен с активным центром
антитела при свободном Fc-фрагменте.

В дальнейшем процесс протекает как и при обычном фагоцитозе.

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ

67
 Иммунобиологические аспекты
создания Евы из ребра Адама ;)
• 1. Из костного мозга ребра Адама были перенесены
стволовые клетки.
• 2. Вторая Х-хромосома была получена из ХУ Адама
• 3. Кровь Адама можно было переливать Еве и
наоборот.
• 4. Почки Евы можно было пересаживать Адаму и
наоборот, не используя иммуносупрессоры.
• 5. Потомство Адама и Евы было гомозиготно по всем
генам. (предположительно, в Раю не было мутагенов и
патогенов)
• 6. После попадания на грешную землю им было не
легко выжить среди микроорганизмов прочих
патогенов и аллергенов, но адаптивный иммунитет, по
всей видимости, справился.
 Иммунитет
— свой ст во жи в ых о рг ан и з мо в п р едот в ра щат ь
проникновение чужеродных молекул в клетки организмов,
узнавать их, разрушать и выводить из организма.
 Иммунитет

Врожденный Приобретенный

специфический неспецифический пассивный активный

естественный искусственный естественный искусственный

(Ig G - от матери плоду) (после введения (постинфекционный) (поствакцинальный)
Ig A - с молоком матери) иммунных
сывороток)
 ВРОЖДЁННЫЙ ИММУНИТЕТ

Врождённый иммунитет — способность организма

обезвреживать чужеродный и потенциально опасный
биоматериал (микроорганизмы, трансплантат, токсины,
опухолевые клетки, клетки, инфицированные вирусом),
существующая изначально, до первого попадания этого
биоматериала в организм.

Активируется при первом распознавании определённых классов

антигенов патогена (а не конкретных специфических антигенов) -
полисахаридов клеточной стенки бактерий, двунитивой РНК
некоторых вирусов и т.п.
 ВРОЖДЁННЫЙ ИММУНИТЕТ

Основные функции:
1. Распознавание патогенов
2. Прямое противомикробное действие
3. Поддержание микробиоциноза
4. Развитие воспаления
5. Индукция адаптированного иммунитета
Анатомическая защита, связанная с тканевыми поверхностями
 ОСНОВНЫЕ СВОЙСТВА ВРОЖДЕННОГО И
ПРИОБРЕТЁННОГО ИММУНИТЕТОВ

Характеристика Врожденный иммунитет Приобретённый иммунитет

Условия Формируется в онтогенезе Формируется в ответ на
формирования вне зависимости от ≪запроса≫ «запрос» (поступление
чужеродных агентов)
Объект Группы чужеродных молекул, Индивидуальные молекулы
распознавания связанных с патогенностью (антигены)
Эффекторные Миелоидные, частично Лимфоидные клетки
клетки лимфоидные клетки
Тип реагирования Популяция клеток реагирует Реакция на антиген клональная
популяции клеток как целое (не клонально)
Распознаваемые Образы патогенности; Антигены
молекулы стрессорные молекулы
Распознающие Патогенраспознающие Антигенраспознающие
рецепторы рецепторы рецепторы
Угроза аутоагрессии Минимальная Реальная

Наличие памяти Отсутствует Формируется

иммунологическая память
 ВРЕМЕННОЙ ПЕРИОД ИММУННОГО ОТВЕТА

• Зависит от природы м/о, места и реакции

• Временной период ответа
• Требуется контроль цитокинами, связь с рецепторами и т.п.
Специфический

В-клетки
ИММУНИТЕТ

Киллерные
Т-клетки
Т-хелперы
ИММУНИТЕТ
Врожденный

Мононуклеары фагоциты

Нейтрофилы

Дни: 0 4 7 Недели:2 4 6
 ПЕРВАЯ ЛИНИЯ ЗАЩИТЫ ОТ ИНФЕКЦИЙ

1 Барьеры кожных покровов и слизистых

Механический Химический Биологический

2 Гуморальные компоненты
Система
Система коагуляции Цитокины
комплемента

3 Клеточные компоненты
Моноциты,
Нейтрофилы NK-клетки Эозинофилы
макрофаги
 МЕХАНИЧЕСКИЙ БАРЬЕР

Система/орган Тип клетки Механизм

Кожа Сквамозный эпителий Физический барьер
Десквамация
Слизистые оболочки Нереснитчатый эпителий Перистальтика
(напр. ЖКТ)

Реснитчатый эпителий
(напр. респираторный Мукоцилиарный
тракт) транспорт

Железистый эпителий Смывающее действие

(напр. носоглотки) слез, слюны, слизи, мочи
 БИОЛОГИЧЕСКИЙ БАРЬЕР

Система/орган Тип клетки Механизм

Кожа и Нормальная Антимикробные
слизистые микрофлора субстанции
оболочки
Среда для питания и
колонизации
 ПЕРВАЯ ЛИНИЯ ИММУННОЙ ЗАЩИТЫ
Миелоидные клетки
• Фагоцитоз и внутриклеточный
киллинг (нейтрофилы,
моноциты, макрофаги)
• Внеклеточный киллинг
(эозинофилы, нейтрофилы)
Провоспалительные
цитокины
Дефензины
Лимфоидные клетки
• Контактный киллинг (NK- и
NKT-клетки)
• Активность γδТ-клеток
Естественные антитела
(продукты В1:клеток)
Интерфероны I типа
(плазмоцитоидные
дендритные клетки)
Эпителиальные и
другие клетки
• Под влиянием активации
могут приобретать многие
защитные функции
миелоидных клеток, включая
фагоцитарную
Система комплемента
(опсонизация,
внеклеточный цитолиз)
Белки острой фазы
(опсонизация и т.д.)
 ПЕРВИЧНАЯ РЕАКЦИЯ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА

ВЫБРОС ЦИТОКИНОВ
макрофагами при первом
контакте с патогенами

«Организация» эмиграции
Активация клеточного
лейкоцитов в очаг
звена
воспаления
 ГУМОРАЛЬНОЕ ЗВЕНО ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА

Компонент Тип клетки

Комплемент Лизис бактерий и некоторых вирусов
Опсонизация
Повышение проницаемости сосудов
Активация и хемотаксис фагоцитов
Коагуляционная Повышение проницаемости сосудов
система Хемотаксис фагоцитов
В-лизин тромбоцитов - катионный детергент
Лактоферрин и Конкурируют с микроарганизмами за связь с
трансферрин железом
Лизоцим Повреждает клеточную мембрану бактерий
Цитокины Многочисленные эффекты
 СВОЙСТВА ЦИТОКИНОВ

Цитокины — небольшие пептидные информационные молекулы,

регулируют межклеточные и межсистемные взаимодействия, рост,
выживаемость, дифференциацию, функциональную активность и апоптоз
клеток.

синтезируются в процессе иммунного ответа

активны при очень низких концентрациях (порядка 10 - 11 моль/л)
аутокринная, паракринная и эндокринная активность с иммунной и
воспалительной реакциями
факторы роста и дифференцировки клеток (медленные клеточные
реакции)
образуют регуляторную сеть с синергическим или
антагонистическим действием
обладают полифункциональной активностью и перекрывающимися
функциями.
 ОСНОВНЫЕ СЕМЕЙСТВА ЦИТОКИНОВ

Семейства Цитокины Биологическая функция

Интерлейкины Семейства: ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-10, ИЛ-12, Aнтивоспалительная, регуляция роста лимфоцитов,
(ИЛ-1 – ИЛ34) ИЛ-17, иммунного ответа, дифференцировки Т-х

Интерфероны Интерфероны I типа (α, β, δ, κ, ω, τ), II Противовирусная, антипролиферативная,

(ИНФ-I и II типа) типа – γ и группа интерфероноподобных иммунорегуляторная активность
цитокинов: ИЛ-28А, ИЛ-28В и ИЛ-29

Фактор некроза ФНО-α и лимфотоксины Противоспалительная активность,

опухоли межклеточное взаимодействие, индукция апоптоза,
участие в морфогенезе
Факторы роста Эритропоэтин, тромбопоэтин, ИЛ-3, Поддержка жизнеспособности и пролиферации
клеток гемопоэза ИЛ-7, ИЛ-11 кроветворных клеток

Хемокины Группы: СС, СХС (ИЛ-8), СХЗС, С Хемотаксис и активация клеток

иммунной системы
Факторы роста ФР фибробластов, ФР эндотелиальных Регуляторы роста, дифференцировки и
клеток, тканевой ФР, функциональной активности различных клеток,
трансформирующий ФР, ФР воспаления, ангиогенеза, морфогенетических
эпидермиса, тканевой ФР, процессов
трансформирующий ФР
 ИНТЕРЛЕЙКИНЫ

ИЛ-1 (эндогенный Повыш. ИЛ-2 и экспрессию его

пироген) рецепторов, острофазовых белков.
Индуцирует ИЛ-3,ИЛ-6, ИЛ-8
ИЛ-2 Повыш. пролиферацию Т-ЛЦ, В-ЛЦ,
функцию МонЦ
ИЛ-3 Повыш. пролиферацию СК для всех
ростков
ИЛ-4 Повыш. пролиферацию В-ЛЦ,
экспрессию Fc-рецепторов IgE
переключает синтез Ig
ИЛ-5 Индуц. дифференцировку и активность
эозинофилов, их жизнеспособность
ИЛ-6 Подобен ИЛ-1

ИЛ-8 Нейтрофильный фактор

ИЛ-10 Супрессорный фактор
 СИСТЕМА КОМПЛЕМЕНТА

Нобелевская премия 1919 г.

Жюль Борде (J. Bordet, Бельгия) – за открытие и
изучение системы комплемента
 Система комплемента (К):

— комплекс белков, постоянно присутствующих в крови.

• Комплемент - каскадная система протеолитических
ферментов, предназначенная для гуморальной защиты
организма от действия чужеродных агентов, она участвует в
реализации иммунного ответа организма.
Является важным компонентом как врождённого, так и
приобретённого иммунитета.
 Основные функции системы
комплемента:
 лизис микробных и соматических клеток;
 освобождение из клеток биологически активных веществ;
 стимуляция фагоцитоза;
 агрегация тромбоцитов, эозинофилов;
 усиление лейкотаксиса, миграции нейтрофилов из
костного мозга и освобождение из них гидролитических
ферментов;
 способствует развитию воспалительных реакций;
 способствует индукции иммунного ответа;
 активирует свертывающую систему крови.
 Компоненты комплемента

Комплемент – это комплекс белков (30) сыворотки крови,

состоящий из более чем 20 компонентов.
Обозначается буквой С.
Компоненты комплемента имеют номера от 1 до 9 (С1,С4,C2 ,С3,
С5,С6 С7,С8, С9)
. Субъединицы и фрагменты, образующиеся при расщеплении
компонентов комплемента, обозначаются номерами с малыми
буквами (С2а, С3b и т.д.).
Молекулярные комплексы системы комплемента
1) C1q,r,s – распознавание чужеродности и подача сигнала тревоги;
2) С4в2а3в – активирует ансамбль литических ферментов;
3) С5-С9 – терминальный комплекс белков, осуществляет лизис
сенсибилизированных клеток.
 ПУТИ АКТИВАЦИИ КОМПЛЕМЕНТА

КЛАССИЧЕСКИЙ ЛЕКТИНОВЫЙ АЛЬТЕРНАТИВНЫЙ

ПУТЬ ПУТЬ ПУТЬ

Антитело- Антитело-
зависимый независимый

Активация C3 и
генерация C5-конвертазы

Активация
C5

Мембраноатакующий комплекс
 КАСКАД АКТИВАЦИИ КОМПЛЕМЕНТА
Классический
путь Комплекс
активации антиген-антитело Опсонизация
бактерии

Активация
мастоцитов и
базофилов

Хемотаксис
лейкоцитов

Альтернативный
путь активации
Микроорганизм
+ белки В и D МАК

Лизис клеток
 Пути активации комплемента

• Активация системы комплемента приводит к активации литических

ферментов комплемента С5-С9, так называемого мембрано-
атакующего комплекса (МАК), который, встраиваясь в мембрану
микробных клеток, формирует трансмембранную пору, что приводит
к гипергидратации клетки и её гибели
классический путь
• каскадная активация C1q, C1r, C1s, C4, C2 комплексом
антиген-антитело, с последующим вовлечением в процесс
центрального компонента С3 и С5-С9
альтернативный путь
• непосредствення активация С3 бактериями, вирусами,
агрегированными иммуноглобулинами
 Пути активации комплемента

КЛАССИЧЕСКИЙ АЛЬТЕРНАТИВНЫЙ
ПУТЬ ПУТЬ
Клеточная
мембрана

С1 С4 С2 С3 С5-С9
Повреждение
мембраны
Фагоцитоз,
Повышение Нейтрализ Активация нейтрализация
проницае- ация кининов вирусов, Формирование
мости вирусов иммунное мембрано-атакующего
сосудов прилипание комплекса (МАК)
 КЛЕТОЧНЫЕ ФАКТОРЫ

Тип клетки Механизм действия

Нейтрофилы Лизис бактерий и некоторых вирусов
Опсонизация
Повышение проницаемости сосудов
Активация и хемотаксис фагоцитов
Макрофаги Повышение проницаемости сосудов
Хемотаксис фагоцитов
лизис тромбоцитов

NK-клетки K-клетки Киллинг вирус-инфицированных клеток

и клеток распознанных как “non-self”
Эозинофилы Киллинг паразитов
 Нейтрофилы и их функция

• Нейтрофилы (полиморфноядерные лейкоциты) неделящиеся

клетки с сегментированным ядром и набором гранул, не
окрашивающихся гематоксилином и эозином. Нейтрофилы живут
2-3 суток

• Дисфункции нейтрофилов, такие как различные формы

нейтропении, дефицит адгезии нейтрофилов или хронический
грануломатоз, приводят к тяжелым формам подверженности
бактериальным инфекциям, т.е нейтрофилы играют ключевую
роль в обеспечении врожденной формы иммунитета.
 Нейтрофилы и их функция

• Гиперактивация нейтрофилов приводит к возникновению таких

патологий, как повреждение при реперфузии, васкулит,
синдром дыхательной недостаточности взрослых и
гломерулонефрит.

• Нейтрофилы обеспечивают основную защиту от пиогенных

(гноеродных) бактерий и могут существовать в анаэробных
условиях. Находятся главным образом в крови, за исключением
случаев острого воспаления. Нехватка
нейтрофилов приводит к хроническим инфекциям.
 Функция нейтрофилов

• Основная функция нейтрофилов - фагоцитоз. Действие

нейтрофилов, как и макрофагов, неспецифично. Время их
нахождения в кровеносном русле в среднем составляет 6 - 8 ч,
они быстро мигрируют в слизистые оболочки .

• При острых инфекционных заболеваниях число нейтрофилов

быстро нарастает. Они способны получать энергию путем
анаэробного гликолиза и поэтому существуют даже в тканях,
бедных кислородом: воспаленных тканях, отечных тканях или
тканях с плохим кровоснабжением.
 Функция нейтрофилов

• Нейтрофилы фагоцитируют бактерии и продукты распада

тканей и разрушают их своими лизосомными ферментами
(протеазами, пептидазами, оксидазами, дезоксирибонуклеазами
и липазами).

• Гной состоит главным образом из нейтрофилов и их остатков.

Лизосомные ферменты, высвобождающиеся при распаде
нейтрофилов, вызывают размягчение окружающих тканей, т.е.
формирование гнойного очага .
 Нейтрофилы, эозинофилы и
базофилы

Эозинофилы

Нейтрофилы Эозинофилы
Базофил
 Макрофаги и их функции

Помимо фагоцитоза макрофаги обеспечивают переработку и

презентацию антигена T-лимфоцитами, вырабатывают некоторые
белки сыворотки, активные формы кислорода, простагландины и
лейкотриены, лизирующие ферменты (лизоцим, нейтральные
протеазы, кислые гидролазы, аргиназу, многие компоненты
комплемента), ингибиторы ферментов (антиактиватор
плазминогена, 2-макроглобулин), транспортные белки
(трансферрин, транскобаламин II) нуклеозиды и цитокины
(фактор некроза опухолей  (-ФНО), ИЛ-1, ИЛ-8, ИЛ-12).
 Макрофаги и их функции

• Макрофаги продуцируют также фактор активации

тромбоцитов, колониестимулирующие факторы, факторы,
стимулирующие пролиферацию фибробластов и разрастание
мелких сосудов. Макрофаги разрушают опухолевые клетки,
вирусы и некоторые бактерий (Mycobacterium tuberculosis ,
Listeria monocytogenes).

• Для уничтожении внутриклеточных паразитов макрофаги

сливаются в гигантские клетки, которые под влиянием
цитокинов объединяются в гранулемы.

• Важная функция макрофагов сводится к борьбе с бактериями,

вирусами и простейшими, которые могут существовать вне- и
внутри клетки-хозяина, при помощи мощных бактерицидных
механизмов.
 Эозинофилы и их функция

• Эозинофилы (полиморфноядерные гранулоциты) -

поражают крупные паразитические организмы
(гельминты). Активированные эозинофилы выделяют
содержимое внутриклеточных гранул и другие вещества,
не находящиеся в гранулах.

• По свойствам эозинофилы сходны с нейтрофилами, но

имеют меньшую фагоцитарную активность. Живут
намного дольше нейтрофилов и, в отличие от них,
способны к возвращению из тканей в кровь
 Эозинофилы и их функция
• Способны к фагоцитозу и образованию активных форм
кислорода, реагируют на специфический хемокин - эотоксин и
обладают рецепторами к нему.

• В норме эозинофилы угнетают воспаление. Но при

бронхиальной астме они начинают вырабатывать медиаторы
воспаления- главный основный белок, нейротоксин
эозинофилов, катионный белок эозинофилов,
лизофосфолипазу, которые повреждают эпителий дыхательных
путей .

• имеют рецептор для C3b (компонент системы комплемента),

при активации C3b происходит усиление дыхания,
сопровождающееся выработкой активных форм кислорода.
 ФУНКЦИИ КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА
ИММУНИТЕТА

1. Реакция отторжения органов и тканей (трансплантационный

иммунитет)
2. Защита от вирусных и грибковых инфекций, протозойных
инвазий
3. Противоопухолевая защита
4. Аутоиммунные реакции
5. Реакции “трансплантат против хозяина”
37
 ФАГОЦИТОЗ

Нобелевская премия 1908 г.

И.Мечников (Россия) и Пауль Эрлик (P. Ehrlich, Германия) за
открытие фагоцитоза и разработку гуморальной теории
иммунитета
 ФАГОЦИТОЗ – РЕАКЦИЯ НА ИНФЕКЦИЮ

SOS-СИГНАЛЫ
Фагоцитоз
(PMN) Пептиды содержащие
N-формил метионин
Пептиды системы
свертывания
Продукция комплементов
Цитокины тканевых
Активация
гистамин макрофагов
тромбин
ФАГОЦИТАРНЫЙ ОТВЕТ
Диапедез
Адгезивность сосудов
Диапедез
Хемотаксис
Лейкотриен D4 Хемотаксис
C5a Воспаление
N-формил Активация
метионин
Фагоцитоз и киллинг
 СТАДИИ ФАГОЦИТОЗА

1. Хемотаксис
2. Адгезия
3. Активация мембраны
4. Погружение
5. Образование фагосомы
6. Слияние фагосомы и лизосомы
7. Киллинг и расщепление
8. Выброс продуктов деградации
МАКРОФАГ ПОГЛОЩАЕТ БАКТЕРИЮ
ФАГОЦИТОЗ

A В

C D
 Иммунитет.
Иммунная система.
Иммуннокомпетентные
клетки
• Иммунитет – невосприимчивость организма к
любым внешним агентам с генетической точки
зрения.
• Иммунитет – это специфическая способность
организма как против внешних агрессоров
(вирусы, бактерии, грибки, простейшие) так и к
собственным деградированным и
модифицированным молекулам и некоторым
клеткам
• Фундаментальная задача иммунологии –
определение собственных (self) молекул и
клеток от чужих (non-self)
Разновидности Иммунитета

I. Врождённый (натуральный, видовой). Появляется

сразу после рождения, является Аг-независимый и
неспецифичным. Отсутствует иммунологическая
память. Может быть абсолютным (всеобщий) или
относительный.

I. Приобретённый
• Натуральный Активный
(постинфекционный) Пассивный
(трансплацентарный, через молоко)
• Искусственный
Активный (вследствие вакцинации)
Пассивный (посредством введения Ат–иммунологической
сыворотки )
• Приобретённый Иммунитет
характеризуется посредством:
1. Распознаванием non-self клеток
2. Способность к распознаванию Aг
3. Иммунологической памятью
4. Начинает воздействовать через несколько
дней после агрессии микроба
Приобретённый Иммунитет бывает:
Антибактериальным, антивирусным,
противогрибковым, антитоксичным,
противоопухолевым и т.д.
II. В зависимости от механизмов иммунных реакций

- Гуморальный иммунитет, характеризуется

вырабатыванием Ат: посредством В- лимфоцитов

- Клеточный иммунитет характеризуется

выработкой цитотоксических Т- лимфоцитов,
активированием макрофагов, клеток NK, секреция
цитокинов, посредством Т-лимфоцитов
III. В зависимости от стойкости м/o

- Стерильный иммунитет – проявляется

после удаления патогенных агентов из
организма ( пример - корь)

- Нестерильный иммунитет –
невосприимчивость сохраняется лишь на
период нахождения м/o в конкретном
органе
( пример туберкулёз, сифилис)
Иммунная Система (Лимфоидная система)
представляет собой систему эффектов на
иммунную реакцию.
ИС – комплекс клеток и органов распределённых по
всему организму.
Центральные органы (первичные) ИС (лимфоидные
органы) – спинной мозг и тимус у позвоночных,
bursa Fabricius у птиц.
Первыми появляются во время эмбрионального роста.
Предназначение ИС – образование стволовых клеток и
созревание иммунокомпетентных клеток (Т- и В -
лимфоцитов)
• В костном мозге находятся стволовые клетки
являющимися предшественниками Т- и В – лимфоцитов.

• Пред – Т впоследствии мигрируют в тимус, где происходит

их созревание, с превращением в иммунокомпетентные
клетки, со специфической способностью распознавать Аг (
посредством спец. рецепторов). Становление В-
лимфоцитов происходит в костном мозге.

• Эти процессы независимы от любой стимуляции организма

• После того как лимфоциты покинули центральные органы

они не возвращаются обратно, они циркулируют в крови,
лимфе и в вторичных лимфоидных органах.
 ТИМУС
(вилочковая железа)

Центральный орган
иммунной системы.
В нем происходит
дифференцировка
Т-лимфоцитов из
предшественников,
поступающих из
красного костного мозга.
 Периферические органы ИС (вторичные)

- Лимфатические узлы
- Селезенка
- Лимфоидные образования пищеварительного и
дыхательного тракта (миндалины, бляшки Peyer,
аппендикс), лимфоидные ткани кожи.
В них происходит контакт между антигеном
(клетки – носители антигена) и
иммунокомпетентными клетками, что приводит
к активации, клоновой экспансии и разделение Т - и
В - лимфоцитов
• Timo - независимые поля (населённые В- лимфоцитами) во
вторичных лимфоидных органах состоят из фоликуллов
наружной коры лимфатического узла, фолликулов пейровых
бляшек и фолликулов периферической зоны из белой пульпы
селезенки

• Timo – зависимые поля (населенные T- лимфоцитами)

являются: глубокая кора лимфы (паракортикальная)
лимфоидные периартериальные рукава белой пульпы
селезёнки и интерфоликулярных зон пейровых бляшек
 Лимфатические узлы:
- периферические органы иммунной системы.
Располагаются по ходу лимфатических сосудов.
В каждом узле выделяют корковое и мозговое
вещество.
• В корковом веществе есть В-зависимые и Т-
зависимые зоны.
• В мозговом веществе - только Т-зависимые
зоны.
 Функции лимфоузлов:
• Барьерная. Первыми реагируют на контакт с
повреждающим агентом.
• Фильтрационная. В них происходит задержка
поступающих с током лимфы микробов,
опухолевых клеток, инородных частиц.
• Иммунная. Связана с выработкой в
лимфатических узлах иммуноглобулинов и
лимфоцитов.
• Синтетическая. (синтез специального
лейкоцитарного фактора, стимулирующего
размножение клеток крови).
• Обменная. Лимфатические узлы принимают
участие в процессах пищеварения, в обмене
жиров, белков, углеводов и витаминов.
 С е л е з ё н к а (С):
• периферический и самый крупный орган
иммунной системы.
• С. - покрыта капсулой из плотной
соединительной ткани, которая содержит
гладко-мышечные клетки.
• Снаружи С. - брюшина, а внутри - паренхима
(рыхлая соединительная ткань). С. включает 2
отдела с разными функциями: белую и красную
пульпу.
 Функции селезёнки:
• Синтетическая. Синтез иммуноглобулинов
классов М и G в ответ на попадание
чужеродного агента (антигена) в кровь или
лимфу. В ткани селезенки содержатся Т- и В-
лимфоциты.
• Фильтрационная. В селезенке происходит
разрушение и “переработка” чужеродных для
организма веществ, собственных
поврежденных клеток крови, красящих
соединений и чужеродных белков.
 Иммунокомпетентные клетки (ИКК)

Представлены B- и T- лимфоцитами (иммунокомпетентные

клетки, распознование Аг)
Клетки представляющие Аг (CPA) (поглощение и представление
Аг)
Эфекторные клетки (удаление микробов)

Созревание лимфоцитов B (ЛВ) имеет место в костном мозге

посредством прямого взаимодействия с клетками стромы,
но в более поздних стадиях под действие цитокинов
секретированных клетками стромы ( в особенности IL-7)
Организм содержит 107-109 различных клонов ЛВ, каждый
с уникальным BCR.
BCR распознает антигены по их конфигурации.
ЛВ стимулированые от Аг дифферинцируют в плазмоциты
секретированные Ig(Aт) и В-клетки памяти .
• Предшественники Т –лимфоцитов мигрируют в
тимус, где под влиянием клеток стромы и телец
Гассаля дифференцируют в зрелые
Т –лимфоциты(ТЛ).

• Миграция ТЛ из коркового вещества в мозговое

сопровождается появлением некоторых
поверхностных специфических гликопротеинов
(рецепторы).
Развитие ТЛ в тимусе характеризуется позитивный отбор
(выживают ТЛ, которые распознают собственную CMH
молекулу).

Те ТЛ которые прошли позитивную селекцию, и те которые

могут распознать собственные пептиды ассоциированные с
CMH подвергаются негативный отбор (запрограммированная
смерть через апоптоз).

Отбор заключается в удалении клонов потенциально

аутореактивных лимфоцитов (потенциально реактивные по
отношению к собственным молекулам).
“Тимус выбирает полезное, игнорирует бесполезное и
уничтожает вредное .”
( Von Boehmer )
Рецепторы ТЛ:

- Рецепторы для Aг - TCR, состоит из 2

полипептидных цепей α и β (90%) или γ и δ.
- TCR может распознавать только антигенные
пептиды, ассоциированные с CMH белками.
- CD3 (Cluster Differentiation 3) –ассоциированный
TCR, помогает в передачи сигнала в клетку
распознавания Aг
- CD2 представлен у всех ТЛ, фиксируют
эритроциты, может быть определен с помощью
теста образования Е-розеток
- CD4 –Экспрессируются у 60% Т-Л.
Обладает сайтами взаимодействия с молекулами
II класса CMH и местом фиксации вируса ВИЧ.

Лимфоциты TCD4 (T4) имеют центральную

координирующую функцию иммуного ответа и активируясь
дифференцируют в субпопуляцию Т-хелперов (Th).
- В зависимости от профиля продуцируемых цитокинов могут
быть выделены 2 группы Th.
- Th1 распознают антигены представленные макрофагами и
секретируют IL-2, TNF şi IFN-γ, способствуя клеточному
иммуному ответу (индуцирует пролиферацию и
дифференциацию цитотоксических Т-лимфоцитов или Т-
киллеры (Tc, T8), активацию Maкрофагов и клеток NK,
разрушение внутриклеточных микроорганизмов).
- Th2 распознают Aг представленые B-лимфоцитами,
секретирует IL-4, IL-5, Il-10 şi IL-13 и стимулирует выработку
Aт (антител ) через BL (гуморальный иммунитет).
- CD8 – Экспрессируются у 40% ТЛ. Может взаимодействовать с
молекулами CMH I класса.
При активации дифферинцируют в Т-киллеры, Т-цитотоксичные
(Tc), Т-супрессоры(Ts).

Tc уничтожают инфицированные вирусом клетки,

внутриклеточный бактерии или раковые клетки, участвуют в
отторжении трансплантата (клеточный иммунитет).

Ts подавляют иммунный ответ будучи ответственными за

иммунологическую толерантность.

Т-клетки памяти обеспечивают иммунологическую память.

Наивные В- и Т- лимфоциты–клетки которые первый раз
встречаются с Aг. После взаимодействия с Aг, следует их
активация, пролиферация и дифференциация в эффекторные
клетки (BL –в плазмоциты, TL в Th, Tc, Ts)
ЛВ представляет 10-15% из лимфоцитарной популяции, с
короткой продолжительностью жизни в 3-5 дней, а ЛТ
представляют 70% с длинной продолжительностью жизни
(месяца, года).

Другие лимфоцитарные клетки (неимуннокомпетентные ) –

15%
- Клетки NK (Natural Killer, естественные киллеры), способны
спонтанно разрушить раковые клетки и клетки, зараженные
вирусом
- Клетки K, имеют на их мембране рецепторы Fc Ig.
Уничтожают клетки-мишени, покрытые Aт (Ig) – феномен Aт-
зависимой цитотоксичности.