ТИТУЛ

СОДЕРЖАНИЕ

2
 ВВЕДЕНИЕ

Биологически активные вещества – химические вещества, обладающие

высокой физиологической активностью при небольших концентрациях по
отношению к определенным группам живых организмов (в первую очередь –
по отношению к человеку, а также по отношению к растениям, животным,
грибам и др.) или к отдельным группам их клеток (рис.1). Физиологическая
активность веществ может рассматриваться как с точки зрения возможности
их медицинского применения, так и с точки зрения поддержания нормальной
жизнедеятельности человеческого организма либо придания особых свойств
(таких, например, как повышенная устойчивость к болезням).

Рис. 1. Классификация биологически активных веществ [ъ7]

Существуют три основных типа классификации биологически

активных веществ: по медицинскому назначению, по источникам получения,
по химическому строению.

3
 По медицинскому назначению биологически активные вещества
подразделяют на три группы.
1. Химиотерапевтические. К ним относятся противоинфекционные
лекарственные средства, действующие на паразитические организмы:
антивирусные, антимикробные (антибиотики, антисептики),
антитуберкулезные, антималярийные, фунгицидные, противоопухолевые,
антигельминтные.
2. Нейрофармакологические. Это лекарственные средства,
действующие на центральную нервную систему (наркотические,
обезболивающие, снотворные и психотропные препараты), местные
анестетики, действующие на периферическую нервную систему.
3. Регуляторные. В эту группу входят витамины, гормоны, метаболиты,
антиметаболиты (средства, регулирующие активность ферментных,
гормональных, иммунных и генных систем).
По источникам получения биологически активные вещества
подразделяют на три вида.
1. Синтетические (около 70 % всех лекарственных средств).
2. Полусинтетические, получаемые из природных веществ путем их
химической модификации (например, антибиотики пенициллинового и
цефалоспоринового ряда).
3. Природные (алкалоиды, витамины, гормоны).
По химическому строению биологически активные вещества
подразделяют на три класса.
1. Неорганические (соли, оксиды, комплексные соединения).
2. Органические синтетические производные алифатического,
алициклического, ароматического и гетероциклического рядов. В каждом
ряду присутствуют активные вещества с теми или иными функциональными
группами и заместителями.
3. Органические природные соединения (алкалоиды, антибиотики,
гормоны, витамины, гликозиды и др.). Природные БАВ образуются в

4
процессе жизнедеятельности живых организмов. Они могут формироваться в
процессе обмена веществ, выделяться в окружающую среду (экзогенные) или
накапливаться внутри организма (эндогенные) [ъ10].
Основой современной промышленной биотехнологии является
микробиологический синтез, в котором используются различные группы
микроорганизмов для получения широкого ассортимента продуктов
Важнейшими преимуществами микробиологического синтеза являются
использование дешевого сырья, часто в виде промышленных отходов,
возможность синтеза сложных органических соединений в одну стадию в
мягких условиях (низкая температура, невысокое давление).
Эффективность микробиологического синтеза определяется прежде
всего возможностями микроорганизмов – продуцентов целевых продуктов. К
промышленным продуцентам предъявляются определенные требования:
– высокая скорость роста;
– непатогенность штаммов, нетоксичность биомассы;
– термотолерантность;
– высокий выход биомассы (или метаболита) от субстрата;
– фагоустойчивость;
– легкость выделения клеток из культуральной жидкости;
– конкурентоспособность, устойчивость в процессе непрерывного
культивирования;
– возможность культивирования в нестерильных условиях;
– минимальное накопление второстепенных продуктов метаболизма в
культуральной жидкости [ъ9].
Все это несомненно указывает на актуальность применения
биотехнологий в современном химическом синтезе.
Целью данной работы является ознакомление с микробиологическим
синтезом витамина В12.
Задача курсовой работы – научиться составлять материальный баланс
данного синтеза.

5
 ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

1.1. ВИТАМИНЫ
Витамины представляют собой группу разнообразных по строению
химических веществ, принимающих участие во многих реакциях клеточного
метаболизма. Они не являются структурными компонентами живой материи
и не используются в качестве источников энергии. Витамины регулируют
множество биохимических и физиологических процессов, без них
невозможно нормальное развитие и жизнедеятельность человека и
животных. Даже при достаточном количестве в пище белков, жиров,
углеводов, но при дефиците витаминов нарушаются процессы обмена.
Большинство витаминов не синтезируются в организме человека и
животных, но некоторые синтезируются микрофлорой кишечника и тканями
в минимальных количествах, поэтому основным источником этих весьма
важных для процессов жизнедеятельности веществ является пища.
Потребность человека и животных в витаминах неодинакова и зависит от
таких факторов, как пол, возраст, влияние среды обитания.
Принципы химического строения витаминов настолько разнообразны,
что классификация их на основе структуры невозможна. Витамины делятся
по принципу растворимости на жирорастворимые и водорастворимые.
Водорастворимые витамины составляют большую группу соединений,
отличающихся как по строению, так и по свойствам. В их состав
входяттиамин (В1), рибофлавин (В2), никотинамид или никотиновая кислота
(В3), пантотеновая кислота или пантотенат кальция (В5), пиридоксин (В6),
фолиевая кислота (В9), п-аминобензойная кислота (В10), цианокоболамин
(В12), аскорбиновая кислота (С) [ъ6]. Из жирорастворимых витаминов
наибольшее значение в народном хозяйстве и в микробиологической
промышленности имеют витамины групп А и D, а из водорастворимых –
витамины В2 и В12.
Специфическая функция водорастворимых витаминов (кроме витамина
С) в организме – образование коферментов и простетических групп
6
ферментов. Так, тиамин в форме тиаминдифосфата – кофермент
пируватдегидрогеназы, кетоглутаратдегидрогеназы, транскетолазы и других
ферментов; витамин В6 – предшественник пиридоксальфосфата (кофермента
трансаминаз и других ферментов азотистого обмена).
В виде коферментов витамины принимают участие во многих
важнейших процессах обмена веществ: энергетическом обмене (витамины
В1, В2и В3), биосинтезе и превращениях аминокислот (витамины В6 и В12),
жирных кислот (витамин В5) и др [ъ8].
Отсутствие, недостаток или переизбыток в организме витаминов
служат причиной различных патологических (болезненных) состояний.
Авитаминозы – тяжелейшие заболевания, вызванные полным
отсутствием в организме какого-либо витамина. У людей авитаминозы
практически не встречаются, так как в пищевом рационе всегда присутствует
минимальное количество витаминов.
Гиповитаминозы – специфические заболевания, вызываемые
длительным недостаточным содержанием в организме какого-либо витамина,
протекают в более легкой форме по сравнению с авитаминозами. Обычно
гиповитаминозы развиваются зимой и весной, когда содержание витаминов в
пищевых продуктах уменьшается вследствие их разрушения при хранении,
поэтому в зимне-весенний период рекомендуется применять комплексные
витаминные препараты. Особенно часто встречается гиповитаминоз С –
цинга.
При поступлении в организм витаминов в количествах, значительно
превышающих физиологические нормы, могут развиваться
гипервитаминозы. Чаще гипервитаминозы вызываются накоплением в
организме жирорастворимых витаминов; выделение этих витаминов с мочой
затруднено из-за их нерастворимости в воде, и они накапливаются в жировой
ткани [ъ3].

7
 Для количественного определения витаминов в продуктах используют
химические, физико-химические, биологические и микробиологические
методы.

1.2. ВИТАМИН В12

Впервые витамин В12 был получен в кристаллическом состоянии в
1948 г. Е. Рикетсом и Е . Смитом. Кристаллы его темно-красного цвета,
хорошо растворимы в воде и нерастворимы в органических растворителях.
Витамин В12 чувствителен к действию света, при световом воздействии
превращается в оксикобаламин. В 1972 г. впервые был осуществлен полный
химический синтез цианкобаламина [ъ5]. Цианокобаламин является
металлопорфирином. Это первое органометаллическое соединение,
выделенное из биологической системы.
Названия «витамин В12» и «кобаламин» обычно относятся ко всем
формам этого витамина. Некоторые врачи полагают, что использование
витамина можно разделить на две категории. В широком смысле, B12
относится к группе кобальтсодержащих витамерных соединений, известных
как кобаламины. Сюда включается цианокобаламин (артефакт, формируемый
с использованием активированного угля, который всегда содержит следы
цианида для очищения гидроксикобаламина), гидроксокобаламин (другая
лекарственная форма, производимая бактериями) Витамин В12 — это общее
название, относящееся к объединениям молекул кобальта и корринового
кольца, которые определяются их конкретной витаминной функцией в
организме. Все субстраты кобальт-корриновых молекул, из которых
создается B12, должны быть синтезированы бактериями. Однако после
завершения этого синтеза организм обладает ограниченной мощностью для
преобразования любой формы В12 в другую, посредством ферментативного
устранения определенных простетических химических групп из атома
кобальта. Различные формы (витамеры) В12 имеют глубокий красный цвет,
из-за окраски кобальт-корринового комплекса. Термин «B12» может

8
использоваться для обозначения цианокобаламина, основной формы B12,
используемой в продуктах и пищевых добавках. ъ4

Рис. 2. Формула витамина В12

Витамин В12 имеет самое сложное строение среди неполимерных

соединений. Его молекула включает корриновое кольцо из четырех
пятичленных азотсодержащих гетероциклов, связанных с атомом кобальта
четырьмя координационными связями. Все разнообразие аналогов витамина
В12 обусловлено природой верхнего и нижнего лигандов атома кобальта. В
истинном витамине В12 (цианкобаламине) верхним лигандом является
цианогруппа. Ее место могут занимать другие заместители:
группа −ОН – оксикобаламин,
−СН3 – метилкобаламин,
5-дезоксиаденозил – аденозилкобаламин и др.
При этом образуются производные витамина, обладающие
биологической активностью для животных и человека.

9
 Нижним лигандом атома кобальта в молекуле витамина В12 является
специфическое азотистое основание – 5,6-диметилбензимидазол (5,6-ДМБ),
которое в природе встречается только в этом соединении. Непосредственным
предшественником 5,6-ДМБ является рибофлавин. Наличие 5,6-ДМБ
определяет биологическую активность корриноидов. Микроорганизмы могут
синтезировать производные витамина, содержащие в качестве нижнего
лиганда другие заместители: 5-оксибензимидазол (производное имеет
название фактор III), 5-метоксибензимидазол (фактор IIIm), метиладенин
(фактор А), аденин (псевдовитамин В12). Нижний лиганд может
отсутствовать (фактор В). Биологической активностью обладают лишь
формы, содержащие в качестве нижнего лиганда 5,6-ДМБ. В меньшей
степени биологически активны фактор III и фактор IIIm. Псевдовитамин В12
и фактор А активностью не обладают.
Препараты витамина В12 широко применяются в медицине, а также
для обогащения кормов (улучшают усвоение белка и повышают прирост
массы животных на 10–15 %).
Витамин В12 участвует в осуществлении биoкаталитических реакций,
которые обеспечивают кроветворную функцию организма. Он оказывает
влияние на когнитивную функцию. Недостаток витамина В12 приводит к
тяжелейшим нарушениям процесса кроветворения, что чревато такими
заболеваниями, как иммунодефицит, анемия, разнообразными симптомами
со стороны желудочно-кишечного тракта и нервной системы. Участвует в
процессах кроветворения, превращениях аминокислот, биосинтезе
нуклеиновых кислот.
Цианокобаламин применяют при лечении хронических анемий, для
нормализации функций кроветворения, в неврологии (в терапии
полиневрита, радикулита). Источники цианкобаламина – продукты
животного происхождения: печень (50–160 мг %), почки (20–30 мг %),
говядина (2–6 мг %), рыба (1–4 мг %), сыр (1–2 мг %), молоко (0,4 мг %) [ъ3].

10
 Выделение витамина В12 (цианкобаламина) вызывает затруднение из-
за его малого содержания в природных продуктах. Из 1 тонны свежей
говяжьей печени можно получить лишь около 30 мг чистого цианкобаламина
(при его содержании 1:1000000) путем освобождения от белков, водно–
спиртовой экстракцией, хроматографическим разделением, адсорбцией и
посредством других тонких процессов. Химический синтез витамина
является нецелесообразным, поскольку включает в себя 70 стадий [ъ1].

1.3. ПОЛУЧЕНИЕ ВИТАМИНА В12

Витамины синтезируют в основном химическим путем или получают
из естественных источников. Однако эргостерин, рибофлавин (В2), витамин
В12 и аскорбиновую кислоту (микроорганизмы используются как
селективные окислители сорбита в сорбозу при производстве витамина С)
получают микробиологическим путем. Для синтеза витаминов В1, В2, В6,
В12 и аскорбиновой кислоты также используют кефирные грибки, а
бифидобактерии – группы В, РР (никотиновая кислота) и Н, однако пока эти
микроорганизмы не используются как продуценты витаминов в
промышленных масштабах.
Путь биосинтеза витамина В12 известен. Общим интермедиатом на
начальном этапе биосинтеза корриноидов является аминолевулиновая
кислота, которая образуется у большинства микроорганизмов в результате
конденсации глицина и янтарной кислоты в виде сукцинил-КоА.
Достижения молекулярной биотехнологии используются в разных
отраслях народного хозяйства, например, для получения первичных и
вторичных метаболитов (аминокислот, белка, биополимеров, ферментов,
витаминов и др.);
Промышленным способом получения витамина В12 является
микробиологический синтез (химический синтез осуществлен, но отличается
большой сложностью). В природе корриноиды обнаруживают в растениях,
развивающихся в симбиозе с азотфиксирующими бактериями.

11
Происхождение этих корриноидов окончательно не установлено. Организм
животных и человека не способен к самостоятельному синтезу витамина В12.
Не образуют корриноиды дрожжи и мицелиальные грибы. Способность к
биосинтезу корриноидов широко распространена среди прокариот.
Мировое производство витамина В12 составляет около 10 т в год, из
которых 6,5 т направлено на медицинские цели. В промышленном
производстве в качестве продуцентов витамина В12 используют
пропионовокислые бактерии (Propionibacterium shermanii), актиномицеты
(Nocardia rugosa), термофильные (реже мезофильные) метаногенные
бактерии.
В нашей стране в качестве продуцента витамина В12 используют
Propionibacteriumf reudenreichii var. Shermanii [ъ2]. Для получения витамина
B12 бактерии культивируют периодическим методом в анаэробных условиях
в среде, содержащей кукурузный экстракт, глюкозу, соли кобальта и сульфат
аммония. Образующиеся в процессе брожения кислоты нейтрализуют
раствором щелочи, которая непрерывно поступает в ферментер. Через 72 ч в
среду вносят предшественник – 5,6-ДМБ. Без искусственного введения 5,6-
ДМБ бактерии синтезируют фактор В и псевдовитамин B12 (азотистым
основанием служит аденин), не имеющие клинического значения.
Ферментацию заканчивают через 72 ч. Витамин B12 сохраняется в клетках
бактерий. Поэтому после окончания брожения биомассу сепарируют и
экстрагируют из нее витамин водой, подкисленной до рН 4,5-5,0 при 85-90
°С в течение 60 минут с добавлением в качестве стабилизатора 0,25 %-ого
NaNO2. При получении Ko-B12 стабилизатор не добавляют. Водный раствор
витамина B12 охлаждают, доводят рН до 6,8-7,0 50 %-м раствором NaOH. К
раствору добавляют Аl2(SO4)3∙18H2O и безводный FеСl3 для коагуляции
белков и фильтруют через фильтр-пресс. Очистку раствора проводят на
ионообменной смоле СГ-1, с которой кобаламины элюируют раствором
аммиака. Далее проводят дополнительную очистку водного раствора
витамина органическими растворителями, упаривание и очистку на колонке с

12
Al2O3. С окиси алюминия кобаламины элюируют водным ацетоном. При
этом Ko-B12 может быть отделен от CN- и оксикобаламина. К водно-
ацетоновому раствору витамина добавляют ацетон и выдерживают при 3-4
°С 24-48 ч. Выпадающие кристаллы витамина отфильтровывают, промывают
сухим ацетоном и серным эфиром и сушат в вакуум-эксикаторе над P 2O5. Для
предотвращения разложения Ko-B12 все операции необходимо проводить в
сильно затемненных помещениях или при красном свете. Таким образом,
можно получить не только смесь CN- и оксикобаламинов, но и
коферментную форму, которая обладает высоким терапевтическим
эффектом. Для химической очистки витамина B12 используется его
способность образовывать продукты с фенолом и резорцином. При этом
способе отделение витамина B12 от сопутствующих ему факторов
упрощается [1].

Кормовой препарат витамина В12 для нужд животноводства получают

термофильным метановым сбраживанием жидких отходов
микробиологического производства органических растворителей – ацетоно-
бутиловой и спиртовой барды, содержащей сухих веществ 2,2–2,6 % и 6,0–
8,0 % соответственно. В состав сухих веществ барды входят белки,
аминокислоты, углеводы, летучие жирные кислоты, витамины,
неорганические соединения.
Для метанового брожения применяют декантат ацетонобутиловой
барды (рис. 3). Осадок взвешенных веществ, содержащий мертвые клетки
продуцентов ацетона и бутанола, используют в качестве кормовой добавки.
Декантированную барду охлаждают со снижением температуры от 100 до
55–57 °С (температура метанового сбраживания). Выход корриноидов
значительно увеличивается при добавлении к барде метанола (5 кг/м 3) и
хлорида кобальта (5 г/м3).
Непрерывное сбраживание барды осуществляют в железобетонных
метантенках объемом 2000–4000 м3 по одно- или двухступенчатому режиму.

13
При термофильном метановом брожении в анаэробных условиях развивается
биоценоз бактерий, осуществляющих сложный взаимосвязанный процесс
расщепления органических веществ до СО2 и СН4. Можно выделить четыре
основные группы бактерий: гидролизующие (расщепляют биополимеры),
углеводсбраживающие, сульфатвосстанавливающие и метанобразующие.
В первой фазе процесса развиваются бактерии-аммонификаторы
(разлагают белки, пептиды, аминокислоты до жирных кислот и аммиака) и
бродильщики. В результате образования аммиака и нейтрализации жирных
кислот рН ферментационной среды повышается до 7,0–7,5. Наступает вторая
фаза брожения, в которой интенсивно развиваются
сульфатвосстанавливающие и метанобразующие бактерии.
В производственных условиях метановое брожение целесообразно
осуществлять в двух последовательно соединенных метантенках (по
двухступенчатому режиму), что приводит к специализации бактерий,
развивающихся в аппаратах первой и второй ступеней, в соответствии с
фазами брожения и сокращению продолжительности процесса с 3,0–3,5
суток (сбраживание в одну ступень) до 2,5–3,0 суток (две ступени
сбраживания). Процесс метанового брожения протекает устойчиво и не
нуждается в условиях асептики.

14
 Рис. 3. Технологическая схема получения кормового концентрата витамина В12 из
послеспиртовой барды:
1 – сборник барды; 2 – поверхностный конденсатор; 3 – декантатор; 4 – сборник
декантата; 5 – теплообменник; 6 – анаэробный реактор; 7 – стабилизатор бражки; 8 –
теплообменник; 9 – газоотделитель; 10 – газгольдер

В сброженном растворе накапливается 4–5 г/м3 корриноидов, из

которых в среднем 50 % приходится на истинный витамин В12, 30 % – на
фактор III. Установлено, что группа метанобразующих бактерий синтезирует
около 75% витамина В12 от общего количества.
Видовая принадлежность анаэробных бактерий, продуцирующих
витамин В12, окончательно не установлена. Подтверждена продукция
корриноидов метанобразующими бактериями Methanosarcina barkeri,
Methanobacterium formicum.
Установлено, что кокковые формы, составляющие 8–10 % от всех
бактерий, синтезируют примерно 65 % корриноидов, а палочки (90–92 %)
продуцируют остальные 35 %.
В процессе брожения образуется биогаз (в среднем 20 м3 на 1 м3
жидкой среды), имеющий следующий усредненный состав, %:
СН4 – 65; СО2 – 30; Н2 и Н2S – 5.

15
Рис.4. Технологическая схема получения витамина В12 [ъ11].

Сброженная барда имеет величину рН 7,5–8,0. В щелочной среде

витамин В12 неустойчив, поэтому для стабилизации витамина метановую
бражку подкисляют до рН 5,5–6,0 и вводят в нее 0,2–0,3 % сульфита натрия.
Перед подачей на упаривание для обеспечения безопасности процесса
бражку подвергают дегазации нагреванием в теплообменнике до 90–95 °С с
последующим отделением газов в объемном сепараторе. Дегазированную
бражку сгущают до 20 % сухих веществ упариванием в трех- или
четырехкорпусных вакуум-выпарных установках. Концентрат высушивают в
распылительной сушилке при температуре теплоносителя на входе в
сушилку 280°С. Продукт – кормовой препарат витамина – представляет

16
собой порошок коричневого цвета и содержит витамин В12 в количестве не
менее 100 мг/кг, а также сырой протеин – не менее 25 %.
Витамин В12 для медицинских целей получают культивированием
бактерий Propionibacterium shermanii периодическим методом при
температуре 28–30 °С в анаэробных условиях с соблюдением правил
асептики на питательной среде, содержащей глюкозу (40 г/л), кукурузный
экстракт (40 г/л), сульфат аммония (2 г/л) и хлорид кобальта (0,005 г/л); рН
среды 6,8–7,0. Ферментация протекает в две фазы. В первой фазе
продолжительностью 65–70 ч бактерии интенсивно размножаются с
накоплением пропионовой и уксусной кислот, подлежащих нейтрализации, и
предшественника витамина В12 – фактора В (без нижнего лиганда). На долю
фактора В приходится более 80 % от всех синтезированных корриноидов
(остальное – цианкобаламин (8–10 %), псевдовитамин В12 и фактор А).
Вторая фаза ферментации начитается с момента внесения в среду 5,6-
ДМБ в количестве 10–20 г/м3, в результате чего происходит трансформация
неактивных аналогов в истинный витамин В12. Продолжительность второй
фазы 24 ч. К концу процесса культуральная жидкость содержит около 30 мг/л
витамина В12, накопленного в клетках бактерий.
Биомассу отделяют сепарацией и экстрагируют из нее витамин водой,
подкисленной до рН 4,5–5,0, при температуре 85–90 °С в течение часа. После
отделения остатка биомассы раствор охлаждают, доводят рН до 6,8–7,0 и
осаждают белки коагуляцией в присутствии Al2(SO4)3 или FeCl3. Осадок
отделяют фильтрованием, а раствор витамина очищают на ионообменной
смоле СГ-1, с которой витамин В12 элюируют водным раствором аммиака.
Элюат упаривают и дополнительно очищают на колонке с окисью алюминия
(очистка кобаламинов от аналогов). Элюируют витамин В12 водным
ацетоном и кристаллизуют из раствора при температуре 3–4 °С в течение 24–
48 ч. Кристаллы промывают ацетоном, затем диэтиловым эфиром и сушат
под вакуумом.__ъ2

17
 Существуют и другие способы получения витамина В12. Например,
была разработана технология получения кормового концентрата витамина
B12 путем сбраживания мелассно-спиртовой барды смешанной культурой
метанообразующих бактерий. Предварительно на мелассно-спиртовой барде
выращивают кормовые дрожжи. После сепарирования дрожжей получают
культуральную жидкость, содержащую 7-8 % сухих веществ. На этой
жидкости выращивают метанообразующие бактерии и получают с 1 м 3
исходной барды 1,5-2 г витамина В12 [ъ2].
Среди штаммов рода Pseudomonas, способных к образованию
цианкобаламина в значительных количествах, чаще всего используют мутант
Pseudomonas denitriflcans, у которого с помощью мутагенеза удалось поднять
уровень содержания витамина В12 с 0,6 мг/л (дикий штамм) до 60 мг/л [ъ1].
В качестве продуцента витамина В12 также используют культуру
Pseudomonas fluorescens штамм ВКМ В-2224Д, полученную путем
многоступенчатой селекции и отбора активных по биосинтезу витамина B12
вариантов из коллекционного штамма Pseudomonas fluorescens В-98. Штамм
депонирован в коллекции микроорганизмов Института биохимии и
физиологии микроорганизмов РАН под номером BKM В-2224Д [ъ1].
Разработана также технология получения В12 из термических бацилл
Bacillus Circulans в течение 18 ч при температуре 65–75 °C в нейтральных
условиях. Выход витамина составляет 2–6 мг/л [ъ13].

2. РАСЧЕТНАЯ ЧАСТЬ

Необходимо провести расчет материального баланса стадии

ферментации.
Исходные данные:
1. Производительность – 30 кг/год
2. Концентрация В12 в культуральной жидкости С=0,0018 кг/м3

18
3. Температура ферментации Т=56 °С
4. Плотность жидкости ж=1250 кг/м3
5. Время цикла работы ферментатора ц.ф.=80 ч.
6. Коэффициент заполнения ферментатора при сливе сл= 0,8
7. Состав питательной среды:
Компоненты питательной Содержание компонента в Содержание компонента
среды сырье с,% в среде ср, %
Сульфатно-спиртовая 50 4
барда
Глюкоза 91 0,8
Карбонат кальция 98 0,5
Мочевина 94 0,03
СоСl4∙6H2O 97 0,001
Сухие кормовые дрожжи 95 0,023

Для расчетов воспользуемся [ъ12, ъ14].

ЛИТЕРАТУРА
Ъ1. Махмутова Л.Ш. Способы получения витамина В 12 // Научно-
практический электронный журнал Аллея Науки. 2017. № 16. С.
Ъ2 Кузнецов, И. Н. Технология микробного синтеза антибиотиков,
витаминов и ферментов: электронный курс лекций для студентов
специальности 1-48 02 02 «Технология лекарственных препаратов»
специализации 1-48 02 02 01 «Промышленная технология лекарственных
препаратов» / И. Н. Кузнецов. – Минск : БГТУ, 2018. – 175 с.
Ъ3. Глухарева, Т. В. Биохимия : [учеб. пособие]. В 2 ч. Ч. 1. Основные
питательные вещества человека / Т. В . Глухарева, И. С . Селезнева ; [науч.
ред. Ю. Ю. Моржерин]; М-во образования и науки Рос. Федерации, Урал.
федер. ун-т. – Екатеринбург : Изд-во Урал. ун-та, 2016. – 140 с.
Ъ4. Филимонова, В. В. Производство витамина В12 / В. В.
Филимонова, В. В. Тарабрин. // Молодой ученый. — 2017. — № 17 (151). —
С. 8-11. — URL: https://moluch.ru/archive/151/41472/ (дата обращения:
09.03.2023).
Ъ5. Носова, Э. В. Химия гетероциклических биологически активных
веществ : [учеб. пособие] / Э. В. Носова ; М-во образования и науки
19
Рос.Федерации, Урал. федер. ун-т. — Екатеринбург : Изд-во Урал.ун-та,
2014. — 204 с.ISBN 978-5-7996-1143-
Ъ6.Полякова Я.А. Разделение водорастворимых витаминов методом
ВЭЖХ на силикагеле, модифицированном наночастицами
золота,стабилизированными L-цистеином / Я.А. Полякова, И.А. Ананьева,
Е.Н. Шаповалова, А.Г. Мажуга, О.А. Шпигун // Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 2.
Химия. 2016. Т. 57. № 1. С. 24-30.
Ъ7. Каток, Я. М. Основные процессы химического синтеза
биологически ак-тивных веществ: тексты лекций для студентов
специальности 1-48 02 02 «Технология лекарственных препаратов» / Я. М.
Каток. – Минск : БГТУ, 2017. – 149 с.
Ъ8. Леонтьев, В. Н. Химия и технология биологически активных
веществ : электронный курс лекций для студентов специальности 1-48 02 02
«Технология лекарственных препаратов» специализации 1-48 02 02 01
«Промышленная технология лекарственных препаратов» / В. Н. Леонтьев. –
Минск : БГТУ, 2014. – 94 с.
Ъ9. Ручай, Н. С. Технология микробного синтеза : электронный курс
лекций для студентов специальности 1-48 02 01 «Биотехнология» / Н. С.
Ручай, И. А. Гребенчикова. – Минск : БГТУ, 2014. – 167 с.
Ъ10. Носова, Э. В. Химия карбоциклических биологически активных
веществ : [учеб. пособие] / Э. В . Носова, Н. Н . Мочульская ; М-во
образования и науки Рос. Федерации, Урал. федер. ун-т. — Екатеринбург :
Изд-во Урал. ун-та, 2015. — 156 с. ISBN 978-5-7996-1576-5
Ъ11. Технология получения витамина В12. [Электронный ресурс]
https://propionix.ru/mikrobiologicheskiy-sintez-vitamina-b12 (дата обращения
09.03.2023 г.)
Ъ12. Нейн, Ю. И. Технологические расчеты в проектировании
химических установок : учебное пособие / Ю.И. Нейн, Н.П. Бельская ; под
общ. ред. М.Ф. Костериной ; Министерство науки и высшего образования
Российской Федерации, Уральский федеральный университет.—

20
Екатеринбург : Изд-во Урал. ун-та, 2021.— 166 с. : ил.—Библиогр.: с. 163–
164.— 30 экз.—ISBN 978-5-7996-3240-3.—Текст : непосредственный. ISBN
978-5-7996-3240-3
Ъ13. Разговоров, П.Б. Технология получения биологически активных
веществ: учеб. пособие / П.Б. Разговоров; Иван. гос. хим.-технол. ун-т. –
Иваново, 2010. – 72 с. – ISВN 978-5-9616-0387-3
Ъ14. Маркевич, Р. М. Расчет материальных и тепловых балансов
пищевых производств : электронное учеб.-метод. пособие к курсовому и
дипломному проектированию для студентов специальности 1-48 02 01
«Биотехнология» / Р. М. Маркевич, Т. И. Ахрамович, О. В. Остроух. – Минск
: БГТУ, 2015. – 192 с.

21