Consignes de propreté

 Nettoyer les paillasses avec l’eau de Javel à l’aide d’un torchon.

 Nettoyer les éviers des colorants et remplir les pissettes d’eau et d’alcool.

 Ramener tout le matériel sur les paillasses et ranger le matériel utilisé.

 Jeter le verre et le matériel souillé (tubes à usage unique, lames…) dans le bac

D’eau de Javel.

 Nettoyer les objectifs du papier joseph et de l’alcool iso-amylique et couvrir les

Microscopes et la loupe.

Flamme bleu

 Déposer les tubes et les boites de culture ensemencés dans l’étuve ou le

Réfrigérateur.

 Lavage minutieux des mains.

- petit matériel : bec bunsen, anse de platine, pipettes Pasteur, micropipettes,

pinces, lames, ...).

- matériel d’optique : microscopes et loupes binoculaires.

- matériel d’incubation et de conservation : incubateurs (étuves), réfrigérateur et

congélateur.

- matériel de stérilisation et de décontamination : hotte à flux laminaire,

autoclaves, stérilisateurs et centrifugeuses.

- matériel de préparation de milieux de culture ou autre (d’identification, de

transport et de conservation) : agitateurs, balance à précision, bains Marie,

distillateur.

Fig. 4 : Etapes de l’ensemencement selon la technique d’isolement.

1. Prélever à l’aide de l’anse de platine une fraction de l’inoculum.

2. Ensemencer par stries fines et très serrées le premier demi-cercle.

3. Flamber l’anse de platine, laisser refroidir.

4. Ensemencer le deuxième demi-cercle.

5. Flamber l’anse de platine.

6. Ensemencer le troisième demi-cercle.

: Ensemencement selon la technique des 4 séries de stries.

1. Tracer sur le fond extérieur de la boite de petri deux diamètres

perpendiculaires séparant la boite en quatre secteurs.

2. Prélever à l'anse (stérile) la suspension ou le bouillon dans le cône

stérile.

3. Avec la main gauche saisir la boite (couvercle sur la paillasse) dans le

cône stérile et déposer l’inoculum sur la surface de la gélose, étaler ensuite le

prélèvement par stries très serrées dans une moitié de quadrant (quadrants 1et

2), flamber l'anse et laisser refroidir.

4. Etaler à nouveau le prélèvement par stries moins serrées dans la moitié

correspondante aux quadrants 2 et 3, flamber l'anse et laisser refroidir.

5. Répéter une dernière fois l'étalement en stries encore moins serrées dans

la moitié correspondante aux quadrants 3 et