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SELECCIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA

ANALITICA
Vizcarra Medina Diego Enrique
Facultad de Ciencias Farmacéuticas, Bioquímicas y Biotecnológicas Escuela Profesional De Ingeniería
Biotecnológica, Universidad Católica de Santa María

RESUMEN
La selección de la longitud de onda es un proceso importante en la
espectroscopía analítica, que permite obtener información sobre las
propiedades químicas y físicas de una muestra. En este informe universitario se
aborda la importancia de la selección adecuada de la longitud de onda para
lograr una medición precisa y fiable. Se describen los diferentes tipos de
espectroscopía, incluyendo la espectroscopía de absorción, emisión y
fluorescencia, así como las técnicas utilizadas para determinar la longitud de
onda óptima en cada caso. Además, se analizan algunos factores que pueden
afectar la selección de la longitud de onda, como la interferencia de fondo y la
dispersión de la luz. En resumen, este informe brinda una comprensión
detallada de la importancia de la selección adecuada de la longitud de onda en
la espectroscopía analítica.

Palabras clave: Espectroscopía, longitud de onda, factores.

ABSTRACT
The selection of the wavelength is an important process in analytical
spectroscopy, which allows obtaining information about the chemical and
physical properties of a sample. This university report addresses the
importance of proper wavelength selection for accurate and reliable
measurement. The different types of spectroscopy are described, including
absorption, emission and fluorescence spectroscopy, as well as the techniques
used to determine the optimal wavelength in each case. In addition, some
factors that can affect the selection of the wavelength are discussed, such as
background interference and light scattering. In summary, this report provides
a detailed understanding of the importance of proper wavelength selection in
analytical spectroscopy.

Keywords: Spectroscopy, wavelength, factors.


1. Introducción:
En la práctica de análisis instrumental llevada a cabo, se utilizó una solución de
Permanganato de potasio al 0.1N y agua destilada para analizar siete muestras con
concentraciones conocidas de 2, 4, 6, 8, 10, 12 y 16 partes por millón (ppm) del
compuesto. Una vez preparadas las muestras, se utilizó un espectrofotómetro para
determinar la longitud de onda del pico más alto generado por la reacción entre el
Permanganato de potasio y el compuesto desconocido.
El espectrofotómetro es un instrumento de análisis instrumental que se utiliza para
medir la cantidad de luz absorbida por una muestra en diferentes longitudes de onda.
En este caso, la medición de la absorbancia de la muestra permitió determinar la
longitud de onda del pico más alto, que es un indicador de la concentración del
compuesto desconocido.
La espectrofotometría es una técnica comúnmente utilizada en química analítica y
bioquímica para medir la concentración de compuestos en solución y para estudiar la
interacción entre moléculas. En esta práctica, la combinación de la espectrofotometría
y la titulación con Permanganato de potasio permitió una evaluación precisa de la
concentración del compuesto.

2. Metodología:
Para realizar dicha práctica se utilizó siete fiolas o matraces aforados de 25 mL que
nos sirve para la preparación de soluciones patrones o estándares, una fiola de 250 mL
que será utilizada para la solución general de donde se extrae para las soluciones
estándares, bureta de 25 mL, vasos de precipitación de 250 mL, pipetas y propipetas.
Primero se realizó los respectivos cálculos (de ppm a mililitros) para obtener nuestra
solución general, obteniendo 22.76 mL de KMnO₄, en un Becker se vertió el KMnO₄
a 0,1 N para poder así ponerlo en la bureta con mayor facilidad y medir la cantidad de
mL correspondientes en la fiola de 250 mL y completar con agua destilada.
Para preparar las soluciones estándares tenemos en cuenta la concentración que
queremos para las siete fiolas (Tabla N°1) y el volumen, se hace los cálculos
correspondientes y los demás se le hecha agua destilada hasta cumplir los 25 ml.
Y por ultimo se lleva las diferentes soluciones estándares al espectrómetro para poder
encontrar los datos estudiados.

Concentración 2 Volumen 2
2 0.5 ml
4 1 ml
6 1.5 ml
8 2ml
10 2.5 ml
12 3 ml
14 4ml
Tabla N°1: Cantidades para preparar las soluciones estándares
3. Resultados y discusión:
Se utilizo el espectrómetro para poder averiguar cuál era su absorbancia y
transmitancia de los diferentes patrones:
- Absorbancia:

- Transmitancia:

4. Conclusión:
- Se obtuvo que el grafico generado por la medición de la absorbancia de las
soluciones patrón el pico mas alto estaba situado en los 525.5 nm con una
absorbancia de 670.
5. Cuestionario:
A. Defínase brevemente:
- La radiación monocromática y policromáticas
 Luz monocromática: Constituida por radiaciones electromagnéticas de una
sola longitud de onda.
 Luz policromática: La que contiene radiaciones electromagnéticas de
diferentes longitudes de onda. Cada longitud de onda equivale a un color.

- Espectro de absorción: La espectrometría de absorción atómica es un método


instrumental que se basa en la absorción, emisión y fluorescencia de radiación
electromagnética por partículas atómicas. Se emplean principalmente
radiaciones del espectro ultravioleta (UV) y visible y Rayos X.

- ¿Por qué es importante monocromatizar la radiación policromática?

Al monocromatizar la radiación policromática nos permite trabajar con una sola


longitud de onda mejorando la eficiencia del análisis y obteniendo datos más
precisos, porque con esa longitud de onda es trabaja mejor el material que se
quiere analizar

B. Describir la diferencia entre un espectrofotómetro y un fotómetro:


El espectrofotómetro, en general, consta de dos dispositivos; un espectrómetro y
un fotómetro. Un espectrómetro es un dispositivo que produce, dispersa y mide la
luz. Un fotómetro tiene un detector fotoeléctrico que mide la intensidad de la luz.
Espectrómetro: Produce un rango deseado de longitud de onda de luz.

C. En la longitud de onda de trabajo obtenida en la parte experimental a 525


nm calcular la cantidad de energía que le corresponde a esa radiación.
Compararla con una longitud de onda de 200 nm que corresponde a la región
UV.

D. ¿Qué tipo de información proporciona el espectro de absorción?


Un espectro de absorción muestra que longitudes de onda son absorbidas por la
molécula en estudio al pasar de niveles de menor a mayor energía. Las bandas
observadas en el espectro dan información sobre las diferencias energéticas entre
los estados energéticos de una molécula.

E. Señale algunas razones ¿por qué determina la longitud de onda analítica o de


trabajo?
La elección de la longitud de onda apropiada depende de la muestra específica a
analizar y de los objetivos de medición. La longitud de onda se puede determinar
de la siguiente manera:
- Sensibilidad: La sensibilidad del dispositivo puede variar según la longitud
de onda. Al elegir la longitud de onda correcta, la sensibilidad del dispositivo
se puede maximizar para esa muestra.
- Especificidad: en algunos casos, es posible que desee analizar solo una
sustancia específica en una muestra. Elegir una longitud de onda específica
para la sustancia en cuestión puede mejorar la especificidad de la medición.
- Interferencia: al elegir la longitud de onda adecuada, se puede minimizar o
eliminar la interferencia de otros componentes de la muestra.
- Superposición: en algunos casos, los espectros de diferentes componentes de
la muestra pueden superponerse en ciertas longitudes de onda. La elección de
una longitud de onda adecuada puede minimizar las superposiciones y
mejorar la precisión de la medición.
- Dispersión: la dispersión de la luz en una muestra puede variar según la
longitud de onda. Al elegir la longitud de onda adecuada, se puede minimizar
la dispersión y mejorar la precisión de la medición.

F. Indicar ¿qué formas conoce para representar una curva de absorción?


Se pueden usar varios formatos de presentación, que incluyen:
- Absorción vs. longitud de onda: Esta es la forma más común de mostrar una
curva de absorción. Muestra la absorbancia en el eje Y y la longitud de onda en
el eje X. Esta representación es útil para identificar los máximos y mínimos de
absorción en una muestra.
- Pasaje divino vs. Longitud de onda: este gráfico muestra la transmitancia en el
eje Y y la longitud de onda en el eje X. Esta curva es útil cuando desea medir la
cantidad de luz que pasa a través de una muestra.
- Absorbancia vs. Concentración: en esta representación, la absorbancia se traza
en el eje Y y la concentración en el eje X. Esta representación es útil para
generar una curva de calibración y determinar la concentración de una muestra
desconocida.
- Gráfico de derivada de absorbancia frente a longitud de onda: este gráfico
muestra la derivada de absorbancia en el eje Y y la longitud de onda en el eje X.
Esta curva es útil para identificar picos y valles en la curva de absorción y para
determinar la presencia de impurezas en la muestra.
- Gráfico de absorción diferencial frente a longitud de onda: en esta
representación, la absorción diferencial se traza en el eje Y y la longitud de onda
en el eje X. La absorción diferencial se refiere a la cantidad de luz absorbida por
unidad de longitud del camino óptico. Esta representación es útil cuando se
utilizan celdas con diferentes longitudes ópticas.

G. ¿Qué es un espectro de absorción atómica y que es un espectro de absorción


molecular?
El espectro de absorción atómica y el espectro de absorción molecular son dos
técnicas analíticas utilizadas para estudiar la absorción de luz por parte de átomos
y moléculas.
- El espectro de absorción atómica se refiere al análisis de la luz absorbida por
átomos individuales en estado gaseoso o disuelta en una solución líquida. La
muestra se vaporiza y luego se irradia con una fuente de luz de alta energía,
como un arco. Los átomos absorbentes se excitan y saltan a un nivel de energía
superior. Luego, cuando los átomos regresan a su estado fundamental, liberan
energía en forma de luz, que puede detectarse y analizarse. La absorción de luz
por parte de los átomos de la muestra crea un espectro de absorción atómica que
muestra las longitudes de onda de la luz absorbida por cada elemento químico
de la muestra. Este tipo de espectroscopia se usa a menudo en el análisis
químico y en la determinación de la concentración de elementos en una muestra.

- Un espectro de absorción molecular se refiere al análisis de la luz absorbida por


las moléculas de la muestra. La muestra es irradiada por una fuente de luz y se
mide la cantidad de luz absorbida por la muestra en diferentes longitudes de
onda. Las moléculas absorbentes en la muestra tienen diferentes niveles de
energía y, por lo tanto, absorben luz en diferentes longitudes de onda. Similar a
un espectro de absorción atómica, la absorción de luz por moléculas produce un
espectro de absorción molecular, que muestra las longitudes de onda de la luz
absorbida por cada tipo de molécula en la muestra. Este tipo de espectroscopia
se utiliza a menudo para identificar compuestos químicos y determinar la
cantidad y la pureza de una muestra.

6. Bibliografía:
- Day RA, Underwood AL. Química Analítica Cuantitativa. 5ª ed. Prentice Hall
Hispanoamérica; 1989.
- Connors KA. Curso de Análisis Farmacéutico (Ensayo del Medicamento).
Barcelona: Reverte, 1981.
- Connors KA, Eriksen SP. Photometric Titration. Journal of Pharmaceutical
Sciences. 1964. 465- 479
- Harris. D. Análisis Químico Cuantitativo. 3º ed. Barcelona: Reverte; 2007.
- Headrige J B. Photometric titrations. Nueva York: Pergamon Press; 1961.
- Jagner D. The determination of sulphate in sea water by means of photometric
titration with hydrochloric acid in dimethyl sulphoxide. 1970; 483- 490.
- Mercado R, Salager JL, Celis MT, Avendaño J. Volumetría de determinación
espectrofotométrica de un surfactante catiónico tipo diamina, mediante la
formación de un complejo coloreado. Revista Ciencia e Ingenieria. Vol 31. 2010;
177-182
- Olsen E. Métodos óptimos de análisis. 2ª ed. Barcelona: Reverte; 1990
- Quesada. S. Manual de experimentos de laboratorio para bioquímica. 1ª ed. San
José, Costa Rica: Editorial Universidad Estatal a Distancia; 2007.

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